医用细胞工程学课程班复习题
细胞生物学与细胞工程练习题
Chapter 1 绪论
一、名词解释
1、细胞（cell）：
2、细胞生物学（cell biology）：
3、细胞工程（Cell Engineering ):
二、填空题
1、1665年,英国学者（）首次发现细胞，他看到是死细胞，是植物细胞的（）。
2、1674年，荷兰布商（)利用自制的高倍显微镜首次发现了活细胞.
3、1839年，德国植物学家( ）和德国动物学家( ）提出了细胞学说，即( );1858年，德国医生和病理学家魏尔肖( ）对细胞学说进行了重要补充并提出：（）。
4、非细胞生物包括（）和（）。
三、选择题
1、第一个观察到活细胞有机体的是（）。
A Robert Hooke
B Leeuwen Hoek
C Grew
D Virchow
2、细胞学说是由( ）提出来的。
A Robert Hooke和Leeuwen Hoek
B Crick和Watson
C Schleiden和Schwann
D Sichold和Virchow
3、细胞学说中不包括的内容是（）
A 细胞是构成一切动植物的基本单位
B 个体发育过程就是细胞不断增殖和连续分化的过程
C 一切动植物都是有细胞构成的
D 细胞的来源只能是细胞
四、判断题
1、细胞生物学是研究细胞基本结构的科学.（)
2、细胞是生命体的结构和生命活动的基本单位.（）
3、英国学者Robert Hooke第一次观察到细胞。（）
4、细胞学说、进化论、遗传学的基本定律被列为19世纪自然科学的“三大发现"。（)
5、罗伯特·胡克观察到的是植物的活细胞（）
6、不管原核生物还是真核生物，都有两种核酸（DNA和RNA）（)
细胞工程习题)
1. 细胞全能性学说的基本内容是什么？
2. 植物材料与细胞全能性表达有何关系？对培养中的选材有何指导意义？
3. 细胞脱分化在细胞结构上有何变化？
4. 细胞周期的调控在细胞脱分化中有何作用？
5. 细胞分化有什么基本特征？
6. 何谓体形态发生？离体培养条件下有哪些途径？
7. 培养条件下的器官发生有哪些方式？提出以何种方式为宜？
8. 分析经过愈伤组织的器官发生过程。
9. 从叶肉细胞向TE细胞转分化的过程全面理解细胞的脱分化与在分化。
10. 蔗糖在组织培养过程中的功能是什么？
11. 为什么培养物在长期继代过程中形态发生能力会丧失？
12. 体细胞胚与合子胚有何异同？
13. 与器官发生形成个体相比体细胞胚形成个体有哪些特点？
14. 如何理解体细胞胚的遗传稳定性和变异性？
15. 为什么离体培养中IAA，NAA和2,4-D地效用不同？
16. 离体培养物的遗传变异有何特点？
17. 离体培养物的遗传变异机理是什么？
18. 哪些因素会影响培养物的遗传变异？
19. 从体细胞变异的分子基础分析体细胞变异的外遗传变异，实践中如何应用这些外遗传变异？
20. 总体上讲离体培养的条件主要有哪些？
21. 为什么茎尖分生组织培养能够除去植物病毒？
22. 哪些因素会影响茎尖培养的脱毒效果？
23. 微繁殖中芽的增殖方式有哪些？各有何特点？
24. 为什么用于繁殖的组培技术要尽量避免使用外源激素？
25. 花药培养过程中花药为什么要经过低温处理？
26. 花药培养时为什么要用较高浓度蔗糖和较低浓度激素？
27. 花药培养中再生植株的形成途径与再生植株倍性有何关系？
细胞工程学复习题
细胞工程学习题
1．诱导试管苗生根时，培养基的调整应
A．加大盐的浓度B．加活性炭
C．加大分裂素的浓度D．加大生长素的浓度
2．以下实验中可能获得三倍体植株的是
A．小麦的茎尖培养B．番茄花药培养
C．玉米胚乳培养D．玉米花粉培养
3．动物体各种类型的细胞中，具有最高全能性的细胞是
A．体细胞B．生殖细胞C．受精卵D．干细胞
4．以下哪个是植物离体培养常用的主要糖类
A．葡萄糖B．果糖C．麦芽糖D．蔗糖
5．农杆菌介导的转化方法主要适用于
A．草本植物B．木本植物C．单子叶植物D．双子叶植物
6．原生质体纯化步骤大致有如下几步：
①将收集到的滤液离心，转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮在上清液中为准，一般以500r／min离心15min。用吸管慎重地吸去上清液。
②将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中(除不含酶外，其他成分和酶液一样)，再次离心，去上清液，如此重复三次。
③将原生质体混合液经筛孔大小为40～100um的滤网过滤，以除去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质，收集滤液。
④用培养基清洗一次，最后用培养基将原生质调到一定密度进展培养。一般原生质体的培养密度为104～106／ml。
正确的操作步骤是：〔〕
A ①②③④
B ②③①④
C ③①②④
D ③②①④
7．常用的细胞融合剂是
A．刀豆球蛋白B．聚乙二醇〔PEG〕C．细胞松弛素B D．脂质体
8．利用细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体过程中，HAT培养基用来进展
A．细胞融合B．杂交瘤选择C．检测抗体D．动物免疫
9．以下过程中，没有发生膜融合的是
A．植物体细胞杂交B．受精过程
2020-2021某大学《细胞工程》期末课程考试试卷B(含答案)
2020-2021《细胞工程》期末课程考试试卷B
适用专业： 考试日期：
试卷所需时间：120分钟 闭卷 试卷总分：100分
一大题：名词解释 （共5小题，每小题4分，共20分）
1、细胞的全能性
2、雌核发育
3、免疫反应
4、微细胞
5、染色体工程
二大题、填空题（每空1分，共10分）
1、抗原具备的三个基本条件是 、 、 。
2、实验室诱导单倍体植株的途径主要有： 、 、 、 。
4、人工种子主要那有三个基本结构 、 、 。
三大题、判断题(对打“√”，错打“×”；每小题1分,共5分)
1、经免疫后，IgA 是血液中最先出现去抑制抗原的抗体，是初次应答的主要成分。（ ）
2、染色质和染色体是同一种物质在细胞周期不同时间的不同形式。（ ）
3、动物细胞培养的培养基中常需大量的氨基酸，其中几乎所有的细胞对谷氨酰氨都有较高的要求。（ ）
4、体外培养动物细胞其生长的自然状态有两种：一种为贴附型，一种为悬浮型。
（ ）
5、酶解法制备G -的原生质体时，一般采用的酶是胰蛋白酶。（ ）
四大题、简答题(共5小题，每小题8分,共40分)
1、核骨架的功能？
2、人工种子的制作过程中，包埋是非常重要的一个环节，主要包括包埋介质的选择和具体的包埋方法。前者主要是人工胚乳和人工种皮的选择。对于人工胚乳理想的包埋介质应该满足哪些条件？
3、什么叫植物原生质体？植物原生质体活力的鉴定方法主要有那些？
： 专业班级： 姓名： 学号：
装 订 线
4、简述电融合法的优点？
5、在动物细胞大规模培养过程中，蛋白质类物质的回收与纯化的效率往往很低，怎样解决此类问题？
细胞工程复习资料
第一章简介
1.生物工程（bioengineering）（生物技术）：是以生物科学为基础，利用生物个体或生物器官、组织、细胞的特性和功能，设计构建具有预期性状的新物种或新品系（包括细胞系），以及与工程原理相结合进行产品加工生产的综合性技术体系。
2.传统生物工程：基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程（各个定义见书）
后来：基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程、蛋白质工程以及生化工程。
3.细胞工程（cell engineering ）是以细胞为研究对象，应用细胞生物学和分子生物学方法，借助工程学的原理或技术，在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特性，以获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的学科。
广义的细胞工程包括所有的生物组织、器官及细胞离体操作和培养技术，狭义的细胞工程则是指细胞融合和细胞培养技术。
思考题：1．细胞工程的概念、研究范畴、在生物工程中与其它工程的关系。
2．动物细胞工程发展的主要标志性成就。
3．植物细胞工程技术的主要标志性成就。
4．细胞工程的作用与应用领域
。
第二章细胞工程基础
1、组成细胞的基本元素有哪些？
O、C、H、N、Si、K、Ca、P、Mg，其中O、C、H、N占90%以上。细胞化学物质分为：有机物和无机物。
2、原核细胞与真核细胞有哪些区别？
原核细胞真核细胞
DNA区域没有被摸包被DNA区域有被摸包被
没有典型的细胞核和细胞器（只有核糖体）有细胞核（染色体、核仁、核液）和细胞器
（核糖体、内质网、叶绿体、高尔基体等）结构简单结构比原核细胞复杂
例：细菌、蓝藻例：动植物细胞
细胞工程学复习题
细胞工程学复习题
细胞工程学是一门综合性学科，涉及到细胞生物学、生物工程学和材料科学等多个领域的知识。通过利用工程原理和技术手段，细胞工程学致力于研究和应用细胞的生物功能以及与之相关的工程应用。以下是一些关于细胞工程学的复习题，希望能帮助你回顾和巩固相关知识。
1. 什么是细胞工程学？
2. 细胞工程学的研究对象主要是哪些细胞类型？
3. 请列举细胞工程学的主要应用领域。
4. 细胞工程学中常用的细胞培养技术有哪些？
5. 什么是细胞培养基？它对细胞的生长和分化有什么影响？
6. 细胞工程学中常用的细胞筛选技术有哪些？
7. 请简要介绍细胞工程学中常用的细胞培养槽和生物反应器。
8. 什么是细胞培养的规模化生产？有哪些常用的规模化生产方法？
9. 细胞工程学在组织工程和再生医学中的应用有哪些？
10. 细胞工程学在药物筛选和药物递送系统中的应用有哪些？
11. 请简要介绍细胞工程学在生物传感和生物芯片领域的应用。
12. 细胞工程学中常用的细胞植入技术有哪些？它们在治疗方面有何作用？
13. 请简要介绍细胞工程学中常用的干细胞技术和基因工程技术。
14. 细胞工程学中的质量控制和质量保证措施有哪些？
15. 细胞工程学的发展趋势和前景如何？
以上是关于细胞工程学的一些复习题，希望能够帮助你进行知
识回顾和巩固。细胞工程学作为一门新兴的学科，其在医学、生物
技术和生物工程领域的应用前景广阔，相信随着科学技术的不断进步，细胞工程学将会取得更加重要的突破和进展，为人类健康和福
祉做出更大的贡献。希望大家能够认真复习，掌握细胞工程学的基
大学《细胞工程》期末考试复习重点、考点总结
细胞工程期末复习（必考）
细胞工程：研究真核细胞的核—质关系以及细胞器、细胞质基因转移的技术。组织工程：研究开发用于修复或改善人体病损组织或器官的结构、功能的生物活性替代物的一门科学。
染色体工程：是按照一定的设计，有计划的消减添加或替换同种或异种染色体从而达到定向改变遗传特性和选育新品种的一种技术。
细胞连接：使细胞间的联系结构。细胞表面的特化结构或特化区域，是细胞间建立长期组织上联系的结构基础。涉及细胞外基质蛋白、跨膜蛋白、胞质溶胶蛋白、细胞骨架蛋白等。
细胞全能性：指分化细胞保留着全部的核基因组，具有生物个体成长、发育所需要的全部遗传信息，具有发育成完整个体的潜能。
细胞分化：指细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程。包括时间和空间上的分化。
脱分化：又称去分化，指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程。即分化的细胞在适当条件下转变为胚性状态而重新获得分裂能力的过程。
再分化：是指在离体条件下，无序生长的脱分化细胞在适当条件下重新进入有序生长和分化状态的过程。
细胞培养：指从体内组织分离细胞，模拟体内环境，在无菌适当的条件使其生长繁殖的技术。
人工种子：又称合成种子或体细胞种子，指将植物离体培养中产生的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中形成的类似种子的颗粒。植物胚胎培养：指对植物的胚及胚器官进行人工离体无菌培养，使其发育成幼苗的技术。
试管受精：指在无菌条件下离体培养未受精子房或胚珠和花粉萌发产生的花粉管进入胚珠从而完成受精过程。
细胞核移植：一种利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内的技术。
细胞工程学复习题样题
细胞工程学复习题
一、名词解释
1．原代培养: 原代培养通过组织块直接长出单层细胞或用酶或机械方法将组织分散成单个细胞开始培养，在首次传代前的培养可认为是原代培养
2．传代培养: 传代培养原代培养形成的单层细胞汇合以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生成空间不足或由于细胞密度过大引起营养枯竭，都将影响细胞的生长，这一程序常称为传代或传代培养
3．细胞系:原代培养物经首次传代成功即称为细胞系
4．细胞株: 通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株
5．细胞融合: 人工的或自然发生的细胞合并形成多核细胞的现象
6．单克隆抗体: 将产生抗体的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞杂交，获得既能产生抗体，又能无限增殖的杂种细胞，并生产抗体的技术。
7．超数排卵: 应用外源性促性腺激素诱发卵巢多个卵泡发育，并排出多个具有受精能力的卵子的方法，称为超数排卵，简称“超排”。
是在动物发情周期的适当时期，利用外源性促性腺激素对雌性动物卵巢进行处理，诱发其卵巢上大量卵泡同时发育并排卵。
8．胚胎移植: 人工授胎或借腹怀胎。它是将家畜的受精卵或发育数日的胚胎，从某一个体（供体）移植到同种动物的另一个体（受体），使之继续发育的技术
9．同期发情: 应用某些激素或药物以及畜牧管理措施使一群动物在同一时期内发情并排卵的技10．体外受精: 指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术，
11．显微受精
12．克隆动物: 动物克隆是一种通过核移植过程进行无性繁殖的技术。不经过有性生殖过程，而是通过核移植生产遗传结构与细胞核供体相同动物个体的技术，就叫做动物克隆
医用细胞生物学全部题库
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I.单选题（共241 题）
1. Ca2+ 逆浓度梯度通过细胞膜的运输方式是( )。
A. 易化扩散
B.被动转运
C.主动转运
D.膜泡运输
E.简单扩散
2. 显示DNA 的特异性细胞化学法是( D)
A. 超薄切片法
B. 负染色技术
C. 冰冻蚀刻术
D. Feulgan 法
E. 以上都不是
3.肌动蛋白构成以下哪种结构( E )
A. 微管
B. 中心粒
C. 鞭毛
D. 纤毛
E. 微丝
4. 真核细胞中RNA 的分布是( ) 。
A. 只在细胞质中
B. 主要在细胞质中，也在细胞核中
C. 主要在细胞核中,也在细胞质中
D. 只在细胞核中
E. 主要在细胞膜上
5. 下列哪一种细胞内没有高尔基复合体( A ) 。
A. 肌肉细胞
B. 肝细胞
C. 癌细胞
D. 胚胎细胞
E. 淋巴细胞
6.不符合捕鱼笼式核孔复合体结构模型的结构为（D）
A. 胞质环或外环
B. 核质环或内环
C. 辐
D. 脂和疏水蛋白构成的复合物
E. 中央栓
7. 核纤层是紧贴核膜的一层() 。
A. 微管
B. 微丝
C. 中间纤维
D. 溶胶层
E. 类脂分子
8. 不是核骨架功能的是( ) 。
A. 为细胞器提供支架
B. 与真核细胞中RNA 的转录和加工有关
C. 与病毒复制有关
D. 参与染色体构建
E. 为DNA 复制提供空间支架
9. 关于细胞核错误的叙述是( ) 。
A. 原核细胞与真核细胞主要区别是有元完整的细胞核
B. 细胞核的主要功能是贮存并传递遗传信息
C. 细胞核的形态有时和细胞的形态相适应
D. 每个真核细胞只能有一个核
E. 核仁位于核内
10.在糙面内质网上合成的蛋白质是( D) 。
_细胞工程试题(卷)答案
2014---2015年第二学期细胞工程试卷答案
一、填空题
1、目前，体外受精成功的标志至少是看受精卵可以发育至囊胚期阶段。
2、动物细胞培养需要防止污染问题，显著污染的标志是PH显著改变，
细胞外形模糊，甚至出现漂浮的集落。
3、超数排卵是向动物体注射某些促性腺激素，对卵巢产生作用促进排卵。
4、动物细胞培养时，细胞主要以聚集体形式存在。
5、细胞融合实验最常用的生物促融剂是仙台病毒（HVJ）。
6、胚胎工程中最关键的技术是体外受精和胚胎移植。
7、克隆动物制备主要是通过不同来源的细胞核移植实现的。
8、动物细胞体外培养的培养基包括：天然培养基、合成培养基和无血清培养基。
9、动物细胞培养一般经过：原代培养、传代培养和衰退期三个阶段。消化法传代是实验室动物细胞培养的传代方法。
10、干细胞从来源上可分为胚胎干细胞和成体干细胞两种。从功能上可分为单能干细胞、多能干细胞和全能干细胞。
11、HAT选择培养基中有三种关键成分：次黄嘌呤（H）、氨基蝶呤（A）、胸腺嘧啶（T）。
12、影响超数排卵效果的因素包括供体年龄、供体品种差异、激素剂量、卵巢状况等。
13、动物多倍体培育常用的物理方法包括：温度激变（温度休克法）、水静压法、机械损伤、辐射高盐碱法等。
14、女性细胞在间期出现的三角形或半月状的染色体，称为Barr's小体。
15、哺乳动物的Y染色体上有一个性别遗传控制因子，称为睾丸决定因子。
16、大量产生单克隆抗体的方法主要有杂交瘤细胞体接种法和体外培养法。—17、卵母细胞成熟的一些标志包括发生泡破裂、染色体凝集、纺锤体形成、极体排出、透明带软化、卵丘细胞扩散。
细胞工程学专业复习资料
绪论
一．细胞工程（Cell Engineering）：（定义）是应用细胞生物学和分子生物学方法，借助工程学的实验方法或技术，在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特性，以获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的学科。
分类（包括）:（填空）植物细胞工程和动物细胞工程
植物细胞工程：（定义）以植物细胞组织为基本单位，在离体条件下进行培养、繁殖或人为的精细操作，使细胞的某些生物学特性按人们的意愿发生改变，从而改良品种或创造新物种，或加速繁殖植物新个体，或获得有用物质的过程。
动物细胞工程：（定义）是根据细胞生物学及工程学原理，定向改变动物细胞内的遗传物质从而获得新型生物或特种细胞产品的一门技术。
二．（填空）细胞学说的提出：施旺，施莱登（1838年）
三．1902年，H aberlandt提出了细胞全能性学说。
第一章基本技术
一．湿热灭菌：103-137kPa(121-126°C),15-30min.
二．干热灭菌：利用烘箱加热到位60-180°C
三．培养基基本成分：无机盐（大量元素，微量元素），有机成分（激素，植物生长调节剂），水
常用有机成分：糖类（蔗糖），维生素，肌醇，腺嘌呤，氨基酸
激素：生长素（根），细胞分裂素（芽），赤霉素（细胞伸长）
四．基本培养基种类：MS,B5,N6,White(P26)
（1）高盐平衡培养基：MS培养基、LS培养基、BL培养基、BM培养基和ER培养基。特点：无机盐浓度较高，元素间的比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲性；营养丰富；微量元素种类全，浓度高。
医学细胞生物学期末复习资料
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第一章绪论
一、A型题
1. 世界上第一个在显微镜下看到活细胞的人是
A. Robert Hooke B、Leeuwenhoek C、Mendel
D、Golgi
E、Brown
2. 生命活动的基本结构和功能单位是
A、细胞核
B、细胞膜
C、细胞器
D、细胞质
E、细胞
3. 被誉为十九世纪自然科学三大发现之一的是
A、中心法则
B、基因学说
C、半保留复制
D、细胞学说
E、DNA双螺旋结构模型
4. 细胞学说的提出者是
A、Robert Hooke和Leeuwenhoek；
B、Crick和Watson；
C、Schleiden和Schwann；
D、Sichold和Virchow；
E、以上都不是
二、X型题
1. 当今细胞生物学的发展热点集中在_______等方面
A、细胞信号转导
B、细胞增殖与细胞周期的调控
C、细胞的生长与分化
D、干细胞及其应用
E、细胞的衰老与死亡
2. ______促使细胞学发展为分子细胞生物学
A、细胞显微结构的研究
B、细胞超微结构的研究
C、细胞工程学的发展
D、分子生物学的发展
E、克隆技术的发展
三、判断题
1. 细胞生物学是研究细胞基本结构的科学。
2. 细胞的亚显微结构是指在光学显微镜下观察到的结构。
3. 细胞是生命体的结构和生命活动的基本单位。
4. 英国学者Robert Hooke第一次观察到活细胞有机体。
5. 细胞学说、进化论、遗传学的基本定律被列为19世纪自然科学的“三大发现”。
四、填空题
•细胞生物学是从细胞的显微、亚显微和分子三个水平对细胞的各种生命活动开展研究的学科。•1838年，施莱登和施旺提出了细胞学说，认为细胞•
细胞工程习题
细胞工程习题
一、选择题
1．植物组织培养是指( )
A．离体的植物器官或者细胞培养成愈伤组织
B．愈伤组织培养成植株
C．离体的植物器官、组织或者细胞培养成完整植物体
D．愈伤组织形成高度液泡化组织
2．在细胞工程的原生质体融合育种技术中，其重要的一环是将植物细胞的细胞壁除去，通常是使用纤维素酶与果胶酶的酶解法处理。如将去掉了细胞壁的成熟植物细胞置于清水中，细胞将( )
A. 皱缩
B. 胀破
C. 呈球形
D.保持原状
3. 在离体的植物器官、组织或者细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需要的( )
A. 消毒灭菌
B. 适宜的温度
C. 充足的光照
D. 适宜的养料与激素
4. 要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株，不需要( )
A. 具有完整细胞核的细胞
B. 离体状态
C. 导入外源基因
D. 一定的营养物质与激素
5．植物体细胞杂交要先去除细胞壁的原因是( )
A．细胞壁阻碍了原生质体的融合
B．细胞壁使原生质体失去活力
C．植物体细胞的结构构成中不包含细胞壁
D．细胞壁不是原生质体的构成部分
6．科学家把天竺葵的原生质体与香茅草的原生质体进行诱导融合，培养出的驱蚊草含有香茅醛，能散发出一种特殊的气味，达到驱蚊且对人体无害的效果。下列关于驱蚊草培养的叙述中，错误的是( )
A．驱蚊草的培养属于细胞工程育种，其优点是能克服远源杂交不亲与的障碍
B．驱蚊草培养过程要用到纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或者离心、振动、电刺激等方法
C．驱蚊草培养过程是植物体细胞杂交，不一致于植物组织培养，无愈伤组织与试管苗形成
D．驱蚊草不能通过天竺葵与香茅草杂交而获得是由于不一致物种间存在生殖隔离7．下列关于植物体细胞杂交目的的描述，错误的是( )
细胞工程期末试题库
一、名词解释
1.细胞工程：应用细胞生物学和分子生物学方法,借助工程学的实验方法或技术,在细胞水平上研究、改造生物遗传特性和生物学特性,获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的科学;
2.动物组织工程：将干细胞与材料科学相结合,将自体或异体的干细胞经体外扩增后种植在预先构建好的聚合物骨架上,在适宜的生长条件下干细胞沿聚合物骨架迁移、铺展、生长和分化,最终发育成具有特定形态及功能的工程组织;
3.细胞全能性：一个细胞所具有的产生完整生物个体的固有能力;
4.干细胞：动物体内具有分化潜能,并能自我更新的细胞,分为胚胎干细胞和组织干细胞;
5.全能干细胞：从早期胚胎的内细胞团分离出来的一种高度未分化的细胞系,可以无限增殖,可分化成为多种细胞类型,从而可形成任何组织、器官,具有形成完整个体的潜能;
6.多能干细胞：具有分化成多种细胞组织的潜能,但失去了发育成完整个体的能力,发育潜能受到一定限制;
7.植物细胞培养：指在离体条件下,对植物的单个细胞或小的细胞团进行培养使其增值的技术;
8.植物组织培养：在无菌和人工控制的条件下,将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上,给予适宜的条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株;
9.细胞脱分化：一个已分化的细胞回复到未分化的状态或分生细胞的过程;
10.细胞再分化：指在离体的培养条件下,当细胞脱分化以后形成的无序生长的细胞或愈伤组织重新进入有序生长的过程;只有再分化才能再生个体;
11.体细胞杂交融合：指两个离体细胞通过一定的诱导技术使质膜接触而融合在一起,随后导致两个细胞核物质融合的技术;
大学 细胞工程试题及答案
细胞模拟试题及答案
一、填空（每空一分，共25分）
1.实验室的物理防护是由隔离的设备、实验室的设计、实验实施等三个方面组成，根据其密
封程度的不同，分为P1、P2、P3、P4四个生物安全等级。典型的P4实验室由更衣区、过滤区、缓冲区、消毒区、核心区组成。
2.细胞系是原代培养经初步纯化获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存的不均一细胞
群体。
3.细胞株是指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细
胞增殖形成的细胞群。
4.干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。干细胞的增殖特性为缓慢性和自稳性。
5.培养细胞的生长特点为贴附、接触抑制和密度抑制。
6.植物细胞培养的原理是基于动物细胞的全能性。
7.植物细胞悬浮培养的方法为分批培养法、连续培养法和半连续培养。
8.植物组织培养中培养材料的消毒过程中，消毒的基本原则是既要杀死附着其上的微生物又
不损伤材料。
9.细胞生长测定的一般方法为：细胞计数、测定细胞密实体积、细胞鲜重或干重。
10.体外培养的细胞根据其生长方式主要分为贴附型细胞和非贴附型细胞。
11.人工种子的组分包括胚状体、人工胚乳和人工种皮。
12.细胞融合主要经过了两原生质体或细胞互相靠近、细胞桥形成、胞质渗透、细胞核融合几
个步骤。其中细胞桥形成是最关键的一步。
13.花粉单倍体植株的鉴定方法有形态鉴定、细胞学鉴定、杂交鉴定、分子标记鉴定。
14.胚胎工程主要是对哺乳类动物的胚胎进行某种人为的工程技术操作，然后让它继续发育，
获得人们所需要的成体动物。
15.人工诱导单倍体形成的方法包括：远缘杂交、延迟授粉、核置换、射线照射、花药培养等。
细胞工程原理与技术复习题
1902年，Haberlandt(哈博兰特)提出植物细胞全能性。
1934年，Gautberet（高特里特）培养三毛柳、黑杨的形成层，成功得到愈伤组织。
1947年，White(怀特)发明了第一个人工合成培养基。
1937年，Nabecourt（诺比考特）是胡萝卜根组织经培养获得愈伤组织并继代培养了几十年。细胞全能性（Totipotency）：每个完整植物的体细胞或性细胞都拥有该植物形成一个完整植株的全套遗传基因，在一定的培养条件下，细胞都可发育成一个与母体一样的植株，这种能力称之为植物细胞的全能性。
外植体（Explant）：从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。
愈伤组织（Callus）：在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在植物体切面上产生。特点：多细胞起源的，具有异质性，遗传稳定性差，易发生变异。
分化（Differentiation）：在细胞分裂过程中发生结构和功能上的改变，从而在个体发育中形成各类组织和器官完成整个生活周期。
脱分化（Dedifferentiation）：已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分生组织状态的过程。
再分化（Redifferentiation）：脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。
细胞（原生质体）融合（Protoplast fusion）：两种异源原生质体在诱导剂诱发下相互接触，从而发生膜融合，胞质融合和核融合并形成杂种细胞，进一步发育成杂种植株的过程。
细胞培养(Cell culture)：用能保持较好分散性的植物细胞或很小的细胞团为材料进行离体培养。
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研究生课程班细胞工程复习题姓名：
名词解释：
1、组织培养：人和动物，昆虫及植物的某组织在试管中培养成活的生物技术。特点：细胞不从组织中失散，保持与组织原来的关系。
2、细胞培养：是从活体中取出小块组织分离出的细胞，在一定条件下进行培养，使之能继续生存、生长、增殖的一种方法。
3、器官培养技术：将器官切成几立方毫米大小，保持器官原有的结构和功能的培养方式。
4、细胞系：是原代培养经传代成功后生成的细胞群体，群体内细胞生长稳定并逐渐趋向于一致，由原先存在于原代培养物中的细胞所组成。
5、细胞株：系通过选择法或克隆形成法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特定性质或标志的细胞群。
6、克隆：系指由同一个祖先细胞通过有丝分裂所产生的遗传性状相同的细胞群体。
7、原代培养期：亦称初代培养期，为新鲜组织自体内取出接种培养至第一次传代的阶段，一般持续1~4周。
8、次代培养：用胰酶等将原代细胞消化分散后，传代再培养的一代，此操作过程叫传代。
9、贴壁型生长细胞：需贴附于底物表面生长者称为贴壁性或锚着依存性细胞，培养时需消化分散，利于观察细胞形态、结构。
10、悬浮型生长细胞：无需附着物的支持表面，呈悬浮状态生长，呈圆形，易形成团块。
11、接触抑制：当细胞过少，培养液与细胞的容积太大，均会影响细胞增殖。若培养液中的PH值变碱，则细胞生长受到抑制，甚至会脱落死亡。
12、限定性细胞系：细胞系一旦作出了一些实验指标者为限定性细胞系。
13、核质体：细胞经离心15～20分钟，可使99%的细胞发生脱核，形成无核的细胞质体
14、胞质体：细胞经脱核后无胞质称为核质体
15、细胞周期：是指指分裂的细胞，从前一次有丝分裂结束，到完成下一次有丝分裂所经历的整个序列过程。可分为两个时期——间期和有丝分裂期。
16、杂交瘤；将分泌特异抗体的B细胞和某一个永生化的骨髓瘤细胞系进行融合，杂交后代称之为杂交瘤。
17、基因导入：将外源性基因(或基因组DNA) 导入细胞中的技术称为基因转导或称基因转移，也简称为导入，是研究基因表达、结构和功能的重要研究手段。
18、诱导分化：诱导分化因素的作用，可使高度分化的细胞通过重新分裂，回复到胚胎细胞状态，这种现象称为去分化或诱导分化，又称“逆转” （肿瘤细胞）
19、细胞凋亡：又称程序性细胞死亡，是由基因编程控制的细胞主动参与的自杀过程，是细胞衰老自然死亡的主要方式之一，是一种生理性调节机制，在机体中承担着重要的调控作用。
20、细胞转化：是细胞发生遗传性改变而导致细胞永生化的转变方式，由限定性细胞系转变成连续性传代细胞系，获得了永生化。
21、细胞生长曲线：是细胞培养实验中最基本的指标，是测定细胞绝对增长数值和生长繁殖基本规律常用的简便方法。
22、基础培养基：人工合成培养基的主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机离子及其他一些辅助物质。
23、完全培养基：将合成基础培养基再添加小牛血清，就称为完全培养基
24、免疫荧光染色法:此法基本原理是将已知抗体或抗原标记荧光素，用此特异性试剂，浸染含有相应抗原或抗体的组织细胞标本，借助抗原抗体的特异性结合，于抗原或抗体的存在部位呈现荧光，从而可以定位标本内的抗原或抗体。
25、台盼蓝染色法：用0.5%浓度的台盼蓝，用PBS配制，室温保存，该染料只对死细胞着色，测定活细胞数和计算成活百分率。
26、细胞融合:两个或两个以上细胞合并成一个细胞的过程,即将两个离体细胞在特殊融合剂的作用下使细胞膜发生一定变化，使两个或多个细胞发生融合，形成体细胞杂交，产生一个新的杂种细胞。
27、克隆形成率：生成克隆数/每皿接种细胞数*100%，克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。
28、转基因技术：是将人工分离和修饰过的基因导入到生物体基因组中，由于导入基因的表达，引起生物体性状的可遗传的修饰，这一技术称为转基因技术。
29、细胞分裂指数：示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/100个细胞，一般细胞分裂指数介于0.2%-0.5%，肿瘤细胞可达3-5%.
30、 3H-TdR掺入法：H-胸腺嘧啶核苷掺入法，原理：T细胞受PHA或特异性抗原刺激后，发生有丝分裂，细胞进入S期，此时在细胞培养液中加入氚标记的胸腺嘧啶核苷，可被细胞摄入而掺入DHA，测定3H-TDR的掺入量，可判定细胞的增殖程度。
问答：
1、细胞培养的生长方式和特点如何？
方式有：贴壁型生长细胞和悬浮型生长细胞
特点：1、贴附并伸展：呈现各种细胞形态，细胞的贴附和伸展受一些因素的影响，如附着因子、生长因子、离子作用、温度、培养液的流动速度等，特别是小牛血清和钙、镁离子对细胞贴壁影响更为
明显。
2、密度依赖性：正常细胞有接触抑制，
过密----拥挤，生长环境恶劣，易死亡；
过稀----PH变碱，生长抑制或死亡。
2、细胞系的细胞培养需经历哪三个阶段？
正常细胞体外培养有寿命期限，大致分三个阶段：（1）原代培养（primary culture）期
（2）传代期（3）衰退期
3、小牛血清在细胞培养中的作用是什么？影响血清质量的因素有哪些？何谓维持液和营养液（完全培养基）？
小牛血清对细胞的作用
提供细胞增殖所必须的生长因子（A因子 促进；B、C因子对细胞有抑制生长作用；D因子促进细胞粘连）。
对细胞附壁有利。
保护作用，解除毒性物质对细胞的毒性作用，使细胞免受冻存、搅拌的损伤。
其他：利于染色体分布良好。
影响血清作用的因素年龄；血型（AB>A或O）；血色素；胆红质脂肪酸；红细胞生成素；肿瘤患者血清；浓度；支原体污染。将合成基础培养基再添加小牛血清，就称为完全培养基
4、影响细胞生长的因素有哪些？为什么？
一、温度:一般哺乳类及禽类细胞体外培养的适宜温度是37~38℃，昆虫细胞25+1℃
高温：蛋白变性，酶失活，类脂质破坏.室温：代谢下降，可短期保存（4℃ ~20℃）
低温：在降到冰点以下时，细胞因胞外水和胞质结冰而受损死亡。但若向培养液中加入甘油或二甲亚砜等保护剂，以防止胞内冰结晶的形成而刺破胞膜，可用作细胞种子长期冻存。
二、渗透压:细胞在高渗溶液或低渗溶液中，可以立即发生皱缩或肿胀、破裂。不同的细胞需要不同的渗透压，可选用不同渗透压的培养基来适应这一需求。
三、气体环境和pH:O2：细胞呼吸，利于生物氧化，促进生长。
CO2 :维持培养液的pH（细胞耐酸>耐碱，增加CO2将使pH下降）
四、无毒和无菌
五、辐射线和超声波（一）可见光：可见光的各种有色光能引起细胞退变，延长核分裂的间期，还可显著降低细胞的附壁能力。（二）紫外线：核分裂、有丝分裂受破坏，细胞脱水收缩、起泡和细胞肿胀。（三）放射线：X、β、γ射线使核分裂数减少并出现不正常的核分裂。（四）超声波和振动：细胞紊乱，胶体结构变化，染色体畸变
六、细胞接种浓度（密度）
培养液与细胞的容积比应小于2000:1，接种密度太低或太高都不利于细胞的生长增殖，如果接种密度太高，每个细胞周围培养液的容积降至0.007mm3以下，妨碍细胞的增殖。
七、容器转动速度和悬浮搅动速度:搅拌速度既不能太快，也不能太慢。太慢，细胞易结团、下沉和贴壁；太快，容易起泡沫，细胞易窒息致死，搅动易使细胞受机械损伤。
5、原代细胞培养方法有哪些？（标题）
组织块培养法、消化培养法、悬浮细胞培养法、器官培养
6、分离培养骨髓细胞有何用途？
经体外培养贴壁的骨髓基质细胞，可用于细胞因子自分泌和诱导分泌能力的测试。骨髓基质细胞能分泌多种调节免疫和造血功能的细胞因子，证明基质细胞能支持造血、提供造血微环境，也为体外扩增干细胞用于骨髓移植提供了新技术、新方法。扩增的基质细胞不仅可直接应用于临床治疗骨髓抑制、成骨能力障碍性疾病，而且可通过基因导入法开展基因治疗的研究。
7、细胞污染的类型有那些？如何预防？
一、细菌：较常见，G+菌较多，多浑浊。二、真菌：最常见，霉菌较多，见菌丝。三、支原体：常见，不易检测。四、病毒：影响疫苗生产。五、非同种细胞：细胞系丢失。六、化学成分：出现毒害或营养不良。
预防：最有效，严密消毒、谨慎操作
8、MTT比色法的主要原理是什么
原理是活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性的MTT还原为难溶性的蓝紫色结晶物，并沉积在细
胞中，而死细胞无此功能。此法已广泛运用于一些生物活性因子的活性检测，抗肿瘤药物的筛选、细
胞毒性试验和肿瘤放射敏感性的测定。