苦参碱对肝癌细胞HepG2增殖的影响及端粒酶活性调控的体外研究

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苦参碱对肝癌细胞增殖及其细胞自噬的影响

苦参碱对肝癌细胞增殖及其细胞自噬的影响

苦参碱对肝癌细胞增殖及其细胞自噬的影响[摘要] 目的探索苦参碱对肝癌hepg2细胞增殖及其细胞自噬的影响,为临床探索有效的肝癌综合治疗方案提供实验依据。

方法采用mtt法和流式细胞仪检测肝癌hepg2细胞增殖抑制率及其细胞周期的变化;荧光显微镜定性观察肝癌细胞自噬情况。

结果苦参碱抑制肝癌hepg2细胞的增殖,且随苦参碱浓度的增加和时间的延长,肝癌hepg2细胞的抑制率增加(p 3 讨论原发性肝癌是恶性程度最高的肿瘤之一。

全球男性发病率位于恶性肿瘤的第5位,死亡率居恶性肿瘤的第2位;全球女性发病率位于第7位,死亡率位于第6位。

全球每年新发肝癌约75万人,而我国占半数以上[6]。

由于肝癌具有恶性程度高、病情发展快、预后差、死亡率高等特点,多数就诊时已属晚期。

目前手术治疗依然是肝癌的首选,但是肝癌发病隐匿,确诊时能手术者仅占l0%~15%,因此必须联合其他非手术措施(如化疗、生物治疗等)进行综合治疗,才能有望提高肝癌患者的长期生存率[7]。

近年来,苦参碱作为一种新型化疗药物,具有疗效显著、副作用小、毒性低等特点应用于临床。

苦参碱(matrine)是中药苦参、山豆根、苦豆子的主要活性成分,具有保护肝细胞、抗病毒、抗过敏等多种药理作用[8]。

此外苦参碱具有广泛的抗肿瘤作用。

研究发现:在体外实验中苦参碱可明显地诱导人乳腺癌[9]、骨肉瘤[10]及肝癌细胞[11]等的凋亡。

苦参碱的抗肿瘤的作用机制很多,主要包括诱导肿瘤细胞凋亡、诱导肿瘤细胞分化、诱导细胞自噬以及细胞毒等多种作用[3,12-13]。

本实验结果表明:苦参碱对人肝癌hepg2细胞有明显的抑制作用,不同浓度的苦参碱作用不同时间后,肝癌细胞的存活率降低,这种抑制作用呈时间和剂量依赖性。

流式细胞仪分析细胞周期结果:苦参碱作用于人肝癌hepg2细胞后, g1 期细胞数目明显增多,s期细胞数目减少(p < 0.05),这表明苦参碱作用肝癌细胞后将细胞周期阻滞在g1期,使细胞不能进入s期进行dna合成,并最终抑制了肝癌hepg2细胞的抑制,本文实验结果与以往郭丹等[14]、夏宝妹等[15]、杨道科等[16]在肝癌、子宫内膜癌以及结肠癌细胞中的研究结果一致。

苦参的药理活性研究进展

苦参的药理活性研究进展

苦参的药理活性研究进展徐今宁张鹤明赵秀华【关键词】苦参苦参(Sophoraflavescens Ait)为豆科槐属植物,是我国历史悠长的传统药物之一,其性味苦寒,归心、肝、肾、大肠、膀胱经,具有清热燥湿,祛风杀虫,利尿的功能。

用于热痢、便血、黄疸、尿闭、赤白带下、阴痒、湿疹、湿疮、皮肤搔痒、疥疮麻风、外治滴虫性阴道炎。

其要紧成份为苦参碱matrine,氧化苦参碱oxymatrine等多种生物碱类成份,苦参醇kurarinol、苦参丁醇kuraridinol等多种黄酮类成份,另含氨基酸类,挥发油类,糖类,有机酸类,内酯类成份等[1]。

近几年,对苦参化学成份和生物活性的研究不断深切,现将国内外对苦参药理活性的研究现状综述如下。

1 抗肿瘤活性肿瘤的发生和进展不仅是肿瘤细胞增殖和分化异样所致,而且仍是肿瘤细胞异样凋亡的结果。

因此,抑制肿瘤细胞增殖,诱导肿瘤细胞分化和凋亡,对临床医治肿瘤有必然的指导意义。

近几年的研究说明,苦参对恶性葡萄胎、绒癌、子宫癌、埃氏腹水瘤和淋巴内癌细胞都有不同程度的抑制和消灭作用,苦参碱对肿瘤细胞具有选择性杀伤作用,还能通过改变细胞核酸的分子序列,抑制肿瘤的生长,而且这种阻碍是普遍的、多部位的[2]。

研究说明,用苦参碱医治各类晚期癌肿,能减轻病症,延长存活期,且不破坏正常白细胞的产生,乃至能升高白细胞,提高机体抗击力,这是许多医治药物难以达到的。

对苦参碱在抗肿瘤机制方面的研究归纳起来其抗肿瘤活性要紧表此刻以下几个方面。

抑制肿瘤细胞增殖苦参碱能有效抑制人肝癌细胞株HepG2的增殖。

MTT实验显示,苦参碱对HepG2抑制作用有时刻剂量依托性。

随着作历时刻延长和药物浓度的增加,HepG2细胞存活率明显降低,细胞DNA合成亦相应降低。

病理学研究说明,苦参碱可抑制肝癌HepG2细胞的增殖,并具有直接杀伤作用[3]。

其作用机制是苦参碱抑制部份肿瘤细胞从G期进入S期,从而抑制其增殖。

诱导肿瘤细胞分化和凋亡苦参碱不仅能抑制细胞增殖并增进其良性分化,还能诱导肿瘤细胞的凋亡。

不同浓度苦参碱对肝癌细胞增殖及JAK_STAT信号通路的影响

不同浓度苦参碱对肝癌细胞增殖及JAK_STAT信号通路的影响

下发生凋亡的内在活性有关[8]。

细胞周期是指连续分裂细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程,可分为间期和有丝分裂期,细胞间期又常划分为休眠期(G0),DNA合成前期(G1),DNA合成期(S),DNA合成后期(G2),整个周期可表示为G1→S→G2→M。

细胞发生凋亡时,用P I对细胞进行染色,凋亡细胞由于总DNA量降低,于正常G0/G1细胞群前出现一DNA低染细胞群,即G1峰前出现亚二倍体峰(sub2G1),细胞凋亡群。

在本实验中,细胞周期检测结果显示,与对照组相比,不同浓度的112羰基2β2乳香酸作用于HCT2116细胞后,都出现了sub2G1峰,有凋亡细胞群产生;G2/M期的细胞比例也明显的增多,表明经药物作用后,细胞周期被阻滞在G2/M期。

由此可推测,112羰基2β2乳香酸通过诱导细胞发生凋亡而阻断了细胞周期,使细胞的增殖被抑制。

由于细胞凋亡的过程受多种因子的调控,112羰基2β2乳香酸诱导细胞凋亡的分子机制有待进一步研究。

参考文献1 季宇彬.抗癌中药药理与临床.第1版.哈尔滨:黑龙江科学技术出版社,1999∶823~8252 郭辉,张玲.乳香中化学成分和药理作用研究进展.食品与药品, 2007;9(05A)∶50~523 赵斌,葛金芳,朱娟娟等.小议在MTT法测细胞增殖抑制率中I C50的计算方法.安徽医药,2007;11(9)∶834~8354 张勇,齐振华.α2乳香酸对HL260细胞株VEGF分泌极其Flt21受体表达的影响.医学临床研究,2009;26(2)∶202~2055 Hoernlein RF,O rlikowsky TH.Acetyl2112ket o2β2bos wellic acid induces apop t osisi in HL260and CCRF2CE M cells and inhibits Topois omerase I.J Phar macol Experl m ent thear peu,1999;288(2)∶613~6196 Yonkui J,Shigeo N.Bos wellic acid acetate induces differentiati on and ap2 op t osis in leuke m ia cell lines.Leukem ia Research,1999;23(2)∶43~50 7 高丰,金天明等.细胞凋亡的研究现状与发展趋势.动物医学进展, 2003,24(6)∶1~38 T ol omeoM,Si m oniD.D rug resistance and apop t osis in cancer treat m ent :Devel opment of ne w apop t osis-inducing agents active indrug resistant ma2 lignancies.CurrMed Che m Canc A gents,2002;2(3)∶387~401I nh i b itory effect of112carbonyl2β2boswelli c ac i d on HCT2116cellHe Ruiling,Zhang Juanjuan,M iu Shikun,W an L ihong,Zhou M in,Zhou L i m ing3(W est2China M edical Center,Sichuan Uninversity,Chengdu 610041) O bjecti ve:To investigate antitu mor effects of112carbonyl2β2bos wellic acid.M ethods:MTT assay and gr owth curve assay were used t o assess the inhibit ory effect of112carbonyl2β2bos wellic acid,the cell cycle and the cellular apop t osis were measured using fl ow cyt ometry.Re2 sults:The p r oliferati on of HCT2116was obvi ously inhibited in dose2dependent manner.112carbonyl2β2bos wellic acid can bl ock cell cycle. Annexin V/P I double staining showed that the apop t osis rate increased by HCT2116cells induced by112carbonyl2β2bos wellic acid48h later. Conclusi on:112carbonyl2β2bos wellic acid can inhibit the p r oliferati on of col on tu mor cell,induce HCT2116cells t o apop t osis and bl ock their cell cycle.Key words 112carbonyl2β2bos wellic acid;HCT2116;apop t osis不同浓度苦参碱对肝癌细胞增殖及JAK2ST AT信号通路的影响蔡怀阳,殷 飞3,杜韶波,张瑞敏1(河北医科大学第四医院消化内科,石家庄 050011;1河北省邯郸市中心医院,邯郸 056001) 摘 要 目的:观察不同浓度苦参碱对肝癌细胞S MMC27721增殖和JAK2ST AT通路的影响。

苦参碱对肝癌细胞增殖及其细胞自噬的影响

苦参碱对肝癌细胞增殖及其细胞自噬的影响
供 实 验 依据 。 方 法 采 用 MT I " 法和 流式 细 胞 仪 检 测肝 癌 H e p G2细 胞 增殖 抑 制 率及 其 细胞 周 期 的变 化 ; 荧 光显
微 镜 定 性 观 察 肝 癌 细 胞 自 噬 情 况 。 结 果 苦 参 碱 抑 制 肝 癌 He p G 2细 胞 的 增 殖 ,且 随 苦 参 碱 浓 度 的增 加 和 时 间
v i d e t h e e x p e ime r n t a l b a s i s f o r e x p l o in r g e f f e c t i v e l i v e r c a n c e r t r e a t me n t me t h o d s .M e t ho d s He p a t i c c a r c i n o ma He p G2 c e l l s p r o l i f e r a t i o n i n h i b i t i o n r a t e s a n d t h e c h a n g e o f c e l l c y c l e S e a c h p h a s e we r e e x p l o r e d b y t h e MTI "a s s a y a n d l f o w
c y t o me t y. r Th e h e p a t o ma c e l l a u t o p h a g y wa s q u a l i t a t i v e o b s e r v e d b y l f u o r e s c e n c e mi c r o s c o p e .Re s ul t s T h e p r o l i f e r a — t i o n o f He p G2 c e l l s wa s i n h i b i t e d b y Ma t r i n e , wi t h t h e i n c r e a s e e d o f t h e c o n c e n t r a t i o n a n d e x t e n s i o n o f t i me ,t h e I n h i —

苦参生物碱抗肿瘤机理分析进展

苦参生物碱抗肿瘤机理分析进展

苦参生物碱抗肿瘤机理分析进展【关键词】苦参;生物碱;抗种瘤;综述苦参为豆科植物苦参Sophora flavescens Aitl的干燥根,具有清热燥湿、杀虫、利尿的功能。

现代研究表明,苦参含有生物碱类、黄酮类、皂苷类、挥发油等多种化学成分;其中生物碱又分为苦参碱型、金雀花碱型、无叶豆碱型及羽扇豆碱型等不同类型的生物碱。

近年来,体内和体外实验对上述生物碱成分提取分离、药理作用和临床研究有很大进展。

这一类生物碱的基本骨架是奎诺里西啶(Quinolizidime),具有平喘、解热镇痛、抗病毒、消炎、提高免疫功能、抗肿瘤等多方面药理活性。

其中以苦参碱和氧化苦参碱的抗肿瘤活性最强[1]。

苦参碱和氧化苦参碱是中药苦参中抗肿瘤的主要活性成分,广泛存在于豆科植物苦参、苦豆子及广豆根中。

研究表明,苦参碱和氧化苦参碱通过抑制肿瘤细胞增殖、转移,诱导其凋亡及向正常细胞分化,抑制细胞粘附及血管转移,调节免疫,以及抑制癌基因及原癌基因的表达,而具有抗肿瘤的活性,现对苦参碱及氧化苦参碱的抗肿瘤作用机制作简要归纳。

1 抑制肿瘤细胞增殖苦参碱和氧化苦参碱能有效地抑制多种肿瘤细胞增殖,其抑制效果与时间、浓度相关。

研究表明,苦参碱能有效地抑制人肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721以及人慢性髓性白血病细胞系K562的增殖,MTT试验显示:苦参碱对HepG2及K562抑制作用呈量-效和时-效关系。

随着作用时间延长和药物浓度的增加, HepG2及K562细胞存活率明显降低,同时细胞DNA合成亦相应降低,具有直接杀伤作用[2-3]。

苦参碱抑制肿瘤细胞增殖的机理可能主要有以下几点。

1.1 作用于细胞周期,而使细胞增殖受抑制实验观察,用0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mg/mL氧化苦参碱处理SMMC-7721细胞2~3 h后,经流式细胞仪分析显示,可增加G0/G1期细胞所占百分比,降低S 期G2/M期的百分比[4]。

对K562细胞周期的影响研究结果显示:苦参碱作用K562细胞72 h后,4.6%的肿瘤细胞阻滞于G1期[5],而S期细胞数明显少;提示苦参碱对细胞产生的抑制是阻止细胞进入S期,使细胞堆积于G0/G1期,因此可以推测,苦参碱可以抑制DNA的合成。

苦参素对肝癌细胞HepG2细胞增_省略_MicroRNA_21表达的影响_黄赞松

苦参素对肝癌细胞HepG2细胞增_省略_MicroRNA_21表达的影响_黄赞松

2. 2 Real-time PCR 法检测苦参素对 HepG2 细胞 MicroRNA122 及 MicroRNA-21 表达的影响 OM 实验组 MicroRNA-122 的 表达为阴性 对 照 组 的 2. 79 倍,MicroRNA-122 表 达 上 调。OM 实验组 MicroRNA-21 的表达为阴性对照组的 0. 44 倍,MicroRNA-21 表达下调。 2. 3 MicroRNA-122 和 MicroRNA-21 PCR 扩增产物琼脂糖凝
表 1 苦参素对 HepG2 细胞增殖的影响( x±s)
组别 ( mg / ml)
48 h 抑制率
OD ( %)
72 h 抑制率
OD ( %)
对照组 0. 649±0. 026 0 1. 064±0. 144 0 0. 5 0. 604±0. 006 6. 93 0. 964±0. 144 9. 40 1. 0 0. 539±0. 0042) 16. 95 0. 845±0. 1031) 20. 58 2. 0 0. 430±0. 0442) 33. 74 0. 651±0. 1002) 38. 82 4. 0 0. 349±0. 0242) 53. 78 0. 449±0. 0292) 57. 80 8. 0 0. 221±0. 0192) 65. 95 0. 143±0. 0082) 86. 56
胶电泳结果 Real-time PCR 反应后为进一步验证扩增产物,予 行琼脂糖凝胶电泳 ( 见图 2) ,MicroRNA-122、MicroRNA-21 及 U6 均见单一清晰条带,无杂带和拖尾现象,说明产物特异性 好,无非特异性扩增和引物二聚体。
2结果
2. 1 苦参素对肝癌 HepG2 细胞增殖的影响 不同浓度苦参 素作用肝癌 HepG2 细胞 48 h、72 h 后,发现苦参素对肝癌细胞 增殖抑制率药物浓度的增加及作用时间延长显著增加 ( P < 0. 05,P<0. 01) ,但低浓度 0. 5 mg / ml OM 作用 48 h、72 h 时差 异无统计学意义 ( P > 0. 05 ) ,故 认 为0. 5 mg / ml OM 组 对 肝 癌 HepG2 细胞无增殖抑制作用。OM 各浓度组作用 48 h 和 72 h 差异有统计学意义( P<0. 05) 。见表 1,图 1。

苦参碱对肝癌细胞增殖抑制作用研究

苦参碱对肝癌细胞增殖抑制作用研究

2010年12月第17卷第12期苦参碱对肝癌细胞增殖抑制作用研究徐邦牢1,李坚2(广州市第一人民医院1检验科2体检中心,广东广州510180)【摘要】目的在体外观察苦参碱对BEL-7402肝癌细胞增殖的影响。

方法用含不同浓度(0~3.2mmol /L )苦参碱的培养液在体外培养BEL-7402细胞24h ,通过MTT 试验测定其对BEL-7402细胞增殖的影响作用。

结果在上述使用浓度范围内,苦参碱对BEL-7402细胞增殖的抑制率为0~36.7%。

结论苦参碱在体外可抑制BEL-7402细胞的增殖,且呈剂量依赖性。

【关键词】苦参碱;BEL-7402;增殖中图分类号:R735.7文献标识码:Adoi:10.3936/j.issn.1674-4659.2010.12.003Study on the Inhibitory Effect of Matrine on Hepatoma Carcinoma Cells BEL-7402XU Banglao 1,LI Jian 2(1Department of Laboratory Medicine,2Health Check-up Centre,Guangzhou First Municipal People's Hospital,Guangzhou 510180,China)[Abstract]Objective To observe the effect of matrine on hepatoma carcinoma cells BEL-7402.Methods BEL-7402cells were cul-tured in different concentrations of matrine in vitro.The inhibitory effects of matrine on BEL-7402were measured by MTT.Results The in-hibitory rates of matrine on BEL-7402cells were from 0to 36.7%.Conclusion Matrine can inhibit the proliferation of hepatoma carcinoma cells BEL-7402in a dose-dependent manner.[Key words]Matrine;BEL-7402;Proliferation苦参碱(Matrine ,MA )是豆科植物苦参苦豆子、广豆根等中草药的活性成分,是苦参碱类生物碱的代表。

苦参碱对肝癌细胞HepG2端粒酶活性调控的体外研究

苦参碱对肝癌细胞HepG2端粒酶活性调控的体外研究

细胞 周 期 的 分 布 及 凋 亡 ;c P R—E IA 法 检 测 端 粒 酶 活性 的 变化 。结 果 苦 参 碱 具 有 抗 He G LS p 2细胞 增 殖 、 阻滞 细胞 周 期 、 导 凋 诱 亡及 抑 制 端 粒 酶 活 性 的 作 用 。结 论 对 端 粒 酶 活 性 的 抑 制 可 能 是 苦 参 碱 发 挥 抗 肿 瘤 作 用 的机 制 之 一 。
K e r s: a rn y wo d m t ie; h a o e l a ar i m a} pr lf r to ep t c lulr c cno o ie a in;t l m e a e eo rs
端 粒 是 随细 胞 不 断 分 裂 而 逐 渐 缩 短 、 于 染 色 体末 端 的 由 位 重 复序 列 D A 和 蛋 白质 组 成 的特 殊 结 构 , 保 持 染 色 体 完 整 N 为
摘 法 要: 目的
4 0 1 ;. 理 生理 学教 研 室 00 0 2病
4 0 1) 0 0 6
观 察 苦 参 碱 对人 肝 癌 细 胞 株 HeG2体 外 增 殖 和 端 粒 酶 活 性 的 影 响 , 一 步探 讨 苦 参 碱 的 可 能 作 用机 制 。方 p 进
采 用 人 肝 癌 细胞 株 He G p 2作 为 研 究对 象 , T 法 检 测 不 同浓 度 和 作 用 时 间的 药物 对 细 胞 增 殖 的抑 制 作 用 ; 式 细胞 仪 分 析 MT 流
关 键 词 : 参 碱 ; 细 胞 癌 ; 殖 ; 粒 酶 苦 肝 增 端 中图 分 类 号 : 3 . ; 2 5 6 R7 5 7 R 8 . 文献标识码 : A 文 章 编 号 : 6 18 4 ( 0 8 0 — 2 lO 1 7 -3 8 2 0 ) 30 9 ~ 2

氧化苦参碱对人肝癌HepG2细胞增殖及能量代谢的影响

氧化苦参碱对人肝癌HepG2细胞增殖及能量代谢的影响
氧 化 苦 参 碱 也 具 有 一 定 的 抗 肿 瘤 活 性 ,对 多 种 肿 瘤 细 胞 具
氢 酶 试 剂 盒 、丙 酮 酸 激 酶 试 剂 盒 、乳 酸 含 量 测 定 试 剂 盒 、
A T P含量 测 定试 剂 盒 ( 南 京 建成 生 物 工 程研 究 所 ,批 号
2 0 1 4 1 0 2 4 、2 0 1 4 1 2 1 1 、2 0 1 5 0 1 1 7、2 0 1 4 1 0 2 4 、2 0 1 4 1 2 0 1 ) 。
d o i : 1 0 . 3 9 6 9 / i . i s s n . 1 0 01 — 1 5 2 8 . 2 0 1 7 . 0 9 . 0 3 7
氧化苦参碱 ( o x y ma t r i n e )又名苦参 素 ,具有抗 炎 、抗 菌和抗肝脏纤维化 等多种药 理活性 。近年来研 究发 现 ,
关键词 :氧化苦参碱 ; 人肝癌能量代谢
中图 分 类 号 :R 2 8 5 5 文 献 标 志 码 :B 文 章 编 号 :1 0 0 1 — 1 5 2 8 ( 2 0 1 7 ) 0 9 — 1 9 3 2 — 0 4
啶。培养 4 8 h后 ,各 孔 加 l 0 L质 量 浓 度 为 5 m g / mL的
H e p G 2糖酵解和有氧氧化 中有关酶 和代 谢产物 的影 响 ,揭 示氧化苦参碱的抗肿瘤作 用机 制 ,选取 非肿瘤 细胞一人 脐
静 脉内皮 E C V 3 0 4细胞 作为 比较 ,来 观察 氧化 苦参 碱对 肿 瘤细胞是否具有特异性 ,为今后有关 其抗肿 瘤研究 开辟 新
生长 曲线 、苏木素一伊红 ( H E)染 色 、透射 电镜 检测 氧化苦参 碱对 H e p G 2细胞 增殖抑制 和形态学影 响 ,分 光光度试

苦参碱对人肝癌细胞HepG2增殖及凋亡相关蛋白的影响

苦参碱对人肝癌细胞HepG2增殖及凋亡相关蛋白的影响
实用 医学 杂志 2 0 1 5 年第 3 1 卷第 2 4期
4 0 0 7
苦 参 碱 对 人 肝 癌 细胞 H e p G 2增 殖 及 凋 亡 相 关 蛋 白的影 响
谢 军 孟 凡 刘 永 萍 张 自翔 黄 文 峰 罗耀 玲
摘 要 目的 : 研 究苦 参碱 对人 肝癌 细胞 H e p G 2增 殖和 凋亡 的影 响及 其相 关机 制。方 法 : 用M T T法检测 不 同浓度 的苦参碱 作 用 He p G 2细胞后 对细胞增 殖的影 响 :流式 细胞 术检 测苦 参碱 作 用前后 H e p G 2细胞 周
恶性 肿瘤 发 生 、 发 展 的 目的 。 2 0 1 2年 9月 至 2 0 1 4年
司) ; 兔抗人 c a s p a s e . 3多克隆抗体 ( 武汉博士德 生 物工程有限公 司) ; 兔抗人 b c l 一 2 多克 隆抗体 ( 武汉 博 士德生 物工程 有限公 司 ) : V a r i o s k a n F l a s h连 续 光谱多功能酶标仪 ( 美国 T h e r m o公 司 ) ; F A C S c a l i b u r 流 式 细胞 仪 ( 美国 B D公 司 )
1 2月 期 间 笔者 初 步研 究 了苦参 碱 干预 H e p G 2细胞 前后 B c l 一 2 、 C a s p a s e 一 3表 达 及 苦 参 碱 对 细 胞 周 期 的 影 响, 并探讨苦参碱诱导 H e p G 2 细胞凋亡可能的机 制, 为寻 找 中药单 体 的作 用靶 点提 供理 论依 据 。
1 . 2 实 验方 法
1 . 2 . 1 四氮 噻 唑蓝 ( MT T) 法 分析 细 胞 增 殖 分 别 取 对 数 生 长期 细胞 接种 于 9 6孔 板 培养 , 常 规 条 件 培养 2 4 h后 ,设 组 并分 别 加 入 经培 养 基 稀 释 的 不 同浓 度 苦参 碱 ( 终浓 度分别为 0 . 1 2 5 、 0 . 2 5 0 、 0 . 5 0 0 、 1 . 0 0 0 、 2 . 0 0 0 mg / mL )各 提 取 部 位 供 试 液 2 0 0 t x L , 同时设 置对照组孑 L ( 加入等体 积 的培养液 ) 。 各组

苦参素对肝癌细胞HepG2增殖及能量代谢的影响

苦参素对肝癌细胞HepG2增殖及能量代谢的影响

苦参素对肝癌细胞HepG2增殖及能量代谢的影响目的:观察苦参素(OM)对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖、细胞内ATP含量、上清液乳酸生成速率的影响,探讨其可能的机制。

方法:体外培养人肝癌细胞株HepG2,CCK-8法观察不同浓度、不同作用时间的OM对HepG2细胞增殖的影响;高效液相色谱技术、乳酸试剂盒分别检测苦参素作用48 h后细胞内ATP、上清液乳酸乳酸生成速率影响。

结果:OM可以抑制人肝癌细胞株HepG2细胞增殖,其作用效果随药物浓度、作用时间增加而增强(P<0.05);不同浓度苦参素作用48 h后细胞内ATP含量、上清液乳酸生成速率显著下降(P<0.05)。

结论:OM可以抑制人肝癌细胞株HepG2细胞增殖,呈现时间-剂量依赖性,作用机制可能是抑制细胞有氧糖酵解使细胞内ATP含量下降有关。

有氧糖酵解即“Warburg effect”參与肝癌的发生、发展及转移成为研究的热点,基于肿瘤细胞能量代谢为靶点的药物,有望成为恶性肿瘤临床治疗的新的突破口[1-3]。

前期实验研究表明苦参素可能通过上调MicoRNA122[4],从而抑制肝癌HepG2细胞增殖。

近来研究发现MircoRNA是关键的代谢调节剂,直接或间接参与癌症的代谢。

因此研究苦参素对HepG2细胞能量代谢影响,进一步研究其抗肿瘤作用。

目前研究苦参素影响肿瘤细胞能量较少。

本实验研究苦参素(Oxymatrine或OM)对HepG2细胞增殖及细胞内ATP含量影响,现报道如下。

1 材料与方法1.1 材料HepG2人肝癌细胞株:购于中科院上海细胞库;DMEM无糖培养基(GFM)、DMEM低糖培养基(GM):购于美国GIBICO;胰酶-EDTA混合液、RPMI-1640培养液:购于北京索莱宝科技有限公司;CCK-8试剂盒:购于碧云天生物科技;苦参素注射液:购于正大天晴药业股份有限公司;三磷酸腺苷(ATP)购于美国Sigma公司,HPLC级;抗霉素-A(AntA)美国Sigma公司。

苦参碱抑制人肝癌 HepG2细胞增殖及其对 VEGF、MMP-9表达的影响

苦参碱抑制人肝癌 HepG2细胞增殖及其对 VEGF、MMP-9表达的影响

苦参碱抑制人肝癌 HepG2细胞增殖及其对 VEGF、MMP-9表达的影响赵海亮;黄桂柳;黄赞松;周喜汉;邓志华;覃月秋【摘要】目的:研究苦参碱(matrine,Ma)抑制人肝癌 HepG2细胞增殖及其对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶-9(matrix meta-lloproteinase-9,MMP-9)表达的影响,探讨其抗肝癌作用可能的分子机制。

方法设 Ma 组和阴性对照组,Ma 组设5个药物梯度,采用0.2 mg/ml、0.4 mg/ml、0.8 mg/ml、1.6 mg/ml、3.2 mg/ml 浓度的苦参碱分别作用于对数生长期的 HepG2细胞,MTT 法检测苦参碱对细胞生长的抑制作用, Real-time PCR 检测 VEGF mRNA 表达,蛋白质印迹法(Western Blot,WB)检测 VEGF 和 MMP-9蛋白的表达。

结果苦参碱能抑制人肝癌 HepG2细胞增殖,呈时间和剂量依赖性。

苦参碱能下调 VEGF mRNA 表达(P <0.05)和VEGF、MMP-9蛋白的表达(P<0.05)。

结论苦参碱在体外能抑制肝癌细胞增殖,呈时间和剂量依赖性,其可能的分子机制是通过下调 VEGF 和 MMP-9蛋白表达,抑制肝癌血管生成,进而起到抗肝癌作用。

%Objective To investigate the anti-hepatocellular carcinoma molecule mechanism of matrine (Ma)by observing cell proliferation and expression of vascular endothelial growth factor (VEGF)and matrix metalloproteinase 9 (MMP-9)in human liver cancer HepG2 cell lines. Methods A Ma group and a negative control group were created in this study.The Ma group included 5 drug concentrations gradients.The HepG2 cell lines at exponential phase were cultured in vitro and treated with 0.2 mg/ml,0.4 mg/ml,0.8 mg/ml,1.6 mg/ml and 3.2 mg/mlmatrine,respectively.HepG2 cell lines viability was measured by a MTTassay. Expressions of VEGF mRNA were measured by using a Real-time PCR.A Western Blot was applied to ex-amine the protein levels of VEGF and MMP-9. Results Matrine significantly inhibited the proliferation of human cancar HepG2 cell lines in a dose- and time-dependent manner.Matrine could down-regulate VEGF mRNA expression (P <0.05)and the expressions of VEGF and MMP-9 proteins (P <0.05). Conclusion Matrine showed satisfactory results in inhibiting the proliferation of HepG2 cell lines in vitro in a dose- and time-dependent manner,which might be achieved by down-regulating the expression of VEGF and MMP-9 and by inhibiting the hepatocellular carcinoma vascular formation for anti-liver cancer.【期刊名称】《右江民族医学院学报》【年(卷),期】2016(000)001【总页数】5页(P1-5)【关键词】苦参碱;癌,肝细胞;血管内皮生长因子;基质金属蛋白酶-9【作者】赵海亮;黄桂柳;黄赞松;周喜汉;邓志华;覃月秋【作者单位】桂林医学院研究生学院,广西桂林 541000; 右江民族医学院附属医院,广西百色 533000;右江民族医学院研究生学院,广西百色 533000;右江民族医学院消化疾病研究所,右江民族医学院附属医院消化内科,广西百色 533000; 右江民族医学院附属医院,广西百色 533000;右江民族医学院消化疾病研究所,右江民族医学院附属医院消化内科,广西百色 533000;右江民族医学院消化疾病研究所,右江民族医学院附属医院消化内科,广西百色 533000;右江民族医学院消化疾病研究所,右江民族医学院附属医院消化内科,广西百色 533000【正文语种】中文【中图分类】R285.5原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是全球第5大常见的恶性肿瘤,占肿瘤致死原因的第3位,全球每年有80万新发肝癌病例,其中一半以上在中国[1],广西发病率较高,为肿瘤致死原因的第1位[2]。

苦参碱调控肝癌细胞HepG2自噬作用机制研究

苦参碱调控肝癌细胞HepG2自噬作用机制研究

苦参碱调控肝癌细胞HepG2自噬作用机制研究郭浩;周淑妮;冉瑞智【摘要】目的探讨苦参碱调控肝癌细胞HepG2自噬的作用机制.方法体外培养肝癌细胞HepG2,用苦参碱染毒48 h后收获细胞,分为苦参碱高、中、低剂量组和对照组(苦参碱质量浓度分别为2.0,1.0,0.5,0 g/L),以单丹磺酞戊二胺(MDC)染色观察肝癌细胞HepG2自噬现象;以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和自噬相关蛋白LC3B mRNA的表达水平;Western Blot法检测Akt,p-Akt,mTOR,LC3B蛋白水平.结果与对照组比较,苦参碱高、中、低剂量组肝癌细胞HepG2荧光强度明显增强,mTOR mRNA和蛋白及p-Akt蛋白表达水平明显降低,LC3B mRNA和蛋白表达水平明显升高,Akt mRNA和蛋白表达水平无明显变化(P>0.05).结论苦参碱可促进肝癌细胞HepG2的自噬作用,其机制与抑制PI3K/Akt/mTOR通路有关.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2019(028)006【总页数】4页(P14-17)【关键词】苦参碱;PI3K/Akt/mTOR通路;肝癌细胞HepG2;自噬作用;作用机制【作者】郭浩;周淑妮;冉瑞智【作者单位】湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院,湖北恩施 445000;湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院,湖北恩施 445000;湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院,湖北恩施 445000【正文语种】中文【中图分类】R932;R285.5;R273全球每年有超过60万患者死于肝癌,其中50%发生在中国[1-2]。

目前,肝癌的有效治疗方法是手术切除和肝移植,再辅助放射治疗、化学治疗(简称放化疗),但患者5年生存率仅为5%[3]。

加之大部分肝癌患者合并肝硬化,限制了化疗药物的使用[4],有必要寻找同时具有抗肿瘤和抗纤维化活性的药物。

苦参碱对HepG_2细胞代谢水平和基因水平的影响

苦参碱对HepG_2细胞代谢水平和基因水平的影响

苦参碱对HepG_2细胞代谢水平和基因水平的影响司维柯;李鹏;姚婕【期刊名称】《第三军医大学学报》【年(卷),期】2002(24)11【摘要】目的观察苦参碱抑制HepG2 细胞增殖时 ,代谢水平和基因水平的变化 ,以揭示苦参碱抑制HepG2 细胞增殖的机制。

方法 0~ 1 5g/L苦参碱作用HepG2 细胞 3d ,免疫组化检测AFP、PCNA、wp5 3、Rb、N ras、c myc蛋白的表达 ,原位杂交法检测wp5 3、c mycmRNA的表达 ,真彩色图像定量分析检测结果 ,Microsoft-Excel软件统计学处理结果 ;放免法检测cAMP、cGMP量的改变 ;亲和层析法分离肝癌GGT(HSGGT)并检测HSGGT和GGT酶活性。

结果苦参碱处理HepG2 细胞后 ,与细胞代谢相关的指标发生变化 :cAMP升高 ,cAMP/cGMP比值升高 ;AFP、PCNA、cGMP、GGT、HSGGT量均降低。

与基因相关的指标发生变化 :抑癌基因wp5 3、Rb表达增强 ,癌基因c myc表达减弱 ,N ras表达变化不明显。

结论一定浓度苦参碱处理HepG2 细胞后 ,在代谢水平和基因水平上均抑制了HepG2 的恶性增殖 ,表明苦参碱通过调节抑癌基因和癌基因的表达。

【总页数】4页(P1346-1349)【关键词】苦参碱;HepG2细胞;代谢;基因水平;肝细胞癌;癌基因;抑癌基因【作者】司维柯;李鹏;姚婕【作者单位】第三军医大学医学检验系临床生物化学教研室【正文语种】中文【中图分类】R735.7;R73-36【相关文献】1.苦参碱对HepG2细胞代谢水平和基因水平的影响 [J], 蒲铃铃; 刘桦; 曾莉萍; 宋海星; 伍秀华2.苦参碱对HepG2细胞代谢水平和基因水平的影响 [J], 蒲铃铃刘桦曾莉萍宋海星伍秀华3.苦参碱对人肝癌细胞HepG_2的细胞形态影响和相关增殖因素的变化 [J], 司维柯;肖桃元;康格非4.苦参碱对HepG_2细胞系增殖能力的影响 [J], 司维柯;张广运;马立强;康格非5.EGCG和红茶多酚对HepG_2细胞脂质代谢相关基因表达的影响 [J], 邓慧君;李奕;易娟;曹进因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

苦参碱影响HepG2细胞分化的相关指标检测

苦参碱影响HepG2细胞分化的相关指标检测

苦参碱影响HepG2细胞分化的相关指标检测张彬;盖自宽【期刊名称】《中国医院用药评价与分析》【年(卷),期】2011(11)5【摘要】目的:观察苦参碱作用于肝癌HepG2细胞后,倒置显微镜和多功能显微镜下的细胞形态结构改变.方法:倒置显微镜下观察活细胞形态;多功能显微镜下观察瑞氏染色和苏木精-伊红(HE染色)染色的细胞形态.结果:未用药细胞具有肿瘤细胞的典型的形态特征,苦参碱处理细胞后,细胞数量减少,分散生长,形态呈多形性.细胞浆内充满圆形透明的颗粒.细胞在倒置显微镜下形态似上皮细胞样,细胞间相互连接,密集成片生长,细胞浆内未见透明颗粒.结论:苦参碱对HepG2细胞的生长增殖有抑制作用,是HepG2细胞的某些恶性增殖表型减弱或消失,说明苦参碱可能是一种很好的抗肿瘤药.【总页数】4页(P443-446)【作者】张彬;盖自宽【作者单位】北京市朝阳医院京西院区,北京,100043;河北工程大学附属医院,邯郸,056002【正文语种】中文【中图分类】R979.1【相关文献】1.氧化苦参碱对人肝癌HepG2细胞增殖及能量代谢的影响 [J], 王淑静;刘欢;赵健凯;孙微微;任爽;张家宁2.苦参碱对人肝癌细胞HepG2增殖及凋亡相关蛋白的影响 [J], 谢军;孟凡;刘永萍;张自翔;黄文峰;罗耀玲3.苦参碱联合顺铂对人肝癌细胞株HepG2裸鼠移植瘤模型瘤体生长及caspase-3和Survivin表达的影响 [J], 鄂颖;尚德高;尤胜4.苦参碱诱导K562细胞分化相关cDNA的克隆 [J], 张彦;蒋纪恺;刘小珊;刘北忠;许相儒;何渝军5.改良DDRT-PCR研究苦参碱诱导K562细胞分化相关的差异表达基因 [J], 刘北忠;蒋纪恺;何於娟;张彦;刘小珊因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

苦参碱对人肝癌细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响

苦参碱对人肝癌细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响

苦参碱对人肝癌细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响金艳书;吴学敏;娄金丽【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2006(010)003【摘要】目的:观察传统中药苦参的主要成分苦参碱对人肝癌细胞体外增殖、细胞周期及细胞凋亡作用的影响,探讨其对肝癌可能的作用机制.方法:实验于2004-05/2004-11在锦州医学院免疫与病原生物学教研室完成.选用人肝癌细胞株(BEL-7402),分设苦参碱0.5,0.75,1g/L浓度组,阴性对照组和阳性对照组(顺铂组).①苦参碱对人肝癌细胞增殖吵作用的影响:将对数生长期的人肝癌细胞调至5×10 8L-1,按每孔100 μL接种到96孔板内,培养24 h后加入不同浓度(0.5,0.75,1 g/L)的药物,继续培养72 h.采用四甲基偶氮唑盐法最后用酶标仪测A值.实验同时设阴性对照组和阳性对照组(顺铂组),每组设6复孔.②苦参碱对人肝癌细胞周期的影响:将对数生长期的细胞用苦参碱(0.5,1 g/L)处理48 h后,消化并收集细胞,冲液后固定,4℃过夜.次日再冲洗2次,染色,调整细胞浓度至1×109 L-1,流式细胞仪检测,按FACSort 软件多正态拟合程序进行曲线拟合分析,计算DNA含量,得出细胞周期(G1、S、G2+M)的百分比.③苦参碱对人肝癌细胞DNA Ladder条带出现的影响:将对数生长期的细胞用苦参碱(0.5 g/L、1 g/L)处理48 h后,消化并收集细胞,调整细胞浓度至1×109L-1,然后按细胞DNA提取试剂盒说明操作,提取细胞DNA,8g/L琼脂糖凝胶电泳,观察有无DNA ladder条带出现. 结果:①苦参碱在0.5,0.75,1 g/L浓度时均能明显抑制人肝癌细胞增殖,抑制率分别为17.24%、26.05%和50.77%,存在着明显地浓度依赖关系,与对照组相比差异显著(P<0.01).②苦参碱0.5,1g/L浓度组G0~G1期细胞数量明显高于对照组,并呈浓度依赖关系(36.96±1.98,48.41±3.12,27.30±1.11;t=-7.37,-11.04,<0.01).③苦参碱(0.5,1g/L)作用后可使人肝癌细胞发生凋亡,直方图上显示典型的细胞凋亡峰,凋亡率分别为10.21%、18.01%.④提取细胞DNA、电泳,可见苦参碱1g/L组出现典型的梯形条带,苦参碱0.5g/L组梯形条带不明显,而对照组未见梯型条带.结论:苦参碱对人肝癌细胞有明显地抑制作用,并存在着明显地浓度依赖关系;苦参碱可能是通过将人肝癌细胞周期阻滞在G0~G1期,抑制其增殖,通过诱导人肝癌细胞发生凋亡等,发挥其抗肝癌作用.【总页数】3页(P107-109)【作者】金艳书;吴学敏;娄金丽【作者单位】锦州医学院免疫与病原生物学教研室,辽宁省,锦州市,121001;锦州医学院免疫与病原生物学教研室,辽宁省,锦州市,121001;北京中医药大学免疫教研室,北京市,100029【正文语种】中文【中图分类】R285【相关文献】1.氧化苦参碱对人肝癌HepG2细胞增殖及能量代谢的影响 [J], 王淑静;刘欢;赵健凯;孙微微;任爽;张家宁2.氧化苦参碱对内毒素作用下人牙周膜细胞增殖、细胞周期和超微结构的影响 [J], 陈凌;吴赟;骆凯;闫福华3.miR-1908对人内脏前体脂肪细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期的影响 [J], 郭冰冰; 付锦艳; 裴晶晶; 蒋新液4.miR-1908对人内脏前体脂肪细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期的影响 [J], 郭冰冰; 付锦艳; 裴晶晶; 蒋新液5.肝癥口服液人含药血清对人肝癌细胞SMMC—7721细胞凋亡及细胞周期的影响[J], 崔刘福;王志文;姚树坤;刘志忠;宋海澄因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

苦参碱对肝癌细胞增殖抑制作用研究

苦参碱对肝癌细胞增殖抑制作用研究

苦参碱对肝癌细胞增殖抑制作用研究
徐邦牢;李坚
【期刊名称】《临床医学工程》
【年(卷),期】2010(017)012
【摘要】目的在体外观察苦参碱对BEL-7402肝癌细胞增殖的影响.方法用含不同浓度(0~3.2 mmol/L)苦参碱的培养液在体外培养BEL-7402细胞24 h,通过MTT试验测定其时BEL-7402细胞增殖的影响作用.结果在上述使用浓度范围内,苦参碱对BEL-7402细胞增殖的抑制率为0~36.7%.结论苦参碱在体外可抑制BEL-7402细胞的增殖,且呈剂量依赖性.
【总页数】2页(P3-4)
【作者】徐邦牢;李坚
【作者单位】广州市第一人民医院检验科,广东,广州,510180;广州市第一人民医院体检中心,广东,广州,510180
【正文语种】中文
【中图分类】R735.7
【相关文献】
1.苦参碱对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的抑制作用研究 [J], 张力;李海英;吴式琇n;吴建波;韩义香
2.苦参碱对人膀胱癌BIU-87细胞增殖的抑制作用及其机制研究Δ [J], 姚莉;武兴斌;秦龙
3.苦参碱对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的抑制作用研究 [J], 张力;李海英;吴式琇;吴
建波;韩义香
4.组织蛋白酶B介导人参多糖联合顺铂对肝癌细胞增殖抑制作用的研究 [J], 郭林娜;姚立杰;王璐璐;李国锋;姜杨;金海峰;何军
5.氧化苦参碱抑制肝癌细胞诱导血管内皮细胞增殖作用的研究 [J], 王兵;王国俊;蔡雄;张大昕;姚阳
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关键词: 苦参碱 ; 端粒酶 ; 增殖; 因调控 : 基 肝肿瘤 中圈 分 类 号 :3 . ; 7 7 57 R 3—3 文献 标 识 码 : A
文章 编 号 :6 1 7 X【01 0 —0 6 —0 17 —10 2( 13 18 3 2
E e to t n n C l P l eain a d Re u aino eo rs cii f c fMar eo el r i rt n g lt f lmea e A t t i o f o o T vy
苦参碱是传统 的 中药 , 具有抗炎 、 病毒 、 纤维 抗 抗 化的作用 , 近年来研究发现 其具有一定 的诱导肿 瘤细 胞 分化和抑 制端粒酶 活性 的作用 l _ 端粒 酶是一个 核 糖 桉蛋 白复合体 , 细 胞大部 分表 达端 粒酶活性 , 肿瘤 端粒酶 激活后 可促进 细胞 无 限增殖 目前 研究证 实 , 端 粒酶 蛋 白质组分是其活性 调控 的主要成分 , 其中催 化 亚单位 一端粒 酶逆转 录酶 (u a l ea vr hm nto LeI es em s _ e e tncp s,T R ) 有 限速作 用 , r sr tehE T具 a ia 对端 粒 酶 的活 性 调节最 为重要 ;T R hE T转 录水 平上的调控 是端粒酶基 因调控 的主要途 径 。 本实验 旨在 了解 不 同浓度 的苦 参 碱对肝癌 细胞株 H p 2增殖 的影响 以及端 粒酶 活 eG 性和 hE T表达的调控作用 。 TR
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苦 参碱 对 肝 癌 细 胞 H p e G2增 殖 的 影 响 及 端 粒 酶 活 性 调 控 的 体 外 研 究
珐伟 忠 , 曾 欣 , 林 勇 谢 渭芬 , , 张 新:
{ 第 二 军 医大 学 长 征 医 院 . 海 20 0 : 上 海市 国家 人 类 基 因组 南 方研 究 中 0, 簿  ̄ ( 1 1 上 00 32 上 JJ 5 33
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