Transwell 小室 细胞粘附实验

Transwell 小室细胞粘附实验
1）提前接种细胞并对细胞做不同处理（如转染或加药）。

此处选取1640培养基，具体情况视细胞种类不同而定。

2）实验前一天，准备铺胶，以每96孔板50μL量计算所需胶体积。

将matrigel 与1640培养基等体积混匀铺于96孔板，于超净台吹干过夜。

实验当天加100μL PBS/孔，1 h后用移液枪吸弃，洗去残胶。

3）将细胞用胰酶消化，血细胞板计数细胞密度，调整成50,000个细胞/mL，加到铺好胶的96孔板，每孔加100 μL，每种处理重复3个孔。

4）于细胞培养箱培养1 h后吸弃培养基，PBS洗两遍以去除未粘附细胞。

5）用100μL每孔甲醇固定细胞15分钟，吸出甲醇后PBS洗两遍。

6）用100μL每孔DAPI染色细胞15分钟，吸出染料后PBS洗两遍。

7）荧光倒置显微镜下计数不同处理下粘附的细胞。