新型的绿色饲料添加剂—溶菌酶
溶菌酶资料
溶菌酶----新型免疫抗菌抗病毒药物、饲料添加剂溶菌酶研发背景：抗生素是人类应用最广泛的抗菌药物，不仅用于临床，也广泛用于畜禽饲养和农业方面。
在过去的50多年中，由于饲用抗生素在养殖中的长期使用导致大量耐药菌株的产生，且病原菌抗药性逐年增强，致使疗效下降，剂量提高，造成动物疾病越防越难防，越治越难治，给养殖业造成很大的损失和危害。
同时也给全人类的健康造成严重的影响。
因此，世界卫生组织于1994年就细菌耐药性的监测结果给全世界提出了警示：细菌对抗生素产生的耐药性正在以惊人的速度增加，而现在的抗生素药物正在失去原来的疗效。
因此寻求广谱、高效的新一代饲用抗菌药物已成为迫在眉睫的摆在人类面前的课题。
澳大利亚昆士兰大学医学系博士生导师、高级研究员王雯禾博士（1993年毕业于英国剑桥大学达尔文学院获微生物营养学博士学位），一直致力于生命科学的研究和发展，历经十多年的研究发现：酶广泛存在于生物体内，参与新陈代谢等多种生理功能，其中对微生物细胞壁具有水解功能的抗菌酶，如溶菌酶lysozyme能够溶解微生物细胞壁而使微生物死亡，而且溶菌酶lysozyme在人和动物的唾液、眼泪、乳汁以及肌体组织中大量存在，是人和动物自身重要的免疫因子，与人和动物的健康息息相关。
溶菌酶lysozyme的溶菌（杀菌）作用与传统的抗生素药物相比，具有对某一病原菌所有血清型都有效的优点，克服了一种抗生素只能预防一种或其中一种血清型病原菌的不足，更不存在药物残留和耐药性的问题。
王雯禾博士认为，溶菌酶lysozyme作为畜禽、水产饲料添加剂在替代抗生素，控制耐药菌，生产绿色肉蛋奶食品方面是最佳的选择。
并多次鼓励和支持国内年轻的科学家、学者，致力于这一伟大的、划时代的、对全人类的健康有杰出贡献的产品的开发和研究。
并于2003年10月推出最早用于防治动物疾病的产品--溶菌酶系列,由于它不但能溶解（杀死）细菌，增强动物的免疫能力，而且还能和病毒结合使病毒失活，所以它作为预防动物疾病的新型饲料添加剂，正在动物疾病防治的许多领域被广泛应用。
溶菌酶应用简介
1. 溶菌酶简介溶菌酶，又称细胞壁水解酶，广泛存在于高等动植物组织及分泌物、原生动物、昆虫和各种微生物中。
1922年Fleming等发现，在人的唾液、眼泪中存在有能够溶解细胞壁杀死细菌的酶，因而被命名为溶菌酶。
它能够水解N一乙酰葡萄糖胺与N一乙酰胞壁酸之间的β一1，4糖苷键，因此可以溶解大多数革兰氏阳性菌的细胞壁而具有溶菌作用，溶菌酶本身是一种蛋白质，安全性能高，在食品、医药、生物学中得到了广泛的应用。
2. 溶菌酶的理化性质（可要可不要）溶菌酶是一种糖苷水解酶，是由129个氨基酸残基组成的小分子碱性球蛋白，相对分子质量为14 300，分子中富含碱性氨基酸和芳香族氨基酸，其多肽链经盘绕折叠形成二级和三级结构，形成一个椭圆形的外形结构，溶菌酶纯品为白色粉末结晶，无臭、甜味，易溶于水和低浓度的盐溶液，不溶于丙酮、乙醚等有机溶剂。
正常条件下溶菌酶作用的最适温度为45--50℃，最适pH为5～7，在低温干燥条件下可长期保存，热稳定性强，耐酸性强，pH为4—7时，100℃下处理45 min仍能保持其酶活性，但在碱性条件下化学性质不稳定，易变性。
3. 溶菌酶的作用1．抗菌消炎2．抗病毒：溶菌酶能与带负电荷的病毒蛋白直接作用。
与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐，使病毒失活。
3．增强免疫力：溶菌酶作为机体非特异免疫因子之一，参与机体多种免疫反应，在机体正常防御功能和非特异免疫中，具有保持机体生理平衡的重要作用。
4．其它方面的药理作用：溶菌酶还具有激活血小板的功能。
可以改善组织局部血液循环障碍，分泌脓液，增强局部防卫功能，从而体现其止血、消肿等作用。
它还可以作为一种宿主抵抗因子，对组织局部起保护作用。
5．促进双歧乳酸杆菌增殖：溶菌酶在婴儿体内可以直接或间接促进婴儿肠道细菌双歧乳酸杆菌的增殖，促进婴儿消化吸收，可以促进人工喂养婴儿肠道细菌的正常化。
4.溶菌酶的应用在乳制品中的应用：人乳中溶菌酶的含量是牛乳的3000倍，溶菌酶是婴儿生长发育必需的抗菌蛋白。
溶菌酶作为抗生素替代品在饲料中的应用
溶菌酶作为抗生素替代品在饲料中的应用
溶菌酶，为一种天然的抗菌物质，可在一些特定的环境中甚至能替代抗生素使用，提高饲料安全性和生产效益。
本文将论述溶菌酶在饲料中的应用，并探讨其优势和发展前景。
在饲料中添加溶菌酶可以发挥多种作用。
溶菌酶能够破坏细菌细胞壁，直接杀灭致病菌。
溶菌酶还能调节动物肠道菌群的平衡，抑制有害菌的繁殖，增加有益菌的生长。
溶菌酶还能促进动物的消化吸收，提高饲料利用率。
研究表明，添加溶菌酶可以改善饲料消化率，降低环境污染，减少动物用药，提高养殖效益。
与传统的抗生素相比，溶菌酶具有许多优势。
溶菌酶是一种天然物质，不存在抗药性问题，不会导致细菌抗药性的进一步发展。
溶菌酶在生物降解过程中不会产生有害物质，对环境友好。
溶菌酶具有较好的稳定性，能够在饲料加工和饲喂过程中保持较高的活性。
与此溶菌酶还可以通过改变配方和剂量来适应不同的饲养条件和生长阶段，具有更高的适应性。
溶菌酶作为抗生素的替代品在饲料中具有广阔的应用前景。
通过添加溶菌酶可以提高饲料安全性和生产效益，减少抗生素滥用的风险，为农牧业的可持续发展提供新的解决方案。
在未来的研究中，需要进一步完善溶菌酶的制备工艺和饲料添加剂的配方，提高其生产效率和降低成本，以推动溶菌酶在养殖业中的广泛应用。
1 溶菌酶
1 溶菌酶溶菌酶(Lysozyme Ec 3.2.17）又称胞壁质酶，它广泛存在于鸟类、家禽的蛋清中和哺乳动物的泪液、唾液、血浆、乳汁、胎盘以及体液、组织细胞内，其中在蛋清中含量最丰富（约0.3%）。
在一些植物体如卷心菜、萝卜、无花果和微生物体内也存在溶菌酶。
溶菌酶是一种糖苷水解酶，在干燥条件下可在室温下长期保存，其纯品为白色或微白色结晶型或无定型粉末，无臭、味甜、易溶于水，不溶于丙酮、乙醚等。
其化学性质稳定，在pH值4～7范围内，100℃处理1min仍能保持原酶活性，但在碱性环境中该酶对热稳定性较差。
溶菌酶最适pH值为6.6，等电点pH值为10.5～11。
2 溶菌酶的催化作用机制细胞壁多糖是N-乙酰氨基葡糖（NAG）－N-乙酰氨基葡糖乳酸（NAM）的共聚物，其中的NAG及NAM通过β－1，4糖苷键而交替排列。
溶菌酶是一种葡糖苷酶，能催化水解NAG的C1和NAM的C4之间的糖苷键，但不能水解NAG的C1和NAM的C4之间的β－1，4糖苷键。
3 微生物溶菌酶参与细菌细胞壁溶解作用的酶大致可分为作用于糖苷键和作用于肽和酰胺部分的两类。
目前主要有七种微生物溶菌酶：内－N－乙酰己糖胺酶、酰胺酶、β－1,3，β－1,6葡聚糖酶和甘露聚糖酶、壳多糖酶（几丁质酶）、磷酸甘露糖酶、脱乙酰壳多糖酶。
4 溶菌酶在畜禽饲料中的应用4.1 降低毒素释放梁爱华等研究表明,鸡蛋清溶菌酶与β-内酰胺类抗生素联合使用能阻止细菌溶解, 降低细菌内毒素的释放, 并减少巨噬细胞TNFα和L－6的产生。
证明鸡蛋清溶菌酶与β-内酰胺类抗生素联合使用能降低细菌内毒素的释放，从而可能减轻内毒素血症。
4.2 作饲料防腐剂和杀菌剂由于溶菌酶本身是一种天然蛋白质，无毒性，是一种安全性高的饲料酶，它能专一性的作用于目的微生物的细胞壁，而不能作用于其它物质。
该酶对革兰氏阳性菌、枯草杆菌、耐辐射微球菌有强力分解作用；对大肠杆菌、普通变形菌和副溶血弧菌等革兰氏阴性菌等也有一定的溶解作用；与聚合磷酸盐和甘氨酸等配合使用，具有良好的防腐作用。
我国溶菌酶的研究与应用进展
我国溶菌酶的研究与应用进展一、本文概述溶菌酶是一种广泛存在于生物体内的水解酶，具有溶解细菌细胞壁的能力，因此在生物防御和医药领域具有重要的应用价值。
我国作为世界上人口最多的国家，对于溶菌酶的研究与应用具有深远的实际意义。
本文旨在综述我国溶菌酶的研究现状、应用领域以及未来的发展趋势，以期为推动溶菌酶在我国生物医药、食品工业、农业等领域的应用提供理论支持和指导。
在过去的几十年里，我国溶菌酶的研究取得了显著进展。
从最初的基础研究，到如今的产业化应用，溶菌酶在我国已经成为一种重要的生物活性物质。
本文将从溶菌酶的来源、性质、制备方法、应用领域等方面进行全面概述，并对我国溶菌酶研究的未来发展进行展望。
本文还将关注溶菌酶在应对抗生素滥用和耐药性问题中的潜力，以期为我国生物医药产业的可持续发展提供新的思路和方法。
二、溶菌酶的结构与性质溶菌酶是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶，主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。
溶菌酶广泛存在于动物、植物、微生物体内，不同来源的溶菌酶其分子结构具有一定差异，但基本性质相似。
溶菌酶分子量较小，通常约为14-15KD，是一种碱性蛋白质。
其等电点通常在pH值5-0之间，因此，在酸性环境中溶菌酶分子带正电荷，可与带负电荷的微生物细胞壁发生静电吸附。
溶菌酶具有较高的热稳定性，能在50℃左右保持较长时间的活性，但其活性受pH值影响较大，通常在pH值3-4范围内活性最高。
溶菌酶对多种化学试剂表现出较强的稳定性，如氯化钠、氯化钙等盐类以及乙醇、丙酮等有机溶剂对其活性影响较小。
溶菌酶的作用机制主要是通过其催化活性水解细菌细胞壁中的多糖成分，导致细胞壁破裂，从而使细菌失去生存能力。
溶菌酶还具有抗病毒、抗肿瘤、抗炎等多种生物活性，因此在医药、食品、饲料等领域具有广泛的应用前景。
在医药领域，溶菌酶可作为抗菌药物使用，对多种革兰氏阳性菌和阴性菌具有抑制作用，尤其对耐药性金黄色葡萄球菌和链球菌具有较强的杀菌作用。
溶菌酶资料
溶菌酶----新型免疫抗菌抗病毒药物、饲料添加剂溶菌酶研发背景：抗生素是人类应用最广泛的抗菌药物，不仅用于临床，也广泛用于畜禽饲养和农业方面。
在过去的50多年中，由于饲用抗生素在养殖中的长期使用导致大量耐药菌株的产生，且病原菌抗药性逐年增强，致使疗效下降，剂量提高，造成动物疾病越防越难防，越治越难治，给养殖业造成很大的损失和危害。
同时也给全人类的健康造成严重的影响。
因此，世界卫生组织于1994年就细菌耐药性的监测结果给全世界提出了警示：细菌对抗生素产生的耐药性正在以惊人的速度增加，而现在的抗生素药物正在失去原来的疗效。
因此寻求广谱、高效的新一代饲用抗菌药物已成为迫在眉睫的摆在人类面前的课题。
澳大利亚昆士兰大学医学系博士生导师、高级研究员王雯禾博士（1993年毕业于英国剑桥大学达尔文学院获微生物营养学博士学位），一直致力于生命科学的研究和发展，历经十多年的研究发现：酶广泛存在于生物体内，参与新陈代谢等多种生理功能，其中对微生物细胞壁具有水解功能的抗菌酶，如溶菌酶lysozyme能够溶解微生物细胞壁而使微生物死亡，而且溶菌酶lysozyme在人和动物的唾液、眼泪、乳汁以及肌体组织中大量存在，是人和动物自身重要的免疫因子，与人和动物的健康息息相关。
溶菌酶lysozyme的溶菌（杀菌）作用与传统的抗生素药物相比，具有对某一病原菌所有血清型都有效的优点，克服了一种抗生素只能预防一种或其中一种血清型病原菌的不足，更不存在药物残留和耐药性的问题。
王雯禾博士认为，溶菌酶lysozyme作为畜禽、水产饲料添加剂在替代抗生素，控制耐药菌，生产绿色肉蛋奶食品方面是最佳的选择。
并多次鼓励和支持国内年轻的科学家、学者，致力于这一伟大的、划时代的、对全人类的健康有杰出贡献的产品的开发和研究。
并于2003年10月推出最早用于防治动物疾病的产品--溶菌酶系列,由于它不但能溶解（杀死）细菌，增强动物的免疫能力，而且还能和病毒结合使病毒失活，所以它作为预防动物疾病的新型饲料添加剂，正在动物疾病防治的许多领域被广泛应用。
溶菌酶
1922年，英国细菌学家Fleming发现人的唾液、眼泪中存在有溶解细菌细胞壁的酶，因其具有溶菌用，故命名为溶菌酶。
溶菌酶广泛地分布于自然界中，在人的组织及分泌物中可以找到，动物组织中也有，以鸡蛋清中含量最多。
其他植物组织及微生物细胞中也存在[1]。
它是由动物特定细胞内的核糖体上合成的一种蛋白酶，分泌到细胞外杀死细菌的。
它存在于卵清、唾液等生物分泌液中，催化细菌细胞壁肽聚糖N-乙酰氨基葡糖与N-乙酰胞壁酸之间的1，4-β-糖苷键水解的酶。
它可以溶解掉细菌的细胞壁，杀死细菌。
由于溶菌酶能够选择性地分解微生物的细胞壁，并且自身没有毒害，因此作为一种天然、安全的杀菌剂和防腐剂，在食品工业、医药制剂、日用化工等行业被普遍重视。
随着开发和应用研究的进一步深入，溶菌酶的发展前景将会十分广阔。
下面主要陈述溶菌酶的一些基本情况及其在食品工业中的应用。
在食品工业中，溶菌酶是无毒的蛋白质，能选择性地使目标微生物细胞壁溶解而使其失去生理活性，而食品中的其他营养成分几乎不会造成任何损失。
因此，它可以安全地替代有害人体健康的化学防腐剂(如苯甲酸及其钠盐等)，以达到延长食品货架期的目的，是一种很好的天然防腐剂。
现已广泛应用于水产品、肉食品、蛋糕、清酒、料酒及饮料中的防腐。
1 溶菌酶的分类溶菌酶按其所作用的微生物不同分两大类，即细菌细胞壁溶菌酶和真菌细胞壁溶菌酶。
真菌细胞壁溶菌酶包括酵母菌细胞壁溶解酶和霉菌细胞壁溶解酶。
1.1 细菌溶菌酶细菌溶菌酶通常可分为三大类：N-乙酰氨基己糖苷酶，它催化水解肽聚糖中糖骨架中的β(1→4)糖苷键；N-乙酰胞壁酰-丙氨酸酰胺酶，它催化裂解肽聚糖中糖基与肽基；内肽酶，它催化裂解肽聚糖肽桥中的肽键。
1.2 真菌溶菌酶真菌溶菌酶主要包括几丁质酶和β-葡聚糖酶。
1.2.1 几丁质酶虽然一些外几丁质酶(exochitinases；EC3．2．1．30)也表现出抗真菌的特性，但抗真菌的几丁质酶主要是内几丁质酶(endochitinases；EC3．2．1．14)。
新型饲料添加剂-溶菌酶
新型饲料添加剂-溶菌酶
乔彦良
【期刊名称】《中国饲料添加剂》
【年(卷),期】2009(000)008
【摘要】1922年英国细菌学家Fleming发现人的唾液、眼泪中存在能溶解细菌细胞壁的酶，因其具有溶菌作用，所以命名为溶菌酶，是一类物质的总称，后来人们逐渐在人和动物的多种组织、分泌物和植物、微生物中也发现了溶菌酶的存在。
随着对溶菌酶研究的不断深入发展，人们对其特性有了进一步的了解。
近年来，人们根据其特性将其应用于动物保健及畜牧业生产中，具有极大的发展潜力。
【总页数】4页(P1-4)
【作者】乔彦良
【作者单位】山东信得科技股份有限公司,山东青岛266061
【正文语种】中文
【中图分类】S816.7
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1.溶菌酶饲料添加剂的研究与应用 [J], 潘正方;钟巧仙;朱江群
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3.用"金大田"饲料添加剂走科学养殖致富路就新型饲料添加剂--"金大田"力威素有关问题答读者问 [J],
4.溶菌酶作为饲料添加剂在动物生产上的应用 [J], 张宜辉;张蕊;王信喜;张军
5.凝胶电泳法(SDS-PAGE)测定饲料添加剂溶菌酶二聚体的含量 [J], 张文刚;张妤;孙冰清;姜芹;顾欣;黄士新;达列亚·阿合买提
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溶菌酶及其在畜牧生产上的应用
溶菌酶及其在畜牧生产上的应用
溶菌酶是一类能够溶解菌壁的酶类物质，它具有广泛的应用价值。
在畜牧生产中，溶菌酶可以用作饲料添加剂，以提高动物的饲料利用率和增强其消化功能。
溶菌酶的作用机制是通过分解细菌细胞壁中的多糖和蛋白质，从而使细菌壁受到破坏，达到杀菌的效果。
同时，溶菌酶还可以促进动物肠道中有益菌的生长，提高肠道健康状况，增强机体免疫力。
在畜牧生产中，溶菌酶被广泛应用于饲料添加剂中，以提高饲料利用效率和增强动物的消化功能。
这是因为溶菌酶可以加速饲料中的大分子多糖的降解，从而提高饲料的可消化性。
同时，溶菌酶还可以减少因为饲料不良造成的消化不良和腹泻等问题，从而提高动物的生产性能。
另外，在动物饲养过程中，肠道微生态平衡的破坏往往导致消化不良和免疫力下降等问题。
溶菌酶可以通过抑制有害细菌的生长，促进有益菌的繁殖，从而有助于维持肠道微生态平衡，提高动物的健康水平。
总之，溶菌酶在畜牧生产中发挥着重要的作用，可以提高动物的饲料利用率，增强消化功能，维护肠道健康和提高免疫力。
溶菌酶
溶菌酶溶菌酶（lysozyme）又称胞壁质酶（muramidase）或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶（N-acetylmuramide glycanohydrlase），是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶。
主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。
溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合，与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐，使病毒失活。
因此，该酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。
1简介中文名称：溶菌酶中文同义词：脆壁质酶；鸡蛋白；胞壁质酶(N-乙酰胞壁质聚糖水解酶);溶菌酶(鸡蛋清)英文名称：Lysozyme,简称LZM英文同义词：REDUCED LYSOZYME,WATERSOLUBLE;MUCOPEPTIDE-GLYCOHYDROLASE;MUCOPEPTIDE GLYCOLHYDROLASE;MUCOPEPTIDEN-ACETYLMURAMOYLHYDROLASE;MUCOPEPTIDEN-ACETYLMURAMOYLHYDROLASE GRADE III;MUCOPEPTIDEN-ACETYLMURAMOYLHYDROLASE GRADE VI:CHLORIDE;MURAMIDASE;MURAMIDASE GRADE III[1]CAS号：12650-88-3EINECS号：235-747-3[2]分子式：无分子量：14000左右EINECS号：235-747-3相关类别：发酵剂；Enzymes;酶；生化试剂；生物化学品。
分子结构图：2性质储存条件：2-8°Cform：powdercolor：white危险品标志B安全说明23-24/25-22WGK Germany3RTECS号OL5989850F3-10白色或微白色冻干粉，溶于水，不溶于乙醚和丙酮，pI为11.0-11.35，最适pH 值6.5。
溶菌酶研究进展及在畜牧业中的应用
溶菌酶研究进展及在畜牧业中的应用作者：张莹雪来源：《科学与财富》2018年第28期摘要：溶菌酶是一种性质稳定、耐酸耐高温、来源于动植物及微生物的球蛋白，具有抑菌、抗病毒等功能。
通过对溶菌酶进行物理、化学及配伍改进，能够提高溶菌酶的生物学功能，作为一种对人和动物安全的抗菌剂，溶菌酶能够提高饲料利用率，用作饲料防腐剂和杀菌剂，用于饲料中可替代抗生素，治疗畜禽疾病等，应用前景相当广阔。
关键词：溶菌酶；功能；改进；饲料；畜牧业1、溶菌酶的结构及性质溶菌酶是由多种氨基酸残基构成的碱性球蛋白，属于葡萄糖苷酶，其纯品为白色或微黄色结晶体或无定型粉末，无臭、微甜、易溶于水和盐溶液，不溶于丙酮、乙醚，化学性质稳定，干燥室温条件下可长期保存。
目前研究比较透彻的是鸡蛋清溶菌酶和牛胃溶菌酶。
2、溶菌酶的分类（1）动物源溶菌酶：分为C型、G型和I型三种类型。
（2）植物源溶菌酶：目前发现含溶菌酶的植物有近170 种，在木瓜、无花果、胡萝卜、大麦等植物中均能分离出溶菌酶。
（3）微生物源溶菌酶：根据其作用对象主要分为细菌细胞壁溶菌酶和真菌细胞壁溶菌酶。
（4）噬菌体溶菌酶：噬菌体产生的溶菌酶具有特异性，由噬菌体感染、诱导宿主细胞产生，未被感染细胞中不存在。
（5）利用基因工程手段制备的溶菌酶：利用基因重组技术将人溶菌酶基因克隆到原核或者真核生物中进行表达。
3、影响溶菌酶活性的因素溶菌酶的活性受到温度、pH、化学环境等因素影响较大。
溶菌酶遇热很稳定，pH值4～7、100℃处理1min仍保持原酶活性；pH值5.5、50℃加热4h后，酶活性不受影响；在碱性条件下，溶菌酶的热稳定性较差，易变性。
糖和聚烯烃类能增加溶菌酶的热稳定牲。
但是，曾发现具有-COOH和-SH、OH基的多糖对溶菌酶活性有抑制作用。
NaCl对溶菌酶也有抗热变性作用，溶菌酶的活性在低盐浓度时和离子强度密切相关的，在高盐浓度时溶菌酶的活性受到抑制。
除此之外，溶菌酶可和许多物质形成络合物导致其活性丧失。
溶菌酶
⑷ 洗脱：用柱平衡液洗脱杂蛋白，在收集洗脱液的
过程中，逐管用紫外分光光度计检验杂蛋白的洗脱 情况，当基线开始走平后，改用含1.0mol/L NaCl的 pH值6.5，浓度为0.02 mol/L磷酸钠缓冲液洗脱，收 集洗脱液。 ⑸ 聚乙二醇浓缩：将上述洗脱液合并装入透析袋内，
使鸡蛋清的稠度均匀，用两层纱布过滤除去脐带 块，量体积约为100ml。
2.鸡蛋清粗分离
按过滤好的蛋清量边缓慢搅拌边加入等体积的去 离子水，均匀后在不断搅拌下用1mol/L HCl调pH 值至7左右，用脱脂棉过滤收滤液。
3.D152大孔弱酸性阳离子交换树脂层析 ⑴ D152树脂处理：将D152树脂先用蒸馏水洗 去杂物，滤出，用1mol/L NAOH 搅拌浸泡并搅 拌4～8小时，抽滤干, 用蒸馏水洗至近pH7.5, 抽滤干, 再用1mol/L HCl按上述方法处理树脂， 直到全部转变成氢型，抽滤干HCL, 用蒸馏水 洗致近pH5.5，保持过夜，如果pH之不低于5.0， 抽滤干HCL,用2mol/L NAOH 处理树脂使之转变 为钠型，pH值不小于6.5。吸干溶液，加pH6.5 0.02mol/L的磷酸盐缓冲液平衡树脂。
聚糖的多层网状结构，作为细胞壁的骨架，上述结构中的任何化学 键断裂，皆能导致细菌细胞壁的损伤。对于G+细菌与G-细菌，其 细胞壁中肽聚糖含量不同，G+细菌细胞壁几乎全部由肽聚糖组成， 而G-细菌只有内壁层为肽聚糖，因此，溶菌酶对G+细菌的作用优 于对G-细菌的作用。
1.2 人及哺乳动物溶 菌酶：人溶菌酶存在于眼泪、唾液、 鼻粘液、乳汁等分泌液以及淋巴腺和白血球中， 1ml眼泪 中含7mg溶菌酶，1ml乳汁中含0.1～0.5mg。人溶菌酶由 130个氨基酸残基组成，有4个S-S键，分子量为14600， 其溶菌活性比鸡蛋清溶菌酶高3倍。对于哺乳动物溶菌酶， 目前仅从牛、马、羊等动物的乳汁中分离出溶菌酶，其化
溶菌酶
27.40%
2.70%
溶菌酶
对照组
增重效果：
“溶菌酶” 增重结果
19.00 18.00 17.00 16.00
18.45 平均每头增重（kg）
17.00
溶菌酶
对照组
每头利润：
8.00 4.00 0.00
7.52
每头增收毛利（元）
溶菌酶
0.00
空白组
（3）预防效果（小猪喂饲） “溶菌酶” 临床预防试验结果（50头小猪）
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（4）预防效果（肉鸡喂饲）324羽肉鸡成活率结果 “溶菌酶” 临床预防试验结果
100.00%
98.15%
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93.83%
85.19%
50.00%
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一、溶菌酶是什么？ 二、溶菌酶的药理作用。 三、临床效果。 四、经济效益和生态效益。
一、溶菌酶是什么？
溶菌酶是一种应用基因工程技术获取的酶，其效 果比蛋清溶菌酶增效50~100倍，抗菌谱扩大到了部分 革兰氏阴性菌。同时，我们还在活力保护上获得了一 种生物活性保护剂，大大延长了生物酶的有效期，二 年内活力水平比对照增加20%。在人的唾液、眼泪、 乳中都存在这种酶。专门作用于微生物细胞壁的水解 酶，又称细胞壁溶解酶。该酶能催化水解细胞壁中的 N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的ß –1,4糖苷键， 使细胞壁不溶性多糖分解成可溶性糖肽，细菌内容物 逸出而使细菌溶解。它可参与各种诱发炎症的酸性物 质结合，使其失活，并能增强其它药物的疗效。
指标 防治率
本产品与现有相关产品主要性能对比
溶菌酶对仔猪生长性能及血清生化指标的影响
２ １ ００
溶 菌 酶 对 仔 猪 生 长 性 能 及 血 清 生 化 指 标 的 影 响
卢亚萍 潘宏涛 纪孙瑞ｚ ， ，
（． １ 杭州康源饲料科技有限公司， 浙江 杭州
中图分类号 ：８ ６７ ￥ １． 文献标志码：Ａ
况 ，溶菌酶组血清 中葡萄糖含量 显著低 于空 白对照 组和抗生素对照组，说 明溶菌酶 可增 强仔猪对葡 萄
糖的转化和 利用效率 Байду номын сангаас ２ 。 表 ）
３ 结 论
样本数／ 头 总 蛋 白，ｇ Ｌ ） （・
于空 白对照组和抗生素对照组，说明溶 菌酶可 以增 腹泻率 ， 增强免疫力 ， 完全可 以替代抗生素使用 。 强仔猪对蛋 白质的消化吸收能力和免疫力 。血清中 表 ２ 溶菌酶对仔猪血清生化 指标 的影响 项目 空 白对照组 抗生素对照组 溶菌酶组 葡萄糖 的含量反映机体对饲料淀粉的吸收和代谢状
２１ ０ ０第 ４期
养猪 Ｓ Ｎ Ｒ ＤＵ Ｔ Ｏ ＷＩ Ｅ Ｐ Ｏ Ｃ Ｉ Ｎ
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母 猪 哺 乳 期 饲 养 要 着 眼 于 其 下 一 窝 产 仔 数
中图分 类号 ：８ ８４ ￥ ２ ． 文献标志码 ： Ｂ 文章编号： ０ — ９ ７２ １）４ ０ ３ — ｌ １ ２ １５ （０ ００ － ０ １ ０ ０
注 ：． １ 同行 肩 标 相 邻 字母 表 示 差 异 显 著 （ ＜ ． ） 相 间 字母 Ｐ Ｏ５， ０
表 示差异极显 著（ ＜ ．１ ， 同字母 表示差异 不显著（ ＞ ． ） Ｐ Ｏ ）相 Ｏ Ｐ０ ５， ０
下 同；． 泻 率 ＝ 泻 头 次，仔 猪 总 头数 × 验 天数 ） ｌｏ ２腹 腹 （ 试 × ０ ％。
溶菌酶在猪、禽上的应用
摘要：在畜牧养殖中，抗生素不仅作为动物发病时治疗的药物进行使用，还会作为促生长剂添加到动物的饲料中使用，目前全球75%的抗生素都用到了动物的生产养殖中。
持续广泛的滥用抗生素，不仅导致了细菌耐药性的产生，也使得肉食品中抗生素残留加大，威胁到了人类的健康。
因此，为了减少抗生素的过度使用、维护环境的安全性，寻找合适的抗生素替代品变得尤为紧迫和重要。
关键词：溶菌酶；猪；禽；应用溶菌酶在猪、禽上的应用顾振宏1，赵子惠2，蒋东平1（1.甘肃省白银市平川区畜牧兽医技术服务中心甘肃白银730900；2.甘肃省畜牧兽医研究所甘肃平凉744000）收稿日期：2023-03-08基金项目：猪IFN-λ1基因克隆、原核表达及抗PoRV 活性研究（项目编号:21JR7RA718）作者简介：顾振宏（1987.9—），男，本科，兽医师，主要从事动物防疫、检疫工作。
1溶菌酶的概述1.1溶菌酶的渊源溶菌酶是1922年由Fleming 从人的唾液和泪水中发现的一种具有溶解有些细菌作用的物质，因此将其命名为溶菌酶。
溶菌酶是一种单体碱性球蛋白，它的相对分子量为14.4ku ，溶菌酶的肽链包括129个氨基酸残基，其中包含18种氨基酸。
溶菌酶肽链N 末端由第40~88位氨基酸残基构成β-反平行折叠结构，含有4对由含硫氨基酸Cys 构成的二硫键，而C 末端由第1~39位和第89~129位氨基酸残基折叠形成α-螺旋结构。
肽链之间的活性位点是溶菌酶的功能核心，能够识别和水解细菌细胞壁的聚糖，从而发挥溶菌作用[1]。
溶菌酶是一种具有杀菌作用的天然抗感染物质，具有序列保守性和无毒副作用的碱性蛋白。
它广泛存在于人体各种组织、禽类和鸟类蛋清中，以及哺乳动物的泪液、血浆、唾液和乳液等液体中。
此外，微生物中同样含有溶菌酶[2]。
据来源不同可分为以下四类：微生物溶菌酶、植物溶菌酶、动物溶菌酶和蛋清溶菌酶[3]。
目前绝大多数的溶菌酶是从蛋清中提取而来的，经常采用的提取方法是：亲和层析法、离子交换树脂法、聚丙烯酸沉淀法和直接结晶法等。
溶菌酶在饲料中的应用
溶菌酶在饲料中的应用李鑫1 ，谭志坚1 ，凌欣华2，李巧贤3(1 佛山市正典生物技术有限公司，广东佛山 528138；2 梅州市畜牧兽医技术推广站，广东梅州 514021；3 广东现代农业集团研究院，广东广州 510630)溶菌酶（Lysozyme）又称胞壁质酶或N-乙酰胞质聚糖水解酶，是动物体内一种非特异性免疫因子，具有抗菌消炎、抗病毒、增强免疫力、促进双歧杆菌等有益菌增殖的作用。
本文介绍了溶菌酶的特性、分类和作用机理，重点综述了溶菌酶作为饲料添加剂在猪、鸡、鸭、反刍动物以及水产动物等饲料中的应用。
溶菌酶广泛存在于鸟类和家禽的蛋清中，亦存在于哺乳动物的泪液、唾液、血浆、乳汁、胎盘、体液及组织细胞内，其中以蛋清中含量最丰富。
溶菌酶对革兰氏阳性菌有抗菌作用，而对没有细胞壁的动物体细胞不会产生不利影响，因而安全性很高。
口服溶菌酶，可阻止流感和腺病毒繁殖。
作为抗生素的替代品，溶菌酶被WHO和许多国家认定为无毒、无害、安全的应用于食品和饲料添加剂领域，2010年被我国卫生部批准为食品添加剂。
1 溶菌酶的特性溶菌酶，又称胞壁质酶或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶，能水解肽聚糖中的N-乙酰葡萄糖和N-乙酰胞壁酸之间的β-1,4糖苷键，以此破坏细菌的细胞壁，具有较强的抑菌抗菌活性。
溶菌酶是一种白色、微白色结晶型或无定型粉末,无臭、味甜且易溶于水，不溶于丙酮和乙醚等有机溶剂，在干燥室温可长期保存。
化学性质非常稳定，对热也极为稳定。
当pH在1.2-11.3范围内剧烈变化时，其结构几乎不变。
在酸性环境中，溶菌酶对热的稳定性很强,在pH4-7范围内，100℃处理1 min仍能保持原酶活性，pH3时能耐100℃加热处理45 min,但在碱性环境中溶菌酶对热稳定性较差。
最适pH为6.6，作用的最适温度为45～50℃，等电点pH10.5-11。
2 溶菌酶的分类2.1 c型溶菌酶, 主要分布在脊椎动物和昆虫中, 大部分虾溶菌酶属于c型,如凡纳滨对虾、日本囊对虾、斑节对虾、罗氏沼虾、日本沼虾的溶菌酶。
溶菌酶,养猪致富好帮手
演讲者：盛强
我国生猪业发展的历史回顾
• ―猪为六畜之首”，养猪业是我国的传统产 业，有六七千年的历史，猪肉是我国消费 者喜爱的食品，目前猪肉消费量仍占肉类 消费总量的60％以上 ; • 我国也是世界上猪肉生产和消费第一大国 ，2007年全国生猪存栏4.39亿头，出栏肉 猪5.65亿头，猪肉产量4287.8万t，占全国 肉类总产量的62.5％，猪肉产量位居世界第 一
目前国内的养猪现状
• 资本与技术是支撑养猪业两个不可或缺的 要素 ； • 行业的技术门槛在逐步提高，有时候一场 疫病就是灭顶之灾，风险很大 ； • 政府大力支持生猪生产； • 近年来，由于养猪行业的高利润，各路资 本纷纷涌入养猪业 ； • 境外资产进军国内市场，参与养猪；
政府对畜牧业的大力支持
• 日前，农业部发布《全国畜牧业发展第十 二个五年规划(2011-2015年)》 ； • 农业部提出，到2015年全国畜禽规模养殖 比重提高10-15个百分点，畜牧业产值占农 林牧渔业总产值的比重达到36% ； • 首次提出对畜牧业的金融支持，鼓励有条 件的地方设立畜牧业贷款担保基金、担保 公司，为养殖加工龙头企业融资提供服务 。
溶菌酶生物学特性
• 抗菌消炎：它是一种水解粘多糖的碱性水解酶
， 使细胞壁不溶性多糖分解成可溶性糖肽， 细菌 内容物逸出而使细菌溶解；
• 促进损伤组织修复：改善组织基质的粘多糖代
谢，分解脓液，增强局部防卫功能。从而达到消 炎、修复组织的目的；
• 抗病毒：能与带负电荷的病毒蛋白直接作用，与
DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐，使病毒失活 。
猪价波动引人深思
• 之前有专家曾分析预测，五一前的猪价阶 段性低点有可能在7.5元/斤左右，7-10月份 间的阶段性低点有可能在7元/斤左右，全年 呈“W‖型走势。但猪价全国均价已连续2周 低于7.5元/斤，且仍在小幅下跌； • 饲料价格的波动影响饲养成本最终影响猪 价？ • 疾病的复杂化，增加了养殖风险、加大了 养殖投入，间接地影响猪价；
绿色饲料添加剂与畜禽免疫的关系
胞 减 少 ，从 而 增 强 机 体 的 抵 抗 力 ，大 大 提 高 动 物 的 健康 水 平 。
３ 益 生 素
中草 药 是 我 国 特 有 的 中 医 药 理 论 与 实 践
的产 物 ，其 资 源 丰 富 、历 史 悠 久 。 中草 药 免 疫 活 性 物 质 能 增 强 机 体 免 疫 机 能 ，提 高 动 物 抗 应 激 、 抗 疾 病 能 力 ，改 善 动 物 生 产 性 能 ，
用 ，在 调 节 动 物 生 长 发 育 、 防 病 治 病 、机 体 免 疫方 面起 到有 益 的作 用 。
绿色饲料添加剂与畜禽免疫的
溶 菌 酶 是 一 种 很 好 的 饲 料 防 腐 剂 。用 ０ ５ ． ％ ｏ
溶 菌酶与 甘氨酸 和聚合 磷酸盐 等配 合使用 ，
能 很 好 地 防 止 饲 料 发 霉 变质 ，延 长 饲 料 的保 溶 菌 酶 本 身 是 一 种无 毒 、无 害 的 高 盐 基
长 。 此 外 ，这 些 微 生 物 还 能 产 生 免 疫 调 节 因
人参皂 甙等 中草药 成分均有 免疫 促进 作用 。
绿 叶 公 司 保 健 养 猪 课 题 组 在 钩 吻 的研 究 上 取 得 突 破 ， 项 目通 过 鉴 定 为 “ 国 内 领 先 水 居
子 、 干 扰 素 等 免 疫 活 性 物 质 ．刺 激 肠 道 局 部 免 疫 器 官 的 生 长 发 育 ，增 强 机 体 的 免 疫 力 ，
保 持 机 体 生 理 平 衡 的重 要 作 用 。 可 改 善 和 增
强 巨 噬 细 胞 吞 噬 和 消 化 功 能 ．激 活 自细 胞 吞 噬 功 能 ．并 能 改 善 细 胞 抑 制 剂 所 导 致 的 白细
溶菌酶的种类及其应用
溶菌酶的种类及其应用摘要：溶菌酶(Lysozyme Ec 3.2.17)又称胞壁质酶或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶,它能专一性的作用于目的微生物的细胞壁,而不能作用于其它物质,是一种无毒、无害、安全性很高的盐基水解蛋白酶。
文章介绍了溶菌酶的来源、种类、抑菌机理,论述了溶菌酶在食品业、畜牧业、医药业中的应用,并展望了其发展及应用前景。
关键词：溶菌酶；种类；食品；畜牧；医药；应用溶菌酶( lysozyme,EC3.2.1.17)又称细胞壁质酶(muramid-ase)或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶(N-acetylmuramide glycano-hydralase)。
最早对溶菌酶的研究起于Nicolle 1907年发表的枯草芽孢杆菌中的溶解子,1922年Fleming等发现,在人的唾液、眼泪中存在有能够溶解细胞壁杀死细菌的酶,因而被命名为溶菌酶[1]。
此后人们发现溶菌酶广泛地存在于高等动物组织及分泌物、植物及各种微生物中,其中在新鲜的鸡蛋清中含量最高。
1937年Abraham和Robinson从卵蛋白中分离出溶菌酶晶体,揭开了研究溶菌酶的历史篇章。
1965年,英国的菲利普等用X衍射法对溶菌酶进行研究分析,第一个完全弄清了溶菌酶的立体结构[2]。
它广泛存在于鸟类、家禽的蛋清中和哺乳动物的泪液、唾液、血浆、乳汁、胎盘以及体液、组织细胞内,其中在蛋清中含量最丰富(约0.3%)。
在一些植物体如卷心菜、萝卜、无花果和微生物体内也存在溶菌酶,只是含量差异较大。
溶菌酶具有抗菌、抗病毒和消炎作用,与抗生素复合应用能增强抗生素疗效。
它还是人体内的非特异性免疫因子,可提高机体的免疫力,并且与其他阳离子抗菌肽类天然防御因子有很好的协同作用[3]。
另外,它本身是1种天然蛋白质,能在胃肠道作为营养物质消化、吸收,无毒性,也不在体内残留,是1种安全性很高的食品保鲜剂、营养保健品和药品[4]。
溶菌酶常用于各种加工食品和饮料中,集药理、保健和防腐3种功能于一体[5]。
饲料添加剂溶菌酶标准
饲料添加剂溶菌酶标准
饲料添加剂溶菌酶标准
随着现代畜牧业的迅速发展，人们对饲料添加剂的需求也变得越来越高。
其中，溶菌酶作为一种常见的饲料添加剂，其作用主要是帮助畜
禽提高对食物中淀粉质和蛋白质的消化率和利用率，从而促进动物的
生长发育和增强抵抗力。
然而，由于市面上溶菌酶产品质量良莠不齐，一些低质量的饲料添加剂会对动物的健康造成负面影响。
为了确保饲
料添加剂的质量，各国纷纷制定了相关的溶菌酶标准。
在使用饲料添加剂时，对其质量进行严格的检测是非常必要的。
各国
针对溶菌酶的品质要求和检测方法都是不尽相同的。
在中国，制定了
多项针对饲料添加剂的标准和试验方法，其中就包括了溶菌酶标准。
溶菌酶饲料添加剂则被分为四个等级。
第一、第二等级：酶活力分别为2000u/g和2500u/g，适用于乳牛、奶山羊、猪、鸡等畜禽中。
第三等级：酶活力为3000u/g，适用于育肥猪。
第四等级：酶活力为3500u/g，适用于超大型猪。
溶菌酶产品如何评估其质量？一般采用“最有效活性”、“酶效率值”、“活性回收率”等相关指标进行评估。
其中，“最有效活性”是指在酶和底物的摩尔比为1：3的情况下，溶菌酶在37℃和不同时间下对底物中淀粉的消化率。
而“酶效率值”则是指溶菌酶对底物中淀粉的消化率，具体计算公式为：酶效率值=最有效活性÷酶单位；“活性回收率”则是在一定条件下进行酶解反应后，通过比较酶解前后的酶活性差异进行计算。
总而言之，保障饲料添加剂的质量非常重要，只有这样才能最大限度地发挥其应有的作用，同时也有助于提高畜禽健康水平，推进农业可持续发展。