超氧化物歧化酶的生产共23页
实验三超氧化物歧化酶SOD的提取及活性测定
六、本实验教学内的深化和拓展
通过本实验的学习，使学生明确实验的意义，联 系实际，使学生了解本实验的应用。明确植物 SOD与动物SOD的区别，了解植物SOD的优势。
七、思考题，完成实验报告
1 什么是分段盐析，为什么要分段盐析？ 2 SOD有哪些用途？
三、材料与试剂
1. 材料
玉米籽粒
2. 主要试剂 1、0.05mol/L磷酸缓冲液（pH7.8）,500mL 2、氯仿-乙醇混合液：氯仿:无水乙醇=3:5 3、丙酮：用前需预冷至4-10℃ 4、0.05mol/L碳酸盐缓冲液（pH10.2） 5、0.1mol/LEDTA溶液
2.3 仪器 恒温水浴锅、 冷冻高速离心机、 可见分光光度计、 研钵、玻棒、烧杯、量筒，等。
3、除杂蛋白：上清液加入0.25体积的氯仿乙醇混合液搅拌15min，5000rpm离心 15min，得到的上清液为粗酶液。
4、SOD的沉淀分离：粗酶液中加入等体积 的冷丙酮，搅拌15min，5000rpm离心 15min，得SOD沉淀。将SOD沉淀溶于 0.05mol/L磷酸缓冲液（pH7.8）中，于5560℃热处理15min，得到SOቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ酶液。
3.2 SOD活性测定
试剂（mL）
空白对照管 样品管
碳酸缓冲液
5.0
5.0
EDTA溶液
0.5
0.5
蒸馏水
0.5
—
样品液
—
0.5
混合均匀，在30℃水浴中预热5min，测定
OD480
3.3 结果计算
总酶活力=酶液总体积X稀释倍数/抑制 50%的酶液量X样品重
五、本实验教学内容的重点和难点
重点：粗提液的获得玉米SOD的提取 难点：提取条件的控制
超氧化物歧化酶的生产
项目二超氧化物歧化酶的生产超氧化物歧化酶（英语：Superoxide dismutase，简称SOD）是一种能够催化超氧化物通过歧化反应转化为氧气和过氧化氢的酶。
它广泛存在于各类动物、植物、微生物中，是一种重要的抗氧化剂，保护暴露于氧气中的细胞。
SOD的概况：1.超氧化物歧化酶（SOD）的概念：超氧化物歧化酶是一种广泛存在于动物、植物、微生物中的金属酶，是生物体内抗氧化酶系中主要成员之一。
2.SOD的分类按其结合的金属离子（即金属辅基的成分）可分为：（1）Fe-SOD（2）Mn-SOD（是SOD酶分子内所含金属离子Mn2+）（3）Cu-Zn-SOD（铜．锌超氧化物）3.SOD的生产：仪器、试剂和材料：-研钵，石英砂，烧杯（50mL），玻璃棒，pH计，冷冻离心机，离心管-新鲜蒜瓣-0.05mol/L磷酸缓冲溶液（pH7.8），氯仿-乙醇混合液（氯仿-无水乙醇3：5），丙酮（用前预冷至-10℃）。
操作步骤：整个操作过程在0到5℃条件下进行。
（1）SOD酶的提取称取5g大蒜蒜瓣，加入石英研磨破碎细胞后，加入0.05mol/L的磷酸缓冲液（Ph7.8）15ml，继续研磨20min，使SOD酶充分溶解到缓冲液中，然后6000r/min冷冻离心15min，弃沉淀，取上清液。
（2）去除杂蛋白上清液中加入0.25倍体积的氯仿-乙醇混合液搅拌15min，6000r/min离心15min，弃去沉淀，得到的上清液即为粗酶液。
（3）SOD酶的沉淀分离粗酶液中加入等体积的冷丙酮，搅拌15min，6000/min离心15min，得到SOD酶沉淀。
（4）将沉淀溶入pH7.8，0.05mol/L的磷酸缓冲液5mL中，然后6000r/min离心15min，放弃沉淀，取上清液，用凝胶sephacylS-200进行纯化，然后超滤浓缩。
（5）用紫外分光光度计测定浓液的蛋白含量（6）将浓缩冷冻干燥后即得成品。
4.SOD酶的检验：原理：连苯三酚在碱性条件下，能迅速自氧化，释放出氧气，生成带色的中间产物。
超氧化物歧化酶资料
超氧化物歧化酶超氧化物歧化酶，别名肝蛋白、奥谷蛋白，简称：SOD。
SOD是一种源于生命体的活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。
对人体不断地补充SOD具有抗衰老的特殊效果。
超氧化物歧化酶是1938年Marn等人首次从牛红血球中分离得到超氧化物歧化酶开始算起，人们对SOD的研究己有七十多年的历史。
1969年McCord等重新发现这种蛋白，并且发现了它们的生物活性，弄清了它催化过氧阴离子发生歧化反应的性质，所以正式将其命名为超氧化物歧化酶。
SOD（超氧化物歧化酶）是国际上公认的具有人体垃圾“清道夫”、“抗衰王”、“美容骄子”之称，是对抗“百病之源”活性氧自由基最有力的物质，是近半个世纪以来社会科学界、医学界、生物界最举世瞩目的价值发现，它的研究与发展代表着生物医药的高科技技术发展的前沿，在科技成果及学术领域占据重要的国际地位。
SOD（超氧化物歧化酶）被国家列入生物医药“国家十一五规划”重点项目。
2011年是“国家十二五规划”的第一年，SOD行业将再次跻身国家当前优先发展的高科技产业化项目，标志着中国健康产业链SOD新兴行业的崛起, 使全人类迈入健康经济时代。
利用超氧化物歧化酶（SOD）产业化建设，一方面可架构生物医药、保健食品、日用美容化妆品、化工化学、农业五大版块经济支柱的绿色产业链循环经济圈发展。
另一方面打造SOD科技应用成果转化的孵化器平台引领生化医药美容化妆品食品等行业的新型健康原料的应用，有利于促进再生资源利用，产生巨大的社会效益和经济效益。
一、反应机理超氧化物岐化酶,它催化如下的反应：2O2-+2H+→H2O2+O2O2-称为超氧阴离子自由基，是生物体多种生理反应中自然生成的中间产物。
它是活性氧的一种，具有极强的氧化能力，是生物氧毒害的重要因素之一。
SOD是机体内天然存在的超氧自由基清除因子，它通过上述反应可以把有害的超氧自由基转化为过氧化氢。
尽管过氧化氢仍是对机体有害的活性氧，但体内的过氧化氢酶（CAT）和过氧化物酶（POD）会立即将其分解为完全无害的水。
超氧化物歧化酶(SOD)的生产
超氧化物酶（SOD）的生产SOD（超氧化物歧化酶）是一种源于生命体的活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。
对人体不断地补充SOD具有抗衰老的特殊效果。
超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase, EC1.15.1.1, SOD）是1938年Marn等人首次从牛红血球中分离得到超氧化物歧化酶开始算起，人们对SOD 的研究己有七十多年的历史。
1969年McCord等重新发现这种蛋白，并且发现了它们的生物活性，弄清了它催化过氧阴离子发生歧化反应的性质，所以正式将其命名为超氧化物歧化酶。
它催化如下的反应：202+2H+→H2O2+O2O2-称为超氧阴离子自由基，是生物体多种生理反应中自然生成的中间产物。
它是活性氧的一种，具有极强的氧化能力，是生物氧毒害的重要因素之一。
SOD是机体内天然存在的超氧自由基清除因子，它通过上述反应可以把有害的超氧自由基转化为过氧化氢。
尽管过氧化氢仍是对机体有害的活性氧，但体内6性极强的过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)会立即将其分解为完全无害的水。
这样，三种酶便组成了一个完整的防氧链条。
一、实验目的a．掌握有机溶剂沉淀法的原理和基本操作。
b．掌握SOD酶提取分离的一般步骤。
二、实验原理超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)是一种具有抗氧化、抗衰老、抗辐射和消炎作用的药用酶。
它可催化超氧负离子(O2-)进行歧化反应，生成氧和过氧化氢。
大蒜蒜瓣和悬浮培养的大蒜细胞中含有较丰富的SOD，通过组织或细胞破碎后，可用pH7.8的磷酸缓冲溶液提取出来。
由于SOD不溶于丙酮，可用丙酮将其沉淀析出。
有机溶剂沉淀的原理是有机溶剂能降低水溶液的介电常数，使蛋白质分子之间的静电引力增大。
同时，有机溶剂的亲水性比溶质分子的亲水性强，它会抢夺本来与亲水溶质结合的自由水，破坏其表面的水化膜，导致溶质分子之间的相互作用增大而发生聚集，从而沉淀析出。
超氧化物歧化酶的制备
超氧化物歧化酶（SOD）的制备超氧化物歧化酶，简称SOD（Super Oxide Dismutase），是一种广泛存在于动、植物及微生物中的金属酶，至少可分为三种类型：第一种类型-Cu·Zn-SOD，呈蓝绿色，主要存在于真核细胞的细胞浆内，分子量在32000左右，由两个亚基组成，每个亚基含一个铜和一个锌。
第二种类型-Mn-SOD，呈粉红色，其分子量随来源不同而异。
来自原核细胞的分子量约为4000，由两个亚基组成，每个亚基各含一个锰；来自真核细胞线粒体的-Mn-SOD，由4个亚基组成，分子量约为80000。
第三种类型-Fe-SOD，呈黄色，只存在于真核细胞中，分子量在38000左右，由两个亚基组成，每个亚基各含一个铁。
此外，在牛肝中还存在一种-Co·Zn-SOD。
自从1973年Weisiger等在鸡肝中发现二种SOD以来，至今已采用了各种分离及分析方法，成功地从各种动物肝脏及血液中，分离纯化了SOD。
同时发现SOD的存在可能与机体衰老、肿瘤发生、自身免疫性疾病和辐射防护有关。
目前临床上主要用于延缓人体衰老，防止色素沉着，消除局部炎症，特别是治疗风湿性关节炎、慢性多发性关节炎及放射治疗后的炎症，无抗原性，毒副作用较小，是很有临床价值的治疗酶。
SOD不仅在临床上大显身手，而且近年来又被广泛的应用于日用化工行业。
含有SOD的化妆护肤品，对抗衰老及去除脸面雀斑等有显著作用。
添加SOD的化妆护肤品倍受女士的青睐，其产品具有很强的竞争力。
如市场上销售的奥琪、大宝、紫罗兰、永芳等高级护肤化妆品，都因添加了SOD而成为抢手货。
随着SOD被广泛应用于护肤霜、洗面奶、香皂等领域及活性氧、疾病诊断和抗辐射等方面的研究，SOD将成为广大药厂和日用化工厂的重要原料。
目前我国大规模生产SOD 厂家屈指可数，市场需求量大，在今后一段时间内供应将趋紧，因此充分利用动物废弃物，生产SOD是大有发展前途的。
（一）原料及试剂：1、牛血或猪血：动物血液一定要保证新鲜，无污染。
超氧化物歧化酶生产方法
超氧化物歧化酶生产方法(总3页)--本页仅作为文档封面，使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--紫草种籽超氧化物歧化酶提取方法：属于生物工程领域，涉及一种紫草种籽ＳＯＤ及其用提取紫草种籽油后的残渣为原料，用生物工程装置提取紫草种籽ＳＯＤ的方法，迄今为止紫草种籽是植物中ＳＯＤ含量最高、质量最好、最有提取价值的唯一原料，含量为２０万Ｕ／公斤种籽，是用任何动物血提取的ＳＯＤ所不能比拟的，创下了国内外唯一的用植物提取ＳＯＤ的记录，不仅填补了国内外空白，在科学研究上也是一个重大突破，它将在人类的延年益寿、防衰抗皱、抗紫外线辐射、清除人体内氧自由基保证身体健康上做出巨大的贡献。
超氧化物歧化酶耐高温、不失活的制备方法：该方法是在提取的固体粉末状超氧化物歧化酶中加入２—８％固体状保护剂，该方法是将它们按上述比例混匀后再进行冻干处理。
该技术保证了添加超氧化物歧化酶的产品，如化妆品、口服液、啤酒、牛奶等等中的超氧化物歧化酶酶活力的稳定性，并扩充了产品开发和应用范围，相对保证了含超氧化物歧化酶的产品在高温工艺中及常温储存下不易变质。
从鸡雏胴体中提取超氧化物歧化酶的方法：取雏鸡胴体将其绞碎、浸泡、过滤、离心，将上清液在一定时间和温度控制下，加入丙酮提取超氧化物歧化酶，本发明用鸡场孵化鸡雏淘汰的蛋用公雏鸡胴体为原料，变废为宝产生高附加值，雏鸡与人无共患病，避免造成如牛、羊、猪血来源的污染，其工艺简单、产率高、活性好、利润高，并可提取一系列副产物，如表皮生长因子、精细蛋白、氨基酸等，为大批量生产超氧化物歧化酶开辟了广阔的前景。
重组人源锰超氧化物歧化酶的制备工艺：属于生物工程技术领域，其特点是先进行工程菌扩增，收集菌体，然后将菌体裂解，加热处理后离心取可溶部分，经离子交换柱层析纯化。
本发明具有工艺流程简便、ＳＯＤ半衰期长、质量稳定、单位成本低等特点，产品不仅可用于化妆品、保健品等民用领域，更适用于医疗领域。
超氧化物歧化酶(SOD)简介课件
SOD抑制剂的研究
寻找和设计能够抑制SOD活性的小分子 或大分子物质，用于研究SOD在生物体 内的功能和作用机制。
VS
SOD激活剂的研究
寻找和设计能够提高SOD活性的小分子 或大分子物质，用于抗氧化应激和治疗相 关疾病的研究。
05
SOD的应用和展望
SOD在医学领域的应用
疾病诊断
超氧化物歧化酶(SOD)水平可以 作为某些疾病的诊断指标，如癌
妆品等领域的应用。
新型SOD的研发
通过基因工程和蛋白质工程技术 ，研发具有特殊性质的新型SOD ，如热稳定型、高活性型等，以
满足不同领域的需求。
THANKS
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超氧化物歧化酶(sod)简介课 件
目 录
• SOD的概述 • SOD的生物学功能 • SOD与疾病的关系 • SOD的检测和实验技术 • SOD的应用和展望
01
SOD的概述
SOD的定义
总结词
超氧化物歧化酶（SOD）是一种生物活性物质，具有抗氧化应激和保护细胞免 受损伤的重要功能。
详细描述
SOD是一种金属酶，其活性与金属离子（如铜、锌）有关。它能够催化超氧阴 离子自由基发生歧化反应，生成氧气和过氧化氢，从而消除超氧阴离子自由基 的毒性。
参与免疫反应
SOD在免疫反应中发挥重要作用，能够影响炎症反应和细 胞凋亡等过程。SOD能够清除超氧阴离子等自由基，抑制 炎症细胞的活化和聚集，从而减轻炎症反应。
同时，SOD能够抑制细胞凋亡和坏死，保护细胞免受损伤 。在感染和组织损伤等情况下，SOD的表达水平会升高， 有助于抵抗病原体和促进组织修复。
症、心血管疾病等。
药物治疗
SOD可以作为药物载体，用于传递 药物到靶部位，提高药物的疗效和 减少副作用。
超氧化物歧化酶SOD的生产
②0.1mol/L盐酸: 取8.6(9)ml浓盐酸，稀释至 1000ml
③5 0毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶 液 19.9_毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100 毫升。
• (保存温度: 常温密封避光保存)
• 测定步骤
1、 称取6g样品，加于现在冰箱中放置的缓冲液 60ml(样品的10倍，视情况定)，在冰浴中研磨成 匀浆，四层纱布过滤，滤液经4000r/min 离心 20min,取上清液用于酶活测定。
• 2.SOD的分类 • 按其结合的金属离子可分为Fe-SOD、Mn-SOD、
CuZn-SOD三种
3.SOD的理化性质 3.1 SOD对氰化物和H2O2的敏感性 3.2 SOD的吸收光谱特性 3.3 SOD稳定性及影响因素
4.SOD的作用
1、抗氧化 2、预防慢性病及其并发症 3、抗衰老 4、抗疲劳 5、化疗副作用的消除剂 6、避免手术的二次伤害 7、化解妇女的氧化压力危机
抗氧化抗腐蚀的优良性能。以 SOD为主要成份的
产品风靡世界，引发了化妆品历史上的一场革命，
使人类永葆青春美丽梦想成真；
•
4. 用作保健食品、饮料、如SOD糖、SOD
口服液、SOD干啤等都非常畅销! 在饮料、糖果、
糕点等食品中加入SOD既可利用其抗腐蚀性延长
保质期，又可调节人体内分泌系统。
• SOD被视为生命科技中最具神奇魔力的 酶人体内的垃圾清道夫。 SOD是氧自由基
二.SOD的运用
• 1．药物类，主要集中在炎症病患者，尤其治疗类 风湿关节炎、慢性多发性关节炎、心肌梗塞、心 血管病、肿瘤患者以及放射性治疗炎症病患者；
•
2．用于生化制药，作为一种生化酶制剂，广
泛应用于临床和科研上，具有极强的抗衰老，抗
实训报告 超氧化物歧化酶
超氧化物歧化酶(SOD)的生产（确定稿）一、实训名称超氧化物歧化酶（SOD）的制备二、实验原理超氧化物歧化酶（SOD）是一种具有抗氧化、抗衰老、抗辐射和消炎作用的药用酶。
它可催化超氧负离子（O 2-）进行歧化反应，生成氧和过氧化氢。
大蒜蒜瓣和悬浮培养的大蒜细胞中含有较丰富的SOD，通过组织或细胞破碎后，可用pH7.8磷酸缓冲液提取出。
由于SOD不溶于丙酮，可用丙酮将其沉淀析出。
植物叶片在衰老过程中发生一系列生理生化变化，如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低及内源激素平衡失调等。
这些指标在一定程度上反映衰老过程的变化。
近来大量研究表明，植物在逆境胁迫或衰老过程中，细胞内自由基代谢平衡被破坏而有利于自由基的产生。
过剩自由基的毒害之一是引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。
由于超氧自由基（O）为不稳定自由基，寿命极短，测定SOD活性一般为间接方法。
并利用各种呈色反应来测定SOD的活力。
核黄素在有氧条件下能产生超氧自由基负离子O，当加入NBT后，在光照条件下，与超氧自由基反应生成单甲月替（黄色），继而还原生成二甲月替，它是一种蓝色物质，在560nm波长下有最大吸收。
当加入SOD时，可以使超氧自由基与H+结合生成H2O2 和O2，从而抑制了NBT光还原的进行，使蓝色二甲月替生成速度减慢。
通过在反应液中加入不同量的SOD酶液，光照一定时间后测定560nm波长下各液光密度值，抑制NBT光还原相对百分率与酶活性在一定范围内呈正比，以酶液加入量为横坐标，以抑制NBT光还原相对百分率为纵坐标，在坐标纸上绘制出二者相关曲线，根据SOD抑制NBT光还原相对百分率计算酶活性。
找出SOD抑制NBT光还原相对百分率为50%时的酶量作为一个酶活力单位（U）。
三、实验目的1、学习超氧物提取物的分离方法。
2、通过大蒜细胞SOD的提取与分离。
3、学习和掌握蛋白质和酶的提取与分离的基本原理和操作方法四、实验试剂与器材1、实验试剂：大蒜蒜瓣、0.05 mol/L磷酸钠盐缓冲液（PH 7.8）、0.05 mol/L磷酸钾盐缓冲液（PH 8.3）、0.05 mol/L邻苯三酚（100ml）、0.01 mol/L浓盐酸（100ml）、氯仿、乙醇、丙酮（冷）、硫酸铵。
超氧化物歧化酶课件
政府机构
如美国国立卫生研究院（NIH） 、欧洲食品安全局（EFSA）等， 发布有关超氧化物歧化酶的科学
研究和政策指点。
超氧化物歧化酶的获取途径
学术图书馆
许多学术图书馆提供在线访问上述数据库和期刊 ，供学者和研究者查阅。
订阅服务
一些机构和个人提供订阅服务，定期推送关于超 氧化物歧化酶的最新研究进展和动态。
超氧化物歧化酶能够减轻氧化应激对线粒体的影响，维持线粒体功能和能量代 谢的正常进行。
抑制炎症因子的释放
超氧化物歧化酶能够抑制炎症因子的释放，减轻炎症反应对组织的损伤。
参与免疫反应
调节免疫细胞的活性
超氧化物歧化酶能够调节免疫细胞的活性，促进免疫细胞的 增殖和分化，增强机体的免疫力。
抑制过敏反应
超氧化物歧化酶能够抑制过敏反应的产生，减轻过敏症状。
05 超氧化物歧化酶的资源与获取途径
超氧化物歧化酶的资源
学术数据库
如PubMed、ScienceDirect等 ，提供大量关于超氧化物歧化酶
的研究论文和综述。
学术期刊
如《Free Radical Biology & Medicine》、《Antioxidants & Redox Signaling》等，专门 刊载抗氧化和自由基相关研究。
糖尿病
• 超氧化物歧化酶的活性降低，导致胰岛素抵抗和 胰岛细胞受损，引发糖尿病。
衰老相关疾病
• 超氧化物歧化酶的活性降低，导 致细胞损伤和老化，引发各种衰 老相关疾病，如皮肤松弛、白内 障等。
04 超氧化物歧化酶的检测和实验研究
超氧化物歧化酶的检测方法
酶联免疫吸附法（ELISA）
01
利用抗体与酶的结合，通过酶促反应显色来检测超氧化物歧化
超氧化物歧化酶(SOD)
工艺流程
酵母泥
洗涤 灭菌 酵母菌复壮 SOD提取
•
酵母培养基 •
SOD纯化
实验过程
• 啤酒酵母的预处理 • 酵母的复壮培养 • 酵母SOD的提取
• SOD纯化
酵母培养基配方
葡萄糖8% 蛋白胨1% 酵母膏1% 蒸馏水 1000ml
121℃灭菌20min
按30％ห้องสมุดไป่ตู้种量接入 经过洗涤后的酵母
恒温摇床培养 28℃140r/min 2h
妆品等方面的应用将更加广泛。
从众多研究者的研究中我们可以得出，微生 物类群SOD含量的基本规律是：革兰氏阳性菌和革 兰氏阴性菌的SOD含量没有明显差异，放线菌和细 菌的SOD 含量没有明显的差异，真核微生物的SOD 含量一般高于原核微生物，好氧微生物的SOD 含 量显著高于厌氧微生物。
鉴于SOD在微生物中的含量的分布，
常用以下七种SOD高产菌株进行研究。
超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase， SOD)是一种生物体防御氧化损伤的、对机体具有
显著保护作用的生物酶，它广泛分布于动物、植 物与微生物体内。由于SOD具有清除体内O2-的能 力，且能较好地抵御氧自由基和基他氧化物自由 基对细胞质膜的毒性，维持细胞正常的生理代谢， 所以其在机体保护方面起着重要作用，也因此SOD 被广泛应用于医药、食品和化妆品工业，作为抗 衰老、抗炎症、治疗自身免疫疾病的药品以及食 品、化妆品的添加剂等，被专家称为21世纪最有 前途的药用酶。
扩大培养， 得到含SOD的湿菌体
返回
每1 g酵母湿细胞 中加入9 mL异丙醇
浸泡120 min 抽滤除去溶剂
SOD粗提液
搅拌120min 离心除去菌体
加入三倍体积的50mmol/L 磷酸钾缓冲液（pH7.0）
超氧化物歧化酶
超氧化物歧化酶
超氧化物歧化酶Orgotein 超氧化物歧化酶Orgotein (Superoxide Dismutase, SOD)，别名肝 SOD)， 蛋白、奥谷蛋白，简称：SOD。SOD是一种源于生命体的活性 蛋白、奥谷蛋白，简称：SOD。SOD是一种源于生命体的活性 物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。对人 体不断地补充SOD具有抗衰老的特殊效果。超氧化物歧化酶（ 体不断地补充SOD具有抗衰老的特殊效果。超氧化物歧化酶（ Superoxide Dismutase, EC1.15.1.1, SOD）是1938年Marn等人首 SOD） 1938年Marn等人首 次从牛红血球中分离得到超氧化物歧化酶开始算起，人们对 SOD的研究己有七十多年的历史。1969年Mc9年McCord等重新发现这 种蛋白，并且发现了它们的生物活性，弄清了它催化过氧阴离 子发生歧化反应的性质，所以正式将其命名为超氧化物歧化酶 。
超氧化物歧化酶
④．抗疲劳 过多的自由基在体内残存， 就犹如毒素蓄积体内一样，会让人：容易疲劳、厌倦 、注意力不集中、常常昏昏沉沉、打哈欠，SOD-Like对上班族熬夜加班，学生应付考 、注意力不集中、常常昏昏沉沉、打哈欠，SOD-Like对上班族熬夜加班，学生应付考 试所产生的疲劳，在提振精神及集中注意力方面成效显著，有助于工作绩效的提升， 及考试成绩的进步。 ⑤．化疗副作用的消除剂 接受化疗的癌症病患体内的抗氧化能力会大大地降低，万一低到某个程度，自由 基就会损害细胞、黏膜、五脏六腑、脑、中枢神经等．所以癌症患者应及时补充抗氧 化剂来维持好体力。日本厚生省与美国癌症中心(NCI)亦建议使用抗氧化剂来预防癌症 化剂来维持好体力。日本厚生省与美国癌症中心(NCI)亦建议使用抗氧化剂来预防癌症 或治疗因[氧自由基] 或治疗因[氧自由基]破坏细胞所引起的病变。降低抗癌药物所引起的如呕吐，食欲不振 、掉发等副作用。 ⑥．避免手术的二次伤害 手术会引起大量自由基，故建议手术前后口服抗氧化剂来迅速恢复体力加速伤口 复原。 ⑦．化解妇女的氧化压力危机 SOD被视为生命科技中最具神奇魔力的酶人体内的垃圾清道夫。 SOD是氧自由基 SOD被视为生命科技中最具神奇魔力的酶人体内的垃圾清道夫。 SOD是氧自由基 的自然天敌，是机体内氧自由基的头号杀手，是生命健康之本。全球118位科学家发表 的自然天敌，是机体内氧自由基的头号杀手，是生命健康之本。全球118位科学家发表 联合声明：自由基是百病之源，SOD是健康之本。体内的SOD活性越高，寿命就越长 联合声明：自由基是百病之源，SOD是健康之本。体内的SOD活性越高，寿命就越长 。
超氧化物歧化酶的生产
4、SOD的沉淀分离 SOD的沉淀分离 将上述粗酶液加入等体积的冷丙酮，搅拌 15min，5000r/min离心15min，得SOD沉淀。 15min，5000r/min离心15min，得SOD沉淀。 将SOD沉淀溶于0.05mol/L pH7.8的磷酸缓冲 SOD沉淀溶于0.05mol/L pH7.8的磷酸缓冲 液中，于55~60摄氏度热处理15min，离心 液中，于55~60摄氏度热处理15min，离心 去掉沉淀，得到SOD酶液。 去掉沉淀，得到SOD酶液。 将上述提取液、粗酶液和酶液分别取样，测 定各自的SOD活力。 定各自的SOD活力。
五、实验步骤
1、组织破碎 称取5g左右大蒜蒜瓣，置于研磨器中研磨，使组织 称取5g左右大蒜蒜瓣，置于研磨器中研磨，使组织 破碎。 2、SOD的提取 SOD的提取 将上述破碎的组织，加入2~3倍体积的0.05mol/L 将上述破碎的组织，加入2~3倍体积的0.05mol/L pH7.8的磷酸缓冲液，继续研磨搅拌20min，使 pH7.8的磷酸缓冲液，继续研磨搅拌20min，使 SOD充分溶解到缓冲液中，然后在5000r/min下， SOD充分溶解到缓冲液中，然后在5000r/min下， 离心15min，去掉沉淀，得提取液。 离心15min，去掉沉淀，得提取液。 3、除杂蛋白 提取液加入0.25倍体积的氯仿— 提取液加入0.25倍体积的氯仿—乙醇混合溶剂搅拌 15min，5000r/min离心15min，去杂蛋白沉淀，得 15min，5000r/min离心15min，去杂蛋白沉淀，得 粗酶液。
超氧化物歧化酶
谢谢观赏
三、实验器材
研钵，石英砂，烧杯（50ml） 研钵，石英砂，烧杯（50ml）,玻璃棒， 冷冻离心机，离心管，pH计。 冷冻离心机，离心管，pH计。
超氧化物歧化酶的生产技术
超氧化物歧化酶的生产技术概述超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，缩写为SOD）是一种广泛存在于生物体中的酶，具有重要的生理功能。
它通过将超氧阴离子（O2-）转化为氧分子（O2）和氢氧离子（H2O2），起到抗氧化和抗炎作用。
在工业应用和科学研究中，人们对SOD的生产技术进行了深入研究和开发。
本文将介绍超氧化物歧化酶的生产技术，主要包括酶源的选择、发酵条件的优化以及酶的提取和纯化过程。
酶源的选择超氧化物歧化酶广泛存在于动、植物以及微生物等生物体中。
不同生物体中的SOD具有不同的特点和催化活性，因此在生产过程中需要根据需求选择合适的酶源。
常用的酶源包括黄豆、大豆、绿豆等植物，以及人体组织中的淋巴细胞、红细胞和肝细胞等。
此外，一些微生物如大肠杆菌、酵母等也可以作为SOD的酶源。
在选择酶源时，需要考虑生产成本、酶的活性以及生物安全性等因素，综合评估选择合适的酶源。
发酵条件的优化超氧化物歧化酶的生产通常借助于发酵技术，通过培养和扩增酶源生物体，使其表达和产生更多的SOD。
为了提高酶的产量和活性，需要对发酵条件进行优化。
1.培养基选择：根据酶源的不同，选择适宜的培养基组分和配方。
常用的培养基包含碳源、氮源、矿质盐和缓冲剂等。
其中，添加适量的辅助因子如镁离子、重金属离子等可提高发酵效果。
2.发酵温度和pH值：适宜的发酵温度和pH值能够促进酶的生长和表达。
常见的发酵温度为25°C-37°C，pH值为6.0-8.0。
需要根据酶源的特性进行调节。
3.氧气供应：超氧化物歧化酶是一种依赖氧气的酶，因此需要提供足够的氧气供应。
常用的发酵方式包括摇瓶培养和槽式发酵，通过控制搅拌速率和通气速率等参数来满足氧气需求。
4.发酵时间：合理控制发酵时间有助于提高SOD的产量和活性。
通常情况下，发酵时间在24-72小时之间。
酶的提取和纯化在获得发酵液后，需要对中含有SOD的细胞或液体进行酶的提取和纯化，以提高酶的纯度和活性。
超氧化物歧化酶(SOD)的生产技术
超氧化物歧化酶(SOD)的生产技术引言超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase, SOD）是一种重要的酶类物质，可以将细胞内的超氧自由基转化为氢过氧化物和氧气，起到保护细胞免受氧化损伤的作用。
SOD的生产技术对于维护细胞的正常功能具有重要意义。
本文将介绍SOD的生产技术，以及常用的生产方法和工艺。
SOD的生产方法SOD的生产方法可以分为化学合成和生物合成两大类。
化学合成是通过化学反应合成SOD，这种方法简单但成本较高，并且产物纯度较低。
生物合成是利用生物体内的细胞合成SOD，这种方法具有高效、环保、产物纯度高等优点。
常用的SOD生产工艺1.发酵法：发酵法是生产SOD的常用工艺之一。
通过选用高效的SOD产生菌株，如大肠杆菌、曲霉等，将其加入到适宜的培养基中进行培养和发酵。
在培养过程中，要控制适宜的温度、pH值和培养时间等因素，以促进菌体的生长和SOD的合成。
2.超声波法：超声波法是一种物理方法，通过超声波的作用将SOD从生物源中提取出来。
这种方法操作简便，提取效率高，但需要使用专门的超声波提取设备。
3.冷冻法：冷冻法是利用冷冻技术将SOD从细胞中释放出来。
将含有SOD的细胞悬浮液经过低温冷冻处理，然后迅速解冻，细胞被破坏后，SOD从细胞中释放出来。
这种方法可用于大规模的SOD生产。
SOD生产技术的优化与创新为了提高SOD的产量和纯度，越来越多的研究人员致力于优化和创新SOD的生产技术。
以下是一些值得关注的技术和方法：1.基因工程技术：通过基因工程技术，可以将SOD的基因导入到高效表达的宿主中，从而实现大规模的SOD产生。
这种方法可以大大提高SOD的产量和纯度，并且可以对SOD进行结构与功能的改良。
2.提高发酵条件：通过调整发酵条件，如温度、pH值、培养基成分等，可以促进SOD的产生和合成。
同时，研究人员还可以通过优化发酵过程中的氧气供应、搅拌速度等参数，提高SOD的产量。
3.组合生产技术：将不同的SOD产生菌株或基因组合在一起，可以实现多种SOD的同时产生。
补充——超氧化物歧化酶完整版
超氧化物歧化酶（超氧化物歧化酶（SOD SOD SOD））概述超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase ）简称SOD ，是一种广泛存在于自然界的生物酶，按所含金属种类不同可分为铜锌SOD 、锰SOD 和铁SOD 三种。
现在市场上出售的SOD 大多都从血液中提取，属铜锌SOD （Cu ，Zn-SOD ）。
Cu ，Zn-SOD 分子由两个亚基组成，每个亚基含有一个铜离子和一个锌离子，分子量在32000左右。
SOD 是一种生物酶，其化学本质是蛋白质，国内外对其毒性进行了广泛的研究。
实验表明，它对人体无毒副作用，是一种纯天然的生物活性物质。
SOD 的抗氧化作用1969年发现SOD 能催化清除超氧阴离子自由基的反应。
自由基是具有不配对价电子的原子或原子团,分子或离子构成。
在正常生理状况下,生物体内不断地产生自由基,自由基的产生与清除处于平衡状态。
但在某些病理情况下,自由基产生量多时,就会对DNA 、蛋白质和脂类等生物大分子造成损伤,导致机体疾病的产生。
由于自由基具有高度的化学活性,是人体生命活动中多种生化反应的中间代谢产物,自由基攻击生物大分子导致组织损伤是许多疾病发生发展的根源。
因而SOD 在防御生物体免受超氧阴离子自由基损伤,抗辐射,抗肿瘤及延缓机体衰老等方面具有重要的作用。
1、清除机体代谢过程中产生过量的超氧阴离子自由基延缓由于自由基侵害而出现的衰老现象,即延缓皮肤衰老和脂褐素沉淀的出现。
衰老自由基学说认为衰老是来自机体正常代谢过程中所产生的自由基随机附带破坏性的作用结果,自由基引起机体衰老的主要机制可概括为以下三方面。
（1）减少生物大分子的交联聚合和脂褐素的堆积；（2）减缓器官组织细胞的损伤与减少；（3）防止免疫能力的降低。
2、提高人体对自由基损伤而诱发疾病的抵抗力自由基损伤而诱发疾病的抵抗力主要包括肿瘤、炎症、肺气肿、白内障和自身免疫疾病等当SOD 作为功能性食品基料加入食品中时,可有效抑制许多疾病的发生、发展,对人体健康有极大作用。
超氧化物歧化酶(SOD)的生产共24页文档
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26、我们像鹰一样，生来就是自由的 ，但是 为了生 存，我 们不得 不为自 己编织 一个笼 子，然 后把自 己关在 里面。 ——博 莱索
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27、法律如果不讲道理，即使延续时 间再长 ，也还 是没有 制约力 的。— —创造出来的。 ——马 克罗维 乌斯
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29、在一切能够接受法律支配的人类 的状态 中，哪 里没有 法律， 那里就 没有自 由。— —洛克
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30、风俗可以造就法律，也可以废除 法律。 ——塞·约翰逊
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26、要使整个人生都过得舒适、愉快，这是不可能的，因为人类必须具备一种能应付逆境的态度。——卢梭
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27、只有把抱怨环境的心情，化为上进的力量，才是成功的保证。——罗曼·罗兰
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28、知之者不如好之者，好之者不如乐之者。——孔子
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29、勇猛、大胆和坚定的决心能够抵得上武器的精良。——达·芬奇
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30、意志是一个强壮的盲人，倚靠在明眼的跛子肩上。——叔本华
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