内标法与外标法若干问题讨论
白酒中乙酸乙酯内标法与外标法的比较报告
白酒中乙酸乙酯内标法与外标法的比较报告白酒是我国传统的酿造酒，白酒的质量评价是非常重要的。
而乙酸乙酯内标法和外标法是当前常用的白酒质量评价方法。
两种方法在白酒的质量评价中都有着各自的优点和不足，下面将就这两种方法进行比较分析。
乙酸乙酯内标法是指以乙酸乙酯为内标物质，通过加标回收法进行测定酒中其他化合物的含量。
具体的操作步骤为：首先将一定量的乙酸乙酯加入待测的样品中，随后进入萃取过程，通过混合离心等步骤将乙酸乙酯和酒中的物质分离开来，然后通过色谱分析仪进行检测，最后根据加标量和回收量等信息计算出酒中其他物质的含量。
乙酸乙酯内标法的优点在于可以消除测量中误差及仪器的误差，还可以减少样品预处理的步骤，缩短实验周期，简化操作流程。
但是需要注意的是，在进行加标回收法的过程中，样品的混合、离心和高温操作等可能会影响到有机化合物的蒸发是否完全，因此有时还需要进行多次重复测定，增加了测量的难度和时间成本。
外标法是指使用一种已知浓度的标准品来测定待测样品中某种化合物的浓度的方法。
具体操作步骤为：首先将一定量的标准品加入到待测样品中，然后进行萃取和分离处理，最后使用测量仪器对样品进行检测，计算出待测化合物的含量。
这种方法的优点在于测量简单、易于操作、准确性高、测量结果稳定。
但是在操作过程中可能会存在误差，因为标准品的浓度可能和待测样品中的化合物的浓度不一致，从而影响测量结果的准确性。
需要特别注意的是，在使用外标法进行测量时，标准品的选取非常重要，必须要对待测化合物有特异性选择。
综上，乙酸乙酯内标法和外标法都是白酒质量评价中比较有效的方法，两种方法都有其优势和不足，具体使用方法要根据实际情况进行选择。
在使用时，需要注意各种误差的影响，从而保证测量结果的准确性。
今后，还需要不断完善和发展各种新的白酒质量评价方法，提高白酒行业的质量水平。
对于白酒中乙酸乙酯内标法和外标法的比较分析，需要列出一些相应的数据进行分析。
下面就为大家列出一些可能涉及到的数据，并进行相应的分析解读。
试简述内标法外标法和标准曲线法的区别与联系
试简述内标法外标法和标准曲线法的区别与联系内标法、外标法和标准曲线法都是常用的分析化学方法，用于定量分析样品中所含物质的浓度。
本文将分别介绍这三种方法，包括其基本原理、优缺点、适用范围和应用注意事项，并进一步比较它们之间的异同点，以帮助读者更好地理解这些方法。
一、内标法1.内标法可以消除不同样品之间的误差。
每个样品都添加相同浓度的内标物质，可以保证分析仪器响应的稳定性和可靠性，从而提高分析结果的精度和准确性。
2.内标法适用于分析系统不稳定、标准曲线多次测定误差较大或样品矩阵干扰较强等情况下。
通过引入内标物质，可以抵消这些误差和干扰因素，从而获得更准确的分析结果。
3.内标法在实际分析中应用较为广泛，包括食品、环境、药品等领域。
内标物质的选取应注意其在样品提取、分离、检测等过程中不会受到干扰和损失。
二、外标法1.外标法适用于分析系统稳定，且标准曲线经过多次测定和优化的情况。
外标法要求标准曲线的线性范围宽，以及样品矩阵中不含有干扰物质，否则会影响测定结果的准确性。
2.优点是操作简单，结果直观，且适用于多种分析仪器。
外标法需要预先制备标准溶液，因此需要时间和精力投入，并且标准溶液的制备和保存需注意一定的技巧。
3.外标法通常用于分析水样、血清等样品中的常规成分，例如微量元素、蛋白质等。
三、标准曲线法2.标准曲线法的优点是可以定量分析多种成分，并且适用于多种分析仪器。
标准曲线法需要对标准曲线进行建立、优化和验证，因此需要投入较多的时间和精力。
3.标准曲线法适用于定量分析各种样品中的成分或物质，包括食品、环境、药品、化妆品等。
标准曲线法的建立过程需要谨慎，尤其要注意质量控制和实验总体性能验证。
总结比较以上三种定量分析方法各有其特点，选用何种方法应根据实际情况而定。
实际应用中，常常选择标准曲线法和内标法相结合的模式，以提高定量分析结果的精度和准确性，并进一步检验和确保实验结果的正确性，如常用的加标法分析。
标准曲线法和外标法均应为线性关系，对于标准曲线法，通常需要至少5个或以上的标准浓度级别和与之相对应的响应信号结果，将数据进行回归拟合，从而建立标准曲线方程，并验证其可靠性和准确性。
[讨论]内标法与外标法的应用
![[讨论]内标法与外标法的应用](https://img.taocdn.com/s3/m/1ced4a2b366baf1ffc4ffe4733687e21af45ff64.png)
[讨论]内标法与外标法的应⽤[讨论]内标法与外标法的应⽤内标法：选择适当的物质作为内标物质，定量加⼊被测样品中，跟据被测组分和内标物质的峰⾯积之⽐，乘以校正因⼦，对映内标物质加⼊量所进⾏含量测定⽅法。
内标法的优点：⾊谱条件对结果影响不⼤，准确度、精度较⾼；缺点：选择合适的内标物质⽐教困难。
外标法：⼜称标准曲线法，依照测量标准品所绘制的曲线来计量被测样品的含量的⽅法。
外标法的优点：简单，适和⼤量样品分析。
缺点：每次⾊谱条件很难相同，容易出现误差。
请问⼤家在做含量测定时依照什么原则来选定⽅法的？我们⼀般作体外药物分析时均采⽤外标法，体内药物分析，因提取步骤烦琐，都采⽤内标法进⾏校正，但如果仪器稳定、⽅法的重现性好，也可使⽤外标法，国外体内药物分析⽤外标法的也有不少，但本⼈认为最好使⽤内标法。
实际样品检测⽤外标法的更多。
原因：1.内标物难获得，特别是同位素标记的有相近⾏为的内标物；2.操作步骤多、计算烦琐如在新药报批中使⽤内标物，则需报送内标物的结构确证资料，在报⽣产的同时还要报送此内标物对照品。
所以现在连SDA的专家都不推荐使⽤内标法。
最初使⽤内标是因为进样器进样不准确，采⽤内标可以校正进样误差。
现在的HPLC⽤定量环进样准确度很⾼，加了内标有时候因为操作的误差反⽽降低准确度。
在药物质量检验中，如果是原料药，或者制剂的成份不很多，⽤外标法即可，不⼀定⾮要⽤内标法，⽽且现在越来越多的标准都放弃了⽤内标法。
对于体内药物分析，分析⽅法的误差反⽽不是那么的重要，⽽在样品处理的过程中引⼊的误差要引起⾜够的重视，所以，⼀般在处理过程中加⼊内标以校正误差。
这个时候，回收率的⾼低⼜不是绝对的要求很⾼，虽然要求绝对回收率在70%或者80%以上，但是，有时候低⼀些也⽆所谓，关键是回收率的稳定性，测定的重现性。
欢迎⾏家指点：）--------------------------------------------------------------------------------却是如此，我刚刚做完体内药物分析，内标法却是⽐较⿇烦--------------------------------------------------------------------------------个⼈认为体内分析应该⽤内标法，否则结果不准确。
[讨论]内标法与外标法的应用
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[讨论]内标法与外标法的应用内标法：选择适当的物质作为内标物质，定量加入被测样品中，跟据被测组分和内标物质的峰面积之比，乘以校正因子，对映内标物质加入量所进行含量测定方法。
内标法的优点：色谱条件对结果影响不大，准确度、精度较高；缺点：选择合适的内标物质比教困难。
外标法：又称标准曲线法，依照测量标准品所绘制的曲线来计量被测样品的含量的方法。
外标法的优点：简单，适和大量样品分析。
缺点：每次色谱条件很难相同，容易出现误差。
请问大家在做含量测定时依照什么原则来选定方法的？我们一般作体外药物分析时均采用外标法，体内药物分析，因提取步骤烦琐，都采用内标法进行校正，但如果仪器稳定、方法的重现性好，也可使用外标法，国外体内药物分析用外标法的也有不少，但本人认为最好使用内标法。
实际样品检测用外标法的更多。
原因：1.内标物难获得，特别是同位素标记的有相近行为的内标物；2.操作步骤多、计算烦琐如在新药报批中使用内标物，则需报送内标物的结构确证资料，在报生产的同时还要报送此内标物对照品。
所以现在连SDA的专家都不推荐使用内标法。
最初使用内标是因为进样器进样不准确，采用内标可以校正进样误差。
现在的HPLC用定量环进样准确度很高，加了内标有时候因为操作的误差反而降低准确度。
在药物质量检验中，如果是原料药，或者制剂的成份不很多，用外标法即可，不一定非要用内标法，而且现在越来越多的标准都放弃了用内标法。
对于体内药物分析，分析方法的误差反而不是那么的重要，而在样品处理的过程中引入的误差要引起足够的重视，所以，一般在处理过程中加入内标以校正误差。
这个时候，回收率的高低又不是绝对的要求很高，虽然要求绝对回收率在70%或者80%以上，但是，有时候低一些也无所谓，关键是回收率的稳定性，测定的重现性。
欢迎行家指点：）--------------------------------------------------------------------------------却是如此，我刚刚做完体内药物分析，内标法却是比较麻烦--------------------------------------------------------------------------------个人认为体内分析应该用内标法，否则结果不准确。
关于内、外标法与其相关的知识
关于内、外标法与其相关的知识外标法：用待测组分的纯品作对比物质，以对比物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法称为外标法。
内标法：将肯定量的纯物质作内标物，加入到精确称量的试样中，依据被测试样和内标物的质量比及其相应的色谱峰面积之比，来计算被测组分的含量。
※选择内标物有4种要求哦！采纳内标法定量时，内标物的选择是一项非常重要的工作。
抱负地说，内标物应当是一种能得到纯样的己知化合物，这样它能以精确、已知的量加到样品中去，它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能全都的物理化学性质(如，化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征，最好是被分析物质的一种同系物。
当然，在色谱分析条件下，内标物必需能与样品中各组分充分分别。
需要指出的是，在少数状况下，分析人员可能比较关怀化台物在一个简单过程中所得到的回收率。
此时，他可以使用一种在此种过程中很简单被完全回收的化台物作内标，来测定感爱好化合物的百分回收率，而不必遵循以上所说的选择原则。
概括起来有以下四点：1.内标物应是该试样中不存在的纯物质；2.它必需完全溶于试样中，并与试样中各组分的色谱峰能完全分别；3.加入内标物的量应接近于被测组分；4.色谱峰的位置应与被测组分的色谱峰的位置相近，或在几个被测组分色谱峰中间。
内标法特点：优点：测定的结果较为精确，由于通过测量内标物及被测组分的峰面积的相对值来进行计算的，因而在肯定程度上消退了操作条件等的变化所引起的误差。
缺点：操作程序较为麻烦，每次分析时内标物和试样都要精确称量，有时查找合适的内标物也有困难。
外标法特点：优点：简便；缺点：进样量要求非常精确，要严格掌握在与标准物相同的操作条件下进行，否则造成分析误差，得不到精确的测量结果；Q1：定量分析中怎样选择内标法或外标法？A1：选与欲测组分相近但能完全分别组分做内标物（当然是样品中没有的组分），然后配制欲测组分和内标物的混合标准溶液，进样得相对校正因子。
外标法与内标法的比较
外标法与内标法的比较
外标法和内标法是分析化学中常用的两种定量方法，用于测定分析物的含量。
在这两种方法中，外标法是最常见的一种，它以已知浓度的化合物作为参照物，进行实验分析来确定分析物的浓度。
而内标法是以已知浓度的化合物作为内标，来校正样品中可能存在的误差和变化，从而得到更准确和稳定的结果。
在外标法和内标法之间，存在一些区别和优缺点，下面我们来进行比较。
1. 经济性
外标法通常需要准备一定数量的参照物，使其浓度完全符合分析物，这需要大量的时间和精力。
另外，多次使用外标物可能会导致其浓度变化，这需要定期重新校准。
因此，外标法的经济性较低。
内标法则是在分析物的浓度变化下仍然能够保持稳定和准确，只需要用一定量的内标物即可，且很少需要更换内标物，故其经济性较高。
2. 灵敏度
外标法在分析物与参照物的浓度不一致时可能出现灵敏度不足的情况，需要调整比例才能获得准确结果。
而内标法采用的是与分析物相同的浓度，因此它的灵敏度更高。
3. 稳定性
外标法的稳定性仅受校准参照物浓度的影响，因此如果校准方法不正确，则可能导致误差。
内标法则是采用与分析物相同的内标物来消除局部误差，从而获得更稳定和准确的测量结果。
4. 处理时间
外标法需要准备参照物并进行校准，这需要多次操作。
内标法只需要在样品中添加内标物，稍微混合即可，节省时间。
在分析化学应用中，通常采用外标法和内标法的组合，来获得更准确和稳定的测量结果。
当使用外标法时，内标法可以用来纠正样品的变化，从而更好地验证结果的准确性。
相反，当使用内标法时，外标法可以作为验证方法，确保精确的分析结果。
气相色谱定量分析中内标法、外标法的比较及选择(精)
内标法：
内标法是一种间接或相对的校准方法。
在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。
使用内标法时，在样品中加入一定量的标准物质，它可被色谱拄所分离，又不受试样中其它组分峰的干扰，只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值，即可求出待测组分在样品中的百分含量。
采用内标法定量时，内标物的选择是一项十分重要的工作。
理想地说，内标物应当是一个能得到纯样的己知化合物，这样它能以准确、已知的量加到样品中去，它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等、色谱行为和响应特征，最好是被分析物质的一个同系物。
外标法
外标法不是把标准物质加入到被测样品中，而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定，把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。
外标物与被测组分同为一种物质但要求它有一定的纯度，分析时外标物的浓度应与被测物浓度相接近，以利于定量分析的准确性。
外标法在操作和计算上可分为校正曲线法和用校正因子求算法。
校正曲线法是用已知不同含量的标样系列等量进样分析，然后做出响应信号与含量之间的关系曲线，也就是校正曲线。
定量分析样品时，在测校正曲线相同条件下进同等样量的等测样品，从色谱图上测出峰高或峰面积，在从校正曲线查出样品的含量。
校正因子求算法时将标样多次分析后得到的响应信号与其含量求出它的绝对校正因子，再根据公式求出待测样品中的含量。
内标法及外标法方法原理优缺点
内标法及外标法方法原理优缺点内标法（internal standard method）和外标法（external standard method）都是常见的分析方法，用于定量分析中。
一、内标法内标法是指在分析样品中加入指定量的内标物质，通过该内标物质与目标分析物相对稳定的对比关系来进行定量分析。
内标法常见的应用场景包括药物检测、环境监测、食品安全等。
内标法的具体操作步骤如下：1.准备内标物质：根据目标分析物的性质选择一个与其化学性质相近的内标物质，并准备好内标物质的标准溶液。
2.加入内标物质：将内标物质的标准溶液与待分析样品混合，使得内标物质和目标分析物共存于同一体系中。
3.分析样品：将加入内标物质的样品进行分析，得到目标分析物的响应信号和内标物质的响应信号。
4.计算：通过对比目标分析物的信号和内标物质的信号，计算出目标分析物的含量。
内标法的优点：1.消除误差：内标法可以减小仪器和环境的非特异性因素对分析结果的影响，从而减小误差。
2.稳定性高：内标物质的选择通常是与目标分析物性质相似，并且具有稳定性较高的物质，可以增加分析结果的准确性和重现性。
3.方便快捷：内标法的操作相对简单，适用于高通量的样品分析。
内标法的缺点1.内标物质的选择：选择合适的内标物质需要对目标分析物的化学性质有一定的了解，有时可能会遇到难以找到合适的内标物质的情况。
2.干扰因素：如果样品中存在与内标物质相似的物质或者存在与目标分析物相互作用的物质，可能会干扰分析结果。
二、外标法外标法是指将待测样品与已知浓度、纯度的外部参考物质进行比对，通过浓度差异来进行定量分析。
外标法常见的应用场景包括药物分析、生物学研究等。
外标法的具体操作步骤如下：1.准备外标物质：选择一个与目标分析物具有相似物理化学性质的外标物质，并准备好外标物质的标准溶液。
2.建立标准曲线：根据外标物质的标准溶液的不同浓度，分别测量其响应信号，并绘制标准曲线。
3.测量样品：将样品进行测量，得到目标分析物的响应信号。
气相色谱中的内标法与外标法
气相色谱中的内标法与外标法公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N]气相色谱中的内标法与外标法内标法与外标法一、内标法什么叫内标法怎样选择内标物内标法是一种间接或相对的校准方法。
在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。
内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。
使用内标法时，在样品中加入一定量的标准物质，它可被色谱拄所分离，又不受试样中其它组分峰的干扰，只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值，即可求出待测组分在样品中的百分含量。
采用内标法定量时，内标物的选择是一项十分重要的工作。
理想地说，内标物应当是一个能得到纯样的己知化合物，这样它能以准确、已知的量加到样品中去，它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征，最好是被分析物质的一个同系物。
当然，在色谱分析条什下，内标物必须能与样品中各组分充分分离。
需要指出的是，在少数情况下，分析人员可能比较关心化台物在一个复杂过程中所得到的回收率，此时，他可以使用一种在这种过程中很容易被完全回收的化台物作内标，来测定感兴趣化合物的百分回收率，而不必遵循以上所说的选择原则。
在使用内标法定量时，有哪些因素会影响内标和被测组分的峰高或峰面积的比值影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的三类。
由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。
化学方面的因素包括：1、内标物在样品里混合不好；2、内标物和样品组分之间发生反应，3、内标物纯度可变等。
对于一个比较成熟的方法来说，色谱方面的问题发生的可能性更大一些，色谱上常见的一些问题(如渗漏)对绝对面积的影响比较大，对面积比的影响则要小一些，但如果绝对面积的变化已大到足以使面积比发生显着变化的程度，那么一定有某个重要的色谱问题存在，比如进样量改变太大，样品组分浓度和内标浓度之间有很大的差别，检测器非线性等。
外标法和内标法的相同点
外标法和内标法的相同点
外标法和内标法的相同点
外标法和内标法都是一种在生物样本中追踪或测量分子组成的方法。
这两种方法在基本特征上是相似的，因为它们都需要使用标记分子来增强或报告特定的分子。
首先，外标法和内标法都需要标记分子。
外标法通常使用一种叫做外标记的物质将某些分子标记上，以实现更高的灵敏度。
内标法则需要使用内标记将某些分子标记上，以检测该分子。
其次，外标法和内标法都需要使用大量生化反应。
外标法需要检测某些外标记的分子，以确定它们的存在，而内标法则需要检测内标记的分子，以找出与特定分子相关的生物样本中的分子。
最后，外标法和内标法都可以用来监测特定分子在生物样本中的存在。
通过检测外标记或内标记，可以确定特定分子在样本中的存在情况，从而推断生物样本中特定分子的数量和表达水平。
总之，外标法和内标法都是一种测量或追踪生物样本中分子组成的方法，它们都需要使用标记分子来增强或报告特定的分子，并都需要使用大量生化反应，以监测特定分子在样本中的存在情况。
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外标法与内标法的比较
外标法仪器分析常用的方法之一，是比较法的一种。
与内标法相比，外标法不是把标准物质加入到被测样品中，而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定，把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。
外标物与被测组分同为一种物质但要求它有一定的纯度，分析时外标物的浓度应与被测物浓度相接近，以利于定量分析的准确性。
外标法在操作和计算上可分为校正曲线法和用校正因子求算法。
校正曲线法是用已知不同含量的标样系列等量进样分析，然后做出响应信号与含量之间的关系曲线，也就是校正曲线。
定量分析样品时，在测校正曲线相同条件下进同等样量的等测样品，从色谱图上测出峰高或峰面积，在从校正曲线查出样品的含量。
校正因子求算法时将标样多次分析后得到的响应信号与其含量求出它的绝对校正因子，再根据公式求出待测样品中的含量。
内标法是将一定量的纯物质作内标物，加入到准确称量的试样中，根据被测试样和内标物的质量比及其相应的色谱峰面积之比，来计算被测组分的含量。
选择内标物有4个要求：1.内标物应是该试样中不存在的纯物质；2.它必须完全溶于试样中，并与试样中各组分的色谱峰能完全分离；3.加入内标物的量应接近于被测组分；4.色谱峰的位置应与被测组分的色谱峰的位置相近，或在几个被测组分色谱峰中间。
内标法的优点是测定的结果较为准确，由于通过测量内标物及被测组分的峰面积的相对值来进行计算的，因而在一定程度上消除了操作条件等的变化所引起的误差。
内标法的缺点是操作程序较为麻烦，每次分析时内标物和试样都要准确称量，有时寻找合适的内标物也有困难。
外标法简便，但进样量要求十分准确，要严格控制在与标准物相同的操作条件下进行，否则造成分析误差，得不到准确的测量结果。
内标与外标都是定量的一种方法而已，至于哪一种方法好与不好不能一概而论，做不同的分析，面对着不同的要求，再加上分析成本分析效率等等问题，我想简单而有效进行定量分析来满足要求才是最重要的。
1、以前做过很多医药、农药中间体的芳香族卤代化合物的常量定量分析，没有自动进样器，用外标法定量，确实重现性与稳定性非常差，结果经常受到搞合成同事的质疑。
内标法与外标法
内标法与外标法一、内标法什么叫内标法?怎样选择内标物?内标法是一种间接或相对的校准方法。
在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。
内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。
使用内标法时，在样品中加入一定量的标准物质，它可被色谱拄所分离，又不受试样中其它组分峰的干扰，只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值，即可求出待测组分在样品中的百分含量。
采用内标法定量时，内标物的选择是一项十分重要的工作。
理想地说，内标物应当是一个能得到纯样的己知化合物，这样它能以准确、已知的量加到样品中去，它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征，最好是被分析物质的一个同系物。
当然，在色谱分析条什下，内标物必须能与样品中各组分充分分离。
需要指出的是，在少数情况下，分析人员可能比较关心化台物在一个复杂过程中所得到的回收率，此时，他可以使用一种在这种过程中很容易被完全回收的化台物作内标，来测定感兴趣化合物的百分回收率，而不必遵循以上所说的选择原则。
在使用内标法定量时，有哪些因素会影响内标和被测组分的峰高或峰面积的比值?影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的三类。
由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。
化学方面的因素包括：1、内标物在样品里混合不好；2、内标物和样品组分之间发生反应，3、内标物纯度可变等。
对于一个比较成熟的方法来说，色谱方面的问题发生的可能性更大一些，色谱上常见的一些问题(如渗漏)对绝对面积的影响比较大，对面积比的影响则要小一些，但如果绝对面积的变化已大到足以使面积比发生显著变化的程度，那么一定有某个重要的色谱问题存在，比如进样量改变太大，样品组分浓度和内标浓度之间有很大的差别，检测器非线性等。
外标法和内标法的异同点
外标法和内标法的异同点
一、外标法与内标法的定义
外标法：是指在样本中放置一定数量的特殊标记，这些标记外部与样本无关，可以用来作为特征标记来识别样本，可以提高识别的精确度。
内标法：指样本本身制作成特定的标记，作为识别样本的特征，可以提高识别的精确度。
二、外标法与内标法的异同
1、不同点：
（1）外标法是指在样本外部放置的特殊标记，而内标法是指样本本身制作的特定标记。
（2）外标法可以选择不同形状的特殊标记，例如标签、条形码等，而内标法只能按照样本的特性来制作特定的标记。
（3）外标法制作方便，只需要将特殊标记置放在样本上就可以识别，而内标法需要样本本身有特殊性能的材料才可以制作出特定的标记。
2、相同点：
（1）外标法和内标法都可以提高识别精确度，两者的作用都是用来标记样本，确保样本的准确性。
（2）外标法和内标法都可以在样本中放置一定数量的特殊标记，作为特征标记来识别样本。
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气相色谱中的内标法或外标法
谈谈内标准品（内标物质）传统上在教科书中都会很模糊的告诉学生内标准的选择方式,例如说要选安定性好;与分析物性质要相近;在分析的基质中不能出现等,现在我对这些个" 选择方式"没有太大的兴趣,因为这个大家都知道,那现在就从另一个角度的来看看内标准品的选择还有哪些需要注意的.1. 只选一个内标准品?当然, 如果你的分析目标物就只有一个, 在正常的状况下,内标准"应该"也只会有一个才对! 但是如果你的分析是多成份的,那就必须十分小心地看待在一个分析方法内标准品的选择, 如果分析物的在层析图中是平均分布在各处, 那你就必须看看你的检测方法中是否有规定内标物与分析物之间的滞留时间差范围是多少,依此规定来选择内标,但是如果并没有规定,最好也是选择一个以上的内标来使用,因为即使化学性质不会差太多,但在沸点方面却会有满大的差异, 内标与分析物的沸点差异过大,在GC的注射口中就无法把因为discrimibation （分辨）所造成的误差校正回来.如果你的分析物是性质相差颇大的(例如说同时含有醇,酸...),那别怀疑一定是要使用一个以上的内标准品,如果多个物种再加上多成份,那就很复杂了. 最低的限度也要依照分析物的沸点高低来使用多个不同的内标准品. 在美国环保署的检验方法USEPA 8270C,是一个检测半挥发性的污染物的规范,前后列了不下一百种的分析物,就使用了六个不同的内标准品作为校正的依据,来照顾到各个不同沸点的分析物!!滥用药物分析大概是最严谨的了,即使是结构性质极相近的分析物,例如morphine和codein e,amphetamine和methamphetamine,在分析时为求准确,都是以各自的D同位素取代的标准品作为内标.2.基质中一定不能存在?这个问题当然是肯定的, 不然定量结果会很不稳定或者是很凄惨. 但是有些时候你根本不知道哪些东西在分析样品的基质中不会存在! 这时候怎么办? 找以往的文献看看别人是用甚么,这是一个方法, 但要注意的是文献不一定就是对的! 使用分析物的氢同位素(D)取代物,是最妥当的,但问题是价格昂贵,而且不是每一种分析物的氢同位素(D)取代物都有贩售,当然,如果本钱够,你可以去订购专门替你合成氢同位素(D)取代物. 如果要自己选, 那就必须了解一下分析物的成分了.以前曾经替人定性和定量过一阵子海水鱼中所含不饱和脂肪酸,这鱼中不饱和脂肪酸的碳数都是奇数(或是偶数, 我已经忘了), 所以内标就使用了几个偶数(或奇数)的不饱和脂肪酸, 像这种内标物绝不可能出现在分析物中,且性质十分相近,所以定量的结果一般误差都不会太大! 如果完全无法确定怎办? 有时候就是赌一赌啰.........举例来说:如果你的分析物结构中含有氯的话,就可以寻找一个化合物,而这个化合物是把其中的氯换成氟或溴,例如你可以使用2-氟联苯或2-溴联苯来当作分析2-氯联苯的内标准品. 以环境分析为例,通常在自然界中的氟及溴化物并不多, 在EPA的方法中,就经常把结构相似的氟及溴化物添加入样品中,来做为分析含氯化合物的QC样品.所以找氟及溴来取代氯原子的化合物来作为内标,基本上还算是很安全的.如果实在连上述转换一个基团的内标都找不到,那至少在选择时一定要找同一类的,分析酸就找酸当内标,分析醇就找醇当内标,直链接构分析物就不要找一个环状的化合物来当内标,分子量不要相差太大,这算是最基本的要求!!3.内标和分析物的滞留时间必须接近?这个说法原则上没错,因为如果滞留时间接近,它们的物理或者是化学的性质在某种程度上是接近的,所以有些分析方法会有这样的规定. 但在某些特殊的状况下却出了问题, 事实上还真的碰过, 结果在更换到第三个内标准品后, 它的RT远离分析物, 反而解决了定量误差的问题!! 这个案例以后有空在来聊聊.4.内标的浓度应该是多少?除了某些分析方法会规定必须加入多少浓度的内标外,其它的就只能靠分析员自己来决定了.以我为例, 通常会先决定一个分析方法的检量线范围,然后开始配制不同浓度的内标准品来注射入仪器中,分析完后选出一个大概是检量线最高浓度的波峰高度三分之二左右的浓度,作为该项分析的内标浓度. 这样的选择方式,可以兼顾到高低浓度的需要,一般来说,内标浓度过高除了会增加成本之外,对于低浓度的校正是会产某些程度的误差.在某些分析方法中会强制你使用内标法而不是外标法或线性回归的方式来定量,但是如果你的基质很复杂,一针打进仪器中,结果大大小小的出来一堆波峰, 这个时候如果你又不是使用质谱作为侦测器的话,就必须考虑加大内标准品的使用浓度, 来降低内标准品的可能发生的积分误差!!5.内标准怎么配制?一旦决定了添加内标准品的浓度,就可以开始配制分析时所用的内标准品标准溶液,相对于测试时的小量, 分析员必须先估计你在这一批的分析样品有多少, 然后计算整个分析需要添加入多少的量,例如说妳需要大概100mL的内标准品标准溶液,这时就必须再加多30%以上,一次就配好整个分析要用的量! 分装或者是整瓶放到-20度的冰箱中存放,免得做到一半发觉内标准品标准溶液用完了,再重新配制一次,如果你是分析的新手, 搞不好前后两次配得不一样浓度,那就会很凄惨了…..有些领域的分析,很重视这种内标波峰的积分值是否是有一定的再现性!!转自中国色谱网，作者：cation内标与外标法的详细计算及操作方式,在这里就不再叙述,不懂得网友就请自行去找找相关的文章.一个分析要选择内标或外标的方式来进行定量, 大概可以依照下述几个方面来讨论!1. 适合的内标准品?以前当学生时,老师给大家记忆很深的一句话:”采样员随便采, 那你就随便分析!”, 反正采得的样品也不具代表性, 随便分析也没关系!! 换到这里, 大概可以改成”如果分析方法的内标准品用得不适当, 那你就随便分析!”, 反正做了也不知道正不正确! 这种情形对于GC分析的特性而言, 是很可能发生的事. 对于一位以GC或GC/MS为定量仪器的分析员而言, 必须有下面的认识:a. 不适当的内标准品, 即使你操作处理无误, 有可能会把原本该得到的正确结果,校正成一个错误的结果.b. 不要迷信内标准法的定量结果一定会优于外标法或线性回归法!现在来看看一个我这边发生的一个实际例子:案例是由于实验室的某一项分析由于注射入GC时浓度的需要,在SPE净化后需要不同的最终体积, 一是1 mL另一是10 mL, 所以在这两组中基质的干扰,前者是后者的十倍, 这个测试是使用空白的样品在经过SPE净化后,调整体积至所需的体积,再添加入同样浓度的分析物标准品及内标准品A, 在正常的状况下,两者分析后所得的样品浓度应该是一样的!体积为1 mL的样品体积为10 mL的样品标准品(无基质干扰)内标峰面积54870.50 40705.10 42811.30分析物面积6224.90 6423.80 7164.38计算后浓度649.90 ug/g 865.08 ug/g 1000 ug/g两个样品很明显的都有受到基值得干扰, 1 mL体积的样品所遭受的影响当然大于体积为10mL的样品, 但是A内标准无法把这种干扰校正回来, 所以很明显的, A对于这个分析方法,并不是一个适合的内标准品!同样的方法, 在使用B内标准时会产生以下的数据:体积为1 mL的样品体积为10 mL的样品标准品(无基质干扰)内标峰面积66423.40 67859.40 73846.70分析物面积6224.92 6243.80 7194.38计算后浓度894.09 ug/g 859.15 ug/g 1000 ug/g两个样品的回收率都超过85%, 样品之间的误差也不大……….所以最后修改SOP, 把A换成了B !一个分析要选择内标或外标的方式来进行定量, 大概可以依照下述几个方面来讨论..................在前面我们讨论了第一个条件"适合的内标准品", 现在继续下去!!2. 要考虑分析物的组成平常的分析物一般大都是单一物质单一成分,也就是如农药中的Aldrine, 这东西当你在分析的时候,图谱上就仅仅会出现单一的一个波峰, 某些东西会有结构异构物, 如BHC会有alpha, beta, gamma及sigma等四种形式的BHC. 另外DDT也是有一系列异构物出现, 前述的那些分析物,再对内标物的选择和定量上, 都不会有太大的问题, 但是, 如果是多成分分析物时, 不仅仅是内标物的选择, 甚至于选用外标或内标法定量, 都必须特别的小心!!多氯联苯PCBs在环境或食品中都会有它的踪迹, PCBs是个多成分的东西, 商业化的PCBs 多以AC1242, AC1016, AC1232.......等代号来命名, 那些数字实际上是具有意义的, 每一种类的PCBs都是多成分的,也就是说如果你以DB-5或DB-1的管柱来分离, 都会获得数十支波峰, 至于多或少, 那就要看分析员的功力和仪器的设定了. 在这里我要讲的重点是, 如果今天是以内标法来分析PCBs, 所面临的问题是分析物成分不止一个, 甚至于多到三十多个.....如果你要选择内标准品,势必要选择避免会和分析物产生重迭但性质又不能差太多的内标准品, 在这个例子中, 并不见简单的事, 在USEPA 8082A的方法中对于Aroclor的分析采用外标法, 虽然外标法对于GC/ECD的检测十分不利. 但在同分析法中对PCBs Congeners( PCBs同源物,指的是单一成分PCB)即采取内标法定量, 内标准是使用十氯联苯或四氯间二甲苯.在某些方法中你可以看到PCBs Aroclor是以十氯联苯或四氯间二甲苯来作为内标准品定量, 之所以会使用这两种东西作为内标的原因是, 十氯联苯是PCBs中分子量最大, 滞留时间当然也是最久, 不会干扰到到其它PCBs的分析, 但在实际操作上会发现以十氯联苯作为内标准品, 对于分子量较大的AC1260或AC1254( AC1260及AC1254含氯数及分子量较接近十氯联苯) 会有较准确的结果, 但对于AC1232或1242则较差. 所以AC1242或AC1232的定量以四氯间二甲苯较适宜, 但是四氯间二甲苯的滞留时间不长( 在AC1232出管柱前面, 也因此不会干扰PCBs定量), 很容易受到基质中低分子量杂质的干扰, 这个干扰再没有前处理净化的状态下更严重, 所以类似多成分的分析物在分析研发阶段, 要采取内标或外标, 采取内标方法后要用甚么内标准品, 都必须要多方考量才可以...多成分的东西其实并不少, 例如农药中的T oxaphene和Chlordane等都是......内标法与外标法一、内标法什么叫内标法?怎样选择内标物?内标法是一种间接或相对的校准方法。
内标法及外标法方法原理优缺点
内标法及外标法方法原理优缺点内标法和外标法是在定量分析中常用的两种方法，具体原理、优缺点如下所述。
一、内标法内标法是利用已知浓度的内标物作为分析物的标准物质，通过测定分析物和内标物的响应差异来计算分析物的浓度。
内标法的原理基于分析物和内标物具有相似的化学性质和反应性，因此它们在样品制备、提取、分离和检测的过程中受到相似的干扰和损失。
内标法的步骤通常包括：1.选择合适的内标物：内标物应具有与分析物相似的性质，并且与分析物在样品制备和仪器测定中的处理方式相同。
2.添加内标物：将已知浓度的内标物添加到待测样品中。
3.测定响应：测定分析物和内标物的响应值，如峰面积或峰高度。
4.计算浓度：通过比较分析物和内标物的响应差异，使用标准曲线或者内标法公式来计算分析物的浓度。
内标法的优点包括：1.可以通过校正样品之间的差异来减少误差，提高定量精确度和准确性。
2.内标物可以用作样品制备效率的指标，帮助检测样品制备过程中的损失。
3.内标法对于复杂样品和多步骤分析特别有用，可减少干扰和修正分析物的误差。
4.可以使用相对较简单的标准曲线法或内标法公式，无需复杂的校正计算。
内标法的缺点包括：1.需要选择合适的内标物，其化学性质和反应性应与分析物尽可能相似。
2.内标物添加的量需要准确，过多或过少都会对测定结果产生影响。
3.内标物和分析物之间的动态响应差异可能导致一定的误差，尤其是在非线性范围内。
4.内标法的准确性和精确度严重依赖于仪器的精确度和重复性，以及样品制备和测定过程的一致性。
二、外标法外标法是将一系列已知浓度的标准物质直接与待测样品进行比较，由此推导出待测物质的浓度。
外标法的原理是测定待测物质和标准物质的响应差异，通过标准曲线或者比对法来计算待测物质的浓度。
外标法的步骤通常包括：1.准备标准曲线：制备一系列已知浓度的标准溶液，并测定其响应值，如峰面积或峰高度。
2.测定待测样品：将待测样品进行相同的分析条件下的测定，测定其响应值。
内标法和外标法的优缺点
内标法和外标法的优缺点内标法（Internal standard method）是将已知浓度的内标物添加到待测样品中进行分析。
内标物在样品中的浓度与待测化合物的浓度相互独立。
其优点如下：1.增加精确度：内标法可以在分析过程中考虑到样品制备和分析过程中的误差，从而减小误差的积累。
内标物能够补偿在制备中的体积误差，仪器校准中的误差等，提高结果的准确性。
2.提高精密度：内标物和待测化合物的特性应尽可能相似，例如化学性质、离子化能以及相对分子质量等。
因此，在样品制备和分析的整个过程中，内标物和待测化合物的特性基本相同。
这种相似性可以降低由样品制备和测量带来的随机误差，从而提高精密度。
3.消除分析仪器的漂移：内标法可以消除仪器中的漂移因素对结果产生的影响。
通过测量内标物和待测化合物的响应，可以确定仪器系统的漂移和变化。
这种方法可以使结果不依赖于仪器的变化，提高结果的可靠性。
然而，内标法也存在一些缺点：1.内标物的选择：选择合适的内标物是非常重要的。
内标物必须在样品中稳定，易提取和分离，并且与待测化合物的性质相似。
这需要经验和专业知识来选择适合的内标物。
2.降低灵敏度：内标物的加入将导致总体分析信号减少，因此可能导致灵敏度的降低。
为了提高灵敏度，需要在仪器性能允许的情况下使用较高的内标物浓度。
三、外标法（External standard method）是通过制备一系列已知浓度的标准溶液来进行分析。
待测样品和标准溶液分别进行测量，然后通过比较待测样品和标准曲线来确定待测化合物的浓度。
外标法的优点如下：1.直接测量：外标法不需要引入内标物，直接测量待测样品的响应信号。
这样可以减少样品制备和测量的步骤，简化实验过程。
2.灵敏度高：由于外标法不需要在样品中添加内标物，因此可以获得更高的信号强度和灵敏度。
这对于需要分析特别低浓度的化合物的样品非常重要。
3.自由选择标准曲线拟合方法：在外标法中，可以选择不同的拟合方法构建标准曲线，使之适应实际样品的特性。
内标法与外标法
内标法与外标法于2008年9月8日中心主任组织了大家对内标法与外标法进行了学习培训。
学习内容如下：一、内标法什么叫内标法?怎样选择内标物?内标法是一种间接或相对的校准方法。
在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。
内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。
使用内标法时，在样品中加入一定量的标准物质，它可被色谱拄所分离，又不受试样中其它组分峰的干扰，只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值，即可求出待测组分在样品中的百分含量。
采用内标法定量时，内标物的选择是一项十分重要的工作。
理想地说，内标物应当是一个能得到纯样的己知化合物，这样它能以准确、已知的量加到样品中去，它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征，最好是被分析物质的一个同系物。
当然，在色谱分析条什下，内标物必须能与样品中各组分充分分离。
需要指出的是，在少数情况下，分析人员可能比较关心化台物在一个复杂过程中所得到的回收率，此时，他可以使用一种在这种过程中很容易被完全回收的化台物作内标，来测定感兴趣化合物的百分回收率，而不必遵循以上所说的选择原则。
在使用内标法定量时，有哪些因素会影响内标和被测组分的峰高或峰面积的比值?影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的三类。
由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。
化学方面的因素包括：1、内标物在样品里混合不好；2、内标物和样品组分之间发生反应，3、内标物纯度可变等。
对于一个比较成熟的方法来说，色谱方面的问题发生的可能性更大一些，色谱上常见的一些问题(如渗漏)对绝对面积的影响比较大，对面积比的影响则要小一些，但如果绝对面积的变化已大到足以使面积比发生显著变化的程度，那么一定有某个重要的色谱问题存在，比如进样量改变太大，样品组分浓度和内标浓度之间有很大的差别，检测器非线性等。
外标法与内标法的比较
外标法仪器分析常用的方法之一，是比较法的一种。
与内标法相比，外标法不是把标准物质加入到被测样品中，而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定，把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。
外标物与被测组分同为一种物质但要求它有一定的纯度，分析时外标物的浓度应与被测物浓度相接近，以利于定量分析的准确性。
外标法在操作和计算上可分为校正曲线法和用校正因子求算法。
校正曲线法是用已知不同含量的标样系列等量进样分析，然后做出响应信号与含量之间的关系曲线，也就是校正曲线。
定量分析样品时，在测校正曲线相同条件下进同等样量的等测样品，从色谱图上测出峰高或峰面积，在从校正曲线查出样品的含量。
校正因子求算法时将标样多次分析后得到的响应信号与其含量求出它的绝对校正因子，再根据公式求出待测样品中的含量。
内标法是将一定量的纯物质作内标物，加入到准确称量的试样中，根据被测试样和内标物的质量比及其相应的色谱峰面积之比，来计算被测组分的含量。
选择内标物有4个要求：1.内标物应是该试样中不存在的纯物质；2.它必须完全溶于试样中，并与试样中各组分的色谱峰能完全分离；3.加入内标物的量应接近于被测组分；4.色谱峰的位置应与被测组分的色谱峰的位置相近，或在几个被测组分色谱峰中间。
内标法的优点是测定的结果较为准确，由于通过测量内标物及被测组分的峰面积的相对值来进行计算的，因而在一定程度上消除了操作条件等的变化所引起的误差。
内标法的缺点是操作程序较为麻烦，每次分析时内标物和试样都要准确称量，有时寻找合适的内标物也有困难。
外标法简便，但进样量要求十分准确，要严格控制在与标准物相同的操作条件下进行，否则造成分析误差，得不到准确的测量结果。
内标与外标都是定量的一种方法而已，至于哪一种方法好与不好不能一概而论，做不同的分析，面对着不同的要求，再加上分析成本分析效率等等问题，我想简单而有效进行定量分析来满足要求才是最重要的。
1、以前做过很多医药、农药中间体的芳香族卤代化合物的常量定量分析，没有自动进样器，用外标法定量，确实重现性与稳定性非常差，结果经常受到搞合成同事的质疑。
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内标法与外标法若干问题讨论目录什么叫内标法? (1)怎样选择内标物? (2)How do I use an internal standard? (2)什么叫内标法?怎样选择内标物? (3)在使用内标法定量时，有哪些因素会影响内标和被测组分的峰高或峰面积的比值? (4)在制作内标标准曲线时应注意什么? (4)外标法 (5)定量分析中怎样选择内标法或外标法 (5)外标法 (7)外标法的优点 (8)内标法操作 (8)内标法的特点 (8)什么叫内标法?What is an internal standard?An internal standard should be used when performing MS quantitation. An appropriate internal standard will control for extraction, HPLC injection and ionization variability. In a complex matrix it is not uncommon for two different standard levels in SRM integrated plots, at the lower end of the standard curve, to give nearly an identical response. It is only when an internal standard is used that the two points can be differentiated. Some researchers attempt to prepare standard curves and run samples without an internal standard and find moderate success. Often without an internal standard % RSDs of replicates can be as high as 20%. Using an internal standard the % RSDs can be brought down to approximately 2%. We run triplicates at each level of our standard curve.怎样选择内标物?How do I choose an internal standard?The best internal standard is an isotopically labeled version of the molecule you want to quantify. An isotopically labeled internal standard will have a similar extraction recovery, ionization response in ESI mass spectrometry, and a similar chromatographic retention time. If you are performing non-clinical PK quantitation it may be difficult to justify such a standard since a special synthesis of an isotopically labeled standard can be expensive and time consuming. Often if you are working with medicinal chemists they will have a library of compound analogs that can be used as internal standards. These analogs were made in the evolution of the compound to be tested and will be similar to the compound to be quantified and more importantly will be slightly different by parent mass. Try to avoid usingde-methylated (-14) or hydroxylated (+16) analogs as internal standards since these are the most common mass shifts observed in naturally occuring metabolites of the parent compound. A common internal standard is a chlorinated version of the parent molecule. A chlorinated version of the parent molecule will commonly have a similar chromatographic retention time which is an important characteristic of an internal standard. We have found that one of the most important characteristics of an internal standard is that it co-elutes with the compound to be quantified.How do I use an internal standard?First of all an internal standard should be added at the beginning of the sample work-up, typically before the plasma crash or solid phase extraction. The internal standard should be added at the same level in every sample including the standards. An internal standard should give a reliable MS response. Care should be taken that the amount of the internal standard is well above the limit of quantitation but not so high as to suppress the ionization of the analyte. "How much internal standard should I add?", this is an important question. It pays to know roughly how much compound is in your sample. This can be accomplished by making trial analyses of an early, middle and late time point with perhaps one or two standard points. This information will be very valuable when building an appropriate standard curve and in knowing how much internal standard to add. If you were trying to quantify samples in the range of 100 fg to 25 pg and the limit of detection was 100 fg you might add 5 to 10 pg of internal standard to every sample. A good rule of thumb is to target the internal standard to the lower 1/3 of the working standard curve. This is a range that will give a comfortable response without interfering with the ionization of the analyte.--------------------------------------------------------------------------------什么叫内标法?怎样选择内标物?已知的量加到样品中去，它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征，最好是被分析物质的一个同系物。
当然，在色谱分析条什下，内标物必须能与样品中各组分充分分离。
需要指出的是，在少数情况下，分析人员可能比较关心化台物在一个复杂过程中所得到的回收率，此时，他可以使用一种在这种过程中很容易被完全回收的化台物作内标，来测定感兴趣化合物的百分回收率，而不必遵循以上所说的选择原则。
在使用内标法定量时，有哪些因素会影响内标和被测组分的峰高或峰面积的比值?影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的三类。
由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。
化学方面的因素包括：1、内标物在样品里混合不好；2、内标物和样品组分之间发生反应，3、内标物纯度可变等。
对于一个比较成熟的方法来说，色谱方面的问题发生的可能性更大一些，色谱上常见的一些问题(如渗漏)对绝对面积的影响比较大，对面积比的影响则要小一些，但如果绝对面积的变化已大到足以使面积比发生显著变化的程度，那么一定有某个重要的色谱问题存在，比如进样量改变太大，样品组分浓度和内标浓度之间有很大的差别，检测器非线性等。
进样量应足够小并保持不变，这样才不致于造成检测器和积分装置饱和。