真菌培养常用培养基
培养基配方
1、PDA培养基（用于分离、培养植物内生真菌）：马铃薯（去皮）200g , 葡萄糖20g , 蒸馏水1000 ml , 琼脂粉15g。
用于分离内生真菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的氯霉素和硫酸链霉素各50 µ g/ml，用于抑制细菌的生长。
2、NA培养基（用于分离、培养植物内生细菌）：牛肉膏3g，蛋白胨5g，葡萄糖2.5g，琼脂粉15g，蒸馏水1000ml，pH 7.0。
用于分离内生细菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的放线菌酮50µg/ml，用于抑制真菌生长。
115℃，20min 灭菌。
3、LB培养基：胰蛋白胨10 g，酵母提取物5 g，NaCl 10 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0；4、DSM1培养基：磷酸三钾26.631 g（pH=7.0)，二水柠檬酸三钠9.999 g，硫酸镁0.2465 g，硫酸铵19.821 g，牛肉膏3 g，NaCl 5 g，胰蛋白胨10 g，葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL，pH=7.0；5、DSM2培养基：磷酸三钾26.631 g（pH=7.0)，二水柠檬酸三钠9.999 g，硫酸镁0.2465 g，硫酸铵19.821 g，牛肉膏3 g，NaCl 5 g，细菌学蛋白胨10 g，葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0；6、Msgg培养基：磷酸钾5 mmoL/L(pH7.0)，MOPs 100 mmoL/L（pH7.0），MgCl2 2 mmoL/L，CaCl2 700 mmoL/L，MnCl2 50 µM，FeCl3 50 µM，ZnCl2 1 µM，VB1 2 µM，甘油0.5 %，谷氨酸0.5 %，色氨酸50 µg/mL，苯丙氨酸50 µg/mL，蒸馏水1000 mL，pH 7.0。
7、N%NA培养基：牛肉膏3.0 g，细菌学蛋白胨10 g，NaCl 5 g，琼脂粉N*10 g，8、BGM1培养基：牛肉膏3 g，胰蛋白胨10 g，NaCl 5 g，磷酸三钾26.631 g（pH7.0），二水柠檬酸三钠9.999 g，硫酸镁0.2465 g，硫酸铵19.821 g，葡萄糖1 g，蒸馏水1000 mL，pH 7.0。
真菌用的培养基
真菌用的培养基
真菌的培养基根据其特点和需求不同，可以分为以下几种常见的培养基：
1. 薄膜培养基：如麦芽琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂等。
适用于革兰氏阳性真菌和某些革兰氏阴性真菌的培养。
2. 液体培养基：如液体麦芽琼脂、液体马铃薯葡萄糖琼脂等。
适用于真菌的液体培养、发酵和产生次级代谢产物。
3. 饲养基：如麦麸葡萄糖培养基、马铃薯糖蛋白胨培养基等。
适用于饲养虫化真菌和真菌的寄生菌株。
4. 高营养培养基：如琼脂葡萄糖培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基等。
适用于真菌菌株的快速生长和高产菌。
5. 特殊培养基：如选择性培养基、鉴定培养基等。
根据不同的真菌种类和需求，可以添加抗生素、抑菌剂或特定的营养成分。
此外，还可以根据真菌的特殊要求，进行改良和添加其他成分，从而满足其生长和繁殖的需要。
真菌培养常用培养基
[沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂，沙堡弱培养基，（一） 组成 40.0g 10.0g12.0- 15.0g 1000ml（二） 制法 上述混合后加入 200mg 氯霉素， 121 摄氏度 10 分钟灭菌后备用。
（三） 目的 是常用的分离或保存菌种的培养基。
[ 沙氏液基， SDB]（一） 组成 葡萄糖 40.0g 蛋白胨 10.0g 蒸馏水1000ml（二） 制法 上述混合后加入 200mg 氯霉素， 121 摄氏度 10 分钟灭菌后备用。
[ 加抗生素沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基，SDA with antibiotic]（一） 组成 葡萄糖 40.0g 蛋白胨 10.0g 琼脂 12.0〜15.0g 蒸馏水 1000ml（二） 制法上述混合后加入 200mg 氯霉素。
250mg 放线菌酮， 121 摄氏度 10 分钟灭菌后备用。
[改良沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基，modified SDA]（一） 组成 葡萄糖 20.0g 蛋白胨 10.0g 琼脂 12.0〜15.0g 蒸馏水1000ml（二） 制法 上述混合后 121 摄氏度 10 分钟灭菌后备用。
（三） 目的 保存菌种培养基。
[ 马铃薯葡萄糖琼脂， PDA]（一） 组成 马铃薯 200.0g 葡萄糖 20.0g 琼脂12.0〜15.0gSDA]葡萄糖 蛋白胨 琼脂 蒸馏水蒸馏水1000ml（二）制法先将马铃薯洗净去皮切片，加水180ml ，煮沸30 分钟后过滤，再加葡萄糖、琼脂，将过滤液补足到1000ml ，121 摄氏度灭菌后备用。
（三）用途此培养基是培养真菌较好的培养基，同时也是鉴定真菌较好的培养基之一。
鉴定皮肤癣菌一般不用此培养基。
[玉米吐温80 琼脂，CMA with T w80]（一）组成玉米粉琼脂蒸馏水吐温80（二）制法40.0g15.0g1000ml10ml先将玉米粉混于水中，65 摄氏度水浴一小时，过滤，再补足水量，然后加入琼脂和吐温80，121摄氏度10 分钟灭菌后备用。
沙保弱培养基原理
沙保弱培养基原理
沙保弱培养基的原理在于它提供了适合真菌生长的环境。
沙保弱培养基是真菌培养中最常用的培养基，其特点在于能够支持绝大多数真菌的生长。
这种培养基中添加了抗生素，目的是抑制多数细菌和污染真菌的生长速度，从而使目标真菌在竞争中占据优势，更易于分离和培养。
然而，需要注意的是，含有抗生素的沙保弱培养基并不适合所有类型的真菌。
例如，它会抑制念珠菌属、隐球菌和少量丝状真菌的生长。
因此，在使用沙保弱培养基时，需要考虑到目标真菌的特性和生长需求。
总的来说，沙保弱培养基的原理在于其提供的营养成分和抗生素的添加，这些都有助于在复杂的微生物环境中选择和培养特定的真菌。
白念珠菌的培养方法
白念珠菌的培养方法
白念珠菌是一种常见的真菌，可以通过以下方法进行培养：
1. 培养基选择：常用的培养基包括Sabouraud葡萄糖琼脂培养基、麦芽葡萄糖琼脂培养基等。
这些培养基富含碳源和氮源，适合白念珠菌的生长。
2. 培养条件：白念珠菌的最适生长温度为25-30摄氏度，可以
在室温下培养，但生长速度会较慢。
此外，培养需要避光。
3. 培养方法：
a. 无菌操作：在培养过程中，必须进行无菌操作，以防止其
他细菌或真菌的污染。
使用无菌技术进行培养物的制备和传递。
b. 接种：将白念珠菌的菌种均匀刷在含有培养基的琼脂培养
皿上。
c. 培养：把培养皿放入培养箱中，培养箱温度设定为适宜的
生长温度，并避光。
d. 观察：定期观察培养皿上是否出现白念珠菌的白色菌落。
检查菌落的形态，如颜色、形状、大小等特征。
这是常规的白念珠菌培养方法，但具体的培养条件和方法可能会根据实验目的和实验室设备有所不同。
在进行真菌培养时应注意个人安全，避免接触到真菌菌株。
实验室常用培养基
．常用培养基的制备（1）马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）和马铃薯蔗糖琼脂（PSA）培养基培养真菌最常用的培养基，成分如下：去皮马铃薯200 g 葡萄糖或蔗糖20g琼脂15－20g 水1000 ml配制方法：将马铃薯洗净去皮，称取200 g，切成小块（不必大小）放入锅中，加水1000ml，煮沸半小时，稍冷后用双层纱布过滤，在滤液中加蔗糖20g，加水补足到1000ml。
配成的培养基一般呈酸性，用于培养真菌，可以不必调pH。
如配制固体培养基，在加蔗糖前先加15－20g 琼胶加热熔化，最后加入蔗糖，混匀并加水补是至1000ml，趁热分装在试管或三角瓶中。
标准试管（15×150mm）分装量如下：一般用作斜面培养的每试管装培养基3－5ml，用作平面培养的每试管约10ml，加棉花塞后灭菌。
培养细菌用的培养基必须调节其酸度值到中性（pH7．0左右）。
（2）牛肉汁蛋白胨培养基（NA）是培养细菌最常用的培养基，又称营养琼脂或肉汤培养基。
成分如下：酵母浸膏1g 牛肉浸膏3g蛋白胨5-10g 蔗糖（或葡萄糖）l0g琼脂15-20g 水1000mlpH7.0配制方法：称取牛肉浸膏及蛋白胨溶于少量热水中备用，在其余水中加入琼脂，加热溶化后将牛肉浸膏和蛋白胨溶液加入混匀，然后加水补足到1000 ml，用NaOH或HCL调整至pH7.0，趁热分装，加棉花塞后灭菌。
（3）玉米叶培养基取一定数量的玉米叶片，洗净后剪成1㎝2左右的小块，放在250ml的三角瓶中，盛放量一般为三角瓶的1／3，然后加少量的水以保持湿润，加棉花塞后灭菌。
天然培养基一般不必调整pH。
（4）查氏（Czapek）培养基查氏培养基是一种组合培养基，其成分如下：NaNO3 2g K2HPO4 1 gMgSO4·7H2O 0．5g KCl 0．5gFeSO4 0．01g 蔗糖30g水1000ml（5）灭菌水的配制蒸馏水（或自来水）经过灭菌处理即成灭菌水，是实验室用量最大的必备品之一，常用于病原菌的分离、稀释、保湿等。
微生物学实验常用培养基的配制
牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）牛肉膏3g蛋白胨5g氯化10g钠琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL 121℃灭菌20min。
2、高氏（Gause）1号培养基（培养放线菌用）可溶性淀20g粉硝酸钾1g氯化0.5g钠磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼20g脂水1000mLpH7.2～7.4配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
3、查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用）硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH 自然121℃灭菌20min。
4、马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红100mL（rose bengal，玫瑰红水溶液）琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基（简称PDA）（培养真菌用）马铃薯200g蔗糖（或葡萄糖）20g琼脂15—20gpH 自然培养基的配制：马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制：(1)、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，至15℃阴暗处发芽，上面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
细菌真菌放线菌培养基配方
一．细菌培养基：肉膏蛋白胨培养基是一种广泛用于培养细菌的培养基,肉膏蛋白胨培养基的主要成分是牛肉膏、蛋白胨和NaCl。
肉膏蛋白胨培养基1.～7.6 2.、6管，10%3.（1速。
（2）加热溶解：在烧杯中加入少于所需要的水量，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒搅拌，待药品完全溶解后再补充水分至所需量。
若配制固体培养基，则将称好的琼脂放入己溶解的药品中，再加热融化，此过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，最后补足所失的水分。
（3）调pH：检测培养基的pH，若pH偏酸，可滴加lmol/LNaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸检测，直至达到所需pH范围。
若偏碱，则用lmol/LHCl进行调节。
pH的调节通常放在加琼脂之前。
应注意pH值不要调过头，以免回调而影响培养基内各离子的浓度。
（4）过滤：液体培养基可用滤纸过滤，固体培养基可用4层纱布趁热过滤，以利培养的观察。
但是供一般使用的培养基，这步可省略。
（5）分装：按实验要求，可将配制的培养基分装入试管或三角瓶内。
分装时可用漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上而造成污染。
分装量：固体培养基约为试管高度的l/5，灭菌后制成斜面。
分装入三角瓶内以（6（7（8（9（10）无菌检查：将灭菌的培养基放入37℃温箱中培养24～48h，无菌生长即可使用，或贮存于冰箱或清洁的橱内，备用。
二.放线菌培养基:高氏合成一号培养基是一种用于培养放线菌的合成培养基,培养基中的可溶性淀粉作为碳源和能源，KNO3作为氮源，K2HP04、MgSO4和FeS04作为无机盐等高氏合成一号培养基1.药品比例：可溶性淀粉20gNaCI 0．5gKNO31gK2HPO4MgSO4FeSO4琼脂水pH2.3.成分，并依次溶化，对微量成分FeSO4．7H2O可先配成高浓度的贮备液，按比例换算后再加入。
待所有试剂完全溶解后，补充水分到所需的总体积。
配制固体培养基时，将称好的琼脂放入已溶的试剂中，在加热融化，最后补充所损失的水分。
146种常用培养基配方
146种常用培养基配方以下是一些常见的培养基配方：1.LB培养基：-牛肉浸液：10g-酵母浸粉：10g-纯化水：1L-加热溶解牛肉浸液和酵母浸粉在纯化水中，煮沸溶解后，过滤灭菌。
2.菌落计数培养基：-蛋白胨消化物：5g-酵母浸粉：2.5g-葡萄糖：1g-纯化水：1L-加热溶解蛋白胨消化物、酵母浸粉和葡萄糖在纯化水中，煮沸溶解后，过滤灭菌。
3.大肠杆菌选择性培养基：-精制豆粉精：10g-纵剖海藻酸钠：10g-氯化钠：5g-硫酸镁：0.2g-活性炭：1g-纯化水：1L-加热溶解精制豆粉精、纵剖海藻酸钠、氯化钠、硫酸镁和活性炭在纯化水中，煮沸溶解后，过滤灭菌。
4.SDA培养基（用于真菌培养）：-磷酸二氢钾：1g-葡萄糖：20g-氯化钠：5g-氯化钠：5g-酵母浸粉：10g-酪蛋白胨：5g-地蜡：20g-纯化水：1L-加热溶解磷酸二氢钾、葡萄糖、氯化钠、酵母浸粉、酪蛋白胨和地蜡在纯化水中，煮沸溶解后，灭菌。
5.霍乱弧菌选择性富营养培养基：-精制海藻剖面：23g-麦芽浸粉：10g-氯化钠：10g-磷酸二氢钠：1.5g-纯化水：1L-加热溶解精制海藻剖面、麦芽浸粉、氯化钠和磷酸二氢钠在纯化水中，煮沸溶解后，过滤灭菌。
这只是一些常用的培养基配方的例子，根据不同的微生物需要，还有更多类型的培养基配方可供选择。
每个培养基的配方具体组成和浓度可以根据实验需要进行调整和优化，以获得最佳的培养条件。
同时，配方中的成分应根据实验目的和研究对象的特性进行选择，以确保培养基能够提供必要的营养物质和环境条件，促进微生物的生长和培养。
微生物学实验常用培养基的
牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）121℃灭菌20min。
2、高氏（Gause）1号培养基（培养放线菌用）配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
3、查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用）121℃灭菌20min。
4、马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基（简称PDA）（培养真菌用）培养基的配制：马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制：(1)、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，至15℃阴暗处发芽，上面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(4)、将滤液稀释到5—6波美度，pH约6.4，加入2%琼脂即成。
121℃灭菌30min。
7、无氮培养基（自生固氮菌、钾细菌）113℃灭菌30min。
8、半固体肉膏蛋白胨培养基121℃灭菌20min。
9、合成培养基加12 mL0.04%的溴钾酚紫（pH5.2—6.8，颜色由黄变紫，作指示剂）。
121℃灭菌20min。
10、豆芽汁蔗糖（或葡萄糖）培养基培养基的配制：称新鲜豆芽100g，放入烧杯中，加入水1000mL，煮沸约30min，用纱布过滤。
用水补足原量，再加入蔗糖（或葡萄糖）50g，煮沸熔化。
简述真菌的培养和菌落特点
简述真菌的培养和菌落特点
一、真菌的概述
真菌是一类生物，属于生物界中的真核生物，与植物、动物并列为三大生命界。
真菌包括单细胞菌和多细胞菌两种类型，它们在自然界中广泛分布，可以生长在土壤、水体、空气等各种环境中。
真菌在生态系统中具有重要的作用，既可以分解有机物质，促进营养循环，还可以制造食品、药品等。
二、真菌的培养方法
1.选择培养基
真菌培养需要选择适合其生长和繁殖的培养基。
常用的培养基有马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）、玉米粉葡萄糖琼脂（CMD）、麦芽琼脂（MA）、Sabouraud琼脂等。
2.接种方法
将纯净的真菌孢子或菌丝接种到含有营养成分的培养基上，并放置在适宜温度下进行培养。
3.温度和湿度控制
不同种类的真菌对温度和湿度要求不同，在进行培养时需要根据实际情况进行调节。
三、真菌菌落特点
1.颜色
真菌菌落的颜色因不同种类而异，一般来说，常见的颜色有白色、灰色、黄色、红色、棕色等。
2.形状
真菌菌落的形状也因不同种类而异，常见的形状有圆形、半圆形、不规则形等。
3.质地
真菌菌落质地通常为柔软或硬质，取决于真菌种类和培养条件。
4.边缘
真菌菌落边缘一般为光滑或毛状，也有些是波浪状或分叉状。
5.表面特征
真菌表面通常具有一定的纹理和纹路，并且会产生一些绒毛或污点。
这些特征可以帮助鉴别不同种类的真菌。
四、结语
通过以上内容的介绍，我们可以了解到真菌的培养方法以及其在培养过程中表现出来的一些特点。
这对于我们深入了解和应用真菌具有重要意义。
真菌培养常用培养基教学内容
[沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂，沙堡弱培养基，SDA]（一）组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0～15.0g蒸馏水1000ml（二）制法上述混合后加入200mg氯霉素，121摄氏度10分钟灭菌后备用。
（三）目的是常用的分离或保存菌种的培养基。
[沙氏液基，SDB]（一）组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g蒸馏水1000ml（二）制法上述混合后加入200mg氯霉素，121摄氏度10分钟灭菌后备用。
[加抗生素沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基，SDA with antibiotic]（一）组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0～15.0g蒸馏水1000ml（二）制法上述混合后加入200mg氯霉素。
250mg放线菌酮，121摄氏度10分钟灭菌后备用。
[改良沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基，modified SDA]（一）组成葡萄糖20.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0～15.0g蒸馏水1000ml（二）制法上述混合后121摄氏度10分钟灭菌后备用。
（三）目的保存菌种培养基。
[马铃薯葡萄糖琼脂，PDA]（一）组成马铃薯200.0g葡萄糖20.0g琼脂12.0～15.0g（二）制法先将马铃薯洗净去皮切片，加水180ml，煮沸30分钟后过滤，再加葡萄糖、琼脂，将过滤液补足到1000ml，121摄氏度灭菌后备用。
（三）用途此培养基是培养真菌较好的培养基，同时也是鉴定真菌较好的培养基之一。
鉴定皮肤癣菌一般不用此培养基。
[玉米吐温80琼脂，CMA with T w80]（一）组成玉米粉40.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml吐温80 10ml（二）制法先将玉米粉混于水中，65摄氏度水浴一小时，过滤，再补足水量，然后加入琼脂和吐温80，121摄氏度10分钟灭菌后备用。
（三）用途用于观察白念珠菌厚壁孢子及假菌丝；红色毛癣菌在此培养基产色素较好。
[米饭培养基rice grain medium](一)组成大米300.0g蒸馏水1000ml（二）制法将3g大米放入试管中，加入10ml蒸馏水，高压121摄氏度10分钟灭菌后备用。
细菌和真菌的培养方法
细菌和真菌的培养方法
1. 细菌的培养方法
（1）液体培养法：将细菌接种在适当的液体培养基中，可使细菌在含有适当营养的液体中生长。
常用的液体培养基有肉汤、营养液、大肠杆菌悬浮液等。
（2）固体培养法：将细菌接种在含有适当营养的固体培养基上，可使细菌在表面和深层生长。
常用的固体培养基有营养琼脂、血琼脂、马铃薯蔗糖琼脂等。
（3）混合培养法：将两种或多种不同细菌接种在同一培养基上，通过它们之间的相互作用，观察细菌之间的关系及生长状况。
2. 真菌的培养方法
（1）液体培养法：将真菌接种在含有适当营养的液体培养基中，可使真菌在含有适当营养的液体中生长。
常用的液体培养基有马铃薯葡萄糖液、麦芽琼脂液等。
（2）固体培养法：将真菌接种在含有适当营养的固体培养基上，可使真菌在表面和深层生长。
常用的固体培养基有马铃薯葡萄糖琼脂、米曲等。
（3）混合培养法：将两种或多种不同真菌接种在同一培养基上，通过它们之间的相互作用，观察真菌之间的关系及生长状况。
真菌细菌的培养原理
真菌细菌的培养原理真菌和细菌的培养原理是指使用合适的培养基和培养条件，将真菌和细菌从最初的样本（如环境中的土壤、水体、食物等）中分离出来，培养成纯种菌株。
以下是真菌和细菌的培养原理的详细说明。
一、真菌的培养原理真菌是一类包含在生物界中真菌门（Fungi）中的单细胞或多细胞生物。
真菌多为丝状菌丝状或酵母状，其生长速度慢，对于培养条件的要求相对较高。
1. 选择合适的培养基：真菌培养通常使用富含碳源、氮源和维生素的培养基。
常用的培养基包括马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）、玉米粉葡萄糖琼脂（CMD）等。
此外，还可以添加一些抗生素或抑菌剂以抑制杂菌的生长。
2. 准备培养条件：真菌的培养通常需要一定的温度、湿度和光照条件。
不同种类的真菌对于温度的要求也不同，可以根据不同的菌种选择适宜的培养温度，一般在20-30摄氏度之间。
3. 分离和培养：从环境样品中分离真菌菌株需要进行分离和纯化。
通常采用分层分涂法或稀释法将菌落分离。
将分离出的菌株转移到培养基上，培养一定的时间后即可观察到纯种菌株的形成。
4. 维持菌株的纯度：维持真菌菌株的纯度是培养的关键步骤。
可以通过定期进行菌株的传代分离，或者在培养中添加适当的抑菌剂来防止杂菌的污染。
二、细菌的培养原理细菌是微生物世界中最广泛分布和最多样化的一类生物，其形态多样，包括球状、棒状、螺旋状等。
细菌的培养原理与真菌类似，但由于其生长速度较快，培养条件相对较简单。
1. 选择合适的培养基：细菌培养一般使用较简单的培养基，常用的包括营养琼脂、肉蛹提取物琼脂等。
培养基要包含细菌所需的基本营养物质，如碳源、氮源、矿物盐和维生素。
2. 调整培养条件：不同种类的细菌对于培养条件的要求有所不同，但大多数细菌适宜生长的温度在30-37摄氏度之间。
此外，细菌的生长还受到氧气浓度、酸碱度等环境因素的影响。
3. 分离和培养：与真菌类似，细菌的分离也需要进行分层分涂法或稀释法。
将分离出的单个菌落移植到培养基上进行培养，通常培养时间较短即可观察到细菌的生长。
实验室常用培养基
实验用培养基配制 >1 ．牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）牛肉膏3g ，蛋白胨10g ，NaCl 5g ，水1000mL ，pH7.4 ～7.62. 高氏1 号培养基( 用于放线菌培养)可溶性淀粉20g ，KNO 3 1g ，NaCl 0.5g ，K 2 HPO 4- · 3H 2 O 0.5g ，MgSO4 · 7H 2 O 0.5g, ，FeSO4 · 7H 2 O 0.01g ，水1000mL ，pH7.4 ～7.6 。
配制时注意，可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。
3 ．马丁氏（Martin ）培养基（用于从土壤中分离真菌）K 2 HPO 4 1g ，MgSO 4 · 7H 2 O 0.5g ，蛋白胨5g ，葡萄糖10g ，1/3000 孟加拉红水溶液100mL, 水900mL ，自然pH ，121 ℃湿热灭菌30min 。
待培养基融化后冷却55 ～60 ℃时加入链霉素( 链霉素含量为30 μ g/mL).4. 马铃薯培养基(PDA)( 用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯( 去皮)200g, 蔗糖( 或葡萄糖) 20g, 水1000mL配制方法如下: 将马铃署去皮, 切成约2cm 2 的小块, 放入1500mL 的烧杯中煮沸30min, 注意用玻棒搅拌以防糊底, 然后用双层纱布过滤, 取其滤液加糖, 再补足至1000mL, 自然pH. 霉菌用蔗糖, 酵母菌用葡萄糖.5. 察氏培养基( 蔗糖硝酸钠培养基)( 用于霉菌培养)蔗糖30g, NaNO 3 2g, K 2 HPO 4 1g, MgSO 4 · 7H 2 O 0.5g, KCl 0.5g, FeSO4 · 7H2 O 0.1g, 水1000mL, pH7.0 ～7.26. Hayflik 培养基( 用于支原体培养)牛心消化液( 或浸出液)1000mL, 蛋白胨10g, NaCl 5g, 琼脂15g, pH7.8 ～8.0,分装每瓶70mL, 121 ℃湿热灭菌15min, 待冷却至80 ℃左右, 每70mL 中加入马血清20mL,25% 鲜酵母浸出液10mL, 15 醋酸铊水溶液2.5mL, 青霉素G 钾盐水溶液(20 万单位以上)0.5mL, 以上混合后倾注平板. 注意: 醋酸铊是极毒的药品, 需特别注意安全操作.7 ．麦氏(McCLary) 培养基( 醋酸钠培养基)葡萄糖0.1g, KCl 0.18g ，酵母膏0.25g ，醋酸钠0.82g, 琼脂l.5g ，蒸馏水l00mL 。
真菌常用培养基的配方
酵母菌、霉菌常用培养基的配制一、目的要求了解合成培养基、半合成培养基和天然培养基的配制原理。
学习和掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的配制方法。
二、基本原理麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌。
马铃薯葡萄糖培养基有时也可用于培养放线菌。
豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的一种优良培养基。
察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用。
麦芽汁培养基为天然培养基，马铃薯葡萄糖培养基和豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基，而察氏培养基则为合成培养基。
培养基配方中出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。
三、实验材料(一)药品葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4·7H2O，FeS04、琼脂。
(二)仪器天平、高压蒸汽灭菌锅。
(三)玻璃器皿移液管、试管、锥形瓶、烧杯、量筒、培养皿、玻璃漏斗等。
(四)其他物品药匙、pH试纸、称量纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸、新鲜麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等。
四、实验内容(一)麦芽汁培养基的配制1．培养基成分新鲜麦芽汁一般为10-15波林。
2．配制方法(1)用水将大麦或小麦洗净，用水浸泡6-12h，置于15℃阴凉处发芽，上盖纱布，每日早、中、晚淋水一次，待麦芽伸长至麦粒的两倍时，让其停止发芽，晒干或烘干，研磨成麦芽粉，贮存备用。
(2)取一份麦芽粉加四份水，在65℃水浴锅中保温3-4h，使其自行糖化，直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液，加2滴碘液，如无蓝色出现，即表示糖化完全)。
(3) 糖化液用4-6层纱布过滤，滤液如仍混浊，可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清，加水20 m1，调匀至生泡沫，倒入糖化液中，搅拌煮沸，再过滤)。
(4)用波美比重计检测糖化液中糖浓度，将滤液用水稀释到10-15波林，调pH 至6．4。
如当地有啤酒厂，可用未经发酵，未加酒花的新鲜麦芽汁，加水稀释到10-15波林后使用。
微生物常用培养基介绍
微生物常用培养基介绍常用的培养基可根据最基本的组成成分分为以下两种类型：化学合成培养基和复合物培养基。
化学合成培养基是通过将纯化学物质溶解在水中制备而成，能精确控制培养基的成分。
复合物培养基则是以天然有机物质如糖、蛋白等为主要碳源和氮源制备的培养基，营养成分相对复杂。
以下将对常用的培养基进行介绍：1. 营养琼脂培养基（Nutrient Agar）：是最常用的通用培养基之一、它由水、肉提取物、酵母提取物和琼脂组成。
适用于大多数常见细菌和真菌的培养。
3. MacConkey琼脂培养基：是一种选择性培养基，用于分离和鉴定肠道革兰氏阴性菌，如大肠杆菌和克雷白杆菌。
它添加了碱性红和液体胆盐，以抑制革兰氏阳性菌的生长。
4. Sabouraud葡萄糖琼脂培养基：是一种常用的真菌培养基，含有葡萄糖和琼脂作为碳源，以及抗生素如氯霉素和青霉素，以抑制细菌的生长。
5. Mannitol盐琼脂培养基：是一种选择性培养基，可鉴定耐盐菌和致病菌如金黄色葡萄球菌。
它含有高浓度的盐和麦芽糖，以及琼脂作为凝胶化剂。
6. TCBS琼脂培养基（Thiosulfate Citrate Bile Salt Sucrose Agar）：是一种用于分离和鉴定卡介菌属细菌的培养基，含有碱性盐、胱硫酸盐、柠檬酸盐和蔗糖。
7. TSB液体培养基（Tryptic Soy Broth）：是一种通用的液体培养基，适用于多种微生物的培养。
它由胰胨和大豆胨制备而成。
8. BHI液体培养基（Brain Heart Infusion Broth）：是用于培养多种微生物的液体培养基，以动物脑和心脏组织为基础材料，提供丰富的营养。
9. 铁琼脂培养基（TSI Agar）：是一种含有红霉素、蛋白质胨、蔗糖和乳糖等成分的复合物琼脂培养基，用于鉴定肠道革兰氏阴性杆菌。
10. 阿曼氏琼脂培养基（Mannitol Salt Agar，MSA）：是一种选择性培养基，用于鉴定耐盐菌，如金黄色葡萄球菌。
培养真菌所需要的条件
培养真菌所需要的条件培养真菌的条件真菌是一类单细胞或多细胞的生物，它们在自然界中广泛存在，并在许多领域中具有重要的应用价值。
要想成功培养真菌，需要提供适宜的环境条件和培养基质。
本文将介绍一些常见的培养真菌的条件。
1. 温度：真菌对温度的适应性较强，不同种类的真菌对温度的要求也有所不同。
一般来说，真菌的生长温度范围在10°C至40°C之间。
在培养真菌时，应根据所要培养的真菌种类选择合适的培养温度，并保持恒定的温度条件。
2. 湿度：真菌对湿度的要求较高，一般要求相对湿度在60%至80%之间。
过高或过低的湿度都会对真菌的生长产生不利影响。
为了保持适宜的湿度，可以在培养箱中放置水盘或湿度调节器。
3. 光照：大部分真菌对光照的需求较低，甚至可以在完全黑暗的环境下生长。
然而，一些真菌对光照有一定的要求，例如光合菌。
在培养这类真菌时，需要提供适当的光照条件，一般可以使用白炽灯或荧光灯。
4. 氧气：真菌对氧气的需求较高，它们通过呼吸作用获取能量。
在培养真菌时，应提供充足的氧气供应，可通过通风或使用氧气泵来增加氧气浓度。
5. pH值：不同种类的真菌对pH值的要求也有所不同，但大多数真菌的适宜生长pH范围在5.0至7.0之间。
在培养真菌时，应根据所要培养的真菌种类调整培养基的pH值，以提供适宜的酸碱环境。
6. 培养基质：真菌的培养基质是指供真菌生长和繁殖所需的物质。
常见的培养基质有琼脂、蔗糖蛋白培养基、玉米粉蔗糖培养基等。
在选择培养基质时，应根据真菌的特性和需求进行选择，以提供适合的营养物质。
7. 消毒：在培养真菌之前，必须对培养器具、培养基质等进行消毒处理，以防止杂菌的污染。
常用的消毒方法有高温蒸汽消毒、紫外线照射和化学消毒剂处理等。
总结起来，培养真菌所需要的条件包括适宜的温度、湿度、光照、氧气、pH值和培养基质。
为了提供这些条件，需要控制培养环境，并采取相应的措施，如调节温度、湿度和pH值，提供适量的光照和氧气，选择合适的培养基质，并进行消毒处理。
PDA培养基的配制方法和注意事项
PDA培养基的配制方法和注意事项PDA（Potato Dextrose Agar）是一种常用的真菌培养基，适用于培养和生长多种真菌菌株。
下面将介绍PDA培养基的配制方法以及注意事项。
配制方法：1. 准备所需材料：马铃薯（200g）、葡萄糖（20g）、琼脂（15g）、蒸馏水（1000ml）。
2.将马铃薯洗净，并切成块状。
3.将切好的马铃薯放入一个大锅中，加入足够的蒸馏水，使其完全浸泡。
4.使用中小火煮沸约30分钟，直到马铃薯变得软烂。
5.用纱布过滤掉马铃薯块，收集到的液体称为马铃薯提取液。
6.将马铃薯提取液加热到煮沸，并添加葡萄糖，搅拌使其充分溶解。
7.加入琼脂，搅拌溶解。
8.继续加热并保持搅拌，直到琼脂完全溶解。
9.关火冷却到40-45°C，搅拌均匀。
10.倒入培养皿或试管中，使其充分凝固。
11.将培养基容器包装好，使用锡箔纸和胶带封口，避免杂菌污染。
12.PDA培养基可以根据需要分装成适当大小的琼脂平板或斜面管，以供后续使用。
注意事项：1.所有试剂和仪器应尽可能消毒和无菌处理，以确保制备的PDA培养基无菌。
2.马铃薯切成块状是为了加速煮沸的过程，但切的过小可能导致提取液中的杂质过多，影响培养基质量。
3.煮沸的时间不宜过短，马铃薯需要彻底煮熟才能提取足够的营养物质。
4.搅拌是为了使葡萄糖和琼脂均匀溶解，并避免极度热区出现。
5.琼脂的溶解需要一定的时间和温度，不可急于冷却和使用。
6.冷却到40-45°C是为了防止高温对培养基中微生物的损害，也是为了避免由于过度冷却导致琼脂凝固太快。
7.封装培养基容器是为了防止杂菌和空气中的孢子进入培养基，避免细菌和真菌污染。
8.在分装培养基前，应将工作台面和器皿用酒精消毒，防止培养基受到外界污染。
9.PDA培养基在20-25°C的常温下可保存2-4周，或在4°C冰箱中保存2-3个月。
保存时不可直接暴露在光线下，避免褪色和干燥。
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[沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂，沙堡弱培养基，SDA]（一）组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0～15.0g蒸馏水1000ml（二）制法上述混合后加入200mg氯霉素，121摄氏度10分钟灭菌后备用。
（三）目的是常用的分离或保存菌种的培养基。
[沙氏液基，SDB]（一）组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g蒸馏水1000ml（二）制法上述混合后加入200mg氯霉素，121摄氏度10分钟灭菌后备用。
[加抗生素沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基，SDA with antibiotic]（一）组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0～15.0g蒸馏水1000ml（二）制法上述混合后加入200mg氯霉素。
250mg放线菌酮，121摄氏度10分钟灭菌后备用。
[改良沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基，modified SDA]（一）组成葡萄糖20.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0～15.0g蒸馏水1000ml（二）制法上述混合后121摄氏度10分钟灭菌后备用。
（三）目的保存菌种培养基。
[马铃薯葡萄糖琼脂，PDA]（一）组成马铃薯200.0g葡萄糖20.0g琼脂12.0～15.0g（二）制法先将马铃薯洗净去皮切片，加水180ml，煮沸30分钟后过滤，再加葡萄糖、琼脂，将过滤液补足到1000ml，121摄氏度灭菌后备用。
（三）用途此培养基是培养真菌较好的培养基，同时也是鉴定真菌较好的培养基之一。
鉴定皮肤癣菌一般不用此培养基。
[玉米吐温80琼脂，CMA with T w80]（一）组成玉米粉40.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml吐温80 10ml（二）制法先将玉米粉混于水中，65摄氏度水浴一小时，过滤，再补足水量，然后加入琼脂和吐温80，121摄氏度10分钟灭菌后备用。
（三）用途用于观察白念珠菌厚壁孢子及假菌丝；红色毛癣菌在此培养基产色素较好。
[米饭培养基rice grain medium](一)组成大米300.0g蒸馏水1000ml（二）制法将3g大米放入试管中，加入10ml蒸馏水，高压121摄氏度10分钟灭菌后备用。
（三）用途用于区分奥杜盎小孢子菌和犬小孢子菌，前者在米饭培养基上生长差，犬小孢子菌生长良好，产生黄色素和典型大分生孢子。
[麦芽浸汁琼脂，MA]（一）组成麦芽浸膏25.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml(二)制法上述混合后，121摄氏度10分钟灭菌后备用。
（三）用途用于观察酵母产生子囊孢子。
[脑心浸膏琼脂。
BHI]（一）组成脑心浸膏35.0g琼脂15.0g（二）制法上述混合后，121摄氏度10分钟灭菌后备用。
（三）用途双相真菌可在该培养基上呈酵母相。
[皮肤癣菌鉴定培养基，DTM]（一）组成葡萄糖10.0g蛋白胨10.0g琼脂15.0g酚红0.2g0.8N盐酸 6.0g放线菌酮0.5g庆大霉素0.1g氯霉素0.125g蒸馏水1000ml（二）制法将葡萄糖、蛋白胨和琼脂混于1000ml水中，加入40ml酚红并震荡（酚红0.5g溶于15ml 0.1NaOH中加水至100ml），然后加入6ml0.8N HCL并震荡；放线菌酮0.5g溶于2ml丙酮中，倒入培养基中；庆大霉素及氯霉素溶于2ml水中，然后加入培养基。
121摄氏度15分钟灭菌后备用。
（三）用途分离和鉴定皮肤癣菌。
[尿素培养基，Christensen urea agar](一)组成A溶液：葡萄糖 1.0g蛋白胨 1.0gNaCl 5.0gKH2PO4 2.0g尿素20.0g酚红0.012g蒸馏水100mlB溶液：琼脂15.0g蒸馏水900ml(二)制法将A溶液混匀，过滤灭菌；加热溶解B液，然后121摄氏度15分钟灭菌后。
将B液冷却至50摄氏度后与A液混合后分装。
(三)用途用于鉴定须癣毛癣菌和隐球菌，可使橘红色培养基变成紫红色。
[察氏培养基，CZA]（一）组成硝酸钠（NaNO3） 3.0g磷酸二氢钾（KH2PO4） 1.0g硫酸镁（MgSO4.7H2O）0.5g氯化钾（KCl）0.5g硫酸亚铁（FeSO4.7H2O）0.01g葡萄糖30.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml（二）制法将以上成分依次混入1000ml水中，加热直到完全溶解，高压121摄氏度，15分钟灭菌后备用。
（三）用途分离和鉴定青霉、曲霉。
[咖啡酸琼脂，CAA]（一）组成硫酸铵（NH4）2SO4 5.0g磷酸二氢钾（KH2PO4）0.8g硫酸镁（MgSO4.3H2O）0.7g咖啡酸0.18g枸橼酸铁0.002g酵母浸膏 2.0g葡萄糖 5.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml（二）制法将以上成分依次混入1000ml水中，枸橼酸铁先配成原液，然后加入。
高压121摄氏度，15分钟灭菌后备用。
（三）用途鉴定新生隐球菌和其他隐球菌。
前者成为黑色或深棕色。
[高盐培养基，Takashio medium](一)组成磷酸二氢钾（KH2PO4） 1.0g硫酸镁（MgSO4.7H2O） 1.0g葡萄糖 2.0g蛋白胨 1.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml(二)制法将以上成分依次混入1000ml水中，高压121摄氏度，15分钟灭菌后备用。
(三)用途用于观察皮肤癣菌的有性时期。
[子囊孢子培养基，ascospore agar](一)组成醋酸钾10.0g酵母浸膏 2.5g葡萄糖 1.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml(二)制法将以上成分依次混入1000ml水中，高压121摄氏度，15分钟灭菌后备用。
(三)用途鉴定产子囊孢子的真菌。
[酵母浸膏磷酸盐培养基，yeast extract phosphate agar]（一）组成A液：酵母浸膏 1.0g琼脂15.0g蒸馏水1000mlB液：磷酸二氢钾（KH2PO4） 6.0g磷酸二氢钠（NaH2PO4） 4.0g蒸馏水30mlC液：氢氧化铵（NH4OH） 1.0g（二）制法先将A液混匀，将B液PH调节至6,然后取2ml加入A液，高压121摄氏度，15分钟灭菌后备用，每次用时加入少许氢氧化铵。
（三）用途鉴定和培养组织胞浆菌，和皮炎芽生菌。
[石蕊牛乳培养基，litmus milk agar]（一）组成脱脂奶粉100.0g石蕊750.0g酵母浸膏 5.0g葡萄糖 3.0g蒸馏水1000ml（二）制法混合上述物质，高压121摄氏度，15分钟灭菌后备用。
（三）用途用于鉴定放线菌。
[Bennett琼脂]（一）组成酵母浸膏 1.0g牛肉浸膏 1.0g酪蛋白氨基酸 2.0g葡萄糖10.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml（二）用途用于需氧放线菌产生孢子。
[诺卡菌鉴定培养基，identification agar for Nocardia]（一）组成1、液化明胶脑心浸汁25.0g明胶120.0g蒸馏水1000ml（PH 7.4～7.6）2、水解淀粉淀粉 2.0g葡萄糖 6.0g蛋白胨10.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml3、水解酪蛋白A液：脱脂奶粉10.0g蒸馏水90mlB液：琼脂 3.0g蒸馏水17ml分别高压，然后混匀。
4、酪氨酸（黄嘌呤）琼脂营养琼脂23.0g酪氨酸（黄嘌呤） 5.0（4.0）g水1000ml 5、营养琼脂牛肉浸膏 3.0g蛋白胨 5.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml（二）制法高压121摄氏度，15分钟灭菌后备用（三）用途用于鉴定诺卡菌和链丝菌。
[合成毛霉琼脂，synthetic agar for Mucor]（一）组成磷酸二氢钾（KH2PO4）0.5g硫酸镁（MgSO4.7H2O）0.25g葡萄糖40.0g天门冬酰胺 2.0g硫胺0.5g琼脂15.0g蒸馏水1000ml（二）制法将以上成分依次混入1000ml水中，高压121摄氏度，15分钟灭菌后备用。
（三）用途鉴定接合菌。
[无碳源培养基，yeast nitrogen base]（一）组成硫酸铵（NH4）2SO4 5.0g磷酸二氢钾（KH2PO4） 1.0g硫酸镁（MgSO4.7H2O）0.5g酵母浸膏0.2g琼脂15.0g蒸馏水1000ml（二）制法将以上成分依次混入1000ml水中，高压121摄氏度，15分钟灭菌后备用。
（三）用途糖同化试验基础培养基。
先转种菌种在培养基上，3天后重复转种一次。
将菌悬液与上述培养基混合后制成平皿。
将含20％的糖滤片置于平皿中，观察同化现象。
先用蔡氏滤液过滤糖溶液。
[Leeming和Notman培养基]（一）组成蛋白胨10.0g葡萄糖 5.0g酵母浸膏 1.0g牛胆盐 4.0g甘油 1.0g单硬脂酸甘油酯0.5g吐温60 0.5ml全脂牛奶10.0g橄榄油20.0ml琼脂12.0g放线菌酮0.5g氯霉素0.05g蒸馏水1000ml（二）用途用于培养马拉色菌。
[七叶苷琼脂，esculin agar]（一）组成Leeming和Notman培养基加入0.2％枸橼酸铁和0.1％七叶苷。
（二）用途用于鉴定马拉色菌。
[橄榄油培养基，olive oil medium for Malassizia sp.]（一）组成蛋白胨10.0g葡萄糖40.0g酵母浸膏0.1g单硬脂酸甘油酯 2.5g吐温80 2.0ml橄榄油40.0ml琼脂18.0g放线菌酮0.5g氯霉素0.05g蒸馏水1000ml（二）用途用于培养马拉色菌。
其中如果没有橄榄油，也可以用菜籽油代替。