流感采样方法
咽拭子采集规程-咽拭子采样流程
咽拭子采集规程-咽拭子采样流程[目的]从咽部和扁桃体取分泌物作细菌培养或病毒分离。
[用物]咽拭子培养管、酒精灯、火柴、压舌板、手电筒。
[步骤]1.查对医嘱,标签贴于标本上,携用物至病人床旁。
2.核对病人,解释取咽拭子培养的目的和方法。
3.点燃酒精灯,嘱病人张口发“啊”音,暴露咽喉,用培养管内的消毒长棉签以敏捷而轻柔的动作擦拭两侧腭弓和咽、扁桃体上的分泌物。
4.取毕,将试管口在酒精灯火焰上消毒,然后将棉签插入试管,塞紧。
5.及时送检(二)样本采集。
疫情发生地疾病预防控制机构负责暴发疫情病例样本的采集。
1、采样种类采集流感样病例的咽、鼻拭子,必要时,可同时采集血清样本。
2、采样对象(1)咽、鼻拭子:发病3天内,未服用抗病毒药物(金刚烷胺、金刚乙胺、XXX等)的流感样病例。
(2)急性期血清:发病后7天内的流感样病例。
(3)恢复期血清:发病后2~4周的流感样病例。
3、采样方法(1)咽拭子收罗:对婴幼儿患者收罗样本时,先将棉拭子用Hank氏液(PH7.4)蘸湿,在试管壁挤干后,在被检者鼻咽部涂抹数次,然后将XXX置于含有3mlHank氏液的试管内送检。
收罗5岁以上患者样本时,XXX可不必用Hank氏液蘸湿。
(2)鼻拭子:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,逗留片刻后缓慢转动退出。
以同一拭子拭两侧鼻孔。
将棉签头部浸入3~4ml采样液中,尾部弃去。
(3)血清采集:采集静脉血5ml,离心后取上清液装至血清管中。
血清样本应采集急性期与恢复期双份血清。
4、样本采集数量每一起暴发疫情一般应采集10份左右咽、鼻拭子样本(如果现症病例在10例以下的,应尽量全部采样)。
对不能明确诊断的可酌情增加采样批次和采样数量。
5、样本的包装样本必须放在密封并有橡胶圈的螺口塑料试管内,作好标记;样本密闭后放入适当的塑料袋内;填写采样登记表,放入另一塑料袋密封。
样本放入专用运输箱内,放入冰排,然后充填柔软物质,同一份样本可以放在同一个塑料袋内再次密封。
流感标本鼻咽拭子采样
标本储存及送输:
• 1、24小时内能检测的标本可置于4℃保存,24小时 内无法检测的标本则应置于-70℃或以下保存。
• 2、用A类(感染性物质,可感染人的)编号UN2814 包装运输。
• 3、标本上送时要附送样单。送样单要单独放置不 要与样品混放。
流感标本鼻咽拭子采样
个人防护
• 做好标本采集时的个人防护,建议: • 1、呼吸防护装备—检测合格的N95呼吸器或更高级别的防护装备。 • 2、鞋套 • 3、前封式手术服 • 4、双层手套 • 5、眼部防护装备(护目镜或面罩) • 拭双侧咽扁桃体及咽后壁, 将拭子头浸入含2~3ML采样液的螺口塑料管中,尾部弃去,旋紧 管盖。
• 4、送样箱要清洁,未受标本污染,送样时最好由 专业人员亲自送达,当面交接。
鼻拭子采集方法
鼻拭子、用合成纤维的拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后 缓慢转动退出。取另一根拭子以同样的方法采集另一侧鼻孔。每 侧1根擦拭后与咽拭子放在同一塑料管中。
标本采集要求:
• 1、标本采集应使用头部为合成纤维的病毒采样拭子,铝或塑料柄, 不推荐棉拭子和木柄。
• 2、标本采集管应包含3毫升采样液。 • 3、标本采集后应置于无菌病毒采样液或生理盐水中,并立即用冰
人感染H7N9禽流感采样以及实验室检测技术
用真空负压采血管采集血液标本5ml,室温静置30分钟, 1500~2000rpm离心10分钟,收集血清于2ml无菌螺口塑料管 中。
样本采集方法 (5)
鼻咽抽取物或呼吸道抽取物:
用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取 呼吸道分泌物。先将收集器头部插入鼻腔或气管,接通负 压,旋转收集器头部并缓慢退出;收集抽取的粘液,并用 采样液3ml涮洗收集器1次(可用小孩导尿管接在50ml注射 器上来代替收集)。
注:应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本(尤其是下呼 吸道标本)和发病7天内急性期血清以及间隔2-4周的恢复 期血清。
要求 呼吸道标本:发病早期采样,每份不少于3ml 血清标本每份分为2管,每管不少于0.5ml
样本采集方法 (1)
咽拭子:左手用压舌板压住患者舌头,右手用2根聚丙烯纤
维头的塑料杆拭子同时檫拭双侧咽扁桃体及咽后壁,应避免 接触舌头,将拭子头浸入含3ml采样液的管中,弃去尾部,旋 紧管盖。
胞分类计数减少; 4. 不能从临床或实验室角度诊断为常见病原所
致的肺炎。
• 包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱 液和鼻洗液);
◆下呼吸道标本(如气管吸取物、肺洗液、肺组织标本);
◆ 血清标本;
◆ 如病人死亡,应当尽可能说服家属同意尸检,及时进行尸 体解剖,采集组织(如肺组织、气管、支气管组织)标本;
样本采集方法 (4)
鼻洗液 患者取坐姿,头微后仰,用移液管将5 ml生理盐水注入一侧鼻孔,嘱患 者同时发K音以关闭咽腔。然后让患者低头使生理盐水流出,用平皿或烧 杯收集洗液。重复此过程洗两侧鼻孔
漱口液 用10 ml生理盐水漱喉。漱时让患者头部微后仰,发“噢”声,让生理
盐水在咽部转动。然后,用50ml的无菌螺口塑料管收集洗液。
人禽流感标本采集、运送、处理及保存的操作规程
人禽流感标本的采集、运送、处理及保存操作规程一、目的规范人禽流感标本的采集、运送、处理及保存操作。
二、适用范围本操作规程适用于人禽流感标本的采集、运送、处理及保存。
三、简介人禽流感检测过程中,采集的标本包括鼻咽拭子、漱口液、血液等。
本实验室一般用鼻咽拭子或漱口液进行病毒分离与分子生物学检测,血清用于人禽流感抗体检测,采集血液部位一般位于前臂肘静脉。
四、器材1、用于血液收集的基本耗材包括:医用(5ml和10ml)一次性注射器、一次性乳胶手套、止血带、碘酒、无菌拭子、血清储藏管、标本标签、创可贴、可封口塑料袋、标本采集表格、带有冰袋的冰壶、棉拭子、污物桶、笔、试管架。
2、用于鼻咽拭子、漱口液等收集的基本耗材包括:一次性乳胶手套、防护服、十二层口罩(或N95口罩)、采样无菌棉签、采样液(螺口塑料管装)、可封口塑料袋、带有冰袋的冰壶、污物桶、样品登记表、笔、试管架。
附:血清保存管:2 ml螺口塑料管(外螺旋、带密封垫圈),可耐深低温(液氮保存);鼻咽拭子保存管:10 ml螺口塑料管(外螺旋、带密封垫圈),可耐深低温(液氮保存);尸检组织冻存管:50ml螺口塑料管(外螺旋、带密封垫圈);记号笔:油性,防水。
五、人禽流感标本采集操作规程(一)标本采集要求1.采样人员须以无菌操作采集各类标本。
采集标本所使用的容器、采样液等均应无菌。
编制:福建省疾控中心病毒性疾病防治科审核:沈晓娜批准:严延生2. 每份标本必须标明标本编号、标本种类及采集日期。
采集单位应指定专人负责标本的登记、收集和管理,并认真填写“人禽流感标本采集登记表。
”3.所有标本的收集、运输和保藏都应装在有螺旋盖的塑料管中,以防止开、关标本管时产生气溶胶,并用两层清洁塑料袋包裹严实。
4.采集的标本应立即送当地疾病预防控制机构,同时附上标本送检单。
如不能立即送交,可置-20℃以下冰箱短暂保存(24小时之内)。
(二)标本采集种类与方法标本采集的时间、位置及质量对能否分离到病毒或提取到有活性的RNA至关重要,而标本保存与运输不当,也会影响病毒的分离。
流感病毒采集规范
附件5:流感监测实验技术操作规范一、流感监测临床标本的采集、运送、处理及流感病毒株的运输(一)、流感临床标本的采集病毒分离成功与否很大程度上取决于临床标本的质量,及其保存运输等环节。
多数标本取自患者上呼吸道鼻咽腔,其次为气管和支气管分泌物及尸检组织。
标本采集后应立即放入适当的采样液中低温保存。
采样液常用的采样液有以下五种:普通肉汤、pH7.4~7.6的Hank's、Eagle's、水解乳蛋白液或不加抗菌素的生理盐水(漱喉液)。
为防止采样液生长细菌和真菌,在采样液中需加入抗菌素,加入庆大霉素,其终浓度为0.1mg/ml,和抗真菌药物,其终浓度为2mg/ml。
加入抗菌素以后重新调节pH值为7.4,配制好以后,分装每个采样管4ml,-20℃冻存。
采样方法有以下几种:1)鼻拭子:将带有聚丙烯纤维头的拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。
以另一拭子拭另侧鼻孔。
将拭子头浸入采样液中,尾部弃去。
2)咽拭子:用带有聚丙烯纤维头的拭子擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,同样将拭子头浸入采样液中,尾部弃去。
注:亦可将鼻、咽拭子收集于同一采样管中,以便提高分离率,减少工作量。
3)鼻咽抽取物:用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液。
先将收集器头部插入鼻腔,接通负压,旋转收集器头部并缓慢退出。
收集抽取的粘液,并用采样液5ml涮洗收集器3次。
4)漱口液:用10ml生理盐水漱喉。
漱时让患者头部微后仰,发“噢”声,让生理盐水在咽部转动。
然后,用平皿或烧杯收集洗液5)鼻洗液:患者取坐姿,头微后仰,用移液管将5ml生理盐水注入一侧鼻孔,嘱患者同时发K音以关闭咽腔。
然后让患者低头使生理盐水流出,用平皿或烧杯收集洗液。
重复此过程洗两侧鼻孔。
(二)、临床标本运送新鲜的临床采集标本应在4℃条件下24小时内运送至全国流感监测网络实验室。
未能24小时内送至实验室的,应置-70℃或以下保存。
标本送至实验室后,病毒分离标本应尽快进行接种分离,24小时内能进行接种的可置于4℃保存,如未能接种应置-70℃或以下保存。
流感监测样本采集有关事项
标本必须放在大小适合的带螺旋盖内有橡胶圈的
塑料管里,拧紧; 每袋装一份标本;
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;
在采样管上用油性记号笔做好标记用塑料袋密封。
同时填写“流感/人禽流感监测病例标本原始登记 表”,用另一塑料袋密封; 然后以柔软物质填充,内衬具吸水和缓冲能力的 材料。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同 一个塑料袋内再次做密封。所有容器必须有生物 危险标识。
标本采集种类包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽拭子。标 本采集后放入含3-4ml采样液的采样管中。
临床样本收集的注意事项
• 要做好自我保护,操作要细心,严防标本间交叉
污染
• 采集禽流感疑似度 • 标本采集后应迅速至于冰上或者4 ℃以下保存,
因为流感病毒对热很敏感
暴发疫情标本采集
采集发病3天内流感样病例的鼻、咽、咽鼻拭子标 本,必要时可采集急性期(发病7天内)和恢复期 (发病2-4周)双份血清标本。每一起暴发疫情至少 采集10份咽、鼻拭子标本(如果现症病例在10例以 下的,应全部采样)。 不能明确病原的可增加采样批次和数量。 标本运输:4℃条件下,于24小时内运送至流感监 测网络实验室 。
临床标本处理
鼻、咽拭子:为带有聚丙烯纤维的拭子标本,应 先将带有聚丙烯纤维的拭子在管壁反复挤压后取 出。 鼻咽抽取液:用干净灭菌的毛细吸管在无菌条件 下反复吹打收集的溶液,以便打碎粘液,置4℃ 待其自然沉淀5~10min,取上清。上清液可直 接接种或低温保存。 组织标本的处理:取肺组织标本放至平皿中,用 灭菌生理盐水清洗肺组织2~3遍,研磨成组织悬 液,配置成10%~20%的组织悬液,2000rpm离 心10min,加入抗菌素,取上清直接接种。 如原始采样液中未加入抗菌素,应在标本接种前 补加,庆大霉素终浓度为10mg/mL,青/链霉素 (终浓度:青霉素G 100U/mL,硫酸链霉素 100μg/mL),混匀后置4℃过夜或作用2h后进行 接种。
禽流感采样方法
二、环境标本采集、处理、保存和运输(一)标本采集和处理1、采样液环境标本采样液可用Hank's或Eagle's等培养液加入以下抗菌素和0.5%BSA:氨苄青霉素(2x106 IU/L)、链霉素(200mg/L)、多粘菌素B(2x106 IU/L)、庆大霉素(250mg/L)、制霉菌素(0.5x106 IU/L)、盐酸氧氟沙星(60mg/L)、磺胺甲基异恶唑(200mg/L)。
2、标本种类、采集方法及处理(1)水标本在禽类活动或笼具旁的水沟或水池不同部位共收集水标本5-10ml置于15ml外螺旋盖的管内。
水样标本到实验室后应在采样管中加入上述抗生素和0.5%BSA,再分装。
如果采集水标本中存在固体等物质,应将采集标本在无菌条件下反复吹打,以打碎固体物质,置4℃待其自然沉淀30min,也可3000rpm离心10min,取上清分装。
(2)笼具表面标本每个笼具采集1份标本放在1个单独采样管中。
用蘸有采样液的带有聚丙烯纤维头的拭子擦拭笼具表面禽类最常接触的3-5个不同部位(包括笼具底部),然后将擦拭过的拭子放入含5ml采样液采样管中,尾部弃去。
也可用多个拭子充分擦拭笼具表面后放到1个采样管中。
环境标本要在无菌条件下反复吹打收集的溶液,以打碎固体,置4℃待其自然沉淀30min,也可3000rpm离心10min,取上清分装。
(3)宰杀或摆放禽肉案板表面的擦拭标本如宰杀或摆放禽肉使用不同案板,可采集擦拭标本放到不同采样管中。
方法与采集笼具表面擦拭标本相同,拭子要擦拭禽肉接触最多部位。
(4)粪便标本从禽舍或环境中采集新鲜禽类粪便样品3-5g左右,放入含5ml采样液的采样管中。
采集的粪便标本要在无菌条件下反复吹打,以打碎粘液和固体物质,置4℃待其自然沉淀30min,也可3000rpm离心10min,取上清分装。
(5)清洗禽类的污水如有清洗禽类的污水盆或桶,可采集清洗禽类的污水标本。
将水槽中水样用无菌的、一次性的玻璃棒或棉签充分混匀后采集5-10ml置于15ml外螺旋盖的管内。
4 流感病毒标本采集、运输、分离检测及注意事项
在采样管上用油性记号笔做好标记用塑料袋密封。同时填 写“流感/人禽流感监测病例标本原始登记表”,用另一 塑料袋密封;
将装标本的密封袋放入专用运输箱内,放入冰排,然后以 柔软物质填充,内衬具吸水和缓冲能力的材料。同一患者 2份以上的密封标本,可以放在同一个塑料袋内再次做密 封。所有容器必须有生物危险标识。
感病毒对热很敏感 • 标本管标识明确:医院名称,标本号,患者姓名,性别,
采样日期 • 标本采集后尽量在24小时内送到实验室进行病毒分离。
24小时内未能进行病毒分离的标本应放-70 ℃或以下
血清学标本注意事项
• 血清学最好采集急性期和恢复期的双份血清塑料管里, 拧紧;
膜与鸡胚胎的另一面形成明显的界限 标记出鸡胚的气室与尿囊的界限、胚胎头部
的位置 如果鸡胚是死胚、没有受精、有裂痕、发育
不全、或表面有好多渗水孔,应弃掉
流感病毒操作要求生物安全规程
禁止在同一实验室,同一时间处理接种未知临床 标本和已知标准病毒
禁止在同一实验室,同一时间处理接种采自不同 动物的标本
国家流感中心 张烨
标本种类
临床标本
鼻拭子、咽拭子、鼻咽吸取物、漱口液等
血清标本
病人的急性期和恢复期血清双份血清
临床样本的选择
采样对象:流感样病例(没有服用过抗病毒药物 )、人禽流感待 查病例
流感样病例:发热(体温≥38℃),伴咳嗽或咽痛之一者, 而缺乏其它的实验室确定诊断依据
采集时间:病人发病后的头三天
RT-PCR 组成成分
PCR的基本原理
• PCR反应条件 • PCR过程 • PCR的特点
94 温 度 72 (℃)
全国流感监测技术指南(2017年版)
附件1全国流感监测技术指南(2017年版)为进一步规范我国流感监测工作技术环节,科学指导全国流感监测网络和各级疾病预防控制机构做好流感监测工作,依据《全国流感监测方案(2017年版)》, 特制定本指南。
一、监测目的(一)实时监测流感活动水平和流行趋势;(二)实时追踪流感病毒变异,及时发现新型流感病毒,并做出预警;(三)为全球及我国流感疫苗株的推荐及抗病毒药物的使用提供依据;(四)为流感大流行的准备和应对提供技术支撑。
二、流感样病例监测(一)监测病例定义流感样病例:发热(体温≥38℃),伴咳嗽或咽痛之一者。
出现发热的时间应在本次急性发热病程内,体温认定包括患者自测体温和医疗机构检测体温。
(二)监测时间所有流感样病例监测哨点医院和流感监测网络实验室均全年开展流感样病例监测。
流感监测周历编排标准参照ISO8601,按照公历的周一到周日编排,周一为每周第一天(周历注释:如1月1日为周一至周四,该周属于新年第一周;如1月1日为周五至周日,该周则属于上一年最后一周;监测年度注释:每年第十四周为监测年度起始周;下一年的第十三周则属于监测年度终止周。
)。
(三)哨点医院监测诊室的设置1.综合医院在内科门诊、内科急诊、发热门诊和(或)儿内科门诊、儿内科急诊开展流感样病例的监测。
2.儿童医院在儿内科门诊、儿内科急诊和(或)发热门诊开展流感样病例的监测。
3.所有国家级流感样病例哨点监测医院都应按要求规范设置监测诊室,不能仅将发热门诊设为监测诊室。
(四)流感样病例的报告1.报告内容和程序(1)哨点医院监测诊室的医务人员,按照流感样病例的定义,对每天在所有监测诊室就诊的病例进行诊断,每天按科室登记各年龄组的流感样病例数和门急诊病例就诊总数,填写“医院科门(急)诊流感样病例数和门急诊病例就诊总数原始登记表”(附表1),报医院主管科室。
原始登记表中“流感样病例数”和“门急诊病例就诊总数”可分科室、诊室,由各科室确定专人每日进行登记。
标准操作规程(SOP)——呼吸道标本采集
标准操作规程(SOP)——一、目的本SOP是为了保证呼吸道标本采集的操作的规范性以及确保采集标本的质量而制定。
二、范围适用于中国国家流感中心的所有技术人员进行呼吸道标本的采集。
三、程序(一)生物安全要求采集疑似人高致病性禽流感病例和不明原因肺炎病人呼吸道标本时,采集人员需以BSL-3级防护;一般流感样病例,呼吸道标本的采集以BSL-2级防护。
具体参见“生物安全个人防护SOP”。
(二)材料1.无菌拭子:聚丙烯纤维头的拭子2.15-mL离心管3.常用的采样液配制:常用的上呼吸道采样液有:pH7.4~7.6的Hank's或MEM液400mL。
加入庆大霉素(50 mg/mL)0.8mL,多粘菌素B(250μg/mL)3.2mL。
加入抗菌素以后重新调节pH值为7.4,配制好以后,分装每个采样管2~3mL,-20℃冻存。
4.压舌板(三)实验步骤1.采集呼吸道标本呼吸道标本:包括鼻拭子、咽拭子、鼻咽抽提物、鼻洗液、咽漱液。
最佳采集时间为发病后的前3天,不超过7天。
(1)鼻拭子:采集者左手扶住患者的下颌部,右手持无菌拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。
以另一拭子擦拭另侧鼻孔。
将拭子头浸入采样液中,在采样液中挤压拭子头部数次,用力折断拭子的尾部,将拭子的尾部弃去。
(2)咽拭子:左手用压舌板压住患者的舌头。
右手持无菌拭子擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将拭子头浸入采样液中,在采样液中挤压拭子头部数次,用力折断拭子的尾部,将拭子的尾部弃去。
亦可将鼻、咽拭子收集于同一采样管中。
(3)漱口液:用10mL生理盐水漱喉。
漱时让患者头部微后仰,发“噢”声,让生理盐水在咽部转动。
然后,用平皿或烧杯收集洗液。
(4)鼻洗液:让患者取坐姿,头微后仰,用移液管将5 mL生理盐水注入一侧鼻孔,嘱患者同时发K音以关闭咽腔。
然后让患者低头使生理盐水流出,用平皿或烧杯收集洗液。
重复此过程洗两侧鼻孔。
(5)鼻咽抽取物:常用于采集气管和支气管分泌物。
标本的采集、保存、运送
3、运送 (1)温度:低温。 (2)样品要固定。 (3)送样人应对采样过程以 况熟悉。
及采样对象等情
谢谢!
3、标本的运送 标本应在冷藏 条件下运送
4、标本的接收 地点: 电话:
六、存在的问题
1、采集过程 (1)咽拭子应立即放入保存液中,并低温保存。 (2)塑料试管上应标记姓名、采样时间等,应使用油性记号笔。 2、样品的保存 (1)血液样品的储存温度是冷藏储存,不是冷冻。 (2)鼻、咽拭子等样品应是冷冻。
1、采样液:普通肉汤、Hanks氏液、Eagle氏液、水解乳蛋白液 在采样液中需加入抗菌素,以往多用青、链霉素,近来发现不少种类细菌对
它们具有耐药性,故近来多用庆大毒素(其终浓度为每ml采样液中加入0.1ml 的 10mg/ml ) 和 抗 真 菌 素 ( 其 终 浓 度 为 每 ml 采 样 液 中 加 入 0.008ml 的 250ug/ml)。 2、采样管:无菌、耐深低温、外螺旋塑料试管
三、采集时限
1、咽、鼻拭子或含漱液在发病的头3天采集; 2、急性期血清在发病后7天内采集,恢复期血清在发病后24周采集; 3、尸检标本尸检时采集
四、采样方法
(一)血液采样方法
1、 采样管:无菌、外螺旋塑料试管 2、采样方法:用一次性注射器采集静脉血 料试管,然后,盖好管盖。
5ml,注入塑
(二)咽、鼻拭子及含漱液采样方法
3、样本采集方法
(1)鼻拭子 将长棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭
子拭两侧鼻孔。将棉签浸入含有4-5ml采样液的管中,尾部弃去。然后, 盖好管盖。 (2)咽拭子
用长棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,同样将棉签头浸入含有4-5ml采 样液的管中,尾部弃去,然后,盖好管盖。
人感染H7N9禽流感标本采集要求
人感染H7N9禽流感标本采集要求一、标本采集种类:医疗机构应当及时采集病例相关临床样本。
1、上呼吸道标本(包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液);2、下呼吸道标本(如气管吸取物、肺洗液、肺组织标本)3、血清标本(发病7天内急性期血清以及间隔2-4周的恢复期血清);4、尸检标本(如病人死亡,应当尽可能说服家属同意尸检,及时进行尸体解剖,采集肺组织、气管、支气管等组织标本);5、应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本(尤其是下呼吸道标本)。
二、标本采集主要器材和试剂:1、拭子:WHO及美国CDC规定,鼻烟拭子采集只能用塑料杆的涤纶或人造棉拭子(如常用的聚酯纤维拭子),不能用藻酸钙拭子或木杆拭子,因可能使某些病毒失活或抑制PCR;脱脂棉含有荧光物质,影响实时应荧光定量PCR结果。
2、压舌板3、3ml Hank’s液螺口采样管4、封口袋5、冷藏运输包6、油性标记笔或标签纸7、样品登记表8、真空采血管9、个人防护装备五、标本采集方法:鼻咽拭子采样是流感病原学监测中的一个重要环节,操作简单,但在流感监测工作中却极为重要。
标本采集的时间、位置及质量对能否分离到病毒或提取到有活性的RNA至关重要,而标本保存与运输不当,也会影响病毒的分离。
为提高病毒的分离率,在用于病毒分离样品的采集数量、类型和地点方面,实验室技术人员应与流行病学人员达成共识。
一般来说,用于病毒分离的样品应与血样同时采集,以便进行血清学诊断。
1、鼻拭子:采集标本时,嘱咐病人头部尽量保持不动,将聚酯纤维头拭子轻轻转动缓缓插入病人鼻孔至颚部(注意:不可太用力,但要尽量深,通常5cm以上),停留数秒吸取分泌物,轻轻旋转取出拭子,置采样管折断手接触部位的塑料柄,使拭子浸泡至采样液中,旋紧管盖。
2、咽拭子:嘱咐病人放松,发“啊”声,立即用压舌板压住病人舌前2/3,聚酯纤维头拭子适度用力多次抹擦悬雍垂(腭垂或小舌,见图)后部咽后壁及双侧扁桃体,避免触及舌部,取出后置采样管,折断手接触部位的塑料柄,使拭子浸泡至采样液中,旋紧管盖。
流感病毒标本采集、运输
流感病毒临床标本的运送要求
• 新鲜的临床采集标本
应在4℃条件下24小时内运送至全国流感监测网络实 验室;
• 护送人员应进行相关的生物安全知识培训;
• 在护送过程中采取相应的防护措施。
• 注意:严禁通过公共交通工具运输
精选ppt
12
感谢亲观看此幻灯片,此课件部分内容来源于网络, 如有侵权请及时联系我们删除,谢谢配合!
感谢亲观看此幻灯片,此课件部分内容来源于网络, 如有侵权请及时联系我们删除,谢谢配合!
4
流感病毒标本采集
临床标本的采集法
鼻拭子 咽拭子 鼻咽吸取物 漱口液
若采集的是鼻咽拭子,同一时间采集的标本可
放入同一管内
注意:采集禽流感疑似病人标本
最好是下呼吸道吸取物
精选pt
5
(一)、临床标本的采集
• 鼻拭子:将带有聚丙烯纤维头的拭子轻轻插入鼻 道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以另一 拭子拭另侧鼻孔。将拭子头浸入采样液中,尾部 弃去。
• 血清学最好采集急性期和恢复期的双份血清 • 采集空腹血
精选ppt
9
临床标本的包装
标本必须放在大小适合的带螺旋盖内有橡胶圈的 塑料管里,拧紧;
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封; 每袋装一份标本;
在采样管上用油性记号笔做好标记用塑料袋密封。 同时填写“流感/人禽流感监测病例标本原始登记 表”,用另一塑料袋密封;
• 采集标本要有一定力度
• 标本采集后应迅速至于冰上或者4 ℃以下保存, 因为流感病毒对热很敏感
流感采样方法
流感采样方法
1 采样标准
严格规范采样标准,是保证流感病毒采样阳性率上升的关键,有以下两点:(1)体温≥38℃,且不超过3天的发热病人:(2)伴有咳嗽、咽痛。
2 采样方法
2.1 患者沟通告诉患者采样的目的、意义、方法以及操作过程中的注意事项以取得患者的合作。
2.2 采样前准备采样者二级防护,采样材料有病毒保存液、注射器、一次性无菌平皿、易折专用无菌拭子、压舌板、剪子。
2.3 采样过程在采样管外写上病人的名字、性别、采样日期。
(1)漱口液:患者面向采样者坐于靠背椅上,先沾湿两支无菌拭子,然后嘱患者用5ml采样液漱喉,漱时让患者头部未仰,发“噢”声,让采样液在咽部转动,吐于平皿。
(2)鼻拭子:患者面向采样者坐于靠背椅上,头后仰45℃左右,将一支沾湿的拭子平行于上鄂的角度轻轻地左右转动从一侧鼻孔插入,一般当拭子插入有阻力时再将拭子停留2到3秒后缓慢转动退出,另一侧鼻孔重复操作。
(3)咽拭子:嘱患者头后仰张大嘴巴发出“啊”声,将另一支沾湿的拭子左右两面及拭子头部快速较用力地分别刮去扁桃体腺两侧和咽后壁的分泌物。
将两支拭子放于空采样管,用剪子或者折断手接触部分,然后用注射器吸取平皿里的漱口液于采样管里,加盖旋紧,最后将样本放于冷藏包中,在24小时内送至实验室。
3 讨论
由于很难采到双份血清标本,不建议采取血清标本,根据病人的情况也可以单采鼻拭子或者咽拭子,咽拭子采样时动作轻巧、快速、准确,而鼻拭子要求动作缓慢、轻巧、稳重,主要用的检测方法是实时荧光定量RT-PCR。
流感病毒采集规范
流感病毒采集规范第一篇:流感病毒采集规范附件5:流感监测实验技术操作规范一、流感监测临床标本的采集、运送、处理及流感病毒株的运输(一)、流感临床标本的采集病毒分离成功与否很大程度上取决于临床标本的质量,及其保存运输等环节。
多数标本取自患者上呼吸道鼻咽腔,其次为气管和支气管分泌物及尸检组织。
标本采集后应立即放入适当的采样液中低温保存。
采样液常用的采样液有以下五种:普通肉汤、pH7.4~7.6的Hank's、Eagle's、水解乳蛋白液或不加抗菌素的生理盐水(漱喉液)。
为防止采样液生长细菌和真菌,在采样液中需加入抗菌素,加入庆大霉素,其终浓度为0.1mg/ml,和抗真菌药物,其终浓度为2mg/ml。
加入抗菌素以后重新调节pH值为7.4,配制好以后,分装每个采样管4ml,-20℃冻存。
采样方法有以下几种:1)鼻拭子:将带有聚丙烯纤维头的拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。
以另一拭子拭另侧鼻孔。
将拭子头浸入采样液中,尾部弃去。
2)咽拭子:用带有聚丙烯纤维头的拭子擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,同样将拭子头浸入采样液中,尾部弃去。
注:亦可将鼻、咽拭子收集于同一采样管中,以便提高分离率,减少工作量。
3)鼻咽抽取物:用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液。
先将收集器头部插入鼻腔,接通负压,旋转收集器头部并缓慢退出。
收集抽取的粘液,并用采样液5ml涮洗收集器3次。
4)漱口液:用10 ml 生理盐水漱喉。
漱时让患者头部微后仰,发“噢”声,让生理盐水在咽部转动。
然后,用平皿或烧杯收集洗液5)鼻洗液:患者取坐姿,头微后仰,用移液管将5 ml生理盐水注入一侧鼻孔,嘱患者同时发K音以关闭咽腔。
然后让患者低头使生理盐水流出,用平皿或烧杯收集洗液。
重复此过程洗两侧鼻孔。
(二)、临床标本运送新鲜的临床采集标本应在4℃条件下24小时内运送至全国流感监测网络实验室。
未能24小时内送至实验室的,应置-70℃或以下保存。
流感病毒核酸检测标本采集、送检、处理流程
流感病毒核酸检测标本采集、送检、处理流程1. 引言流感病毒核酸检测是一种常用的检测方法,可以用于流感的早期诊断和监测。
本文档旨在提供流感病毒核酸检测标本采集、送检和处理的详细流程,以确保准确、及时和安全的检测结果。
2. 标本采集标本采集是流感病毒核酸检测的第一步,正确的采集方法对于后续检测结果至关重要。
以下是标本采集的步骤:1. 选择合适的采集时间:流感病毒在病程初期时最容易检测到,因此最好在症状开始后的48小时内采集标本。
2. 选择合适的采集方法:常见的标本采集方法包括咽拭子采集、鼻拭子采集和咳痰样本采集。
根据临床需要和采集者的经验选择合适的采集方法。
3. 采集过程:采集者应使用无菌手套,并根据操作要求进行准确的采集。
在采集过程中,要避免其他污染源的接触,确保标本的纯净度。
4. 标本保存和运输:采集后,标本应立即储存于适当的中,并在规定的时间内送往实验室进行处理。
3. 送检送检是将采集的标本送往实验室进行核酸检测的步骤。
以下是送检的流程:1. 填写申请单:在送检前,检测人员应填写标本的相关信息,如姓名、性别、年龄等,并注明流感病毒核酸检测的要求。
2. 标本包装:将已采集的标本放入密封袋中,确保袋子密封良好,避免标本在运输过程中的泄漏。
3. 运输方式:根据实验室的要求,选择适当的运输方式。
一般情况下,标本应使用专用的运送盒,采取冷链运输以确保标本的质量。
4. 相关文件:将申请单和相关的送检文件一同放入密封袋中,以便实验室对标本的追踪和管理。
4. 处理流程实验室收到标本后,需要进行一系列处理步骤以获得准确的核酸检测结果。
以下是处理流程的主要步骤:1. 样本接收:实验室收到标本后,应及时确认标本的完整性和相关信息的准确性,并记录相关数据。
2. 样本处理:对标本进行必要的预处理,如离心、去除细胞和红细胞沉淀等,以提取标本中的核酸。
3. 核酸提取:使用合适的提取试剂和方法,从标本中提取核酸。
在提取过程中,应采取相关措施以防止实验室内的交叉污染。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
流感采样方法
1 采样标准
严格规范采样标准,是保证流感病毒采样阳性率上升的关键,有以下两点:(1)体温≥38℃,且不超过3天的发热病人:(2)伴有咳嗽、咽痛。
2 采样方法
2.1 患者沟通告诉患者采样的目的、意义、方法以及操作过程中的注意事项以取得患者的合作。
2.2 采样前准备采样者二级防护,采样材料有病毒保存液、注射器、一次性无菌平皿、易折专用无菌拭子、压舌板、剪子。
2.3 采样过程在采样管外写上病人的名字、性别、采样日期。
(1)漱口液:患者面向采样者坐于靠背椅上,先沾湿两支无菌拭子,然后嘱患者用5ml采样液漱喉,漱时让患者头部未仰,发“噢”声,让采样液在咽部转动,吐于平皿。
(2)鼻拭子:患者面向采样者坐于靠背椅上,头后仰45℃左右,将一支沾湿的拭子平行于上鄂的角度轻轻地左右转动从一侧鼻孔插入,一般当拭子插入有阻力时再将拭子停留2到3秒后缓慢转动退出,另一侧鼻孔重复操作。
(3)咽拭子:嘱患者头后仰张大嘴巴发出“啊”声,将另一支沾湿的拭子左右两面及拭子头部快速较用力地分别刮去扁桃体腺两侧和咽后壁的分泌物。
将两支拭子放于空采样管,用剪子或者折断手接触部分,然后用注射器吸取平皿里的漱口液于采样管里,加盖旋紧,最后将样本放于冷藏包中,在24小时内送至实验室。
3 讨论
由于很难采到双份血清标本,不建议采取血清标本,根据病人的情况也可以单采鼻拭子或者咽拭子,咽拭子采样时动作轻巧、快速、准确,而鼻拭子要求动作缓慢、轻巧、稳重,主要用的检测方法是实时荧光定量RT-PCR。