马铃薯茎尖培养部分因子对黄化苗发生的影响
我国马铃薯茎尖培养脱毒和脱毒试管苗微繁研究进展
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内 蒙 古农 业科 技
职教专辑
霉素类植物生长物质， 多数研究者采用 !"# ， 且浓 度 在 $% $& ’ $% ($)* + , 的 居 多 ， 少 数 人 采 用 $% &)* + , 或 -% $)* + ,. 笔者以 /0 1 2""$% -)* + , 1 3 4 5"$% -)* + , 1 !"# $% -)* + , 诱导 6 个生产 用种， 均获成功。 先将茎 -77& 年肖玉兰采用分阶段培养方案： 尖接种在分化培养基 8 /0 1 泛酸钙 ()* + , 1 肌醇 &$)* + , 1 !"$% 6)* + , 1 蔗 糖 (&* + , 1 琼 脂 3* + ,9， #$: 后转入茎尖生长培养基 8 /0 1 5"$% &)* + , 1 !"$% 6)* + , 1 2""$% $$()* + , 1 蔗 糖 (&* + , 1 琼脂 3* + , 9 ； 李静华等则采取先以 - + (/0 1 ;< "" -)* + , 1 (= 6 4 > 丁酯 $% &)* + , 1 ?@ -)* + , 培养， 泛绿后转入 - + (/0 1 A@ -)* + , 1 (= 6 4 > 丁酯 $% &)* + , 。茎尖成活率一般在 (6B ，成活 株中脱毒苗占 &$B 。 -% -% # 培养条件 液体培养的以 (- ’ (&C ，光 照 #$$$ ’ 6$$$DE 进行培养；固体培养的多采用 (&C 或上下浮动不超过 (C ，稍宽一点的范围是 -F ’ (&C 或 ($ ’ (&C 。 光照强度多为 ($$$DE 或以 ($$$DE 为中心上下浮动不超过 -$$$DE，也有严格 限定在 (&$$ ’ #$$$DE 的。光周期则多采用 -3G + :， 也有用 -(G + :， 少有用 -$G + : 的。 若以滤纸桥法 液体培养， 在光照强度 -$$$ ’ #$$$DE 、 光照 -3G + : 的条件下， 经 -($: 的培养， 茎尖即可长成小苗。 -77F 年李天然认为：马铃薯茎尖在 -$$DE 下培养 (F:，然后扩大为 ($$DE ，而在芽长到 -H) 左右时 必须扩大光量达 6$$$DE ， 否则生长不好。 -% -% 6 病毒种类 依司怀军所述，马铃薯茎尖 培养 脱毒按 从易到 难的顺 序为： I,JK、 IK"、 IKL、 I"/ K、 IK/、 IKM、 IK0， 另有类病毒 I0@K: 较 IK0 更难脱去， 而很多实验证明有些病毒也可 （烟草花叶病毒） 侵入分生组织， 如 IKM、 均 @/K 可侵入茎尖， 所以顶端分生组织可以汰除病毒， 但 并不是所有的均可汰除，因而必须采用与热处理 结合的顶端分生组织培养方法， 先热处理母株， 然 后切取顶芽进行培养。二法相结合处理可除去部 分单用茎尖培养难以汰除的病毒。 /N,,NO 和 0PQHN ’ 0)RPG 以 ## ’ #SC 热处理 长根的茎 6( ’ &3: 后剥取 $% - ’ $% #)) 茎尖培养 去除了 F&B IKM 和 3(B IK0= 这一方法适用于以 未能完全脱除病毒的试管苗的再脱毒处理。其他 以块茎为处理对象的研究，恒温处理温度中间值 分别为 ##% &C = #S% &C = #FC ， 在此范围内， 选择
马铃薯茎尖脱毒培养基的筛选及影响因素分析
马铃薯茎尖脱毒培养基的筛选及影响因素分析蒋瑜;张丽芳;朱维贤;李珂【摘要】以国际马铃薯中心提供的编号为B13-6的马铃薯薯块进行脱毒培养.研究了添加不同激素的培养基和茎尖大小对马铃薯茎尖成活及脱毒效果的影响.研究结果表明培养基"MS+GA30.2mg/L+6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L+泛酸钙O.2mg,L+肌醇100mg,L"为最佳培养基,不产生愈伤组织,直接成苗;带1个叶原基的茎尖有较高的脱毒率,但成活率较低;而带2个叶原基的茎尖脱毒率较低,但成活率较高.对薯块的处理可降低污染率.得到更多的无茵苗提高脱毒苗的成活率;对薯块进行热处理后可提高脱毒效果.【期刊名称】《长江蔬菜》【年(卷),期】2010(000)004【总页数】3页(P11-13)【关键词】马铃薯;茎尖脱毒;培养基【作者】蒋瑜;张丽芳;朱维贤;李珂【作者单位】昆明市农业科学研究院,云南昆明,650213;昆明市农业科学研究院,云南昆明,650213;昆明市农业科学研究院,云南昆明,650213;昆明市农业科学研究院,云南昆明,650213【正文语种】中文马铃薯是世界四大作物之一，由于马铃薯具有适应性强、产量高、营养成分全和产业链长等特点，受到全世界的重视。
但马铃薯在种植过程中容易通过昆虫媒介、摩擦接触感染病毒，马铃薯主要又是以块茎进行无性繁殖，这样病毒为害逐年加重，使马铃薯种薯退化，产量下降。
马铃薯茎尖分生组织培养是解决马铃薯退化的最有效的方法，它是根据病毒在植株体内分布不均匀性即越靠近新生组织部位（如茎尖和根尖顶端生长点、新生芽的生长锥等处）病毒含量越少的原理，结合使用钝化病毒的热处理方法，通过剥取茎尖分生组织进行培养获得脱毒植株。
本文研究了添加不同激素的培养基和茎尖大小对马铃薯茎尖成活及脱毒效果的影响，以期得到合适的培养基，培养出脱毒效果较好的核心苗。
1 材料与方法1.1 试验材料由国际马铃薯中心提供的编号为B13-6未脱毒的种薯在昆明市农业科学研究院繁殖的无菌马铃薯组培苗茎尖为试材。
培养条件对马铃薯试管苗生长及其结薯性能的影响的开题报告
培养条件对马铃薯试管苗生长及其结薯性能的影响的开题报告马铃薯是人们日常生活中常见的蔬菜之一，其种植面积广泛而且产量高。
为了提高马铃薯的产量和品质，研究马铃薯试管苗的培养条件对其生长和结薯性能的影响十分重要。
本次研究将通过实验，探究不同培养条件对马铃薯试管苗的生长和结薯性能的影响，并对试验结果进行分析和总结。
研究方法：1. 选取不同的培养基：MS培养基、B5培养基、N6培养基。
2. 培养条件：固定高度为3cm的增量温室，光照强度为35μmol/m²s，光周期为16h/8h（光照/黑暗），温度为25~28℃。
3. 取自同一基质的马铃薯试管苗，进行培养。
在生长过程中，观察苗高、根长、茎粗等生长指标，并根据试管苗的结薯情况，测定结薯率、块茎数、块茎体积、块茎干重等指标。
4. 对实验结果进行统计和分析。
研究意义：研究这一问题的意义在于，能够通过寻找出最适宜马铃薯试管苗生长的培养条件，进一步优化种植技术，提高种植效率，减少资源浪费，提高经济效益。
预期结果：1. 不同培养基对试管苗的生长和结薯性能具有显著的影响。
2. 以MS培养基为代表的含有生长因子的培养基对试管苗的生长和结薯性能影响最大。
3. 块茎数、块茎体积和块茎干重与培养基成正比增加。
4. 结薯率随着培养条件的优化而提高。
结论：研究结果表明，马铃薯试管苗的生长和结薯性能受到培养基成分、培养条件影响较大。
从实验结果来看，以MS培养基为代表的含有生长因子的培养基可能是促进马铃薯试管苗生长和结薯效果最好的选择。
同时，培养条件的优化也是实现高产马铃薯种植的重要手段，包括适宜的光照、温度等条件。
马铃薯茎尖脱毒培养技术研究
马 铃薯 茎 尖脱毒 就 是利用 该原 理 ，把茎 尖 剥离 接 种到 培 养基 上 ，进而培养马铃薯种薯或微型薯 。 ２ 操 作 方 法
剪取促芽后的马铃薯块茎上合适大小的芽若干个 ，冲洗干净 后放于烧杯内用纱布封 口，置于 自来水下反复冲洗 ４０分钟，吸干 表面水分放进超净工作台进行深层消毒；先用 ７５％酒精浸泡 ２０～ ４５ｓ，无菌水冲洗 ３次 ；再用 ｏ．１％的升汞浸泡 ８￣１０ｍｉｎ，无菌水冲洗 ５次 ，冲洗时轻轻晃动烧杯时消毒剂彻底被漂洗掉 ，之后置于无 菌 滤纸 待用 。
毒 效果 的 因素进 行 了详 细分析 ，进 一步 阐述 了对病毒 检 测的 常 用方 法。
关 键词 ：马铃 薯 ；茎 尖脱毒 ；病毒 检 测
中图分 类号 ：￥５３２
文 献标 识码 ：Ａ
文章编 号 ： １６７４—０４３２（２０１３）一１０—２３—２
马铃薯是我国重要的粮食作物 ，近年来 ，政府加大力度发展 现代 马 铃 薯 产业 ，促 进 了马 铃 薯 产业 的 快速 发 展 ，种植 面 积 和 鲜 薯产量均居世界首位 ，产业链条逐步拓展 ，经济效益稳步提升。但 是 ，马铃薯是通过块茎进行的无性繁殖 ，在连年种植过程 中土壤 和种薯本身携带的病害逐年严重 ，导致品种退化 ，严重降低了马 铃薯的产量和品质。１９５５年法国 Ｍｏｎｅｌ通过剥离马铃薯茎尖获 得 了不 带病 毒 的 马铃 薯 脱 毒苗 ，引起 了 科学 界 的广 泛 关 注 ，世 界 各地纷纷采用马铃薯茎尖脱毒快繁应用于大田生产 ，提高马铃薯 产量 ，改善其品质。 １马 铃薯 茎 尖脱 毒原 理
马铃薯组织培养脱毒快繁
马铃薯组织培养脱毒快繁植物组织培养（Plant tissue culture）是指在无菌的条件下，将离体的植物（根、茎、叶、花、果实、种子等）、组织（形成层、花药组织、胚乳、皮层等）、细胞（体细胞和生殖细胞）以及原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适当的培养条件，使其长成完整的植株。
由于培养物是脱离植物母体，在玻璃瓶中进行培养，所以也叫做离体培养。
在有些情况下，再分化也可不经愈伤组织阶段，而直接发生于脱分化的细胞。
[1]植物组织培养脱毒快繁是人工在无菌条件下利用植物体的一部分，在人工控制的营养和环境条件下繁殖植物，脱除病毒得到无毒苗株，继而在大田快速繁殖的技术。
脱毒及离体快繁，这是目前植物组织培养应用最多、最广泛和是有效的一个方面。
主要是进行茎尖培养脱除病毒。
对于脱毒苗、新育成、新引进、稀缺良种、优良单株、濒危植物和基因工程植株等可通过离体快速繁殖，同时可不受地区和气候的影响，比传统的繁殖方法快数万倍。
植物组织培养已发展成为一门富有生命力的学科。
[2]植物组织技术在农业上的应用有很多方面，其中植物脱毒和离体快速繁殖是目前植物组织培养应用最多、最有效的一个领域。
通过植物生物技术改良作物是以后农业科学领域最重要的发展之一。
首先用茎尖脱毒获得无病毒植株成功的是法国人莫勒尔,他们用大丽花为原料,在1952 年试验产生了无病毒植株。
在1955 年以马铃薯为材料产生了无病毒植株。
农业生产中，许多农作物都带有病毒，无性繁殖方式植物如马铃薯、甘薯、大蒜等尤为严重，但是感病植株并非每个部位都带有病毒。
[3]一、国内外研究动态（一）研究背景栽培种的马铃薯(Solanurn tuberosurn)是双子叶种子植物, 属茄科(Solanceae)茄属(Solanum)的一年生草本植物,生产上绝大多数是利用块茎进行无性繁殖。
[4]马铃薯用块茎繁殖，植株长势逐年削弱、矮化，分枝变小，结薯变小，产量逐年下降，甚至绝产，这种现象叫做种性退化。
马铃薯大西洋品种的茎尖组织培养技术
马铃薯大西洋品种的茎尖组织培养技术摘要马铃薯品种大西洋是国内外广泛种植的品种，青海省在大西洋品种的组织培养中试管苗出现了生长势减弱、茎叶嫩黄、繁殖系数减小退化等问题，通过对其茎尖剥离、病毒检测及组织培养管理技术总结，为解决生产中的实际问题、生产优质的脱毒组培苗提供参考依据。
关键词马铃薯；茎尖剥离；组织培养马铃薯品种大西洋是目前国内外广泛种植的炸片型、加工型品种，但该品种易感晚疫病，适合在我国北方晚疫病发生较轻的地区种植或繁种。
青海省由于气候寒冷、隔离条件好、晚疫病和病毒病发生危害轻等优势已成为马铃薯种薯繁育的理想基地。
近年来，随着脱毒技术和组织培养技术的应用，青海种植大西洋种薯的规模在不断扩大，但是在大西洋组培快繁过程中，随着继代次数的增加、继代时间的延长和外源生长延缓剂在植物体内的累积，其试管苗也发生了严重退化，表现为苗的生长势减弱、茎叶嫩黄、繁殖系数减小，影响移栽成活率和降低微型薯的生产潜力，甚至产生变异苗，因此每过一段时间就要对其进行茎尖剥离，以达到脱毒复壮及保证脱毒种薯质量的目的。
本文对马铃薯大西洋品种的脱毒及组培管理技术进行总结，以期为生产优质脱毒苗，保证种薯源头质量提供参考依据。
1茎尖剥离1.1材料的选择和处理在大田选择生长健壮、没有病虫危害且大西洋品种特性表现典型的植株，小心挖出其薯块后进行常规窖藏；待薯块通过自然休眠期后置于网袋中，在室内进行自然光催芽或用5~8mg/kg的赤霉素浸种0.5~1.0h进行催芽处理；待芽长到4~5cm未充分展开叶时，将芽从薯块取下，剥去外面多层的叶片并将底部剪去2cm左右后进行消毒处理。
1.2外植体消毒及茎尖剥离剪取的芽用纱布包好放入烧杯中，用自来水流水冲洗20~30min去除表面杂质，在无菌条件下先用无水乙醇浸润3s左右去除表面张力，放入盛有0.1%升汞的无菌培养瓶中灭菌6~8min，期间轻轻晃动培养瓶使灭菌完全，然后用无菌水冲洗4次。
解剖镜下在灭过菌的培养皿中进行茎尖剥离，小心剥取带1~2个叶原基的茎尖0.1~0.3mm，迅速接种到分化培养基中，防止茎尖风干死亡。
不同培养基对马铃薯茎尖分生组织生长的影响
不同培养基对马铃薯茎尖分生组织生长的影响摘要将云南师范大学薯类作物研究所提供的合作88号马铃薯品种的发芽块茎，进行茎尖剥离脱毒和组织培养诱导，研究添加不同浓度激素的培养基对合作88号茎尖分生组织生长的影响。
试验结果表明，对合作88号茎尖分生组织培养较适宜的培养基为MS+0.1 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA+0.1 mg/L GA3+30 g/L 白糖+4.0 g/L琼脂粉+100 mg/L肌醇，形成的愈伤组织状态好、成苗率高。
关键词马铃薯；茎尖；组织培养；培养基；生长；影响普通栽培种的马铃薯（Solanum tuberosum L.）是双子叶种子植物，属茄科（Solanacea）茄属（Solanum），一年生喜凉草本植物，原产于南美洲，马铃薯在生产上绝大多数是利用马铃薯块茎进行无性繁殖，是我国四大粮食作物之一。
世界马铃薯面积分布的最大特点是以欧、亚两洲种植为主，两者种植面积占世界马铃薯总面积的78%。
其中，中国、俄罗斯、乌克兰和印度四大生产国，占世界总种植面积的1/2[1]。
国际马铃薯中心（CIP）和国际食品政策中心（IDPRI）合作研究表明，到2020年全世界对马铃薯的需求将有望增长40%[2]，超过水稻、小麦和玉米的增长，特别是亚洲和非洲对马铃薯的需求将增长更快。
近年来，随着我国农业产业结构调整和种薯、商品薯、加工企业市场的发展，优质马铃薯加工产品供不应求，加工用薯比例大幅度增加，马铃薯栽培成为种植业结构调整和农民增收的一项战略选择，且马铃薯种植也逐步走向规模化、标准化和区域化。
马铃薯为块茎无性繁殖作物，在生长期间易受病毒侵染，且病毒会在种薯块茎中逐代累积，使马铃薯种薯的种性发生退化[3]。
而种薯“退化”是马铃薯产量降低和商品性状变差的主要原因[4]。
有研究表明，病毒在植株体内的分布是不均匀的，且越靠近新生组织部位的（如茎尖）病毒越少，甚至无毒。
目前，国内外研究者即根据这个原理，利用无菌操作，通过马铃薯茎尖分生组织的离体培养，获得无病毒或脱去马铃薯主要危害病毒的试管苗[5-7]，从而恢复马铃薯的种性。
【精品】：马铃薯组织培养技术
马铃薯茎尖组织脱毒培养及植物激素在培养中的作用摘要：马铃薯茎尖组织脱毒培养,愈伤组织解除分化形成新个体时,体细胞有丝分裂的异染色质延迟复制行为较正常活体植株更严重,后代变异较自然群体变异高出500倍,若在培养过程添加辐射和化学诱变试剂变异率会更高。
因此,组织培养环境不只是现代生物技术辅助育种的一个重要条件,更是诱变育种的一个有效途径,对于以营养体繁殖的马铃薯作物效果更好。
本文介绍了马铃薯茎尖培养的意义和方法，综述了植物激素在马铃薯生长中的作用。
关键词：茎尖体细胞组织培养变异植物激素Abstract: Potato virus-free cultivation of the tip meristem, callus formation of new individual remove differentiation, somatic cell mitosis heterochromatin delay of normal living plant copy behavior more serious than natural group, variation and variation of 500 times higher in the training process, if add radiation and chemical mutagenesis reagent mutation rate is higher. Therefore, tissue culture of modern biological technology environment is not only an important supplementary conditions, is an efficient way of mutation breeding for excessive n-redistribution breeding, potato crop effect is better. The paper introduces the significance of potato meristem-tip culture were reviewed, and the method of plant hormone role in growth of potatoes.Key words: Stem cells; Tissue culture; variation; Plant hormones1马铃薯生态习性和种类对土壤的适应性很强，但对气候要求凉、冷、燥，在湿热地区虽然也能生长，不过一代以后品种就会演化，需要经常从寒冷地区引进新的种。
马铃薯茎尖脱毒培养关键因子探析
Ｔｈｅ Ｋｅ ｙ Ｆａ ｃ ｔ ｏ ｒ ｏ ｆ Ｐｏ ｔ ａ ｔ ｏ Ｓ ｈｏ ｏ ｔ －ｔ ｉ ｐ Ｃห้องสมุดไป่ตู้ ｌ ｔ ｕｒ ｅ
（ Ｐ ｏ ｔ ａ ｔ ｏ Ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ Ｄ ｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｗｕ ｌ ａ ｎ ｃ ｈ ａ ｂ ｕ Ｃ ｏ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｌ ａ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ， Ｗｕ ｌ ａ ｎ ｃ ｈ ａ ｂ ｕ ０ １ ２ ０ ０ ０ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
题， 提 出 了结 合 化 学 处理 提 高脱 毒 率 的 有 效措 施 ， 指 出 茎尖 脱 毒 培 养 中 尚存 在 的 一 些 问题 以及 相 应 对 策 。 关键 词 ： 马铃薯 ； 茎 尖 脱毒 ； 组 织培 养
中 图分 类 号 ： Ｓ ５ ３ ２ 文献 标 识 码 ： Ａ １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｊ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ７ — ０ ９ ０ ７ ． ２ ０ １ ３ ． ０ ４ ． ０ １ ９ 文章 编 号 ： １ ０ ０ ７ — ０ ９ ０ ７ ｛ ２ ０ １ ３ ） ４－ ０ ０ ０ ３ ６ — ０ ２
操 作 流 程 如下 ：
国第 一 ２ ０ １ ２年 种 植 面 积 有 所 下 降 ． 但 仍 然 保 持 在 ６ ６ ． ７ ９万
ｈ ｍ０ ． 总产可达 １ ０ ０ ０万 ｔ 左右
１ ． ２ ． １ 选材
于 马 铃薯 生 长 季 在 田间选 取 生 长 健 壮 、品 种 特性
马铃 薯 产 业 对 我 国农 村经 济 发 展 、国家 粮 食 安 全 起 到 了 非 常 重 要 的作 用 由于 马 铃薯 栽 培 属 于 无 性 繁殖 ， 导致 马 铃 薯 如 果 自身 携 带有 病 毒 的话 ． 多代 无 性 繁 殖可 以导 致病 毒 的积 累 ． 造 成 产 量 以 及 品 质 的逐 年 下 降 ， 也 就 是 品种 退 化 。 目前 ． 病 毒 病 是 制 约 马 铃 薯 产 业发 展 的 主 要 因素 。马 铃 薯 茎尖 脱 毒 培 养 手 段 是 解 决 马 铃 薯 病 毒病 最 常 使 用 的方 法 之 一 。通 过分 离 茎 尖 分 生 组 织
马铃薯茎尖组织培养技术研究
马铃薯茎尖组织培养技术研究吴兴泉,陈士华,王朔,杨岫峰(河南工业大学生物工程学院,河南郑州450001)摘要 [目的]提高离体马铃薯茎尖组织培养的成苗率和脱毒率。
[方法]从马铃薯上取生长健壮的芽,经消毒后在显微镜下切取1.0到1.5m m 长度的茎尖,接种于诱导分化培养基上,研究了不同浓度的GA 3、KT 与6-B A 和不同激素配比以及不同浓度的基础培养基的诱导效果,探讨了茎尖组织诱导分化的最适培养条件。
[结果]低浓度的GA 3可促进愈伤组织的形成,过高的GA 3浓度会抑制愈伤组织的形成;K T 比6-B A 具有更好的诱导效果;在MS +GA 30.1m g/L +NAA 0.1mg/L +6-B A 0.5m g/L 培养基中激素配比的诱导效果较好。
[结论]MS +0.5mg/L K T +0.2mg/L GA 3+0.1m g/L NAA 是最为适宜的茎尖组织培养基。
在28e 、每天光照16h 、光照强度>2000lx 的培养条件下,经7d 左右即可得到形态良好愈伤组织,经15d 左右即可得到分化良好的试管植株。
关键词 马铃薯;茎尖组织;组织培养中图分类号 S603.6 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2009)03-01039-02Research on Tissue C ulture T echnolo gy for Potato Stem -tip WU X ing -quan et al (College of B ioen gineerin g,Hen an Ind ustrial University,Zhen gz hou,Henan 450001)Abstract [Objective]The study ai med to enhance the seedling rate an d vi rus free rate of s tem -ti p tis sue cul ture of potato i n vitro.[Method]The l usty bu d was taken from potato,an d the stem -tip wi th len gth from 1to 1.5mm was cu t u nder microscope after di si nfection,and then i t was inoculated to the m edi um for ind ucti on an d differentiati on,the i nduction effects of GA 3,KT and 6-B A wi th different concn.and the different h orm one matchi ng as well as the basic mediu m wi th differen t concn.were s tu died,and the m ost p roper culture condi tions for in duction and differentiati on of stem -tip tiss ue was discussed.[Result]The GA 3with low concn.could promote callus formati on,the exorbitant G A 3concn.would res train form ation of callu s;KT had better i nduction e-ffect than that of 6-B A.In the mediu m of MS +G A 30.1m g/L +NAA 0.1mg/L +6-B A 0.5m g/L,the indu ction effect was good for the hormone m atchin g.[Conclusion]The MS +0.5mg/L KT +0.2mg/L GA 3+0.1mg/L NAA was the most suitable m edi um for stem -tip ti ssue.Under the cu-l tu re condi tions of li ght in ten si ty >2000l x,temperatu re of 28e ,illu minati on of 16h p er d ay,the callu s wi th good sh ape would be attain ed about 7d lat -er,and the test tube plan tlets with good differenti ation coul d be acq uired about 15d later.Key w ords Potato;S tem -ti p tis sue;Tiss ue cultu re基金项目 河南省教育厅自然科学基础研究项目(2006210003);河南工业大学校科研基金项目(07XJC008)。
不同培养基对马铃薯试管苗生长的影响
试验研究２００７．１１包玲曾述容对三汗（新疆农五师农科所博乐８３３４０８）不同培养基对马铃薯试管苗生长的影响马铃薯组培苗培养中，通常使用ＭＳ＋琼脂的培养基，由于市场所售琼脂质量不稳定（凝胶性及透明度），且价格较高（１２０元／ｋｇ），增加了生产成本，因此，我们在不影响试管苗生长状况的前提下，对培养基进行改进，选择食品加工业用卡拉胶和浅层静置液培两种方式，本试验的目的是比较这两种培养基和琼脂对马铃薯脱毒组培苗生长的影响，探讨其代替琼脂的可能性。
１材料和方法１．１试验材料陇薯３号（晚熟）１．２培养条件培养室温度保持在２３±２℃，用空调控温。
相对湿度保持在４０％～５０％，光强２５００～３０００ｌｘ，光照时间２４小时。
２试验设计２．１琼脂和卡拉胶作为支撑物的对比试验（Ａ组）２．１．１凝固剂类型琼脂（１２０～１６０元／ｋｇ，强度５００ｇ／ｃｍ２）、卡拉胶（９０元／ｋｇ，强度７５０ｇ／ｃｍ２）。
２．１．２处理（Ａ组）ＭＳ＋琼脂７ｇ／Ｌ＋蔗糖３０ｇ／Ｌ（对照）；ＭＳ＋卡拉胶＋蔗糖３０ｇ／Ｌ（卡拉胶用量分别为２、３、４、５、６、７ｇ）。
每瓶分装４０～５０ｍｌ培养基，接种材料采用两个叶片茎段。
２．２浅层液培与固体培养基的比较试验（Ｂ组）ＭＳ＋琼脂７ｇ／Ｌ＋蔗糖３０ｇ／Ｌ（对照）；ＭＳ＋蔗糖３０ｇ／Ｌ（１０ｍｌ、１２ｍｌ、１４ｍｌ、１６ｍｌ）；液体分装量分别为１０、１２、３．４添加氮肥硝化抑制剂使用土壤重金属钝化剂（消毒剂）以改良土壤。
添加硝化抑制剂能降低土壤硝化强度，减少蔬菜中硝酸盐累积。
生产上用双氰铵来降污效果较好，一般双氰铵占纯化肥氮的６％￣８％。
另每６６７ｍ２施石灰２０￣２５ｋｇ，可以调节土壤酸碱度，且能消毒杀菌，降低土壤重金属活性。
３．５有机肥的处理利用污泥土、垃圾肥、粉煤渣等有机肥的质量要达标或经过无害处理，用量也要严格控制，不能超过有关要求。
４合理排灌蔬菜对硝态氮的吸收、运输、转化与水分密切相关。
马铃薯茎尖培养实验报告
马铃薯茎尖培养实验报告黄佳妮 27号马铃薯属茄科植物，是分布很广的一种重要作物，既可作粮食，又可作蔬菜，具有重要的经济价值。
在生产中多采用块茎进行无性繁殖，在繁殖过程中易受病毒和细菌侵染导致产量下降。
利用无菌操作通过组织和细胞培养，不但可以产生去病毒的试管苗，还可以缩短生长周期，而进行大批量的快速繁殖。
1 材料与方法1.1实验材料：马铃薯块茎1.2实验方法：1) 配制培养基：MS+GA30.05mg/L+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+3%蔗糖15g+0.7%琼脂3.5g2) 取材：采用在室内发芽，当芽长到4~5cm时，即可用于剥取茎尖。
3) 消毒：自来水下冲洗20~30min，切成单芽茎段。
将顶芽或侧芽连同部分茎段用70%酒精浸泡5~10s，无菌水冲洗1次，再经0.1%升汞处理8~10min，用无菌水冲洗3~5次。
4) 茎尖剥离：在超净工作台上，剥取茎尖，剥离时一手用镊子将茎芽按住，另一只手用解剖针将叶原基仔细剥掉。
当圆亮半球形的茎尖生长点充分暴露出来时，用锋利的刀片切下大小0.1~0.25mm，带1~2个叶原基的茎尖，并迅速接种到诱导培养基上。
5) 培养：培养条件：温度20~26℃，光照16h/d，光照强度3000lx。
2~3周可形成小芽，4~6周长成小植株。
2 关键技术选择合适的培养基是茎尖培养成功与否的关键，根据前人的实践经验，我们发现MS+GA30.05mg/L+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+3%蔗糖15g+0.7%琼脂3.5g，PH5.8，为比较好的培养基组合。
其次，每次消毒的芽不要太多，以防放置时间过长，茎尖褐变，用解剖针剥离茎尖时要小心地除去茎尖周围的叶片组织，不要用解剖针来回挑，使芽上的病毒带到茎尖。
3 技术路线图马铃薯块茎20min切成单芽茎段分装接种剥离茎尖瓶1 2 3 44 结果与分析4.1实验结果实验只进行到初代培养，共接种了两批，第一批的培养一段时间后不见有生长，第二批基本成功，有长出愈伤组织并生长出小芽。
马铃薯茎尖脱毒技术 (1)精选全文完整版
可编辑修改精选全文完整版马铃薯茎尖脱毒技术作者：刘学武方大雨关永明来源：《吉林蔬菜》2014年第03期马铃薯（Solanurn tuberosurn），茄科、茄属作物，作为一种蔬菜，深受人们的喜爱。
目前在我国的栽培面积大约有500多万公顷，已经成为世界上栽培面积最大的国家，但在其繁殖过程中退化问题比较严重，症状是叶片卷缩，产量降低，实验研究表明，病毒浸染是其退化的根源。
因此生产脱毒种薯成了在马铃薯生产过程中的关键环节，常用的马铃薯脱毒技术是茎尖组织培养，下面介绍一下马铃薯的茎尖脱毒技术。
1 取材进行脱毒培养的材料，可以直接从大田取。
一般当苗高约15厘米时，将顶端切下6～8厘米，去掉下面2片叶，在切口处涂上生根激素后，把切条植入一个口径为10厘米、内装有消毒营养土的花盆中，然后用玻璃烧杯罩上，保持10天。
然后将其转入生长箱中，光照3 000～4 000Lx，每天光照16小时。
两周后去掉顶芽，以促使腋芽的生长。
当腋芽长出约1～2厘米时，折下腋生枝，用于消毒，接种。
2 消毒及接种一般来说，茎尖分生组织由于彼此重叠的叶原基的严密保护，只要仔细解剖，不进行表面消毒也能得到无菌的外植体，但分生组织不带菌，并不等于包在它外面的叶片及其下部的茎段不带菌，将外植体从超净台外面的空间拿进去可能会带进一些菌。
因此，在切取外植体之前仍需对茎芽进行表面消毒。
常用的消毒方法是，先剥去大叶片，用自来水冲洗干净，在75%酒精中浸泡30秒钟左右，用1%～3%次氯酸钠或5%～7%的漂白粉溶液消毒10～20分钟（或用0.1%HgCl2消毒数分钟），最后用无菌水冲洗材料4～5次。
接种时，先把解剖显微镜置于超净工作台，然后把茎芽置于解剖镜下，左手用一把镊子将它按住，右手用解剖针将叶片和叶原基剥掉。
当形似一个闪亮半圆球的顶端分生组织充分暴露出来后，用锋利的长颈刀片将分生组织切下来，一般以0.2～0.3毫米，带1～2个叶原基为好，然后再用刀片将其接种到培养基上。
马铃薯茎尖培养部分无机盐浓度对黄化苗发生的影响
关键词：马铃薯 ；茎尖培养 ；黄化苗
Ｉ ｆ ｅ ｃ ｆＩｏｒ ａ ｉ ｌＣｏ ｃ ｎ ｒ ｔ ｎ ｏ ｔ ｌｔ ｎ ｌ ｎ ｅ ｏ ｎｕ ｇ ｎ ｃ Ｓａｔ ｎ ｅ ｔａ ｉ ｎ Ｅ ｉ ａ ｉ ｎ ｏ ｏ ｏ ｉ ｔ ｔ ｏ ｔ ｐ Ｃｕｔ ｒ ｎ Ｐｏ ａ ｏ Ｓｈ ｏ ｌ ｅ Ｔｉ ｕ
马铃薯茎尖培养部分无机盐浓度对黄化苗发生的影 响——黄
萍 ，马朝宏 ，颜
谦
・０ ２ ９・
中 图分 类 号 ：￥ ３ ５２
文 献 标 识码 ：Ａ
文 章 编 号 ： １７ — ６ ５ ２ １）４ ０ ０ — ６ ２ ３ ３ （０ ０ ０ — ２９ ０ ４
马铃 薯 茎 尖 培 养 部 分 无机 盐 浓 度 对 黄 化 苗 发 生 的影 响
２ Ｄ ｐ ｒ ｎ ｆ ｅ ｅ ｒｈａ ｄＤ ｖ ｌｐ ｎ， ｉ ｏ ａ ｄ ｍｙｏ ｒ ｕｔｒ ｃｅ ｃ ｓ Ｇｕ ａ ｇ Ｇｕｚ ｏ ５ ０ ６ Ｃｈｎ ． ｅ ａｔ ｔ ｓ ａｃ ｎ ｅ ｅｏ ｍｅ ｔＧｕｚ ｕＡｃ ｅ ｆ ｉ ｌ ｅＳ ｉｎ ｅ ， ｉ ｎ ， ｉ ｕ５ ０ ０ ， ｉａ） ｍｅ ｏ Ｒ ｈ Ａｇ ｃ ｕ ｙ ｈ
黄 萍 ， 贵阳 ． ５ ００ ；２ 贵州省农业科学院科技开发处，贵州 贵 阳 ５０ ６ ． ５００ ５ ０ ６）
摘
要 ：为解决马铃薯茎尖脱毒培养过程 中黄化 苗形成 的问题 ，以马铃薯 品种 Ｂ １ ３ 一 ０ — ｌ ９为试验材料 ，研 究
了茎尖诱导培养基 中 Ｎ Ｏ ，Ｍ Ｓ ４７ ： Ｈ Ｎ ， ｇ ０ ＂ＨＯ，Ｃ Ｃ２２ ａ Ｉ Ｈ０和铁 盐浓度改变对茎尖培 养过程 中黄化苗发生及成苗率的 ＂
影响 。结 果 证 明 ：培 养 基 中 氮 、镁 、铁 浓 度 的 改 变对 黄 化 苗 的预 防 有 显 著 作 用 ， ３ Ｎ ４ Ｏ ，ＭｇＯ ・ＨＯ 和铁 盐 － ＂ ＨＮ ３ Ｓ ７ ２ 的浓 度 分 别 在 １ ０ ｇＬ 、４ ０ｍｇＬ 、８ ． ｍｇＬ ，黄 化 苗 发 生率 最 低 ；但 以上 各 因 素 处 理 对 茎 尖诱 导 分 化 ０ｍ ・～ ０ ・～ ３ ・一时 ６ ４ 成 苗 的 影 响 差异 并 不 显 著 。
马铃薯离体茎尖生长点对几种培养因子的生长反应
马铃薯离体茎尖生长点对几种培养因子的生长反应
刘卫平;李玉华;孙秀梅;王福兴
【期刊名称】《中国马铃薯》
【年(卷),期】2001(000)002
【摘要】马铃薯茎尖组织培养,对培养条件和几种主要培养因子的生长反应十分敏感.以MS 培养基为基本成分,与几种附加成分组配了5种培养基,对马铃薯茎尖进行离体培养.结果发现:光照、温度、湿度、激素、肌醇对茎尖的生长影响较大.
【总页数】2页(P81-82)
【作者】刘卫平;李玉华;孙秀梅;王福兴
【作者单位】黑龙江省农科院马铃薯研究所;黑龙江省农科院马铃薯研究所;黑龙江省农科院马铃薯研究所;宝清县种子公司
【正文语种】中文
【中图分类】S532
【相关文献】
1.薄荷茎尖生长点离体培养 [J], 臧玉琦
2.马铃薯试管薯形成对几种培养因子的宽容反应 [J], 窦国杰;张玉新
3.马铃薯茎尖脱毒培养关键因子探析 [J], 刘海英
4.栝楼茎尖生长点脱毒培养和植株分化 [J], 卢豪;张雪燕;李友勇
5.甘薯离体茎生长点对几种培养因子的生长反应 [J], 陈海燕;任海英;寨秀兰;李友勇;赵乐玲;王巧玲
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究， 以期 提高 马铃 薯 茎 尖 剥离 脱 毒 培养 过 程 中的成
收 稿 日期 ：００— ５—１ ２１ ０ ３
１ ２ １ 薯 块的 筛选 ．． １ ２ ２ 外植 体 的 筛选 ．． １ ２ ３ 消毒 ．．
在 田间筛 选无病 虫 害感染 、 无 薯 块在 室 内催 芽 ， 待芽 长 至
损伤 、 健壮 的薯块 用于室 内 自然催芽 。
苗率 。
了茎尖 诱导 培养 过 程 中抑 制 黄化 苗 发 生 的研 究 ， 报
道 了培养基 中部 分无 机盐浓 度 的改 变会 直接影 响黄
１ 材料 与方 法
１ １ 试 验材 料 ．
化苗 的形 成 ， 并证 明 培养 基 中 氮 、 、 的浓 度分 别 镁 铁
在 １０ 、０ ６ ０ ４ ０和 ８ ． ／ ３ ４ｍｇ Ｌ时 ， 黄化 苗发生 率能达 到 最低 … ， 但其 他 因子 ， ｐ 如 Ｈ值 、 、 脂 等 的作用 如 糖 琼
马 铃 薯 茎 尖 培 养 部 分 因子 对 黄 化 苗 发 生 的 影 响
黄 萍 马朝宏 颜 ， ，
（． １ 贵州省生物技术研究所 ， 贵州 贵阳
谦 丁海兵 ，
５０ ０ ） ５ ０ ６
５０ ０ ；． ５０ ６ ２ 贵州省农业科学院科技开发处 ， 贵州 贵 阳
摘
要： 为提高马铃薯茎尖剥 离脱毒培养过程 中的成苗率， 对马铃薯茎尖诱 导培养基 的ｐ Ｈ值、 糖和琼脂浓度 对黄化苗发 生的影响
ＨＵＡＮＧ Ｐｉ ｇ ＭＡ Ｃ ａ ． ｏ ｇ ｎ ， ｈ ｏ ｈ ｎ ２
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（ ． ｕｚｏ ｉｅｈ ｏ ｇ ｎｔｕｅ ｕｚｏ ｕｙｎ ５ ０６， ｈｎ ； ．Ｏ ｉｅｏ ｃ ｎ ｅ ｎ ｅｈ ｏ ｇ ｅｅ ｐ ｎ，Ｇ ｉｈｕＡ ａｅ １ Ｇ ｉ ｕＢｏ ｃ ｎｌ ｙＩｓｔｔ，Ｇ ｉ ｕＧ ｉａｇ ０ ０ Ｃ ｉａ ２ ｆｃ ｆ ｉ ｃ ｄＴｃ ｎｌ ｙＤ ｖｌ ｍｅｔ ｕｚｏ ｃｄ— ｈ ｔ ｏ ｉ ｈ ５ Ｓｅ ａ ｏ ｏ ｍｙ０ Ａ ｃ ｌ ｒ ｃｅｃｓ ｕｚｏ ｕｙｎ ５ ０ ６ ｈｎ ） ｆ ｕｔ ａ Ｓ ｉ ｅ ，Ｇ ｉｈｕＧ ｉａｇ５００ ，Ｃ ｉａ ｕｌ ｎ
进行 了试验研究。结果表 明： 培养基 ｐ Ｈ值及琼脂的使用浓度对预防黄化苗的发生有显著作用 ， 当它们分别 在 ６ ０～ ． ． ６ ５和 ７ｇ Ｌ ： 马铃薯 ； 茎尖培养 ； 黄化苗 ；Ｈ值 ； ｐ 蔗糖 ； 琼脂
中 图 分 类 号 ：５ ２ ￥ ３ 文 献 标 识码 ： Ａ
Ｅｆｅ ｔｏ Ｈ ，Ｓ ｇ ｒ ａ ａ ｎ Ｏ ｃ ｕ ｒ ｎｃ ｆ ｆ ｃ ｆｐ ｕ ａ ｎｄ Ａｇ ｒ ｏ ｃ ｒ ｅ ｅ ｏ Ｅｔｏ ａ ｅ ｅ ｌｎ ｓｉ ｈｏ ｔＴｉ ｉ ｌｔ ｄ Ｓｅ ｄ ｉ ｇ ｎ Ｓ ｏ ｐ Ｃｕｌｕ ｅ ｏ ｔ ｔ ｔ ｒ ｆＰｏ ａ ｏ
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试验材 料是 贵州省 马铃薯 研究 所选 育 的马铃薯
新 品系 Ｂ １ １９ Ｏ － －。 ３
１ ２ 试 验方 法 ．
何 的报道 鲜见 ， 因此 ， 笔者 等针对 马铃薯 茎尖 组织培 养过 程 中黄化苗 发 生 现象 ， 展 了茎尖 诱 导 培养 基 开 的ｐ Ｈ值 、 （ 糖 蔗糖 ） 和琼脂 浓度 的 比较 试验 ， 马铃 对 薯茎 尖培 养部分 因子 对黄 化苗发 生 的影 响进行 了研
ｌｎ ａｅ Ｔ ｅｒｓ ｌ ｈｗｅ ｈ ｔｔｅｐ ａ ｄ ａ ａ ｏ ｃ ｎｒｔ ｎ ｉ ｈ ｄｕ ｈ ｄ ｓｇ ｉｃ ｎ ｎ ｉｉｏ ｆ ｃ ｎｏ ｃ ｒｅ ｃ ｆｅｉｌｔｄ ｉｇｒ ｔ． ｈ ｅｕｔ ｓｏ ｄ ｔａ ｈ Ｈ ｎ ｇｒｃ ｎ ｅ ｔａｉ ｎｔｅ ｍｅ ｉｍ ａ ｉｎｆ ａ ｔｉｈｂｔ ｎ ｅ ｅ ｔｏ ｕｒｎ ｅ ｏ ｔ ａｅ ｓ ｏ ｉ ｉ ｃ ｏ
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１６ ７０
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２１ ０ ０年 ２ ３卷 ５期
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文 章 编 号 ：０ １ ４ ２ （Ｏ Ｏ Ｏ １０ — ８９ ２ Ｌ ） ５—１６ ０ ７０— ３
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针 对 马铃薯 茎尖 培养过 程 中黄 化苗 时有发生 的 现象 ， 贵州 省生 物技 术 研究 所 生 物 技术 研 究 室开 展