免疫组化在脱落细胞上的应用价值
脱落细胞学
结合患者的病史和其他检查结果,综合分析病变的原因和诊断,为临床医生 提供参考依据。
04
脱落细胞学在临床上的应用
在肿瘤早期诊断中的应用
宫颈癌筛查
通过检测脱落的宫颈细胞,能够 早期发现宫颈癌变,提高治愈率 和生存率。
肺癌诊断
通过观察支气管和肺泡的脱落细 胞,有助于诊断肺癌,并为早期 治疗提供依据。
研究目的和意义
研究目的
通过对脱落细胞形态学、生物学特性、动力学变化等方面的研究,为临床医学提 供诊断依据和支持,提高诊疗水平。
研究意义
脱落细胞学在癌症筛查、疾病预后评估、药物疗效评价等方面具有重要价值,同 时脱落细胞学研究也为其他医学领域的发展提供了有力支持。
02
脱落细胞的来源与特点
脱落细胞的来源
THANKS
可培养性差
脱落细胞难以进行体外培养
脱落细胞的诊断价值
1 2
判断疾病性质
通过对脱落细胞的形态学观察,可以初步判断 肿瘤的性质
监测治疗效果
通过对治疗前后脱落细胞的形态学观察,可以 评估治疗效果
3
发现早期病变
通过对脱落细胞的筛查,可以发现早期病变, 提高诊断的准确性
03
脱落细胞学检查技术
标本采集与处理
皮肤表面脱落细胞
皮肤表面坏死的角质层和皮屑
呼吸道表面脱落细胞
呼吸道黏膜表面的坏死细胞和痰液
消化管道表面脱落细胞
消化道黏膜表面的坏死细胞和排泄 物
泌尿道表面脱落细胞
泌尿道黏膜表面的坏死细胞和尿液
脱落细胞的特点
数量少
不易存活
相对于活体细胞,脱落细胞数量较少
脱落细胞脱离母体后难以长期存活
形态多样
病理诊断中胸腹水细胞块结合免疫组化
World Latest Medicne Information (Electronic Version) 2019 Vo1.19 No.24172投稿邮箱:zuixinyixue@·医学检验·病理诊断中胸腹水细胞块结合免疫组化王德玉,向思敏(中山大学附属第三医院,广东 广州 510630)0 引言胸腹腔积液也被称为胸腹水,是临床肿瘤性疾病的一种常见体征,晚期恶性肿瘤患者大多数会出现胸腹水。
而胸腹水的产生机制较为复杂,所以有效判断其性质对疾病诊断、临床治疗以及改善患者预后均具有重要意义。
目前胸腹水脱落细胞学检查是临床中较为常用的临床诊断方法,但是单纯细胞形态学提供的病理诊断的准确性低于组织学病理诊断,因此为疾病的临床诊断增加了一定难度。
为了进一步提升细胞病理诊断的准确率,为疾病的临床诊疗提供可靠依据,本研究对细胞块与免疫组化用于胸腹水脱落细胞学检查的应用效果作如下分析与总结。
1 资料与方法1.1 一般资料。
在本次研究中,共计随机选择的54例研究对象,均为2015年5月至2017年6月于我院接受胸腹水液基细胞学检查后疑似肿瘤的患者,后经手术活检症状为恶性肿瘤伴胸腹水。
其中男28例,女26例;年龄29-64岁,平均(46.5±5.8)岁,其中胸水23例、腹水31例。
体液容量55-500 mL ,平均(302.5±83.5)mL ,液体颜色均呈血色或者是淡黄色。
入选研究对象中17例肺腺癌、2例恶性间皮瘤,5例肺鳞癌、14例小细胞癌、16例鳞状细胞癌。
1.2 方法。
将所有入选本次研究的患者胸腹水液基细胞进行细胞块及切片制作,并分比采用HE 常染色以及免疫组化染色。
细胞学涂片制备:静止胸腹水样品30 min 后,用吸管将距离瓶底的液体吸取8 mL ,放置在离心管当中,以3500 r/min 的速度进行15 min 的离心操作,弃上清液后,将试管底部的沉淀物涂在切片上进行固定,并采用瑞士-姬姆萨实施染色,直至涂片呈紫红色。
免疫组化各步原理
一、免疫组化技术免疫组织化学(Immunohistochemistry"HC)技术是用标记的特异性抗体(或抗原)对组织内抗原(或抗体)的分布进行组织和细胞原位检测技术。
目前,这种技术在临床病理诊断和形态学研究中已得到广泛应用。
Slide 3:(一)、免疫组化常用染色方法和步骤(石蜡切片)SP法(链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法):SP法(链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法)原理采用生物素标记的第二抗体与链霉菌抗生物素蛋白连接的过氧化物酶及底物色素混合液来测定细胞和组织中的抗原。
主要步骤:主要步骤1、石蜡切片脱蜡(与常规HE切片脱蜡相同):石蜡切片置60 ℃ 烤箱烤片15小时以上一从烤箱中拿出立即放入二甲苯I中5~10 min一二甲苯II 5~10min 一无水乙醇5min 一95%乙醇5min 一80%乙醇5min 一70%乙醇5min 一自来水洗Slide 6:2、3%H2O2阻断20min (以消除内源性过氧化物酶的活性,降低背景);PBS 洗3次,每次5min。
3、抗原修复;PBS洗3次,每次5min。
4、滴加5~10% 正常山羊血清封闭,37℃, 10min (消除背景非特异性着色)Slide 7:5、吸干组织周围多余的血清,不洗,滴加第一抗体,37℃,孵育60min或孵育30min 再4℃冰箱过夜;PBS洗3次,每次5min。
6、擦干组织周围PBS, 滴加生物素标记的第二抗体,37c 孵育20min, PBS洗3次,每次5min。
Slide 8:7、擦干组织周围PBS,滴加链霉菌抗生物素-过氧化物酶溶液37c 孵育20min。
8、PBS洗3次,每次5min, D.W洗2次,DAB显色(DAB必须现用现配),镜下控制显色程度,自来水冲洗,苏木素复染胞核,烤干,中性树胶封片。
染色步骤:染色步骤石蜡切片脱蜡到水;3%H2O2阻断10min (以消除内源性过氧化物酶的活性,降低背景);蒸馏水洗2次,PBS洗3次,每次5min。
免疫组化需要注意事项
免疫组化需注意的问题一、为达到免疫组织化学技术的要求,组织固定越新鲜越好。
为达到免疫组织化学染色的要求,对于离体的组织尽量快的进行固定,有条件的应将其剖开,早取材,早固定。
二、组织脱水必须彻底干净组织块取材不能太大过厚,才能较好地完成脱水的过程。
如果取材太厚,在较短的时间内脱水不完全,将可引起一系列的问题,比如浸蜡不彻底,切片不好完成,切不完整。
由于先天不足,导致后来切片染色的脱落,造成染色的失败,或者由此反复操作,造成人力物力的浪费,造成病理报告的延期发出等。
因此,对取材的要求是除了要求要有艺术性外,即平整、外观好看,还要求适中。
三、切片必须完整、均匀、平展、无邹折应用于免疫组织化学染色的切片,对切片的质量要求较高,切片必须完整,平展、无汽泡,无邹折,这样有利在染色时的冲洗,有利于切片的牢固附贴。
如果切片不平展,免疫组化染色后,可出现染色不均匀的现象,颜色深浅不一,不平。
如果切片有汽泡切片在烘烤时,由于汽泡的破裂影响了汽泡周围的组织,在其周围可观察到深浅不一的染色。
如果切片有邹折,免疫组化染色后,在邹折的地方有深浅不一的颜色,这是一种假阳性,容易引走混淆。
四、切片的附贴必须牢固,必须使用合适的粘贴剂。
免疫组织化学染色前的前期准备工作,就是必须对新的载玻片进行处理,新的载玻片表面看起来很干净,有人认为不需要进行任何的处理,都能够适合使用,这是一种错误的想法。
新出厂的载玻片,表面复盖着开一层油脂样的物质,如果不加以处理,对切片的附贴是极为不利的。
我们的做法是:新的载玻片,放于玻璃清洗液中浸泡4小时甚至过夜,然后取出,经自来水彻底冲洗后,浸入酒精中达2小时以上,取出擦干备用或烘干也可。
然后再将载玻片浸入了-氨基-三乙氧基-硅烷(3-Aminopropyl triethoxy-silane)的稀释液(1:50用丙酮或无水乙醇稀释都可以)中硅化10分钟,后经无水乙醇洗2次,烘干即可使用。
五、切片必须烘烤附贴牢固,既要经得起抗原修复时高温的作用而不使轻易脱片,又不至于破坏抗原。
脱落细胞学检查技术及基本知识
EA36染液中4~5min • 脱水:95%、无水乙醇各1~2min→二甲苯透明2~
05.03e.2.0血24 片自然干燥后即可镜检。
21
第二节 显微镜检查
一、阅片
要求:核对送检单与涂片的编号;了解病史及临 床情况与送检目的;涂片应封固;先低倍镜逐个 视野仔细阅片每个视野部分重叠,以免遗漏;找 到具有诊断意义或值得讨论的细胞,要作标记。
观察项目:涂片中的细胞成分;细胞的排列方式; 一群细胞的毗邻关系;单个细胞的特征;核浆比 例;细胞的退变情况;涂片背景中细胞成分和非 细胞成分。
1) 缓冲液作用:染色对氢离子浓度是十分敏感的, 据观察 pH 值的改变,可使蛋白质与染料形成的化 合物重新离解。 缓冲液须保持 一定的 pH 使染色稳 定, pH 一般在 6.4~6.8 ,偏碱性染料可与缓冲液中 酸基起 中和作用,偏酸性染料则与缓冲液中的碱基
起中和作用,使 pH 恒定。
2) 缓冲液配制( pH6.4~6.8 ,弱酸性):
细胞的染色既有物理的吸附作用,又有化学 的亲和作用,各种细胞成分化学性质不同, 对各种染料的亲和力也不一样。
⑴.血红蛋白,嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与 酸性染料伊红结合,染红色,称为嗜酸性物 质;
⑵细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性蛋白质, 与碱性染料美蓝或天青结合,染蓝色,称为 嗜碱性物质;
⑶中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结 合,染淡紫红色,称为中性物质。
11
注意事项:
高级卫生专业资格正高副高病理学专业资格(正高副高)模拟题20题-无答案90002
高级卫生专业资格(正高副高)病理学专业资格(正高副高)模拟题2021年(165)(总分91.XX99,考试时间120分钟)A1/A2题型1. 急性、慢性粒细胞性白血病时,在骨内、骨膜下或其他器官内,出现白血病细胞形成的瘤结,该瘤为( )A. 黄色瘤B. 白色瘤C. 棕色瘤D. 绿色瘤E. 转移瘤2. 长管状骨骨折时可能引起的栓塞是( )A. 空气栓塞B. 脂肪栓塞C. 血栓栓塞D. 细胞栓塞E. 细菌栓塞3. 类风湿性关节炎血清中RF最主要成分是( )A. IgMB. IgAC. IgGD. IgEE. C34. 骨结核病常见于( )A. 股骨B. 肋骨C. 腓骨D. 胫骨E. 脊椎骨5. 临床所谓"冷脓肿"的实质是A. 深部真菌感染所引起的脓肿B. 不伴有全身发热的脓肿C. 组织深部化脓菌感染所引起的脓肿D. 骨结核病合并化脓性炎症E. 骨结核病穿破骨皮质在软组织内形成的结核性脓肿6. 色素性绒毛结节性滑膜炎最常累及A. 肩关节B. 肘关节C. 髋关节D. 膝关节E. 踝关节7. 增生性肌炎与横纹肌肉瘤的区分主要依据是A. 细胞增生活跃和多形性B. 肿瘤生长迅速并见核分裂象C. 见横纹肌母细胞样的细胞D. 在疏松的黏液样基质内见多形性细胞分布E. 病变侵犯肌间质,无病理性核分裂象8. 下列关于小细胞型骨肉瘤的叙述,正确的是()。
A. 好发部位为四肢长骨的骨表面B. 由小圆形细胞构成C. 轻度异型D. 预后好E. 毋需化疗9. 软骨肉瘤的特殊类型不包括()。
A. 黏液样软骨肉瘤B. 纤维性软骨肉瘤C. 皮质旁软骨肉瘤D. 去分化软骨肉瘤E. 透明细胞软骨肉瘤10. 骨关节炎病理改变是()。
A. 炎性肉芽组织B. 于酪样坏死C. 较多中性粒细胞浸润D. 肉芽肿性炎E. 关节软骨的变性,导致软骨下骨质发生结构改变11. 下列选项中,属于瘤样病变的是()。
A. 骨软骨瘤B. 血管肉瘤C. 骨巨细胞瘤D. 骨纤维结构不良E. 骨关节炎12. 关于动脉瘤样骨囊肿,叙述错误的是A. 影像学呈偏心性、溶骨性和膨胀性改变B. 多发生于20岁以下的青少年C. 组织学主要为纤维组织构成的血腔样结构,可见多核巨细胞和反应性编织骨D. 属于瘤样病变,不发生复发和转移E. 分为原发性和继发性13. 骨肉瘤的好发部位是( )A. 头面骨B. 脊椎骨C. 扁骨D. 长骨E. 指(趾)骨14. 青春期后骨骺已闭合,生长激素分泌过多可能引起( )A. 肢端肥大症B. 多毛症C. 巨人症D. 男性化E. 过早衰老15. 关于巨人症,下列哪一项是正确的( )A. X线检查蝶鞍无特殊变化B. 发病年龄多在青春期之后C. 骨骼、肌肉、结缔组织过度生长,但内脏不明显D. 生长激素分泌增多,但促性腺激素常减少E. 垂体常有嗜碱性细胞腺瘤16. 软骨黏液样纤维瘤组织学形态不包括A. 肿瘤呈分叶状B. 含软骨样组织C. 含黏液样组织D. 含纤维组织E. 含骨样组织17. 骨化性纤维瘤与骨纤维结构不良的病理鉴别诊断要点是A. 纤维组织和与骨组织含量比例不同B. 有无骨样组织C. 有无新生骨D. 病变内骨小梁表面有无骨母细胞围绕E. 有无坏死18. 男,46岁,左腿大隐静脉曲张6年,行大隐静脉切除术。
脱落细胞学检查技术
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THANKS
02
脱落细胞学检查技术的原理
脱落细胞的来源和采集
脱落细胞的来源
脱落细胞学检查技术主要针对人体组 织表面或腔道内自然脱落的细胞进行 研究。这些细胞可以来自皮肤、腔道 、尿液、痰液等不同部位。
采集方法
采集脱落细胞的方法包括刮片法、刷 片法、冲洗法等。根据不同部位和检 查目的,选择合适的采集方法。
脱落细胞的形态学特征
离心沉淀法
将采集的细胞经离心后,取沉淀物进行涂片 ,显微镜检查。
细胞块技术
将采集的细胞经过处理后形成细胞块,进行 切片和染色,显微镜检查。
特殊染色脱落细胞学检查
01
02
03
巴氏染色法
利用巴氏染色技术对细胞 进行染色,用于宫颈、阴 道等部位的细胞学检查。
瑞氏染色法
利用瑞氏染色技术对细胞 进行染色,用于血液、骨 髓等细胞的检查。
铁染色法
利用铁染色技术对细胞进 行染色,用于鉴别含铁血 黄素细胞等。
免疫细胞化学脱落细胞学检查
免疫组化染色法
利用免疫组化技术对细胞进行染色, 用于鉴别肿瘤细胞、鉴别细胞类型等 。
荧光免疫细胞化学法
酶免疫细胞化学法
利用酶免疫技术对细胞进行染色,用 于定位和定量分析。
利用荧光免疫技术对细胞进行染色, 用于定位和定量分析。
脱落细胞学检查技术
汇报人:可编辑 2024-01-11
目录
• 引言 • 脱落细胞学检查技术的原理 • 脱落细胞学检查技术的分类 • 脱落细胞学检查技术的临床应用 • 脱落细胞学检查技术的发展趋势和展望
01
引言
目的和背景
目的
脱落细胞学检查技术是一种通过收集人体组织表面或腔道内脱落的细胞,进行病理学检查的方法,用于诊断疾 病、评估病情和监测治疗效果。
P53和Ki-67蛋白在宫腔脱落细胞中的表达及意义
强度与平均阳性细胞百分 比的乘积 > 3定为免疫反应 阳性 。
13 统计学分析 .
2 结 果
应 用 SS 10统 计软 件 , PS1. 计数 资料采 用
11 一 般资料 选择 2 0 . 06年 6月至 20 0 9年 5月, 我院妇科门 诊患 者 18例 , 0 年龄 3 7 5— 8岁 , 平均 年龄 5 . ; 4 3岁 病例选择 阴 道不规则 出血 、 绝经 后 出血、 体发 现子 宫内膜增 厚等 。其 中 查 子宫 内膜 癌 3 2例 , 子宫 内膜不典 型增 生 3 6例 , 正常子 宫 内膜
底部 , 出宫腔深度 , 读 回缩外套管 推出采集器 , 顺时针方 向转动
3—5圈 , 将外套管 向前推将 采集器 收入外套 管 中, 同一 起退 连
出官 腔 , 将采集环上 的附着物 立 即投 入液 基小瓶 中 , 做成 液基
子宫内膜癌 和宫 颈 癌是 女性 生殖 道 最常 见 的恶性 肿瘤 。
采用免 疫组化 S P法, 检测 18例 宫腔 脱落细胞 P3和 K _ 0 5 i 7的表达 。结 果 6 正常子
宫 内膜、 宫内膜不典型增 生、 宫 内膜癌 中, 5 子 子 P 3蛋 白表达 率分 别为 7 5 5 . 8 8 . % , . %、2 7 %、7 5 3组比较差 异有 统计 学意 义( < . 1 , i 7的表达分别 为 5 5 .6 、0 6 , 比较差异有统计 学意义(P < P 0 0 ) K_ 6 %、5 5 % 9 . % 3组
表达 , 同时检测 K-7在子宫 内膜发生发展 中的作用 , i 6 提高子宫 内膜癌 的检 出率 。
免疫组化实验报告
免疫组化一、实验目的:1.了解免疫组化基本原理。
2.了解免疫组化实验操作及注意事项。
3.免疫组化结果判定。
通过实验,让学生熟悉免疫组化操作流程及注意事项,对抗原抗体结合、抗原修复和酶催化底物显色进行研究。
要求学生通过查阅文献,在归纳、对比、总结的基础上对免疫组化有进一步的了解。
二、实验原理:三、实验材料:一抗:Ki67、PCNA、VEGF、TGE-β、AFP等二抗:兔HRP标记抗体其它:组织切片、EDTA抗原修复液、过氧化物酶阻断剂、PBS缓冲液、DAB、孵育盒、染色架、苏木素、盖玻片、冲洗瓶、中性树胶,孵育盒。
四、实验步骤:1.组织切片脱蜡水化二甲苯(Ⅰ)10min,二甲苯(Ⅱ)10min,无水乙醇(Ⅰ)3min,无水乙醇(Ⅱ)3min,95%酒精3min,85%酒精3min,自来水冲洗。
2.抗原修复采用EDTA修复,具体步骤见修复方法。
3.过氧化物酶阻断修复结束后,流水冲洗干净,除去自来水,在离组织3mm处用免疫组化油笔画圈或用纸巾擦干组织外残留的液体,滴加50 μL(一滴)过氧化物酶阻断剂,室温孵育10min,PBS冲洗3×3min。
4.孵一抗甩去PBS,纸巾擦干组织3mm外的残留液体,每张切片加50 μL(一滴)相应一抗,37℃孵育60min或4℃过夜,PBS冲洗3×3min。
5.孵二抗甩去PBS,纸巾擦干组织3mm外的残留液体,每张切片加50 μL(一滴)二抗试剂,37℃下孵育30分钟,PBS冲洗3×3min。
6.DAB显色甩去PBS液,纸巾擦干组织3mm外的残留液体,每张切片加50 μL(一滴)新鲜配制的DAB,显色5min,自来水冲洗。
7.苏木素复染每张切片滴加50 μL(一滴)苏木素,10-15s后自来水冲洗,或浸泡于PBS 中10-15s再自来水冲洗。
8.封片梯度酒精脱水干燥(85%酒精2min,95%酒精2min,无水乙醇2min,无水乙醇2min,二甲苯1min),或直接烘箱烘干,中性树胶封固。
简述临床脱落细胞学检验基本技术的优缺点
简述临床脱落细胞学检验基本技术的优缺点下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。
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atrx免疫组化和atrx基因金标准
ATRX免疫组化是指使用特定的抗ATRX抗体来检测细胞中ATRX蛋白的表达情况。
ATRX基因属于X染色体上的一个基因,它编码的是一种对铁离子敏感的ATP酶。
ATRX蛋白在细胞核中发挥着重要的作用,参与到染色质重塑、基因转录调控以及端粒的稳定等生物学过程中。
ATRX基因突变或缺失会导致染色质不稳定、端粒缩短以及肿瘤的发生。
通过ATRX免疫组化检测ATRX蛋白的表达情况可以帮助医生诊断肿瘤类型、评估肿瘤的预后以及制定个体化的治疗方案。
ATRX免疫组化是临床病理学中的一项重要检测技术,其结果对肿瘤的诊断和治疗具有重要的指导意义。
在进行ATRX免疫组化检测时,需要先准备组织切片,然后通过免疫组化技术使用特异性抗ATRX抗体对组织切片中的ATRX蛋白进行染色。
通过显微镜观察染色结果,可以判断出组织中ATRX蛋白的表达水平,进而对肿瘤进行分型和病理评价。
ATRX免疫组化技术的准确性和可靠性在肿瘤病理学领域得到了广泛认可,成为肿瘤诊断和治疗中不可或缺的一部分。
ATRX基因突变与多种肿瘤的发生和发展密切相关。
研究表明,ATRX 基因的突变或缺失在神经胶质瘤、睾丸生殖细胞瘤、胶质母细胞瘤等多种恶性肿瘤中均有发现。
根据ATRX免疫组化结果,可对这些肿瘤进行准确的分型和病理评价,有助于临床医生进行个体化治疗方案的制定。
ATRX免疫组化在某些先天遗传病和白血病等疾病中也具有重要的应用价值。
ATRX免疫组化技术的发展和应用,对于改善肿瘤患者的诊断和治疗效果具有重要意义。
在进行ATRX免疫组化检测时,需要注意以下几个方面:1. 样本的准备:组织切片应该保存完整,没有明显的脱落或破损,这样才能保证染色结果的准确性。
2. 抗体的选择:选择特异性抗ATRX抗体进行染色,以保证结果的准确性和可靠性。
3. 染色结果的解读:根据染色结果,判断组织中ATRX蛋白的表达水平,进而对肿瘤进行病理学评价和分型。
ATRX免疫组化作为一种重要的肿瘤诊断技术,对肿瘤的分类、预后评估和个体化治疗方案的制定具有重要的指导意义。
免疫组化染色在细胞学标本石蜡切片中的应用
免疫组化染色在细胞学标本石蜡切片中的应用在临床各种诊断方法中,细胞学检查具有简便、安全、准确、经济等特点,已在病理学检查中广泛应用。
除了抽取浆膜腔积液进行细胞学检查之外,随着细针穿刺吸取标本采集技术的发展,如何提高肿瘤细胞的检出率是一个值得探讨的问题,我们尝试将细胞学标本制成细胞块,用于进一步观察分析其组织结构,并进行免疫组化标记,旨在更客观地鉴别细胞的良恶性,判析瘤细胞的组织来源!1、材料和方法1.1标本的采取,送检的标本要求新鲜,临床上采取后应立即送检。
1.2方法1.2.1送检的浆膜腔积液如肉眼可见较多纤维蛋白凝集物,按规范[1]离心涂片2张并取适量凝集物常规石蜡包理切片。
1.2.2送检的浆膜腔积液如肉眼未见凝集物,先静置30分钟,让瘤细胞自然沉淀弃去上清液,余50ml左右以每分钟2500转离心5-10分钟,取沉渣用滤纸包裹,10%福尔马林固定后常规石蜡切片。
1.2.3痰液用N-乙酰半胱氨酸液化后沉淀30分钟,2500rmp离心5-10分钟,取沉渣用滤纸包裹,10%福尔马林固定后常规石蜡切片。
1.2.4细针穿刺吸取的标本,先借助空气压力将针管内的穿刺标本喷至载玻片上,用穿刺针将标本聚成一小团,吸除多余的血液,将标本放置2-5分钟后,连同载玻片浸入95%乙醇中2-3分钟,使其表面凝固,然后立即浸入中性福尔马林中固定2小时,再用手术刀水平从载玻片上切取细胞块进行脱水,常规石蜡包理切片。
1.2.5细胞块切片行HE和免疫组化染色(依临床情况选用不同的抗体),镜下观察,结合临床,做出综合分析。
2、结果2.1细胞块的常规石蜡切片,在某种程度上具有组织切片的特点,细胞集中,克服了涂片中细胞重叠堆积,厚薄不均的现象,图像背景中血细胞和炎性细胞更少,组织像清晰便于观察,较易识别具有特征性的异型细胞。
2.2综合HE染色的细胞学涂片,细胞块切片及临床资料,不同病例选用不用抗体进行免疫组化染色,染色结果定位准确,颗粒清晰,弥补了细胞学涂片不能进行多次免疫组化染色等检测的不足,为细胞学的诊断和鉴别诊断提供了丰富的信息。
免疫组化总结
免疫组化总结免疫组化定义用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学( immunohistochemistry )技术或免疫细胞化学( immunocytochemistry )技术。
原理免疫组织化学染色方法的原理抗原( antigen)1. 定义:是一类在适合条件下能激发机体免疫系统发生免疫应答,并能与免疫应答产生的效应物质(抗体和效应细胞)在体内或体外发生特异性结合反应的物质。
抗原具有两种性能:(1)免疫原性(immunogenicity)指抗原分子具有诱导机体产生免疫应答的特性。
(2)反应原性(reactogenicity)指抗原分子与抗体或效应T细胞等免疫应答产物发生特异性反应的特性。
2. 抗原的分类 -- 完全抗原、半抗原免疫学分类胸腺依赖抗原与非依赖抗原外源性抗原:微生物、花粉等内源性抗原:隐蔽的自身抗原、肿瘤相关抗原等临床分类同种异型抗原:人类白细胞抗原、血型抗原异嗜性抗原:人与其他动物、植物等之间存在的共同抗原抗体( antibody)1. 定义:机体受到抗原刺激后,通过体液免疫应答,B 淋巴细胞活化、增殖,分化为浆细胞,由浆细胞合成并分泌的仅与该抗原发生特异性反应的球蛋白,称为抗体。
大部分抗体电泳后位于丫区带,1972年国际免疫学联合会正式将化学结构相同或相似的一类球蛋白分子统一命名为免疫球蛋白(immunoglobin,Ig)。
2. 抗体的种类:五类,即IgA、IgD、IgE、IgG、IgM。
免疫组织化学染色技术中,使用的抗体主要是IgG,个别情况下使用IgG的亚型,多为lgG1。
免疫组织化学染色的反应原理染色反应的最基本原理是抗原抗体的反应。
通过对针对标本中相应抗原的抗体上标记某种发色剂或酶类,再通过激发发色剂或使用某种显色剂,在显微镜下使标本中抗原抗体反应的部位产生肉眼可观察到的颜色以确定所要检测的抗原是否存在。
宫颈细胞p16免疫组化检测在宫颈不典型鳞状上皮细胞分流管理中的应用价值
宫颈细胞 p16免疫组化检测在宫颈不典型鳞状上皮细胞分流管理中的应用价值【摘要】目的分析宫颈细胞p16免疫组化检查对不典型宫颈鳞状上皮细胞(ASC)的分流管理价值。
方法 2019.01-2021.08本院就诊760例ASC患者,均结合宫颈有关细胞学检查明确诊断,同时取宫颈细胞开展p16免疫组化检查,统计p16阳性率。
结果 ASC-US患者的p16阳性率于HSIL、LSIL、正常或者炎症反应组的分布情况差异显著(P<0.05)。
ASC-H患者的p16阳性率于HSIL、LSIL、正常或者炎症反应组的分布情况无显著差异(P>0.05)。
结论结合宫颈细胞p16免疫组化检查结果能对ASC-US患者开展有效分流管理,优化阴道镜的转诊流程,HSIL检出效率较高,值得采用。
【关键词】不典型宫颈鳞状上皮细胞;p16;阳性率;分流管理宫颈癌属于临床一类常见恶性肿瘤,已经严重威胁到女性健康。
积极开展宫颈癌筛查对降低疾病发病率有着重要意义。
不典型鳞状细胞(ASC)于巴氏诊断系统评定结果中占比第二,常规分流方式对高危人乳头瘤病毒(HR-HPV)开展检测特异度较低。
因此,需临床积极探索出新型技术手段或者生物学标志物,以达到对ASC的风险分层管理。
有研究显示,p16蛋白于宫颈癌前病变和宫颈癌中处在过表达状态,该指标能被应用到宫颈癌及癌前病变的辅助诊断中[1]。
本文就宫颈细胞开展p16免疫组化检查对ASC的分流管理价值开展分析,现报告如下:1资料和方法1.1.一般资料选择2019.01-2021.08本院就诊的760例ASC患者进行研究,年龄范围在21-65岁,均值(39.60±8.42)岁。
均结合宫颈有关细胞学检查明确诊断,后分成不明确意义非典型鳞状细胞(ASC-US)737例和无法除外上皮内高度病变(ASC-H)23例。
1.1.方法所有患者均先后开展HR-HPV、p16检查:(1)HR-HPV检查:选择美国DIGENE公司提供HC-II检查仪对所有患者宫颈脱落细胞开展HR-HPV检查,涉及的高危型有18型、31型、33型、35型、39型、45型、51型、52型、56型、58型、59型以及68型,操作者严格按试剂盒中说明书进行操作,结果显示≥1.0pg/mL时能评定成阳性。
液基薄层制片技术制作外周血淋巴细胞涂片方法学的建立及免疫组化染色应用
液基薄层制片技术制作外周血淋巴细胞涂片方法学的建立及免疫组化染色应用孔庆暖;王丽娜;韩增磊;黄维清【摘要】Objective To develop a new morphological examination method which make smears of lymphocytes in pe-ripheral blood as well as applied with immunohistochemistry using thinprep liquid-based technology. Methods After separated by Ficoll-hypaque density centrifugation, lymphocytes in peripheral blood were preserved in special Preserv-Cyt Solution overnight. And liquid-based smears were prepared with cytospin on the principle of thinprep cytologic test. The immune phenotype of lymphocytes were observed with CD3 and CD20 immunohistochemistry staning. Accu-rate expression location indicated the condition of antigen preservation in lymphocytes. Results The lymphocytes yields of five healthy volunteers reached up to 95% with complete and clear cell morphology. CD3 and CD20 were accord-ingly expressed on cell membranes of two lymphocyte subsets. The proportion of the two lymphocyte subsets calculated by immunohistochemstry staining was in accordance with previous literature. Conclusion The application of preparing lymphocytes smears with thinprep liquid-based technology in blood method in lymphocytes morphology observation and immunohistochemistry staining is rapid and effective compared with conditional manual blood smears. The method also has important values on lymphocyte subsets classification, lymphoma classification and prognosis.%目的:应用液基薄层制片技术制作外周血淋巴细胞涂片,以期建立更加简单直观且能够与分子生物学相结合的外周血淋巴细胞形态学检查方法。
病理报告肿瘤细胞脱落
病理报告:肿瘤细胞脱落背景:肿瘤细胞脱落是一种常见的病理学现象,指的是肿瘤组织细胞从原发肿瘤中脱落,并进入体液或组织中。
这些脱落的细胞可以通过各种方式进行检测和分析,从而提供重要的临床诊断和预后信息。
本文将逐步介绍肿瘤细胞脱落的检测方法和临床应用。
一、细胞脱落的机制肿瘤细胞脱落的机制主要包括两个方面:细胞内因素和外部环境因素。
1.细胞内因素:细胞内因素是指肿瘤细胞自身的特点和变化,如细胞形态的改变、细胞凋亡、表面标记物的变化等。
这些因素可以导致肿瘤细胞从原发肿瘤中脱落,并进入体液或组织中。
2.外部环境因素:外部环境因素是指肿瘤细胞脱落受到的外界刺激和影响,如肿瘤组织的血液供应状况、机械刺激、炎症反应等。
这些因素可以促使肿瘤细胞从原发肿瘤中脱落,并进入体液或组织中。
二、肿瘤细胞脱落的检测方法肿瘤细胞脱落的检测方法主要包括细胞学检查和分子生物学检测。
1.细胞学检查:细胞学检查是通过对体液或组织中的细胞进行形态学观察和分析,以检测是否存在肿瘤细胞脱落。
常用的方法包括涂片染色、细胞免疫组化和原位杂交等。
这些方法可以直接观察细胞的形态和标记物表达情况,从而确定细胞是否为肿瘤细胞。
2.分子生物学检测:分子生物学检测是通过检测体液或组织中的肿瘤相关标记物的表达情况,以间接判断是否存在肿瘤细胞脱落。
常用的方法包括聚合酶链反应(PCR)、蛋白质芯片和基因测序等。
这些方法可以检测特定基因的突变、蛋白质的表达水平等,从而提供肿瘤细胞脱落的临床诊断依据。
三、肿瘤细胞脱落的临床应用肿瘤细胞脱落的检测在临床上有重要的应用价值,主要体现在以下几个方面:1.早期筛查与诊断:肿瘤细胞脱落的检测可以提供早期肿瘤的筛查和诊断依据。
通过检测体液中的肿瘤细胞脱落情况,可以及早发现肿瘤的存在和发展趋势,从而采取相应的治疗措施。
2.预后评估:肿瘤细胞脱落的检测可以提供肿瘤患者的预后评估依据。
通过检测体液或组织中的肿瘤细胞脱落情况,可以评估肿瘤的侵袭性和转移倾向,从而预测患者的生存期和治疗效果。
免疫组化法检测脱落细胞端粒酶活性在良、恶性胸腹水鉴别中的应用
免疫组化法检测脱落细胞端粒酶活性在良、恶性胸腹水鉴别中
的应用
于秀艳;王振明;朱华;高海燕
【期刊名称】《中国检验医学与临床》
【年(卷),期】2004(005)001
【摘要】常规胸腹水中肿瘤细胞病理学检查,由于受经验、技术条件等因素的影响,敏感性低,对良、恶性胸腹水有时很难定性诊断。
除生殖细胞、造血干细胞外,正常细胞不表达端粒酶活性,而85%~90%的肿瘤细胞表达端粒酶活性,端粒酶活性检测对肿瘤的诊断具有较强的专一性。
本文用免疫组化方法检测胸腹水脱落细胞端粒酶活性,旨在探讨其在良、恶性胸腹水鉴别诊断中的价值。
【总页数】2页(P22-23)
【作者】于秀艳;王振明;朱华;高海燕
【作者单位】吉林省肿瘤医院检验科,长春130012;辽原市东辽县医院检验科137000
【正文语种】中文
【中图分类】R561.3
【相关文献】
1.端粒酶活性检测对良恶性胸腹水的鉴别诊断价值 [J], 蒋文智;叶锋;陈杰;张行
2.脱落细胞端粒酶活性检测在良恶性胸腹水鉴别中的应用 [J], 王文龙;于秀艳;黄式敏;王振明
3.液基细胞学检测联合DNA倍体分析在良恶性胸腹水鉴别诊断中的应用 [J], 王应霞;张旋;吴莹莹;舒然;潘国庆
4.液基细胞学检测在良恶性胸腹水鉴别诊断中的应用 [J], 王应霞;赵珍;杨梅秋;王殿华;张旋;
5.脱落细胞端粒酶活性检测对良恶性胸腹水的鉴别 [J], 于秀艳;朱华;黄式敏;王振明
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免疫组化技术总结(较好)
免疫组化技术总结(较好)个人免疫组化感悟(Jane)1、方法操作不难,最大的难处是出现异常结果时如何解决?这就需要掌握免疫组化实验原理,每一步知道为什么这样做,这样你才敢大胆地改革先前的不对的方法步骤。
如抗体孵育条件主要是抗体浓度、温度、时间,这三者一般是相互成反比的(相对),其中浓度是最重要的先决条件,温度决定反应的速度、时间决定反应的量。
就拿温度来说,可以有4度、室温、37度,我推荐4度最佳,反应最温和,背景较浅;而37 度反应速度较快,时间较短;室温我不太提倡,除非你每次都把环境温度控制在一定的范围,否则,尽量选择前两者。
2、免疫组化最大的优势是定位和定性。
相比于其他蛋白检测方法,免疫组化具有定性灵敏度高、定位较直接准确,是定位检测分析首选方法。
尤其对于有些因子的转位研究十分有用。
3、免疫组化结果定量分析的前提是高质量的染色切片。
免疫组化结果也能定量分析,但必须是背景染色浅而特异性染色较深的情况下,分析最为准确,这种原则可能也是我们日常审稿时判定研究结果的必备条件。
4、免疫组化实验一定要设置阳性对照和阴性对照。
阳性对照一般是用肯定表达这种抗原的切片来做;阴性对照一般是用PBS或非一抗替代一抗来进行反应,其余步骤均一致。
前者是排除方法和实验系统有无问题;后者是排除有无一抗外的非特异性染色。
5、免疫组化的应用广泛,是当前实验研究的最重要方法之一。
如今发SCI论文时,明显感觉仅靠量化的数据来发文章很难,加一些形态学数据或图片,老外十分欢迎,可能是怕你学术造假吧。
当然也不能做假阳性或假阴性结果。
6、免疫组化技术掌握与否的鉴定标准是同一切片或不同切片中不同抗原均从摸索浓度或条件而做出优良的染色切片。
我在平时带教中就发现许多研究生把我已经摸索很成熟的反应条件、浓度、方法步骤,重复运用于同一性质的切片和同一种抗体,做出来后就觉得自己已经掌握了免疫组化方法,更换一种抗体后,居然连二抗的种属来源都拿错了。
脱落细胞学检查
脱落细胞学检查脱落细胞学检查(DesquamativeCellExamination,DCE)是一种无创性的检查方法,用于检测皮肤、头发和指甲的脱落的细胞以及皮肤表面上的分泌物,可以为治疗和鉴定许多慢性皮肤病提供有价值的信息。
它结合了常规的病理学技术,如显微镜检查,电镜检查和免疫组化检查等,以观察皮肤中细胞的结构和病理变化,以及表面细胞膜上的分泌物。
脱落细胞学检查用于鉴定什么病?脱落细胞学检查在皮肤病学、内科学和外科学中有着广泛的应用。
它最常用于鉴别以下皮肤病:1)皮肤渗出性病,如湿疹、牛皮癣、脓疱性病变和溃疡性病变; 2)酒糟皮;3)银屑病;4)脂溢性皮炎;5)多形红斑;6)白癜风及其他皮肤病。
脱落细胞学检查的原理是什么?脱落细胞学检查可以评估皮肤、头发和指甲细胞在表面上脱落或在其他位置成团的情况,还可以观察其中的细胞膜上的分泌物,并与正常皮肤进行比较。
脱落细胞学检查的基本流程是什么?1)采集皮肤样本:根据需要,采集不同部位的皮肤样本,如受检者腿部、胸部、臀部或其他部位,用细小的刮刀抽取皮肤样本,将其置于玻片上。
2)应用适当的染色剂:通常使用染色剂如Giemsa染色、棕色和Reynolds染色,以突出细胞内的细胞结构和形态特征。
3)查看下层细胞:检查标本中的细胞水平,观察表面下层的细胞细胞结构和特征,以及它们之间的关系。
4)识别表面细胞膜上的分泌物:表面细胞膜上常存在一些特征分泌物,可以识别这些分泌物,以作为判断检查结果的依据。
脱落细胞学检查的优缺点是什么?脱落细胞学检查的优点:1)无创性检查:只需很少的皮肤损伤,就可以观察病变的发生和发展情况;2)非常客观:病理学家可以根据细胞结构和分泌物的变化来判断病变的可能性;3)快速:根据得到的结果,病理学家可以很快完成有效的报告。
脱落细胞学检查的缺点:1)部分病症的诊断效果会受到影响:由于表面损伤小,有些病症的病因比较复杂,脱落细胞学检查可能无法得出明确的结果;2)费用较高:脱落细胞学检查的费用较高,在某些情况下可能难以接受。
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胸 腹水酶 、 E X及 C C A, T片、 B超等 ) 三结合 。判 断标准 : 胞
内 有 棕 黄 色 颗 粒 者 为 阳性 。
2 3 数据处理 .
2 结 果
采 用 S S 2 0统计 软 件进 行数 据处 理 。 P S 1.
对 我院 2 0 0 8年 3月至 2 1 2月送检的胸腹水 3 0 0年 0例 、
方便 以及患者痛苦 少等 优点 , 是临床上诊 断疾病 的重要手段 之一 , 但是 在实 际应用 中 , 常因涂片 太厚 、 细胞 重叠、 细胞退 变等 因素导致 细胞 结构 不清 以及收 集细胞 数量 少而 导致 出 现假 阴性 , 尤其在恶性 肿瘤 细胞 检查 中 , 影响涂 片治 疗和诊 断结果 , 组织化学结合 免疫 组织 化学对 某些 疑难 病例 , 通过
局麻药或插管 , 免扩大损伤范围 。 避
3 结 果
免 疫 组 化 在 脱 落 细 胞 上 的 应 用 价 值
邹 洪 杰
【 摘要 】 目的 探讨免疫组化染色在脱落细胞 检测上 的应用价值 。方 法 对送检 的胸腹水 3 、 0例
胸腹水 3 0例 , E H
便脱落细胞 2 2例 , 进行脱落细胞学检查采用 H E染色法和免疫组织化学染 色。结果 免疫组化检测方 法简单 、 实用效果好等优点 , 对细胞学诊 断起 到了很大 的帮助 。
染色 阳性 1 例 , 1 免疫组化 阳性 8例 , 便脱落细胞 2 , E染色 阳性 5例 , 2例 H 免疫组化检测 阳性 3例。结论
【 关键词 】 免疫组化 ; 落细胞 ; 脱 胸腹水
脱落细胞 即由机体整体 或某 器官掉下来 的细胞 , 采集脱 取经 H E诊断有癌细胞 样本 , 做免疫 组化 , 免疫组化采用 s P法 ,P试剂盒购 自福州迈新生物技术公司 。根 据诊 断的不 s 同需要选择性使用抗体 p3 C A、 a ei n C 5 6 C N E 5 、 E C l t i、 K / 、 K、 S 、 r n C A Sn C 15E P g 、y 、 A 2 、 R、R。使 用 4 m厚 的切片 经脱腊 、 脱水 、 3 %H O 阻断内源性过氧化物酶、 微波 修复、 血清封 闭后加 一
为结 核性 胸 、 膜 炎 ; 脱 落 细 胞 2 腹 便 2例 , 中恶 性 肿 瘤 3例 其
色便脱落细胞学 阳性 1 , 1例 阳性率 为 3 .7 ,9例便脱 落 66% 1
细 胞 均 为 阴性 。SP法 免 疫 组 化 检 测 1 例 , 性 8例 , 性 - 1 阳 阳
( 大肠癌 2例 , 巴瘤 1 ) 良性病 变 8例 ( 淋 例 ; 含炎症 、 肉及 息
应强调避免暴力及反复穿刺 。 27 脊 神经根 或脊髓损 伤 . 发 生 原 因 : 穿 刺 针 偏 斜 或 操 ①
本组 47例硬膜外阻滞麻 醉术患 者发 生术后 并发症 2 8 8 例, 并发症 发生率为 5 7 % , . 4 所有并发 症患者 均经 积极 有效
的处 理 痊 愈 出 院 。
・
6 ・ 2
中 国现 卷 第 2 2期
C i hnJMo mgAplNo 01 , 1 4. o 2 dD p v 2 0 Vo . N . 2
。
形成 血肿的直接原 因, 患者合 并凝血功能 障碍或服用抗 凝 若 药物 , 则硬膜外 血肿 发生 的机率 将增 加。处理 措施 : 若确 诊 后尽 早 ( 8h内) 行椎板减压 术 , 清除血 肿 , 状多 可缓解 , 症 若 超过 1 2h再行手术 , 复的可能性极小 。对有凝血障碍及正 恢 在使 用抗凝治疗的患者应避免应用硬 膜外麻醉 , 穿刺操 作时
出版 社 ,09, :7 . 20 55 5
作粗暴 , 可损 伤神 经根 ; ②导管插入脊 髓或局麻 药注入脊髓 。
处理措施 : 脊髓 损伤 后果 严重 , 应强 调预 防为 主 ,2 以上 穿 T
刺 尤 应 谨 慎 小 心 , 有 异 样 感 或 疼 痛 , 退 针 观 察 , 忌 注 入 如 应 切
便 脱 落 细胞 2 2例 , 行 脱 落 细 胞 学 检 查 采 用 H 进 E染 色 法 , 免
组间 比较采用 检验 , P< . 5作为差异显著性 的标准 。 以 00 采用双盲法镜 检便脱落 细胞 , 胸腹水 3 0例 , 中 HE染 其
疫组织化 学染 色采用 即用型 s 。胸腹水 3 P法 O例 , 中 8例 其 可见转移 腺癌细胞 , 5例鳞 癌细 胞 , 恶性 间皮细胞 ,5例 2例 1
抗, 一抗 4C冰箱 过 夜 ; 抗 、  ̄ 二 三抗 3 ℃ 各 2 i;B 7 0 mn P S洗 3次
落细胞 , 特别是官腔器 官表 面 的脱 落 细胞 , 经染 色后用 显微
镜观察这些细胞 的形态 , 以帮 助诊 断许多 疾病 , 可 对脱 落 细
胞 进 行 检 查 , 在 病 理 解 剖 学 的基 础 上 近 年 发 展 起 来 的一 种 是 检 验 方 法 。脱 落 细 胞 学 常 规 涂 片 检 查 具 有 结 果 快 速 、 确 、 准
对 阳性 结 果 的 判 断 辅 助 诊 断 。
1 临 床 资 料
后, 再加过氧化物酶复合 物孵育 加 m n D B显 色 , i,A 苏木精 复 染、 梯度 乙醇脱水 、 甲苯透明、 二 中性树胶封 固。
2 2 病 理诊 断方法 .
采 用 临床、 病理 、 助检查 ( 括血及 辅 包
4 讨 论
硬膜外 阻滞麻醉 易发 生并 发症 , 并发 症的发生 常与术者 操作是否正确处 理等均 有密 切 的关系 。合 理 的选 择麻 醉方 法可降低麻醉术后并发症 的发 生率 , 提高 患者 的综合 治疗和 预后 , 提高其生存质量 。
参 考 文献
[ ] 张玉珍 . 1 临床 常见病 的诊 治与护 理. 尔滨 : 哈 黑龙 江科 学技术