常用荧光染料的激发和发射波长

流式细胞术中应用的荧光染料介绍

流式细胞术（Flow Cytometry）是一种用于分析和计数细胞的技术。在流式细胞术中，荧光染料起着至关重要的作用，可以标记细胞的不同成分，使其能够通过流式细胞仪进行检测和分析。荧光染料通过特定的荧光光谱来发出荧光信号，这些信号被流式细胞仪采集和分析，从而提供有关细胞类型、数量和功能的信息。以下是几种常见的流式细胞术中应用的荧光染料的介绍。

1. FITC（Fluorescein Isothiocyanate）：FITC是最常用的荧光染料之一，通过与免疫球蛋白G（IgG）结合，可用于免疫细胞表面分子的检测。FITC在波长为488 nm的激光下激发，发射的荧光信号在525 nm 左右。它可以与其他荧光染料（如PE或APC）结合使用，以实现多参数流式细胞分析。

2. PE（Phycoerythrin）：PE是一种从红藻中提取的荧光染料，其发射的荧光信号在575 nm左右。PE通常用于检测细胞表面的抗原或细胞内的蛋白质，如细胞因子。PE也可以与其他染料结合使用，以实现多参数分析。

3. APC（Allophycocyanin）：APC是一种类似于PE的荧光染料，通过独特的发射波长（约于660 nm附近）和长的荧光寿命来区分。APC适用于检测多种细胞表面分子和蛋白质，在深色的区域提供了可靠的信号。

5. PE-Cy7：PE-Cy7是PE染料与Cyanine 7（Cy7）结合形成的荧光染料。它适用于多参数流式细胞术，利用其较长的荧光寿命和波长（激发于488 nm，发射于780 nm左右），可以与其他染料一起使用，以实现更多的细胞表面和内部分子的检测。

常见荧光染料的激发波长及发射波长.

常用荧光染料的激发及发射波长

Fluorescent Dye(荧光染料Excitation(激发波长nmEmission发射波长nm Cy2TM489506

GFP(Red Shifted488507

YO-PRO TM-1491509

YOYO TM-1491509

Calcein494517

FITC494518

FluorX TM494519

Alexa TM488490520

Rhodamine110496520 ABI,5-FAM494522

Oregon Green TM500503522 Oregon Green TM488496524 RlboGreen TM500525 Rhodamine Green TM502527 Rhodamine123507529 Magnesium Green TM506531 Calcium Green TM506533 TO-PRO TM-1514533 TOTO?-1514533

ABI,JOE520548 BODIPY?530/550530550

Dil549565

BODIPY?TMR542568 BODIPY?558/568558568 BODIPY?564/570564570

Cy3TM550570

Alexa TM546555570

TRITC547572

Magnesium Orange TM550575 Phycoerythrin,R B565575 Rhodamine Phalloidin550575 Calcium Orange TM549576 Pyronin Y555580 Rhodamine B555580

常用染料的激发与发射

常用荧光染料的激发和发射波长

备注：发射波长的颜色及频率

荧光染料的使用

吖啶橙：吖啶橙是最经典的灵敏的荧光染料，它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光，DNA呈绿色荧光，RNA呈橙红色荧光。EB:染色DNA和RNA 荧光素双醋酸酯(FDA)：FAD本身无荧光,无极性,可透过完整的原生质膜。一旦进入原生质体后,由于受到酯酶分解而产生具有荧光的极性物质荧光素。它不能自由出入原生质膜，因此有活力的细胞能产生荧光,无活力的原生质体不能分解FAD无荧光产生。5mgFDA溶于1ml丙酮中,避光4℃下贮存,使用时取贮存液加入L甘露醇中.使用时,使最终浓度为%。荧光染料Ho33342和若丹明123:活细胞双荧光染色观察细胞核和线粒体。一般的生物染料不能穿透细胞膜，只有当细胞被固定后改变了细胞膜的通透性，染料才能进入细胞内。但有些活体染料能进入活细胞，并对细胞不产生毒性作用。荧光染料Ho33342和若丹明123都是活体染料。Ho33342能与细胞中DNA进行特异的结合，若丹明123能与线粒体进行特异的结合。采用两种荧光染料的混合染液可对一个活细胞的核和线粒体同时染色。

荧光组化实验中应注意的几个问题：1．每种荧光染料，均有自己的最适PH值，此时荧光最强。当pH改变时，不仅荧光强度减弱，而且波长将有所改变，因此荧光检测时要在一定的PH值的缓冲液中进行。2．一放荧光染色在20℃以下时荧光比较

稳定，温度升高常出现温度猝灭。3．在荧光观察中，常因激发光的增强而使样品荧光很快衰竭，造成观察和照相困难。为此最好用能量小的长波长光进行观察，需照相时再适当增强激发光。4．一般荧光染液的浓度在万分之一以下，甚至亿万分之一，也能使标本着色。在一定的限度内，荧光强度可随荧光素的浓度增加而增强，但超过限度，荧光强度反而下降，

cy2的激发波长和发射波长

CY2是一种常见的荧光染料，广泛应用于生物医学研究和荧光显微技术中。它具有独特的激发波长和发射波长，其独特的荧光特性使其成为科学研究中不可或缺的工具。

首先，我们来看看CY2的激发波长。激发波长是指当CY2受到光的激发时，所需的光的波长。CY2的激发波长为488纳米。这意味着，当CY2受到波长为488纳米的光照射时，其分子将被激发到高能态，从而产生荧光。这使得CY2成为荧光显微镜中常用的标记物之一，因为氩离子激光等可以产生488纳米波长的光源。

接下来，我们来介绍CY2的发射波长。发射波长是指当CY2分子被激发后发出的荧光光谱中的波长。对于CY2而言，它的发射波长为515纳米。这意味着在荧光显微观察中，当CY2受到激发光的照射后，它会发出波长为515纳米的荧光信号。这种特定的发射波长使得CY2能够与其他荧光染料进行区分，并在复杂的生物样本中提供清晰的显微图像。

CY2独特的激发波长和发射波长为科学家们提供了极大的便利。首先，CY2的激发波长处于可见光范围内，这意味着它可以通过常见的光源（如激光器或荧光显微镜）激发。其次，CY2的发射波长也处于可见光范围内，这使得研究者可以直接观察和记录CY2的荧光信号。这样的好处使得CY2成为广泛使用的荧光染料，可应用于细胞成像、蛋白质定位、细胞追踪以及分子相互作用研究等领域。

除了激发波长和发射波长外，CY2还具有许多其他优点。首先，

CY2荧光强度高，对光照条件不敏感，使其在低荧光背景下具有良好的探测灵敏度。其次，CY2具有较长的荧光寿命，这使得在时间解析实验中能够进行更精确的测量。此外，CY2还具有优异的化学稳定性和光稳定性，这使得其可以经受多次激发和长时间的照射而不受损坏。

常用荧光染料的激发和发射波长

常用荧光染料的激发和

发射波长精选文档 TTMS system office room 【TTMS16H-TTMS2A-TTMS8Q8-

常用荧光染料的激发和发射波长Fluorescent Dye （荧

光染料）Excitation （激发波长，

nm ）

Emission （发射波长，

nm ）

Cy2 489 506 GFP(Red Shifted) 488 507 YO-PRO -1 491 509 YOYO -1 491 509 Calcein 494 517 FITC 494 518 FluorX 494 519 Alexa 488 490 520 Rhodamine 110 496 520 ABI,5-FAM 494 522 Oregon Green 500 503 522 Oregon Green 488 496 524 RlboGreen 500 525 Rhodamine Green 502 527 Rhodamine123 507 529 Magnesium Green 506 531

Calcium Green 506 533 TO-PRO -1 514 533 TOTO-1 514 533 ABI,JOE 520 548 BODIPY 530/550 530 550 Dil 549 565 BODIPY?R 542 568 BODIPY?558/568 558 568 BODIPY?564/570 564 570 Cy3 550 570 Alexa 546 555 570 TRITC 547 572 Magnesium Orange 550 575 Phycoerythrin,R & B 565 575 Rhodamine Phalloidin 550 575 Calcium Orange 549 576 Pyronin Y 555 580 Rhodamine B 罗丹明555 580 ABI,TAMRA 560 582 Rhodamine Red 570 590

6-fam激发波长和发射波长

6-FAM（6-羧基荧光素）是一种常用的荧光染料，常被用于标记和检测生物分子。6-FAM分子在不同环境下的激发波长和发射波长可以有所变化。

在溶液中，6-FAM的激发波长通常在490-495 nm范围内，而发射波长通常在515-520 nm范围内。这些数值可以在具体实验条件下略有变化。

需要注意的是，6-FAM被用于不同系统和实验中，其激发波长和发射波长可能会有一些差异。因此，在使用6-FAM进行实验时，最好参考供应商提供的具体数据，以确保准确的波长设置和结果解读。

常用染料的激发与发射

常用染料的激发与发射公司内部编号：（GOOD-TMMT-MMUT-UUPTY-UUYY-DTTI-

常用荧光染料的激发和发射波长

荧光染料的使用

吖啶橙：吖啶橙是最经典的灵敏的荧光染料，它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光，DNA呈绿色荧光，RNA呈橙红色荧光。EB:染色DNA和RNA荧光素双醋酸酯(FDA)：FAD本身无荧光,无极性,可透过完整的原生质膜。一旦进入原生质体后,由于受到酯酶分解而产生具有荧光的极性物质荧光素。它不能自由出入原生质膜，因此有活力的细胞能产生荧光,无活力的原生质体不能分解FAD无荧光产生。5mgFDA溶于1ml丙酮中,避光4℃下贮存,使用时取贮存液加入L 甘露醇中.使用时,使最终浓度为%。荧光染料Ho33342和若丹明123:活细胞双荧光染色观察细胞核和线粒体。一般的生物染料不能穿透细胞膜，只有当细胞被固定后改变了细胞膜的通透性，染料才能进入细胞内。但有些活体染料能进入活细胞，并对细胞不产生毒性作用。荧光染料Ho33342和若丹明123都是活体染料。Ho33342能与细胞中DNA进行特异的结合，若丹明123能与线粒体进行特异的结合。采用两种荧光染料的混合染液可对一个活细胞的核和线粒体同时染色。

荧光组化实验中应注意的几个问题：1．每种荧光染料，均有自己的最适PH值，此时荧光最强。当pH改变时，不仅荧光强度减弱，而且波长将有所改变，因此荧光检测时要在一定的PH值的缓冲液中进行。2．一放荧光染色在20℃以下时荧光比较稳定，温度升高常出现温度猝灭。3．在荧光观察中，常因激发光的增强而使样品荧光很快衰竭，造成观察和照相困难。为此最好用能量小的长波长光进行观察，需照相时再适当增强激发光。4．一般荧光染液的浓度在万分之一以下，甚至亿万分之一，也能使标本着色。在一定的限度内，荧光强度可随荧光素的浓度增加而增强，但超过限度，荧光强度反而下降，

常用荧光染料的激发和发射波长

经常使用荧光染料的激发和发射波长之巴公井开创作创作时间：二零二一年六月

三十日

Fluorescent Dye （荧光染料）Excitation （激发波长,

nm ）

Emission （发射波长,

nm ）

Cy2 489 506 GFP(Red Shifted) 488 507 YO-PRO -1 491 509 YOYO -1 491 509 Calcein 494 517 FITC 494 518 FluorX 494 519 Alexa 488 490 520 Rhodamine 110 496 520 ABI,5-FAM 494 522 Oregon Green ?500 503 522 Oregon Green ? 488 496 524 RlboGreen ? 500 525 Rhodamine Green 502 527 Rhodamine123 507 529 Magnesium Green 506 531 Calcium Green 506 533 TO-PRO ?-1 514 533 TOTO-1 514 533 ABI,JOE 520 548 BODIPY? 530/550 530 550 Dil 549 565 BODIPY?R 542 568 BODIPY?558/568 558 568 BODIPY?564/570 564 570 Cy3 ? 550 570 Alexa ? 546 555 570 TRITC 547 572 Magnesium Orange ? 550 575 Phycoerythrin,R & B 565 575 Rhodamine Phalloidin 550 575

常见荧光通道命名

在荧光成像和荧光定量分析中，常见荧光通道的命名通常与荧光染料的激发和发射波长有关。不同的荧光染料有不同的激发和发射特性，因此它们通常被分配到特定的通道以便于识别和管理。以下是一些常见的荧光通道命名：

1. FAM (Fluorescein Amidite): FAM是一种常用的荧光染料，其激发波长通常在494-590纳米之间，发射波长在515-605纳米之间。FAM 通道通常用于标记DNA或RNA分子。

2. VIC (Violet Invader): VIC是一种荧光染料，其激发波长在405-470纳米之间，发射波长在490-570纳米之间。VIC通道常用于多种应用，包括细胞标记和DNA/RNA检测。

3. Cy5 (Cyanine 5): Cy5是一种荧光染料，其激发波长在649-680纳米之间，发射波长在670-705纳米之间。Cy5通道通常用于远红外荧光成像和生物检测。

4. Cy3 (Cyanine 3): Cy3是一种荧光染料，其激发波长在554-570纳米之间，发射波长在570-605纳米之间。Cy3通道常用于双色或多色荧光标记。

5. Alexa Fluor 488 (AF488): AF488是一种荧光染料，其激发波长在495-540纳米之间，发射波长在515-555纳米之间。AF488通道用于绿色荧光标记。

6. Alexa Fluor 532 (AF532): AF532是一种荧光染料，其激发波长在532-580纳米之间，发射波长在540-590纳米之间。AF532通道用于红色荧光标记。

常用荧光染料的激发和发射波长

荧光染料广泛应用于生物医学、材料科学、光电子学等领域，其特点是在受到激发后会发出可见光，具有较高的荧光量子产率和灵敏度。在实际应用中，荧光染料的激发和发射波长显得尤为重要，因此本文将整理常用荧光染料的激发和发射波长，方便读者在实验或研究中的选择。

常用荧光染料

1. FITC （荧光同型素-异硫氰酸酯）

FITC是一种广泛应用于生物学实验的荧光染料，常用于标记蛋白质、抗体、药物等分子，其最大吸收波长和最大发射波长分别为495 nm和519 nm。FITC的分子量小，荧光量子产率高，这使得它成为一种理想的荧光标记分子。

2. Rhodamine 123

Rhodamine 123是一种阳离子荧光染料，可在细胞中标记线粒体，同时也可在许多生物学应用中标定其他细胞器。Rhodamine 123的最大吸收波长和最大发射波长分别为507 nm和529 nm，其荧光量子产率高，荧光亮度高。

3. Texas Red

Texas Red是一种常用的激发波长长达596 nm的荧光染料，在荧光共振能量转移等实验中被广泛应用。Texas Red的最大发射波长在610 nm左右，其在荧光共振能量转移实验中能够提供强烈的荧光标记。

4. PE （腺苷酸酰基酯）

PE是一种被广泛用于流式细胞仪实验中的荧光染料，其最大激发波长为488 nm，最大发射波长在575 nm左右。PE作为一种非常亮的荧光染料，可用于标记和鉴定特定类型的细胞。

荧光染料的选择

在实验或研究中，需要根据具体的情况选择合适的荧光染料。对于激发波长和发射波长的选择，一些因素应该被考虑，如：

sybr gold激发波长和发射波长

sybr gold是一种常用的荧光染料，广泛应用于生物医学研究、生物工程领域。sybr gold的激发波长和发射波长对于其在实验中的应用至关重要，下面我们将对sybr gold的激发波长和发射波长进行详细的解读。

一、sybr gold的激发波长

1.1 sybr gold是一种DNA染料，其激发波长在约495纳米至505纳米之间。在这一范围内的光波作用下，sybr gold分子会发生能级跃迁，从而激发出荧光信号。

1.2 由于sybr gold的激发波长较窄，在进行实验时需要选择合适的激发光源，以确保sybr gold能够充分受激发并发出荧光信号。

1.3 实验中常用的激发光源包括紫外光、蓝光等，研究人员可以根据实验需求选择合适的激发光源来激活sybr gold。

1.4 正确的激发波长对于实验结果的准确性和可重复性具有重要意义，因此在进行实验前需要对激发波长进行严格的控制和调节。

二、sybr gold的发射波长

2.1 sybr gold的发射波长在约520纳米至530纳米之间，当受到激

发光源激发后，sybr gold分子会发出这一范围内的荧光信号。

2.2 发射波长的测定可以通过荧光分光光度计等专业仪器进行，研究人员可以根据实验需求对sybr gold的发射波长进行精确测定。

2.3 sybr gold的发射波长是衡量其荧光强度和稳定性的重要指标，研究人员在选择sybr gold作为实验染料时需要对其发射波长进行充分的了解和考量。

2.4 合理的发射波长选择能够提高实验结果的准确性和可靠性，因此在实验设计中需要充分考虑sybr gold的发射波长及其特性。

常用染料的激发与发射

常用染料的激发与发射 IMB standardization office【IMB 5AB- IMBK 08- IMB 2C】

常用荧光染料的激发和发射波长

荧光染料的使用

吖啶橙：吖啶橙是最经典的灵敏的荧光染料，它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光，DNA呈绿色荧光，RNA呈橙红色荧光。EB:染色DNA和RNA荧光素双醋酸酯(FDA)：FAD?本身无荧光,无极性,可透过完整的原生质膜。一旦进入原生质体后,由于受到酯酶分解而产生具有荧光的极性物质荧光素。它不能自由出入原生质膜，因此有活力的细胞能产生荧光,无活力的原生质体不能分解FAD无荧光产生。5mgFDA溶于1ml丙酮中,避光4℃下贮存,使用时取贮存液加入L甘露醇中.使用时,使最终浓度为%。荧光染料Ho33342和若丹明123:

活细胞双荧光染色观察细胞核和线粒体。一般的生物染料不能穿透细胞膜，只有当细胞被固定后改变了细胞膜的通透性，染料才能进入细胞内。但有些活体染料能进入活细胞，并对细胞不产生毒性作用。荧光染料Ho33342和若丹明123都是活体染料。Ho33342能与细胞中DNA进行特异的结合，若丹明123能与线粒体进行特异的结合。采用两种荧光染料的混合染液可对一个活细胞的核和线粒体同时染色。

荧光组化实验中应注意的几个问题：1．每种荧光染料，均有自己的最适PH值，此时荧光最强。当pH改变时，不仅荧光强度减弱，而且波长将有所改变，因此荧光检测时要在一定的PH值的缓冲液中进行。2．一放荧光染色在20℃以下时荧光比较稳定，温度升高常出现温度猝灭。3．在荧光观察中，常因激发光的增强而使样品荧光很快衰竭，造成观察和照相困难。为此最好用能量小的长波长光进行观察，需照相时再适当增强激发光。4．一般荧光染液的浓度在万分之一以下，甚至亿万分之一，也能使标本着色。在一定的限度内，荧光强度可随荧光素的浓度增加而增强，但超过限度，荧光强度反而下降，

荧光基团波长

荧光基团是一种能够吸收特定波长的光能并发出荧光的分子。不同的荧光基团具有不同的激发波长和发射波长。

常见的荧光基团包括荧光素、罗丹明、Cy 系列染料等。荧光素的激发波长为 495nm，发射波长为 520nm；罗丹明的激发波长为 550nm，发射波长为 570nm；Cy 系列染料的激发波长和发射波长则根据不同的染料而有所不同。

在实际应用中，选择合适的荧光基团需要考虑激发波长和发射波长是否与实验设备匹配，以及荧光基团的亮度、稳定性等因素。同时，还需要注意荧光基团的浓度和环境条件对荧光强度的影响。

总之，了解荧光基团的波长特性对于荧光标记和荧光检测等实验非常重要，可以帮助我们选择合适的荧光基团和实验条件，提高实验的准确性和可靠性。

常用荧光染料的激发及发射波长

FLUOROCHROME EXCITATION EMISSION

3-Hydroxypyrene 5,8,10-Tri Sulfonic acid 403 513 5-Hydroxy Tryptamine 380-415 520-530

5-Hydroxy Tryptamine (5-HT) 400 530

Acid Fuchsin 540 630

Acridine Orange (bound to DNA) 502 526

Acridine Red 455-600 560-680

Acridine Yellow 470 550

Acriflavin 436 520

AFA (Acriflavin Feulgen SITSA) 355-425 460 Alizarin Complexon 530-560 580

Alizarin Red 530-560 580

Allophycocyanin 650 661

ACMA 430 474

Aminoactinomycin D 555 655

Aminocoumarin 350 445

Anthroyl Stearate 361-381 446

Astrazon Brilliant Red 4G 500 585

Astrazon Orange R 470 540

Astrazon Red 6B 520 595

Astrazon Yellow 7 GLL 450 480

Atabrine 436 490

Auramine 460 550

Aurophosphine 450-490 515

dapi激发波长和发射波长

DAPI（4',6-diamidino-2-phenylindole）是一种DNA荧光染料，广泛应用于生物学和医学研究领域，用于检测细胞核和染色体。DAPI

荧光显微镜广泛应用在生物学技术中。DAPI可以通过吸收UV光来激发，发射出蓝紫色的荧光信号。在进行DAPI荧光显微镜观察时，需要注

意激发波长和发射波长，下面将会详细介绍。

第一步：概述

DAPI荧光显微镜观察必须了解激发波长和发射波长。激发波长是荧光染料在吸收光子后进入激发状态的波长。DAPI需要使用紫外线来

激发，激发波长为350 nm。发射波长是荧光染料返回基态并发出荧光时所发射的波长。DAPI发射波长为 460nm的蓝色荧光。

第二步：激发波长和荧光显微镜

在进行DAPI荧光显微镜观察时，需要使用可以激发紫外线的荧

光显微镜。常用的激发波长为350nm的紫外线。通过调节荧光显微镜

的滤镜，可以选择合适的发射波长进行观察，DAPI发射的蓝紫色荧光

可以容易地被分辨和捕捉。

第三步：DAPI的特点及应用

DAPI荧光染料是一种极具选择性和敏感性的DNA标记，特别适用于细胞核或染色体的染色。同时，DAPI荧光染料也可用于菌落计数。DAPI可以穿透多层细胞膜，通过紫外线激发后可以将DNA很容易地染

成紫色，可用于快速、灵敏地检测微生物。DAPI还可以用于开展细胞

生物学领域的其他研究，例如细胞核数量的计数以及观察细胞的有丝

分裂现象等。

总而言之，DAPI是一种灵敏、实用并且广泛应用于多种生物学领域的DNA荧光染料。在进行DAPI荧光显微镜观察时，需要了解激发波

pe激发波长

PE激发波长是指荧光染料在光谱上吸收最大的波长，也是激发荧光染料所需的波长。PE（Phycoerythrin）是一种常用的荧光染料，其激发波长为488nm，发射波长为578nm。PE荧光染料广泛应用于流式细胞仪、免疫组化、免疫印迹等领域。

PE激发波长的确定是非常重要的，因为它直接影响到荧光信号的强度和稳定性。如果激发波长不准确，可能会导致荧光信号过弱或过强，

影响实验结果的准确性。因此，在使用PE荧光染料时，需要根据实验需要选择合适的激发波长，并进行严格的质量控制。

除了PE荧光染料，还有许多其他的荧光染料也需要确定其激发波长。例如，FITC（荧光异硫氰酸荧光素）的激发波长为488nm，发射波长为530nm；Alexa Fluor 647的激发波长为633nm，发射波长为

660nm。不同的荧光染料具有不同的激发波长和发射波长，因此在实

验中需要根据需要选择合适的荧光染料和激发波长。

在实验中，为了确定荧光染料的激发波长，可以使用荧光光谱仪进行

测量。荧光光谱仪可以测量荧光染料在不同波长下的吸收和发射情况，从而确定其激发波长和发射波长。在测量时，需要注意荧光染料的浓

度和pH值等因素对荧光信号的影响，以保证测量结果的准确性。

总之，PE激发波长是荧光染料在光谱上吸收最大的波长，也是激发荧光染料所需的波长。在实验中，需要根据需要选择合适的荧光染料和激发波长，并进行严格的质量控制。通过荧光光谱仪的测量，可以确定荧光染料的激发波长和发射波长，从而保证实验结果的准确性。

常用荧光染料的激发和发射波长

流式细胞术中应用的荧光染料介绍

常见荧光染料的激发波长及发射波长.

常用染料的激发与发射

cy2的激发波长和发射波长

常用荧光染料的激发和发射波长

6-fam激发波长和发射波长

常用染料的激发与发射

常用荧光染料的激发和发射波长

常见荧光通道命名

常用荧光染料的激发和发射波长

sybr gold激发波长和发射波长

常用染料的激发与发射

荧光基团 波长

常用荧光染料的激发及发射波长

dapi激发波长和发射波长

pe激发波长

荧光基团波长