微生物实验报告

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微生物实验报告

实习报告

实习名称食品微生物检验实习

系别生物与化学工程系

年级专业12级食品科学与工程专业学生姓名某某某

指导老师王老师、黄老师、李老师

X X 学校

2015 年1 月13日

1、实习时间、地点和实习单位

2、实习目的

通过食品微生物检验实习,掌握培养基的配制、包扎及灭菌;正确采集样品并对样

品进行稀释、滴加、培养;菌落观察、鉴定与计数;数据处理、分析等方面内容,并结

合生产和科研技术的发展,开设较高的综合性实验为主,运用综合的实验方、实验手段

对我们的知识、能力、素质形成综合的培养。为我们今后从事各种与食品相关的工作打

下基础。

3、实习过程概述

3.1参加认识实习动员大会

2014年11月8日上午由黄大川、王瑶琼2位老师召开了微生物实习动员大会。会

上,老师们说明了实习目的、内容、时间、地点,着重强调了此次实习的自主性和和注

意事项,另外还应遵守实验室的规章制度,保持高度的安全意识。

3.2实习内容

一、腐乳中细菌含量的检测

1、实验材料和设备

1ml移液管 5支,1000ml、500ml、100ml的烧杯各1、1、2个,250ml锥形瓶 3个,

100ml量筒1个,研钵1个,滴定管1支,试管5支,试管架1个,玻璃棒1根,培养皿 12

个,涂布器1个,洗耳球1个,酒精灯1盏,电磁炉1个,天平1台,药匙1个,pH试纸,

标签纸1张,纱布、棉花、线、报纸若干,高压蒸汽灭菌锅,恒温培养箱,超净工作台。

2、牛肉膏蛋白胨培养基的配制

配方:牛肉膏3g 蛋白胨10g NaCl 5g 琼脂15—20g 水1000ml pH 7.4—7.6

步骤:称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→倒平皿→接种→培

3、样品的稀释

①预处理:在天平上称取25g 样品,置于研钵中,然后加50ml无菌水在无菌室里研磨,磨碎后再加175mL 无菌水于研钵中,最后转至250ml锥形瓶中,充分振摇后,制成1:10 的样液。

②十倍稀释:

用1mL 灭菌移液管吸取1:10 样液1mL ,沿管壁缓缓注人盛有9 mL无菌水的灭菌试管中(注意吸管不要触及稀释液面),充分振荡试管使其混合均匀,制成1:100 的样品匀液。接着用另一支吸管按上述操作重复,依次制成10倍梯度系列的样品匀液。每稀释1次,换用1支1mL灭菌移液管。从制备样品匀液至样品接种完毕,全过程不得超过15 min 。

4、倒平皿前准备

开启无菌工作台,先紫外线灭菌,30min后再进入。(研钵用酒精擦拭后,放在无菌室进行紫外灭菌)

5、倒平皿

倒入的培养液要到培养皿高度三分之一的位置,至少倒10个培养皿。倒完培养皿后,将其放在一旁等待冷却凝固。

6、接种

根据对样品污染状况的估计,选择3 个适宜稀释度的样品匀液,根据腐乳的污染情况估计我们选用了10-11、10-12、10-13 三个稀释度,进行10倍稀释时,吸取0.5 mL 样品匀液于无菌培养皿内,每个稀释度做了3个平皿。同时,留1个培养皿作空白对照。(注:每个稀释度做三个培养皿是为了降低误差,使结果更准确,因为我们用的是市售型腐乳,污染情况较严重,所以选用了这三个稀释度)

7、渗透

将接种后的培养皿放置30min,使样液渗入培养基。

8 、倒置培养

将渗透好了的培养基翻过来,放在温度为36±1℃的恒温箱中培养 24±1h。

9、实验结果

选取菌落数在30 CFU~300CFU 之间,无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数,低于30 CFU 的平板记录具体菌落数,大于300 CFU 的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。

二、腐乳中霉菌含量的检测

1、实验材料和设备

研钵1个,100mL量筒1个,滴定管1支,1 mL移液管6支,试管5支,玻璃棒1根,培养皿12个,500mL烧杯一个,涂布器1个,洗耳球1个,药匙1个,试管架1个,酒精灯1盏,电磁炉1个,天平1台,pH试纸,250mL锥形瓶3个,标签纸1张,纱布、棉花、线、报纸若干,高压蒸汽灭菌锅,恒温培养箱,超净工作台。

察氏培养基的配制

配方:硝酸钠3g 磷酸氢二钾1g MgSO4·7H2O 0.5g 氯化钾0.5g 硫酸亚铁0.01g 蔗糖30g 琼脂20g 蒸馏水1000mL

步骤:称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→倒平皿→接种→培养

3、4、5跟细菌含量的检测步骤一样

6、接种

根据对样品污染状况的估计,选择3 个适宜稀释度的样品匀液,因为霉菌的菌落较大,所以我们选择了10-11、10-12、10-13 三个稀释度,进行10倍稀释时,吸取0.5 mL 样品匀液于无菌培养皿内,每个稀释度做了3个平皿。同时,留1个培养皿作空白对照。(注:每个稀释度做三个培养皿是为了降低误差,使结果更准确)

7、渗透

将接种后的培养皿放置30min,使样液渗入培养基。

8 、倒置培养

将渗透好了的培养基翻过来,放在温度为27±1℃的恒温箱中培养5天。

9、实验记录

24小时记录一次数据,连续5天。

10、实验结果

1、实验材料和设备

研钵1个,100mL量筒1个,滴定管1支,1 mL移液管5支,试管5支,玻璃棒1根,培养皿12个,500mL烧杯一个,涂布器1个,洗耳球1个,药匙1个,试管架1个,酒精灯1盏,电磁炉1个,天平1台,pH试纸,250mL锥形瓶3个,铁架台1个,漏斗1个,标签纸1张,纱布、棉花、线、报纸若干,高压蒸汽灭菌锅,恒温培养箱,超净工作台。

2、马铃薯葡萄糖琼脂培养基的配制

配方:马铃薯200g 葡萄糖20g 琼脂15~20g 蒸馏水1000ml 自然pH 步骤:先洗净去皮,再称取200g马铃薯切成小块,加水煮烂(煮沸20—30分钟,能被玻璃棒戳破即可),用纱布过滤,加热,再据实际实验需要加琼脂,继续加热搅拌混匀,待琼脂溶解完后,加入葡萄糖,搅拌均匀,稍冷却后再补足水分至1000ml,分装锥形瓶,加塞、包扎,(121℃)灭菌20分钟左右后取出。

3、4、5跟细菌含量的检测步骤一样

6、接种

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