微生物实验报告

微生物实验报告

实习报告

实习名称食品微生物检验实习

系别生物与化学工程系

年级专业12级食品科学与工程专业学生姓名某某某

指导老师王老师、黄老师、李老师

X X 学校

2015 年1 月13日

1、实习时间、地点和实习单位

2、实习目的

通过食品微生物检验实习，掌握培养基的配制、包扎及灭菌；正确采集样品并对样

品进行稀释、滴加、培养；菌落观察、鉴定与计数；数据处理、分析等方面内容，并结

合生产和科研技术的发展，开设较高的综合性实验为主，运用综合的实验方、实验手段

对我们的知识、能力、素质形成综合的培养。为我们今后从事各种与食品相关的工作打

下基础。

3、实习过程概述

3.1参加认识实习动员大会

2014年11月8日上午由黄大川、王瑶琼2位老师召开了微生物实习动员大会。会

上，老师们说明了实习目的、内容、时间、地点，着重强调了此次实习的自主性和和注

意事项，另外还应遵守实验室的规章制度，保持高度的安全意识。

3.2实习内容

一、腐乳中细菌含量的检测

1、实验材料和设备

1ml移液管 5支,1000ml、500ml、100ml的烧杯各1、1、2个,250ml锥形瓶 3个，

100ml量筒1个，研钵1个,滴定管1支,试管5支,试管架1个，玻璃棒1根,培养皿 12

个,涂布器1个,洗耳球1个,酒精灯1盏,电磁炉1个，天平1台,药匙1个，pH试纸，

标签纸1张，纱布、棉花、线、报纸若干，高压蒸汽灭菌锅，恒温培养箱，超净工作台。

2、牛肉膏蛋白胨培养基的配制

配方：牛肉膏3g 蛋白胨10g NaCl 5g 琼脂15—20g 水1000ml pH 7．4—7．6

步骤：称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→倒平皿→接种→培

养

3、样品的稀释

①预处理：在天平上称取25g 样品，置于研钵中，然后加50ml无菌水在无菌室里研磨，磨碎后再加175mL 无菌水于研钵中，最后转至250ml锥形瓶中，充分振摇后，制成1:10 的样液。

②十倍稀释：

用1mL 灭菌移液管吸取1:10 样液1mL ，沿管壁缓缓注人盛有9 mL无菌水的灭菌试管中（注意吸管不要触及稀释液面），充分振荡试管使其混合均匀，制成1:100 的样品匀液。接着用另一支吸管按上述操作重复，依次制成10倍梯度系列的样品匀液。每稀释1次，换用1支1mL灭菌移液管。从制备样品匀液至样品接种完毕，全过程不得超过15 min 。

4、倒平皿前准备

开启无菌工作台，先紫外线灭菌，30min后再进入。（研钵用酒精擦拭后，放在无菌室进行紫外灭菌）

5、倒平皿

倒入的培养液要到培养皿高度三分之一的位置，至少倒10个培养皿。倒完培养皿后，将其放在一旁等待冷却凝固。

6、接种

根据对样品污染状况的估计，选择3 个适宜稀释度的样品匀液，根据腐乳的污染情况估计我们选用了10-11、10-12、10-13 三个稀释度，进行10倍稀释时，吸取0.5 mL 样品匀液于无菌培养皿内，每个稀释度做了3个平皿。同时，留1个培养皿作空白对照。（注：每个稀释度做三个培养皿是为了降低误差，使结果更准确，因为我们用的是市售型腐乳，污染情况较严重，所以选用了这三个稀释度）

7、渗透

将接种后的培养皿放置30min，使样液渗入培养基。

8 、倒置培养

将渗透好了的培养基翻过来，放在温度为36±1℃的恒温箱中培养 24±1h。

9、实验结果

选取菌落数在30 CFU～300CFU 之间，无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数，低于30 CFU 的平板记录具体菌落数，大于300 CFU 的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。

二、腐乳中霉菌含量的检测

1、实验材料和设备

研钵1个，100mL量筒1个，滴定管1支，1 mL移液管6支，试管5支，玻璃棒1根，培养皿12个，500mL烧杯一个，涂布器1个，洗耳球1个，药匙1个，试管架1个，酒精灯1盏，电磁炉1个，天平1台，pH试纸，250mL锥形瓶3个，标签纸1张，纱布、棉花、线、报纸若干，高压蒸汽灭菌锅，恒温培养箱，超净工作台。

察氏培养基的配制

配方：硝酸钠3g 磷酸氢二钾1g MgSO4·7H2O 0.5g 氯化钾0.5g 硫酸亚铁0.01g 蔗糖30g 琼脂20g 蒸馏水1000mL

步骤：称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→倒平皿→接种→培养

3、4、5跟细菌含量的检测步骤一样

6、接种

根据对样品污染状况的估计，选择3 个适宜稀释度的样品匀液，因为霉菌的菌落较大，所以我们选择了10-11、10-12、10-13 三个稀释度，进行10倍稀释时，吸取0.5 mL 样品匀液于无菌培养皿内，每个稀释度做了3个平皿。同时，留1个培养皿作空白对照。（注：每个稀释度做三个培养皿是为了降低误差，使结果更准确）

7、渗透

将接种后的培养皿放置30min，使样液渗入培养基。

8 、倒置培养

将渗透好了的培养基翻过来，放在温度为27±1℃的恒温箱中培养5天。

9、实验记录

24小时记录一次数据，连续5天。

10、实验结果

1、实验材料和设备

研钵1个，100mL量筒1个，滴定管1支，1 mL移液管5支，试管5支，玻璃棒1根，培养皿12个，500mL烧杯一个，涂布器1个，洗耳球1个，药匙1个，试管架1个，酒精灯1盏，电磁炉1个，天平1台，pH试纸，250mL锥形瓶3个，铁架台1个，漏斗1个，标签纸1张，纱布、棉花、线、报纸若干，高压蒸汽灭菌锅，恒温培养箱，超净工作台。

2、马铃薯葡萄糖琼脂培养基的配制

配方：马铃薯200g 葡萄糖20g 琼脂15~20g 蒸馏水1000ml 自然pH 步骤：先洗净去皮,再称取200g马铃薯切成小块，加水煮烂（煮沸20—30分钟，能被玻璃棒戳破即可），用纱布过滤，加热，再据实际实验需要加琼脂，继续加热搅拌混匀，待琼脂溶解完后，加入葡萄糖，搅拌均匀，稍冷却后再补足水分至1000ml，分装锥形瓶，加塞、包扎，（121℃）灭菌20分钟左右后取出。

3、4、5跟细菌含量的检测步骤一样

6、接种