pDEX-KG质粒图谱
质粒图谱查询方法
3.google scholar: / 有些质粒是经过改造的，所以通过上述方法不能查询到相应信息。这时，可以在google scholar中输入质粒名称，可以直观地看哪些学者在何文章中使用了该质粒，从而可了解到质粒的来源;或者籍此向作者咨询或索取。 4.尝试从各大生物公司，例如invitrogen网站查询. 5. 这个网站收录了大量图谱： http://www.embl-hamburg.de/~geerlof/webPP/vectordb/bact_vectors/table.html
Pe
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file:///D|/中科院/Selective Serotonin Transporter/质粒信息/质粒图谱查询方法.txt
file:///D|/中科院/Selective Serotonin Transporter/质粒信息/质粒图谱查询方法.txt（第 2／6 页）[2011/8/4 18:39:52]
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0099--pGE-1—Stratagene--RNAi载体 0100--pSUPER.p53—OligoEngine--RNAi载体 0101--palter-ex1--promega 0102--pACYCDuet-1--NOVAGEN 0103--pEX lox(+) Vector—NOVAGEN--原核表达 0104--质粒名称：pBACgus-8 Transfer Plasmid—NOVAGEN--CHUANSUO 0105--pSCREEN?-1b(+) Vector Map—novagen--筛选 0106--PGEX-2T--BD Co--pDsRed2--Clontech 0107--pbgal-Basic—Clontech--mammalian reporter vector 0108—pBI—Clontech--express two genes of interest from a bidirectional tet-responsive promoter 0109--质粒名称：pbgal-Control—Clontech--mammalian reporter vector 0110-- pGEX-5X-1--原核表达 0111--pBI-EGFP—Clontech--pBI-EGFP-- coexpress 0112--pBI-G—Clontech--pBI-G--express b-galactosidase 0113--pBI-GL—Clontech--pBI-GL --express luciferase and b-galactosidase 0114--pCMS-EGFP—Clontech--mammalian expression vector 0115--pd2EYFP-1—Clontech--启动子测定 0116--质粒名称--pd2EYFP-N1—Clontech--融合表达 0117--pd4EGFP-Bid—Clontech--融合表达 Bid 0118--pDNR-CMV—Clontech--pDNR-CMV 0119--pDNR-EGFP Vector—Clontech 0120--pDNR-LacZ –Clontech 0121--pECFP-Endo—Clontech--真核表达0122--pECFP-ER—Clontech--真核表达0123--pEGFP-Actin—Clontech--真核表达0124--pGAD GH--Clontech--酵母表达 0125--pGADT7-Rec –Clontech--酵母表达 0126--pGADT7-RecAB—Clontech--酵母表达 0127--pGADT7-Rec2—Clontech--酵母表达 0128--pGBKT7—Clontech--酵母表达 0129--pHAT 10/11/12—Clontech 0130--pHAT20—Clontech 0131—pHygEGFP—Clontech 0132—pLacZi—Clontech 0133—pM—Clontech--pM is used to generate a fusion of the GAL4 DNA-BD 0134--pPKCa-EGFP—Clontech 0135--pPKCb-EGFP—Clontec 0136--pSIREN-DNR Vector—Clontech--RNAi 0137--pSIREN-DNR-DsRed-Express Vector—Clontech--RNAi 0138--pSIREN-RetroQ—Clontech--RNAi 0139--pIRES-EYFP—Clontech--RNAi 0140--pSRE-Luc—Clontech--RNAi 0141--pTK-neo—novagen--原核表达 0142--pZsGreen Vector—Clontech--pZsGreen is a pUC19-derived prokaryotic expression vector 0143--pTandem-1—novagen--原核表达 0144--pZsGreen1-C1Vector—Clontech----真核表达 0145--质粒名称：M13mp18—novagen--原核表达 0146--pZsGreen1-DR Vector—Clontech--真核表达 0147--PZsGreen1-N1 Vector—Clontech --真核表达 0148--T7Select415-1b—novagen----真核表达 0149--pZsYellow Vector—Clontech --真核表达 0150—pTimer—Clontech --真核表达 0151--pTA-Luc—Clontech --真核表达 0152--pTAL-Luc—Clontech --真核表达 0153--pTA-SEAP—Clontech --真核表达 0154--pTAL-SEAP—Clontech --真核表达 0155--pTet-On—Clontech --真核表达 0156--pTet-Off—Clontech --真核表达 0157--pTet-ATF—Clontech --真核表达 0158--pTet-CREB—Clontech --真核表达
质粒图谱大全之欧阳引擎创编
（转载）欧阳引擎（2021.01.01）一.九种表达载体Pllp-OmpA,pllp-STII,pMBP-P,pMBP-C,pET-GST,pET-Trx,pET-His,pET-CKS,pET-DsbA 二.克隆载体pTZ19RDNApUC57DNAPMD18TPQE30pUC18pUC19pTrcHisApTrxFuspRSET-ApRSET-BpVAX1PBR322pbv220pBluescriptIIKS( )L4440pCAMBIA-1301pMAL-p2XpGD926三.PET系列表达载体ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETDsbFusionSystems39 band40bProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETExpressionSystem33 bProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETExpressionSystems ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETExpressionSystemspl usCompetentCellsProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETGSTFusionSystems4 1and42ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETNusAFusionSystems 43.1and44ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETVectorDNA ProteinPurification?PurificationSystems?Strep?TactinResinsandPuri ficationKits四.PGEX系列表达载体TEcoR?pGEX-1I/BAP pGEX-2TpGEX-2TK pGEX-3X pGEX-4T-1 pGEX-4T-2 pGEX-4T-3 pGEX-5X-1 pGEX-5X-2 pGEX-5X-3 pGEX-6P-1 pGEX-6P-2 pGEX-6P-3五.PTYBsystem PTYB1PTYB2PTYB11PTYB12六.真核表达载体pCDNA3.1(-) pCDNA3.1( ) pPICZalphaA pGAPZαA PYES2.0pBI121pEGFP-N1pEGFP-C1pPIC9KpPIC3.5K如何阅读分析质粒图谱载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒DNA是一种新的非病毒转基因载体。
质粒大全及质粒图谱
一.九种表达载体Pllp-OmpA, pllp-STII, pMBP-P, pMBP-C,pET-GST, pET-Trx, pET-His, pET-CKS, pET-DsbA二.克隆载体pTZ19R DNApUC57 DNAPMD18TPQE30pUC18pUC19pTrcHisApTrxFuspRSET-ApRSET-BpVAX1PBR322pbv220pBluescript II KS (+)L4440pCAMBIA-1301pMAL-p2XpGD926三.PET系列表达载体Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET Dsb Fusion Systems 39b and 40b Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET Expression System 33bProtein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET Expression SystemsProtein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET Expression Systems plus Competent CellsProtein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET GST Fusion Systems 41 and 42 Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET NusA Fusion Systems 43.1 and 44Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET Vector DNAProtein Purification ? Purification Systems ? Strep?Tactin Resins and Purification Kits四.PGEX系列表达载体T EcoR?pGEX-1 I/BAPpGEX-2TpGEX-2TKpGEX-3XpGEX-4T-1pGEX-4T-2pGEX-4T-3pGEX-5X-1pGEX-5X-2pGEX-5X-3pGEX-6P-1pGEX-6P-2pGEX-6P-3五.PTYB systemPTYB1PTYB2PTYB11PTYB12六.真核表达载体pCDNA3.1(-)pCDNA3.1(+)pPICZ alpha ApGAPZαAPYES2.0pBI121pEGFP-N1pEGFP-C1pPIC9KpPIC3.5K如何阅读分析质粒图谱载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒DNA是一种新的非病毒转基因载体。
质粒图谱
)质粒图谱登记号：00012)质粒名称：pIRES3)来源：BD Co4)用途：真核双表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：7)联系方式：PM)质粒图谱登记号：00022)质粒名称：pECFP-C13)来源：BD Co4)用途：检测真核表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：7)联系方式：pm1)质粒图谱登记号：00032)质粒名称：pShuttle3)来源：4)用途：5)是否可以提供更详细资料：6)是否可以共享：7)联系方式：2)pShuttle MCS很多人用pEGFP-C1，我也来发一个)质粒图谱登记号：00042)质粒名称：pSBR322、pUC183)来源：4)用途：5)是否可以提供更详细资料：6)是否可以共享：7)联系方式：1)质粒图谱登记号：00052)质粒名称：pcDNA3.1(+)/CAT3)来源：invitrogen4)用途：真核表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：无偿7)联系方式：PM1)质粒图谱登记号：00062)质粒名称：pQEx3)来源：Qiagen4)用途：原核表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：交换7)联系方式：PM2)1)质粒图谱登记号：00072)质粒名称：pIVEX2.33)来源：Rocho4)用途：体外转录翻译5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：交换7)联系方式：PM质粒图谱登记号：0008质粒名称：pIRES-EGFP来源：用途：是否可以提供更详细资料：是否可以共享：否联系方式：1)质粒图谱登记号：00092)质粒名称：pET-28a（+）3)来源：Novagen4)用途：原核表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：交换7)联系方式：PM1)质粒图谱登记号：00112)质粒名称：pET-32a(+)3)来源：novagen4)用途：原核表达5)是否可以提供更详细资料：6)是否可以共享：7)联系方式：pm1)质粒图谱登记号：00132)质粒名称：pcDNA3.1/Zeo (+)3)来源：invitrogen4)用途：原核表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：交换7)联系方式：PM)质粒图谱登记号：00132)质粒名称：pEGFP-N33)来源：clontech4)用途：真核表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：交换7)联系方式：PM)质粒图谱登记号：00142)质粒名称：pcDNA33)来源：invitrogen4)用途：真核表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：交换7)联系方式：PM)质粒图谱登记号：00152)质粒名称：pfastbac13)来源：invitrogene4)用途：昆虫表达5)是否可以提供更详细资料：不可以6)是否可以共享：不可以7)联系方式：PM)质粒图谱登记号：00162)质粒名称：pEGFP-C33)来源：clontech4)用途：真核表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：交换7)联系方式：PMwangjun2002274 edited on 2004-06-22 00:041)质粒图谱登记号：00172)质粒名称：pSecTag23)来源：Invitrogen4)用途：真核表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：交换7)联系方式：PM)1质粒图谱登记号：00192)质粒名称：pET20b3)来源：NOVAGEN4)用途：原核表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：交换7)联系方式：PM1)质粒图谱登记号：00222)质粒名称：pThioHisA3)来源：invitrogen4)用途：原核表达5)是否可以提供更详细资料：4.365kb , HP-thioredoxin fusion proteinexpressionvector, trc promoter, Ampr, a EK cleavage site lies between HP-thioredoxin and MCS宿主菌TOP10（基因型为：F-mcrA △（mrr-hsd RMS-mcrBC）Ф80 lacZ M15 △lacX74 deoR recAl araD139 △（ara-leu）7697 galU galK rpsL endAl nupG6)是否可以共享：交换或其它7)联系方式：PM2)3)1)质粒图谱登记号：00242)质粒名称：pcDNA3.1-Myc-His-A-3)来源：invitrogen4)用途：真核核表达4))质粒图谱登记号：00252)质粒名称：pSUPER.neo3)来源：4)用途：siRNA5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：交换7)联系方式：PM)质粒图谱登记号：00312)质粒名称：pSilencer1.0-siRNA3)来源：Ambion4)用途：RNAi5)是否可以提供更详细资料：/techlib/Documents.html?fkResSxn=7&fkSub Sxn=236)是否可以共享：实验结束后，可提供含shRNA模板的质粒7)联系方式：pm5) )质粒图谱登记号：00322)质粒名称：pSilencer2.0-U6siRNA 3)来源：Ambion4)用途：RNAi ，与1.0相比，可以建立稳转株5)更详细资料：/techlib/prot/fm_7209.pdf 6)是否可以共享：交换 7)联系方式：pm6)会员名：mlluoE-mail：*************可提供试验资源名称和简要介绍：pSilencer 3.1-H1 neo Vector，是Ambion公司目前最高版本的shRNA 载体，为扩增此载体我已插入目的片段，如有战友需要，将此片段双酶切再连上自己的片段即可。
教你如何阅读质粒图谱
一、一个合格质粒的组成要素复制起始位点Ori，即控制复制起始的位点。
原核生物dna 分子中只有一个复制起始点。
而真核生物dna 分子有多个复制起始位点。
抗生素抗性基因：可以便于加以检测，如Amp+ ，kan+ 多l 克隆位点：mcs 克隆携带外源基因片段 P/E：启动子/增强子 Terms：终止信号加poly（A）信号：可以起到稳定mrna 作用二、如何阅读质粒图谱第一步：首先看Ori 的位置，了解质粒的类型（原核/真核/穿梭质粒） Ori 的箭头指复制方向，其他元件标注的箭头多指转录方向（正向）。
第二步：再看筛选标记，如抗性，决定使用什么筛选标记：（1）Ampr：水解β -内酰胺环，解除氨苄的毒性。
（2）tetr ：可以阻止四环素进入细胞。
（3）camr：生成氯霉素羟乙酰基衍生物，使之失去毒性。
（4）neor（kanr）：氨基糖苷磷酸转移酶，使G418（卡那霉素衍生物）失活。
（5）hygr：使潮霉素β失活。
第三步：看多克隆位点（mcs）。
它具有多个限制酶的单一切点，便于外源基因的插入。
如果在这些位点外有外源基因的插入，会导致某种标志基因的失活，而便于筛选。
决定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。
第四步：再看外源 dna 插入片段大小。
质粒一般只能容纳小于10Kb 的外源dna 片段。
一般来说，外源dna 片段越长，越难插入，越不稳定，转化效率越低。
第五步：是否含有表达系统元件，即启动子－核糖体结合位点－克隆位点－转录终止信号。
这是用来区别克隆载体与表达载体。
克隆载体中加入一些与表达调控有关的元件即成为表达载体。
选用那种载体，还是要以实验目的为准绳。
相关概念：启动子－核糖体结合位点－克隆位点－转录终止信号启动子－促进DNA 转录的DNA 顺序，这个DNA 区域常在基因或操纵子编码顺序的上游，是DNA 分子上可以与rnapol 特异性结合并使之开始转录的部位，但启动子本身不被转录。
增强子/沉默子－为真核 l 基因组（包括真核病毒基因组）中的一种具有增强邻近基因转录过程的调控顺序。
质粒图谱大全
（转载）一. 九种表达载体Pllp-OmpA, pllp-STII, pMBP-P, pMBP-C,pET-GST, pET-Trx, pET-His, pET-CKS, pET-DsbA二. 克隆载体pTZ19RDNApUC57DNAPMD18TPQE30pUC18pUC19pTrcHisApTrxFuspRSET-ApRSET-BpVAX1PBR322pbv220pBluescriptIIKS( )L4440pCAMBIA-1301pMAL-p2XpGD926三.PET 系列表达载体ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETDsbFusionSystems39band40b ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETExpressionSystem33b ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETExpressionSystems ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETExpressionSystemsplusCompetentCells ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETGSTFusionSystems41and42 ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETNusAFusionSystems43.1and44 ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETVectorDNAProteinPurification?PurificationSystems?Strep?TactinResinsandPurificationKits四.PGEX 系列表达载体TEcoR?pGEX-1I/BAPpGEX-2TpGEX-2TKpGEX-3XpGEX-4T-1pGEX-4T-2pGEX-4T-3pGEX-5X-1pGEX-5X-2pGEX-5X-3pGEX-6P-1pGEX-6P-2pGEX-6P-3五.PTYBsystemPTYB1PTYB2PTYB11PTYB12六. 真核表达载体pCDNA3.1(-)pCDNA3.1( )pPICZalphaApGAPZα APYES2.0pBI121pEGFP-N1pEGFP-C1pPIC9KpPIC3.5K如何阅读分析质粒图谱载体主要有病毒和非病毒两大类, 其中质粒DNA是一种新的非病毒转基因载体。
pGEX质粒图谱
pGEX-1λT (27-4805-01)pGEX-6P-1 (27-4597-01)EcoR I Sma I Sal I Xho I Not IBamH I PreScission ™ ProteaseLeu Glu Val Leu Phe Gln Gly Pro Leu Gly Ser Pro Glu Phe Pro Gly Arg Leu Glu Arg Pro HisCTG GAA GTT CTG TTC CAG GGG CCC CTG GGA TCC CCG GAA TTC CCG GGT CGA CTC GAG CGG CCG CAT↓pGEX-6P-2 (27-4598-01)BamH I PreScission ™ ProteaseLeu Glu Val Leu Phe Gln Gly Pro Leu Gly Ser Pro Gly Ile Pro Gly Ser Thr Arg Ala Ala Ala SerCTG GAA GTT CTG TTC CAG GGG CCC CTG GGA TCC CCA GGA ATT CCC GGG TCG ACT CGA GCG GCC GCA TCG↓EcoR I Sal I Xho INot I pGEX-6P-3 (27-4599-01)BamH IPreScission ™ ProteaseLeu Glu Val Leu Phe Gln Gly Pro Leu Gly Ser Pro Asn Ser Arg Val Asp Ser Ser Gly ArgCTG GAA GTT CTG TTC CAG GGG CCC CTG GGA TCC CCG AAT TCC CGG GTC GAC TCG AGC GGC CGC↓EcoR I Sma I Sal I Xho I Not I BamH IEcoR I Sma I Sal I Xho I Not I BamH I EcoR I Sma I Sal I Xho I Not IBamH I EcoR I Sma I Sal I Xho I Not IBamH I EcoR I Sma I Sal I Xho I Not IBamH I EcoR I Sma I Sal I Xho INot I BamH I EcoR I Sma I Sal I Not IEcoR I CTG GTT CCG CGT GGA TCC CCG GAA TTC ATC GTG ACT GAC TGA CGABamH ILeu Val Pro Arg Gly Ser Pro Glu Phe Ile Val Thr AspThrombinStop codons ↓pGEX~4900 bppBR322oriBal I BspM IPtac g lu ta thi on e S -t r a n s f e r as eA mp ra c Iq Nar I EcoR VBssH IIBstE IIMlu IApa ITth111 IAat IIPst Ip4.5AlwN IpSj10 Bam7Stop7∆pGEX-4T-2 (27-4581-01)pGEX-5X-1 (27-4584-01)pGEX-5X-2 (27-4585-01)pGEX-5X-3 (27-4586-01)pGEX-4T-1 (27-4580-01)pGEX-4T-3 (27-4583-01)pGEX-3X (27-4803-01)pGEX-2TK (27-4587-01)Leu Val Pr o Ar g Gly Ser Pr o Gly Ile Pr o Gly Ser Thr Ar g Ala Ala Ala SerCTG GTT CCG CGT GGA TCC CCA GGA ATT CCC GGG TCG ACT CGA GCG GCC GCA TCG TGAStop codon Ile Glu Gly Arg Gly Ile Pro Glu Phe Pro Gly Arg Leu Glu Arg Pro His Arg AspATC GAA GGT CGT GGG ATC CCC GAA TTC CCG GGT CGA CTC GAG CGG CCG CAT CGT GAC TGAStop codons Ile Glu Gly Arg Gly Ile Pro Gly Ile Pro Gly Ser Thr Arg Ala Ala Ala SerATC GAA GGT CGT GGG ATC CCC GGA ATT CCC GGG TCG ACT CGA GCG GCC GCA TCG TGAStop codon Ile Glu Gly Arg Gly Ile Pro Arg Asn Ser Arg Val Asp Ser Ser Gly Arg Ile Val Thr AspATC GAA GGT CGT GGG ATC CCC AGG AAT TCC CGG GTC GAC TCG AGC GGC CGC ATC GTG ACT GAC TGAStop codons Leu Val Pro Arg Gly Ser Pro Glu Phe Pro Gly Arg Leu Glu Arg Pro His Arg AspCTG GTT CCG CGT GGA TCC CCG GAA TTC CCG GGT CGA CTC GAG CGG CCG CAT CGT GAC TGAStop codons Leu Val Pro Arg Gly Ser Pro Asn Ser Arg Val Asp Ser Ser Gly Arg Ile Val Thr AspCTG GTT CCG CGT GGA TCC CCG AAT TCC CGG GTC GAC TCG AGC GGC CGC ATC GTG ACT GAC TGAStop codons ATC GAA GGT CGT GGG ATC CCC GGG AAT TCA TCG TGA CTG ACT GACIle Glu Gly Arg Gly Ile Pro Gly Asn Ser SerStop codons Leu Val Pro Arg Gly Ser Arg Arg Ala Ser ValKinaseCTG GTT CCG CGT GGA TCT CGT CGT GCA TCT GTT GGA TCC CCG GGA ATT CAT CGT GAC TGAStop codons Thrombin↓Thrombin↓Thrombin↓Thrombin↓Factor Xa↓Factor Xa↓Factor Xa↓Factor Xa↓EcoR IBamH I Sma I EcoR IBamH I Sma I pGEX-2T (27-4801-01)CTG GTT CCG CGT GGA TCC CCG GGA ATT CAT CGT GAC TGA CTG ACGLeu Val Pro Arg Gly Ser Pro Gly Ile His Arg AspStop codons EcoR IThrombin↓BamH I Sma I。
质粒图谱阅读.pptx
*2-direction insertion
双向插入
*self-reconnection
自身环化
*no easy way of retrieving
the insert
重新筛选插入的片断困难
9
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A1 A
2 vector
B
2 A
vector 1
B
平齐末端连接时，插入的方向是 随机的，称为双向插入。会给后续 的工作造成很多麻烦。
原理 目的基因编码的蛋白质作为抗原，用特异
性抗体与之反应，再根据颜色等变化，筛选出菌
落
。
方法 在琼脂平板上的菌落，转移到尼龙滤膜上，
若某菌落带有目的基因，并可表达该目的基因所
编码的蛋白质，则加入该蛋白质的特异抗体，可
与该菌落结合，附着在滤膜上，不会被洗掉。该
抗体可携带酶或荧光，易于检测。
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完整的LacZ基因内，经过改造加入了多克隆位点，但并不影响LacZ基因的 表达。
当质粒转化细胞后，完整的LacZ基因表达产物与细菌的有关基因表达产物 共同组成有功能的半乳糖苷酶，该酶把无色的X-gal切割成半乳糖和蓝色的5－溴 －4－氯－靛蓝，使得菌落呈现蓝色。
some cells (actually, very few) become
transformed: they acquire recombinant vector
Pseudo-positive
DNA.
positive
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第四节 重组子的筛选与鉴定
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质粒图谱大全
（转载）一.九种表达载体Pllp-OmpA, pllp-STII, pMBP-P, pMBP-C,pET-GST, pET-Trx, pET-His, pET-CKS, pET-DsbA二.克隆载体pTZ19RDNApUC57DNAPMD18TPQE30pUC18pUC19pTrcHisApTrxFuspRSET-ApRSET-BpVAX1PBR322pbv220pBluescriptIIKS( )L4440pCAMBIA-1301pMAL-p2XpGD926三.PET系列表达载体ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETDsbFusionSystems39band40b ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETExpressionSystem33b ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETExpressionSystems ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETExpressionSystemsplusCompetentCells ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETGSTFusionSystems41and42 ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETNusAFusionSystems43.1and44 ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETVectorDNAProteinPurification?PurificationSystems?Strep?TactinResinsandPurificationKits四.PGEX系列表达载体TEcoR?pGEX-1I/BAPpGEX-2TpGEX-2TKpGEX-3XpGEX-4T-1pGEX-4T-2pGEX-4T-3pGEX-5X-1pGEX-5X-2pGEX-5X-3pGEX-6P-1pGEX-6P-2pGEX-6P-3五.PTYBsystemPTYB1PTYB2PTYB11PTYB12六.真核表达载体pCDNA3.1(-)pCDNA3.1( )pPICZalphaApGAPZαAPYES2.0pBI121pEGFP-N1pEGFP-C1pPIC9KpPIC3.5K如何阅读分析质粒图谱载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒DNA是一种新的非病毒转基因载体。
实验新人必读（七）：一文学会读懂和查找质粒图谱
实验新⼈必读（七）：⼀⽂学会读懂和查找质粒图谱作者：解螺旋.⼦⾮鱼如需转载请注明来源：解螺旋·医⽣科研助⼿导语质粒图谱即为质粒DNA序列的物理图谱，包含了质粒⼤⼩、筛选标记、克隆位点、转录及翻译元件等信息。
尽管它为我们选择质粒、了解质粒特点及应⽤提供了重要依据，然⽽我们常常要为图谱中丰富信息所困扰。
那么，本⽂就为你拨云见⽇，让你快速掌握质粒图谱。
三步法看懂质粒图谱Step 1:先了解质粒的基本组成元素。
1）复制起始点Ori。
该位点决定了质粒的宿主及质粒的拷贝数，它是质粒中⼀段特定序列，富含AT和重复序列。
Tips：图谱上只有⼀个Ori，表⽰质粒是原核克隆表达质粒；有两个Ori，则表⽰该质粒是，穿梭质粒，即可在原核也可在真核中复制。
2）抗性筛选基因。
图谱中Kan/tet就是抗⽣素抗性基因，⽅便后续通过抗⽣素筛选阳性克隆。
特点就是单词最后会以⼤写R或上标r结束。
Tips：⼀般克隆载体只有⼀种抗性筛选标记，部分表达载体及穿梭质粒具有两种抗性筛选标记。
3）多克隆位点（MCS），即⼀系列限制性内切酶酶切位点，是外源DNA插⼊位点，⼀般可通过酶切/连接⽅式将外源DNA插⼊质粒，外源DNA⼀般⼩于10kb，⽽⽚段越长，转化效率越低。
Tips: ⼀般位于转录启动和转录终⽌信号之间；所包含的限制性内切酶位点数量和组成因载体不同会有所差异，且其中的酶切位点在质粒中为单⼀的酶切位点；同时在使⽤时需注意质粒载体与外源DNA酶切位点的兼容性问题4）荧光标记或蛋⽩标签序列。
蛋⽩纯化标签蛋⽩：His-Tag，GST-Tag等；蛋⽩检测标签蛋⽩：Myc-Tag，Flag-Tag，HA-Tag等；荧光蛋⽩表达标签：GFP，mCherry等。
Step 2:看质粒是否是表达载体，如果是，那就必定有这些原件：启动⼦－核糖体结合位点－克隆位点－转录终⽌信号。
1、启动⼦：促进DNA转录的DNA序列，可与RNApol特异性结合。
2、增强⼦/沉默⼦：前者是真核基因组中⼀种增强邻近基因转录过程的调控顺序，其作⽤与增强⼦所在位置或⽅向⽆关。
质粒
质粒载体
把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术，送进受体细胞中去进行繁殖和表 达的工具叫载体(Vector)。细菌质粒是重组DNA 技术中常用的载体。 质粒载体是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行人工构建的。与天然质 粒相比，质粒载体通常带有一个或一个以上的选择性标记基因(如抗生素抗性基因) 和一个人工合成的含有多个限制性内切酶识别位点的多克隆位点序列，并去掉了 大部分非必需序列，使分子量尽可能减少，以便于基因工程操作。大多质粒载体 带有一些多用途的辅助序列，这些用途包括通过组织化学方法肉眼鉴定重组克隆、 产生用于序列测定的单链DNA、体外转录外源DNA序列、鉴定片段的插入方向、 外源基因的大量表达等。 一个理想的克隆载体大致应有下列一 些特性：（1）分子量小、多拷贝、 松驰控制型；（2）具有多种常用的 限制性内切酶的单切点；（3）能插 入较大的外源DNA片段；（4）具有 容易操作的检测表型。常用的质粒载 体大小一般在1kb至10kb之间，如 PBR322、PUC系列、PGEM系列和 pBluescript（简称pBS）等
基因克隆载体之质粒
质粒(Plasmid)是一种染色体 外的稳定遗传因子，大小从1200kb不等，为双链、闭环的 DNA分子，并以超螺旋状态存在 于宿主细胞中。 质粒主要发现于细菌、放线 菌和真菌细胞中，它具有自主复 制和转录能力，能在子代细胞中 保持恒定的拷贝数，并表达所携 带的遗传信息。 质粒的复制和转录要依赖于 宿主细胞编码的某些酶和蛋白质， 如离开宿主细胞则不能存活，而 宿主即使没有它们也可以正常存 活。质粒的存在使宿主具有一些 额外的特性，如对抗生素的抗性 等。 pBR322 质粒物理图谱
从细菌中分离质粒 DNA
从细菌中分离质粒DNA的 方法都包括3个基本步骤： 培养细菌使质粒扩增；收 集和裂解细胞；分离和纯 化质粒DNA。
如何阅读质粒图谱
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------如何阅读质粒图谱如何阅读质粒图谱(转载） (2009-03-18 07: 31: 46) 转载部分信息来源于丁香园[/M]载体主要有病毒和非病毒两大类，其中质粒 DNA 是一种新的非病毒转基因载体。
一、合格质粒的组成要素 1. 复制起始位点 Ori 即控制复制起始的位点。
原核生物 DNA 分子中只有一个复制起始点。
而真核生物 DNA 分子有多个复制起始位点。
2. 抗生素抗性基因：可以便于加以检测，如 Amp+ ， Kan+ 3. 多 l 克隆位点：MCS 克隆携带外源基因片段 4. P/E 启动子/增强子 5. Terms 终止信号 6. 加 poly（A）信号：可以起到稳定 mRNA 作用二、如何阅读质粒图谱 1.首先看Ori 的位置，了解质粒的类型（原核/真核/穿梭质粒） 2.再看筛选标记，如抗性，决定使用什么筛选标记：（1） Ampr 水解－内酰胺环，解除氨苄的毒性。
（2） tetr 可以阻止四环素进入细胞。
（3） camr 生成氯霉素羟乙酰基衍生物，使之失去毒性。
（4） neor（kanr）氨基糖苷磷酸转移酶使 G418（长那霉素衍生物）失活。
（5） hygr 使潮霉素失活。
1/ 63.看多克隆位点（MCS）。
它具有多个限制酶的单一切点，便于外源基因的插入。
如果在这些位点外有外源基因的插入，会导致某种标志基因的失活，而便于筛选。
决定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。
4.再看外源 DNA 插入片段大小。
质粒一般只能容纳小于 10Kb 的外源 DNA 片段。
一般来说，外源 DNA 片段越长，越难插入，越不稳定，转化效率越低。
5.是否含有表达系统元件，即启动子－核糖体结合位点－克隆位点－转录终止信号。
质粒图谱——精选推荐
1)质粒图谱登记号：00012)质粒名称：pIRES3)来源：BD Co4)用途：真核双表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：7)联系方式：PM)质粒图谱登记号：00022)质粒名称：pECFP-C13)来源：BD Co4)用途：检测真核表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：7)联系方式：pm1)质粒图谱登记号：00032)质粒名称：pShuttle3)来源：4)用途：5)是否可以提供更详细资料：6)是否可以共享：7)联系方式：2)pShuttle MCS很多人用pEGFP-C1，我也来发一个)质粒图谱登记号：00042)质粒名称：pS BR322、pUC183)来源：4)用途：5)是否可以提供更详细资料：6)是否可以共享：7)联系方式：1)质粒图谱登记号：00052)质粒名称：pcDNA3.1(+)/CAT3)来源：invitrogen4)用途：真核表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：无偿7)联系方式：PM1)质粒图谱登记号：00062)质粒名称：pQEx3)来源：Qiagen4)用途：原核表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：交换7)联系方式：PM2)1)质粒图谱登记号：00072)质粒名称：pIVEX2.33)来源：Rocho4)用途：体外转录翻译5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：交换7)联系方式：PM质粒图谱登记号：0008质粒名称：pIRES-EGFP来源：用途：是否可以提供更详细资料：是否可以共享：否联系方式：1)质粒图谱登记号：00092)质粒名称：pET-28a（+）3)来源：Novagen4)用途：原核表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：交换7)联系方式：PM1)质粒图谱登记号：00112)质粒名称：pET-32a(+)3)来源：novagen4)用途：原核表达5)是否可以提供更详细资料：6)是否可以共享：7)联系方式：pm1)质粒图谱登记号：00132)质粒名称：pcDNA3.1/Zeo (+)3)来源：invitrogen4)用途：原核表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：交换7)联系方式：PM)质粒图谱登记号：00132)质粒名称：pEGFP-N33)来源：clontech4)用途：真核表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：交换7)联系方式：PM)质粒图谱登记号：00142)质粒名称：pcDNA33)来源：invitrogen4)用途：真核表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：交换7)联系方式：PM)质粒图谱登记号：00152)质粒名称：pfastbac13)来源：invitrogene4)用途：昆虫表达5)是否可以提供更详细资料：不可以6)是否可以共享：不可以7)联系方式：PM)质粒图谱登记号：00162)质粒名称：pEGFP-C33)来源：clontech4)用途：真核表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：交换7)联系方式：PMwangjun2002274 edited on 2004-06-22 00:041)质粒图谱登记号：00172)质粒名称：pSecTag23)来源：Invitrogen4)用途：真核表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：交换7)联系方式：PM)1质粒图谱登记号：00192)质粒名称：pET20b3)来源：NOVAGEN4)用途：原核表达5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：交换7)联系方式：PM1)质粒图谱登记号：00222)质粒名称：pThioHisA3)来源：invitrogen4)用途：原核表达5)是否可以提供更详细资料：4.365kb , HP-thioredoxin fusion proteinexpressionvector, trc promoter, Ampr, a EK cleavage site lies between HP-thioredoxin and MCS宿主菌TOP10（基因型为：F-mcrA △（mrr-hsd RMS-mcrBC）Ф80 lacZ M15 △lacX74 deoR recAl araD139 △（ara-leu）7697 galU galK rpsL endAl nupG6)是否可以共享：交换或其它7)联系方式：PM2)3)1)质粒图谱登记号：00242)质粒名称：pcDNA3.1-Myc-His-A-3)来源：invitrogen4)用途：真核核表达4))质粒图谱登记号：00252)质粒名称：pS UPER.neo3)来源：4)用途：siRNA5)是否可以提供更详细资料：可以6)是否可以共享：交换7)联系方式：PM)质粒图谱登记号：00312)质粒名称：pSilencer1.0-siRNA3)来源：Ambion4)用途：RNAi5)是否可以提供更详细资料：/techlib/Documents.html?fkResSxn=7&fkSub Sxn=236)是否可以共享：实验结束后，可提供含shRNA模板的质粒7)联系方式：pm5))质粒图谱登记号：00322)质粒名称：pSilencer2.0-U6siRNA3)来源：Ambion4)用途：RNAi，与1.0相比，可以建立稳转株5)更详细资料：/techlib/prot/fm_7209.pdf6)是否可以共享：交换7)联系方式：pm6)会员名：mlluoE-mail：*************可提供试验资源名称和简要介绍：pSilencer 3.1-H1 neo Vector，是Ambion公司目前最高版本的shRNA 载体，为扩增此载体我已插入目的片段，如有战友需要，将此片段双酶切再连上自己的片段即可。
pAdEasy-1质粒图谱
pAdEasy-1 载体基本信息出品公司: AgilentGenBank序列号: AY370909质粒类型: 腺病毒系统高拷贝/低拷贝: 低拷贝启动子: CMV克隆方法: 多克隆位点，限制性内切酶载体大小: 33441 bp载体抗性: Ampicillin (氨苄青霉素)质粒图谱载体描述The plasmid pAdEasy-1, containing most of the human adenovirus serotype 5 (Ad5) genome, is deletedfor the genes E1 and E3. The removal of these two viral genes creates space for foreign DNA and eliminates selfreplication capabilities. The E1 deletion renders the viruses defective for replication and incapable of producing infectious viral particles in target cells (provided there is no complementation by the host cell); the E3 region encodes proteins involved in evading host immunity and is dispensable. The deletion of both genes creates room for up to 7.5 kb of foreign DNA that can be inserted into the Ad5 genome. The E1 gene, which is necessary for production of viral particles, is provided in trans by AD-293 cells. pAdEasy-1 carries the ampicillin resistance gene, which is lost after recombination with a shuttle vector.。
常用pGEX载体图谱
Rosetta系列的表达菌株可以提供T7 RNA聚合酶，它能表达PET系列载体上的外源基因。
pGEX系列载体上的外源基因不需要T7 RNA聚合酶，普通的大肠杆菌经IPTG诱导即可表达Tac启动子是一组由Lac和trp启动子人工构建的杂合启动子，受Lac阻遏蛋白的负调节，它的启动能力比Lac和trp都强。
其中Tac 1是由Trp启动子的－35区加上一个合成的46 bp DNA片段(包括Pribnow 盒)和Lac操纵基因构成，Tac 12是由Trp的启动子-35区和Lac 启动子的-10区，加上Lac操纵子中的操纵基因部分和SD序列融合而成蛋白标签：pGEX4T1载体基本信息出品公司: GE别名: pGEX-4T-1, pGEX4T1, pGEX 4T 1质粒类型: 大肠杆菌蛋白表达载体表达水平: 高拷贝启动子: Tac克隆方法: 多克隆位点，限制性切酶载体大小: 4969 bp5' 测序引物及序列: pGEX5': GGGCTGGCAAGCCACGTTTGGTG3' 测序引物及序列: pGEX3': CCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGG载体标签: N-GST载体抗性: Ampicillin 氨苄备注: 复制子是pMB1产品目录号: 27-4580-01稳定性: 瞬时表达 Transient组成型: 诱导表达病毒/非病毒: 非病毒pGEX4T1载体质粒图谱和多克隆位点信息原核生物DNA复制起始点，是DNA链上独特的具有起始DNA复制功能的碱基序列。
大肠杆菌的复制起点包括OriC和OriHThrombin 凝血酶pGEX4T1载体简介pGEX4T1载体序列LOCUS pGEX-4T-1 4969 bp DNA circular SYN DEFINITION pGEX-4T-1ACCESSIONKEYWORDSSOURCEORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors. COMMENT This file is created by Vector NTI.biofeng./COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.|FEATURES Location/Qualifierssource 1..4969/organism="pGEX-4T-1"/mol_type="other DNA"promoter 184..212/label="tac_promoter"misc_feature 224..246/label="M13_pUC_rev_primer"gene 258..977/label="GST (variant)"/gene="GST (variant)"CDS 258..977/label="ORF frame 3"/label="pGEX_3_primer"promoter 1307..1335/label="AmpR_promoter"gene 1377..2237/label="Ampicillin"/gene="Ampicillin"CDS 1377..2237/label="ORF frame 3"rep_origin 2392..3011/label="pBR322_origin"misc_feature 3309..4400/label="lacI"CDS 3441..4400/label="ORF frame 3"promoter 4449..4478/label="lac_promoter"misc_feature 4492..4514/label="M13_pUC_rev_primer" promoter 4513..4531/label="M13_reverse_primer" CDS 4523..81/label="ORF frame 2"misc_feature 4540..4695/label="lacZ_a"/label="M13_forward20_primer"misc_feature complement(4552..4574)/label="M13_pUC_fwd_primer"pGEX4T2载体基本信息出品公司: GE别名: pGEX-4T-2, pGEX4T2, pGEX 4T 2 质粒类型: 大肠杆菌蛋白表达载体表达水平: 高拷贝启动子: Tac克隆方法: 多克隆位点，限制性切酶载体大小: 4970 bp5' 测序引物及序列: pGEX5': GGGCTGGCAAGCCACGTTTGGTG 3' 测序引物及序列: pGEX3': CCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGG 载体标签: N-GST载体抗性: Ampicillin 氨苄备注: 复制子是pMB1产品目录号: 27-4581-01稳定性: 瞬时表达 Transient组成型: 诱导表达病毒/非病毒: 非病毒pGEX4T2载体质粒图谱和多克隆位点信息pGEX4T2载体简介pGEX4T2载体序列LOCUS pGEX-4T-2 4970 bp DNA circular SYN DEFINITION pGEX-4T-2ACCESSIONKEYWORDSSOURCEORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors. COMMENT This file is created by Vector NTI.biofeng./COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.|FEATURES Location/Qualifiers/organism="pGEX-4T-2"/mol_type="other DNA"promoter 184..212/label="tac_promoter"misc_feature 224..246/label="M13_pUC_rev_primer" gene 258..978/label="GST (variant)"/gene="GST (variant)"CDS 258..974/label="ORF frame 3"misc_feature complement(1020..1042)/label="pGEX_3_primer"promoter 1308..1336/label="AmpR_promoter"gene 1378..2238/label="Ampicillin"/gene="Ampicillin"CDS 1378..2238/label="ORF frame 1"rep_origin 2393..3012/label="pBR322_origin"misc_feature 3310..4401/label="lacI"/label="ORF frame 1"promoter 4450..4479/label="lac_promoter"misc_feature 4493..4515/label="M13_pUC_rev_primer"promoter 4514..4532/label="M13_reverse_primer"CDS 4524..81/label="ORF frame 3"misc_feature 4541..4696/label="lacZ_a"promoter complement(4544..4560)/label="M13_forward20_primer" misc_feature complement(4553..4575)/label="M13_pUC_fwd_primer" pGEX4T3载体质粒图谱和多克隆位点信息pGEX4T3载体简介pGEX4T3载体序列LOCUS pGEX-4T-3 4968 bp DNA circular SYN DEFINITION pGEX-4T-3ACCESSIONKEYWORDSSOURCEORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors. COMMENT This file is created by Vector NTI.biofeng./COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.|FEATURES Location/Qualifierssource 1..4968/organism="pGEX-4T-3"/mol_type="other DNA"promoter 184..212/label="tac_promoter"misc_feature 224..246/label="M13_pUC_rev_primer" gene 258..976/label="GST (variant)"/gene="GST (variant)"CDS 258..980/label="ORF frame 3"misc_feature complement(1018..1040)/label="pGEX_3_primer"promoter 1306..1334/label="AmpR_promoter"gene 1376..2236/label="Ampicillin"/gene="Ampicillin"CDS 1376..2236/label="ORF frame 2"rep_origin 2391..3010/label="pBR322_origin"misc_feature 3308..4399/label="lacI"CDS 3440..4399/label="ORF frame 2"promoter 4448..4477/label="lac_promoter"misc_feature 4491..4513/label="M13_pUC_rev_primer"promoter 4512..4530/label="M13_reverse_primer"CDS 4522..81/label="ORF frame 1"misc_feature 4539..4694/label="lacZ_a"promoter complement(4542..4558)/label="M13_forward20_primer"misc_feature complement(4551..4573)/label="M13_pUC_fwd_primer"pGEX6P1载体基本信息出品公司: GE别名: pGEX-6P-1, pGEX6P1, pGEX 6P 1 质粒类型: 大肠杆菌蛋白表达载体表达水平: 高拷贝启动子: Tac克隆方法: 多克隆位点，限制性切酶载体大小: 4984 bp5' 测序引物及序列: pGEX5': GGGCTGGCAAGCCACGTTTGGTG 3' 测序引物及序列: pGEX3': CCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGG 载体标签: N-GST载体抗性: Ampicillin 氨苄备注: 复制子是pMB1产品目录号: 27-4597-01稳定性: 瞬时表达 Transient组成型: 诱导表达病毒/非病毒: 非病毒pGEX6P1载体质粒图谱和多克隆位点信息pGEX6P1载体简介pGEX6P1载体序列LOCUS pGEX-6P-1 4984 bp DNA circular SYN DEFINITION pGEX-6P-1ACCESSIONKEYWORDSSOURCEORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors. COMMENT This file is created by Vector NTI.biofeng./COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.|FEATURES Location/Qualifierssource 1..4984/organism="pGEX-6P-1"/mol_type="other DNA"promoter 184..212/label="tac_promoter"misc_feature 224..246/label="M13_pUC_rev_primer"gene 258..992/label="GST"/gene="GST"CDS 258..992/label="ORF frame 3"misc_feature 918..938/label="precision"misc_feature complement(1034..1056)/label="pGEX_3_primer"promoter 1322..1350/label="AmpR_promoter"gene 1392..2252/label="Ampicillin"/gene="Ampicillin"CDS 1392..2252/label="ORF frame 3"rep_origin 2407..3026/label="pBR322_origin"misc_feature 3324..4415/label="lacI"CDS 3456..4415/label="ORF frame 3"promoter 4464..4493/label="lac_promoter"misc_feature 4507..4529/label="M13_pUC_rev_primer"promoter 4528..4546/label="M13_reverse_primer"CDS 4538..81/label="ORF frame 2"misc_feature 4555..4710/label="lacZ_a"promoter complement(4558..4574)/label="M13_forward20_primer" misc_feature complement(4567..4589)/label="M13_pUC_fwd_primer"pET28a载体基本信息出品公司: EMD Biosciences (Novagen)别名: pET28a, pet 28a, pET-28a(+) 质粒类型: 大肠杆菌蛋白表达表达水平: 高克隆方法: 多克隆位点，限制性切酶载体大小: 5369 bp5' 测序引物及序列: T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3' 3' 测序引物序列: T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3' 载体标签: N-His, N-Thrombin, N-T7, C-His载体抗性: 卡那备注: N端含有Thrombin蛋白酶切位点; pET28a, b, c 的差异仅仅存在于多克隆位点处。
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pGEX-KG 质粒图谱
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GGC CTT GTG CAA CCC ACT CGA CTT CTT TTG GAA TAT CTT GAA GAA G L V Q P T R L L L E Y L E E AAA TAT GAA GAG CAT TTG TAT GAG CGC GAT GAA GGT GAT AAA TGG K Y E E H L Y E R D E G D K W CGA AAC AAA AAG TTT GAA TTG GGT TTG GAG TTT CCC AAT CTT CCT R N K K F E L G L E F P N L P TAT TAT ATT GAT GGT GAT GTT AAA TTA ACA CAG TCT ATG GCC ATC ATA Y Y I D G D V K L T Q S M A I I CGT TAT ATA GCT GAC AAG CAC AAC ATG TTG GGT GGT TGT CCA AAA R Y I A D K H N M L G G C P K GAG CGT GCA GAG ATT TCA ATG CTT GAA GGA GCG GTT TTG GAT ATT E R A E I S M L E G A V L D I AGA TAC GGT GTT TCG AGA ATT GCA TAT AGT AAA GAC TTT GAA ACT R Y G V S R I A Y S K D F E T CTC AAA GTT GAT TTT CTT AGC AAG CTA CCT GAA ATG CTG AAA ATG L K V D F L S K L P E M L K M GAT CGT TTA TGT CAT AAA ACA TAT TTA AAT GGT GAT CAT F E D R L C H K T Y L N G D H GTA ACC CAT CCT GAC TTC ATG TTG TAT GAC GCT CTT GAT GTT GTT TTA
V T H P D F M L Y D A L D V V L TAC ATG GAC CCA ATG TGC CTG GAT GCG TTC CCA AAA TTA GTT TGT Y M D P M C L D A F P K L V C TTT AAA AAA CGT ATT GAA GCT ATC CCA CAA ATT GAT AAG TAC TTG F K K R I E A I P Q I D K Y L AAA TCC AGC AAG TAT ATA GCA TGG CCT TTG CAG GGC TGG CAA GCC K S S K Y I A W P L Q G W Q A ACG TTT GGT GGT GGC GAC CAT CCT CCA AAA TCG GAT CTG GTT CCG T F G G G D H P P K S D L V P
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