药物的分析方法与验证
第四章 药物定量分析与分析方法验证
1、含卤素有机药物
含卤素有机药物是指分子结构中所含卤素直接与芳环
如果测得理论板数低于规定的最小理论板数， 应改变色谱柱的某些条件（如柱长、载体性能、色 谱柱填充的优劣等），使理论板数达到要求。
(2)分离度(R)
在定量分析时，要求定量峰与其他峰 或内标峰之间有较好的分离度。除另有规定 外，分离度应大于1.5。
分离度（R）的计算公式见下式：
R 2 t R2 t R1
含量（CX）= f
AX AS / CS
式中，AX为供试品峰面积或峰高；CX为供
试品的浓度 。
丙酸睾酮含量测定采用高效液相法：取本品 对照品适量，精密称定，加甲醇定量稀释成 每lmL中约含1mg的溶液。精密量取该溶液 和内标溶液（1．6mg/ml苯丙酸诺龙甲醇溶 液）各5ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至 刻度，摇匀，取10μl注入液相色谱仪，记录
例
取盐酸麻黄碱0.1532g，精密称定， 加冰醋酸10ml溶解后，加醋酸汞试液 2ml与结晶紫指示液1滴，用HClO4滴 定至绿色，用去0.1022mol/L的高氯 酸滴定液7.50m1，空白试验消耗高氯 酸滴定液0.08ml。已知每1ml高氯酸 滴定液（0.1mol/L）当于20.17mg的 C10H15ON·HCl。试计算盐酸麻黄碱 的百分含量？（99.80％）
1.分离原理
吸附色谱 分配色谱 离子交换色谱 排阻色谱
吸附色谱
根据填充剂吸附活性 对样品的吸收系数不 同而分离
充填剂：硅胶
分配色谱
根据固定相与流动相的极性不同而分为 正相分配色谱和反相分配色谱 两者的区别如下图所示：
固定相
流动相
正相分配
极性
药物分析课件第4章药物定量分析与分析方法验证
[B型题]
HPLC。
按分离方法分为：PC；TLC；柱色谱；GC；
（一）HPLC法
1. 对HPLC仪器一般要求 色谱柱、流动相按品种项下要求。
色谱柱的理论板数：n = 5.54(tR /Wh/2)2
2. 系统性试验 于1.5
分离度：R = 2（tR1 – tR2)/(W1 + W2); 要大
拖尾因子：T = W /2d 应在0.9 ～
1. 原料药 可用已知纯度对照品或样品进行测定；或与已建准 确
度的另一方法测定的结果进行比较。 2. 制剂 要考察辅料对回收率的影响。采用在空白辅料中加入 原
料对照品的方法作回收率试验，然后计算RSD。 具体做法：测定高、中、低三个浓度，n=3, 共9个数据来评价
回收率的RSD＜2%；用UV和HPLC发时，一般
三．含量测定 常用的方法对照品比较
法:Ci = (Ri-Rib)/(Rr-Rrb) ×Cr
Ch.P收载地高辛片、利血平片、洋地黄毒苷片。
二．荧光分析仪 有二个单
色光器—激发单色光器与
发射单色光
器；且激发光源、样品池和检测器成直 角。
三、色谱分析法
按分离原理分为：吸附；分配；离子交换；排阻色 谱
方法分类
2. 用硫酸水解后测定法 例如：硬脂酸镁的含量测定
Mg(C17H35COO)2 + H2SO4
H2SO4 + 2NaOH
MgSO4 + 2C17H35COOH Na2SO4 + 2H2O
（三）经氧化还原后测定法
COOH
I
I
药物分析含量测定方法与验证
药物分析含量测定方法与验证选择合适的测定方法是药物分析含量测定的首要任务。
常用的测定方法包括色谱法、光谱法、电化学法和滴定法等。
在选择方法时，需要考虑以下几个因素：1.应用对象：考虑药物的理化性质和活性成分的特点，选择适合的分析方法。
例如，对于具有荧光特性的活性成分，可以选择荧光光谱法进行分析。
2.灵敏度和准确度：选取具有良好灵敏度和准确度的方法，以确保对样品中微量活性成分的准确测定。
例如，高效液相色谱法(HPLC)和气相色谱法(GC)是常用的灵敏度高的色谱法。
3.可行性和经济性：考虑方法的可行性和经济性，选择合适的仪器设备和试剂，以确保分析成本和操作难度的控制。
在药物分析含量测定方法选择后，需要对方法进行验证以确保其准确性和可靠性。
药物分析含量测定方法的验证主要包括以下几个方面：1.精密度和重复性：重复测定多个样品，并计算其相对标准偏差(RSD)来评估方法的精密度。
RSD越小，说明方法的重复性越好。
2.准确度：与已知浓度的标准样品进行比较，计算方法的准确度。
一般使用回收率作为评价指标，回收率越接近100%，说明方法的准确度越高。
3.灵敏度和线性：测定一系列不同浓度的样品，并计算测定结果的线性相关性。
通常使用相关系数和回归方程来评估方法的线性。
4.特异性和选择性：分析样品中可能存在的干扰物质，并验证方法对活性成分的选择性。
一般通过添加干扰物质来测试方法的特异性。
5.稳定性：测试方法在不同条件下的稳定性，包括温度、湿度、光照等。
确保方法在不同条件下的测定结果一致。
除了以上验证的基本步骤，还需要根据具体的药物分析含量测定方法的特点和要求，进行其他适当的验证参数的测试。
在实际操作中，应制定详细的验证方案和实施计划，并按照规定的方案进行验证实验。
实验结果需要进行统计分析，并按规定的标准判断方法的验证结果。
综上所述，药物分析含量测定方法的选择和验证是确保药物质量稳定性和一致性的重要环节。
通过选择合适的方法和进行严格的验证，可以保证药物分析结果的准确性和可靠性，并为药物研发和生产提供科学依据。
药物分析方法的开发与验证
药物分析方法的开发与验证药物分析方法的开发与验证药物分析方法是药物研究的重要环节之一，它的开发和验证对于药物的质量控制和治疗效果的保障至关重要。
药物分析方法的开发和验证需要遵循一定的规范和流程，本文将从这两个方面进行阐述。
一、药物分析方法的开发药物分析方法的开发是指根据药物的特性和需求，设计出一种可靠、准确、灵敏、重复性好的分析方法。
药物分析方法的开发需要进行以下几个步骤：1. 确定分析目标：首先需要确定要分析的药物种类、成分及其含量范围等，以及需要达到的分析指标和要求。
2. 确定分析方法：根据药物的化学特性、分子结构等，选择合适的分析方法，如色谱法、质谱法、光谱法等。
3. 优化实验条件：进行实验前，需要对实验条件进行优化，如样品前处理、色谱柱选择、流速和波长等参数的调整等。
4. 确定分析参数：根据实验结果，确定分析参数，如检测限、定量限、线性范围、精密度和准确度等。
5. 编写操作规程：根据实验结果，编写操作规程，确保实验的可重复性和准确性。
二、药物分析方法的验证药物分析方法的验证是指通过一系列实验，证明该方法能够满足预期的分析指标和要求。
药物分析方法的验证需要遵循以下几个步骤：1. 确定验证参数：根据药物特性和需求，选择适合的验证参数，如精密度、准确度、线性范围、检测限和定量限等。
2. 进行实验验证：根据操作规程进行实验验证，并记录实验结果。
3. 数据处理：对实验结果进行数据处理和统计分析，计算出各项验证参数。
4. 判断结果：根据验证结果，判断该方法是否符合预期要求，并进行合理解释。
5. 编写报告：根据验证结果，编写验证报告，并加以存档。
总之，药物分析方法的开发和验证是药物研究中不可或缺的环节。
只有通过科学规范的方法开发和验证出可靠的分析方法，才能保证药物质量的稳定性和治疗效果的有效性。
因此，在药物研究中，应高度重视药物分析方法的开发和验证工作。
药物分析方法的设计和验证
第三节 药物分析中的有效数字 一、有效数字 （一）定义：分析中，实际能测量到的数字。
根据测定方法和使用仪器的准确程度来确定，只有最
后一位欠准，欠准度为±1。
例: 电子分析天平读数0.3526 滴定管体积读数22.25
2、有效位数确定 （1）0在数据中位置不同，作用不同。
例：1.002---4位，0.0980---3位，2.0×103---2位
第三章 药物分析方法的设计和验证 第一节 药物分析方法的分类和设计 一、分类
常量分析（0.1~1g或10~100mL）
按取样量分
半微量 (10~100mg或1~10mL)
微量分析 微量 (0.1~10mg或10uL~1mL)
超微量(<0.1mg或10uL)
按测定原理与操作方法 分
重量分析法
化学分析法 滴定或容量分析法
一、误差及其分类 （一）绝对误差和相对误差
（二）系统误差和随机误差
1、系统误 差
（1）方法误差
解决方法
（2）仪器和试剂误差 （3）操作误差
对照或空白试验 校正仪器
2、随机误差-----多次平行测定
3、测量结果检验-----方差分析 （t检验、G检验、F检验）
一、准确度和精密度 （一）准确度（Accuracy)
50.11.45 0.281 50.11.4 0.3 51.8
（二）乘除法 以有效数字最少的那个测量值为准（相对误差最大）。
例：0.231× 20.24÷3.2=14.9618 ≈15
三、药物含量测定结果的表达法
测量结果的有效数字的保留取决于仪器的精确度和要求。一 般滴定和重量分析取4位有效数字；仪器分析取3 位有效数字。
实例分析
苯溴马隆
药物分析 药物分析方法的验证
2. 验证方法
（1） 含量测定
1）基质无（原料药）/可模拟（制剂）
回收率(%)=
测得量 加入量
100
2）基质不可模拟（制剂、中药）
回收率(%)=
测得量 - 本底值 加入量
100
（2） 杂质检查——方法同2）
2. 验证方法（其他方法）
• 可与已知准确度的另一方法的测定结果比较 ——药典标准方法 / 经过验证的方法
• LOD是一种限度检验效能指标， 反映方法的灵敏度
1 直观法
目视法评价的方法: 化学反应 / TLC ——鉴别的显色法； 杂质检查的TLC
2 信噪比法
3 标准偏差/ 标准曲线
显示信号与噪声水平的方法: HPLC ——S/N=3（2） 时的相应浓度或量
其他分析方法: UV-Vis法
LOD 3.3 / S δ空白响应偏差
含量水平
限度（%）
100 % 10 % 1% 0.1%
98~101 95~102 92~105 90~108
0.01 % 10 g/g （ppm） 1 g/g （ppm） 10 g/kg （ppb）
85~110 80~115 75~120 70~125
（二） 精密度
1. 定义 • 同一均匀供试品多次取样测定 所得结果之间的接近程度 • 相对标准偏差（%， RSD）；
• 也可由所测定的精密度、线性和专属性推算 ——原料药含量HPLC测定法
3. 数据要求 • 9个测定结果（n=9）
3水平×3样品 • 化药：1 ︰ 0.8、1 ︰ 1、1 ︰ 1.2 • 中药: 1 ︰ 0.5、1︰1、1︰1.5
3. 数据要求
样品中被测成分的含量水平 与回收率限度 要求的关系
药物分析课件 第四章 药物定量分析与分析方法验证_OK
③要有防爆措施 ④氧气要充足，确保燃烧完全，产物不能有黑色
炭化物 ⑤燃烧产生的烟雾要被完全吸收
充分振摇和放置都是为了保证吸收完全 例：碘产生紫色烟雾；氯、氟产生白色烟雾，烟
雾颜色完全消失后，即表示吸收完全 ⑥测定含氟有机化合物时要用石英燃烧瓶
26
4、应用
含卤素、硫、磷、氟及硒等有机药物的鉴别、杂 质的检查及含量测定
100%
注射剂：标示量％＝
V0
V T 标示量
100%
V VO
T F 标示量
100%
VO : 量取注射剂的体积， ml
36
(2)间接滴定法 1）生成物滴定法
供试品＋试剂 A 化合物 B
化合物 B＋滴定液 C 化合物 D
计量滴定液消耗的量，计算供试品的含量 计算同直接滴定法
37
2）回滴定法（剩余滴定法） 原理：先在待测样品溶液中加定量、过量的滴定
10
（一）湿法破坏
（1） 硝酸-高氯酸法 适用于血、尿、组织等生物样品的破坏，有
机金属药物经破坏后，得到的无机金属离子一 般呈高价态。
本法不能用于含氮杂环药物的破坏
干法灼烧法 11
（2） 硝酸-硫酸法 适用于大多数有机物质的破坏，破坏得到的
无机金属离子均为高价态。 不能用于含碱土金属有机药物的破坏
27
氧瓶燃烧
药物分析-药物定量分析与方法验证
特点：
仪器简单－滴定管、锥形瓶等玻璃仪器。 操作方便－通过观察溶液颜色变化确定滴
9
测 定 方 法 ： 取 本 品 约 0.1g ， 精 密 称 定 ， 加 乙 醇 5ml溶解后，加20%氢氧化钠溶液5ml，加热回流 15min，放冷至室温，加水20ml与硝酸5ml，精 密加硝酸银滴定液(0.1mol/L) 30ml，再加邻苯二 甲酸二丁酯5ml，密塞，强力振摇后，加硫酸铁 胺指示液2ml，用硫氰酸胺滴定液(0.1mol/L)滴定， 并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硝酸银 滴 定 液 (0.1mol/L) 相 当 于 6.216mg 的 三 氯 叔 丁 醇 （C4H7Cl3O·1/2H2O）。
13
（1） 碱性还原后测定
例 泛影酸的测定 ChP (2000)
取本品约0.4g，精密称定，加氢氧化钠溶 液30ml与锌粉1.0g，加热回流30min，放冷，冷 凝管用少量水洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水洗 涤3次，每次15ml，洗液与滤液合并，加冰醋 酸 5ml 与 曙 红 钠 指 示 液 5 滴 ， 用 硝 酸 银 滴 定 液 (0.1mol/L)滴定。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L) 相当于20.46mg的C11H9 I 3N2O4。
富马酸亚铁 C4H2FeO4的含量测定
原理
d H2SO4
O
HC C O
C CH Oˉ
+
Fe2+
富马酸亚铁
Oˉ
富马酸
Fe2+ + Ce4+
滴定 Ce3+ + Fe3+
邻二氮菲指示剂
N
N
红色
Fe2+ + Ce4+
药物分析第四章 药物定量分析与分析方法验证
2019/11/5
1
第四章 药物定论量分析与分析方法验证
主 要 内 容
2019/11/5
一、 定量分析样品的前处理方法 二、 定量分析方法特点 三、药品质量标准分析方法验证 四、 生物样品分析方法的基本要求
2
第一节 定量分析样品前处理方法
一、概述
含金属与卤素药物须处理后方可进行测定。
处理方法视结合牢固程度而异。
卤素与芳环相环相连牢固；与脂肪族碳相连 结合不牢固。
含金属药物：金属不直接与碳相连为含金属 的有机药物，不牢固，一般直接测定；金属与碳 原子以共价键相连，结合比较牢固---为有机金 属药物，须适当处理。
2019/11/5
3
含卤素有机药物的分析
T 0.1 1 134.14 3.429(mg/ml) 4
2019/11/5
含量% (VI2 FI 2 -VNa2S2O3 FNa2S2O3 ) T 100 W
40
T M b B(mg/ ml) a
直接滴定法： 含量% V T 100%
W
含量% V T F 100% W
20203241药物分析?pharmaceuticalanalysis20203242一定量分析样品的前处理方法二定量分析方法特点三药品质量标准分析方法验证四生物样品分析方法的基本要求主要内容主要内容论第四章药物定量分析与分析方法验证20203243一概述含金属与卤素药物须处理后方可进行测定
药物分析
I
I
COOH
I
I
NH C (CH2)4 C NH
I
O
O
I
胆影酸
药物分析第四章定量分析与分析方法验证
标准偏差
三、专属性 系指在其它成份（如杂质、降解产物、辅料等） 系指在其它成份（如杂质、降解产物、辅料等）可能存在 采用的方法能准确测定出被物的特性。 下，采用的方法能准确测定出被物的特性。 四、检测限（LOD） 检测限（ ） 指试样中被测物能被检出的最低浓度或量。 指试样中被测物能被检出的最低浓度或量。 五、定量限（LOQ） 定量限（ ） 指样品中被测物能被定量测定的最低量， 指样品中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果具有 一定的准确度和精密度。 一定的准确度和精密度。 六、线性 系指在设计的范围内， 系指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接 呈正比关系的程度，相关系数R-->1 ,用软件可得回归方程 用软件可得回归方程. 呈正比关系的程度，相关系数 用软件可得回归方程
VT 含量% = × 100% W
T—滴定度 滴定度;V—消耗滴定液体积 消耗滴定液体积;W—供试品取量 滴定度 消耗滴定液体积 供试品取量 校正因子F: 校正因子 当滴定液浓度与药典中规定浓度不相同时,要校正 要校正: 当滴定液浓度与药典中规定浓度不相同时 要校正 实际摩尔浓度 F= 规定摩尔浓度 在药检部门实验里的试剂瓶子一般不标浓度,而是 值 在药检部门实验里的试剂瓶子一般不标浓度 而是F值. 而是 实际滴定度:T’=TF 实际滴定度
二、光谱分析法 光照在物质上，物质内部发生能级跃迁而产生辐射， 光照在物质上，物质内部发生能级跃迁而产生辐射，利用 光谱进行定性或定量的结构分析称为光谱分析法。 光谱进行定性或定量的结构分析称为光谱分析法。 1、紫外-可见分光光度法（200nm—760nm) 、紫外 可见分光光度法 可见分光光度法（ (1)朗伯 比耳定律 朗伯-比耳定律 朗伯 A=ELC A-吸光度；L-液层厚度；C-溶液浓度；E-吸收系数 吸光度； 液层厚度 液层厚度； 溶液浓度 溶液浓度； 吸收系数 吸光度 （2）百分吸收系数 ）百分吸收系数E 1% 溶液浓度为1%（ 溶液浓度为 （W/V）厚度为 ）厚度为1cm的吸收度 E1cm 的吸收度 A （3）吸收系数法测含量 ） ×D 1% E1cm 含量%= ×100% W × l ×100 A-供试品吸光度；D-供试品稀释倍数； 供试品吸光度； 供试品稀释倍数 供试品稀释倍数； 供试品吸光度 W-供试品取量（标示量）（ ）； 液层厚度（cm） 供试品取量（ ）（g）； 液层厚度（ ） 供试品取量 标示量）（ ）；L-液层厚度
药物分析的方法学验证
药物分析的方法学验证
药物分析的方法学验证是指针对某一特定的分析方法，通过一系列的实验验证其可行性、准确性、精密度、重复性、稳定性、线性范围、灵敏度、特异性、精确度等性能指标，确保该方法符合要求。
常见的方法学验证包括以下方面：
1.线性范围：检验药物浓度与信号响应之间的线性关系，通常需要使用多个浓度水平进行验证。
2.准确度：准确度是指药物分析方法在测量结果中接近真实值的程度。
比如通过添加标准品或对标，验证测量结果与标准值之间的误差。
3.精密度：精密度指药物分析方法的测量结果在重复性试验中的一致性。
通常使用多次测量同一样品，计算其相对标准偏差（RSD）或方差。
4.稳定性：稳定性是指药物分析方法在一定时间内，分析结果的变异程度。
通常通过长时间存储、变温、光照等实验验证。
5.特异性：特异性是指药物分析方法针对目标分析物的选择性。
通常需要验证该方法能否识别和测量其他可能存在的干扰物质或杂质。
6.检测限和定量限：检测限是指药物分析方法中能够被检测到的最低限度，定量限是指能够准确测量药物浓度的最低限度。
7.精确度：精确度是指药物分析方法在测量结果中的一致性。
通常通过同一样品在不同条件下进行测量，比较测量结果的一致性。
在药物分析中，以上方法学验证通常需要符合某些国际标准或药典规定，如美国药典、欧洲药典、日本药典等。
检验科药物检测常见检测与分析方法
检验科药物检测常见检测与分析方法药物检测是检验科中的重要一环，通过科学的方法检测和分析药物
成分可以帮助医生做出准确的诊断和治疗方案。
本文将介绍药物检测
中常见的检测与分析方法，包括色谱法、光谱法、质谱法等。
一、色谱法
色谱法是一种通过物质在固定相和移动相之间的分配系数来进行分
离和检测的方法。
在药物检测中，色谱法被广泛应用于测定药物的成
分和含量。
常见的色谱法包括气相色谱（GC）和液相色谱（HPLC）。
气相色谱主要用于检测挥发性物质，而液相色谱则适用于检测水溶性
和不挥发性物质。
二、光谱法
光谱法是一种通过物质对光的吸收、散射或发射来测定物质种类和
含量的方法。
在药物检测中，常用的光谱法包括紫外可见光谱、红外
光谱和荧光光谱等。
这些光谱法可以快速准确地鉴定药物的成分和结构。
三、质谱法
质谱法是一种通过物质的离子化和质谱仪的检测来确定物质的分子量、结构和含量的方法。
在药物检测中，质谱法被广泛应用于鉴定药
物成分和确认药物结构。
常见的质谱法包括质子质谱、质量光谱和飞
行时间质谱等。
除了上述介绍的常见方法，药物检测中还有许多其他方法，如电化
学法、生物学方法等。
这些方法在药物检测中各有优势，可以相互补充，从而提高检测结果的准确性和可靠性。
总之，药物检测是检验科中的重要内容，通过各种科学方法的组合，可以准确快速地对药物进行检测和分析，为临床诊断和治疗提供重要
依据。
希望本文所介绍的常见检测与分析方法对您有所帮助，谢谢阅读！。
第四章药物定量分析与分析方法验证
(2)间接滴定法 1）生成物滴定法
供 试 品 ＋ 试 剂A 化 合 物 B 化 合 物 B＋ 滴 定 液 C 化 合 物 D
计量滴定液消耗的量，计算供试品的含量
计算同直接滴定法
2）回滴定法（剩余滴定法） 原理：先在待测样品溶液中加定量、过量的滴 定液A，使它和样品反应，等反应结束后，再 用另一种滴定液B来回滴剩余的滴定液A。
含有机结合的卤素
间接银量法测定
例：三氯叔丁醇的含量测定
2、水解后测定法 例：硬脂酸镁的含量测定
Mg(C17 H35COO)2 + H2SO4
定量、过量
△
MgSO4 + 2 C17 H35COOH
Na2SO4 + 2H2O
2NaOH + H2SO4
过量剩余
(三)经氧化还原后测定法
1、酸性或碱性还原后测定
（1）对照品比较法 供试品的浓度为：
AX CX Cr Ar
原料药：
Ax C r D CX D 含量% 100%＝ 100% W Ar W
Ax C r D 平均片重 片剂：标示量 ＝ % 100% Ar W 标示量
Ax C r D V 液体制剂：标示量 ＝ % 100% Ar V 标示量
1% E1cm ②
：一定波长下，溶液浓度为1%（W/V）， 液层厚度为1cm时，物质的吸收度- -定量依据
两者间的关系：
M 1% E1cm 10
或
E
1% 1cm
10 M
2、对溶剂的要求 溶剂的截止波长：使用范围不能小于截止
使用波长
溶剂的纯度：检查所用溶剂在检测波长处
是否符合要求
药物定量分析与分析方法验证
方法验证的内容与步骤
准确度
通过对比已知浓度的样品测量值 与真实值，评估方法的准确度。
精密度
通过多次测量同一样品，评估方 法的重复性和再现性。
专属性
验证方法是否能够区分目标成分 与其他物质的干扰。
耐用性
验证方法在不同条件下的稳定性 及变化程度。
范围
验证方法适用的浓度范围。
线性
验证方法在一定浓度范围内的响 应是否呈线性关系。
响应值应无明显交叉干扰，能够准确区分目标物质与杂质。
专属性验证结果
根据响应值判断分析方法的专属性是否符合要求。
检测限与定量限验证
检测限与定量限验证方法
逐渐降低样品浓度，观察信号响应值的变化。
检测限与定量限验证要求
检测限和定量限应满足预设的灵敏度要求。
检测限与定量限验证结果
根据信号响应值判断分析方法的检测限与定 量限是否符合要求。
分析方法验证的意义
分析方法验证是确保药物定量分析结果准确可靠的重要手段。通过验证，可以证明所选用 的分析方法适用于该药物的分析，并确保其在各种条件下的稳定性和可靠性。
当前发展状况
随着科学技术的发展，药物定量分析的方法和技术也在不断进步。目前，高效液相色谱法 、气相色谱法和质谱法等先进技术已被广泛应用于药物定量分析中，大大提高了准物质进行多次测定，计算相对标准偏 差（RSD）。
精密度验证要求
RSD应符合预设的接受范围，通常不超过±5%。
精密度验证结果
根据RSD大小判断分析方法的精密度是否符 合要求。
专属性验证
专属性验证方法
采用具有相似结构或相同成分的物质进行测定，比较其响应值。
专属性验证要求
中药有效成分的定量分析
中药是我国传统医学的重要组成部分， 中药有效成分的定量分析对于确保中 药质量和临床疗效具有重要意义。
药物分析方法的优化与验证
药物分析方法的优化与验证一、引言药物分析方法的优化与验证是药物研发和生产过程中的重要环节，它对保证药物质量和有效性具有重要意义。
本文将从优化方法和验证方法两个方面进行探讨。
二、药物分析方法的优化药物分析方法的优化旨在提高其准确性、灵敏度、选择性和可重复性等指标，确保分析结果的可靠性和精确性。
1. 优化实验条件优化实验条件是提高药物分析方法准确性和灵敏度的关键步骤。
在确定药物分析方法时，需要考虑样品的物理化学性质、药物的稳定性和分析仪器的特性等因素。
通过调整温度、pH值、柱温等实验条件，可以提高分析效果。
2. 优选分离方法药物分析中常用的分离方法包括色谱分析和电泳分析等。
在优化分离方法时，可以针对不同药物的特性和分子结构选择合适的分离柱和流动相，以达到最佳的分离效果。
3. 优化检测方法药物分析的检测方法直接影响到分析结果的准确性和灵敏度。
常用的检测方法包括紫外-可见光谱法、质谱法和荧光法等。
通过调整检测器的参数和采集条件，可以提高检测的灵敏度和选择性。
4. 优化数据处理方法数据处理是药物分析方法优化中的关键环节。
合理选择数据处理的算法和参数，可以减小误差、提高信噪比和准确性。
常用的数据处理方法包括基线校正、样品纠正和数据拟合等。
三、药物分析方法的验证药物分析方法的验证是为了证明该方法在实际应用中的可靠性和准确性。
验证过程包括验证方案的确定、实验条件的验证、方法的准确性和稳定性的评估等。
1. 验证方案的确定验证方案的确定是药物分析方法验证的首要步骤。
验证方案应包括验证目标、验证样品的来源、验证参数的选择和验证实验的流程等。
2. 实验条件的验证验证方法的实验条件包括仪器的准确性、灵敏度、选择性和可重复性等。
通过使用标准物质和参比方法，可以对实验条件进行验证，确保方法的有效性。
3. 方法准确性的评估方法的准确性是评估药物分析方法的重要指标之一。
常用的评估方法包括回收率、准确度和稳定度等。
通过对多次重复实验和与参考方法的对比分析，可以评估方法的准确性。
药品分析方法验证
药品分析方法验证
药品分析方法验证是指对新开发或已有的药品分析方法进行验证，以保证其准确性、可靠性、有效性和适用性。
验证方法可以分为三个步骤：
1. 精密度验证：精密度是指在同一天或不同天内，同一实验室和同一设备的条件下，对同一样品进行多次分析，计算测定值的离散程度。
经过精密度验证，可以确定方法的测量精度。
2. 准确度验证：准确度是指测定值与真实值之间的接近程度。
准确度验证是通过对样品添加一定量的标准品或内标物质，进行多次测量，计算所得测定值和加标回收率，来检验分析方法是否准确。
3. 线性验证：线性是指在一定浓度范围内，样品的响应与浓度成比例，即测定结果呈线性关系。
线性验证可以通过绘制外标曲线和内标曲线，根据回归方程计算样品中成分的浓度。
其他验证方法还包括限制检测界限、限制检测量、选择性验证等。
药品分析方法的验证非常重要，可以确保药品分析结果的准确性和可靠性。
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• （4）对于易水解的酯类药物，可采用定量过量加入碱滴定液水解后，用酸 滴定液回滴的剩余滴定法。如氯贝丁酯、阿司匹林片的含量测定。
• 示例： 氯贝丁酯(Clofibrate，降血脂药)的含量测定
• 取本品2 g，精密称定，置锥形瓶中，加中性乙醇(对酚酞指示液显中 性)10mL与酚酞指示液数滴，滴加氢氧化钠滴定液(0.lmol/L)至显粉红色，再 精密加氢氧化钠滴定液(0.5mol/L)20mL，加热回流1小时至油珠完全消失， 放冷，用新沸过的冷水洗涤冷凝管，洗液并入锥形瓶中，加酚酞指示液数滴， 用盐酸滴定液(0.5mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL氢 氧化钠滴定液(0.5mol/L)相当于121.4mg的C12H15ClO3。
第二法：测定有机弱酸及其盐类（异维A酸、苄氟噻嗪、环吡酮等）
• 第二法：除另有规定外，精密称取供试品适量 [约消耗碱滴定液(0.1 mol/L)8 mL]，加各品种 项下规定的溶剂使溶解，再加规定的指示液 1~2滴，用规定的碱滴定液(0.1 mol/L)滴定。 终点颜色应以电位滴定时的突跃点为准，并将 滴定的结果用空白试验校正。
• 为消除这些酸性物质的干扰，采用两步滴定法：
第一步—中和供试品中的各种酸性杂质，消耗的氢氧化钠量较少，故采用较 稀的碱滴定液(0.1mol/L)
第二步—水解后返滴定，加入定量过量较浓的碱滴定液(0.5mol/L)，进行加热 回流1h，以保证水解完全，并可以准确滴定剩余量。
（三）氧化还原滴定法
• 该法是以氧化还原反应为基础的滴定分析法，既可直接测定具有氧化性或还 原性的物质，又可间接测定不具有氧化性或还原性的物质。
• 滴定分析所用的溶剂为水或中性乙醇，根据药物的酸碱性、 溶解度和稳定性等性质进行选择。
• （1）如枸橼酸以水为溶剂，阿司匹林、丙磺舒、水杨酸、 布洛芬、苯甲酸等以中性乙醇为溶剂，以酚酞为指示剂， 用氢氧化钠滴定液直接滴定。
• （2）一些弱酸性或强酸弱碱盐药物，也可在水/与水混溶的有机溶剂中用氢 氧化钠滴定液直接滴定。如巴比妥类药物、盐酸利多卡因等，在该混合溶剂 中，有机溶剂不仅增加了药物的溶解度、稳定性，同时可增加滴定突跃范围。
第七章 药物的分析 方法与验证
药品质量标准分析方法验证的目的： 证明采用的方法适合于相应检测要求
在建立药品 质量标准时， 分析方法需 经验证
在药品生产工艺变更、制 剂的组分变更、原分析方 法进行修订时，则质量标 准分析方与特点 第二节 分析验证指标与要求 第三节 分析样品的制备 第四节 分析方法的转移与确认 第五节 标准物质的作用与研究建立
• 反应式如下：
CH3
Cl
+ O C COOC2H5
NaOH
Cl
CH3
(定量过量 )
CH3
+ O C COONa
C2H5OH
CH3
NaOH + HCl ( 剩余 )
NaCl + H2O
• 注释：一些含酯结构的药物在合成或贮存过程中可能引入酸性杂质，或在制 剂工艺过程中为增加稳定性，加入少量酒石酸或枸橼酸等作稳定剂。
亚硝酸钠滴定法
碘量法
铈量法
溴量法
(1) 亚硝酸钠滴定法
原理：利用亚硝酸钠滴定液，在较浓盐酸溶液 中，与具有芳伯氨基的化合物发生重氮化反应， 定量生成重氮盐，根据消耗亚硝酸钠的量来计 算药物含量的方法。
• 注意事项：该法中常用的碱滴定液为甲醇钠滴 定液、甲醇锂滴定液等。在滴定过程中应注意 防止溶剂和碱滴定液吸收大气中的二氧化碳和 水蒸气，以及滴定液中溶剂的挥发。
• 示例： 肾上腺素受体激动药 肾上腺素(Epinephrine)的含 量测定
取本品约0.15g，精密称定，加 冰醋酸10mL，振摇溶解后，加 结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴 定液(0.lmol/L)滴定至溶液显蓝 绿色，并将滴定的结果用空白 试验校正。每l mL髙氯酸滴定 液(0.lmol/L)相当于18.32mg的 C9H13NO3。
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常用质控方法的分类与特点
一、容量分析法
在中国药典中，容量分析法被广泛应用于化学原料药物的含量测定。 容量分析方法的特点：
①简便易行，方法耐用性高 ☺ ②测定结果准确(相对误差0.2%)☺
③方法专属性一般较差，对结构相近的有关物质或其他干扰测定的
杂质缺乏选择性☹
④一般适用于主成分含量较高的试样的分析☺
容量分析法
1 非水溶液滴定法 2 酸碱滴定法 3 氧化还原滴定法
容量分析法
直接滴定法 间接滴定法
剩余滴定法
直接滴定法：含量%=V F T 100%
W 1000
剩余滴定法：含量%=
(V0 V ) F T W 1000
100%
置换滴定法
式中：V为供试品消耗滴定液的体 积(mL)；V0为空白试验消耗滴定 液的体积(mL)；F为滴定液浓度校 正因子；T为滴定度(mg/mL)；W 为供试品的重量(g)。
（二）酸碱滴定法
• 酸碱滴定法(Acid-base Titration)是以质子转移反应为基础的 滴定分析方法，包括强酸强碱的滴定、一元弱酸弱碱的滴 定和多元酸碱的滴定。
• 在药物分析中，由于多数药物为弱酸、弱碱或其盐类；故 最常见的是应用强酸、强碱，滴定弱碱或弱酸
• 常用的滴定液有盐酸、硫酸、氢氧化钠等
（一）非水溶液滴定法
• 非水溶液滴定法(Non-aqueous Titration, ChP2015通则0702)：是在非水溶剂中 进行滴定分析的方法。
常用的非水溶剂
酸性溶剂
碱性溶剂
（冰醋酸、醋酐） （二甲基甲酰胺、乙二胺、乙醇胺）
第一法：测定有机弱碱及其盐类（多数胺类药物，含氮杂环类药物 等）
• 第一法：除另有规定外，精密称取供试 品适量[约消耗高氯酸滴定液 (0.1mol/L)8mL]，加冰醋酸10~30 mL使 溶解，加各药品项下规定的指示液1~2滴， 用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定。终点颜 色应以电位滴定时的突跃点为准，并将 滴定的结果用空白试验校正。
• 注意事项：非水滴定受温度、溶剂的选 择、指示终点方法以及被测物酸根等因 素的影响