广东省猪圆环病毒2型感染的血清学调查

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DNA病原—圆环病毒2型PCR检测方法

DNA病原—圆环病毒2型PCR检测方法

猪圆环病毒2型PCR检测方法操作程序廖荣斌,何启盖(华中农业大学动物医学院)一、原理猪圆环病毒2型感染引发的仔猪断奶衰竭综合症、肾炎与皮炎、增生性肠炎以及母猪繁殖障碍。

通过病原检测和病毒分离是确证本病的重要手段。

猪圆环病毒分为2种,即圆环病毒1型和圆环病毒2型。

前者不致病,后者可致病。

猪圆环病毒2型(PCV2)的基因组大小为1768 bp或1767bp。

其中,PCV2ORF2基因与免疫保护和毒力等重要特性有关,同时,此基因与PCV1的同源性较低,通过合理设计引物,扩增ORF2,从而可检测并区分PCV2与PCV1。

PCR技术具有快速、敏感的优点,已经用于许多动物疾病病原的检测。

本试验是利用我们设计的引物,通过反应条件的优化,以感染猪组织或血液为模板,扩增PCV2的ORF2基因,从而作出感染的结论。

二、材料准备1、手术器械:采样用。

根据样品数量来确定。

2、微量移液器(规格:2.5μl,10μl,100μl,200μl,1000μl)3、反应引物上游引物:CAC GGA TAT TGT AGT CCT GGT;下游引物:CGC ACC TTC GGA TAT ACT GTC4、磁珠:用于吸附和分离DNA4、PCR仪:东胜创新5、电泳仪:北京六一电子设备6、紫外检测仪:Bi0-RAD凝胶成像系统7.相关溶液及配方:1╳TAE buffer(电泳缓冲液)配方:(1)称量Tris:242g,Na2EDTA.2H2O:37.2g,置于1L的烧杯中;(2)向烧杯中加入约800ml去离子水,充分搅拌溶解;(3)加入57.1ml的醋酸,充分搅拌;(4)加去离子水将溶液定容至1L后,室温保存;(5)使用时将室温保存的该溶液稀释50倍即可使用。

扩增产物的样品缓冲液:全式金生物6╳Loading buffer。

三.样品采集感染猪或流产的胎儿的肺脏、淋巴结、脾脏和肾脏;发热期猪的抗凝血或血清;每个样品用单独的剪刀或刀片,避免交叉污染。

珠三角地区猪圆环病毒2型的分离鉴定及序列分析

珠三角地区猪圆环病毒2型的分离鉴定及序列分析

小量提 取试 剂 盒 、 x T qD E a NA 聚合 酶 购 于宝 生 物 工 程 ( 连 ) 限公 司 , C 一 大 有 P V 2阳 性血 清 、 性 血 清 阴
P V 2 可引起 断奶 后 仔猪 多 系统 衰竭 综 合征 ( M— C -) P WS 、 ) 猪皮炎 肾病 综 合 征 ( D ) 繁 殖 障 碍等 相 关 P NS 、
2 结 果
2 1 病料 P . CR 扩 增 结 果

: 1t uf f
P V2 C - 标准 阳性 血清 , 照组加 阴性血 清 ,7℃温育 对 3
1h 再用 P S洗 涤 3次 , 次5ri; FT ; B 每 n 加 I C标 记 的 a 羊抗 猪 IG染 色 ,7℃温育 lh 最后 用 P S洗 涤 3 g 3 ; B
接种 到有 P —5的 l Kl 2孔细胞 板上 , 每个 梯 度接种 8 孔, 按照 12 5的方法处理 后 , 间接 免疫 荧光 试 验 .. 用 测病 毒 的 T I 5。 C I 。 )
12 8 全 基 因 组 序 列 P . . CR 的 扩 增 用 P P4和 3、
t t
物 P5 5_ : ,ACATGGTTACACGGATATTGT一 下 3,
1 材料 与 方 法
1 1 材 料 .
1 1 1 细 胞 和病 料 无 P V 1污 染 的 P 1 . . C 一 K一5细
游 引 物
P : 5一 6 AAT T AC TAC C C T— AG G AC
以上 引物 由上海生 物工程 技术 服务 有限公 司合 成 。 1 2 3 模 板 的 制 备 1 . . 3份 病 料 研 磨 后 用 组 织
D NA 提取 试剂盒 抽提 D NA, 一2 于 O℃保存 。 1 2 4 病 料 的 P R检 测 .. C P R 的反 应体 系 : NA C D

(完整版)猪圆环病毒2型(PCV-2)及相关疾病

(完整版)猪圆环病毒2型(PCV-2)及相关疾病
4、A2型先天性震颤(Congenital tremors,CT)
5、猪呼吸道病综合征(Porcine respiratory disease complex ,PRDC)
6、猪增生性和坏死性肺炎(Porcine proliferative and necrotizing pneumonia,PNP)
• PCV-2相关疾病包括:
1、断奶仔猪多系统衰竭综合征(Postweaning multisystemic wasting syndrome ,PMWS)
2、猪皮炎肾炎综合征(Porcine dermatitis and nephropathy syndrome,PDNS)
3、繁殖障碍(Reproductive failure)
具体预防程序为:
1、 母猪于产前和产后各7天用支原净加强力霉 素拌料。
2、3、7、21日龄各注射0.5~1ml得米先。 3、3天补铁及10天硒。 4、 10日龄注射PRRS苗(兰耳苗) 5、15日龄注射自家苗(个别过敏)。 6、25日龄猪瘟免疫3~4头份。 7、42日龄注射PR苗(伪狂犬基因缺失苗) 8、断奶后拌料用药20天阿奇霉素、氟苯尼考
及黄芪多糖;黄芪多糖、替米考星。
9、育肥期每月初用支原净加强力霉素拌料7天, 月末用氟苯尼考拌料4~5天。
特别观注:目前还没有真正效果良好的商品化疫 苗用于PCV-2的免疫接种。其主要原因是现有 条件下体外培养PCV-2的最佳条件还没找到, 人工培养时PCV-2含量不高,难以达到制作疫 苗的要求。临床上可选用病变最为严重的猪送 到实验室制作自家苗,这是目前全国通用的方 法。
猪圆环病毒2型(PCV-2)及相关疾病
猪圆环病毒2型(PCV-2)是目前已知的最小的动 物病毒之一,近几年来对养猪业造成了巨大的经济损 失,就连美国一些养殖场也因此而垂头丧气。我国近 年来随着养猪的大发展及猪群的大规模调动,各地均 的发生,为了进一步预防和控制本病,现就PCV-2及 其相关猪病进行探讨,以期帮助养殖场正确对待本病, 提高经济效益,减少不必要的损失。

农村猪场猪圆环病毒病的血清学调查

农村猪场猪圆环病毒病的血清学调查

农村猪场猪圆环病毒病的血清学调查近年来,农村猪场猪圆环病毒病在中国引起了广泛关注,其对猪场的生产和经济造成了严重影响。

猪圆环病毒病是一种由猪圆环病毒引起的急性传染病,主要表现为发热、呼吸困难、腹泻和脱水等症状,严重时可导致猪的死亡。

血清学调查是对该病毒病进行研究和监测的重要手段之一,本文将对农村猪场猪圆环病毒病的血清学调查进行详细介绍。

一、研究目的本次研究的主要目的是了解农村猪场猪圆环病毒病的流行程度和感染情况,为制定防控策略和保障猪场生产安全提供依据。

具体包括以下几个方面的内容:1.调查不同地区、不同规模的猪场中猪圆环病毒病的感染率;2.了解猪群中不同年龄、不同品种猪的感染情况;3.探讨不同季节对猪圆环病毒病感染率的影响。

二、调查方法1.样本采集本次调查选择了多个地区的不同规模的猪场作为研究对象,从每个猪场中随机选取一定数量的猪只进行血清学调查。

按照猪的年龄和品种进行分类采样。

2.血清学检测采集到的猪血样本将被送往实验室进行猪圆环病毒特异性抗体检测。

常用的检测方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)和血凝抑制试验(VNT)等。

3.数据统计与分析对血清学检测结果进行统计和分析,计算猪圆环病毒病的感染率,并对感染率进行比较,分析不同因素对感染率的影响。

三、调查结果根据调查结果显示,农村猪场中猪圆环病毒病的感染情况较为普遍,部分猪场的感染率甚至超过了50%,且呈现逐年增加的趋势。

生长猪和仔猪的感染率较高,而种猪的感染率相对较低。

在不同季节中,夏季的感染率明显高于其他季节。

四、分析与讨论1.病毒传播途径农村猪场猪圆环病毒病的高感染率主要与疫控不严和管理不善有关。

病毒通过饮水、粪便和密切接触等途径传播,尤其是在高温多湿的夏季容易造成病毒传播加剧。

2.防控策略针对以上调查结果,应采取以下措施加强猪圆环病毒病的防控工作:(1)加强猪舍的卫生管理,定期清洁消毒,保持猪舍内空气流通;(2)加强饲养管理,确保饮水卫生,控制饲料来源,避免猪群感染;(3)定期对猪群进行血清学检测,及时发现感染病例并隔离治疗;(4)采取有效的防疫措施,注重疫苗接种,提高猪的免疫力。

猪圆环病毒2型基因组DNA的结构与功能研究进展

猪圆环病毒2型基因组DNA的结构与功能研究进展

猪圆环病毒2型基因组DNA的结构与功能研究进展赵燕;喻正军【摘要】猪圆环病毒2型(PCV2)是引起猪圆环病毒病相关疾病的主要致病原,可损伤宿主的免疫系统,加剧一些细菌病和病毒病感染的临床症状,在全球养猪业中造成巨大损失.PCV2的基因组DNA含有11个开放阅读框(ORFs),其中至少有7个ORFs编码的蛋白质分子质量大于5 ku,但目前只有5种编码的蛋白(Rep、Rep’、Cap、ORF3和ORF4)发现于PCV2复制过程中.作者概述了当前PCV2基因组DNA的结构与功能,阐明PCV2的病原学,为防控PCV2感染提供科学依据.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2016(043)005【总页数】6页(P1176-1181)【关键词】猪圆环病毒2型;基因组DNA;开放阅读框;病毒编码蛋白【作者】赵燕;喻正军【作者单位】湖南中岸生物药业有限公司,长沙410199;湖南中岸生物药业有限公司,长沙410199【正文语种】中文【中图分类】S852.65猪圆环病毒病是由猪圆环病毒2型(PCV2)引起的一系列疾病的总称[1],主要包括猪呼吸道疾病综合征(PRDC)、猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎与肾病综合征(PDNS)及繁殖障碍等疾病。

PCV2感染可严重破坏易感动物的免疫系统,产生严重的免疫抑制,且易诱发多种细菌及病毒的协同或继发感染,给该病的防控带来巨大困难[2]。

1991年,猪圆环病毒病首次发现于加拿大,之后迅速在北美洲、南美洲、欧洲、亚洲、大洋洲和非洲流行,严重威胁生猪养殖业的可持续发展。

中国自2001年首次分离到PCV2以来,山东、浙江、山西、广东、河南等省先后报道该病发生,近年来由PCV2引起的PMWS在中国相关养猪地区呈现暴发流行趋势,对中国的生猪产业造成巨大经济损失[3]。

PCV2是圆环病毒科的一种无囊膜、二十面体对称、共价闭合、环状、单股DNA病毒,直径平均为17 nm,是目前发现最小的动物病毒[4]。

猪圆环病毒1型、2型、3型SYBR_GreenⅠ实时荧光定量PCR鉴别方法的建立及应用

猪圆环病毒1型、2型、3型SYBR_GreenⅠ实时荧光定量PCR鉴别方法的建立及应用

·研究论文·Chinese Journal of Animal Infectious Diseases中国动物传染病学报摘 要:猪圆环病毒(PCV )包括猪圆环病毒1型(PCV1)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪圆环病毒3型(PCV3)。

近些年来,PCV1、PCV2、PCV3基因型之间存在共感染,因此建立一种快捷、特异、敏感的PCV1、PCV2、PCV3的SYBR Green Ι实时荧光定量PCR 鉴别检测方法显得尤为必要。

本试验通过特异性引物筛选,各项反应条件优化,建立了实时荧光定量PCR 鉴别方法。

结果表明:PCV1、PCV2、PCV3检测下限分别为40.3、25.2、22.4 copies/μL 。

与猪瘟病毒(CSFV )、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV )、猪伪狂犬病病毒(PRV )、猪细小病毒(PPV )均无交叉反应。

批内及批间变异系数均小于1%。

对98份PCV 疑似阳性病料检测结果表明,PCV1、PCV2、PCV3感染率分别为10.2%、65.3%、53.1%,共感染率为7.1%。

该方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性,为PCV1、PCV2、PCV3的早期检测、定量检测及后期研究提供了技术手段。

关键词:猪圆环病毒;特异性;敏感性;SYBR Green Ι实时荧光定量PCR 中图分类号:S852.65文献标志码:A文章编号:1674-6422(2023)06-0085-07D evelopment and Application of a SYBR Green Real-Time Quantitative PCR Method for Differentiation of Porcine Circoviruses 1, 2 and 3收稿日期:2021-05-24基金项目:山东省重大科技创新工程项目(2023CXGC010705);山东省现代农业产业技术体系项目(SDAIT-08-06);山东省自然基金(ZR2022MC011);济南市“新高校20条”资助项目(202228112);山东省科技型中小企业创新能力提升工程(2023TSGC0734);山东省农业科学院创新工程(CXGC2018E10, CXGC2023G03, CXGC2023E02, CXGC2023A21)作者简介:田瑶,女,硕士,主要从事动物病毒学与免疫学研究通信作者:李俊,E-mail:***************;韩先杰,E-mail:**********************猪圆环病毒1型、2型、3型 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR 鉴别方法的建立及应用田 瑶1,2,时建立2,彭 喆2,李 琛2,徐绍建2,吴晓燕2,3,李佳昕1,2,杨 莹2,3,王 硕2,刘 畅2,韩 红2,李 俊1,2,3,韩先杰1(1.青岛农业大学动物医学院,青岛266109;2.山东省农业科学院畜牧兽医研究所,济南250100;3.山东师范大学生命科学院,济南250100)2023,31(6):85-93Abstract: Porcine circovirus (PCV) includes three genotypes: Porcine circovirus 1 (PCV1), Porcine circovirus 2 (PCV2) and Porcine circovirus 3 (PCV3). In recent years, there have been co-infections among these 3 genotypes. Therefore, it is particularly necessary to develop a fast, specifi c and sensitive SYBR Green I real-time quantitative PCR method for differentiation of PCV1, PCV2 and PCV3. In this experiment, a real-time fl uorescent quantitative PCR method was developed by using specifi c primers and optimizing various reaction conditions. The results showed that the lower limits of detection were 40.3 copies/μL for PCV1, 25.2 copies/μL for PCV2 andTIAN Yao 1,2, SHI Jianli 2, PENG Zhe 2, LI Chen 2, XU Shaojian 2, WU Xiaoyan 2,3, LI Jiaxin 1,2,YANG Ying 2,3, WANG Shuo 2, LIU Chang 2, HAN Hong 2, LI Jun 1,2,3, HAN Xianjie 1(1. College of Veterinary Medicine, Qingdao Agricultural University, Qingdao 266109, China; 2. Institute of Animal Science and Veterinary Medicine , Shandong Academy of Agricultural Sciences, Jinan 250100, China; 3. College of Life Sciences, Shandong Normal University,Jinan 250100, China)· 86 ·中国动物传染病学报2023年12月猪圆环病毒(Porcine circovirus, PCV)是圆环病毒科圆环病毒属的一种无囊膜环状单链 DNA 病毒,也是迄今为止发现的具有自主复制能力的最小的动物病毒[1-2]。

近两年我国猪圆环病毒Ⅱ型流行病学调查

近两年我国猪圆环病毒Ⅱ型流行病学调查

1 6份 猪 血 清 中 P V 2 C 2抗 体 阳 性率 为 也 有很大关系。有人发现乳猪 出生后母 C - 95 ,2 0 .% 0 7年浙 江 4个 猪 场 5 8份 猪 源 P V抗体 在 8 9周龄 时消失,但在
血清中 P V C 2抗 体 阳性率 为 3 .6 1 - 5周龄 时又 重新 出现 ,表 明这些小 96 %。 3 1
体 , 结 果 有 9个 阳 性 场 、4 7份 样 品 感染有 关,这也 与有 关专家对 2 0 0 7年 阳性 。场 阳性 率 为 9 %,样 品阳性 率 那场大规模 的猪场疫病的调查与研究结 0
为 3 .2 09 %。其 中 2 0 0 6年上 海 2个 猪 果相符合。P V2目前在许多省份危害 C 场 的抗 体 阳性率 为 0 0 7年抗 体 阳 严重 , ,2 0 给我国养猪业造成 了巨大的损失。 性 率 为 2 % 。2 0 4 0 6年 浙 江 8个 猪 场 当 然,猪 的检 测年 龄 与检 测结 果
其P V C 2感染上升 了 4倍 多。 猪 在 1~ 3周龄 时又接 触 了 P V。因 11 C
替米考星。具体程序可 向兽 医咨询。 疾病 每年可 造成 1 0 0 1 0 0英镑 的 30 ̄60
根除
由于 支原体 经风 媒 传播 的能 力很

目前人 们对 地 区疾 病根 除产 生 了 损失。如果实施任何 治疗 ,成本还会增 些兴趣 。这种方法就是各个猪场一起 加 。
强 。因此对于养猪业密集的地区 .猪场 合作 ,集体清 除疾病。 保 持 无 S P一 般是 不 现 实 的。然 而 , E 如果猪场选址 、隔离很好 。那么根除支 原体也是值得企盼 的。该病根除可通过
21年 期l 7 00 第3 I

猪圆环病毒2型检测技术及研究进展

猪圆环病毒2型检测技术及研究进展

猪圆环病毒2型检测技术及研究进展1. 引言1.1 猪圆环病毒2型概述猪圆环病毒2型(PCV2)是一种引起猪瘦弱综合征和猪圆环病毒病的病毒,属于环状病毒科。

PCV2是一种小型非包膜的双链DNA病毒,病毒颗粒直径约17-25nm。

PCV2主要感染猪,特别是生长发育中的猪,并可引起多种免疫抑制相关疾病,严重影响了猪的生长发育和生产性能。

PCV2感染广泛分布于全球范围内,给猪养殖业造成了巨大的经济损失。

PCV2感染的临床症状主要包括疲劳、厌食、呼吸困难等,重症时还可导致猪的死亡。

随着猪养殖业的快速发展和养猪密度的增加,PCV2感染的发病率也在逐渐上升。

加强PCV2的检测和研究对于控制和预防猪瘦弱综合征和猪圆环病毒病具有重要意义。

通过对PCV2的检测技术和研究进展的深入探讨,可以为疫苗研制和防疫工作提供重要的参考和支持。

【字数:276】1.2 研究意义猪圆环病毒2型是一种广泛存在于猪群中的病原体,能够引起猪圆环病毒病,严重危害猪的生产业。

猪圆环病毒2型检测技术的研究意义在于及早发现并控制病毒传播,保障猪群的健康和生产安全。

通过对猪圆环病毒2型检测技术的研究和应用,可以提高疾病的早期诊断率和治疗效果,降低疫情的传播风险,减少养猪业的经济损失。

研究猪圆环病毒2型的检测技术还可以为相关病毒的检测提供借鉴和参考,推动病毒学领域的发展。

加强对猪圆环病毒2型检测技术的研究具有重要的意义,有助于提高我国养猪业的竞争力和可持续发展能力。

【研究意义】2. 正文2.1 猪圆环病毒2型检测方法猪圆环病毒2型(PCV2)是一种严重危害猪只健康的病毒,因其高度变异性和传染性而备受关注。

为了及时发现和控制PCV2感染,研究人员开发了多种检测方法。

1. 病毒核酸检测:PCR技术是目前应用最广泛的检测方法之一。

通过设计特异性引物,可以实现对PCV2基因组的扩增和检测,具有高灵敏度和特异性。

2. 免疫学检测:病毒抗原检测通过检测病毒在体内产生的蛋白质来确认感染情况。

猪圆环病毒2型病毒样颗粒的纯化及鉴定

猪圆环病毒2型病毒样颗粒的纯化及鉴定

猪圆环病毒2型病毒样颗粒的纯化及鉴定WANG Xi;LI Guopan;CHEN Qingqing;XU Baojuan;RONG Jun【摘要】为获得较高纯度的猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2) Cap蛋白的病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)并对其进行结构和功能研究,本试验以大肠杆菌表达系统表达了PCV2重组Cap (PCV2 rCap)蛋白,通过硫酸铵分级沉淀、Sephacryl S-300 HR凝胶过滤层析、Capto Q离子交换层析、CsCl密度梯度离心等方法对其进行了纯化.通过Western blotting对纯化所得蛋白进行免疫反应性鉴定,透射电镜(TEM)观察纯化蛋白的粒径及形态,高效液相尺寸排阻色谱(HPSEC)检测其组分分布.结果显示,纯化后PCV2 rCap蛋白经SDS-PAGE检测,可见28 ku的目的蛋白带,灰度扫描法检测其纯度为97.53%.Western blotting结果显示,该处的特异性蛋白条带有明显的免疫反应性;TEM检测其为粒径17.35~19.24 nm的规则球形颗粒,表明所获得的PCV2 rCap蛋白在表达时能在菌体内自我装配成VLPs,且在纯化过程中没有被破坏而解聚,仍保持天然状态;HPSEC检测纯化样品中VILPs含量为92.67%.本试验结果为进一步研究PCV2 VLPs的空间结构及其免疫保护机制提供了参考依据.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2019(046)006【总页数】9页(P1792-1800)【关键词】猪圆环病毒2型(PCV2);病毒样颗粒(VLPs);纯化;鉴定;凝胶过滤层析;离子交换层析【作者】WANG Xi;LI Guopan;CHEN Qingqing;XU Baojuan;RONG Jun【作者单位】;;;;【正文语种】中文【中图分类】S852.65猪圆环病毒2型(PCV2)属于单股负链环状DNA病毒,无囊膜[1],是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(post-weaning multisystemic wasting syndrome,PMWS)的主要病原体,对不同阶段的猪均可造成感染[2],给全球养猪业造成了极大的经济损失[3]。

猪圆环病毒2型引发母猪繁殖障碍的诊治

猪圆环病毒2型引发母猪繁殖障碍的诊治

2023年第12期(总第415期)畜禽业疫病防治猪圆环病毒2型引发母猪繁殖障碍的诊治林谋运福建省浦城县动物卫生监督所,福建浦城353400摘 要 猪圆环病毒病可发生于不同品种、性别和年龄的猪,猪圆环病毒2型可引发母猪严重的生殖障碍,给养殖户造成较为严重的经济损失。

受猪圆环病毒2型危害严重的猪场可在后备母猪配种前进行疫苗免疫,同时,重视猪群猪圆环病毒的抗原监测,加强生物安全措施,必要时使用抗生素进行药物预防,疾病暴发后采取隔离病猪、紧急接种、药物治疗及环境消毒等措施,可有效防止病情进一步发展,降低养殖损失。

关键词 猪圆环病毒2型;母猪;繁殖障碍;生物安全doi:10.19567/j.cnki.1008 0414.2023.12.021 引言猪圆环病毒病是由猪圆环病毒引起猪的多种疾病的总称,根据感染日龄及疾病表现不同,临床分为断乳仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎和肾病综合征、猪呼吸道病综合征、相关性繁殖障碍以及相关性肉芽肿性肠炎等多种类型疾病,以母猪繁殖障碍、仔猪多系统衰竭和呼吸障碍最为常见[1 2]。

临床以猪圆环病毒2型为主要流行血清型,我国猪群中猪圆环病毒2型感染较普遍,给养猪业造成较为严重的经济损失。

猪圆环病毒2型引发母猪繁殖障碍的临床治愈率较低,只有做到科学防控才能降低该病的发生率和经济损失。

 猪圆环病毒 型简介目前,猪圆环病毒有1型、2型、3型和4型共4种血清型,猪圆环病毒2型为世界性流行和存在的病毒,具有致病性,主要侵害机体的免疫系统,单核细胞和巨噬细胞为本病毒的作用靶细胞,从而造成机体的免疫抑制。

病毒基因组长度为1766~1769bp,含11个重叠的开放阅读框,可细分为a、b、c、d、e、f、g、h共8个基因亚型[3],但抗原性没有明显差异,在疾病流行前期,毒力较强的猪圆环病毒2b基因亚型为主要流行亚群,自2012年后,猪圆环病毒2d基因亚型已逐渐替代2b基因亚型,成为主流的基因亚型[4]。

猪圆环病毒2型研究进展

猪圆环病毒2型研究进展

猪圆环病毒2型研究进展李红园;魏丽娟;魏占勇;刘欣;宋婷婷【摘要】猪圆环病毒2型(PCV2)已成为家猪和野猪常见的一种病毒病,由其引起的疾病称为猪圆环病毒相关疾病(PCVAD),自猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)暴发以来,已成为近年来阻碍养猪业发展的重要传染病。

为了进一步了解该病,以便更好地预防和控制该病,本文从病原学、流行病学、致病机理、临床症状、防控措施等方面进行了综述。

%Porcine circovirus type 2 (PCV2) have become a common viral disease of hog and wild boars, it is caused by a disease called porcine circovirus associated disease (PCVAD). Since por-cine circovirus associated disease (PCVAD) outbreak, its infection is an important infective dis-ease in pig in recent years, which seriously hinders the development of pig industry. In the pur-pose of further understanding the disease,and making better prevention and control of this dis-ease, the paper reviewed the etiology, epidemiology, pathogenesis, clinical symptoms, prevention and control measures of PCV2 in terms.【期刊名称】《现代畜牧兽医》【年(卷),期】2014(000)011【总页数】5页(P56-60)【关键词】猪圆环病毒2型;猪圆环病毒相关疾病;重要传染病【作者】李红园;魏丽娟;魏占勇;刘欣;宋婷婷【作者单位】河北远征药业有限公司,河北石家庄 050041;河北远征药业有限公司,河北石家庄 050041;河北远征药业有限公司,河北石家庄 050041;河北远征药业有限公司,河北石家庄 050041;河北远征药业有限公司,河北石家庄050041【正文语种】中文【中图分类】S852.620世纪90年代,世界上许多国家在病猪及一些无明显临床症状的猪体内检测到了一种新型猪小环状样病毒[1]。

猪圆环病毒2型PCV

猪圆环病毒2型PCV

宿主范围
PCV2主要感染猪,可引起猪圆 环病毒相关疾病(PCVAD),如 猪圆环病毒病、猪皮炎肾病综合
征等。
传播方式
PCV2主要通过呼吸道、消化道 以及母猪的胎盘垂直传播。病毒 也可通过接触感染猪的粪便、鼻
液等途径传播。
潜伏期与病程
潜伏期一般为1-2周,感染后猪 只呈现渐进性消瘦、呼吸困难、 腹泻等症状。病程长短不一,取 决于感染的毒株、免疫状态以及
体系,有效控制PCV2的传播和危害。
03
加强疫情报告和信息交流
及时报告疫情,加强与相关部门的信息交流和协作,共同应对PCV2的
威胁。
06
PCV2的研究进展与展望
新药研发与治疗策略
抗病毒药物的研发
针对PCV2的抗病毒药物是研究的重点,包括直接抗病毒药物和免 疫调节药物等。
新型疫苗的研发
随着对PCV2病毒结构和免疫机制的深入了解,新型疫苗的研发也 在不断推进,如基因工程疫苗、亚单位疫苗等。
亡。
PRDC的防控需要采取综合措施, 包括加强饲养管理、提高免疫力、
减少应激等。
猪繁殖障碍
PCV2可引起猪繁殖障碍,表现为流产、死胎、木 乃伊胎等症状。
PCV2通过胎盘感染胎儿,引起胎儿发育异常或死 亡。
猪繁殖障碍的防控需要采取综合措施,包括加强 检疫、减少病毒传播、提高母猪免疫力等。
04
PCV2的诊断与检测
猪圆环病毒2型(PCV2)
contents
目录
• 猪圆环病毒2型概述 • PCV2的感染机制 • PCV2与猪疾病的关系 • PCV2的诊断与检测 • PCV2的预防与控制 • PCV2的研究进展与展望
01
猪圆环病毒2型概述
定义与特性

猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白表达综述

猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白表达综述

猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白表达综述第一篇:猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白表达综述PCV2是圆环病毒科(Circoviridae)圆环病毒属成员,为单股环状负链无囊膜的DNA病毒, 为已知的最小动物病毒之一,约17~ 20nm, 二十面体对称。

根据病毒的抗原性和基因组成不同,可分为2种基因型或称血清型, 即PCV1型和PCV2型。

PCV1无致病性。

PCV2具有致病性,基因组全长1767bp或1768bp,包括11个读码框,其中ORF2编码病毒的主要结构蛋白)核衣壳蛋白(Cap),其N端包含一个由41个氨基酸残基组成的的核定位信号(Nuclear location signal,NLS),与PCV2在细胞核内定位有关。

Mahe和Liu等分别在sf 9真核细胞及大肠杆菌中进行了PCV2Cap蛋白的表达, 但Cap蛋白的表达量较低。

为了提高Cap蛋白的表达量, 本实验成功构建去除NLS的重组质粒, 并对其进行表达、纯化、鉴定。

1材料和方法1.1pcv-581重组质粒的构建1.1.1PCR扩增去除NLS基因的pcv-5811.1.1.1引物的设计与合成: 根据本实验室保存毒株的测序结果, 用Oligo6.0设计删除核定位信号特异引物(由大连宝生物工程公司合成), 并引入限制性内切酶BamHI、HindIII(加下划线表示)。

上游引物: ACAGGATCCATGGCATCTTCAACAC;下游引物: GAAAGCTTT TCATTAAGGGTTAAGT;产物长度581bp。

1.1.1.2PCV2核酸的提取: 取接种PCV2病毒的PK-15细胞悬液500uL, 常规方法提取, 最后加20uL灭菌去离子水溶解,-20度保存。

1.1.1.3PCR扩增: PCR的反应体系总体积25uL: 上、下游引物(10uLmol/L)各1.0uL,10×RCR Buffer2.5uL、dNTP3.0uL(2.5mM each),提取的DNA2.0LL,Taq酶0.25LL(5U/ LL, TaKaRa), 去离子水补到25LL。

猪圆环病毒2型(PCV2):发病机理及与先天性免疫的相互作用(III,续完)

猪圆环病毒2型(PCV2):发病机理及与先天性免疫的相互作用(III,续完)

猪圆环病毒2型(PCV2):发病机理及与先天性免疫的相互作用(III,续完)作者:张凡庆来源:《国外畜牧学·猪与禽》2014年第07期上期回顾:上期主要介绍猪圆环病毒临床疾病(猪圆环病毒相关疾病、同事感染其他猪病病原)、治病机理(淋巴衰竭和免疫抑制)。

关键词:猪圆环病毒2型;断奶仔猪多系统衰竭综合症;猪圆环病毒相关疾病;致病机理;免疫相互作用;细胞因子4 与宿主免疫系统的相互作用4.1 感染免疫细胞体外培养的单核细胞、肺巨噬细胞和单核细胞来源的巨噬细胞可以摄取PCV2,并且在它们的细胞质中可以检测到PCV2特异性的抗原,虽然现在缺乏PCV2在单核细胞中复制的有力证据[91-93]。

这说明这些免疫细胞可能不是PCV2复制的主要位置。

还有证据表明,PCV2可在T和B淋巴细胞、来源于PBMCs的单核细胞和感染猪的气管扁桃体中复制[89,90]。

PCV2复制水平证明,来自气管淋巴结的B淋巴细胞比来自PBMCs的更高[89,90],说明B细胞可能是PCV2复制的靶位点。

PCV2的内化作用已在经典的血液DC细胞和浆细胞树突状细胞上证实 [94],DC细胞内PCV2的持续存在并不会降低病毒的感染力、导致细胞死亡或改变DC 细胞的免疫功能[95]。

PCV2可简单地通过DC细胞对它们的吞噬和内吞作用进入细胞,而不是通过感染[95-97](图3)。

不过,PCV2在DC细胞内安静地不复制的感染,可能有利于病毒逃避宿主的免疫系统和促进PCV2利用DC细胞迁移的特性在猪群中传播[95]。

PCV2可削弱干扰素产生细胞产生IFN-α和TNF-α的能力,从而抑制骨髓DC细胞自分泌和旁分泌的成熟过程[11,94]。

在患有PMWS的猪体内发现T细胞和B细胞的MHC-II的高水平活化和早期表达,IL-2受体CD25的高水平表达[66]。

此外,巨噬细胞内的PCV2会降低这些细胞的吞噬和杀菌能力,从而有利于PCV2的生存和传播[91,92]。

猪的疾病 猪圆环病毒2型感染 的知识和防治

猪的疾病 猪圆环病毒2型感染 的知识和防治

猪的疾病猪圆环病毒2型感染的知识和防治一、概述:猪圆环病毒2型感染(Porcine circovirus type 2 infection)是由猪圆环病毒2型所引起的一系列疾病的总称,包括猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎-肾病综合征(PDNS)、繁殖障碍、肺炎、肠炎、先天性震颤等。

1991年加拿大首次爆发该病,随后世界上许多国家和地区都有该病的报道。

在我国,2000年通过血清学调查证实了北京、河北、天津、江苏、上海等地的猪群中存在PCV2感染抗体。

2001年,与PCV2感染相关的猪断奶后多系统衰竭综合征开始在南方地区流行,2002年全国各地规模化猪场暴发猪断奶后多系统衰竭综合征,给我国养猪业造成了相当大的经济损失。

目前,本病已经遍及世界各养猪国家,已成为养猪生产中突出的问题之一。

近期研究表明,PCV2与猪皮炎与肾病综合征(PDNS)、猪的流产和繁殖障碍、猪增生性坏死性肺炎(PNP)和猪先天性脑震颤(CT)等的发生密切相关。

PCV2常与猪呼吸与繁殖综合征病毒(PRRSV)或猪细小病毒(PPV)并发感染或继发细菌感染,使患病猪病情加重,死亡率升高。

二、病原:猪圆环病毒2型(PCV2)属圆环病毒科(Circoviridae)圆环病毒属(Circovirus)。

是一种小而无囊膜、二十面体、共价闭合、环状的单股DNA病毒,病毒粒子直径平均为17nm,分子量为0.58×106Da。

PCV2在氯化铯中浮密度为1.37g/cm3,蔗糖梯度离心的沉降系数为52S,对pH 3的酸性环境、氯仿作用或高温环境(70℃)有较强的抵抗力。

不凝集牛、羊、猪、鸡等多种动物和人的红细胞。

PCV2完整的基因组大小多数为1768bp,少数为1767bp。

各分离株之间核苷酸序列的同源性大于96%,而与PCV1分离株之间的核苷酸序列的同源性小于80%。

PCV1和 PCV2的ORF1的核苷酸和推导氨基酸序列的同源性分别为83%和86%,而ORF2的仅为67%和65%。

猪圆环病毒2_型和3_型检测方法建立及初步应用

猪圆环病毒2_型和3_型检测方法建立及初步应用

·研究论文·摘 要:为快速检测并鉴别猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)病毒。

本文研究参考GenBank 中PCV2和PCV3高度保守片段分别设计了探针引物,成功建立了一种双重TaqMan 荧光定量检测方法。

结果显示:该方法特异性好,可鉴别 PCV2、PCV3与其他猪病病毒;PCV2最低检测下限为1.00×101 copies/µL ,PCV3最低检测下限为1.00×100 copies/µL ;重复性高,批内、批间的变异系数分别为0.01%~0.02%和0.02%~0.05%;本研究采用建立的方法与商品试剂盒同步检测猪只样品440份,PCV2样品符合率为97.47%,PCV3样品符合率为96.85%;测序结果显示,PCV2均为2d 亚型,PCV3均为3c 亚型。

结果表明,建立的双重TaqMan 荧光定量检测方法具有良好的特异性、敏感性且快速、准确,节约成本,可为PCV2和PCV3的监测与防控提供技术支撑。

关键词:PCV2;PCV3;双重TaqMan qPCR 方法建立;混合感染中图分类号:S852.651 文献标志码:A 文章编号:1674-6422(2024)02-0151-09Establishment and preliminary application of detection methods forPCV2 and PCV3LI Tong, ZHAO Runze, LI Botian, LI Chunqi, WANG Yan, GUO Liwei, YANG Xiaolin, LIU Gouping(Y angtze University, Jingzhou 434000, China)收稿日期:2023-10-16基金项目:荆州市2022年度自然科学研究专项(202254-07CC);石首市先行县“先进技术集成示范基地建设与定向攻关”揭榜项目(SS202311);生猪健康养殖省部共建协同创新中心创新平台项目(2019H2209)作者简介:李桐,女,硕士研究生,预防兽医学专业通信作者:刘国平,E-mail:******************猪圆环病毒2型和3型检测方法建立及初步应用李 桐,赵润泽,李博天,李春琪,王 妍,郭利伟,杨小林,刘国平(长江大学,荆州434000)Abstract: Rapid detection and identification of PCV2 and PCV3. In this paper, probe primers were designed with reference to highly conserved fragments of PCV2 and PCV3 in GenBank, and a dual TaqMan fluorescence quantitative detection method was successfully established. The results show that this method has good specifi city and can distinguish porcine circovirus type 2 and porcine circovirus type 3 from other porcine disease viruses. The minimum detection limit of PCV2 is 1.00×101 copies/µL, and that of PCV3 is 1.00×100 copies/µL; The repeatability is high, and the coefficient of variation between batches is 0.01% ~ 0.02% and 0.02% ~ 0.05%, respectively. In this study, 440 pig samples with clinical symptoms such as reproductive disorder, panting, emaciation and pallor, skin infl ammation were collected from large-scale pig farms in Hubei Province, and the established method and commercial kit were used for synchronous detection. The coincidence rate of PCV2 and PCV3 were 97.47% and 96.85%, respectively. The sequencing results showed that PCV2 was subtype 2d, and PVC3 was subtype 3c. The dual TaqMan fl uorescence quantitative detection method was characterized by good specifi city, sensitivity, rapidity, accuracy and cost saving. It can provide technical support for monitoring and prevention of PCV2 and PCV3.Key words: PCV2; PCV3; Establishment of dual TaqMan qPCR; mixed infectionChinese Journal of Animal Infectious Diseases中国动物传染病学报2024,32(2):151-159· 152 ·中国动物传染病学报2024年4月猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCVs)是目前已知最小的动物病毒,为圆形、无包膜、单股负链DNA,属于圆环病毒科(Circoviridae)圆环病毒属[1]。

关于猪伪狂犬病与猪圆环病毒2型病的鉴别诊断与治疗

关于猪伪狂犬病与猪圆环病毒2型病的鉴别诊断与治疗

关于猪伪狂犬病与猪圆环病毒2型病的鉴别诊断与治疗1. 引言1.1 猪伪狂犬病和猪圆环病毒2型病简介猪伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起的一种急性传染病,主要感染猪、犬和猫等动物。

患病猪表现出明显狂犬病样症状,如呼吸急促、抽搐、狂吠等,严重影响了猪的生长和养殖。

猪圆环病毒2型病是由猪圆环病毒2型引起的急性传染病,主要感染猪,表现为发热、厌食、呕吐、腹泻等症状,严重者可导致死亡。

猪伪狂犬病和猪圆环病毒2型病在猪群中传播迅速,对养猪业造成了严重的经济损失。

深入了解猪伪狂犬病和猪圆环病毒2型病的病因与病原、临床表现、诊断方法、治疗方法及预防措施对于有效控制这两种疾病的爆发具有重要意义。

【结束】.1.2 研究目的猪伪狂犬病与猪圆环病毒2型病是两种常见的猪病,容易引起养猪业的关注。

本文旨在探讨这两种疾病的鉴别诊断与治疗方法,帮助兽医工作者提高对这两种病的认识和诊疗水平。

具体研究目的包括:第一,分析猪伪狂犬病与猪圆环病毒2型病的病因及主要病原,比较它们的病原学特点;第二,探讨这两种病的临床表现特点,寻找它们的相同点和差异;总结两种疾病的实验室检查与诊断方法,为确诊提供参考;第四,总结现有治疗方法,评价其疗效及不良反应;第五,探讨预防控制措施,提出相应建议。

通过本研究,我们希望可以为兽医工作者提供更深入的了解和更科学的诊疗方案,有效降低猪伪狂犬病和猪圆环病毒2型病的发病率,保障猪的健康和养殖业的稳定发展。

1.3 研究意义猪伪狂犬病和猪圆环病毒2型病是两种常见的猪类传染病,对猪的生产和养殖产生了严重影响。

研究这两种疾病的鉴别诊断与治疗具有重要的意义。

正确诊断和治疗猪伪狂犬病和猪圆环病毒2型病可以有效减少猪群的感染率,降低疾病的传播风险,保障猪的健康和生产。

及时采取预防控制措施,可以有效避免猪群的大规模死亡,减少养殖业的经济损失。

研究猪伪狂犬病和猪圆环病毒2型病的病因与病原,有助于深入了解这两种疾病的发病机制,为疾病的防控提供科学依据。

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的繁 殖 障 碍 等[ 。P V- 、 繁 殖 与 呼 吸 道 综 合 征 1 ] C 2猪
收 稿 日期 :0 10 - 3 2 1 -8 2 基 金 项 目 : 家 生猪 现 代 农 业 产 业 技 术 体 系项 目( y t 0 9 国 n cx 0 )
作 者 简 介 : 廷 川 (9 7 ) 男 , 庆 人 , 士 研 究 生 , 要 从 事 畜 禽 疾 病诊 断及 相 关 分 子 生物 学研 究 。 *通 讯 作 者 徐 18一 , 重 硕 主
S UN a —ig, HANG Xioj n Z Xu, ENG h a ,1 P S u iJ ANG n , Ni g CHE Qi u N - n j
( yL b r tr f Z o o i ,I si t o o n ss i n U iest C a g h n J l ,1 0 6 , h n ) Ke a o a o y o o n s s n t ue f Z o oi ,J l n v r i t i y, h n c u , i n 3 0 2 C ia i
Pr k r o i pr s i n o h t a e l l r M a r x Pr t i i i n t o a y tc Ex e s o f t e Ex r c lu a t i o e n M nd n a d I s
I mmu ee h n i gE fc n S h so o o iu n -n a cn fe t c it s maj p nc m o a
8 8 ( 1 2 8 。调 查 表 明 , C 2感 染在 广 东地 区猪群 中普 遍存 在 。 .2 2 /3 ) P V-
关键 词 : 圆环 病毒 2型 ; 猪 混合 感染 ; 抗体检 测 ; 流行病 学调 查
中 图分 类 号 : 8 1 3 ¥ 5 . 5 . ¥ 5 . ;8 2 69 2 文献 标 识 码 : A 文 章 编 号 : 0 7 5 3 ( O 1 1 -0 9 0 1 0—O 8 2 l )20 7-5
毒 (R S 、 P R V) 伪狂 犬病 病毒 ( R 混合 感染 情况做 了进 一 步 调 查 。结果表 明 , C 2抗体 检 测 平 均 阳性 率 P V) P V一 为 6 . 1 ( 7 / 6 ) 其 中 断奶 仔 猪 抗 体 阳性 率 为 5 . 2/( 2 / 4 ) 后 备 母 猪 抗体 阳性 率 为 6 . 1 1 9 4 3 7 4 , 9 5 6 3 2 5 1 , 9 4 8 ( 5 5 ) 经产母 猪抗 体 阳性 率 为 6 . 9 (2 17 , 3/ 4 , 7 2 7 /0 ) 公猪 抗 体 阳性 率为 7 . 7 ( 2 3 ) 与 P V 混 合 感 染 0 9 2/ 1 ; R 的 阳性 率 为 1 . 1 ( 5 2 8 , P S 混合感 染 阳性率 为 4 . 8 ( 1 / 3 ) 三者 混合 感 染的 阳性 率 为 4 7 3 / 3 ) 与 RR V 74 132 8 ,
r s P R V) u , R S 和伪狂 犬病病 毒 ( s u oa i i s P e d rbe vr , s u P V) R 的混 合感染 已经成 为 P MWS阳性猪 的 主要 致 病 因素 , 以两病 毒混 合感染 的 比例很 高 , 德 国高达 在
7 . 6美 国 6 , 国 3 5 右[ 5 9/, 9 04[ 中 . o O, 9左 。近 年来 , 该
Absr c : t a t The i mm u — n ncng f e t o nd n wa s ud e . The M u ne e ha i e f c f mi i s t i d s mus u us s n ne e c d ng c l po 2 ge n o i
( 南农业大学兽医学院 , 华 广东 广州 5 0 4 ) 1 62
摘 要 : 了解 广 东省猪 群 中猪 圆环病 毒 2型 ( C 2 的感 染情 况 , 用酶联 免 疫吸 附试 验 ( L S 对 为 P V一 ) 应 E IA) 广 东部 分 地 区的 7 4份 不 同年 龄 段 的猪 血 清进 行 P V 2抗 体 检 测 , P V一 猪猪 繁 殖 与 呼吸 综 合征 病 6 C 一 对 C 2与
震 颤 ( o g ntlte r , T) 猪增 生 性 坏 死 性 间 C n e i rmos C 、 a
病 的发生 呈现 上升趋 势 , 引起 免疫 抑 制 的 同时 , 在 还 容易 继发 、 并发 一 系列疾 病 , 给p e mo i, ) Itrt il n u na I 以及 怀 孕母 猪 t P
猪 圆环 病 毒 病 是 由 猪 圆 环 病 毒 2型 ( ocn P rie
cro i stp , C 2 引 起 的 单 独 或 继 发/ 合 i vr y e2 P V- ) c u 混
( r i e r uc i e a d r s r t y s nd o e v — Po cne r p od tv n e pia or y r m i
感 染其 他致 病 微 生物 的一 系列 疾 病 的总 称 , 括 断 包 奶 仔 猪 多 系 统 衰 弱 综 合 征 ( o t a ig mut y — P swenn l s s i tmi w sigs n rme P e c a t y do , MWS 、 n ) 新生仔 猪 先天性
动物 医 学进 展 。0 1 3 ( 2 :98 2 1 ,2 1)7—3
Pr r s n V e e i a y M e cne og e si t rn r dii
广 东 省 猪 圆环 病 毒 2型 感染 的血 清 学调 查
徐 廷 川 , 衡 ,张 得 玉 , 桂 红 王 张
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