细胞融合技术学案

第三节细胞融合技术

课前预习（10分钟）凡事预则立，不预则废。

一、学习目标

1、理解和掌握细胞融合的原理、过程和方法。

2、理解和掌握单克隆抗体制备的过程和应用，植物体细胞杂交在育种中的应用。

3、比较动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同。

德育目标：关注现代生物科技的发展，初步培养学生勇于探索，不断创新的精神和合作精神。

二、自主学习：

一、植物体细胞杂交技术

1、概念：是将不同种植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培养成新的植物体的技术。

2、理论基础（原理）：

3、过程（以白菜细胞和甘蓝细胞杂交得到白菜---甘蓝为例，试用文字和箭头描述过程）

4、注意

（1）去除细胞壁的方法为：利用和去除植物细胞壁。（2）诱导融合的方法：①物理法包括、、等。

②化学法一般是用（PEG）作为诱导剂。

（3）原生质体融合后的细胞是杂种细胞，利用植物组织培养技术把杂种细胞培养成杂种植株。（4）融合完成的标志：杂种细胞再生出细胞壁；

5、意义：。

二、动物细胞融合与单克隆抗体

1、动物细胞融合

（1）概念：动物细胞融合也称，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来细胞遗传信息的单核细胞，称为。（2）过程：动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有、、等。（3）动物细胞融合的意义：克服了远缘杂交的不亲和性，成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段。

2、单克隆抗体

（1）抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。

（2）单克隆抗体的制备过程（试用文字和箭头描述过程）课堂互动学习

一、植物体细胞杂交与作物育种

1、为什么要去除细胞壁？细胞壁如何去除？

2、原生质层如何融合？融合的基础是什么？诱导融合的方法有哪些？

3、杂交完成的标志是什么？

4、最后通过什么手段得到新个体？

学生活动：尝试写出白菜—甘蓝的培育过程

5、植物体细胞杂交的原理是：

二、动物细胞融合与单克隆抗体的制备

1、诱导动物细胞融合的方法有哪些？

2、动物细胞融合的原理是：

3、单克隆抗体的制备

（1）概念：

（2）选取的细胞：

B淋巴细胞的特点：_____________ ___，缺点：________ _________ 骨髓瘤细胞的特点：

（3）单克隆抗体的制备过程：

第一步：将注射到小鼠体内进行免疫；

第二步：从该小鼠脾脏中获得能够产生抗体的细胞，与小鼠的

细胞用或聚乙二醇的诱导下融合；

思考：若只考虑两种细胞的融合情况，此时，培养液中会有哪几种细胞？

第三步：在特定的培养基中，筛选出细胞；

原因：在选择培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有才能生长

第四步：培养杂交瘤细胞，从中挑选出的细胞群，继续培养；

第五步：将该杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或注射到小鼠内增殖，然后再分离纯化单克隆抗体；

提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。

思考：在这两种方法中，后者的优点是什么？

（4）特点：

杂交瘤细胞的特点：具备双亲的遗传物质，不仅能产生____________，还能__________。

单克隆抗体的优点：。

（5）单克隆抗体的应用

①诊断疾病：诊断和定位诊断．

②用于治疗疾病和运载药物：运用制成＂生物导弹＂．

总结反思：写出植物细胞融合和动物细胞融合一般过程。

巩固提高

12．右图为细胞融合的简略过程，请据图回答：

（1）若A、B是植物细胞，在细胞融合前可用纤维素酶除去细胞

壁得到；D杂种细胞能培育成杂种植株，说明植物

细胞具有。

（2）不同种植物之间由于存在而不能进行有性杂交，

但植物体细胞杂交技术的成功为培育种间或属间杂种植株提供了

新的思路。

（3）动物细胞工程的重要目的之一是制备单克隆抗体。若A细胞为瘤细胞、B细胞为B淋巴

细胞，则促融后能形成种融合细胞（只考虑细胞两两融合），还应从中筛选出既能

大量增殖又能产生的杂交瘤细胞。与传统从血清提取的抗体相比，单克隆

抗体的优点是。（4）制备单克隆抗体的过程中

涉及到的细胞工程技术有。

3、图（2）是植物细胞杂交过程示意图，请据图回答：

（1）植物体细胞杂交的

第①步是去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体。目前此步骤最常用的方法是酶解法，也就是

在温和的条件下用

（2）②过程的发生，必须进行

人工诱导。人工诱导原生质体融

合的物理方法是：利用

等（至少写

出两种）促使原质体融合；化学方

法是：用等试剂作为诱

导剂诱导融合。动物细胞融合与植

物原生质体融合的基本原理相同，

诱导融合的方法类似，动物细胞的

融合还常用到作为诱导剂。

（3）③表示融合后的原生质体再产生出新的细胞壁，新细胞壁的产生与细胞内 (细胞

器)有密切关系。

（4）在④⑤过程中,细胞分裂的主要方式是有丝分裂,此种分裂方式的重要意义(或称特征)是

________________________________。

（5）植物体细胞杂交在育种工作中具有广泛的应用价值，其突出的优点是可以

，目前，动物细胞融合技术最重要的用途是。

4、如图(4)表示用单克隆抗体制备来针对性治疗肿瘤的示意图。据图回答：

（1）通过①过程得到B淋巴细胞，从小白鼠体内分离之前,应对小白鼠进行的处理

来，就成为威力强大的抗体“导弹”。提高了杀灭肿瘤细胞的针对性，这是利用了

这一特点。从理论上分析，这种治疗疾病的方法是完全安全的吗？为什么？