2019版高考生物一轮复习 专题2 微生物的培养与应用高考预测 新人教版选修1
高考生物一轮复习 专题二微生物的培养与应用课件 新人教版选修1
5．该实验中的注意事项 (1)设立重复组：统计某一稀释度下平板上的菌落数 时，要至少涂布3个平板作重复组，增强实验结果的说 服力与准确性。
(2)对照原则 ①判断培养基中是否有杂菌污染，需将未接种的培 养基同时进行培养。 ②判断选择培养基是否具有筛选作用，需设立牛肉 膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上菌 落数目，进行对比得出结论。
3．细菌分离与计数的实验流程 土壤取样→样品稀释→取样涂布→微生物的培养→ 观察并记录结果→细菌计数 4．课题延伸——菌种的进一步鉴定 (1)原因：由于分离分解尿素的细菌的选择培养基上 可能生长着以分解尿素的细菌的代射产物为氮源的其它 微生物。
脲酶 (2)原理：CO(NH2)2＋H2O――→ CO2＋2NH3；由于 NH3的产生，培养基碱性增强，pH升高，因此可通过检 测pH的变化来判断该化学反应是否发生。 (3)方法：以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指 示剂，培养某种细菌，若指示剂变红，则pH升高，说明 该种细菌能分解尿素。
(3)强 (4)干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰
方法
平板划线法
(1)接种环的灼烧
①第一次划线前：接种环上的微生物，避免污染培养物
②每次划线前：杀死残留菌种，保证每次划线菌残留菌种，避免污染环境和感染操作者 (2)灼烧接种环之后，要冷却后再进行操作，以免温度太高
杀死菌种
(3)划线时最后一区域不要与第一区域相连
C．培养基中的营养物质浓度越高对微生物的增殖越 有利
D．生长因子一般是酶或核酸的组成成分，微生物本 身合成这些生长因子的能力往往不足
答案 D
解析 本题是关于微生物培养的考查。微生物的营 养包括碳源、氮源、水、无机盐和生长因子。乳酸菌的 碳源是有机物，而硝化细菌可以利用无机物作为碳源； 生长因子是微生物体内不能合成的，需要量很小的一些 有机物；培养基中营养物质浓度过高会造成微生物细胞 失水，不利于菌种生长。
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2．无菌技术 (1)关键：防止外来杂菌 ________的入侵。 (2)不同对象的无菌操作方法(连线)：
(2)Βιβλιοθήκη 3．大肠杆菌的纯化培养 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基： 倒平板 计算 ―→________ ―→________ 称量 ―→ 溶化 ―→________ 灭菌 (2)纯化大肠杆菌的方法 ①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来 的肉眼可见的菌落，即可获得________ 。 较纯的菌种 接种 ②纯化大肠杆菌的关键步骤：________ 。 ③常用的微生物接种方法有两种： 连续划线的操作 a．平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面 ________， 将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 梯度稀释，然后将 b ．稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的________ 不同稀释度 ________的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
(4)实验流程 纤维素 的环境 土壤取样：富含________ ↓ 选择培养基 选择培养：用 ________培养，以增加纤维素分解菌的浓度 ↓ ________：制备系列稀释液 梯度稀释 ↓ 涂布平板：将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 ↓ 挑选产生________ 透明圈 的菌落
[能力排查· 试一试] 一、理解能力 1．判断下列有关微生物实验室培养叙述的正误。 (1)在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌( × ) (2)培养基分装到培养皿后进行灭菌( × ) (3)将转基因植物的叶片接种到无菌培养基上，应该进行严格的无 菌操作( √ ) (4)培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种成分( √ )
微生物的实验室培养技术 [核心知识] 1．培养基的类型及作用 划分 培养基种类 特点 用途 标准 液体培养基 不加凝固剂 工业生产 半固体 观察微生物的运动、分类 物理 加凝固剂， 培养基 鉴定 性质 如琼脂 微生物分离、鉴定、活菌 固体培养基 计数、保藏菌种
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(3)菌种的保藏
①短期保存： ________ 上 4℃保存，菌种易被污染或产生
变异。 ②长期保存：________中－20℃在冷冻箱中保藏。
为什么在倒平板时，等平板冷却后要将平板倒置？
二、土壤中分解尿素的细菌的分离和计数
1．菌种筛选：使用尿素是唯一氮源的选择培养基培养。
2 ． 统计菌落数目： 常用方法有 ________ 、显微镜直接计 数法。 3．细菌分离与计数的实验流程：土壤取样→配制 ________→微生物的培养与观察→细菌的计数。
地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
(4)在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿 底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生， 因此最好不要用这个平板培养微生物。
2．教材第18页平板划线操作的讨论
(1)为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种 环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的 微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划
1．教材第17页倒平板操作的讨论
(1)培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平 板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下 降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。
(2)为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 (3)平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的 湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好
[破题·分层揭秘密]
(一)明确解题思路
2019版高考生物一轮复习生物技术实践第2讲微生物的培养与应用课件
(1)图中步骤①称为________消毒法。步骤②是________。 (2)培养基中的蛋白胨可以为微生物提供________。进行步骤③操作时，应选 用下列中的哪种工具？________。为了避免杂菌污染，此步骤应在________ 附近进行。
(3)将接种后的培养基和作为对照的________________同时放入 37 ℃恒温培 养箱中，培养 36 小时。取出后统计各平板的菌落数，结果如下表所示。应 该选择其中稀释倍数为 ____________ 的平板进行计数，经过消毒后的牛奶 中，细菌数大约是____________/mL。 牛奶稀释倍数 平板 1 菌落数 平板 2 菌落数 平板 3 菌落数 102 87 83 85 103 10 12 10 104 1 1 0
(2)纯化大肠杆菌的方法 ①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见
较纯的菌种 。 的菌落，即可获得___________ 接种 。 ②纯化大肠杆菌的关键步骤：_____
平板划线 法接种获得的平板；下图乙可表示 ③接种方法：下图甲可表示用_________
用_____________ 稀释涂布平板 法接种获得的平板。
选修
第2讲
生物技术实践
微生物的培养与应用
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考点一 考点二 真题验收
微生物的实验室培养 微生物的分离与计数 感悟高考 淬炼考能
课时分层集训
考纲要求 1.微生物的分离和培养 2.某种微生物数量的测定 3.培养基对微生物的选择 作用
全国卷五年考情 2017· 卷ⅠT37,2016· 卷ⅠT39,2016· 卷ⅢT39,2015· 卷 ⅠT39,2014· 卷ⅠT39,2014· 卷ⅡT39,2013· 卷ⅡT39 2016· 卷ⅠT39,2014· 卷ⅡT39 2017· 卷ⅠT37,2016· 卷ⅢT39,2014· 卷ⅠT39,2013· 卷 ⅡT39
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高频 考 点 突 破
寻 本 源·················································基 础 牢
一、培养基的种类
划分 培养基种类
标准
特点
用途
物理 性质
液体培养基 固体培养基
不加凝固剂 工业生产
加凝固剂，如 微生物分离、
琼脂
鉴定等
划分 培养基种类
标准
特点
答案：D
典型 例 题 导 思
精 点 拨·················································明 技 巧
题型一 微生物的培养基的配制和应用 【例1】 如下所示为培养某种微生物的培养基的配 方，请回答：
成分
NaNO3 K2HPO4 KCl MgSO4·7H2O FeSO4 (CH2O) H2O 青霉素
3．实验流程 土壤取样：富含________的环境
选择培养：用________培养，以增加纤维素分解菌的 数量
梯度稀释
涂布平板：将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基 上
挑选产生透明圈的菌落：产生________的菌落周围 出现透明圈
点拨 (1)纤维素分解菌的选择培养基为液体培养基， 因培养基中无凝固剂，利用液体培养基以增加纤维素分解 菌的浓度。
用途
培养基中加入某 培养和分离出
种化学物质，用 特定微生物(如
来抑制不需要的 分离酵母菌和 用途 选择培养基
微生物的生长， 霉菌，可以在
促进所需要的微 培养基中加入
生物的生长
青霉素)
划分 培养基种类
标准
特点
用途
用途
鉴别培养基
根据微生物 的代谢特 点，在培养 基中加入某 种指示剂或 化学药品
高考生物一轮复习专题2微生物的培养与应用学案新人教版选修1
【高考新动向】1、微生物的分别和培育2、培育基对微生物的选择作用3、某种微生物数量的测定4、利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其余方面的应用【考纲全景透析】一、微生物的分别和培育1、微生物的营养：碳源、氮源、水、无机盐和生长因子。
1、培育基（ 1）观点：人们依据微生物对营养物质的不一样需求，配制出供其生长生殖的营养基质（ 2）成分：一般都含有水、碳源、氮源无机盐，还需知足不一样微生物生长对 pH、特别营养物质以及氧气的要求。
（3）分类：固体培育基：含凝结剂，如琼脂液体培育基：不含凝结剂2、无菌技术（1）含义：指在培育微生物的操作中，所有防备杂菌污染的方法（2）重点：防备外来杂菌的入侵（3）方法：消毒：煮沸消毒法，化学药剂消毒法，紫外线消毒法灭菌：灼烧灭菌，干热灭菌，高压蒸汽灭菌差别消毒和灭菌3、纯化大肠杆菌以及菌种的收藏（1）制作牛肉膏蛋白胨固体培育基方法步骤：计算、称量、熔解、灭菌、倒平板。
（2）纯化大肠杆菌①原理：在培育基大将细菌稀释或分别成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个细胞生殖而来的子细胞群体。
②方法：平板划线法、稀释涂布平板法。
（ 3）菌种的收藏①短期保留：将菌种接种到试管的固体斜面培育基上4℃保留，菌种易被污染或产生变异。
②长久保留：－20℃甘油管在冷冻箱中收藏。
二、土壤中分解尿素的细菌的分别与计数1、分别的原理（1）土壤中的细菌之所以能够分解尿素，是因为它们体内能合成脲酶。
这类物质在把尿素分解成无机物的过程中起催化作用。
（ 2）实验室中微生物的挑选应用的原理：人为供应有益于目的菌株生长的条件（包含营养、温度、pH等），同时克制或阻挡其余微生物生长。
2、统计菌落数目的方法稀释涂布平板法和显微镜直接计数。
3、细菌分别与计数的实验流程土壤取样→样品稀释→取样涂布→微生物培育→察看并记录结果→细菌计数三、分解纤维素的微生物的分别1、纤维素酶纤维素酶是一种复合酶，一般以为它起码包含三种组分，即 C1 酶、 CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。
高考生物一轮复习 专题2 微生物的培养与应用课件 新人教版选修1
基应进行灭菌处理,以避免造成污染。
二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
即时训练2自然界中的微生物往往是混杂生
长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯,然后进行数量的 测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验,请回答有关问题。 步骤如下: ①制备稀释倍数为102,103,104,105,106的系列稀释液。 ②为了得到更加准确的结果,应选用 法接种样品。
③适宜温度下培养。
结果分析: (1)测定的大肠杆菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几 种统计结果,与事实更加接近的是 A.一个平板,统计的菌落数是23 B.两个平板,统计的菌落数是22和26,取平均值24 C.三个平板,统计的菌落数分别是21,5和52,取平均值26 D.四个平板,统计的菌落数分别是21,30,24和25,取平均值25 。
解析:若对大肠杆菌进行计数,则需要用稀释涂布平板法接种样品。
(1)应选取多个菌落数相差不大的平板计数,取其平均值。(2)23.4÷0.2 ×106=1.17×108。(3)因为菌落可能由1个或多个细菌连在一起生长而 成,所以实际活菌数量要比测得的数量多。
三、分解纤维素的微生物的分离——纤维素分解菌的筛选
即时训练1科学家发现家蝇体内存在一种抗
菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗菌能力,因而受到了研究者 的重视。 (1)可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的抗菌特性。抗菌实验所用培 养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供 和 。
(2)分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养
一定时间后,比较两种培养基中菌落的 效果。 (3)细菌培养常用的接种方法有 用过的培养基应进行 处理。 和 。实验结束后,对使 ,确定该蛋白质的抗菌
3.实验操作
高考生物一轮复习专题 微生物的培养与应用高考预测新人教选修
微生物的培养与应用预测点1.微生物的实验室培养1.某校生物兴趣小组同学为了从某品牌酸奶中分离乳酸菌并检测其耐药情况，设计了如下实验流程(如图所示)。
据流程图分析回答：(1)配制细菌培养基：为了挑选到乳酸菌，必须在配制好的细菌培养基中特别加入一定量的碳酸钙，乳酸菌在________(生理过程)中产生的乳酸能与不溶性的碳酸钙生成可溶性的乳酸钙，从而在菌落周围形成溶钙圈。
从物理性质角度分析，这种培养基属于________(填“固体”或“液体”)培养基。
(2)灭菌：在利用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时，把锅内水加热煮沸，必须__________________________后，将锅密闭，继续加热以保证锅内气压上升为100 kPa，温度达到121℃。
灭菌后的培养基应适当冷却后，在酒精灯________倒平板。
(3)分离乳酸菌：用平板划线法将酸奶接种到细菌培养基上，在________(填“有氧”或“无氧”)条件下培养。
其中，______________________的菌落即为乳酸菌的菌落。
(4)乳酸菌耐药性检测：检测乳酸菌对青霉素、四环素的耐药性。
①准备培养基：取三组细菌固体平板培养基并编号1、2、3，依次加入等量的__________________________________________。
②接种：向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。
③培养并观察：将接种后的三组培养基和一个__________________都置于适宜温度等条件下培养若干天，观察比较培养基中菌落生长情况。
④结果分析。
Ⅰ.若1、2、3号培养基上菌落生长情况相同，则乳酸菌既能抗青霉素，也能抗四环素。
Ⅱ.若________________________，则乳酸菌能抗青霉素，不抗四环素。
Ⅲ.若________________________，则乳酸菌不抗青霉素，能抗四环素。
Ⅳ.若________________________，则乳酸菌既不抗青霉素，也不抗四环素。
高考生物一轮复习 2微生物的培养与应用配套课件 新人教版选修1
课 时
等
规 范
训
练
培养基中加入某种化
选择 学物质，用来抑制不 培养和分离出特定微生物
基 础
用
知 识
培养 需要的微生物的生 (如分离酵母菌和霉菌，可
梳 理
途
基 长，促进所需要的微 以在培养基中加入青霉素)
感 悟
考
点
生物的生长
透 析
高
鉴别不同种类的微生物，如 根据微生物的代谢特
考 命 题
鉴别
用伊红-美蓝培养基鉴别饮
感 悟 考 点 透 析
高 考 命 题 把 脉
课 时 规 范 训 练
基 础 知 识 梳 理
感
悟
考
点
透
为什么在倒平板时，等平板冷却后要将平板倒置？
析
高
考
提示： 将平板倒置的目的是防止培养皿盖上的水珠滴落到平 命 题
把
板上造成污染。
脉
课
时
规
范
训
练
基
础
下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请回答相关问题：
基 础 知 识 梳 理
感 悟 考 点 透 析
高 考 命 题 把 脉
课 时 规 范 训 练
基
础
知
识
梳
[考纲展示]
理
感
悟
1．微生物的分离和培养
考 点
透
2．某种微生物数量的测定
析
高
考
3．培养基对微生物的选择作用
命 题
把
4．利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的 脉 课
时
应用
规 范
训
练
基
础
知 识
高考生物一轮复习 专题2微生物的培养与应用精品课件 新人教版选修1
因子
的微量有机物 成分
1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是
(
)
A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌
B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板
D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板
解析：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，应先根据需要计算各成分用 量，然后称量、溶化、灭菌、倒平板。 答案：C
[答案] (1)液体
选择
(2)异养型
(3)(CH2O)
酵母菌或霉菌
调整pH 灭菌 50℃ 酒精灯火焰 刚果红 红
(4)青霉素和(CH2O) 透明圈
琼脂和纤维素粉
1．培养基的类型 划分 培养基 特点 用途
标准
种类
液体培
物理 性质
养基 固体培
不加凝固剂
加凝固剂，如
工业生产
养基
琼脂
微生物分离、鉴定等
划分
KCl
MgSO4· 7H2O FeSO4 CH2O H2O
0．5 g
0． 5 g 0．01 g 30 g 1 000 mL
青霉素
0．1万单位
(3)该培养基中的碳源是________。不论何种培养基，在各 成分都溶化后分装前，要进行的是________和________； 倒平板时，一般需冷却至________左右，在________附近 操作。 (4)若用该培养液培养纤维素分解菌，应除去的物质是_____， 至少应加入的物质是________，为检测纤维素分解菌的存 在与否还应加入________，形成________色复合物，若产 生________，则证明有纤维素分解菌存在。
3．实验操作 (1)牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备 计算→ 称量 →溶化→灭菌→ 倒平板 。
【优化方案】高考生物一轮复习 专题2 微生物的培养与应用课件 新人教选修1
对点突破
3．(2013·山东青岛调研)在农田土壤的表层自生固氮菌较
多，用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养，
可将自生固氮菌与其他细菌分开,对培养基的要求是( )
①加抗生素 ②不加抗生素 ③加氮素 ④不加氮素
⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦37 ℃恒温箱中培养
⑧28～30 ℃温度下培养
A．①③⑤⑦
B．②④⑥⑧
C．②④⑤⑧
D．①④⑥⑦
解析：选C。细菌对抗生素敏感，故培养基中应不加抗生
素；自生固氮菌有固氮功能，故培养基中不需要加氮素；
自生固氮菌是异养的，应该加葡萄糖，其生长繁殖的适宜
温度是28～30 ℃。
4．下列关于微生物分离和培养的叙述，错误的是( ) A．微生物培养前，需对培养基进行消毒 B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法 C．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度 D.分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中的唯一氮源 解析：选A。微生物培养前，需对培养基进行灭菌，而不是 消毒；测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法；分离 土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度，因为不同的微 生物在土壤中的含量不同；分离能分解尿素的细菌，要以尿 素作为培养基中的唯一氮源。
2.几种典型微生物的筛选方法 (1)培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。 (2)培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。 (3)培养基中缺乏氮源时，可以分离固氮微生物。 (4)当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离 效果。如当石油是唯一碳源时，可以抑制不能利用石油的微 生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，达到分离能消 除石油污染的微生物的目的。 (5)改变微生物的培养条件，也可以达到分离微生物的目的， 如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。
高考生物一轮复习预测选修微生物的培养与应用
高效演练·创新预测预测点1.微生物的实验室培养1.为探究一种新型抗生素的抑菌效果，研究人员在培养基上打出直径为3 mm的孔，在孔中加入一定浓度的该新型抗生素，并在培养基上接种某细菌，经过一定时间培养后，可以在孔的周围观察到一圈的清晰区，测量清晰区的直径(如图所示)。
改变孔中的抗生素浓度和接种的细菌种类重复实验，得到的数据如下表。
分析回答：(1)该实验中将细菌接种于培养基上的方法是________，常用的接种工具是________。
(2)培养基上的清晰区形成的原因是__________________。
(3)要用该新型抗生素控制大肠杆菌感染，该新型抗生素的最适浓度为________ μg/mL。
在控制白色葡萄球菌方面，该新型抗生素具有抑菌作用的最低浓度在________μg/mL左右。
(4)某人感染枯草芽孢杆菌而患病。
欲使用25 μg/mL该新型抗生素治疗。
该做法合理吗？________。
理由是________________________________(答出一点即可)。
【解析】(1)该实验要使细菌均匀接种到培养基表面，应采用稀释涂布平板法，所用的接种工具是涂布器。
(2)由于孔内加入了该新型抗生素，就会在孔周围形成无菌的抑菌圈。
(3)由题表可知，对大肠杆菌来说，该新型抗生素的最适浓度为15 μg/mL。
对白色葡萄球菌来说，7.5 μg/mL的该新型抗生素才出现抑菌圈，因此在控制白色葡萄球菌方面，该新型抗生素具有抑菌作用的最低浓度在7.5 μg/mL左右。
(4)题表中没有数据显示25 μg/mL该新型抗生素的效果，不能确定25 μg/mL该新型抗生素的效用比20 μg/mL时高。
而且高浓度的抗生素可能有严重的副作用，滥用抗生素也可能会加速细菌产生抗生素抗性。
答案：(1)涂布平板法涂布器(2)抗生素抑制细菌生长形成无菌的抑菌圈(3)15 7.5(4)不合理①没有证据显示25 μg/mL该新型抗生素的效果比20μg/mL该新型抗生素高；②高浓度的抗生素可能有严重的副作用；③滥用抗生素可能会加速细菌产生抗生素抗性(答出一点即可)预测点2.微生物的选择培养2.硝化细菌是亚硝化细菌和硝化细菌的统称。
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2019版高考生物一轮复习专题2 微生物的培养与应用高考预测新人教版选修
1
预测点1.微生物的实验室培养
1.某校生物兴趣小组同学为了从某品牌酸奶中分离乳酸菌并检测其耐药情况，设计了如下实验流程(如图所示)。
据流程图分析回答：
(1)配制细菌培养基：为了挑选到乳酸菌，必须在配制好的细菌培养基中特别加入一定量的碳酸钙，乳酸菌在________(生理过程)中产生的乳酸能与不溶性的碳酸钙生成可溶性的乳酸钙，从而在菌落周围形成溶钙圈。
从物理性质角度分析，这种培养基属于________(填“固体”或“液体”)培养基。
(2)灭菌：在利用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时，把锅内水加热煮沸，必须__________________________后，将锅密闭，继续加热以保证锅内气压上升为100 kPa，温度达到121℃。
灭菌后的培养基应适当冷却后，在酒精灯________倒平板。
(3)分离乳酸菌：用平板划线法将酸奶接种到细菌培养基上，在________(填“有氧”或“无氧”)条件下培养。
其中，______________________的菌落即为乳酸菌的菌落。
(4)乳酸菌耐药性检测：检测乳酸菌对青霉素、四环素的耐药性。
①准备培养基：取三组细菌固体平板培养基并编号1、2、3，依次加入等量的__________________________________________。
②接种：向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。
③培养并观察：将接种后的三组培养基和一个__________________都置于适宜温度等条件下培养若干天，观察比较培养基中菌落生长情况。
④结果分析。
Ⅰ.若1、2、3号培养基上菌落生长情况相同，则乳酸菌既能抗青霉素，也能抗四环素。
Ⅱ.若________________________，则乳酸菌能抗青霉素，不抗四环素。
Ⅲ.若________________________，则乳酸菌不抗青霉素，能抗四环素。
Ⅳ.若________________________，则乳酸菌既不抗青霉素，也不抗四环素。
【解析】(1)乳酸菌属于异养厌氧细菌，细胞呼吸方式为无氧呼吸，产物是乳酸，要在培养基上形成菌落，则所用的培养基应为固体培养基。
(2)在利用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时，锅内水加热煮沸后，必须将其中冷空气彻底排除后，才能将锅密封，继续加热灭菌，否则灭菌不彻底。
冷却后，为防止污染，应该在酒精灯火焰附近倒平板。
(3)乳酸菌为厌氧菌，需在无氧条件下培养。
由于乳酸菌无氧呼吸产生的乳酸能与不溶性的碳酸钙生成可
溶性的乳酸钙，从而在菌落周围形成溶钙圈，因此周围存在溶钙圈的菌落即为乳酸菌的菌落。
(4)①根据等量原则，应该分别取等量的青霉素、四环素和无菌水加入三组无菌培养基中。
③根据对照原则，应该将接种后的三组培养基和一个未接种的培养基都置于适宜温度等条件下培养若干天作为对照实验。
④如果乳酸菌不抗某种抗生素，则不能在含有该抗生素的培养基上正常生长；如果乳酸菌抗某种抗生素，则能在含有该抗生素的培养基上正常生长。
答案：(1)无氧呼吸固体
(2)将其中的冷空气彻底排除火焰附近
(3)无氧周围形成溶钙圈
(4)①青霉素、四环素和无菌水③未接种的培养基
④Ⅱ.1、3号培养基上菌落生长情况相同，2号培养基上菌落生长不正常Ⅲ.2、3号培养基上菌落生长情况相同，1号培养基上菌落生长不正常Ⅳ.3号培养基上菌落生长情况正常，1、2号培养基上菌落生长不正常
预测点2.分解尿素的细菌的分离与计数
2.某生物兴趣小组同学为探究牛的瘤胃中是否含有分解尿素的细菌，设计了以下实验。
据图分析回答：
(1)从营养物质的组成分析，图中所用培养基共有的特点是_________________。
(2)为了确定尿素分解菌的菌落，除在培养基中加入______________外，还需在培养基中添加__________作为指示剂，周围有________菌落即为分解尿素的细菌，理由是____________________________________。
(3)为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数，将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24～48 h，观察并统计尿素分解菌的菌落数，结果如下表，其中______倍的稀释比较合适。
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【解析】(1)要筛选分解尿素的细菌，应以尿素为唯一氮源。
(2)要在培养基上长出菌落，应将培养基制成固体培养基，即在液体培养基上添加琼脂(凝固剂)。
分解尿素的细菌将尿素分解成氨，氨会使培养基碱性增强，pH升高，指示剂酚红变红，因此通过在培养基中加入酚红指示剂，检测培养基pH的变化来判断尿素是否被分解。
(3)观察并统计菌落数，应选30～300的进行统计，故选106或105倍的稀释比较合适。
答案：(1)以尿素为唯一氮源
(2)琼脂(凝固剂) 酚红红色环带(变红) 微生物产生的脲酶能将尿素分解成氨，氨会使培养基的pH升高，使酚红指示剂变红(3)106或105
预测点3.纤维素分解菌的分离
3.下图是纤维素的分子组成示意图，纤维素被称为“第七大营养素”。
食物中的纤维素对人体的健康有着重要的作用。
但纤维素不能被人体吸收，因为人体缺乏分解纤维素的酶。
据图回答下列问题：
(1)从纤维素的分子组成分析，纤维素是一种________。
能使图中化学键a断裂的酶是____________。
(2)根据用途划分，从土壤中筛选纤维素分解菌所用的培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基，该培养基的特点是________________。
配制好的培养基还应进行灭菌处理，一般采用的方法是________。
(3)牛、羊等食草动物也能利用纤维素，是因为其胃内含有纤维素分解菌。
若从牛的胃中分离出纤维素分解菌，与从土壤中分离出的纤维素分解菌相比较，除了要调整培养基的pH外，还必须控制的条件是______________。
【解析】(1)纤维素是一种多糖，可以被纤维素酶水解成葡萄糖。
其中C1酶、C X酶可以将纤维素分解为纤维二糖，葡萄糖苷酶可以将纤维二糖水解为葡萄糖。
其中图中化学键a断裂后其产物就是葡萄糖，因此能使化学键a断裂的酶是葡萄糖苷酶。
(2)从土壤中筛选纤维素分解菌的过程称为微生物的分离，用于筛选纤维素分解菌的培养基属于选择培养基。
培养基灭菌一般采用高压蒸汽灭菌法。
(3)牛胃中纤维素分解菌生活的条件没有氧气，所以要在无氧条件下进行培养。
答案：(1)多糖葡萄糖苷酶
(2)选择富含纤维素高压蒸汽灭菌法
(3)保持无氧环境。