耳聋的基因诊断和咨询

在中国，每年有30000新生儿患重度或 极重度耳聋。
另有相当比例的婴幼儿患迟发性听力下 降，每年新发耳聋患儿8万名。
两千万人患各种听力疾病。
随着人类基因组计划的实施和完成， 耳聋的遗传学研究是遗传学中进步最大 的一个分支，鲜有人类常见病能象耳聋 那样有大量的疾病相关基因被定位克隆。
耳聋的临床基因诊断应运而生。
怎样去利用基因科学的巨大进步去造 福于众多的耳聋患者？
第一步：耳聋的基因诊断（突破坚硬 耳蜗外壳的限制）
第二步：耳聋的预防和产前诊断
第三步：耳聋的基因治疗
Hale Waihona Puke 耳聋基因诊断应达到的目的1. 在分子水平明确病因（意义等同于发现肺炎的 致病子）
2. 预防耳聋发生 3. 指导耳聋治疗 4. 判断预后 5. 进行耳聋遗传咨询 6. 进行产前诊断，迎接正常听力新生儿
解放军总医院聋病分子诊断中心
我们在500例耳聋患者中用此试剂盒进行了筛 查，共发现60例患者携带mtDNA A1555G突变， 患者多来自母系遗传耳聋家系，其发病多与氨 基糖甙类抗生素用药史有关，提示这一筛查的 预防性意义。
远程诊断：异地寄送DNA或外周血标本
外地病人自行送诊程序
电话电邮联系
•先天性耳聋患者中GJB2基因存在高突变率
•235delC是频率最高的致病突变
•已发现一系列新突变，表明中国人有其独特的突 变热点和频率
限制性酶切检测中国人常见GJB2 235delC突变
什么样的病人应作GJB2基因突变检测?
广义：不明原因的双侧中重度感音性 耳聋
强烈推荐：先天性双侧中重度感音性 耳聋
解放军总医院聋病分子诊断中心
大部分氨基糖甙类抗生素致聋（AAID）家系为 母系遗传方式 线粒体基因第1555 位A→G均质性点突变与 AAID关系密切 单次剂量的氨基糖甙类药物应用即可导致携带 此突变个体的重度听力损失（一针致聋！）
解放军总医院聋病分子诊断中心
•我科收集的遗传性耳聋家系中有40个母系遗 传耳聋家系携带mtDNA A1555G点突变
野生型GGGCCC
纯合235缺失C
测序证实纯合性GJB2 235del C，突变导致终止密码 子提前出现，使其蛋白产物大大短于正常产物。
诊断结果提示：
1. 患儿的先天性耳聋是由于GJB2基因突变导 致的。
2. 父母均为携带者，后代有25%的风险成为先 天性耳聋患者。
3. 基因诊断结合产前诊断可以遴选出确定的耳 聋胎儿以避免再次生育聋儿。
当地医院抽血
诊断中心进行标本 处理和分子诊断
这一全新的诊断手段可以为聋哑儿童和家长 •明确病因、避免对所有可能病因的猜测和恐惧 •避免再次的伤害和有利于家庭成员的听力保护 •可以进行有把握的再次生育 •指导治疗和日常生活行为、预防并发症 •对聋儿的下一代生育可以提前检测和干预
常染色体显性遗传
常染色体隐性遗传
线粒体遗传
常见的耳聋基因诊断
中重度先天性耳聋中GJB2基因突 变的检测和快速筛查
解放军总医院聋病分子诊断中心的数据：
在500例各地的先天性耳聋患者20%具有 GJB2 235delC纯合或杂合突变
在针对100例先天性耳聋患者的GJB2基因全序列 分析中发现：
在东亚，5%的语前聋由PDS(SLC26A4) 基因突变引起
以下三张图片来自一对同卵双生姐妹，均患大 前庭水管，具有中、重度听力下降。
基因诊断结果证实她们均具有PDS IVS7-2 A-G突 变，明确了其分子致病原因。
野生型 IVS 7-2 A
突变型 IVS 7-2 A-G
已完成的26例针对大前庭水管患者基因 诊断在22例患者中发现PDS基因、纯合突 变、复合突变或杂合突变，提示这类患者 中PDS可能的高突变率以及存在突变热点。
产前诊断：羊水检测
产前诊断：羊绒毛膜检测（CVS）
先天性或进行性耳聋中 SLC26A4(PDS)基因突变的检测和
快速筛查
大前庭水管常合并耳蜗和（或）半规管畸 形，如耳蜗 畸形、前庭池扩大、半规管壶 腹扩大等。听力下降呈进行性或波动性， 与轻度的头部外伤有密切的关系。
PDS基因突变与散发性大前庭水管综合 征及先天性神经性耳聋联系密切
解放军总医院聋病分子诊断中心
据报道：上海地区的药物性耳聋患者30%由 A1555G突变引起
美国：15%药物性耳聋患者由A1555G突变引起
陈观明 武汉（2000）：检测66例药物性耳聋 患者中，14例有A1555G突变
日本：估计3%门诊耳聋患者携带A1555G突变
南京卜行宽教授报道一个特大母系遗传家系：
GJB2基因突变检测的意义：
•明确耳聋的分子学病因，终止大范围盲目的 病因学检查
•配合新生儿的听力筛查手段，及早明确GJB2 基因突变的耳聋诊断，进行早期听力康复
•提示良好的电子耳蜗移植的治疗效果
•适合于产前诊断和筛查
•杂合性GJB2基因突变仍强烈提示耳聋的遗传 因素
病例：
患儿语言发育不良，听力检查显示重度感音性 耳聋，2岁时于北京行电子耳蜗移植术，患儿父 母及双方家族内均无类似病例。
家系总人口507人
耳聋患者136人
31人轻度、18人中度、31人重度、56人极重度耳 聋
15人曾用过氨基糖甙类抗生素，均在3个月内发 生极重度耳聋
耳聋患者均携带A1555G和961 insC突变
耳聋基因诊断试剂盒
mtDNA1555 A to G检测试剂盒应用范围： •常规临床检测 •新生儿筛查 •孕期母亲筛查 •耳聋患者群中的病因学检查 •氨基糖甙类药物应用前的预防性检查
PDS基因突变检测的意义：
•配合或代替影象学（颞骨CT)明确耳聋 的分子学病因或进行远程诊断
•指导诊断明确患儿的日常行为及注意事 项,提前注意甲状腺异常情况
•适合于产前诊断和筛查
氨基糖甙抗生素致聋的线粒体基因突 变的检测和广泛筛查
•氨基糖甙类抗生素种类（链霉素、庆大霉素、卡 那霉素、妥布霉素及小诺霉素等） •广谱高效 •价格低廉 •应用广泛 •严重的耳毒性副作用 •受损听力难以逆转
聋病的临床基因诊断
概况
• 每1000个儿童里 1.3-2.3名儿童受耳聋困扰
• 50% 儿童感音神经性聋归结于遗传因素, 20-25% 归结 为环境因素， 25-30% 为散发性病例
• 遗传性感音性耳聋的相对增加促动医生必须熟悉这一 疾病
• 75-80% 遗传性耳聋为常染色体隐性遗传，18-20% 为 常染色体显性遗传，其余为线粒体、 X-连锁 或染色 体疾病