高效液相色谱法鉴别染料型黑色喷墨打印字迹

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hplc高效液相色谱法

HPLC高效液相色谱法简介高效液相色谱法（HPLC）是一种利用液体作为流动相，通过高压输液系统，将样品中的各组分在固定相和流动相之间进行分配或吸附等作用而实现分离和检测的色谱技术。

HPLC具有分离效率高、灵敏度高、选择性强、分析速度快、样品适用范围广等优点，已成为化学、生物、医药、环境等领域中最重要的分析方法之一。

本文将简要介绍HPLC的基本原理、仪器组成、常用的色谱模式和应用领域，以期对HPLC感兴趣的读者有所帮助。

一、HPLC的基本原理HPLC的基本原理是利用样品中的各组分在固定相和流动相之间的不同亲和力，使其在色谱柱内以不同的速度移动，从而达到分离的目的。

固定相是填充在色谱柱内的颗粒状物质，可以是固体或涂于固体载体上的液体。

流动相是通过高压泵送入色谱柱的溶剂或溶剂混合物，可以是极性或非极性的。

样品是通过进样器注入流动相中，并随流动相进入色谱柱。

当样品中的各组分经过固定相时，会发生吸附、分配、离子交换、排阻等作用，导致它们在固定相中停留不同的时间。

这个时间称为保留时间（retention time），通常用tR表示。

保留时间是反映样品组分在色谱柱内分离程度的重要参数，不同的组分有不同的保留时间。

当样品组分从色谱柱出口流出时，会被检测器检测到，并产生一个信号。

这个信号随时间变化而变化，形成一个色谱峰（chromatographic peak）。

色谱峰的位置反映了样品组分的保留时间，色谱峰的面积或高度反映了样品组分的含量或浓度。

将检测器信号随时间变化而绘制出来，就得到了一条色谱图（chromatogram）。

色谱图上可以看到不同的色谱峰，每个峰对应一个样品组分。

通过比较保留时间和色谱峰面积或高度，就可以对样品进行定性和定量分析。

二、HPLC仪器组成HPLC仪器主要由以下几个部分组成：溶剂供给系统（solvent delivery system）：负责提供恒定压力和流速的流动相，并将溶剂混合成所需比例。

高效液相色谱方法及应用

一、流动相脱气（1）吹氦脱气法（2）加热回流法（3）抽真空脱气法（4）超声波脱气法（5）在线真空脱气法
高压输液泵及梯度洗脱装置
一、高压输液泵高压输液泵可以分为以下两类： 1．恒流泵：可输出恒定体积流量的流
动相。（1）注射式泵（又称注射式螺杆泵）（2）往复型泵 2．恒压泵：恒压泵又称气动放大泵，
一类是选择性检测器，如紫外一可见分光光度检测器；
另一类是通用型检测器，如示差折光检测器。
(1)紫外一可见分光光度检测器。
如今此技术已在分析咖啡中的黄嘌泠、调料中的核苷酸及核苷、果汁中的有机酸、米中的维生素、牛奶中的维生素D等都对食品营养价值提供有效数据。热不稳定物、离子型化合物及高聚物的分离及测量有困难，致使其应用受到了很大的限制。又如止痛药或退烧药也可用此法分离并测得各组分的含量。染料厂排出废水中的苯胺等。用液相色谱分析简便迅速。分析食品中的有毒成分，如苹果中农药萘乙酸、稻米中的黄曲霉素、鱼体中的有机汞等。是输出恒定压来自的泵。二、梯度洗脱装置
1．梯度洗脱（gradient elution）又称停流进样是在高压泵停止供液、体系压力下降的情况下，将样品直接加到柱头。
一、与经典液相色谱法比较
为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析用离子交换柱和缓冲游泳梯度淋洗。
多种不同性能的配位体键联在固相基体上分析食品中的有毒成分，如苹果中农药萘乙酸、稻米中的黄曲霉素、鱼体中的有机汞等。
高效液相色谱法的特点
一、与经典液相色谱法比较经典液相（柱）色谱法使用粗粒多孔固定相，装
填在大口径、长玻璃柱管内，流动相仅靠重力流经色谱柱，溶质在固定相的传质、扩散速度缓慢，柱入口压力低，仅有低柱效，分析时间冗长。
高效液相色谱法使用了全多孔微粒固定相，装填在小口径、短不锈钢柱内，流动相通过高压输液泵进入高柱压的色谱柱，溶质在固定相的传质，扩散速度大大加快，从而在短的分析时间内获得高柱效和高分离能力。

高效液相色谱法测定染发剂中32种禁限用染料

高效液相色谱法测定染发剂中32种禁限用染料摘要：对染发剂中的染料运用情况通过采取高效液相色谱测定的方法来进行研究。

将此32种物质分为三类，一共三组，通过对流动相、缓冲盐、色谱柱、波长等的测定，进行分析研究，得出数据。

一般来说，当相对标准差在5%以内时，其加标回收率是比较高的。

关键词：染发剂；高效液相色谱法；染料引言作为特殊化妆用品的染发剂，其主要的功能就是改变头发颜色，提升人物形象与气质。

一般来说，染发剂主要有三种常见的类型：氧化性染发剂、金属型染发剂以及植物型染发剂。

在这当中，染色效果最好的就是氧化性染发剂，由于其具有维持时间较长、色调变化很宽的优点，所以得到了较为广泛的应用。

苯酚类有机化合物和苯胺类有机化合物是氧化性染发剂最主要的成分。

但是需要注意的是这些化合物在某种程度上均具有致敏性和致癌性，所以加强对染发剂的监管以及日常的卫生管理都是非常重要的。

一、基本概述我国《化妆品卫生规范》（2007年版）中规定了93种暂时允许使用的染发剂，《化妆品卫生规范》（2007年版）对这些染发剂的使用浓度、限制使用条件和警示用语等作了相应规定，但是在相关检验方法项目中仅提供8种禁限用成分的液相色谱检测方法，检测成分在数量上严重不足。

文献中报道的检测方法种类很多，有薄层色谱（TLC）、高效薄层色谱（HPTLC）、高效液相色谱（HPLC）、高效液相色谱－质谱（HPLC/MS）、气相色谱（GC）、气相色谱－质谱（GC/MS）、毛细管电泳（CE）等。

DiGioia等采用GC/MS在选择离子监测（SIM）条件下分析染发剂中的p－苯二胺。

刘丽等采用超声波抽提、GC/MS测定氧化性染发剂中的16种染料。

Vincent等采用ＲP－HPLC－DAD（反相高效液相色谱配二极管阵列检测器）检测p－苯二胺、m－苯二胺、m－氨基苯酚和m－苯二酚4种染料。

上述方法检测染料种类有限，不能满足染发剂的监管需求，急需一种能检测尽可能多且容易实施的方法为化妆品的监管提供技术支持。

高效液相色谱法

1971年科克兰等人出版了《液相色谱的现代实践》一书，标志着高效液相色谱法 (HPLC)正式建立。在此后的时间里，高效液相色谱成为最为常用的分离和检测手段，在有机化学、生物化学、医学、药物开发与检测、化工、食品科学、环境监测、商检和法检等方面都有广泛的应用。高效液相色谱同时还极大的刺激了固定相材料、检测技术、数据处理技术以及色谱理论的发展。
高效液相色谱的特点
高压——压力可达150～300 kg/cm2。色谱柱每米降压为75 kg/cm2以上。高速——流速为0.1～10.0 mL/min。高效——塔板数可达5000/米。在一根柱中同时分离成份可达100种。高灵敏度——紫外检测器灵敏度可达 0.01ng。同时消耗样品少。
高效液相色谱法基本原理
（1）正键合相色谱中，采用和反相液液分配色谱相似的流动相，流动相的主体成分为己烷或庚烷。（2）反相键合相色谱中，流动相采用和反相液液分配色谱相似的流动相，主题为水。 4.应用（1）正键合相色谱法的应用：多用于分离各类极性化合物如染料、炸药、多巴胺、氨基酸等；（2）反键合相色谱法的应用：由于操作简单，稳定性和重复性好，该方法已成为一种通用型液相色谱分析方法。在生物化学、医药研究、食品分析和环境污染分析等多个领域有了很大的应用和发展。
高效液相色谱分析法
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一、概述
高效液相色谱法 High Performance Liquid Chromatography 简称(HPLC) 高效液相色谱法又叫做高压或高速液相色谱、高分离度液相色谱或近代柱色谱,以液体为流动相，采用高压输液系统，是色谱法的一个重要分支。它是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入待测样品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。这种方法已成为化学、生化、医学、工业、农业、环保、商检

高效液相色谱法分析蓝黑墨水墨迹

板上，不要为图方便将相纸放在暖气之类的发热源上烘烤，否则相纸会卷曲变形，给操作带来又一麻烦。
收稿日期：０１１ — ３２１－２２
轻轻的粘压在相纸上；４其余的部分一边粘一边用（）
蘸了水的硬纸条将塑料布与相纸之间的气泡带出来。（）要将水滴到指纹表面。（）５不６彻底晾干（图１。见）
２１１离子对色谱法分析蓝黑墨水墨迹的依据．．
蓝
黑墨水也称鞣酸铁墨水，由变黑成分、色成分和添有
・
５・１
型童垫Ｑ生箜
加剂组成。有色成分主要是酸性墨水蓝，了调节色为光和色泽，常添加少量的其他酸性染料和直接染料。酸性染料、接染料分子结构中均含有磺酸基或羧直
痕，方便Hale Waihona Puke 照（图２３。见、）
供数据参考。
１实验部分
试剂：甲醇、磷酸（５／（浓８６均为分析纯）离子对９）、
试剂（谱纯）蒸馏水。色，
样品：同牌号、同产地３蓝黑墨水墨迹，不不０种不同制成时问的墨迹样品。仪器及条件：ｉｎ０型液相色谱仪。色谱Ａｇｌｔ１０ｅ１柱：ｔｒｖ — ａ１，ＷａｅｓＮｏａＰｋＣ８检测波长：８ｎ流动相：５０ｍ，甲醇一离子对试剂流速：．ｍＬｍｉ。水一０８／ｎ

黑色中性笔字迹色痕及书写时间鉴定方法研究

第7期何海洋，等:黑色中性笔字迹色痕及书写时间鉴定方法研究-103•黑色中性笔字迹色痕及书写时间鉴定方法研究何海洋，赵鹏程*，李泽瀚，高静(中国刑事警察学院法化学系，辽宁沈阳110854)摘要:黑色中性笔字迹色痕检验及书写时间的鉴定一直是法庭科学的研究重点和难点。

近年来涉及黑色中性笔字迹色痕形成时间的案件较多，国内外法庭科学工作者对此问题进行不断探究，本文对目前检验黑色中性笔字迹色痕形成时间的问题进行系统的研究，综述了傅里叶变换红外光谱法、高效液相色谱法、气相色谱法、气相色谱-质谱联用法等有效鉴定方法。

关键词:黑色中性笔;字迹色痕；书写时间中图分类号：O657；D918.9文献标识码：A文章编号：1008-021X(2021)07-0103-03Study on the Identification Method of Black Gel Ink Brush Marks and Writing TimeHe Haiyang,Zhao Pengcheng*, Li Zehan,Gao Jing(Department of Law Chemistry，Criminal Investigation Police University of China，Shenyang110854，China)Abstract：The examination of black gel pen handwriting and the identification of writing time have been the focus of research and difficulties in forensic science.In recent years，there have been cases involving the writing time of black gel pen handwriting，and forensic scientists have been exploring this field.This paper conducts a systematic study of the current problem of testing the writing time of black gel pen handwriting，and reviews effective analysis methods such as Fourier transform infrared spectroscopy，high performance liquid chromatography，gas chromatography，and gas chromatography-mass spectrometry.Key words：black gel pens；handwriting；writing time近年来随着社会进步和经济发展,人们日常事务间的经济往来不断增加，合同、契约等文件已经成为现代生活中不可或缺的重要凭据。

简述高效液相色谱法用于杂质检测的几种方法及其适用条件

简述高效液相色谱法用于杂质检测的几种方法及其适用条件高效液相色谱法（HPLC）是一种广泛应用于药品、食品、生物制品等领域的分析技术，其灵敏度高、分离效果好、检测速度快、操作简便等优点，使其成为杂质检测的重要手段。

本文将介绍HPLC用于杂质检测的几种方法及其适用条件。

一、正相色谱法正相色谱法是指使用亲水性固定相，亲油性流动相的色谱技术。

对于药品的杂质检测，正相色谱法一般用于检测药物的不纯物、副产物及其降解产物等，如溶质的极性较大，适合使用正相色谱法。

1.逆流萃取法逆流萃取法是利用化学诱导物质通过反应生成或转化为更为极性或亲水性的产物，并用亲水性溶剂逆流提取，将产物与样品基质分离的方法。

逆流萃取法主要适用于水溶性杂质的检测，其操作简便，能进行选择性萃取，具有较高的检测灵敏度和准确性。

2. 核糖核酸碱解法核糖核酸碱解法是利用碱性溶液，使DNA或RNA被碱解后，经过脱色和加热处理，产生大量的碎片，然后通过正相色谱分离，进一步鉴定和定量其中的各种碎片的分子量，得到杂质含量的结果。

该方法适用于生物制品的杂质检测，如疫苗、血清等生物制品中杂质检测。

二、反相色谱法反相色谱法是指固定相为亲油性材料，流动相为亲水性的溶剂。

反相色谱法适用于一些不太易发生氢键或金属络合的化合物，也可以用于检测药品中的有机杂质、无机杂质等。

1.基线漂移法基线漂移法是指在反相色谱法中，属性相同杂质会相同时，只能通过基线漂移来判断其是否存在，并推断其相对含量的方法。

该方法适用于检测大分子药品或高分子物质中的杂质，如蛋白质、多肽、核苷酸等。

2. 静电耦合检测器法静电耦合检测器法是利用静电作用力，将电极上的杂质快速扫过，通过检测器采集下来，进行检测的方法。

该方法适用于分子量大于1000Da的高分子物质的检测。

该方法具有快速、高灵敏度、稳定性好的优点，因此在高分子物质中的杂质检测方面得到广泛应用。

三、离子交换色谱法离子交换色谱法是指利用正负离子之间的吸引和排斥作用，将目标化合物分离出来的一种技术。

墨迹色痕形成时间检验的研究进展

墨迹色痕形成时间检验的研究进展墨迹色痕形成时间检验在法庭科学、文件鉴定、文物保护等领域具有广泛的应用价值。

通过对墨迹色痕形成时间的精确判断，可以帮助我们解决许多实际问题，如确定文书的伪造时间、判断艺术品的创作年代等。

因此，墨迹色痕形成时间检验技术的不断发展与创新，对于司法鉴定和文物保护等领域具有重要意义。

墨迹色痕形成时间检验的发展历程可以追溯到20世纪初，历经百余年的发展，已经形成了多种检验理论和实验方法。

其中，化学显色法、光学显微分析法和光谱分析法是常用的几种方法。

化学显色法是通过分析墨水中的化学成分，观察其颜色变化来判断墨迹形成时间。

光学显微分析法则是利用显微镜观察墨迹的微观结构，分析其变化规律来判断墨迹形成时间。

光谱分析法则是通过对墨迹进行光谱扫描，分析其特征峰的变化来判断墨迹形成时间。

然而，这些方法都存在一定的局限性，如对样品损害大、精度低、成本高等问题。

随着科技的不断进步，近年来出现了许多新型的墨迹色痕形成时间检验方法。

其中，压力传感器和图像处理技术是备受的新技术。

压力传感器法是通过在纸张上安装压力传感器，记录人们在书写时对纸张施加的压力，根据压力变化来判断墨迹形成时间。

图像处理技术则是利用计算机对墨迹图像进行处理和分析，通过识别墨迹的颜色、形状等特征，来推断墨迹的形成时间。

这两种方法具有无损、高效、准确的优点，为墨迹色痕形成时间检验带来了新的突破。

墨迹色痕形成时间检验技术将在更多领域得到应用。

在司法鉴定领域，该技术将有助于解决许多棘手的案件，如合同纠纷、保险诈骗等。

同时，在文物保护领域，墨迹色痕形成时间检验将为文物的鉴定和保护提供更为精确的科学依据。

未来，随着检验技术的不断创新和进步，墨迹色痕形成时间检验的应用前景将更加广阔。

墨迹色痕形成时间检验技术对于司法鉴定、文物保护等众多领域具有重要意义。

虽然现有的检验方法已经取得了一定的成果，但仍存在一定的局限性和不足。

随着科技的不断发展和进步，新型的检验方法和理论将继续涌现，为墨迹色痕形成时间检验带来新的突破。

简述高效液相色谱法用于杂质检测的几种方法及适用条件

简述高效液相色谱法用于杂质检测的几种方法及适用
条件
高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的分离和分析技术，可用于检测各种杂质。

以下是几种常见的HPLC检测杂质的方法及适用条件：
1. 离子对色谱法：适用于离子和极性化合物的检测，包括无机离子、有机酸、有机碱等。

通常使用离子对柱，并加入离子对试剂作为流动相添加剂，以提高分离度和灵敏度。

2. 反相色谱法：适用于极性和非极性化合物的检测，包括许多药品和农药等。

使用非极性反相柱，并使用有机溶剂作为流动相添加剂，以提高分离度和灵敏度。

3. 大孔毛细管色谱法（GPC）：适用于分离高分子化合物的杂质，如聚合物和蛋白质。

使用大孔柱，并在流动相中加入钙离子等添加剂，以提高分离度和灵敏度。

4. 气化柱组合技术（GC）：适用于检测挥发性和半挥发性化合物的杂质，如有机溶剂和挥发性芳香化合物。

使用毛细管柱与气相质谱仪（GC/MS）组合，可提高分离度和灵敏度。

以上几种方法在HPLC中广泛应用，适用条件包括样品的物化性质、温度、压力、流动相种类和浓度等。

选取合适的HPLC方法和条件可以有效地分离和检测各种
杂质。

高效液相色谱法的原理

高效液相色谱法的原理高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种分离和分析化学物质的常用技术。

它基于样品在流动相中的相互作用，利用不同化学物质在固定相上的差异来实现分离。

HPLC的原理可以分为以下几个步骤：1. 流动相选择：HPLC中的流动相由溶剂组成，根据分析物性质的不同，可以选择不同的流动相。

溶剂的选择应使得分析物在流动相中有适当的溶解度，并且不与固定相发生显著的反应。

2. 固定相选择：HPLC中的固定相通常是一种多孔的固体材料，它具有较大的比表面积以增加分离效果。

常用的固定相有疏水性相、亲水性相、离子交换相等。

固定相的选择应根据分析物的化学特性和分离要求进行。

3. 样品处理：样品需要经过预处理，通常包括提取、浓缩、净化等步骤。

样品处理的目的是去除杂质和提高分离效果。

4. 进样：样品通过进样器引入色谱柱。

进样时要保证样品量的准确控制，以确保分析结果的准确性。

5. 色谱柱：样品在色谱柱中进行分离。

色谱柱是由固定相填充的管状结构，样品在固定相中的相互作用与时间有关，这将导致样品分离。

分离的准确性和效率取决于固定相的性能和色谱柱的尺寸。

6. 检测器：色谱柱输出的混合物被送入检测器进行检测。

常见的检测器包括紫外可见光检测器、荧光检测器、质谱检测器等。

检测器将染料信号转化为电信号，通过数据处理系统得到分析结果。

7. 数据处理：色谱仪将检测到的信号传输到计算机上进行数据处理和结果分析。

数据处理的步骤包括峰面积和峰高计算，峰的定性和定量分析等。

通过以上步骤，HPLC可以实现对复杂混合物的高效分离和定量分析。

它在制药、环境监测、食品分析等领域被广泛应用。

圆珠笔油墨字迹色痕的高效液相色谱分析方法

第32卷2004年5月分析化学(FENXI HUAXU E )　研究报告Chinese Journal of Analytical Chemistry 第5期657～660圆珠笔油墨字迹色痕的高效液相色谱分析方法李心倩3　王彦吉　史晓凡　许英健　王景翰(中国刑事警察学院法医学系,沈阳110035)摘　要　采用正交实验设计法从多种流动相体系中优选出了圆珠笔油墨字迹色痕的高效液相色谱分析条件。

在此条件下分析了105种市售的不同生产厂家和牌号蓝色圆珠笔油墨的字迹色痕,并依据有色成分的差异将这些同色油墨分成了6大类,考察了纸张的影响因素及在该条件下分析结果的重现性和精密度,为进一步分析鉴定圆珠笔字迹色痕的形成时间提供了有利条件。

关键词　法庭科学,字迹色痕,蓝色圆珠笔油墨,高效液相色谱法2003205226收稿;2003209225接受本文系国家高技术产业发展项目(计高技No.20012492)和公安部重点课题(No.200119300007)1　引言圆珠笔油墨字迹色痕的分析检验是目前法庭科学中急待解决的热点问题。

圆珠笔油墨主要由溶剂、有色成分、合成树脂三部分组成,其中有色成分约占油墨总量的25%,这些有色成分的性质及其组成对分析圆珠笔油墨是非常重要的。

近几年来国内外的法庭科学工作者对圆珠笔油墨字迹色痕的分析鉴别进行了大量的研究工作,建立了一些分析方法1～5。

在这些方法中,高效液相色谱法6～9以其分离效能高、灵敏度高和样品用量少等特点而倍受关注,但目前高效液相色谱法仅对少量样品作了初步的探索、分析。

本实验建立了用高效液相色谱法分析蓝色圆珠笔油墨字迹色痕的实验方法和分析条件,并在此条件下分析了105种市售的蓝色圆珠笔油墨的字迹色痕。

依据有色成分,对这些国内市场上销售的不同厂家、不同牌号的蓝色圆珠笔油墨进行了分类,考察了作为色痕载体的纸张对分析结果的影响及本分析方法的精密度和重现性,为进一步分析鉴定圆珠笔字迹的色痕形成时间提供了有利条件。

高效液相色谱——电喷雾式检测器的校准方法

高效液相色谱——电喷雾式检测器的校准方法1. 引言高效液相色谱（HPLC）作为一种重要的分析方法，在科研和工业领域有着广泛的应用。

而在HPLC分析中，检测器起着至关重要的作用，其准确性直接影响到实验结果的可靠性。

电喷雾式检测器作为HPLC 中常用的一种检测器，其校准方法对于保证分析结果的准确性至关重要。

2. 电喷雾式检测器的工作原理电喷雾式检测器是利用毛细管内的溶液在高压电场的作用下被喷成细小的液滴，形成雾状物，再通过干燥后使得待检化合物得以赴电离，最后通过质谱仪进行检测。

其工作原理复杂，所以对其进行校准尤为重要。

3. 校准方法的基本步骤a. 校准前的准备工作：检查仪器的各个部件是否完好，保证流动相的纯度和稳定性。

b. 内部标定：使用标准物质进行内部标定，并通过仪器的自动调节功能使其达到最佳状态。

c. 校准曲线的绘制：使用不同浓度的标准溶液进行测试，绘制出校准曲线。

d. 稳定性评估：检测器在长时间运行后的性能是否稳定，需要进行稳定性评估，确保实验结果的准确性和可靠性。

4. 校准方法的注意事项a. 校准曲线的选择：根据分析物的特性选择合适的校准曲线类型，可采用线性、二次、对数等不同类型的校准曲线。

b. 校准标准物质的选择：校准物质的纯度和稳定性对校准结果有着重要影响，因此需要选择高纯度和稳定性的标准物质。

c. 校准条件的选择：在校准过程中需要考虑到流动相的选择、流速的设定、温度的控制等因素，以保证校准的准确性和可重复性。

5. 个人观点和理解电喷雾式检测器的校准方法十分重要，它不仅仅是为了保证仪器的准确性和稳定性，更是为了保证分析结果的准确性和可靠性。

在实际操作中，需要严格按照校准方法的步骤进行操作，并且需要耐心细致地进行校准曲线的绘制和稳定性的评估。

只有这样，才能保证实验结果的高质量和可信度。

6. 总结电喷雾式检测器的校准方法是HPLC分析中至关重要的一环。

通过内部标定、校准曲线的绘制和稳定性评估等步骤，可以保证检测器的准确性和稳定性。

高效液相色谱法用于药物鉴别的依据

高效液相色谱法用于药物鉴别的依据
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）广泛应用于药物鉴别中，其依据主要有以下几点：
1. 色谱图谱：药物在高效液相色谱仪中进行分离，并通过检测器检测出它们的特征峰。

每种药物的色谱图谱是独特的，可以作为鉴别的依据。

比较待测药物的色谱图谱与已知药物的色谱图谱，可以确定待测药物的成分。

2. 保留时间：药物在高效液相色谱柱中的滞留时间也是药物鉴别的重要依据。

每种药物的保留时间是独特的，可以通过与标准药物的保留时间进行比较来鉴别药物是是否相同或相似。

3. 量：高效液相色谱法可以对药物进行定量分析，通过测量药物的含量来鉴别药物的真伪。

4. 化学指纹图谱：药物的化学指纹图谱是药物鉴别的另一个重要依据。

通过高效液相色谱对药物进行分离，并通过梯度洗脱的方法获取不同成分的色谱图谱，可以建立药物的化学指纹图谱。

比较待测药物的化学指纹图谱与标准药物的化学指纹图谱，可以鉴别药物的真伪。

总之，高效液相色谱法可以通过分离、检测和定量药物的成分，建立药物的色谱图谱和化学指纹图谱，以及比较药物的保留时间等方式来进行药物鉴别。

高效液相色谱法测定染发剂中14种染料

高效液相色谱法测定染发剂中14种染料尤海丹【摘要】建立了染发剂中对苯二胺等14种染料的高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)测定方法.采用RP-AMIDE C16柱(250mm× 4.6mm×5μm),流动相为乙腈-磷酸盐混合溶液梯度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长280nm.样品用50％的乙醇水溶液冰水浴超声提取,离心过滤后检测.14种染料在给定的浓度范围内峰面积与浓度有良好的线性关系,相关系数不低于0.9995,平均回收率为85％～110％,相对标准偏差(RSD)为1.20％～1.98％,检出浓度为19～22μg/g.该方法简便、准确、快速,可用于检测染发剂中14种染料.【期刊名称】《分析仪器》【年(卷),期】2018(000)005【总页数】4页(P45-48)【关键词】高效液相色谱法;染发剂;染料【作者】尤海丹【作者单位】辽宁省分析科学研究院辽宁省标准化体系建设工程技术研究中心,沈阳110015【正文语种】中文染发剂是通过改变头发颜色，达到美化毛发之目的的一类化妆品。

随着社会生活水品的不断提高，人们开始注重生活质量和消费质量，染发作为美容的方式之一，越来越受到人们的青睐，城市中青少年彩色染发者逐年增多，同时中老年人群中的使用者比例也逐渐上升。

世界卫生组织研究表明,长期使用染发产品可导致头发脱落、皮肤过敏、皮肤癌、恶性肿瘤、肝脏损害和泌尿系统疾病,同时某些染发剂中的染料所具有雌激素效应的该类化合物也易危害生殖系统的健康。

为了保障消费者的身体健康,欧盟78/ 768/ EEC 及2003/ 15/ EC 的增补指令[1，2] 、日本化妆品卫生标准，及我国《化妆品卫生规范》2015版[3] 规定了染发剂中相关染料的一些检测方法。

为满足国内外法规的要求,积极开展染发剂中多种类染料的检测具有重要的现实意义。

对苯二胺等有机胺类染料作为典型的染料被广泛的使用在黑色染发剂中[4]。

高效液相色谱法hPPT课件

❖ 它是在经典液相色谱基础上，引入了气相色谱的理论，在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器，因而具备速度快、效率高、灵敏度高、操作自动化的特点。为了更好地了解高效液相色谱法优越性，现从两方面进行比较：
1．高效液相色谱法与经典液相色谱法
高效液相色谱法比起经典液相色谱法的最大优点在于高速、高效、高灵敏度、高自动化。
❖ 另一类是总体检测器，它对试样和洗脱液总的物理或化学性质有响应，属于这类检测器的有示差折光，电导检测器等。
第三节固定相和流动相
（－）固定相
❖ 高效液相色谱固定相以承受高压能力来分类，可分为刚性固体和硬胶两大类。
❖ 刚性固体以二氧化硅为基质，可承受7.0×108～ 1.0×109Pa的高压，可制成直径、形状、孔隙度不同的颗粒。如果在二氧化硅表面键合各种官能团，就是键合固定相，可扩大应用范围，它是目前最广泛使用的一种固定相。
1、高压输液系统
❖ 由于高效液相色谱所用固定相颗粒极细，因此对流动相阻力很大，为使流动相较快流动，必须配备有高压输液系统。
❖ 它是高效液相色谱仪最重要的部件，一般由储液罐、高压输液泵、过滤器、压力脉动阻力器等组成，其中高压输液泵是核心部件。
❖ 对于一个好的高压输液泵应符合密封性好，输出流量恒定，压力平稳，可调范围宽，便于迅速更换溶剂及耐腐蚀等要求。
❖ 硬胶主要用于离子交换和尺寸排阻色谱中，它由聚苯乙烯与二乙烯苯基交联而成。可承受压力上限为 3.5×108Pa。固定相按孔隙深度分类，可分为表面多孔型和全多孔型固定相两类。
1.表面多孔型固定相
它的基体是实心玻璃珠，在玻璃球外面覆盖一层多孔活性材料，如硅胶、氧化铝、离子交换剂、分子筛、聚酸胺等。
（3）高纯度。由于高效液相灵敏度高，对流动相溶剂的纯度也要求高。不纯的溶剂会引起基线不稳，或产生“伪峰”。

高效液相色谱法的标准操作规程

高效液相色谱法的标准操作规程1 定义及概述：1.1 高效液相色谱法是一种现代液体色谱法，其基本方法是将具不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶液作为流动相，用高压输液泵将流动相注入装有填充剂的色谱柱，注入的供试品被流动相带入柱内进行分离后，各成分先后进入检测器，用记录仪或数据处理装置记录色谱图或进行数据处理，得到测定结果。

由于应用各种性质的微粒填料和加压的液体流动相，本法具有分离性能高、分析速度快的特点。

1.2 高效液相色谱法适用于能在特定填充剂的色谱柱上进行分离的药品的分析测定，特别是多组分药品的测定、杂质检查和大分子物质的测定。

有的药品需要在色谱分离前或后经过衍生化反应，方能进行分离或检测。

常用的色谱柱填充剂有：硅胶，用于正相色谱；化学键合固定相，根据键合的基团不同可用于反相或正相色谱，其中最常用的是十八烷基硅烷（又称ODS）键合硅胶，可用于反相色谱或离子交换色谱；凝胶或玻璃微球等填充剂是有一定孔径的大孔填料，用于排阻色谱。

1.3 高效液相色谱仪基本由泵、进样器、色谱柱、检测器和色谱数据处理组成。

检测器最常用的为可变波长紫外检测器或紫外—可见检测器。

色谱信息的收集和处理常用积分仪或数据工作站进行。

梯度洗脱，可用两台泵或单台泵加比例阀进行程控实现。

2 高效液相色谱仪的使用要求：2.1 按国家技术监督局国家计量检定规程汇编中“实验室液相色谱仪检定规程”的规定作定期检定，应符合规定。

2.2 仪器各部件应能正常工作，管路为无渗漏连结，流路中无堵塞或漏液，在设定的检测器灵敏度条件下，色谱基线噪音和漂移应能满足分析要求。

2.3 具体仪器在使用前应详细参阅各操作说明书。

3 操作前的准备：3.1 流动相的制备：用高纯度的试剂配制流动相，必要时照紫外分光光度法进行溶剂检查，应符合要求；水应为新鲜制备的高纯水。

对规定pH值的流动相，应使用精密pH 计进行调节。

配制好的流动相应通过0.45µm适宜的滤膜滤过，用前脱气。