超声辅助提取大豆糖蜜沉淀中异黄酮和皂苷的工艺研究

提取液中异黄酮（皂苷）含量
异黄酮（皂苷）提取率%=
物料中异黄酮总量
×100%
（1）
提取液中异黄酮（皂苷）含量
异黄酮（皂苷）纯度%=
×100%
提取液总重（干基）
（2）
2 结果与讨论
低聚糖和单糖、双糖等是不带电荷的，
ห้องสมุดไป่ตู้
2.1 大豆糖蜜沉淀成分分析
所以在酸性条件下不会沉淀下来。皂
由表 1 可以看出，大豆糖蜜经酸 苷和异黄酮以及大部分磷脂﹑植酸﹑
关键词：大豆；大豆糖蜜；异黄酮；皂苷；超声辅助
大 豆 糖 蜜 的 主 要 成 分 是 糖， 含 量 在 58% ～ 65%，包括低聚糖、二糖和 少量单糖。次要成分包括蛋白质、脂质、 矿物质、大豆皂苷（6% ～ 15%）、大 豆异黄酮（0.8% ～ 2.5%）和其他有机 成分，包括酚酸，无色花青素等 [1]。
大豆异黄酮标准品（纯度 99.9%， 购 于 sigma 公 司）， 大 豆 糖 蜜 由 山 东 万 德 福 实 业 集 团 有 限 公 司 提 供， Waters 600 高 效 液 相 色 谱 仪（ 美， Waters 公司），台式离心机 TPL-5（上 海安亭科学仪器厂），KJ-300 超声波 发生器（无锡市科洁超声电子设备有限
100
80
异黄酮提取率 (%)
60
40
20
0
45
90
100
150
300
600
功率 ( W )
图 1 超声功率对异黄酮提取率的影响
生的机械作用越弱，而功率过高时， 产生的空化效应弱，有效成分的溶出 不充分，在空化作用的最佳结合点上， 有效成分溶出最完全，总异黄酮提取 率最大 [11]。因而确定 150 W 为适宜的
脂类测定：氯仿甲醇法 [9]。 总糖含量测定：苯酚 - 硫酸法 。 [10]
1.2.1 超声辅助提取异黄酮 准确称取一定量的经冷冻真空干 燥后的大豆糖蜜沉淀粉末，按照一定 的料液比加入 90% 丙酮 - 水溶液，在 设定温度下经超声提取一段时间后， 过滤，滤渣再用相同体积分数溶液在 普通磁力搅拌下提取 1 h，合并滤液， 旋转蒸发除去丙酮，测定其异黄酮总 量，3 次重复。分别考察超声功率 ( 超 声频率为 20 kHz)、料液比、提取时间 对提取效果的影响，得到最佳的超声 辅助提取条件。 1.2.2 回流提取皂苷 提 取 异 黄 酮 后 的 滤 渣， 改 变 丙 酮 和水比例，调节 pH 值，在一定温度下， 加热回流提取皂苷，滤液旋转蒸发除 去丙酮，测皂苷含量。 1.2.3 提取率和纯度的计算 提取率和纯度按照公式（1）和 (2) 计算。
超声辅助提取技术的原理是超声 波传播过程中产生的强烈空化、扰动 效应，可增大提取溶剂中物质分子运 动频率和速度，增强溶剂穿透力，从 而加速提取溶剂中的目标成分进入溶 剂，促进提取的进行。目前，超声辅 助提取技术被广泛应用于油脂提取、 食品添加剂、食品原料中活性成分 [6] 和糖类物质等的提取分离。 1 材料与方法 1.1 实验材料
工艺技术
超声辅助提取大豆糖蜜沉淀中异黄酮和皂苷的 工艺研究
□ 张倩瑶 梁世君 桐庐县检验检测中心
摘 要：采用 90% 丙酮水溶液提取溶剂，经超声辅助提取大豆糖蜜沉淀中的大豆异黄酮，滤渣热回流提取大豆皂苷， 得到异黄酮和皂苷粗品。其中超声辅助提取大豆异黄酮时，异黄酮提取率可达到 85.96%，纯度为 11.48%；改变丙酮和水 的比例，调节 pH 值，将滤渣进一步提取，可获得提取率为 76.91%，纯度为 57.80% 的皂苷粗品。
公司），旋转蒸发器 RE-52（上海亚 荣生化仪器厂）。 1.2 实验方法
大豆糖蜜（粘稠液体状）经过稀释、 酸沉、离心后得到大豆糖蜜沉淀，沉 淀经冷冻干燥后得到大豆糖蜜沉淀干 粉，为实验原料。
大豆皂苷含量的测定：香草醛 - 高 氯酸法 [7]。
大 豆 异 黄 酮 总 量 测 定： 外 标 法， HPLC 法 [8]，反向色谱柱，C18 柱 250mm× 4.6 mm×5 µm；流动相，A 相：三氟 乙酸 - 乙腈溶液，三氟乙酸体积分数为 0.5%；B 相：三氟乙酸水溶液（三氟乙 酸体积分数 0.05%）；检测器类型： 紫外检测器；测定波长，254 nm；色 谱柱温度，34 ℃；洗脱方式：梯度洗脱； 流速，1 mL/min；进样量，20 µL。
异黄酮仅存在于豆科的蝶形花亚 科 [2] 等少数植物中。目前鉴于异黄酮 具有雌激素类性质，因对人体健康有 益而被广泛关注 [3]。大豆糖蜜作为异 黄酮的丰富来源，关于其的提取与富 集研究文献主要是一些专利，国内相 关的研究报道还不是很多 [4]。
大 豆 皂 苷 毒 副 作 用 很 小， 并 且 具 有很多有益的生理功能 [5]。随着大豆 皂苷在食品领域应用的增加和其众多 的有益生理功效，其商业价值正逐渐 得到人们的重视，这也就促进了对大 豆皂苷产品生产提取工艺的研究。
成分
总糖
表 1 大豆糖蜜沉淀成分分析
异黄酮
粗脂
皂苷
灰分
含量 /%
24.38
4.12
37.67
14.58
4.87
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沉后，异黄酮和皂苷的含量（一般糖蜜 酚酸等分子带负电荷，在酸性条件下
中异黄酮含量为 0.8% ～ 2.5%，皂苷 因形成聚集体而沉淀下来，从而实现
含量为 6% ～ 15%）有所上升。这主要 了初步富集。酸沉沉淀中，异黄酮和
是由于大豆糖蜜中含有大量的碳水化 皂苷含量高，适合作为提取异黄酮和
合物，主要是一些水溶性的糖类，而 皂苷的原料。
2.2 超声功率对异黄酮提取率的影响 准确称取糖蜜沉淀干粉 6 份，每
份 10 g，按照料液比 1 ∶ 10 加入一定 体积分数的丙酮水溶液，室温条件下，
在频率 20 kHz，不同功率条件下超声 30 min，除去丙酮，测定提取液中的 异黄酮总量。比较超声功率对异黄酮 提取率的影响，结果见图 1。
由图 1 可以看出，当超声功率在 150 W 时，异黄酮的提取率达到最大， 过高和过低都会降低异黄酮的提取率。 这可能是由于超声功率越低，超声产