DNA03用LGO后处理
酶免疫组织化学染色技术 -回复
酶免疫组织化学染色技术-回复酶免疫组织化学染色技术(Enzyme ImmunoHistoChemistry, E-IHC)是一种常用于组织学研究和病理诊断的方法。
该技术基于免疫学原理,采用酶标标记抗体和细胞色素底物,通过酶的催化作用来检测组织中特定抗原的分布和表达水平。
本文将一步一步回答与酶免疫组织化学染色技术相关的问题。
第一步:样本处理样本处理是酶免疫组织化学染色技术的重要步骤,它的目的是保持组织结构和细胞膜完整性,同时保留目标抗原的免疫原性。
1. 固定化:将组织样本进行固定化处理有助于保持细胞和组织的形态学结构。
最常用的固定剂包括甲醛和乙醇。
甲醛能够形成甲醛-蛋白质交联,从而固定并保持组织中的抗原。
乙醇可以用于去除水分和酮糖,提高抗体的渗透性。
2. 残胶和抗原修复:许多抗原在标本固定过程中会损失其免疫原性,需要进行抗原修复。
常用的修复方法包括热处理、酶消化和酸碱处理等。
热处理通常使用高温蒸煮或压力加热,可使蛋白质水平解离,恢复抗原性。
酸碱处理则通过改变组织的PH值,使抗原解离。
第二步:抗体选择抗体是酶免疫组织化学染色技术的核心。
选择合适的抗体对于获得可靠的结果至关重要。
1. 一抗和二抗:酶免疫组织化学染色一般采用间接法。
首先,使用一抗与目标抗原特异性结合。
随后,使用标记有酶的二抗来识别和结合一抗,从而可视化目标抗原。
常用的二抗有辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)。
2. 选择合适的抗体:选择抗体需要考虑目标抗原的特异性和抗体的亲和性。
在选择抗体时,可以参考文献报道、试剂公司提供的抗体说明书和其他研究人员的建议。
第三步:酶标标记酶标标记是酶免疫组织化学染色技术的另一个关键步骤。
酶标标记抗体在靶抗原区域内催化底物,从而产生特定的染色反应。
1. 酶标物质的选择:常用的酶标物质有HRP和AP。
HRPHRP常用于DAB法(diaminobenzidine)和AEC法(aminoethyl carbazole)等反应体系中,可产生棕色至棕黑色反应。
LeicaDNA03电子水准仪简要操作说明
1 仪器的基本设置⑴仪器的基本介绍图1图11 聚焦:黑条表示该栏为活动栏2 符号3 软按键4 电源开关键5 圆水准器6 固定键(左边一列键):具有固定功能的按键7 固定键第二功能:用[shift]加固定8 输入键:输入数字、键起动第二功能字母和特殊字符9 定位键:功能的变化与应用有关10 回车键INT打开碎部测量键MODE 设置测量模式键USER 用户自定义键,功能菜单中的任意一项功能都可定义给它PROG 测量程序键DATA 数据管理器ESC 一步步退出测量程序、功能或修改模式,恢复原来的参数,取消/停止测量键SHIFT 开关第二功能键(SET OUT,INV,FNC,MENU,LIGHTING,PgUp,PgDn,<<Back,INS),转换输入数字或字母。
CE 删除字符或信息,取消或停止测量确认输入,继续下一栏SET OUT SHIFT+INT启动放样INV SHIFT+ MODE 测量翻转标尺(标尺0 刻度在上),只要INV 被激活,仪器显示“T”符号,再按INV 键恢复测量正常标尺状态。
反转标尺测量值为负。
FNC SHIFT+USER起动测量的一些支持功能MENU SHIFT+PROG仪器设置,系统信息,启动轴系检测(利用平行光管对DNA03 仪器进行视线倾斜检测)。
显示屏和圆水准器照明若显示内容含有多页,“Page Up”=翻到前一页。
若显示内容含有多页,“Page Down”=翻到下一页。
返回到上一次视线,例如,回到后视,反之亦然。
定位键有多种功能,执行何种功能,取决于使用定位键的模式: •聚焦控制•光标控制•通过选择定位选择及确定输入的参数输入数字,字母和特殊字符。
输入小数点和特殊字符触发正、负号输入;输入特殊字符在字母模式中快速连续按压激活下一个符号(字母/特殊字符/数字)。
静止0.5 秒钟接受输入的符号。
软按键是对一个已知情况附加的“软件键”,软按键可用定位键选取,按启动。
DNA03-数字水准仪说明书
用户手册
中文 5.3
2
要正确、
4
6
7
8
9
11
13
17
查阅徕卡在线帮助。
我们反对以GSI格式把测量数据从数字水准
可用“数据交换管理器”把作业数据
19
由于
21
电池
1GEB121 只使用徕卡推荐的电池、充电器及
23
关闭:向下按压仓盖,锁上为止。
灰尘进入。
插卡
将有徕卡商标的面朝上插入,卡插到底只使用清洁干燥的存储卡。
存储卡
仪器电源关闭时插、拔插头。
徕卡供应的电
25
尽可能使脚架面水平。
27
31
33
显示为示例,而且当地软件可能与
按键与显示键
<<Back
删除字符或信息,取消或停止测量
确认键,继续下一栏。
返回到上一次视线,
37
输入数字,字母和特殊字符。
显示键
显示键是对一个已知情况的附加“软件键”,“CONT 在手册中的所有显示描述只含有文本,
显示键是对一个已给状态的附加“软件键”
39
从列表中选择的符号。
启动功能
直接键入数字快捷启动,或菜单的顺序、
打开照明,显示照明设置选项:
关闭所有照明
显示照明为省电模式。
圆水准器持续照仅照明圆水准器。
43
32A
+/- *
1 S
2 V
3 Y
4 J
5
6 P
9 G
框显示搜寻结果。
45
若在内存中搜寻不到点,就可手工输入高程。
47
无任何遮挡。
49。
DNA03用LGO后处理
DNA水准仪器数据传
1.数据通讯连接
将仪器与电脑相连接,并打开LGO在主界面左侧的“工具”框下点击“数据交换管理”
点开“串口”用鼠标右键打开“COM(X)”对话框
在对话框的“COM设置”页面下选择相应的“仪器(I)”和“波特率(B)”
调整好通讯设置后,用左键点开连接对应的“COM(X)”前的加号,出现下图情况
在“内存”里的“作业”下选择需要传输的作业,点左键从仪器拖到电脑任意磁盘下会弹出下列对话框
“文件名”可以更改但要注意后缀的“.GSI”不能更改
“格式(F)”务必选择“GSI”
在传输过程中不要有任何其他无关操作
2.数据平差处理
数据传输完成后,在主菜单左侧“管理”栏中选择并用鼠标左键点击“项目”弹出对话框,在对话框任意位置点鼠标右键“新建项目”如下图所示
完成新建项目后,将光标挪动至左上的红色箭头图标点击弹出下图对话框,在“查看”里找到刚才保存的“作业”同时在次对话框下端的“文件类型”选择“GSI(观测数据)”,选择好后点“输入”
把数据“分配”到新建的项目里
进入“项目”后在下端点击“水准处理”页面在会出现下面对话框,此对话框左侧中把相应的水准路线打开如图
用鼠标左键选择固定高程点,用右键打开选项菜单选“创建控制点(C)”,您会发现“点类别”里固定高程点的类型由“测量点”变成“控制点”,这个时候再在“高程”项目里输入固定点的确切高程。
全选各点后点击鼠标右键,确认“处理参数”
以相似操作进行水准“处理”
处理完成后点击鼠标右键!“储存”处理结果。
在下端“结果”页面里点左侧“总结”可以看到“水准总结”的报告
再次回到“水准处理”页面下,全选点,用鼠标右键可另存为其它格式数据。
莱卡dna03操作流程及数据处理
莱卡dna03操作流程及数据处理下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改,请根据实际需要进行相应的调整和使用,谢谢!并且,本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料,如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等,如想了解不同资料格式和写法,敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!1. 仪器准备:确保DNA03 水准仪处于良好的工作状态,检查仪器是否有损坏或故障。
DNA03电子水准仪GSI8数据格式转换软件开发
第42卷第2期2019年2月测绘与空间地理信息GEOMATICS&SPATIALINFORMATIONTECHNOLOGYVol.42ꎬNo.2Feb.ꎬ2019收稿日期:2018-03-19作者简介:姜㊀松(1978-)ꎬ男ꎬ辽宁法库人ꎬ高级工程师ꎬ学士ꎬ主要从事基础测绘与地理信息系统应用研究等工作ꎮDNA03电子水准仪GSI-8数据格式转换软件开发姜㊀松1ꎬ张恒璟2(1.辽宁省地理信息院ꎬ辽宁沈阳110034ꎻ2.辽宁工程技术大学ꎬ辽宁阜新123000)摘要:对徕卡DNA03电子水准仪线路测量模式及GSI-8数据存储格式进行了研究ꎬ基于VisualC++6.0平台MFC对话框ꎬ编写GSI-8数据格式向Excel电子表格水准记录簿格式的转换软件ꎬ实现DNA系列电子水准仪内置的5种线路测量模式GSI-8数据自动向满足国家水准测量规范的Excel电子手簿记录格式转换ꎬ测站各项限差指标自动检核并定位ꎬ水准测量等级满足从一等到四等以及等外水准的要求ꎬ相同等级和同一类型的线路数据文件实现批量格式转换ꎮ关键词:DNA03电子水准仪ꎻ线路测量模式ꎻGSI-8ꎻ格式转换ꎻExcel电子表格中图分类号:P204㊀㊀㊀文献标识码:A㊀㊀㊀文章编号:1672-5867(2019)02-0183-04DevelopmentofGSI-8DataFormatTransformSoftwareforDNA03DigitalJIANGSong1ꎬZHANGHengjing2(1.LiaoningProvincialInformationofGeographicꎬShenyang110034ꎬChinaꎻ2.LiaoningTechnicalUniversityꎬFuxin123000ꎬChina)Abstract:LinemeasurementmodeofLeicaDNA03digitallevelinginstrumentandGSI-8datastorageformatarestudied.BasedonVisualC++6.0platformandMFCdialogboxꎬthinformatconversionsoftwareiswrittenfromGSI-8toExcelspreadsheetdataformatstandard.ImplementationofDNAserieselectroniclevelbuilt-infivelinemeasurementmodeistomeetcountriesExcelelectronichandbookrecordformatconversion.Eachtoleranceindexofstationautomaticcheckislocatedtomeettherequirementsofthelevelfromthefirstordertothefourthandsubstandard.Thesameorderandtypeofdatafileformatareconvertedinbatches.Keywords:DNA03digitallevelinginstrumentꎻlinemeasurementmodeꎻGSI-8ꎻformatconversionꎻExcelspreadsheet0㊀引㊀言徕卡公司测量仪器的数据格式比较特殊ꎬ例如全站仪采用长数据块的GSI-16格式ꎬ每个数据区块占16个字符ꎬ保证平面坐标的有效数字ꎻ电子水准仪例如DNA03/DNA10采用短数据块的GSI-8格式ꎬ每个数据区块占8个字符ꎬ保证水准高差和视距的有效数字ꎮ这种GSI数据格式与我国的水准记录手簿格式不同ꎬ需要进行记录格式的转换ꎬ方能提供满足国家水准规范要求的记录手簿ꎮ文献[1]对电子水准仪数据传输转换与管理信息系统的主要功能模块进行论述ꎬ论证了系统运行的可行性ꎬ处理的仪器包括leica㊁Trimble㊁Nicon和Topocn系列ꎻ文献[2]基于微软MSCOMM控件和VB6.0平台ꎬ编写DNA03与微机数据通信程序ꎬ实现了电子水准仪与计算机的接口交互ꎻ文献[3]采用WPSOFFICE2007软件的表格处理功能将GSI-8数据转换为表格存储ꎻ文献[4]采用仪器自带LGO软件的 格式管理器 功能ꎬ提取测站观测信息ꎻ文献[5]利用徕卡随机软件LGO的格式管理器功能ꎬ结合Excel表格VBA宏命令ꎬ生成规定格式的水准测量手薄ꎻ文献[6]基于徕卡DNA03水准仪数据预处理程序设计ꎬ利用VB编写了读入数据文件并转换生成水准观测手薄ꎬ生成一个测段的水准测量外业高差与概略高程表ꎻ文献[7]利用XML格式下载DNA03原始观测数据ꎬ通过编程自动提取观测信息并生成Excel文件ꎻ文献[8]利用VB与Word交互ꎬ自动输出水准测量成果ꎬ实现了往返测㊁单程双转点及BFFB㊁BBFF原始数据的处理ꎻ文献[9]对GSI进行分割并剔除无用的索引字段ꎬ然后利用Excel-VBA编写自动化格式转换处理程序ꎻ文献[10]在PDA掌上电脑平台下开发了DZSZ04程序ꎬ实现了Dini12电子水准仪数据自动传输记录功能ꎻ文献[11]基于VS开发环境和c#语言编写DINI03数据格式转换程序ꎬ将原始数据转化为常用的平差数据记录格式ꎻ文献[12]对DINI03数字水准仪内存记录数据转换方法研究ꎬ提出原始数据格式转换方法并剔除无效信息ꎬ提取有用测段信息并以后处理软件要求的文本文件形式保存ꎮ本文在分析DNA03的GSI-8数据格式以及线路测量模式基础上ꎬ利用VC6.0平台ꎬ开发GSI-8数据格式向国家水准测量规范要求的水准记录薄转换软件ꎬ分别考虑DNA03仪器的5种线路测量模式ꎬ水准测量等级从国家一等到等外水准ꎬ对于相同等级和相同线路测量模式的GSI-8数据文件ꎬ可组成一个列表数据文件ꎬ批量实现数据格式向Excel电子记录手簿的转换ꎬ每一个GSI-8文件的测站数以及各项水准限差按线路分别统计ꎬ同时可对测站的各项测量限差进行检核ꎮ1㊀GSI-8数据格式徕卡公司生产的电子水准仪㊁全站仪等ꎬ内部数据存储为GSI(GeoSerialInterface)数据格式ꎮ电子水准仪采用GSI-8格式存储测量数据ꎮGSI-8的数据段见表1ꎬ第1 3位:字索引ꎬ指出数据的类型ꎻ第4位:空数位ꎻ第5位:地球曲率改正ꎻ第6位:单位与小数位数ꎬ例如 0 表示记录至1mmꎬ 6 表示0.1mmꎬ 8 表示0.01mmꎬ其他的数字例如1与7表示英制单位的不同小数取位ꎻ第7位:符号ꎬ指出数据的正负号ꎻ第8 15位:指出具体的水准数据(共8位字符)ꎻ第16位:空字符ꎮ表1㊀GSI 8数据段字符位Tab.1㊀GSI 8datasegmentcharacterposition位置1234567890123456 ʃnnnnnnnn2㊀line线路测量模式2.1㊀DNA03的线路测量模式徕卡公司的DNA系列电子水准仪提供了水准线路测量功能ꎬ为满足我国水准测量规范要求ꎬ制定了5种不同的路线测量形式ꎬ见表2ꎮ表2㊀DNA03线路测量模式Tab.2㊀DNA03linemeasurementmode线路模式测量顺序常用等级DNA03代码aBFFB奇数站后前前后偶然站前后后前国家一㊁二等4BFFB后前前后国家三等2BBFF后后前前国家四等7BF后前等外1aBF奇数站后前偶数站前后等外32.2㊀BFFB模式GSI-8数据文件格式BFFB模式线路测量GSI-8数据样例如图1所示ꎮ文件的第1行ꎬ例如:4100001+? 2ꎬ表示的意义为ꎬ 41 是测量方法代码ꎬ表明这个数据文件采用line线路测量模式ꎬ第1行省略号后面的数字 2 表示线路测量的模式为 BFFB 模式ꎮ图1㊀BFFB模式线路测量GSI-8数据样例Fig.1㊀GSI-8datasamplesofBFFBline㊀㊀㊀㊀measurementmode第2行ꎬ例如:110002+000000A183..58+10000000ꎬ 11 表示测量数据段的开始ꎬ A1 表示后视点名ꎬ 83..58 最右侧的 8 表示仪器记录的小数位数为0.01mmꎮ第3行ꎬ 32...8+03969149 ꎬ其中32表明该数据块为视距ꎬ数值为+39.69149mꎻ接着的 331.08+00187510 ꎬ331表示第一次的后视读数为1.87510ꎻ 390...+00000003 的390表示重复观测次数ꎬ最后的数位3表示重复3次读数ꎻ 391.08+00000010 的391表示平均观测模式(例如3次读数取平均)时ꎬ单次测量的标准差为0.10mmꎮ第4 6行ꎬ分别代表第一次前视F1(332)㊁第二次前视F2(336)㊁第二次后视B2(335)ꎮ第7行ꎬ571表示两次所测高差之差ꎬ572表示高差之差累积ꎬ573表示前后视距差ꎬ574表示该测站的总视距(前视+后视)ꎮ第8行ꎬ83表示该站的前视点高程ꎮ从第9行开始为水准仪第二站观测ꎬ第9 12行是第二站的后 前 前 后顺序观测值ꎬ第13行同第7行含义ꎮ详细的数据格式和字段说明见DNA系列GSI格式说明书ꎮ3㊀GSI-8转换EXCEL程序设计软件设计采用批量的GSI-8文件模式ꎬ不直接对GSI-8文件进行读写操作ꎬ而是将相同线路测量形式和测量等级的GSI-8单一路线数据文件组成一个后缀名为lst的文本列表文件ꎬlst列表文件中每一行为一个GSI-8单一线路数据文件名ꎮ例如:BFFB模式ꎬ三等水准测量ꎬ三个line线路测量数据文件名分别为:0529D05G09.GSI㊁0530D05D2.GSI㊁YBY4.GSIꎬ组成的列表文件名为BFFB-3.lstꎬ文件内容如图2所示ꎮ图2㊀BFFB-3.lst文件Fig.2㊀BFFB-3.lstfile软件整体技术流程如图3所示ꎬ主界面如图4所示ꎬ设计了单一水准路线测量形式单选项ꎬ包括5种单一路线测量形式ꎻ水准网等级选择和指标精度显示ꎬ包含从一等到四等的等级水准和五等水准(等外水准)ꎻ导入GSI 8格式的列表文件按钮ꎬ以及转换成Excel水准记录手簿并保存结果的按钮ꎮ481㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀测绘与空间地理信息㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀2019年图3㊀GSI-8格式转换软件整体设计流程Fig.3㊀Softwareoveralldesignprocess图4㊀GSI-8格式转换软件主界面Fig.4㊀MaininterfaceofGSI-8format㊀㊀㊀㊀transformationsoftwareExcel针对单元格的操作都应先获取其对应的Range对象ꎬ获取第一个工作表中的单元格ꎬ设置表头和合并单元格ꎮ基于VC6.0平台MFC对话框应用程序ꎬ声明Excel表格数据处理类对象的代码如下:_Applicationappꎻ//用_Application来创建一个Excel应用程序接口Workbooksbooksꎻ//工作簿集合_Workbookbookꎻ//工作簿Worksheetssheetsꎻ//工作表集合㊀㊀_Worksheetsheetꎻ//工作表Rangerangeꎻ//Excel中针对单元格的操作都应先获取其对应的Range对象Fontftꎻ//字体4㊀实㊀验㊀㊀按图2格式设计lst列表文件ꎬ导入GSI-8的lst文件后ꎬ生成1个包含全部GSI数据的文本文件ꎬ内容如图5㊁图6所示ꎮ对于lst文件中的每一个GSI-8数据文件ꎬ分别生成了3部分数据段:水准尺原始读数ꎬ仪器计算结果和测站检核结果ꎮ图5㊀水准尺原始读数数据段Fig.5㊀Originalreadingdatasectionoflevelingruler图6㊀仪器计算结果和测站检核数据段Fig.6㊀Instrumentcalculationresultsandstation㊀㊀㊀㊀inspectiondatasection超限的项目数据ꎬ后面以 ! 结尾ꎬ测站检核的两次设站高差之差不大于10cmꎮ测站检核没有问题时ꎬ由水准尺原始读数记录自动生成Excel表格的水准记录薄格式数据文件ꎮ生成的Excel水准记录见表3ꎬ每一个GSI-8线路文件分别统计测站编号㊁视距差㊁视距差累积㊁两次所测高差之差等信息ꎮ生成水准记录本格式的记录后ꎬ可以采用水准网平差软件ꎬ将各个单一线路的测段高差组成水准网ꎬ进行后续平差处理ꎮ表3㊀Excel水准记录表样式Tab.3㊀Excellevelingrecordpattern照准点视距水准尺读数读数差备考测站编号后后距1后距2后视1后视2K+黑-红前前距1前距2前视1前视2K+黑-红后 前后距前距h1h2h1-h2高差中数0.01mm视距信息视距差d累积差ðd本站视距总视距1后39691493970560187510191685-4175前397876439788276603570220-4185后 前39.739.7912147512146510121470-0.09-0.0979.4979.492后70500817046182126678131664-4986前718653071867466231967199-4880后 前70.4871.876435964465-10664412-1.39-1.47142.35221.83581第2期姜㊀松等:DNA03电子水准仪GSI-8数据格式转换软件开发续表3Tab.3㊀(Continued)照准点视距水准尺读数读数差备考测站编号后后距1后距2后视1后视2K+黑 红前前距1前距2前视1前视2K+黑 红后 前后距前距h1h2h1 h2高差中数0.01mm视距信息视距差d累积差ðd本站视距总视距3后108989710897941171141149012213前112793411283731720241698172207后 前10.911.28-54910-549166-54913-0.38-1.8622.18244.014后930257933393106651107923-1272前915734913028166973168225-1252后 前9.329.14-60322-60302-20-603120.17-1.6818.46262.485㊀结束语1)GSI-8数据格式向Excel表格转换软件ꎬ可以满足国家水准测量规范各个等级的测量要求ꎬ实现了测站各项限差的内业检核与定位ꎬ实现了Excel电子水准记录手簿的自动化存储ꎻ2)软件采用GSI-8批量数据文件格式转换模式ꎬ适用于DNA03电子水准仪常用的aBFFB㊁BFFB㊁BBFF㊁BF㊁aBF等5种线路测量模式数据格式转换ꎮ参考文献:[1]㊀马德英ꎬ赖鸿斌.电子水准仪数据传输转换和成果管理系统的设计和建立[J].测绘与空间地理信息ꎬ2008ꎬ31(6):199-201.[2]㊀王伟才.使用VB6.0编写DNA03电子水准仪与微机通信程序[J].测绘通报ꎬ2009(9):72-73. [3]㊀刘业林.Leica+DNA03水准仪的一种数据处理方法及应用实例[J].湖南水利水电ꎬ2009(6):31-33. [4]㊀袁峥.LeicaDNA数字水准仪测量数据输出格式研究[J].大坝与安全ꎬ2009(S1):70-72.[5]㊀贾丙普ꎬ彭喜林.徕卡DNA03数字水准仪数据处理研究[J].测绘工程ꎬ2015ꎬ24(2):75-77.[6]㊀韦国和ꎬ李应超ꎬ高建尽ꎬ等.基于徕卡DNA03水准仪数据预处理程序设计[J].中国新技术新产品ꎬ2010(19):37.[7]㊀李德龙ꎬ张文金.徕卡DNA03水准仪数据处理方案与实现[J].城市勘察ꎬ2009(6):93-94.[8]㊀汪平ꎬ孙雪洁ꎬ许家琨ꎬ等.基于VisualBasic实现徕卡DNA03电子水准仪数据处理[J].海洋测绘ꎬ2013ꎬ33(6):56-58.[9]㊀张卫.EXCEL_VBA实现徕卡DNA03电子水准仪数据自动处理[J].技术研发ꎬ2016ꎬ23(8):64.[10]㊀王太松ꎬ韩勇.电子水准仪数据自动传输记录程序的研发[J].测绘与空间地理信息ꎬ2010ꎬ33(1):180-182. [11]㊀赵显富ꎬ朱杰ꎬ吕伟.DiNi03数字水准仪数据格式转换程序的设计与实[J].测绘通报ꎬ2013(11):134-135. [12]㊀邹进贵ꎬ余锐ꎬ纪志刚.DINI03数字水准仪内存记录数据转换方法研究[J].测绘地理信息ꎬ2013ꎬ36(4):16-17.[编辑:任亚茹](上接第182页)4.3㊀不动产登记成果展示分析模块采用二三维一体化展现技术对不动产登记成果进行三维建模ꎬ模拟真实城市场景ꎬ借助纹理贴图㊁烘焙等手段将场景真实化ꎮ同时运用三维地理信息系统中的数据编辑与管理功能㊁模拟与推演功能㊁挖掘与分析功能ꎬ建立起一个真实立体的城市三维场景ꎬ以弥补传统二维地理信息系统的不足[4]ꎮ这种真实感㊁互动性㊁冲击力和表现力均是二维地理信息系统所无法比拟的ꎮ该技术在不动产登记成果展示应用中得到很好的运用ꎮ按用户要求进行各类专题统计ꎬ动态生成图表ꎬ能够让决策者从宏观层面掌握不动产登记成果数据情况ꎬ模拟与推演功能为决策者提供高科技手段的决策辅助ꎮ5㊀结束语国家对城市规划的更高要求ꎬ对不动产行业的微观把控ꎬ推动了不动产部门和行业的管理手段㊁行业技术飞速发展ꎬ并在很多地方已经慢慢凸显出规划㊁监控力度ꎮ本文以地理信息二三维一体化技术在不动产登记成果中的应用和实践为基础ꎬ结合二三维技术发展现状分析和不动产登记成果二三维资源展示与分析系统的推行ꎬ阐述了二三维一体化各项关键技术的应用意义ꎮ如何利用好二三维一体化技术ꎬ辅助支撑不动产行业发展ꎬ值得我们继续思考和研究ꎮ参考文献:[1]㊀蓝秋萍ꎬ李利军ꎬ杨波.二维GIS与三维场景交互技术的研究与应用[J].测绘信息与工程ꎬ2007ꎬ32(3):18-19. [2]㊀龚靖.三维地理信息系统在统一不动产管理中的应用[J].住宅科技ꎬ2014(7):56-60.[3]㊀朱庆.三维地理信息系统技术综述[J].地理信息世界ꎬ2004ꎬ2(3):8-12.[4]㊀万宝林.3DSMAX与SketchUp的三维城市建模技术实验对比分析[J].测绘地理信息ꎬ2015ꎬ40(2):23-25.[编辑:刘莉鑫]681㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀测绘与空间地理信息㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀2019年。
三丁基锡氢后处理
三丁基锡氢后处理
三丁基锡氢后处理是指对三丁基锡氢化合物进行处理的过程。
三丁基锡氢化合物是一种常用的有机锡化合物,常用于有机合成反应中作为还原剂、催化剂和反应中间体等。
然而,三丁基锡氢化合物对环境和健康有一定的潜在危害,因此在使用过程中需要进行后处理以降低其对环境的影响。
三丁基锡氢后处理主要包括以下几个方面:
1. 涉及到的主要问题是三丁基锡氢化合物的残留。
为了减少残留锡氢化合物的量,可以采取溶剂萃取、原位转化、再结晶等方法对反应体系进行处理。
2. 三丁基锡氢化合物转化为无机锡化合物,脱除有机基团。
这主要通过将三丁基锡氢化合物与过量的氢气反应,使其转化为三丁基锡氧化物,并通过酸处理将有机基团溶解掉。
3. 对于废水中的锡离子,可以采用沉淀法、离子交换法、膜过滤法等进行去除。
4. 废水中的有机物可以通过生物降解、混凝沉淀等方法进行处理。
需要注意的是,在进行处理过程中,要严格遵守相关的安全操作规程,采取必要的防护措施,以保护个人和环境的安全。
同时,对于处理后的废物应根据当地法规进行妥善处置,避免对环境造成二次污染。
Oligo DNA合成原理
Oligo DNA 合成
固相亚磷酰胺三酯法是目前最常用的Oligo DNA化学合成方法,它具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。
亚磷酰胺三酯法是将DNA固定在固相载体上完成DNA链的合成,合成的方向是由待合成引物的3′端向5′端合成的,相邻的核苷酸通过3′→5′磷酸二酯键连接。
合成步骤:
1、脱保护:将预先连接在固相载体CPG上的活性基团被保护的核苷酸与三氯乙酸反应,脱去其5′-羟基的保护基团DMT,获得游离的5′-羟基;
2、缩合:合成DNA的原料-单体,与活化剂四氮唑混合,得到核苷亚磷酸活化中间体,它的3′端被活化,5′-羟基仍然被DMT保护,与溶液中游离的5′-羟基发生缩合反应;
3、带帽(capping)反应:缩合反应中可能有极少数5′-羟基没有参加反应(少于2%),用乙酸酐和1-甲基咪唑终止其后继续发生反应;
4、氧化:在氧化剂碘的作用下,亚磷酰形式转变为更稳定的磷酸三酯;
通过上述步骤,一个脱氧核苷酸被连接到固相载体的核苷酸上。
再重复以上步骤,直到所有要求合成的碱基被连接上去。
合成过程中可以观察TCA处理阶段的颜色判定合成效率;
5、氨解:通过氨水高温处理,连接在CPG上的引物被切下来;
6、纯化:切下来的Oligo粗品根据实验目的不同选择不同的纯化手段进行纯化,OD260定量及抽干后根据定单要求对Oligo进行分装。
琼脂糖凝胶dna回收原理
琼脂糖凝胶dna回收原理
琼脂糖凝胶DNA回收是一种常用的蛋白质和核酸分离纯化技术,其原理如下:
1. 凝胶电泳:首先,将待回收的DNA样品经过凝胶电泳进行
分离。
在凝胶中,DNA分子根据尺寸和电荷迁移速度的差异
被分离开来。
2. 可视化:然后,用染料(如溴化乙锭)染色凝胶,使DNA
分子在紫外光下能够被可视化。
3. 切取DNA:通过使用灭菌的切割器具(如刮刀或剪刀),
将目标DNA条带切取下来。
注意要避免任何可能的污染。
4. 溶胶化:将切取下的DNA条带放入含有高浓度盐(如氯化
铵或碳酸锂)的洗涤缓冲液中,使DNA溶于溶液中。
5. 沉淀:将洗涤缓冲液中的DNA溶液与等体积的冷乙醇混合,形成DNA沉淀物。
6. 离心:将混合物进行离心,使DNA沉淀下来。
7. 溶解:去除上清液,用无菌蒸馏水洗涤DNA沉淀物,然后
用适当的缓冲液溶解DNA沉淀。
8. 储存:将回收的DNA溶液进行储存,以备后续实验使用。
总之,琼脂糖凝胶DNA回收是通过将目标DNA条带从凝胶中切取下来,然后对其进行溶胶化、沉淀、溶解等操作,最终得到纯化的DNA溶液的过程。
dna浓盐法 -回复
dna浓盐法-回复DNA浓盐法是一种常用的DNA提取方法,它能够从生物样本中纯化出高质量的DNA。
本文将介绍DNA浓盐法的原理、步骤以及实验操作的一些技巧和注意事项。
DNA浓盐法的原理基于DNA的溶解特性和浓盐溶液对DNA的沉淀作用。
浓盐溶液的高离子浓度可以中和DNA分子间的静电排斥力,并使DNA以盐沉淀的形式析出。
在此过程中,还需要蛋白酶来去除蛋白质的干扰,使得最终提取得到的DNA纯化度更高。
DNA浓盐法的步骤如下:1. 样本处理:将待提取DNA的样本(如细胞、组织等)进行处理,去除可能存在的脂肪、蛋白质等杂质。
可以使用PBS等缓冲液对样本进行洗涤,使其适合后续提取DNA的步骤。
2. 细胞破碎:将样本破碎,为了得到更好的DNA产率和质量,可以使用细胞破碎剂,如蛋白酶K等,进行细胞膜的破裂。
3. 蛋白质去除:通过添加蛋白酶等蛋白质去除剂,将样本中的蛋白质进行降解。
这个步骤的目的是去除蛋白质对DNA提取纯化的干扰。
4. 加入浓盐溶液:将浓盐溶液加入混合液中,使DNA以盐的形式析出。
常用的浓盐溶液包括高浓度NaCl、NaI等。
浓盐的存在可以中和DNA 分子间的静电排斥力,使得DNA沉淀。
5. DNA沉淀:将高浓度的盐溶液和样本混合物在低温条件下放置一段时间,DNA便以盐形式沉淀。
运用小心的离心等技术,将DNA沉淀以及上层的等离子体和其他杂质分离。
6. DNA洗涤:将DNA沉淀洗涤,以去除其他残留的血浆蛋白和遗留的盐。
洗涤可以使用70乙醇溶液,多次重复洗涤使得洗涤得更加彻底。
7. DNA溶解:将洗涤后的DNA溶解于缓冲液中。
常用的缓冲液包括TE缓冲液。
8. DNA质量检测:使用比色法或者凝胶电泳等方法进行DNA浓度和纯度的检测。
可以用比色法或者比例法来测定DNA浓度,用凝胶电泳来判断DNA的纯度、分子量和完整性。
DNA浓盐法有一些技巧和注意事项:1. 注意样本制备过程中的无菌操作,以避免外源DNA的污染。
nucleozol法 -回复
nucleozol法-回复什么是nucleozol法?Nucleozol法是一种用于提取和纯化DNA的方法。
它基于DNA的阴离子特性,利用其在高盐条件下与阳离子交互作用的原理。
第一步:样品准备将需要提取的样品进行预处理。
比如,如果是细菌或真核细胞,可以通过离心将细胞沉淀下来。
将细胞裂解并且溶解细胞壁,得到一个含有DNA的溶液。
第二步:处理酶加入一定量的蛋白酶K和SDS来降解细胞的蛋白质,杂质,病毒和其他核酸。
SDS同时可以破坏细胞的膜结构,帮助释放DNA。
蛋白酶K可以迅速降解蛋白质,以防止其对DNA的污染。
第三步:脱色加入一定量的异丙醇和高盐缓冲溶液,将溶液混合均匀。
异丙醇可以用来脱色,使DNA沉淀至溶液底部。
第四步:离心沉淀将溶液离心,将DNA从上清液中沉淀至离心管的底部。
高盐缓冲液的作用是增加DNA与水的溶液之间的离子相互作用,进一步促使DNA沉淀。
第五步:洗涤用70%的乙醇洗涤DNA沉淀,以去除残留的盐和其他杂质。
乙醇可以改变DNA与水的溶液,从而使DNA保持在乙醇的沉淀中。
第六步:DNA溶解将溶液中的DNA沉淀溶解到适当的缓冲溶液中,以便后续的DNA分析或操作。
通常使用Tris酸缓冲液来溶解DNA。
第七步:纯化和测定使用吸光度法或琼脂糖凝胶电泳等方法检测纯化后的DNA含量和质量。
Nucleozol法的优点包括操作简单、提取效率高、消耗低成本、适用于多种样品等。
它被广泛应用于基因组测序、PCR扩增、重组DNA构建等分子生物学实验中。
需要注意的是,在使用Nucleozol法提取DNA的过程中,要注意保持样品的无污染性,同时避免对DNA产生损伤或降解。
在每一步的操作中,要防止外来DNA的污染,同时酶和高盐缓冲溶液的使用需要根据样品的特性和需要进行相应的优化。
产3—羟基丁酮菌株的分离·筛选与鉴定
产3—羟基丁酮菌株的分离·筛选与鉴定产3-羟基丁酮(3-HB)的菌株是一类具有重要应用潜力的微生物。
它们可以通过代谢底物合成3-HB,而3-HB在制药、化妆品、食品添加剂等领域有广泛的应用。
分离、筛选和鉴定产3-HB菌株是非常重要的研究工作。
分离产3-HB菌株的第一步是采集土壤、水体、沉积物或其他环境样品作为菌源。
然后,将样品通过稀释涂布法或摇瓶培养法分离出单菌落。
接下来,通过传代培养方法,将单菌落转移到富含碳源和氮源的平板培养基上。
在筛选阶段,可以利用亚甲蓝染色法或比色法来初步判断产3-HB菌株。
3-HB菌株通常可以产生蓝色或紫色的染料,所以染色方法可以显示菌落的颜色变化。
还可以使用光谱分析、高效液相色谱(HPLC)和气相色谱质谱(GC-MS)等分析技术来确认3-HB的产生。
在鉴定产3-HB菌株的过程中,可以使用传统的形态学特征观察、生理生化特性测试和分子生物学方法。
形态学特征观察包括菌落形态、细胞形态和芽孢形态观察。
生理生化特性测试涉及氧需求、温度适应性、耐盐性等方面的测试。
而分子生物学方法如16S rRNA基因测序可以提供更准确的菌株鉴定结果。
经过分离、筛选和鉴定,获得的产3-HB菌株可以用于进一步的研究和应用。
这些菌株可以通过优化培养条件和代谢工程方法来提高3-HB的产量,并且可以应用于3-HB相关产品的生产中。
产3-HB菌株的分离、筛选和鉴定是一个复杂且耗时的过程,需要结合多种分析技术和方法来得到准确的结果。
这个过程对于研究和应用3-HB具有重要意义,能够为相关领域的发展提供有力的支持。
京广高铁运营期精测网复测新算法的应用
京广高铁运营期精测网复测新算法的应用发表时间:2020-12-02T15:53:45.783Z 来源:《工程管理前沿》2020年24期作者:陈威[导读] 随着我国高速铁路的飞速发展,高铁技术日益成熟,我国高速铁路运营里程位居世界第一,拥有世界上最繁忙的高铁运营网络。
陈威武汉锐进铁路发展有限公司,湖北武汉 430074摘要:本文以京广高铁精测网复测为例,详细介绍了京广高铁运营期精测网复测的计算情况,采用稳定的线上CPIII成果反算线上加密控制点,再由加密控制点反算线下基准点,并将反算的控制网成果与线下正算的成果进行对比,通过多种算法对数据进行综合处理,使得控制网成果的各项精度指标满足要求,达到精测网复测目的。
关键词:GNSS 高铁精测网复测1.引言随着我国高速铁路的飞速发展,高铁技术日益成熟,我国高速铁路运营里程位居世界第一,拥有世界上最繁忙的高铁运营网络。
在如此规模高铁建设及投入使用过程中,线路安全已成为关注和研究的热点问题。
因此,高速铁路运营期间的复测和监测是一项任务量大且极其重要的工作。
线路的高平顺性是通过高精度的轨道控制网CPⅢ来保障的,需要定期进行必要的复测[1]。
对运营期高速铁路复测工作全过程进行咨询评估及验收工作,是高速铁路测量控制的关键环节之一[2]。
2. 工程概况京广高速铁路,简称京广高铁,又称京广客运专线,是京港高速铁路(北京至香港)的重要组成部分,是中国《中长期铁路网规划》中“八纵八横”高速铁路的重要“一纵”,呈南北走向,被誉为世界上运营里程最长的高速铁路。
2009年12月26日,京广高速铁路武广段开通运营;2012年9月28日,京广高速铁路郑武段开通运营;2012年12月26日京广高速铁路京郑段开通,标志着京广高速铁路全线开通运营。
京广高速铁路自北京西站至广州南站,全长2298千米,共设37个车站,设计最高时速350千米,运营时速为300千米。
3. 主要精度指标全线的精测网复测应达到《高速铁路工程测量规范》的技术标准,并满足以下要求:注:表中为往返测段、附合或环线的水准路线长度,单位为km。
三苯基氧膦后处理除去方法
三苯基氧膦后处理除去方法三苯基膦是有机合成中常用的还原剂,但是生成的三苯基氧膦很难纯化去除(柱层析容易拖尾)。
虽然有一些方法可以将三苯基氧膦沉淀出来除去,如在乙醚中打浆可以除掉大部分三苯基氧膦,如果底物在乙醚中溶解度较好,效果还可以,此方法也不能将三苯基氧膦完全去除。
利用石油醚去除应用范围就更小了。
几乎没有文献报道在大极性溶剂中去除三苯基膦的方法。
2017年,Daniel Weix等人报道了在极性溶剂中将三苯基氧膦和氯化锌形成TPPO−Zn络合物沉淀,过滤将其去除的方法。
【J. Org. Chem.2017, 82, 9931–9936】用乙醇作为溶剂,一个当量的氯化锌就可以去除90%的三苯基氧膦,当增加到三个当量,则可以去除全部的三苯基氧膦。
General Procedure : Optimizing Equivalents of ZnCl2. A 20 mL scintillation vial was charged with a stirbar, triphenylphosphine oxide (1.0 g, 3.6 mmol, 1 equiv), andEtOH (10 mL). To this solution was added the listed equivalents of solid ZnCl2 accompanied by the immediate formation of a white precipitate. The mixture was allowed to stir for 18 h at 22 °C before the solid was separated by filtration and rinsed with EtOH (10 mL). The filtrate was collected, and dodecane (100 uL, 0.44 mmol) was added as an internal standard. The percentage of triphenylphosphine oxide remaining in the solution was determined by GC analysis, corrected.除了乙醇作为溶剂,异丙醇,乙酸乙酯和乙酸异丙酯效果也可以,但是不如乙醇效果好。
DNA采样点消杀要求
DNA采样点消杀要求DNA采样点消杀是指对DNA采样点进行清洁和消毒的过程,旨在防止DNA样本的污染和交叉污染,确保样本的纯净度和可靠性。
在DNA采样点的消杀过程中,需要遵循一系列的要求和步骤,以确保彻底杀灭细菌、病毒、真菌等微生物,同时最大限度地保护操作人员的安全。
首先,DNA采样点的消杀要求包括选择合适的消毒剂和消毒方法。
常见的消毒剂包括酒精、漂白粉、石碱、过氧化氢等。
针对不同的杀菌目标和环境条件选择合适的消毒剂,并按照合适的比例进行配制。
不同的消毒剂有不同的杀菌机理和适用范围,因此在选择和使用消毒剂时要参考相关的标准和规定,确保其具有足够的杀菌效果。
其次,DNA采样点的消杀要求还包括合理的操作方法和程序。
在进行消杀前,应该先将实验室或采样点整理干净,并清除多余的杂物和污物。
消杀前要先用肥皂水清洗采样点的工作台、工具、容器等,然后再进行消毒。
消毒时需要按照规定的时间和浓度浸泡或喷洒消毒剂,使其充分接触到被消毒表面。
消毒后应进行彻底的清洁和冲洗,以去除残留的消毒剂。
同时,DNA采样点的消杀要求还包括保持良好的卫生习惯和个人防护措施。
在进行消杀操作时,操作人员应佩戴合适的个人防护装备,如手套、口罩、防护服等,以保护自己的安全。
操作人员应经常洗手,避免接触口鼻眼等易受感染的部位。
同时,应定期对个人防护装备进行清洗和消毒,以防止交叉感染的发生。
此外,DNA采样点的消杀要求还需要注意对采样点内外的通风和环境卫生的管理。
采样点应保持良好的通风环境,定期进行空气流通和清洁,以减少污染物的积累和传播。
工作台、地面、墙壁等表面应保持清洁,经常擦拭和清洗,并定期进行彻底的消杀。
最后,DNA采样点的消杀要求还应建立相应的记录和管理制度。
对消杀操作的时间、消毒剂的使用情况、操作人员的姓名等应进行记录,以便追踪和管理。
同时,要建立健全的管理制度和规范,包括定期检查和维护消杀设备、进行培训和教育、制定操作规程等,以确保DNA采样点的消杀工作能够持续有效地进行。
DNA片段的纯化回收的几种方法
DNA片段的纯化回收载体及目的DNA 片断经酶切后,如果无多余的片断(如载体单切)可以直接酚/氯仿抽提后乙醇沉淀回收直接连接用。
但多数还有多余片断(如载体双酶切后有插入片断但要回收空载体,多个目的DNA片断选择其一克隆),必须电泳分离后回收目的片断。
回收的方法既有传统的方法,这些方法基于降低凝胶的熔点以释放DNA,然后通过酚/氯仿抽提后乙醇沉淀回收,也有公司生产的商品化的试剂盒可用,这些试剂盒多采用凝胶裂解液(如含有降低熔点的NaI)融化凝胶释放DNA后,采用特殊的硅胶树脂吸附DNA后,用洗液洗去杂质,最后用洗脱液洗出DNA。
一.材料、试剂和仪器:1 材料:待回收DNA样品2试剂:1) 1% 低熔点胶,琼脂糖,2) glassmilk kit: 裂解缓冲液,漂洗液,glassmilk3) TE, ddH2O,4) 酚/ 氯仿, 氯仿, 无水乙醇,70%乙醇,5) DNA回收试剂盒: 树脂,80%异丙醇,Syringe Barrel,3仪器:离心机,水浴锅,电泳仪二实验程序:2.2.1 低熔点胶法:1) 电泳到适当位置后在目的DNA条带的前端挖一长方形槽,向槽中加入融化的低熔点胶,待凝固后进行电泳。
当DNA进入低熔点胶中心时停止电泳。
紫外灯下切下目的条带的低熔点胶。
2) 将切下的胶放到离心管中,加入200ul的TE,65℃温浴3min以融化低熔点胶。
3) 分别用酚/氯仿,氯仿抽提一次。
4) 取上清,加入2倍体积的无水乙醇,-20℃沉淀DNA 2hr以上,12 000rpm离心15min,弃上清,用70%乙醇洗涤,吹干后溶于10ul无菌水中,取1ul电泳检测。
2.2.2. 冻融法:1) 电泳后直接切下凝胶中目的条带后加200ul TE,再加2倍体积酚,在液氮中冻2min ,再65℃水浴中融化10min,这样重复数次.2) 10 000g离心5 min,取上相液加2倍体积100%冰乙醇-20℃沉淀过夜。
核酸外切酶III克隆PCR产物的操作流程
核酸外切酶III克隆PCR产物的操作流程
具体操作步骤如下:
1.制备PCR产物及利用相应的限制
性内切酶线性化载体。
2.按照PCR片段与载体摩尔数为2:
1的比例将两者在冰上混和。
PCR片段浓度应大于50 ng,最
佳浓度在100~150 ng之间,并相
应调整载体浓度。
体系中片段
应调整载体浓度体系中片段
及载体浓度不宜过大。
3.加入水使反应体系达到8 ul。
4.在冰上加入1 ul10×缓冲液。
5.将100个单位的核酸外切酶III用水
稀释10倍,吸取1 ul加入体系。
冰上孵育30秒至3分钟。
66.设置PCR仪程序为70℃20分钟,
42℃10分钟。
待PCR仪加热至
70℃后,立即将反应体系放到
PCR仪上进行反应。
7.反应结束后,吸取2 ul反应液直接
应结束应液直接
用于转化。
[生活]引物合成步骤
[生活]引物合成步骤引物化学合成不同于酶促的DNA合成过程从5'?3'方向延伸,而是由3'端开始。
具体的反应步骤如下:一、脱保护基(Deblocking) 用三氯乙酸(Trichloroacetic Acid,TCA)脱去连结在CPG(Controlled Pore Glass)上的核苷酸的保护基团DMT(二甲氧基三苯甲基),获得游离的5'-羟基端,以供下一步缩合反应。
二、活化(Activation) 将亚磷酰胺保护的核苷酸单体与四氮唑活化剂混合并进入合成柱,形成亚磷酰胺四唑活性中间体(其3'-端已被活化,但5'-端仍受DMT 保护),此中间体将与GPG上的已脱保护基的核苷酸发生缩合反应。
三、连接(Coupling) 亚磷酰胺四唑活性中间体遇到CPG上已脱保护基的核苷酸时,将与其5'-羟基发生亲合反应,缩合并脱去四唑,此时合成的寡核苷酸链向前延长一个碱基。
四、封闭(Capping) 缩合反应后为了防止连在CPG上的未参与反应的5'-羟基在随后的循环反应中被延伸,常通过乙酰化来封闭此端羟基,一般乙酰化试剂是用乙酸酐和N-甲基咪唑等混合形成的。
五、氧化(Oxidation) 缩合反应时核苷酸单体是通过亚磷酯键与连在CPG上的寡核苷酸连接,而亚磷酯键不稳定,易被酸、碱水解,此时常用碘的四氢呋喃溶液将亚磷酰转化为磷酸三酯,得到稳定的寡核苷酸。
经过以上五个步骤后,一个脱氧核苷酸就被连到CPG的核苷酸上,同样再用三氯乙酸脱去新连上的脱氧核苷酸5'-羟基上的保护基团DMT后,重复以上的活化、连接、封闭、氧化过程即可得到一DNA片段粗品。
最后对其进行切割、脱保护基(一般对A、C碱基采用苯甲酰基保护;G碱基用异丁酰基保护;T碱基不必保护;亚磷酸用腈乙基保护)、纯化(常用的有HAP,PAGE,HPLC,C18,OPC等方法)、定量等合成后处理即可得到符合实验要求的寡核苷酸片段。
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DNA水准仪器数据传
1.数据通讯连接
将仪器与电脑相连接,并打开LGO在主界面左侧的“工具”框下点击“数据交换管理”
点开“串口”用鼠标右键打开“COM(X)”对话框
在对话框的“COM设置”页面下选择相应的“仪器(I)”和“波特率(B)”
调整好通讯设置后,用左键点开连接对应的“COM(X)”前的加号,出现下图情况
在“内存”里的“作业”下选择需要传输的作业,点左键从仪器拖到电脑任意磁盘下会弹出下列对话框
“文件名”可以更改但要注意后缀的“.GSI”不能更改
“格式(F)”务必选择“GSI”
在传输过程中不要有任何其他无关操作
2.数据平差处理
数据传输完成后,在主菜单左侧“管理”栏中选择并用鼠标左键点击“项目”弹出对话框,在对话框任意位置点鼠标右键“新建项目”如下图所示
完成新建项目后,将光标挪动至左上的红色箭头图标点击弹出下图对话框,在“查看”里找到刚才保存的“作业”同时在次对话框下端的“文件类型”选择“GSI(观测数据)”,选择好后点“输入”
把数据“分配”到新建的项目里
进入“项目”后在下端点击“水准处理”页面在会出现下面对话框,此对话框左侧中把相应的水准路线打开如图
用鼠标左键选择固定高程点,用右键打开选项菜单选“创建控制点(C)”,您会发现“点类别”里固定高程点的类型由“测量点”变成“控制点”,这个时候再在“高程”项目里输入固定点的确切高程。
全选各点后点击鼠标右键,确认“处理参数”
以相似操作进行水准“处理”
处理完成后点击鼠标右键!“储存”处理结果。
在下端“结果”页面里点左侧“总结”可以看到“水准总结”的报告
再次回到“水准处理”页面下,全选点,用鼠标右键可另存为其它格式数据。