【精品课件】微生物药物敏性试验的意义
微生物检验 第三章 药敏试验
绿脓和非肠杆菌科 头孢他啶,庆大霉素 替卡西林,哌拉西林 阿米卡星 头孢吡肟,头孢哌酮 氨曲南 环丙沙星,亚胺培南 替卡西林/克拉维酸 妥布霉素,复方磺胺 头孢曲松 氯霉素,奈替米星
三级
常规测试并报告的药物分组(2)
葡萄球菌
一级 林 二级
三级
肠球菌
青霉素,氨苄西
万古霉素 庆大霉素
苯唑西林,青霉素
红霉素类 克林霉素,万古霉素 氯霉素
• 或治疗研究显示药物对分离菌株的临床疗效不可靠。
中 介(intermediate , I)
是指抗菌药物处于敏感与耐药之间,加大剂量有 可能敏感。即抗菌药物在生理浓集的部位具有临 床效力,还包括一个缓冲区,以避免微小的、不 能控制的技术因素造成重大的结果解释错误。
药代动力学和药效学
• 药代动力学:药物吸收,分布,代谢,排泄 • 药效学:药物对机体的作用
推测其他药物的敏感
• 青霉素G
• 头孢噻吩 • 奈啶酸
2015-7-10
葡萄球菌
氨苄西林,美洛西林
替卡西林
肠杆菌科
头孢拉定,头孢氨苄 头孢克罗
肠杆菌科 所有
所有氟喹诺酮类 替考拉宁
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• 万古霉素
药敏试验-稀释法
• 以一定浓度的抗菌药物与含有被试菌株的培养基 进行一系列不同倍数稀释(通常为双倍稀释), 经培养后观察其最低抑菌浓度。
• 时间依赖型:β-内酰胺类,大环内酯类 • 浓度依赖型:氨基糖苷类、喹诺酮类 – 这些参数可用于计算具有最佳药效的给药方案
药敏试验的方法学
• 半定量…纸片扩散法 (抑菌圈直径) • MIC法:
– 肉汤稀释法 – 琼脂稀释法
– 自动化仪法
– 抗生素连续梯度法 (Etest )
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4
▪ 主要根据细菌种类和抗生素作用机制选药。
▪ 选择试验的药物应具有确切的临床疗效,试验 药物的体外试验结果可以接受,并且试验药物 具有代表性。
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5
▪ 抗菌药物有近200种,药敏试验不可能也没 有必要测定每种药物。
▪ 药敏试验药物选择是根据细菌对抗菌药的 敏感性、药物抗菌活性及耐药菌株流行状 况而确定的,通常同类药物只选择1-2个代 表品种。 CLSI对各种细菌的药敏试验中宜测试的药 物品种进行了推荐,如对葡萄球菌的药敏 试验应包括苯唑西林、青霉素、红霉素、 克林霉素、复方磺胺甲噁唑(SMZ-TMP) 和 万古霉素;此外根据情况可增加其他品种 如氯霉素、环丙沙星、庆大霉素、利福平 和呋喃妥因等。
▪ 对付产ESBLs菌株,最有效的抗生素为碳 青霉烯类(泰能)
▪ 其次,头孢西丁及含酶抑制剂的复合剂、 氨基糖类等。
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药敏试验的推导
▪ 一代头孢菌素的代表药是头孢噻吩
▪ 但该药也只能预测敏感
▪ 也就是说如果头孢噻吩敏感,那么其他 一代头孢菌素就都是敏感的
▪ 而耐药则不然;相反,而头孢唑林可以 预测一代头孢菌素的耐药性,却不能完 全预测其敏感。
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C组:为备选药物,作为替代 或补充
在下列情况下使用: 对一个或多个首选药耐药的地区流行株 感染 对不常见菌感染的治疗,控制传染病的 流行,获得耐药性监测资料。
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▪ U组:为备选药物,仅用于尿 路感染的治疗。
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药敏试验相关概念解释
▪ MRSA—耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 ▪ MRSE—耐甲氧西林表皮葡萄球菌
《解读药敏报告》课件
药敏报告的重要性
指导临床用药
药敏报告为临床医生提供了致病微生物对各种抗菌药物的敏感性和耐药性信息,有助于医生选择 合适的药物。
提高治疗效果
通过药敏报告,医生可以选择对致病微生物敏感的抗菌药物,提高治疗效果,缩短病程。
控制耐药性的产生
药敏报告有助于医生及时发现和防止耐药性的产生,保护抗菌药物的有效性。
患者情况
一位65岁男性,因尿路感染住院 治疗。
病原体
耐万古霉素肠球菌。
药敏报告
显示该菌对多种抗生素耐药。
治疗过程
采用替加环素治疗,同时根据药 敏报告调整剂量和疗程。
THANKS
告并合理选用敏感药物。
加强与实验室的沟通合作
03
临床医生和实验室之间应加强沟通合作,及时反馈和解决药敏
试验中出现的问题。
05
实际案例分享
案例一:耐药菌感染治疗失败
01
患者情况
一位70岁女性,因
肺部感染住院治疗
02
。
耐药菌株
肺炎克雷伯菌,对 多种抗生素耐药。
04
结果
患者死亡,诊断为
03
多重耐药菌株感染
02
药敏报告解读步骤
确定病菌种类
01
确定病菌种类是解读药敏报告的第一步,因为 不同病菌对药物的敏感性不同。
02
通过查看报告中的细菌名称或编号,可以确定 感染的病菌类型。
03
了解病菌种类有助于医生选择合适的药物进行 治疗。
判断是否耐药
耐药性是指病菌对某些药物产 生抵抗力,导致药物无法有效 杀死或抑制病菌的生长。
04
药敏报告的局限性及未来展 望
药敏报告的局限性
01
培养基的局限性
抗微生物药物和敏感性试验-精品医学课件
菌落数(CFU)/ cm2 = 菌落数/ 采样面积
2.压印法
用直径5cm的特制平皿(Rodac平皿),倾注于16.5ml琼 脂后可使培养基高出平皿口1~2mm,凝固后将平皿上的琼 脂直接压贴于物体表面10~20s,接触面积为19.63平方厘米。
2.对居住环境、特殊病房、实验室、无菌车间等场所空气质量 的细菌学评价。
实验目的
掌握医院感染的微生物监测方法
目的与要求
器材与试剂
器材与试剂
普通琼脂平板(直径90mm及60mm)、无菌生理盐水、无菌 棉拭子等。
步骤与方法
一、空气中细菌含量的检测
1.检测对象:医院各个科室的空气,手术室、新生儿室、产房、 烧伤病房、重症监护室等空气污染的检测,应成为医院感染 管理中特别关注的重点。
2. 用无菌棉拭子蘸取菌液,在管内壁将多余菌液旋转 挤去后在琼脂表面均匀涂布接种3次,每次旋转平板 60度,最后沿平板内缘涂抹1周。
3. 平板置室温下3-5分种后,用纸片分离器或无菌镊 将含药纸片贴于琼脂表面,各纸片中心相距应大于 24mm,纸片距平板内缘应大于15mm。(纸片选 择参照实验书p39)
药敏实验与医院感染的检测
一、抗菌药物敏感试验
抗菌药物敏感性试验
纸片琼脂扩散法
经世界卫生组织推荐,目前各国临床微生物学实验 室广泛采用的标准纸片扩散法是由Kirby和Bauer 所建立的纸片琼脂法,即Kirby-Bauer法(K-B法纸 片琼脂扩散法)
实验原理
将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板 上,纸片中所含的药物吸收琼脂中的水分溶解后不断向纸片 周围扩散形成递减的梯度浓度,在纸片周围抑菌浓度范围内 测试菌的生长被抑制,从而形成无菌生长的透明圈即为抑菌 圈.抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度。
细菌药敏试验 ppt课件
8
4
2
重要误差
12
258
1
1
12
小误差
敏感 5
1 0.5
1
25
9
0.25 6
8 10 12 细1菌4药敏1试8 验2p0pt课件22 24 26 28 30 32 349
不同国家的判定折点 -可能不同
原因:
用药剂量不同,服药的间隔不同 评价敏感时较保守 更强调检测出耐药株(即特定的耐药群) 技术因素:接种、培养基
* M100 每年更新一次
**M2, M7 每三年更细新菌一药敏次试验 ppt课件
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药物分组
判断折点
标准菌株质控范围
特殊的耐药监测
细菌药敏试验 ppt课件
13
细菌药敏试验 ppt课件
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敏感性分类(CLSI的定义)
敏感(Susceptible)
用常规用量治疗有效 常规用药时达到的平均血药浓度超过细菌的
缓冲区:防止操作的系统误差造成重 大结果的判定错误
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药敏试验的方法学
半定量…纸片扩散法 (抑菌圈直径) MIC法:
稀释法(肉汤、琼脂) 自动化仪法 抗生素连续梯度法 (Etest ) 流式细胞仪
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纸片扩散法(Kirby-Bauer法)
将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼 脂平板上,纸片中所含的药物吸收琼脂中水分溶解后 不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度,在纸片周 围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制,从而形成无 菌生长的透明圈即为抑菌圈。
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7
MIC与抑菌圈直径的线性关系
Log2. MIC R I
微生物药物敏性试验的意义
纸片扩散法具有操作简便、成本低廉的优点,适用于大量样本的初步筛选。但是,该方法的结果受人为因素影响 较大,且无法准确测定细菌的MIC值。
E试验
总结词
E试验是一种半定量药物敏性试验方 法,通过在细菌培养液中加入药物浓 度的梯度,观察细菌的生长情况,从 而判断细菌对药物的敏感性。
详细描述
E试验具有操作简便、结果准确、可重 复性好的优点,适用于临床实验室和 科研实验室。但是,该方法需要特殊 的仪器和试剂,成本较高。
微生物药物敏性试验 的意义
目 录
• 微生物药物敏性试验的定义和目的 • 微生物药物敏性试验的方法和流程 • 微生物药物敏性试验的应用领域 • 微生物药物敏性试验的挑战和前景 • 微生物药物敏性试验的案例分析
01
微生物药物敏性试验的 定义和目的
定义
微生物药物敏性试验是指通过实验手 段检测微生物对各种药物的敏感性和 耐药性,从而为临床治疗提供依据的 过程。
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个体化治疗
根据患者的药敏试验结果,医生可以为患者制定个体化的治疗方案,确保治疗的有效性和安全性。
药物研发
新药筛选
药敏试验可用于筛选具有抗菌活 性的新药,为药物研发提供依据 。
药物评价
通过比较不同药物对微生物的药 敏性,可以评估新药的抗菌效果 和潜在的治疗优势。
流行病学研究
疾病监测
通过药敏试验监测致病菌的耐药性变化 ,有助于了解疾病的流行趋势和传播情 况。
它是一种重要的临床实验室检测方法, 用于指导医生选择合适的药物和剂量, 提高治疗效果并减少不必要的药物浪 费和副作用。
目的
确定微生物对药物的敏感 性和耐药性
抗菌药敏试验的意义
药敏试验的意义:1.查出耐药,减少治疗错误,便于医生选择个体化疗方案、节省费用。
2. 进行耐药监测,为医院感染控制部门提供防治依据,为经验用药提供可靠依据。
3.利用耐药监测结果控制抗菌药物应用,减少耐药菌株的出现,延长新药使用寿命。
4. 为新药的研究和评估提供有价值的信息。
(二)、药物敏感试验规则目前世界上通用的规则是德国和欧洲标准,而我国主要以临床试验室标准化委员会(CLSI ),即美国国家实验室标准委员会(NCCLS) 的规则为标准,这个标准主要包括CLSI 纸片扩散法(M2 )和需氧菌稀释法(M7 )。
(三)、抗菌药物敏感性试验结果参照标准1.标准的正确使用M100 –即新表M100-S17 ,每年更新1 次;包括M2 和M7 文件,M2 –即纸片扩散法(DD) 文件M2-A9 ,M7 –即MIC 文件M7-A7 。
M2 、M7 文件每3 年更新一次;使用文件时应注意文件是否已更新,避免使用旧文件造成判断结果失误。
2.获得文件的方法如果购买厂家的纸片可向厂家索取标准,每年国际化会议也会颁发此文件的中心内容。
(四)、CLSIM-100 表内容:CLSIM-100 表主要包括版本中的更新要点、各版本抗菌药物分组、M2 纸片扩散法用的表、M7 MIC 用的表、M7 MIC 用的表及词汇表等内容。
2007 年主要更新内容有关“或”的章节,即同类抗生素能否相互替代的问题;耐药性的增长及连续发生株的测试原则;不适于尿中分离菌的药物,大环内酯类的说明;革兰阴性菌及阳性菌的更新部分;质量评估和质量控制方面的更新。
(五)、试验与报告中抗菌药物的选择</strong>M-100 表将抗菌药物分成A.B.C.U.O 组1 、表1 和表1A 中所列A 组药物被认为对特定菌群的常规的首选试验组合以及常规结果报告中应该出现的药物。
2 、B 组包含一些临床上重要的,特别是针对医院内感染的药物,也可以用于首选试验。
药敏试验PPT资料PPT课件
采集部位
选择病原体含量较高的部 位进行采集,如痰液宜选 自肺部。
样本处理
样本保存
样本量
采集后的样本应尽快送至实验室进行 检测,如不能及时送检,应妥善保存。
保证足够的样本量,以满足后续实验 需求。
样本处理方法
对采集的样本进行适当的处理,如离 心、过滤等,以去除杂质和无关细胞。
结果判断
根据病原体的生长情况,判断其对不同药物的敏 感程度。
报告发布
将实验结果及时报告给临床医生,为治疗提供参 考依据。
04
药敏试验的应用
抗生素选择
抗生素选择
药敏试验能够确定病原体对各种 抗生素的敏感程度,帮助医生选 择最有效的抗生素进行治疗,提 高治愈率并减少耐药性的产生。
耐药性检测
通过药敏试验可以检测病原体对 抗生素的耐药性,了解耐药机制 和传播情况,为制定防控策略提 供科学依据。
在琼脂平板上接种细菌,然后滴 加抗生素溶液,观察抑菌圈的大 小,判断细菌对药物的敏感性。
稀释法
将不同浓度的抗生素与细菌混合培 养,观察细菌的生长情况,确定药 物的最小抑菌浓度(MIC)。
纸片扩散法
将含有一定量抗生素的纸片贴在琼 脂平板上,观察纸片周围抑菌圈的 大小,判断细菌对药物的敏感性。
02
药敏试验的种类
详细描述
E试验法是一种新型的药敏试验方法,通过在药敏试纸上施加连续变化的压力,使药物浓度与细菌生 长曲线呈线性关系,从而快速准确地判断细菌对药物的敏感程度。该方法操作简便,结果准确可靠。
03
药敏试验的步骤
样本采集
采集方法
根据感染部位和病原体类 型,选择合适的采集方法, 如咽拭子、痰液、尿液等。
微生物药敏实验及合理使用抗生素
微生物药敏实验技术的发展趋势
高通量自动化
随着技术的进步,微生物药敏实验将更加趋向高 通量、自动化,提高实验效率和准确性。
智能化分析
借助人工智能和机器学习技术,对实验数据进行 智能分析,快速准确地解读药敏结果。
耐药性检测
针对多重耐药菌的耐药性检测将更加精准和快速, 为临床提供及时有效的指导。
将样本接种在培养基上,在适 宜的温度和环境下培养一定时 间,使病原体生长繁殖。
药敏试验
在培养后的病原体中加入不同 种类的抗菌药物,观察病原体 对药物的反应,如抑制生长、 杀菌效果等。
结果解读
根据病原体对药物的敏感程度 ,判断哪种药物对该病原体有
效,从而指导临床用药。
药敏实验结果的解读
敏感
表示病原体对该药物敏感,通常 在常规用药剂量下即可达到治疗
的副作用。
抗生素的联合使用
01
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协同作用
在某些情况下,联合使用两种 或多种抗生素可以产生协同作
用,增强抗菌效果。
扩大抗菌谱
联合用药可以扩大抗菌谱,覆 盖更多种类的病菌。
减少耐药性
合理地联合使用抗生素可以减 少单一用药时病菌产生耐药性
的机会。
注意配伍禁忌
不同抗生素之间可能存在配伍 禁忌,需谨慎选择联合用药方
四环素类
包括四环素、土霉素等,通过 抑制细菌蛋白质合成发挥抗菌 作用。
其他类
包括氯霉素、磺胺类、喹诺酮 类等,通过不同机制发挥抗菌 作用。
各类抗生素的作用机制
四环素类
氨基糖苷类
通过抑制细菌蛋白质合成的关键 酶,使细菌细胞膜功能受损,引 起细菌死亡。
通过与核糖体结合,抑制细菌蛋 白质合成,导致细菌生长受阻死 亡。
药敏实验的原理与意义
药敏实验的原理与意义
药敏实验是用来测试患者对药物的敏感性的一种实验方法。
其原理是通过将不同浓度的药物加入到培养基中,然后观察药物的最低有效浓度以及最低抑制药物敏感菌株的能力。
通过这种方法可以确定患者对某种药物的敏感性,从而选择最适合的治疗方案。
药敏实验的意义在于可以帮助医生选择最有效的药物治疗患者,并避免对无效的药物进行不必要的使用,从而减少药物的不良反应和耐药性的发生。
同时,药敏实验也可以帮助医生了解不同菌株对不同药物的敏感性,为临床治疗提供参考。
因此,药敏实验在临床医学中具有重要的意义。
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抗菌药物分类
青霉素类
头孢菌素类
β-内酰胺类
其他β内酰胺类
氨基糖甙类
大环内酯类
喹诺酮类
林可霉素类和克林霉素
糖肽类
四环素
氯霉素
利福霉素类
其他抗菌药物(硝基呋喃类、磺胺药及甲氧苄啶)
β内酰胺类抗生素
青霉素类
头孢菌素类
天然青霉素 抗葡萄球菌青霉素 氨基青霉素 抗铜绿假单胞菌青霉素
4、 细菌对抗生素的抵抗力在增加,并且速度也在加 快。很多细菌对各种药物的MIC值在不断提高,表现 出细菌对抗生素的敏感性在不断降低。对于G+球菌, 青霉素的剂量已经从最初的2万单位上升到几百万单 位,仍然有耐药菌株出现。临床出现的葡萄球菌几 乎全部对青霉素耐药。很多菌株(特别是G-杆菌), 在使用抗生素治疗4天后,就可以通过各种途径获得 对某敏感药物的耐药性。万古霉素是用于阳性球菌 所致严重感染时的首选用药,在应用的3年后就已经 发现耐万古霉素的肠球菌菌株。虽然目前还没有发 现耐万古霉素的葡萄球菌,但如果无目的使用,对 其耐药的葡萄球菌菌株将会很快出现。
对青霉素酶稳定,但仍可为许多革兰阴性菌 产生的β内酰胺酶所水解;
血清半衰期多较短,大多为0.5~1.5小时; 不易透过血脑屏障
四、自动化仪器与手工法的比较
1. 结果分析智能化:仪器能够将具有特殊耐药机制的细 菌报告,而这类细菌用药方案与常规不同。如ESBL、 MRSA等等。此外,体外药敏结果可能与体内效果不一 致时,对该结果提出预警。
2. 药敏组合更为合理、全面:仪器做药敏时,按照不同 类别细菌将抗生素合理组合,避免将不适用的抗生素 报告给临床。如:红霉素用于报告对阳性球菌的药敏, 但不能报告对阴性杆菌的药敏。同样,头孢哌酮用于 报告对阴性杆菌特别是铜绿假单胞菌的药敏,但一般 不报告对阳性球菌的药敏。
一、药敏试验在感染性疾病防治中的意 义
近年来,由于各种抗菌药物的广泛应用, 导致耐药菌株的迅速增多。尤其是广谱及超 广谱抗生素的普遍使用,造成耐药菌株大量 出现,给临床治疗带来极大的困难。同时, 由于不合理的使用抗生素,治疗的失败率及 不良反应均有增加。因此,药敏试验在感染 性疾病的防治方面具有日益重要的实际意义。
3、用于流行病学调查及院内感染的监控,减 少耐药菌株的流行。
三、什么情况下需要做培养+药敏?
感染原因无法确定。 病原菌的耐药性无法确定,经验用药可能失败(尤
其是免疫力低下患者、长期使用抗生素者、ICU病 房、院内感染患者、接受导管插入或其他创伤性治 疗患者。) 病人对可用药物过敏,需要检测其他药物的耐药性。 病人个体情况要求对某些药物精确用药,需要测定 其最低抑菌浓度(MIC)。
六、当前细菌感染的特点及对策
1、条件致病菌引起的感染增多,感染的病 原菌难以事先预料。
2、由于耐药性的普遍增加,细菌对抗生素 的敏感性往往无法预知,经验用药经常无效。
3、多重耐药菌株增多。特别是院内感染病 人,ICU病房、免疫力低下的病人所发生的 感染。具有特殊耐药机制的菌株不断增多, 给临床治疗带来难题,对于部分细菌甚至出 现没有合适的抗生素可以使用。
3. 药敏结果实现定量:同时报告MIC值以及由此得出的 定性结论(敏感。中介、耐药)。
五、如何理解MIC值及药敏结果?
每种药物均提供定性和定量两种结果。 定性:敏感(S)表示该药物对该细菌有抑制或杀灭作用。使 用常规剂 量可以达到有效的治疗效果。 中介(中度敏感,I)表示细菌对该药物治疗的敏感性低 于敏感 菌株,必须加大剂量以达到更高的血药浓度才能在特定 的生理部 位获得有效的临床效力;对于使用剂量有严格限制的药 物则必须 重复测试以确定敏感还是耐药。 耐药(R)表示药物常规剂量所达到的药物浓度不能抑制 或杀死 细菌,即使加大剂量也不能达到治疗效果或者超过了人 体的正常
二.培养+药敏的目的
1、 确定导致感染的病原菌的种类,对于不同 的病原菌(G-杆菌或G+球菌,条件致病菌或 急性传染病病原菌)需要采取不同的治疗措 施。
2 、 确定病原菌对各种抗生素的敏感性,指导 临床根据病人情况合理用药。由于细菌耐药 性的快速增长,单纯依赖经验选用药物经常 无效,在更多的时候需要参考药敏实验的结 果。
抗葡萄球菌青霉素类:包括双氯西林、苯唑 西林、甲氧西林等;对产β内酰胺酶葡萄球
氨基青霉素
氨苄
金葡、链球、大肠 相似
流感杆菌、厌氧菌 稍强
肠球、沙门
杀菌作用
等(%)
10~20
阿莫 相似
强2倍 稍强、快
10 高 5
头孢菌素分类
一代:对青霉素酶稳定,但被β内酰胺酶水 解,主要用于敏感G+/G-菌(金葡、大肠、 肺克)
细菌的耐药性及药 敏试验的临床意义
细菌室
主题
一.药敏试验在感染性疾病防治中的意义 二.培养+药敏的目的 三、什么情况下需要做培养加药敏 四、自动化仪器与手工法的比较 五、如何理解MIC值及药敏结果? 六、当前细菌感染的特点及对策 七、常规药敏试验的选用原则 八、细菌的耐药机制 九、关于药敏试验的补充说明 十、一些特殊细菌的药敏 十一、长期使用抗生素的病人应该怎样做药敏试验?
二代:对β内酰胺酶稳定,绿脓耐药 三代:对β内酰胺酶稳定,组织分布好,
MRSA、肠球菌耐药,对肠杆菌科抗菌活性 加强,但不动杆菌常耐药
四代:对β内酰胺酶,尤其是AmpC酶稳定, 对细菌细胞膜穿透力增强
第一代头孢菌素
主要作用于MRSA和除肠球菌外的需氧革兰 阳性球菌(包括甲氧西林敏感葡萄球菌以及 各组链球菌)。对部分大肠埃希菌、肺炎克 雷伯菌、痢疾杆菌和奇异变形杆菌等亦有较 强抗菌作用;对口腔厌氧菌具抗菌活性。
第一~四代头孢菌素 口服头孢菌素
β内酰胺类+酶抑制剂
非典型类
单环类 碳青霉烯类
青霉素类
天然青霉素:包括青霉素G、青霉素V;主 要作用于革兰氏阳性菌、革兰氏阴性球菌、 和某些革兰氏阴性杆菌如嗜血杆菌属。
氨基青霉素类:包括氨苄西林、阿莫西林、 巴氨西林、匹氨西林等;主要用于对青霉素 敏感的革兰氏阳性菌以及部分革兰氏阴性杆 菌如大肠杆菌、奇异变形杆菌、沙门菌属、 志贺菌属和流感杆菌等。