植物与植物生理实训知识点

2013年植物与植物生理实训知识点

实训一光学显微镜的构造与使用

1.显微镜的构造

机械部分：（1）镜座（2）镜柱（3）镜臂（4）镜筒（5）物镜转换器（6）载物台（7）粗调节螺旋（8）细调节螺旋

光学部分：（1）目镜（2）物镜（3）聚光器（4）虹彩光圈（5）反光镜或内置光源

2.显微镜的使用方法

（1）取、放显微镜：一手握住镜臂，一手平托镜座

（2）对光：低倍镜对准通光孔，用眼观察目镜，调节内置光源强度，使视野明亮、均匀，不刺眼

（3）放置标本与调节：略

（4）低倍镜的使用：

（5）高倍镜的使用：“先低后高，无动粗焦”

（6）油镜的使用: 显微镜、香柏油、擦镜纸、二甲苯

（7）用毕复原和存放：

实训二植物细胞结构观察

实训步骤：

1、清洁玻片（洁净、干燥）

2、滴染液：在干净载玻片上滴一小滴水和少量碘液；

3、取材：用镊子撕取洋葱鳞茎内（外）表皮一小块（1cm2的正方形；在使用刀片时注意安全），立即放入载玻片水中或染液中，展平；

4、加盖玻片：（5～10min后），加盖玻片，同时用吸水纸拭去过多的碘液；

从一侧开始慢慢盖上盖玻片，不能有气泡产生。

5、镜检：显微镜下观察（先低倍镜后高倍镜）；

实训三根尖压片法实训步骤

实训步骤

（1）洋葱根尖的培养：洋葱放在装满水的广口瓶上，底部接触水，装置放在温暖的地方，注意经常换水，目的是防止烂根，待根长到5 cm长时取根尖进行观察。

（2）取材：剪取根尖2～3mm （只有分生区细胞能分裂，选取2～3mm）

（3）临时装片的制作:

实训四

1.根的结构识别

2.单子叶植物与双子叶植物茎的结构对比

3.

植物叶表皮结构

双子叶植物（过主脉横切）叶片

1 叶表皮细胞

2 保卫细胞

3 气孔

4.双子叶植物叶片识别

实训五叶绿体色素的提取与分离方法操作步骤

（一）叶绿体色素的提取：

叶片擦净，去中脉后取2g剪碎，加少许碳酸钙和石英砂，再加入10mL丙酮，研磨成匀浆，分次再加丙酮15ml。过滤，滤液即为色素提取液。（碳酸钙：保护叶绿素被破坏；石英砂：充分研磨）注意：取材要避开主叶脉，因为主叶脉上主要是茎中的维管束鞘分支，含有的叶绿体少，使得测量结果偏低。

（二）叶绿体色素的分离——（纸层析法）

惰性支持物：滤纸；

固定相：水；

流动相：丙酮-石油醚推进剂（v：v=3：25/10）

步骤：（1）准备：将优质滤纸剪成3*9cm的长条，将一段剪成中央留约1-1.5cm*0.5cm的窄条（2）点样：用细玻璃棒（或毛细管）蘸取叶绿体色素提取液在滤纸一端点样。垂直点于层析纸的窄条上端中央部，吹干后重复点样7-8次。保证点小而色深（1mm宽）

(3) 层析：层析纸浸入试管的层析液中，调节纸条窄条的1/2部分浸入层析液（注意样点不可触及层析液），并盖好盖子，于暗处展层约10分钟，即可在层析纸上分辨出4种不同的清楚色层。（滤液细线不要深入层析液中）

（4）用铅笔在层析纸上之处4种色层的轮廓。并注明色层的名称和颜色。

实训六植物组织渗透势的测定

原理：（1）当植物组织处于高渗溶液（即低水势溶液）中时，常常由于细胞失水而导致原生质随着液泡一起收缩，脱落细胞壁而发生质壁分离。

（2）植物组织转入低渗溶液或水中，水分进入细胞，原生质体又可恢复到原来的状态，即质壁分离复原；

（3）当细胞的渗透势等于外液的渗透势时，细胞处于即将发生质壁分离的状态，此时为临界质壁分离；该溶液的浓度即为该植物组织的等渗浓度（引起质壁分离的最低浓度与不能引起质壁分离的最高浓度的平均值视为等渗溶液浓度）

(4)公式：Ψπ=-icRT (R=0.008314 MPa.L/(mol.K)

实训七植物组织水势的测定

方法：植物组织水势的测定方法：小液流法

计算：植物组织的水势（ψw）（waterpotential）即等于此时外界溶液的渗透势；溶液渗透势的计算公式为：Ψπ= - RTiC

实训八徒手切片的步骤

1．材料准备：取迎春叶或苋菜新鲜幼嫩的茎，用刀片切成2—3cm长的小段，将其切面削平待用

2．切片：滑润（切片前在材料和刀口上蘸一些水）。

垂直(把握材料时材料不要高出手指太多，且和刀口垂直)。

方向（自外侧左前方向内侧右后方斜切）。

动作(左手保持稳定，不要两手同时拉动，中途不应停顿，要快)。

连续切数片后放入盛水的培养皿中备选。

3．临时制片：选材(薄、透、平整)，（染色）盖片。

4．镜检。