AP标记山羊抗小鼠IgG二抗
GoatAnti-RabbitFcspecificIgG产品使用说明书
Goat Anti-Rabbit (Fc specific)IgG产品使用说明书
技术背景： NanoGen TM提供的多克隆抗体主要来自于宿主动物（BALB/c小鼠、家兔、山羊）抗血清、鸡卵黄等，单克隆抗体主要来自于小鼠杂交瘤克隆株。
本产品为以兔IgG Fc片段作为免疫原，制备山羊抗血清，经阴离子交换柱纯化，去除羊血清中其他非特异蛋白，特异识别兔IgG Fc片段的抗体，酶类如碱磷酶（AP）、辣根过氧化物酶（HRP）及其衍生物，荧光染料如荧光素（FITC）、罗丹明及其衍生物，TRITC，青色素（Cy3），藻红蛋白（R-PE）标记后，可用于科学研究。
与鼠IgG、山羊IgG和人IgG 无交叉反应。
二抗克隆性：多克隆
二抗免疫原：兔IgG Fc片段
二抗宿主动物：山羊
应用：免疫组化、免疫荧光、蛋白印记、细胞相关分析实验、流式细胞术。
产品推荐使用浓度：Western blotting/1:5000-1:10000
Enzyme immunoassays/1:1000-1:5000
具体实验过程中，应根据不同的使用用途选择IgG最适工作浓度。
保存说明：自生产之日起，-20℃可保存1年，经常使用可置4℃；为了更好保存、使用试剂，使用前后请适当离心（盖帽）；禁止反复冻溶。
备注：本产品仅用于科研，不能用于人体实验或人体治疗。
HRP标记二抗
二抗：山羊抗小鼠（HRP标记）山羊抗小鼠说明本二抗为辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG(H+L)(HRP-labeled Goat Anti-Mouse IgG(H+L))，用于Western、ELISA和IHC等的二抗。
HRP，即horseradish peroxidase，中文名为辣根过氧化物酶，可以在Western检测时催化ECL 类试剂(如ECL、BeyoECL等)产生化学发光，可以在ELISA时催化TMB产生蓝色，也可以在IHC 或Western blot检测时催化DAB产生棕色沉淀。
本辣根过氧化物酶标记山的羊抗小鼠IgG(H+L)用于WB、ELISA和IHC的推荐稀释比例参考上表，实际实验操作过程中需根据抗原和抗体的具体情况适当调节二抗的稀释比例。
对于WB，推荐的稀释范围为1:500-2000。
本二抗为用纯化的小鼠IgG免疫山羊，然后用亲和纯化柱对获得的抗血清进行纯化，并经过人IgG吸附纯化的优质山羊抗小鼠二抗。
对人IgG几乎没有结合能力。
·二抗用途本山羊抗小鼠二抗如果用于常规的Western检测，以每次检测需5毫升1:1000稀释的二抗计，至少可以检测20次。
·使用方法Western、ELISA或IHC请参考相关实验步骤进行。
起始稀释浓度按照产品简介中推荐的稀释比例进行稀释。
叠氮钠会抑制辣根过氧化物酶的活性，在含有辣根过氧化物酶的二抗中不可加入叠氮钠。
·使用建议稀释比：ELISA，1:200；Western blot，1:1000；Immunohistochemistry，1：50.稀释后的一抗，回收后可重复使用，回收后的稀释一抗可在4°C短期保存。
·保存条件本山羊抗小鼠二抗4°C保存，一年有效。
·其他说明详细内容请参考说明书。
二抗的选择
二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合的抗体，根据实验需求，二抗上通常连有酶或荧光素等标签。
由于二抗所具备的优点使得其在免疫学实验中得以广泛应用，如WB/ELISA/IHC/IP等。
二抗针对某一特定物种的所有抗体均具有特异性，因而使用特定标记的二抗可以免去对每一个一抗进行标记，大大节省了时间和费用；此外，一个一抗分子可以同时结合几个二抗分子，从而使信号大大增强，提高了实验灵敏度。
二抗，广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体。
检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，同样的，在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求，一般来说，选择合适的二抗需要从以下几个方面考虑：1.一抗的种属来源根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。
例如：一抗是小鼠源的单克隆抗体，二抗则选抗小鼠的二抗（山羊抗小鼠或兔抗小鼠等）。
2.一抗的类别亚型二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。
这通常是针对单克隆抗体而言。
多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白，因此相应的二抗就是抗IgG抗体。
单克隆抗体的类别及亚型通常会在产品说明书中有描述，如果一抗是小鼠IgM，那么相应的二抗就应当是抗IgM。
如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚型（IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3），那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合，或者你也可以选择专门针对这一亚型的二抗。
此种抗体在双标记实验中尤其合适。
3.二抗的偶联标记一般来讲，偶联到二抗上的探针主要有酶（辣根过氧化酶HRP）、荧光基团、生物素、金颗粒等。
选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验。
WB、ELISA 和IHC常用的二抗通常是酶标二抗（部分荧光WB需选用远红外波长荧光蛋白标记的荧光二抗），而免疫荧光、流式等实验中通常使用荧光基团标记的二抗，而金颗粒标记的二抗则更多的应用于免疫电镜中。
还有一些需要更大程度地放大信号的免疫实验中，二抗则可以选择biotin/avidin体系的二抗或无偶联标记的二抗（再用三抗放大）。
2018年凋亡相关基因-Bax在不同细胞中表达产物差异检测-文档资料
告知
实验（四）
细胞内微核的检测 家系分析
注意事项
一、二抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、 背景有直接关系。
染色背景过高，在DAB显色之前，用含0.01-0.02 ％TWEEN20的PBS洗涤标本4次，再PBS洗2次， 然后DAB显色。 DAB有毒性（小心）
SABC试剂盒保存在4 ℃为佳(2年)，而-20 ℃短期 内生物活性则被破坏 。
25µl，37 ℃，1h PBS洗，5min X 3次
实验步骤
加0.3％ H2O2-PBS（甲醇），37 ℃，30min PBS洗，5min X 3次 SABC工作液（1ml PBS加入SABC 10µl，混匀）20-
30µl，37 ℃，1h PBS洗，5min X 3次 DAB显色：
器材与试剂
仪器：移液枪、枪头、滴管、显微镜 材料：培养细胞 试剂：甲醇、PBS、封闭液、一 抗、 二抗、
SABC、DAB 、0.3％H2O2-PBS、
试剂说明
PBS： 磷酸盐缓冲液（ 0.01M pH7.4 ） 封闭液： 山羊血清(或BSA)，用时PBS稀释 一 抗： 小鼠IgG，用时PBS稀释 二抗： 生物素标记的羊抗小鼠IgG 0.3％ H2O2-PBS（甲醇）
DAB显色工作液配制（现配）：1ml蒸馏水，加试 剂盒中A、B、C试剂各一滴，混匀后加至细胞孔 板，镜下控制，以蒸馏水终止反应。
观察结果
实验结果
缺糖前 Hela 细胞
缺糖 24h Hela细胞
缺糖 48h Hela 细胞
缺糖前 PC 12细胞
缺糖 24 h PC 12细胞
ห้องสมุดไป่ตู้
缺糖 48 h PC 12细胞
DyLight荧光二抗——高性价比的全新荧光体验
DyLight荧光二抗——高性价比的全新荧光体验美国Abbkine的DyLight™系列荧光标记是一种近年来被广泛应用的新型荧光染料，由于具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度，更高的光学耐受性（抗淬灭性）、对pH不敏感、分子较小而渗透性更好的优势，越来越受到科研客户的喜爱。
DyLight™种类齐全，如Dylight 405是蓝色荧光，替代Alexa 405；DyLight 549是绿色荧光，可完全替代FITC/Cy2/Alexa 488；完全替代Cy3/Rhodamin/Alexa 546/Alexa 555的Dylight 549；替代Texas Red/Alexa 594的Dylight 594；Dylight 633和Dylight 649（可替代Cy5/Alexa 647）则是更强的红色荧光；另外，Dylight还有适配Odyssey系统的近红外和远红外二抗Dylight 680和DyLight 800。
下面我们来看看美国Abbkine品牌DyLight系列荧光的优异表现吧：一、DyLight荧光二抗比传统荧光标记二抗具有更高的荧光发光强度DyLight 488标记的抗体比Cy2 和FITC标记的更亮，与Alexa Fluor 488 标记的亮度相当。
DyLight 549标记的抗体比传统的罗丹明、TRITC等荧光亮，与Cy3 和Alexa Fluor 555亮度相当；而DyLight 594标记的抗体荧光亮度明显强于Alexa 594标记抗体。
相比较Texas Red 而言，不仅更亮，而且具有更好的水溶性。
二、DyLight荧光二抗比传统荧光及Alexa标记二抗具有更低的背景！三、DyLight荧光二抗比传统荧光标记二抗具有更好的光学稳定性、发光更持久、更适合拍照488594最常用的荧光颜色，激发光和发射光光谱分布合理，适用于各种荧光分析。
其中蓝色荧光的DyLight 405实验。
另外，1. 大包装二抗具有更高的性价比。
IPKine山羊抗小鼠IgG轻链二抗,HRP标记(消除重链干扰)
Abbkine, Inc • Redlands, CA • USA •Not for further distribution without written consent. Copyright © Abbkine, Inc. IPKine® HRP, Goat Anti-Mouse IgG LCS# A25012Product InformationProduct Name: IPKine® HRP Conjugated Goat Anti-Mouse IgG Light Chain SpecificCatalog Number: A25012 Lot Number: Refer to vial Formulation: Liquid Size: 100ul/500ulStorage: Store at -20°C. Avoid repeated freeze / thaw cycles.Note: NoneBackground: 50kD or 25kD protein detection on Western blots after Immunoprecipitation is often suffered from heavy or light chain blotting contamination. Abbkine's IPKine® products solve these problems through less background noise, and enhanced accuracy. The light chain/Fc fragment specific optimization eliminates heavy/light chain interference, while serum proteins absorbed minimizes cross-reactivity with immunoglobulins from other species which may be present on blots. Abbkine's secondary antibodies are available conjugated to enzyme, biotin or fluorophore for use in a variety of antibody-based applications including Western Blot, ImmunoHistoChemistry, ImmunoFluorescence, Flow Cytometry and ELISA. We offer high quality secondary antibodies from goat, rabbit and donkey sources for your each application.Purity: Affinity purified using solid phase Mouse IgG(H+L) light chain with finally > 95% purity based on SDS-PAGE.Specificity: The antibody reacts with kappa light chains on mouse IgG, while it doesn’t react with the heavy chain of mouse IgG. It's cross-reaction with human, rabbit, rat, goat, sheep and bovine serum proteins has been specialized minimized, while it may cross-react with immunoglobulins from other species. It has no reactivity on non-immunoglobulin serum proteins.Application Notes: Optimal working dilutions should be determined experimentally by the investigator. Suggested starting dilutions are as follows: WB (1:10,000-1:100,000), IHC (1:500-1:5,000) and ELISA (1:5,000-1:100,000).Storage Buffer: 0.01M Sodium Phosphate, 0.25M NaCl, 50% Glycerol pH 7.4.Stabilizer: 1% Bovine Serum Albumin (IgG and Protease Free).Preservative: No preservative added.Storage Instructions: Stable for one year at -20°C from date of shipment. For maximum recovery of product, centrifuge the original vial after thawing and prior to removing the cap. Aliquot to avoid repeated freezing and thawing.Note: The product listed herein is for research use only and is not intended for use in human or clinical diagnosis. Suggested applications of our products are not recommendations to use our products in violation of any patent or as a license. We cannot be responsible for patent infringements or other violations that may occur with the use of this product.。
如何选择二抗
二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体，在免疫学反应中，经常需要针对试验选择不同的二抗，艾美捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。
检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，同时在后继试验中也会有不同的检测方案，因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求，一般来说，选择合适的二抗需要从下面几个方面考虑：【一抗的种属来源】二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源，例如：如果你的一抗是小鼠源的单克隆抗体，二抗则选抗小鼠的二抗（山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可）；如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体，则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。
即根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。
艾美捷能为您提供最全的抗不同种属的原装进口二抗，包括抗小鼠、大鼠、兔、山羊、绵羊、人、豚鼠、猪、马、牛、鸡、鸭等二抗。
【一抗的类别亚型】二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。
这通常是针对单克隆抗体而言。
多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白，因此相应的二抗就是抗IgG抗体。
其中单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述，如果你的一抗是小鼠IgM，那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM。
如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合，或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那么你可以选择抗IgG1的二抗，此种抗体在双标记实验中尤其适合。
在不清楚一抗为何种类/亚类的情况下，可以选用抗相应物种IgG。
艾美捷能为您提供通用的IgG（H+L）二抗，或者特异性只结合IgM的Anti IgM （mu）Antibody、IgA的Anti IgA （alpha-Antibody、IgE的Anti IgE （epsilon）Antibody等。
【二抗的种属来源】一般来说，不同的种属来源与二抗的质量没有必然的联系，来源于山羊的二抗与来源于驴的二抗在一般的实验里没有太多的差别。
免疫荧光抗的选择
免疫荧光抗的选择免疫组化/western blot/免病荧光如何进行二抗的选择2010-05-26 17:20:12| 分类：默认分类|字号订阅在讲二抗的选择之前，我们有必要对抗体（也就是免疫球蛋白）的基本结构等基本知识进行必要的了解。
免疫球蛋白，包括IgA, IgD, IgE, IgG 和IgM五种，其各自来源及特点如下：NameTypesDescriptionIgA2Found in mucosal areas, such as the gut, respiratory tract and urogenital tract, and prevents colonization by pathogens. Also found in saliva, tears, and breast milk.IgD1Functions mainly as an antigen receptor on B cells that have not been exposed to antigens. It has been shown to activate basophils and mast cells to produce antimicrobial factors.IgE1Binds to allergens and triggers histamine release from mast cells and basophils, and is involved in allergy. Also protects against parasitic worms.IgG4In its four forms, provides the majority of antibody-based immunity against invading pathogens. The only antibody capable of crossing the placenta to give passive immunity to fetus.IgM1Expressed on the surface of B cells and in a secreted form with very high avidity. Eliminates pathogens in the early stages of B cell mediated (humoral) immunity before there is sufficient IgG.其中，IgD, IgE, IgG是单体结构，IgA是二聚体结构，IgM是五聚体结构各种抗体共同的基本结构都包括2条轻链和2条重链，Fab和Fc段如图所示Schematic diagram of the basic unit of immunoglobulin (antibody)FabFcheavy chain (consist of VH, CH1, hinge, CH2 and CH3 regions: from N-term)light chain (consist of VL and CL regions: from N-term)antigen binding sitehinge regions(*) -S-S- mean disulfide bonds.通过以上的阅读，我们已对抗体的基本结构了解了，接下来我们便来谈谈如何选择二抗了。
如何选择荧光二抗
如何选择荧光二抗如何选择二抗--根据一抗种属及类型选择合适的二抗二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体，在免疫学反应中，经常需要针对试验选择不同的二抗，检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，同时在后继试验中也会有不同的检测方案，因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求，一般来说，选择合适的二抗需要从下面几个方面考虑：【一抗的种属来源】二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源，例如：如果你的一抗是小鼠源的单克隆抗体，二抗则选抗小鼠的二抗（山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可）；如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体，则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。
即根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。
抗不同种属的原装进口二抗，包括抗小鼠、大鼠、兔、山羊、绵羊、人、豚鼠、猪、马、牛、鸡、鸭等二抗。
【一抗的类别亚型】二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。
这通常是针对单克隆抗体而言。
多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白，因此相应的二抗就是抗IgG抗体。
其中单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述，如果你的一抗是小鼠IgM，那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM。
如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合，或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那么你可以选择抗IgG1的二抗，此种抗体在双标记实验中尤其适合。
在不清楚一抗为何种类/亚类的情况下，可以选用抗相应物种IgG。
通用的IgG（H+L）二抗，或者特异性只结合IgM的Anti IgM （mu）Antibody、IgA的Anti IgA （alpha-Antibody、IgE的Anti IgE （epsilon）Antibody等。
【二抗的种属来源】一般来说，不同的种属来源与二抗的质量没有必然的联系，来源于山羊的二抗与来源于驴的二抗在一般的实验里没有太多的差别。
Westernblot一抗和二抗的选择
Westernblot一抗和二抗的选择抗体分类：根据重链恒定区的血清学类型，可将抗体分为IgM，IgG，IgA，IgD，IgE 五类，它们的重链分别为mu, gamma, alpha, delta, epsilon链。
在上述每一类别中，按重链构造上的变异又可分为几个亚类，例如人的IgG可分为IgG1，IgG2，IgG3，IgG4四个亚类。
轻链分为两种类型，kappa链和lambda链，但每种抗体中只存在一种类型的轻链。
二抗：二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合的抗体，上面通常连有酶或荧光素等标签。
由于二抗所具备的优点使得其在免疫学实验中得以应用广泛，如western blot（通过与特异性抗体结合来鉴定蛋白质），ELISA（以耦联有酶的抗体或抗原为标记来检测特异性的蛋白质，尤其是相应的抗原或抗体），免疫组织化学（检测组织中的特异性抗原），免疫细胞化学（通过免疫学方法检测细胞的抗原组成），流式细胞术（通过检测激光所激发荧光来鉴定分离不同类型的细胞）及免疫沉淀（通过抗原与抗体的特异性结合作用来分离相应抗原）。
二抗针对某一特定物种（如小鼠）的所有抗体均具有特异性，因而使用标记的二抗可以免去对每一个一抗进行标记，大大节省了时间和费用；此外，一个一抗分子可以同时结合几个二抗分子，从而使信号大大增强，提高了实验灵敏度。
二，如何选择二抗——根据一抗种属及类型选择合适的二抗广义上是指专门和进行特异性反应和结合的抗体，在免疫学反应中，经常需要针对试验选择不同的二抗，**捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。
检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，同时在后继试验中也会有不同的检测方案，因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求，一般来说，选择合适的二抗需要从下面几个方面考虑：【一抗的种属来源】二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源，例如：如果你的一抗是小鼠源的单克隆抗体，二抗则选抗小鼠的二抗（山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可）；如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体，则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。
辣根过氧化物酶标记的山羊抗小鼠IgG(γ链特异性)
辣根过氧化物酶标记的山羊抗小鼠IgG (γ链特异性) Goat Anti-Mouse IgG (γ chain specific)/HRP
应用范围
● 酶联免疫吸附实验(ELISA)
● 荧光免疫吸附实验(FLISA)
● 免疫印迹(immunoblotting)
稀释比例
推荐稀释比例ELISA ：1:4000-1:8000，具体稀释比例请根据实验确定。
其他应用请根据具体实验确定最佳稀释度。
保存
HRP 标记的山羊抗小鼠IgG (γ chain specific)储存液含50%甘油和50%PBS ，pH7.4，无防腐剂。
保存于2-8°C ；若需长期保存，请置于-20°C 冰箱。
注意事项
试验中请穿着试验服并带手套做好防护工作。
请按实验室安全操作规范进行实验。
本试剂仅供科研使用，请勿用于临床诊断或其他治疗用途。
V14/03 产品编号 规格 产品简介
ANM02-3 100ul 辣根过氧化物酶标记抗体广泛应用于免疫学、免疫细胞化学、分子生
物学、病理学等领域。
该产品为辣根过氧化物酶标记的经亲和层析的
山羊抗小鼠IgG 抗血清。
经ELISA 实验验证其与小鼠
IgG 1,IgG 2a ,IgG 2b ,IgG 3反应，与人免疫球蛋白有微量交叉反应。
HisTag Antibody 产品使用说明书
His•Tag® 单克隆抗体试剂盒简介以下货号试剂和试剂盒均可参照此说明书操作：His•Tag® Monoclonal Antibody：100µg 货号70796-3，3µg 货号70796-4His•Tag AP Western Reagents：25 blots 货号70972-3His•Tag AP LumiBlot™ Reagents：25 blots 货号70973-3His•Tag HRP LumiBlot Reagents：25 blots 货号70974-3His•Tag单克隆抗体是一种小鼠单抗(IgG1)，用于检测Novagen表达载体及其它来源载体上编码表达的His•Tag序列。
本His•Tag单抗能够识别连续5个组氨酸残基(HHHHH)，且不受此序列旁侧氨基酸序列限制。
亲和力很高（达到Kd = 5×10–8–1×10–9M），能够非常专一而灵敏地检测His•Tag融合表达蛋白，常用浓度为0.1-0.2µg/ml。
His•Tag单抗可以与N-端，C-端或内部His•Tag序列结合。
His•Tag单抗还可以检测重组表达的marker（如Novagen的Perfect Protein™ 或Trail Mix™ Western Markers），使Western blot的结果带上精确的分子量内参。
采用His•Tag AP Western试剂盒可以用标准的比色法在Western blot中检测到2ng蛋白，或在斑点杂交中检测到0.5ng蛋白。
采用His•Tag AP或HRP LumiBlot试剂盒的化学发光法检测，灵敏度还可提高10倍。
本产品没有检出与细菌，酵母菌，昆虫或哺乳动物细胞的交叉反应。
储存His•Tag单抗以冻干粉形式提供，4℃下可稳定存放1年。
抗体经重悬后，4℃下可放置3个月，分装后冻存于-20℃可达6个月。
IP消除重链干扰山羊抗小鼠轻链二抗
IPKine山羊抗小鼠IgG轻链二抗，HRP标记（消除重链干扰）IPKine HRP AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG Light Chain在免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)和免疫共沉淀(co-Immunoprecipitation, c o-IP) 实验中，IP和WB的操作过程中通常会用到相同的一抗或同种属来源的一抗，这种情况下，如果使用常规的Anti-IgG（H+L）酶标二抗，WB实验中IP抗体变性后产生的重链（5 5kDa）和轻链（25kDa）都能够识别，而此非特异的信号往往会部分甚至完全掩盖目的蛋白的信号。
背景资料：IPKine是一系列新型的二抗分子，能有效解决IP-WB后的重链干扰问题。
在免疫沉淀（Immunoprecipitation， IP）和免疫共沉淀实验中，IP和WB的操作过程中通常会用到相同的一抗或同种属来源的一抗，这种情况下，WB实验中IP抗体变性后产生的重链和轻链都能够被接下来的二抗识别，而此非特异的信号往往会部分甚至完全掩盖目的蛋白的信号。
IPKine 系列二抗经过特别优化，不会与IgG重链分子的结合。
应用类型：WB（1:5000 - 1:100000）、ELISA（1:2000 - 1:50000） IHC（1:200 - 1:2000）免疫原：小鼠IgG来源宿主：山羊反应性：该IPKine山羊抗小鼠IgG轻链二抗，HRP标记（消除重链干扰）与小鼠IgG分子的轻链有特异性反应，经过特殊处理，与小鼠IgG重链分子几乎没有交叉反应。
保存建议：在-20℃稳定保存1年为了避免实验中重链干扰的问题，有二种解决方案。
一种是选择不同种属来源的一抗分别进行IP和WB实验，然后再选择无种属交叉反应的二抗进行WB实验；这种方案相对来说比较昂贵，需要买两个一抗和两个对应的二抗。
一种是在IP和WB实验中使用相同的抗体，如果目的条带在55kDa左右，可以通过选择与轻链特异性结合的二抗，来消除重链条带对目的蛋白检测的干扰。
山羊抗小鼠igg抗体的质量标准
山羊抗小鼠igg抗体的质量标准
山羊抗小鼠IgG抗体的质量标准是指该抗体在生产和质控过程中需要符合的一系列标准和要求，以确保其质量稳定和可靠性。
这些标准通常涵盖了抗体的纯度、活性、特异性、稳定性和安全性等方面。
首先，抗体的纯度是一个重要的指标，通常通过凝胶电泳、Western blot或者HPLC等技术来检测。
高纯度的抗体可以减少非特异性反应，提高实验结果的可靠性。
其次，抗体的活性也是质量标准中的关键指标，通常通过ELISA、免疫荧光等技术来检测。
活性合格的抗体能够有效地结合到特定的抗原上，发挥预期的生物学效应。
特异性是另一个重要的质量标准，即抗体只能与特定的抗原结合，而不与其他分子发生结合。
这通常通过Western blot、免疫组化等技术来检测。
此外，抗体的稳定性也是质量标准中需要考虑的因素。
抗体在储存和运输过程中需要保持稳定，不受温度、光照等因素的影响，
以确保其在实验中的可靠性和重复性。
最后，安全性也是质量标准中必须考虑的因素。
抗体生产过程
中需要符合相关的生物安全标准，确保抗体的使用不会对实验人员
和环境造成危害。
总的来说，山羊抗小鼠IgG抗体的质量标准涵盖了纯度、活性、特异性、稳定性和安全性等多个方面，确保抗体的质量稳定和可靠性。
这些标准的严格执行对于抗体的应用和实验结果的可靠性具有
重要意义。
高原低氧环境下小鼠肺组织细胞自噬及凋亡情况观察
高原低氧环境下小鼠肺组织细胞自噬及凋亡情况观察王昱欢1，马晓峰2，陈颖2，永胜1，杨惠11 青海大学医学院，西宁810016；2 青海省心脑血管病专科医院心血管病一科摘要：目的 探讨高海拔低氧诱导对C57BL /6小鼠肺组织细胞自噬及凋亡的影响。
方法 选取8周龄C57BL /6小鼠30只，分别饲养于西安市雁塔区（对照组）及青海省果洛藏族自治州（高原低氧组），连续饲养21 d 后处死并采集肺脏组织。
透射电镜下观察肺组织显微结构，记录自噬体数量；免疫组化法检测肺组织自噬相关因子Beclin -1、LC3B 、p62以及凋亡相关因子Bax 、Bcl -2阳性信号表达情况，Western blotting 法及实时荧光定量PCR 法检测Beclin -1、LC3B 、p62、Bax 、Bcl -2蛋白及mRNA 表达。
结果 高原低氧组与对照组自噬体数量分别为（4.80 ± 0.84）、（1.80 ± 0.45）个，两组比较P <0.05。
与对照组比较，高原低氧组肺组织Beclin -1、Bcl -2蛋白阳性信号表达增强，p62、Bax 蛋白阳性信号表达减弱（P 均<0.05），LC3B 蛋白阳性信号表达无明显变化（P >0.05）。
与对照组比较，高原低氧组肺组织Beclin -1蛋白相对表达量及LC3BⅡ/Ⅰ、Bcl -2 /Bax 均升高，p62蛋白相对表达量降低（P 均<0.05）。
与对照组比较，高原低氧组肺组织Beclin -1、LC3B mRNA 相对表达量及Bcl -2 mRNA /Bax mRNA 均升高，p62 mRNA 相对表达量降低（P 均<0.05）。
结论 高原低氧环境下的小鼠肺组织自噬及抗凋亡能力均存在一定程度的增强。
关键词：高原环境；低氧环境；细胞自噬；细胞凋亡；肺损伤doi ：10.3969/j.issn.1002-266X.2023.23.009中图分类号：R392.12 文献标志码：A 文章编号：1002-266X （2023）23-0039-04Autophagy and apoptosis of lung tissues in mice under high altitude hypoxia environment WANG Yuhuan 1， MA Xiaofeng ， CHEN Ying ， YONG Sheng ， YANG Hui 1 Medical College of Qinghai University ， Xining 810016， ChinaAbstract ： Objective To investigate the effects of high altitude hypoxia on autophagy and apoptosis in lung tissuesof C57BL /6 mice. Methods Thirty 8-week -old C57BL /6 mice were selected and housed in Yanta District ， Xi'an City（control group ） and Goluo Tibetan Autonomous Prefecture ， Qinghai Province （plateau hypoxia group ）， respectively ， and they were executed and their lung tissues were collected after 21 d of continuous feeding. The microstructure of lung tissue was observed under transmission electron microscopy and the number of autophagosomes was recorded ； the expression lev⁃els of autophagy and apoptosis factors Beclin -1， LC3B ， p62， Bax and Bcl -2 positive signals in the lung tissues were detect⁃ed by immunohistochemistry ， and Beclin -1， LC3B ， p62， Bax and Bcl -2 protein and mRNA expression levels were detect⁃ed by Western blotting and real -time fluorescence quantitative PCR. Results The number of autophagosomes in the pla⁃teau hypoxia group and the control group were 4.80±0.84 and 1.80±0.45， respectively ， with statistically significant dif⁃ference between the two groups （P <0.05）. Compared with the control group ， the expression of Beclin -1 and Bcl -2 protein positive signals in the lung tissues of the plateau hypoxia group was enhanced ， and the expression of p62 and Bax positive signals was diminished （both P <0.05）， and there was no significant change in LC3B positive signal expression （P >0.05）. Compared with the control group ， the relative expression of Beclin -1 protein ， LC3B Ⅱ/Ⅰ and Bcl -2/Bax in⁃creased and the relative expression of p62 protein decreased in the plateau hypoxia group （all P <0.05）. Compared with the control group ， the relative expression of Beclin -1， LC3B and Bcl -2/Bax mRNA in the lung tissue of the plateau hypox⁃ia group increased ， and the relative expression of p62 mRNA decreased （both P <0.05）. Conclusions Autophagy andanti -apoptotic capacity of mouse lung tissues were enhanced to a certain extent in the high altitude hypoxic environment.Key words ： high altitude ； hypoxia ； autophagy ； apoptosis ； lung injury· 基础研究 ·基金项目：国家自然科学基金资助项目（82060295）；青海大学医学院中青年科研基金项目（2020-kyy -7）。
115-035-164 jackson 说明书
应用类型：WB（1:10000 - 1:200000）、ELISA（1:5000 - 1:100000） IHC（1:500 - 1:5000） 免疫原：小鼠 IgG（1+2a+2b+3） 来源宿主： 山羊 反应性：该山羊抗小鼠二抗只与小鼠 IgG1、IgG2a、IgG2b 和 IgG3 的 Fc 片段有特异性反应，但是与小鼠免疫球蛋白的 Fab 片段无交叉 反应。该二抗与血清内非免疫球蛋白和 IgM 无交叉反应。通过血清 吸附处理，其与人、牛、兔血清内蛋白包括免疫球蛋白）的交叉反 应降到最低，但可能与除此以外其它种属的免疫球蛋白有交叉反应。 保存建议： 冻干粉保存在 2-8°C，准备用时，根据指示的体积加入 三蒸水，产品在 2-8°C 条件下，未稀释的液体保质期为 6 周，每天 准备新鲜的工作液。如果溶解后想延长保存期，加入等体积的甘油 （ACS 级别或更好的）使终浓度为 50%，保存在-20°C。另外也可以 在没有甘油时直接分装，并冰冻在-70°C 或以下，避免反复冻融。 保质期为收到货物后至少 1 年，合适的保存方式可以延长保质期。 其他：Jackson ImmunoResearch 公司是美国著名的二抗及相关免疫 产品生产厂商，其产品包括各种纯化和标记的二抗（AMCA、Cy2、FITC、 Cy3、TRITC、RRX、TR、 Cy5、长臂生物素、辣根过氧化物酶、碱性 ***酸酶标记）、免疫球蛋白、血清等。由于其产品效价高、种类全、 价格实惠，长期以来深受全球广大科研用户的喜爱，一直享有二抗 金标准的赞誉。作为多家知名品牌的中国代理或区域代理，艾美捷 向您推荐 Jackson 的各种标记的二抗产品，包括 HRP 及 AP 酶标二抗、
FITC/Rhodamine /Cy 系列/Dቤተ መጻሕፍቲ ባይዱLight 系列等荧光二抗等均为原装进包 装，高效敏感，能为您提供最值得信赖的抗体产品保障和售后服务。
GoatAnti-MouseIgG产品使用说明书
Goat Anti-Mouse IgG产品使用说明书
技术背景： NanoGen TM提供的多克隆抗体主要来自于宿主动物（BALB/c小鼠、家兔、山羊）抗血清、鸡卵黄等，单克隆抗体主要来自于小鼠杂交瘤克隆株。
本产品为以小鼠IgG 作为免疫原，制备山羊抗血清，经阴离子交换柱纯化，去除羊血清中其他非特异蛋白，特异识别小鼠IgG的抗体，酶类如碱磷酶（AP）、辣根过氧化物酶（HRP）及其衍生物，荧光染料如荧光素（FITC）、罗丹明及其衍生物，TRITC，青色素（Cy3），藻红蛋白（R-PE）标记后，可用于科学研究。
与人IgG、山羊IgG和兔IgG无交叉反应。
二抗克隆性：多克隆
二抗免疫原：小鼠IgG
二抗宿主动物：山羊
应用：免疫组化、免疫荧光、蛋白印记、细胞相关分析实验、流式细胞术。
产品推荐使用浓度：Western blotting/1:5000-1:10000
Enzyme immunoassays/1:1000-1:5000
具体实验过程中，应根据不同的使用用途选择IgG最适工作浓度。
保存说明：自生产之日起，-20℃可保存1年，经常使用可置4℃；为了更好保存、使用试剂，使用前后请适当离心（盖帽）；禁止反复冻溶。
备注：本产品仅用于科研，不能用于人体实验或人体治疗。
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Abbkine, Inc • Redlands, CA • USA •
Not for further distribution without written consent. Copyright © Abbkine, Inc. AP, Goat Anti-Mouse IgG
# A21110
Product Information
Product Name: AP Conjugated Goat Anti-Mouse IgG(H+L)
Catalog Number: A21110 Lot Number: Refer to vial Formulation: Liquid Size: 100ul/500ul Storage: Store at -20°C. Avoid repeated
freeze / thaw cycles. Note: Contain sodium azide.
Background: Abbkine's secondary antibodies are available conjugated to enzyme, biotin or fluorophore for use in a variety of antibody-based applications including Western Blot, ImmunoHistoChemistry, ImmunoFluorescence, Flow Cytometry and ELISA. We offer high quality secondary antibodies from goat, rabbit and donkey sources for your each application. Serum adsorbed secondary antibodies are also available and are recommended for use with immunoglobulin-rich samples.
Purity: Affinity purified using solid phase Mouse IgG (H&L) with finally > 95% purity based on SDS-PAGE.
Specificity: The antibody reacts with whole molecule mouse IgG. It also reacts with heavy chains of mouse IgG, and light chains of all other mouse immunoglobulins. It has no reactivity on non-immunoglobulin serum proteins, while it may cross-react with immunoglobulins from other species.
Application Notes: Optimal working dilutions should be determined experimentally by the investigator. Suggested starting dilutions are as follows: WB (1:1,000-1:10,000), IHC (1:500-1:1,000) and ELISA (1:1,000-1:10,000).
Storage Buffer: 30 mM Triethanolamine, 5 mM Magnesium Chloride, 0.1 mM Zinc Chloride, 50% Glycerol pH 7.4.
Stabilizer: 1% Bovine Serum Albumin (IgG and Protease Free).
Preservative: 0.05% (w/v) Sodium Azide.
Storage Instructions: Stable for one year at -20°C from date of shipment. For maximum recovery of product, centrifuge the original vial after thawing and prior to removing the cap. Aliquot to avoid repeated freezing and thawing.
Note: The product listed herein is for research use only and is not intended for use in human or clinical diagnosis. Suggested applications of our products are not recommendations to use our products in violation of any patent or as a license. We cannot be responsible for patent infringements or other violations that may occur with the use of this product.。