分子生物学实验报告
分子生物学实验报告
分子生物学实验报告
实验目的:
通过本次实验,我们旨在探究DNA复制、基因表达和蛋白质合成等分子生物学的基本原理,加深对分子水平生物学过程的理解,培养实验操作技能和科学思维能力。
实验材料与方法:
1. 实验材料:大肠杆菌(E. coli)细菌菌斑、DNA提取试剂盒、PCR试剂盒、琼脂糖、琼脂糖电泳试剂、PCR扩增仪、电泳仪等。
2. 实验步骤:
a. DNA提取:取一支含E. coli细菌菌斑的移液管,用DNA提取试剂盒提取DNA。
b. PCR扩增:将提取的DNA加入PCR试剂盒中进行PCR扩增反应。
c. 原核表达:将扩增后的DNA片段转入大肠杆菌进行原核表达。
d. SDS-PAGE电泳:将蛋白质样品加入琼脂糖凝胶,通过电泳进行蛋白质分子量的分离。
实验结果与分析:
1. DNA提取:成功提取到E. coli细菌的DNA,并通过琼脂糖凝胶电泳观察到DNA的带型。
2. PCR扩增:成功扩增出目标DNA片段,并经过验证测序结果正确。
3. 原核表达:大肠杆菌成功表达了目标蛋白质,通过SDS-PAGE电泳观察到目标蛋白质的条带。
4. SDS-PAGE电泳:观察到蛋白质的分子量差异,验证了蛋白质的分离效果。
结论与讨论:
通过本次实验,我们成功实现了DNA提取、PCR扩增、原核表达和蛋白质分离等分子生物学实验步骤,从而全面了解了分子生物学过程的基本原理。
实验结果表明,实验操作规范,结果可靠,为今后的科研工作和实验基础奠定了坚实的基础。
同时,也发现了实验中的一些不足之处,提出了改进的建议,为进一步的研究工作提供了参考。
参考文献:
无。
(完整版)质粒DNA的提取、纯化与鉴定
分子生物学实验报告题目:质粒DNA的提取、纯化与鉴定姓名:学号:班级:时间:一、实验目的:1.学习并掌握凝胶电泳进行DNA的分离纯化的实验原理。
2.学习并掌握凝胶的制备及电泳方法。
3.学习并掌握凝胶中DNA的分离纯化方法。
4.掌握碱变性提取发的原理及各种试剂的作用。
5.掌握碱变性法提取质粒DNA的方法。
二、实验原理:1.质粒DNA的提取——碱变性提取法:提取和纯化质粒DNA的方法很多,目前常用的有:碱变性提取法、煮沸法、羟基磷灰石柱层析法、EB-氯化铯密度梯度离心法和Wizard法等。
其中,碱变性提取法最为经典和常用,适于不同量质粒DNA的提取。
该方法操作简单,易于操作,一般实验室均可进行。
提取质粒DNA纯度高,可直接用于酶切、序列测定及分析。
EB-氯化铯密度梯度离心法,主要适合于相对分子质量与染色体DNA相近的质粒,具有纯度高、步骤少、方法稳定,且得到的质粒DNA多为超螺旋构型等优点,但提取成本高,需要超速离心设备。
少量提取质粒DNA还可用沸水浴法、Wizard法等,沸水浴法提取的质粒DNA中常含有RNA,但不影响限制性核酸内切酶的消化、亚克隆及连接反应等。
碱变性法提取质粒DNA一般包括三个基本步骤:培养细菌细胞以扩增质粒;收集和裂解细胞;分离和纯化质粒DNA。
在细菌细胞中,染色体DNA以双螺旋结构存在,质粒DNA以共价闭合环状形式存在。
细胞破碎后,染色体DNA和质粒DNA均被释放出来,但两者变性与复性所依赖的溶液pH值不同。
在pH值高达12.0的碱性溶液中,染色体DNA氢键断裂,双螺旋结构解开而变性;共价闭合环状质粒DNA的大部分氢键断裂,但两条互补链不完全分离。
当用pH值4.6的KAc(或NaAc)高盐溶液调节碱性溶液至中性时,变性的质粒DNA可恢复原来的共价闭合环状超螺旋结构而溶解于溶液中;但染色体DNA不能复性,而是与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起形成缠连的、可见的白色絮状沉淀。
分子生物学实验报告
分子生物学实验报告分子生物学实验报告引言分子生物学是一门研究生物大分子结构、功能和相互作用的学科,通过实验手段揭示生命现象的分子机理。
本实验旨在探究DNA复制过程中的关键步骤,以及RNA转录和蛋白质翻译的基本原理。
实验一:DNA复制DNA复制是细胞分裂过程中必不可少的步骤,它保证了遗传信息的传递和维持。
本实验通过模拟DNA复制过程,研究DNA复制酶的作用和复制的准确性。
材料:- DNA模板- DNA聚合酶- 引物- dNTPs- 缓冲液方法:1. 准备反应体系,包括DNA模板、DNA聚合酶、引物、dNTPs和缓冲液。
2. 在适当的温度下,将反应体系放入PCR仪中进行反应。
3. 取样并进行凝胶电泳分析,观察DNA复制产物。
结果:通过凝胶电泳分析,我们观察到DNA复制产物的出现。
这表明DNA聚合酶能够在模板DNA上合成新的DNA链,并且复制的过程较为准确。
讨论:DNA复制的准确性是生命传递遗传信息的基础。
DNA聚合酶具有校正功能,能够识别和修复错误的碱基配对。
这种精确性保证了基因组的稳定性和可靠性。
实验二:RNA转录RNA转录是将DNA信息转录成RNA的过程,它是基因表达的第一步。
本实验旨在研究RNA转录的机制和调控。
材料:- DNA模板- RNA聚合酶- 引物- NTPs- 缓冲液方法:1. 准备反应体系,包括DNA模板、RNA聚合酶、引物、NTPs和缓冲液。
2. 在适当的温度下,将反应体系放入PCR仪中进行反应。
3. 取样并进行凝胶电泳分析,观察转录产物。
结果:凝胶电泳分析显示出RNA转录产物的出现。
这表明RNA聚合酶能够在DNA模板上合成RNA链。
讨论:RNA转录是基因表达的第一步,它决定了细胞内特定基因的表达水平。
RNA聚合酶通过与DNA模板的互作用,选择性地合成特定的RNA链。
这种选择性转录是基因调控的关键。
实验三:蛋白质翻译蛋白质翻译是将RNA信息翻译成蛋白质的过程,它是生物体内蛋白质合成的关键步骤。
分子生物学实验总结
分子生物学实验总结分子生物学实验总结分子生物学作为生物科学中的一个重要分支,在现代生物学研究中具有重要的地位。
通过分子生物学实验,可以研究生物分子的结构、功能、调控以及相互作用等方面的问题,对生物学研究具有重要的推动作用。
在本次实验中,我们进行了一系列的分子生物学实验,对于实验原理和方法进行了学习,并实际操作了实验操作步骤。
现将本次实验的主要内容及结果进行总结。
本次实验主要涉及到了分子生物学中的PCR技术、酶切与连接以及基因测序等实验技术。
首先,我们对PCR技术进行了学习和实验操作。
PCR技术是一种人工合成DNA的方法,通过此技术可以对DNA片段进行扩增,从而快速制备大量的特定DNA序列。
在实验中,我们根据给定的DNA模板及引物,按照PCR反应的标准条件,使用热循环仪进行了PCR扩增。
通过观察PCR扩增体系中DNA条带的出现与扩增效果,我们得到了我们所需要的特定DNA片段。
接下来,我们进行了酶切与连接实验。
酶切与连接是分子生物学中的重要实验技术,能够对DNA分子进行精确的酶切,并通过连接酶将不同DNA片段连接在一起。
在实验中,我们选择了限制性内切酶进行酶切,根据选定的酶切位点设计引物,通过PCR扩增获取所需的DNA片段。
然后,我们使用连接酶对目标DNA片段进行连接,连接产物经电泳检测,观察到目标片段已成功连接。
最后,我们进行了基因测序实验。
基因测序是分子生物学中的重要技术,可以获得DNA序列信息,从而揭示基因的变异,研究基因的功能等。
在实验中,我们根据已揭示出的DNA序列设计引物,对特定的DNA片段进行测序。
通过对测序结果的阅读和分析,我们准确地获得了目标DNA片段的DNA序列。
通过本次实验,我们不仅学习了分子生物学的相关理论知识,还亲自操作了PCR、酶切与连接以及基因测序等实验步骤,进一步强化了我们对于分子生物学原理和实验技术的理解。
此外,我们还学习了实验数据的分析和解读,培养了我们科学研究的能力。
分子生物学实训报告
一、实训背景分子生物学是研究生物大分子如蛋白质、核酸的结构与功能的一门学科。
随着生命科学技术的不断发展,分子生物学在医学、农业、环境保护等领域发挥着越来越重要的作用。
为了更好地理解和掌握分子生物学的基本理论和技术,我们开展了为期两周的分子生物学实训课程。
本次实训旨在通过实际操作,加深对分子生物学理论知识的理解,提高实验技能,培养科研素养。
二、实训目的1. 熟悉分子生物学实验室的基本操作规程和安全规范。
2. 掌握DNA提取、PCR扩增、酶切、电泳等分子生物学实验技术。
3. 理解基因克隆、基因表达、蛋白质分析等分子生物学实验原理。
4. 提高团队协作和沟通能力,培养科研素养。
三、实训内容1. 实验室基本操作与安全规范(1)熟悉实验室布局,了解各种仪器的使用方法。
(2)学习实验室安全操作规程,掌握实验室废弃物处理方法。
(3)进行实验前的准备工作,如配制试剂、消毒、无菌操作等。
2. DNA提取(1)了解DNA提取的原理和常用方法。
(2)学习酚-氯仿法提取DNA。
(3)对提取的DNA进行质量检测,如A260/A280比值、琼脂糖凝胶电泳等。
3. PCR扩增(1)了解PCR扩增的原理和步骤。
(2)设计PCR引物,进行PCR反应。
(3)对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳检测。
4. 酶切(1)了解酶切原理和酶切反应条件。
(2)学习限制性内切酶的用法。
(3)进行酶切反应,对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳检测。
5. 电泳(1)了解电泳原理和电泳技术。
(2)学习琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等电泳技术。
(3)对DNA、蛋白质等生物大分子进行电泳分离和检测。
6. 基因克隆、基因表达、蛋白质分析(1)了解基因克隆、基因表达、蛋白质分析的基本原理。
(2)学习相关实验技术,如载体构建、重组表达、蛋白纯化等。
(3)对克隆的基因、表达的蛋白进行检测和分析。
四、实训过程1. 实验前准备(1)查阅相关文献,了解实验原理和操作步骤。
(2)配制实验试剂,确保实验用品齐全。
分子生物学实验报告
分子生物学实验报告实验目的:探究基因在DNA复制过程中的作用及其表达机制。
实验材料与方法:材料:1. DNA模板:提取自大肠杆菌细胞中的质粒DNA。
2. DNA聚合酶:用于合成新的DNA链。
3. 引物:用于DNA聚合酶的引导和定向合成DNA。
4. dNTPs:脱氧核苷酸三磷酸盐,提供新的核苷酸单位供DNA聚合酶使用。
方法:1. DNA复制反应:将DNA模板、DNA聚合酶、引物和dNTPs混合在一起,加入适量缓冲液和镁离子,并在适温条件下进行DNA复制反应。
2. DNA扩增:通过PCR技术,利用引物的特异性,从DNA模板中扩增目标序列。
3. 聚丙烯酰胺凝胶电泳:用于分离和检测PCR产物,通过电泳迁移率差异判断扩增产物的大小。
实验结果:1. DNA复制反应成功进行,获得了新的DNA链。
2. PCR反应成功扩增目标序列,观察到明显的放大带。
3. 聚丙烯酰胺凝胶电泳显示PCR产物的大小符合预期。
实验分析与讨论:本实验通过模拟DNA的复制过程,成功合成了新的DNA链,并通过PCR技术扩增了目标序列。
这一结果验证了基因在DNA复制过程中的作用。
在DNA复制过程中,DNA聚合酶是关键的酶类。
DNA聚合酶能够识别DNA的模板链,并根据模板链的信息合成新的互补链。
在实验中,添加了引物和dNTPs,引物可以定向和引导DNA聚合酶的合成,dNTPs则提供了能量和碱基单位,支持DNA聚合酶的复制活动。
PCR技术是一种重要的生物分子技术,其通过引物的特异性识别和引导,扩增目标序列。
实验中,选择了适当的引物序列,使其能够与目标序列特异性地结合,并保证扩增反应的特异性和选择性。
PCR反应可以在短时间内扩增大量的目标DNA序列,为后续的分析和研究提供了足够的样品。
聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种常用的分析方法,通过电场驱动DNA分子在凝胶中迁移,根据分子大小的差异来判断扩增产物的大小。
在实验中,聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示出明显的PCR产物带,与预期的目标序列大小相符,说明PCR扩增反应成功,目标序列得到了扩增。
分子生物学实验总结报告
实验总结报告摘要1、通过PCR 扩增,琼脂糖凝胶电泳回收得到外源基因parb,进行BglⅡ和Xba I 双酶切;抽提质粒pIJ86601,进行BamH I和Xba I 双酶切;将两者的酶切产物通过连接转化,培养后抽提质粒进行电泳,测序,检测重组质粒是否构建成功。
测序结果显示未构建成功。
2、用相同的方法构建表达载体PGEX-sco3330,由于时间问题尚未完成。
3、诱导蛋白表达,蛋白纯化,蛋白脱盐,bradford法进行蛋白含量测定以及SDS-PAGE电泳和免疫印迹试验(Western Blotting)。
实验内容:一、构建质粒pIJ86601-parb(一)获取外源基因parb1.PCR扩增PCR体系:200µl体系中,高保真pfuDNA聚合酶10X buffer,40 µl;10mM Mixed dNTP,5 µl;PrimerA,5 µl;PrimerB,5 µl;高保真pfu酶,2 µl;DMSO,20 µl;双蒸水,120 µl;模板1μl。
PCR程序设定Temp[℃] Time next turns Gradient[℃]1: 98.0 10min2: 98.0 30S3: 60.0 30S 30.04: 72.0 30S 2 3 45: 72.0 10min6:16.0 1h2.琼脂糖凝胶电泳切胶回收目的DNA1)通过电泳将目的片段与其他DNA尽可能分开,然后用干净的手术刀割下含需回收DNA的琼脂块,放入1.5ml离心管中。
2)按每300µl/100mg的比例加入Binding Buffer,置于50-60℃水浴中10分钟,使胶彻底融化。
加热融胶时,每2分钟混匀一次。
3)将融化的胶溶液转移到套放在2ml收集管内的UNIQ-10柱中,12,000rpm室温离心2 min。
4)取下UNIQ-10柱,倒废液,将柱放回同一收集管, 加入500µl WashSolution,12,000 rpm室温离心30秒。
分子生物学实验
分子生物学实验在分子生物学领域,实验是非常重要的手段,可以帮助科学家们深入研究细胞和遗传信息的奥秘。
本文将介绍分子生物学实验的一般步骤和常见技术,为读者提供一个全面的了解。
实验准备在进行任何分子生物学实验之前,实验室必须准备好所有必需的试剂和器材。
这些试剂包括DNA酶、引物、缓冲液等,而器材则包括PCR仪、电泳仪、热循环仪等。
此外,实验室还需要保持清洁、有序,以确保实验结果的准确性和可重复性。
核酸提取在进行分子生物学实验时,研究人员通常需要提取目标细胞或组织中的核酸,如DNA和RNA。
这个步骤非常关键,因为核酸是遗传信息的载体,对后续实验至关重要。
PCR扩增PCR(聚合酶链反应)是一种常用的技术,可以在体外复制DNA片段。
通过PCR扩增,科学家们可以快速获得大量特定DNA序列,为后续实验提供充足的材料。
凝胶电泳凝胶电泳是一种常用的分离和分析DNA片段的技术。
通过在凝胶电泳仪中施加电场,可以使DNA片段根据大小在凝胶中移动,从而实现分离和检测。
蛋白表达和纯化在分子生物学研究中,研究人员经常需要表达和纯化特定蛋白。
通过基因工程技术,科学家们可以将目标基因插入表达载体中,在宿主细胞中大量表达目标蛋白,并通过纯化步骤获得纯净的蛋白样品。
分子克隆分子克隆是将某一DNA片段插入到另一DNA分子中的过程,常用于构建重组DNA、重组蛋白等。
通过分子克隆技术,科学家们可以研究和改变生物体内的基因组成。
实验结果分析一旦实验完成,科学家们需要对实验结果进行分析和解读。
这通常涉及到数据处理、图表绘制、统计学分析等工作,以确保实验结论的准确性和可靠性。
结论与展望分子生物学实验在揭示生命的奥秘和解决重大疾病方面起着至关重要的作用。
随着技术的不断发展和创新,我们相信分子生物学实验将在未来展现出更广阔的发展前景,为人类健康和生活质量带来更多的希望。
希望本文能够帮助读者更好地了解分子生物学实验的基本原理和方法,激发更多人对分子生物学这一神奇领域的兴趣和热爱。
分子生物学综合实验报告
分子生物学综合试验报告综合实验Ⅰ.Southern杂交(质粒DNA提取、PCR技术体外扩增DNA、质粒载体和外源DNA的连接反应、地高辛标记的Southern杂交)一.实验目的1.学习Southern杂交的原理及操作方法。
2.学习碱裂解法提取质粒的原理。
3.学习PCR反应的基本原理和实验技术;了解引物设计的一般要求。
4.掌握DNA体外连接的基本技能,了解连接反应的注意事项。
二.实验原理利用染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离的目的。
在碱变性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋解开而变性,质粒DNA氢键也大部分断裂,双螺旋也有部分解开,但共价闭合环状结构的两条互补链不会完全分离,当pH=4.8的乙酸钠将其pH调到中性时,变性的质粒DNA又恢复到原来的碱裂解法提取质粒的主要原理是:利用染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而构型,而染色体DNA不能复性,形成缠绕的致密网状结构,离心后,由于浮力密度不同,染色体DNA与大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
聚合酶链反应(PCR)是体外酶促合成DNA片段的一种技术,PCR进行的基本条件:DNA模板(在RT-PCR中模板是RNA)、引物、dNTP(dATP、dTTP、dGTP、dCTP)、Taq DNA聚合酶、反应缓冲体系。
PCR循环由三个步骤组成:变性、退火、延伸。
每一个循环的产物可作为下一个循环的模板,通过30个左右循环后,目的片段的扩增可达106倍。
DNA片段之间的连接是通过DNA连接酶的催化实现的。
DNA连接酶催化具有平末端或互补粘性末端的DNA片段间相邻碱基通过3’,5’磷酸二酯键连接起来。
最常用的来源于T4噬菌体的T4DNA连接酶。
对于平末端或互补的粘性末端可直接进行连接反应。
一个片段是平末端,另一片段为粘性末端或两个片段都是粘性末端但不配对,则需要通过各种方式使其可一匹配或通过平末端进行连接。
通常采用末端补平、加同聚物尾、加接头等方式是目的片段之间能够匹配。
分子生物学综合大实验实验报告
分子生物学综合大实验实验报告外源基因SOC1的扩增和重组载体的构建与筛选班级姓名学号实验目的通过PCR技术克隆外援基因SOC1的目的片段。
通过质粒提取,酶切和连接技术,把SOC1基因重组进TA克隆载体并完成筛选。
实验用品材料:植物叶片,TA克隆载体试剂:DNA提取液(1L)TE缓冲液;琼脂糖;核酸染料;;DNAmarker;6×上样缓冲液(0.25%溴酚蓝、0.25%二甲苯青FF、30%甘油)、DNA聚合酶、dNTP、上下游引物器材:研钵,恒温水浴,离心机,离心管,PCR仪、生化培养箱、电泳仪、电泳槽、凝胶成像系统,去离子水、超净工作台,低温台式离心机,分光光度计,水浴锅,高压灭菌锅,酒精灯等。
实验原理通过配制DNA提取液,利用研磨法获得DNA模板,然后采用PCR技术扩增基SOC1基因获得目的片段,然后通过酶切和连接方法把SOC1基因连接到TA载体上。
大肠杆菌感受态细胞中加入质粒,则质粒DNA与Ca2+形成的复合物粘附于细胞表面,经过42℃短暂的热激处理后,DNA与Ca2+形成的复合物进入大肠杆菌细胞,在不含抗生素的培养基中短暂培养,使转入大肠杆菌质粒上的抗生素抗性基因表达,在含相应抗生素的选择培养基上可将转化菌(含质粒)与未转化细菌分开,转化细菌经过不断分裂增殖形成菌落,而未转化的细菌则不能。
并通过氨苄抗性筛选获得重组子实验方法步骤1、植物基因组DNA的小量提取(1)剪取新鲜幼嫩的植物叶片1~2片于1.5 mL离心管中.(2)先加入少量的DNA提取液100 μL,用研磨棒充分研磨尽量避免提取液溅出。
(3)再加入600 μL的DNA提取液,使DNA提取液的总体积为700 μL,上下颠倒混合均匀。
(4)放入高速离心机4 ℃条件下12 000 rpm离心15 min。
(5)取上层水相,移入标有相应序号的新的离心管中,加入600 μL的异丙醇(与加入DNA 提取液的总体积相同),上下颠倒混匀。
分子生物学实验报告全解(有图有真相)讲解
分⼦⽣物学实验报告全解(有图有真相)讲解分⼦⽣物学实验报告慕蓝有志班梦想学院⽬录实验⼀细菌的培养 (2)实验⼆质粒DNA的提取 (4)实验三琼脂糖凝胶电泳法检测DNA (7)实验四质粒DNA酶切及琼脂糖电泳分析鉴定 (9)实验五聚合酶链反应(PCR)技术体外扩增DNA (11)实验六植物基因组DNA提取、酶切及电泳分析 (14)实验七RNA分离与纯化 (17)实验⼋RT-PCR扩增⽬的基因cDNA (19)实验九质粒载体和外源DNA的连接反应 (21)实验⼗感受态细胞的制备及转化 (23)实验⼗⼀克隆的筛选和快速鉴定 (25)实验⼗⼆地⾼⾟标记的Southern杂交 (27)实验⼗三阿拉伯糖诱导绿⾊荧光蛋⽩的表达 (31)思考题 (32)分⼦实验⼼得总结 (33)实验⼀细菌的培养⼀、⽬的学习细菌的培养⽅法及培养基的配置。
⼆、原理在基因⼯程实验和分⼦⽣物学实验中,细菌是不可缺少的实验材料。
质粒的保存、增殖和转化;基因⽂库的建⽴等都离不开细菌。
特别是常⽤的⼤肠杆菌。
⼤肠杆菌是含有长约3000kb的环状染⾊体的棒状细胞。
它能在仅含碳⽔化合物和提供氮、磷和微量元素的⽆机盐的培养基上快速⽣长。
当⼤肠杆菌在培养基中培养时,其开始裂殖前,先进⼊⼀个滞后期。
然后进⼊对数⽣长期,以20~30min复制⼀代的速度增殖。
最后,当培养基中的营养成分和氧耗尽或当培养基中废物的含量达到抑制细菌的快速⽣长的浓度时,菌体密度就达到⼀个⽐较恒定的值,这⼀时期叫做细菌⽣长的饱和期。
此时菌体密度可达到1×109~2×109/mL。
培养基可以是固体的培养基,也可以是液体培养基。
实验室中最常⽤的是LB培养基。
三、实验材料、试剂与主要仪器(⼀)实验材料⼤肠杆菌(⼆)试剂1. 胰蛋⽩胨2. 酵母提取物3. 氯化钠4. 1mol/L NaOH5. 琼脂粉6. 抗⽣素(氨苄青霉素、卡那霉素等)(三)仪器1. 培养⽫2. 带帽试管3. 涂布器4. 灭菌锅5. ⽆菌操作台(含酒精灯、接种环、灭菌⽛签等)6. 恒温摇床四、操作步骤(⼀)LB培养基的配制配制每升培养基,应在950m1去离⼦⽔中加⼊:细菌培养⽤胰蛋⽩胨10g细菌培养⽤酵母提取物5gNaCl 10g摇动容器直⾄溶质完全溶解,⽤1mol/L NaOH调节pH位⾄7.0。
分子生物学检验实习报告
一、实习背景分子生物学检验是现代医学检验的重要分支,通过分子生物学技术对生物大分子进行定性和定量分析,为疾病的诊断、治疗和预防提供科学依据。
为提高自身专业技能,本人于2022年8月至2023年8月在XX医院分子生物学检验科进行了为期一年的实习。
二、实习目的1. 熟悉分子生物学检验的基本原理和操作技术;2. 掌握实验室管理、生物安全等相关知识;3. 培养严谨的工作态度和团队协作精神;4. 提高临床应用能力和综合素质。
三、实习内容1. 实习期间,我主要参与了以下工作:(1)学习分子生物学检验的基本原理,包括DNA、RNA的提取、纯化、扩增、检测等;(2)掌握PCR、RT-PCR、实时荧光定量PCR等分子生物学技术;(3)熟悉基因测序、基因芯片等高通量检测技术;(4)参与临床样本的接收、处理、检测和结果分析;(5)协助带教老师进行实验室管理、生物安全管理等工作。
2. 在实习过程中,我重点学习了以下内容:(1)DNA、RNA的提取:掌握了不同来源样本的DNA、RNA提取方法,包括酚-氯仿法、试剂盒法等;(2)PCR、RT-PCR、实时荧光定量PCR:熟悉了PCR原理、操作步骤和结果分析,掌握了实时荧光定量PCR技术;(3)基因测序:了解了基因测序的基本原理、操作流程和数据分析方法;(4)基因芯片:学习了基因芯片的原理、应用和数据分析方法;(5)实验室管理:了解了实验室安全管理、生物安全管理等相关知识。
四、实习收获1. 技术能力:通过实习,我掌握了分子生物学检验的基本原理和操作技术,能够独立进行PCR、RT-PCR、实时荧光定量PCR等实验操作,为今后的工作打下了坚实的基础。
2. 理论知识:实习期间,我深入学习了分子生物学、遗传学等相关理论知识,提高了自己的综合素质。
3. 实践能力:通过参与临床样本的检测和结果分析,我提高了自己的临床应用能力,为今后从事相关工作积累了宝贵经验。
4. 团队协作:在实习过程中,我学会了与同事沟通、协作,共同完成工作任务,培养了团队精神。
检验科实习报告分子生物学
检验科实习报告:分子生物学在过去几个月的实习期间,我有幸参与了检验科分子生物学实验室的工作,从中获得了丰富的实践经验和专业知识。
在此期间,我深刻体会到分子生物学在临床诊断和疾病研究中的重要性,并逐步掌握了相关检验技术。
一、实习内容1. 熟悉实验室设备和工作流程在实习初期,我在导师的指导下,了解了实验室的基本设备和工作流程。
通过学习,我熟悉了分子生物学实验室的各种仪器设备,如PCR仪、电泳仪、凝胶成像仪等,并掌握了它们的使用方法。
同时,我还学习了实验室的安全操作规程,确保实验过程中能够严格遵守。
2. 学习分子生物学检验技术在实习过程中,我学习了多种分子生物学检验技术,如聚合酶链反应(PCR)、基因测序、基因芯片等。
通过实际操作,我了解了这些技术在临床诊断和疾病研究中的应用,并掌握了实验操作要领。
3. 参与科研项目在实习期间,我参与了实验室的一个科研项目,研究某疾病的分子诊断方法。
在项目中,我负责部分实验操作,如样本提取、PCR扩增、电泳分析等,并协助导师分析实验数据。
通过参与项目,我提高了自己的实验能力和科研素养。
4. 参加培训和学术讨论为了拓宽知识面,提高自己的专业素养,我参加了实验室组织的培训和学术讨论。
通过培训,我学习了实验室质量控制、实验数据处理等知识。
在学术讨论中,我了解了最新的分子生物学研究进展,并与同事们交流了实验经验。
二、实习收获1. 提高了实验技能通过实习,我掌握了分子生物学实验室的基本操作技能,如样本提取、PCR扩增、电泳分析等。
这些技能为我今后从事相关领域的研究和工作打下了坚实基础。
2. 增强了科研能力参与科研项目的过程使我学会了如何设计实验、分析数据和撰写实验报告。
这些科研经验将对我今后的工作和学术发展产生积极影响。
3. 拓展了知识面实习期间,我了解了分子生物学在临床诊断和疾病研究中的应用,并学习了最新的研究进展。
这使我对分子生物学领域的知识有了更全面的了解。
4. 培养了团队合作精神在实习过程中,我与实验室的同事们共同完成各项任务,学会了团队合作和沟通。
pcrdna实验报告
PCR-DNA实验报告简介PCR-DNA是一种常用的分子生物学实验技术,可以通过扩增DNA片段来研究DNA序列。
本实验报告将详细介绍PCR-DNA实验的步骤和思路。
实验目的本实验的目的是通过PCR方法扩增特定的DNA片段,从而验证样本中的目标基因是否存在。
通过PCR-DNA实验,可以快速、准确地扩增出目标基因片段,为后续的基因分析和研究提供基础。
材料与方法1.样本准备:收集待测样本,如细胞、组织或DNA提取物。
2.引物设计:根据目标基因序列设计引物,确保引物与目标基因片段特异性结合。
3.PCR反应体系准备:按照设计的引物和待测样本的要求,准备PCR反应液,包括引物、缓冲液、DNA模板、酶和dNTPs等。
4.PCR扩增:将PCR反应体系置于热循环仪中,按照设定的PCR程序进行扩增反应,包括一系列的变温步骤。
5.PCR产物分析:将扩增产物用琼脂糖凝胶电泳进行分析,观察扩增片段的大小和纯度。
6.结果解读:根据电泳图结果,判断目标基因是否存在,并计算扩增产物的浓度。
步骤与思路步骤1:样本准备首先,我们需要收集待测样本。
样本可以是细胞、组织或DNA提取物,具体根据实验需求选择适当的样本类型,并按照相应的方法提取DNA。
步骤2:引物设计在进行PCR-DNA实验之前,我们需要设计引物。
引物是一种能够特异性结合目标基因序列的寡核苷酸链。
通过引物的特异性结合,可以确保扩增出目标基因片段而不产生非特异性扩增。
引物设计可以借助一些在线工具,如NCBI网站提供的Primer-BLAST等。
在设计引物时,需要考虑引物的长度、碱基组成、熔解温度等参数。
步骤3:PCR反应体系准备准备PCR反应体系时,需要按照设计的引物和待测样本的要求,将各种反应试剂按比例混合。
一般的PCR反应体系包括引物、缓冲液、DNA模板、酶和dNTPs 等。
确保反应体系中的每一个组分都处于适当的浓度范围。
步骤4:PCR扩增PCR扩增是整个实验的核心步骤。
分子生物学实习报告
一、实习目的本次分子生物学实习旨在通过实验操作,使学生掌握分子生物学的基本理论、基本技术和基本技能,提高学生的动手能力和实验操作技能,培养学生严谨的科研态度和良好的实验习惯。
二、实习时间2021年6月1日至2021年6月30日三、实习地点某高校分子生物学实验室四、实习内容1. DNA提取(1)实验原理:DNA提取是分子生物学实验的基础,主要目的是从细胞中提取纯净的DNA。
本实验采用酚-氯仿法提取DNA。
(2)实验步骤:①将细胞裂解,使细胞内容物释放出来;②加入酚-氯仿溶液,振荡混匀,使蛋白质和脂质等杂质溶解于酚相;③加入饱和NaCl溶液,使DNA沉淀;④离心,收集DNA沉淀;⑤用TE缓冲液溶解DNA,进行后续实验。
2. PCR扩增(1)实验原理:聚合酶链反应(PCR)是一种体外扩增特定DNA片段的方法。
本实验采用PCR技术扩增目的基因。
(2)实验步骤:①设计引物:根据目的基因的序列,设计一对引物;②配制PCR反应体系:包括模板DNA、引物、dNTPs、Taq聚合酶等;③进行PCR扩增:按照94℃预变性、60℃退火、72℃延伸的循环条件进行扩增;④琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。
3. DNA测序(1)实验原理:DNA测序是确定DNA序列的方法。
本实验采用Sanger测序法。
(2)实验步骤:①将PCR产物进行纯化,去除引物和dNTPs;②进行测序反应,包括PCR扩增和终止反应;③进行毛细管电泳分离,检测DNA序列。
五、实习心得1. 通过本次实习,我对分子生物学的基本理论和基本技术有了更深入的了解,提高了自己的实验操作技能。
2. 在实验过程中,我学会了如何设计实验方案、配制试剂、操作仪器等,为今后的科研工作打下了基础。
3. 实验过程中,我体会到严谨的科研态度和良好的实验习惯的重要性。
只有严格按照实验步骤进行操作,才能得到可靠的实验结果。
4. 在实验过程中,我学会了与同学合作,共同解决问题。
这对我今后的科研工作具有重要意义。
分子生物学检验室实习报告
实习报告一、前言在过去的三个月里,我有幸在分子生物学检验室进行实习。
在此期间,我不仅学到了分子生物学实验的方法和技术,还深刻体会到了实验室工作的严谨和细致。
本文将对我实习期间的学习和体会进行总结,以期对今后的学习和工作有所启发。
二、实习内容1. 实验技能的学习在实习期间,我参与了分子生物学实验室的日常工作和多个实验项目。
通过实习,我掌握了实验室的基本操作技能,如细胞的培养、DNA的提取、PCR技术的应用等。
同时,我还学会了使用各种分子生物学仪器,如PCR仪、凝胶成像仪、离心机等。
2. 实验项目的参与在实习期间,我参与了多个实验项目,如基因克隆、基因表达、基因突变检测等。
通过实际操作,我深入了解了实验原理和实验步骤,并学会了如何处理实验数据和撰写实验报告。
3. 实验室管理在实习期间,我了解了实验室的日常管理工作,包括实验室安全管理、实验耗材的采购和保管、实验室设备的维护等。
通过参与实验室管理,我认识到实验室工作不仅要注重实验技术的学习,还要关注实验室的运营和管理。
三、实习收获1. 提升了实验技能通过实习,我的分子生物学实验技能得到了很大的提升。
我学会了如何设计实验、如何处理实验数据、如何撰写实验报告。
这些实验技能对我今后的科研工作具有很大的帮助。
2. 增强了团队协作能力在实习期间,我与实验室的其他成员密切合作,共同完成各项实验任务。
通过团队协作,我学会了如何与他人沟通、如何协调工作、如何解决问题。
这些团队协作能力对我今后的职业生涯具有很大的意义。
3. 培养了对科研的兴趣实习期间,我深入了解了分子生物学的研究内容和前沿动态。
我发现自己对分子生物学的研究充满了兴趣,并决心将来继续深造,从事分子生物学方面的研究。
四、实习体会通过这次实习,我深刻体会到了实验室工作的严谨和细致。
在实验过程中,每一个步骤都关系到实验结果的准确性,因此必须严格按照实验规程进行操作。
同时,实验过程中可能会遇到各种问题,如实验失败、数据异常等,这时需要冷静分析问题,积极寻找解决办法。
分子生物学实验技术
《分子生物学实验技术》实验报告实验一碱裂解法小量提取质粒DNA一、实验原理在碱性环境中,细菌膜破裂释放内容物。
染色体DNA变性分开,而质粒DNA虽变性但仍处于缠绕状态。
将pH调至中性并有高盐存在及低温的条件下,染色体DNA、大分子量的RNA和蛋白质在SDS的作用下形成沉淀,而质粒DNA仍然为可溶状态。
通过离心,可除去大部分细胞碎片、染色体DNA、RNA及蛋白质,最后用酚、氯仿抽提纯化得到质粒DNA。
二、操作步骤主要步骤1.细菌的培养2.细菌的收集和裂解3.质粒DNA的分离和纯化4.质粒的鉴定具体操作如下:1. 取1.5 ml过夜菌液于EP管中,12 000 r/min离心1min,弃去上清液。
2. 加100 μl 溶液Ⅰ,剧烈震荡使菌体悬浮均匀,室温放置5min 。
3. 加200 μl 溶液Ⅱ(现配现用),轻柔颠倒混匀4~6次,室温放置5min 。
4. 加150μl预冷溶液Ⅲ,轻柔颠倒混匀4~6次,冰上放置10分钟。
5. 12 000 r/m离心10 分钟(如果上清液仍然浑浊,可将上清液移出,再次离心5分钟)。
6. 吸出上清液,加2.5倍体积的无水乙醇,混匀,室温放置10分钟,12 000r/min离心10分钟,沉淀DNA 。
7. 弃上清,挥干,所得DNA溶于30μlddH2O中,用于后续试验。
三、实验结果获取极少量白色固体,主要为DNA,也不排除有蛋白质等杂质,但是不影响后续实验的继续进行。
实验二氯化钙法进行质粒转化及筛选一、实验原理细菌处于0 ℃,在CaCl2低渗溶液中,菌体细胞膨胀成球形,DNA则与CaCl2形成抗Dnase的羟基-磷酸钙复合物粘附于细胞表面,经42 ℃短时间热冲击处理,促进细胞吸收DNA复合物,在丰富培养基上生长数小时后,球状细胞复原并分裂增殖,重组子的基因在被转化的细菌中得到表达,在选择性培养基平板上,可选出所需的转化子。
1. 氯化钙(二价钙离子)的作用:提高细胞壁(膜)的通透性。
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分子生物学实验院系:生命科学与技术学院专业:生物科学(基地)班级: 201101班学号:姓名:分子生物学基础实验分子生物学实验技术已成为生物化学及分子生物学以及相关学科院系教学科研不可缺少的一部分。
为提高学生在分子生物学技术方面的动手能力,生物技术综合实验室主要开设常用而基本的分子生物学实验技术。
它的内容包括质粒DNA的制备;DNA的重组;PCR基因扩增等等。
实验一质粒DNA的小量制备一、实验原理要把一个有用的外源基因通过基因工程手段,送进细胞中去进行繁殖和表达,需要运载工具,携带外源基因进入受体细胞的这种工具就叫载体(vector)。
载体的设计和应用是DNA体外重组的重要条件。
作为基因工程的载体必须具备下列条件:(1)是一个复制子,载体有复制点才能使与它结合的外源基因复制繁殖;(2)载体在受体细胞中能大量增殖,只有高复制率才能使外源基因在受体细胞中大量扩增;(3)载体DNA链上有1到几个限制性内切酶的单一识别与切割位点,便于外源基因的插入;(4)载体具有选择性的遗传标记,如有抗四环素基因(Tc r),抗新霉素基因(Ne r)等,以此知道它是否已进入受体细胞,也可根据这个标记将受体细胞从其他细胞中分离筛选出来。
细菌质粒具备上述条件,它是基因工程中常用的载体之一。
质粒(plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小在1~120kb之间,具有双链闭合环状结构的DNA分子,主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中。
质粒具有自主复制和转录能力,能使子代细胞保持它们恒定的拷贝数,可表达它携带的遗传信息。
它可独立游离在细胞质内,也可以整合到细菌染色体中,它离开宿主的细胞就不能存活,而它控制的许多生物学功能也是对宿主细胞的补偿。
质粒在细胞内的复制,一般分为两种类型:严密控制型(stringent control)和松弛控制型(relaxed control)。
前者只在细胞周期的一定阶段进行复制,染色体不复制时,它也不复制。
每个细胞内只含有1个或几个质粒分子。
后者的质粒在整个细胞周期中随时复制,在细胞里,它有许多拷贝,一般在20个以上。
通常大的质粒如F因子等,拷贝数较少,复制受到严格控制。
小的质粒,如ColE Ⅰ质粒(含有产生大肠杆菌素E1基因),拷贝数较多,复制不受严格控制。
在使用蛋白质合成抑制剂-氯霉素时,染色体DNA复制受阻,而松弛型ColEⅠ质粒继续复制12-16h,由原来20多个拷贝可扩增至1000-3000个拷贝,此时质粒DNA占总DNA的含量由原来的2%增加到40%-50%。
本实验分离提纯化的质粒pBR322、pUC19就是由ColE Ⅰ衍生的质粒。
所有分离质粒DNA的方法都包括三个基本步骤:培养细菌使质粒扩增;收集和裂解细菌;分离和纯化质粒DNA。
采用溶菌酶可破坏菌体细胞壁,十二烷基硫酸钠(SDS)可使细胞壁解,经溶菌酶和阴离子去污剂(SDS)处理后,细菌染色体DNA 缠绕附着在细胞壁碎片上,离心时易被沉淀出来,而质粒DNA则留在清液中。
用乙醇沉淀、洗涤,可得到质粒DNA。
质粒DNA的相对分子量一般在106-107范围内,如质粒pBR322的相对分子质量为2.8×106,质粒pUC19的相对分子质量为1.7×106。
在细胞内,共价闭环DNA(covalently closed circular DNA,简称cccDNA)常以超螺旋形式存在。
如果两条链中有一条链发生一处或多处断裂,分子就能旋转而消除链的张力,这种松弛型的分子叫做开环DNA(open circular DNA,简称ocDNA)。
在电泳时,同一质粒如以cccDNA形式存在,它比其开环和线状DNA的泳动速度快,因此在本实验中,自制质粒DNA在电泳凝胶中呈现3条区带。
二、实验目的1.掌握最常用的提取质粒DNA的方法和检测方法。
2.了解制备原理及各种试剂的作用。
三、实验材料和试剂材料:大肠杆菌E.coli,含pBR322质粒。
试剂:1.LB培养基:10g/L胰蛋白胨,5g/L酵母提取物,10g/L NaCl,用NaOH调pH至7.3左右。
如固体培养基则添加15g/L琼脂。
2.溶液Ⅰ(缓冲液):50 mmol/L葡萄糖,25mmol/LTris-HCl,10mmol/L EDTA。
灭菌后存放。
3.溶液Ⅱ(0.2mol/LNaOH(内含1%SDS)):预先配制1%SDS母液,临用前一天晚上加入0.2mol/LNaOH,4℃保存。
4.溶液Ⅲ(pH4.8乙酸钾溶液):5mol/L乙酸钾60mL、冰乙酸11.5mL、双蒸馏水28.5mL。
5.酚/氯仿液(V/V=1/1):酚为重蒸酚,配制时,先将氯仿中加入异戊醇,使其体积比为24:1,然后等量的加入重蒸酚,混匀,并用0.1mol/LTris-HCl (pH7.6)抽提几次以平衡这一混合物,于棕色瓶中存放,并在上面覆盖等体积的0.01 mol/LTris-HCl(pH7.6),4℃保存。
6.无水乙醇7.70%乙醇8.pH8.0 TE缓冲液:10mmol/LTris-HCl、1mmol/LEDTA,其中含RNA酶20μg/mL。
仪器:恒温培养箱、恒温摇床、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、台式高速离心机、台式小型振荡器、EP管(1.5mL微量离心管)、加样器(20uL~lmL)、吸头。
四、操作步骤(一)培养细菌将带有质粒pBR322的大肠杆菌接种在含50μg/mL氨苄青霉素(Amp)的LB 液体培养基中,37℃振荡培养过夜。
注意:添加Amp时,须待LB培养基冷却到50℃左右方可加入。
(二)从菌落中快速提取制备质粒DNA1.取1.4mL菌液置于1.5mL Ep管中,7500rpm离心1min。
2.弃上清,加入150μL GET缓冲液,在涡旋混合器上充分混匀,在室温下放置10min。
3.加入200μL新配制的0.2mol/L NaOH(内含1%SDS),加盖,颠倒(不要振荡)2~3次,使之混匀,冰上放置4min,最多不能超过5min。
4.加入150μL冰冷的乙酸钾溶液。
加盖后,颠倒数次使之混匀,冰上放置15min。
5.10000rpm离心5min,上清液吸至另一干净的1.5mL Ep中,如上清液浑浊则需重新离心一次。
6.于上清液中加等体积酚/氯仿液,振荡混匀,12000rpm离心2min,小心吸取上清液,转移至另一1.5mL Ep管中,注意勿将两液相中间的白色蛋白薄层吸出。
7.向上清液加入2倍体积无水乙醇,混匀,室温放置3min。
用离心机于10000rpm 离心5min。
倒去上清液。
8.用0.5mL 70%乙醇洗涤沉淀一次,10000rpm离心3min,除尽乙醇,室温自然干燥(将离心管倒置于一张纸巾上),备用。
9.用30uL含无DNA酶的胰RNase(20 ug/mL)的TE重新溶解DNA,置于4℃保存,供下午电泳使用。
这里因为要检测质粒是否提取成功以及提取质粒的浓度,故在此要进行一次电泳,下面为琼脂糖凝胶电泳的原理及方法:原理:根据DNA分子量不同,采用外加电场使其分开,用EB嵌入DNA分子后在紫外下显荧光。
而荧光强度正比于DNA的含量,如将已知浓度的标准样品表2-1作为电泳对照,就可以估计出待测样品的浓度。
电泳后的琼脂凝胶糖直接在紫外灯下拍照,只需要5-10ngDNA,就可以从照片上比较鉴别。
由于电泳时所用的样品量非常少,只要将浓度控制在几十纳克即可,所以在基因工程中经常被用做检测DNA样品。
表2-1 λDNA/ Hind Ⅲ中DNA片断总DNA含量为100%琼脂糖凝胶板的制备1.琼脂糖凝胶的制备称取1.0g琼脂糖,置于锥形瓶中,加入100mL TBE缓冲液,于电炉上加热,注意:防止溢出,由于琼脂糖较难溶解,如果水分损失较大,则补充一定量的蒸馏水,使其终浓度为1%。
2.胶板的制备将有机玻璃内槽洗净、晾干。
取胶带纸将有机玻璃内槽的两端边缘封好,形成一个边脚模子。
注意:将橡皮膏紧贴在有机玻璃内槽两端边上,不能留空隙。
将有机玻璃内槽置于水平位置,放好样品槽模板(一般称之为梳子),将冷却至65℃左右的琼脂糖凝胶,小心地倒在内槽上,控制灌胶速度,使胶液缓慢地展开,直到整个有机玻璃板表面形成均匀的胶层。
室温下静置1h左右,待凝固完全后,轻轻拔出样品槽模板,撕去胶带纸,胶板上即形成相互隔开的样品槽。
将有机玻璃内槽放入电泳槽中,加入0.5×TBE电泳缓冲液,以盖过胶板为宜。
胶板内的样品小槽3.加样用移液枪将上述样品分别加入胶板的样品小槽内,每次加完一个样品为了避免交叉污染,各样品用不同的枪头,以免造成限制酶被污染。
加样时,枪头不要插入胶板内,防止碰坏样品槽周围的凝胶面,每个样品槽的加样量不宜过多,本实验加样为10uL左右。
(每块胶板需点一个Marker,这里即为λDNA/ Hind Ⅲ)4.电泳加完样品后应立即通电,进行恒压电泳。
在低压条件下,线形DNA片段的迁移速度与电压成比例关系,为了获得电泳分离DNA片段的最大分辨率,电场强度不应高于5V/cm。
当溴酚蓝染料(蓝色)移动到距离胶板下沿约1~2cm处,停止电泳。
5.染色将电泳后的凝胶浸入EB染液中,进行染色以观察在琼脂糖凝胶中的DNA带。
染色20min后,用大量水冲洗。
6.观察在波长为254nm的紫外灯下,观察染色后的电泳凝胶。
DNA存在处显示出红色荧光条带。
用凝胶自动成像仪处理代替。
五、注意事项1.收集菌体提质粒前,培养基要去除干净,同时保证菌体在悬浮液中充分悬浮。
2.在添加溶液Ⅱ与溶液Ⅲ后溶液的混合一定要柔和,采用上下颠倒的方法,千万不能在旋转器上剧烈振荡。
其中加入溶液Ⅱ后,溶液变成澄清,并有黏性;加入溶液Ⅲ后,出现絮状沉淀。
3.苯酚具有腐蚀性,能造成皮肤的严重烧伤及衣物损坏,使用时应注意。
如不小心皮肤上碰到苯酚则应用碱性溶液、肥皂及大量的清水冲洗。
4.苯酚可以用于抽提纯化DNA,由于苯酚的氧化产物可以使核酸链发生断裂。
所使用的苯酚在使用前必须经过重蒸,且都必须用0.1mol/LTris-HCl (pH7.6)进行平衡。
所以取酚/氯仿/异戊醇时应取下层溶液,因为上层是Tris-HCl液隔绝空气层。
5.酚/氯仿/异戊醇抽提时,应充分混匀。
经酚/氯仿/异戊醇抽提后,吸取上清液时注意不要把中间的白色层吸入,其中含有蛋白质等杂质。
6.实验中,涉及酚/氯仿溶液的操作要格外小心,而且与之接触的吸头、Ep管,全部弃用,不回收。
7.有些质粒本身可能在某些菌种中稳定存在,但经过多次移接有可能造成质粒丢失。
因此不要频繁转接,每次接种时应挑单菌落。
六、实验结果与分析提取质粒DNA后,经琼脂糖凝胶电泳,图谱如下:图中M为Marker,4号为本人所提取的质粒DNA凝胶电泳的检测图,本人所用的质粒为pEGFP-N3。