细胞凝集反应实验

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凝集实验报告

凝集实验报告

凝集实验报告篇一:细胞凝集反应实验报告细胞生物学实验报告一.二.实验名称:细胞凝集反应实验原理:细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构,脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分支状糖外被。

目前认为:细胞间的联系,细胞的生长和分化,免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分支状糖分子有关。

凝集素(lectin)是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。

凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。

凝集素是指一种从各种植物,无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白,因其能凝集红血球(含血型物质),故名凝集素。

常用的为植物凝集素(Phytoagglutin, PNA),通常以其被提取的植物命名,如刀豆素A(Conconvalina,ConA)、麦胚素(Wheat germ agglutinin, WGA)、花生凝集素(Peanut agglutinin, PNA)和大豆凝集素(Soybean agglutinin, SBA)等,凝集素是它们的总称。

凝集素不是来源或参与免疫反应的产物,它们具有的某些“亲合”特性,能被免疫细胞化学技术方法所应用。

血型鉴别实验,也是凝集反应的一种。

三.实验用品:土豆块茎显微镜,粗天平,载玻片,滴管2支,离心管2支PBS缓冲液:称取NaCl7.2g,Na2HPO41.48g,KH2PO40.43g,加蒸馏水,定容至1000ml,调pH值到7.2.4.2%的红细胞四.实验步骤:1. 称取土豆去皮块茎2g,加10mlPBS缓冲液,浸泡2h,浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素。

2. 以无菌方法抽取兔子静脉血液(加抗凝剂),加生理盐水3ml,在1000r/min,离心5min,重复3次离心,最后按压积红细胞体积用生理盐水配成1%红细胞液。

3. 分别用滴管吸取土豆凝集素和1%红细胞液各一滴,置双凹片左孔内,充分混匀。

细胞凝集反应实验报告

细胞凝集反应实验报告

细胞生物学实验报告一.实验名称:细胞凝集反应二.实验原理:细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构,脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分支状糖外被.目前认为:细胞间的联系,细胞的生长和分化,免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分支状糖分子有关。

凝集素(lectin)是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。

凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。

凝集素是指一种从各种植物,无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白,因其能凝集红血球(含血型物质),故名凝集素。

常用的为植物凝集素(Phytoagglutin, PNA),通常以其被提取的植物命名,如刀豆素A(Conconvalina,ConA)、麦胚素(Wheat germ agglutinin, WGA)、花生凝集素(Peanut agglutinin, PNA)和大豆凝集素(Soybean agglutinin, SBA)等,凝集素是它们的总称。

凝集素不是来源或参与免疫反应的产物,它们具有的某些“亲合”特性,能被免疫细胞化学技术方法所应用。

血型鉴别实验,也是凝集反应的一种。

三.实验用品:土豆块茎显微镜,粗天平,载玻片,滴管2支,离心管2支PBS缓冲液:称取NaCl7.2g,Na2HPO41。

48g,KH2PO40。

43g,加蒸馏水,定容至1000ml,调pH值到7.2.4。

2%的红细胞四.实验步骤:1.称取土豆去皮块茎2g,加10mlPBS缓冲液,浸泡2h,浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素。

2.以无菌方法抽取兔子静脉血液(加抗凝剂),加生理盐水3ml,在1000r/min,离心5min,重复3次离心,最后按压积红细胞体积用生理盐水配成1%红细胞液。

3.分别用滴管吸取土豆凝集素和1%红细胞液各一滴,置双凹片左孔内,充分混匀。

4.同时分别用滴管吸取PBS缓冲液和1%的红细胞悬液各一滴,置双凹片右孔内,充分混匀,做对照实验。

实验一 细胞凝集反应

实验一 细胞凝集反应

实验一细胞凝集反应1.实验目的1.1了解细胞膜的表面结构。

1.2掌握凝集素促使细胞凝集的原理。

1.3学习研究细胞凝集反应的方法。

1.4掌握耳缘静脉兔子取血的方法。

2.实验原理凝集素是一类含糖(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。

目前已发现近千种植物中含有凝集素,在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物,特能提的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素。

常用的为植物凝集素,通常以其被提取的植物命名,如伴刀豆凝集素A、麦胚凝集素、花生凝集素和大豆凝集素等,凝集素是他们的总称。

在细胞表面,组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链,形成细胞外被(又称为糖萼)。

凝集素能与细胞外被中的糖分子连接,在细胞膜结构间形成“桥”,从而引起细胞凝集。

凝集素引起的血细胞凝集,其细胞膜结构没有发生变化,与血液凝固中发生的复杂生物化学过程完全不同;另外,凝集素能与不同的糖蛋白特异性结合,加入域凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集,但是凝集素能与不同的糖蛋白特异性结合,加入与凝集素互补的的糖可以抑制细胞的凝集,但是凝集素不是来源或参与免疫反应的产物,因此,Ponder(1983)提出应称“凝集素组织化学”而不能称为“凝集素免疫组织化学”。

凝集素使细胞凝集与血小板凝血的原理不同。

当人体受伤流血时,血小板就迅速向血管破裂处大量聚集。

它们首先释放肾上腺素、5-羟色胺等具有收缩血管作用的物质,使受损血管不同程度地紧闭,减少血流量。

然后血小板一旦与非血管内膜表面接触,便会迅速扩展,颗粒向中央集中,并伸出多个伪足,转变成树突型血小板,大部分颗粒随即释放,血小板之间融合,成为粘性变形血小板。

粘性变形血小板在伤口大量堆积粘附形成血栓,堵住伤口,制止流血。

如果伤口很大那还要与纤维蛋白一起封堵。

血小板凝血是一个生理反应,要注意与凝集素使细胞凝集相区分。

3.实验用品3.1材料家兔3.2试剂 PBS缓冲液土豆凝集素4.实验步骤4.1取土豆去皮块茎2克,加10mlPBS缓冲液,浸泡24小时,浸出的粗体液中即含有可溶性土豆凝集素。

细胞凝集反应

细胞凝集反应

细胞凝集反应一、实验目的1.了解细胞膜的表面结构2.掌握凝集素促进细胞凝集的方法3.学习研究细胞凝集反应的方法二、实验原理凝集素是一类可逆结合特异糖基的蛋白质,能与细胞外被的寡糖链相连接,使细胞发生凝集:①细胞质膜外表面的一层黏性多糖物质构成的,细胞被在细胞间的联系和识别、细胞的生长分化、免疫反应及肿瘤发生等过程中发挥着重要作用;②动物细胞表面的糖蛋白、糖脂中的糖链伸向膜表面,它们是细胞识别、细胞免疫及细胞接触抑制现象的必要组分;③凝集素是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一性结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。

凝集使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果。

④凝集素与糖分子结合有一定的专一性和结合价,并与细胞膜上受体的分布有关。

三、实验用品1 .器材: 显微镜、天平、载玻片、滴管、离心管、烧杯、10ml移液管、试管、试管架2 .材料: 土豆块茎3 .试剂: 兔子血、抗凝血剂、PBS、土豆块茎、生理盐水和其他等渗液。

四、实验步骤1.去皮土豆块茎2g,加10mLPBS缓冲液浸泡24h,所得粗提液中既含有可溶性土豆凝集素.2.抽取兔静脉血1mL加抗凝剂,加入3mL生理盐水,1000r/min离心5min,重复洗涤三次。

按红细胞压积配成1%红细胞悬浊液。

3.分别用滴管吸取土豆凝集素和1%兔血红细胞各一滴,置于双凹片左孔混匀;吸取PBS缓冲液各一滴置于双凹片右孔混匀。

4.摇晃5-10min观察,并以低倍镜镜检。

五、实验结果如图1可看到,混合了土豆凝集素的兔血红细胞(右侧)聚集成块,周围液体较澄清;而混合了PBS缓冲溶液的兔血红细胞(左侧)未发生凝集,液体浑浊。

低倍镜下镜检(图2)可看到,凝集了的细胞聚成一簇不规则的团,而未发生凝集的红细胞很均匀。

图1 反应后的双凹片图2a 未发生凝集的细胞图2b发生凝集的细胞图2 低倍镜(*10)下混合了了土豆凝集素(右)和PBS缓冲溶液(左)的兔血红细胞观察六、分析与讨论1.为什么对照组有PBS液作对照呢?答:因为凝集素中本身含PBS缓冲液,当含本身凝集素是不含PBS的,只是因为本实验中凝集素的提取时用到了PBS。

细胞凝集反应实验(共10张PPT)

细胞凝集反应实验(共10张PPT)

1 . 2%鸭血红细胞0悬.液1制7备mol/L醋酸铵、0.17mol/L硝酸铵、
0.32mol/L葡萄糖、0.32mol/L乙醇、0.32mol/L
丙酮等6种溶液进行同样实验,步骤同上。
在低渗液中,细胞很快吸水而胀裂,称为溶血异糖基的蛋白质,能与细胞外被的寡糖链相连接,使细胞发生凝集。
17mol/L氯化钠、0. 新鲜鸭血加抗凝剂,生理盐水洗5次,每次2000r/min,离心5min,按红细胞压积用生理盐水配成2%鸭血红细胞悬液。
– 结果溶血,溶液变透明 在等渗液中,由于有些溶质会进入红细胞内、引起细胞渗透压升高,细胞也会吸水胀裂,由于各种物质透入细胞的速度不同,溶血的时间
茎、0.17mol/L氯化钠和其他等渗液。
四、实验步骤
• (一) 细胞凝集反应 • 1 . 2%鸭血红细胞悬液制备 • 新鲜鸭血加抗凝剂,生理盐水洗5次,每次2000r/min,离心5
min,按红细胞压积用生理盐水配成2%鸭血红细胞悬液。
• 2 .土豆凝集素制备
• 土豆2克,加10ml PBS,浸泡2h • 3 .细胞凝集反应
细胞凝集反应实验
一、实验目的
• 1 .了解细胞膜的表面结构; • 2 .了解细胞膜的渗透性及各种物质进入细
胞膜的速度。
二、实验的原理
• 1、细胞凝集反应
• 凝集素是一类可逆结合特异糖基的蛋白质,能与细 胞外被的寡糖链相连接,使细胞发生凝集。
• 2、细胞膜的渗透性
• 在低渗液中,细胞很快吸水而胀裂,称为溶血。在等渗液
不同。
蒸馏水
10ml
• 2 .等渗溶液 1 .了解细胞膜的表面结构;
1 .了解细胞膜的表面结构;
土豆凝集素1滴、2%鸭血红细胞液1滴

细胞反应凝集实验报告

细胞反应凝集实验报告

一、实验目的1. 了解细胞凝集反应的基本原理。

2. 掌握细胞凝集反应的实验操作方法。

3. 观察和分析细胞凝集现象。

二、实验原理细胞凝集反应是指细胞在特定条件下,由于细胞膜表面分子间的相互作用,导致细胞相互聚集的现象。

凝集反应在医学、生物学等领域具有重要的应用价值,如血型鉴定、病原体检测等。

本实验采用凝集素作为凝集剂,通过观察红细胞凝集现象,了解细胞凝集反应的基本原理。

三、实验材料与用品1. 试剂:红细胞悬液、PBS缓冲溶液、0.9%氯化钠溶液、不同浓度的凝集素溶液、蒸馏水。

2. 仪器:离心机、移液器、试管、显微镜等。

四、实验步骤1. 准备红细胞悬液:将一定量的红细胞加入适量的生理盐水中,混匀后离心,弃去上清液,加入适量PBS缓冲溶液重悬细胞。

2. 设置实验组:取3支试管,分别加入等量的红细胞悬液。

3. 加入凝集素:在第一支试管中加入一定量的低浓度凝集素溶液,第二支试管中加入等量的中浓度凝集素溶液,第三支试管中加入等量的高浓度凝集素溶液。

4. 观察细胞凝集现象:静置一段时间后,观察各试管中红细胞的凝集情况,记录结果。

5. 加入蒸馏水:取3支新的试管,分别加入等量的红细胞悬液。

6. 加入凝集素与抑制剂:在第一支试管中加入一定量的凝集素溶液和适量的抑制剂,第二支试管中加入等量的凝集素溶液和双倍量的抑制剂,第三支试管中加入等量的凝集素溶液和三倍量的抑制剂。

7. 观察细胞凝集现象:静置一段时间后,观察各试管中红细胞的凝集情况,记录结果。

五、实验结果与分析1. 实验组:随着凝集素浓度的增加,红细胞凝集现象逐渐明显。

低浓度凝集素溶液中红细胞凝集较少,中浓度凝集素溶液中红细胞凝集较多,高浓度凝集素溶液中红细胞几乎全部凝集。

2. 抑制剂组:在加入抑制剂后,红细胞凝集现象明显减弱。

当抑制剂浓度为凝集素浓度的1倍时,红细胞凝集现象减弱;当抑制剂浓度为凝集素浓度的2倍时,红细胞凝集现象进一步减弱;当抑制剂浓度为凝集素浓度的3倍时,红细胞几乎不发生凝集。

细胞凝集试验报告

细胞凝集试验报告

细胞凝集反应实验报告【摘要】细胞凝集素可以将不同的细胞粘连在一起,在显微镜下可以观察到最终形成大的细胞团块,可以观察到细胞的凝集现象。

通过不同的变量,控制细胞凝集反应因素,观察细胞凝集程度。

【关键字】血细胞凝集素凝集反应【背景介绍】细胞凝集指细胞与细胞之间通过某种凝集素的作用而相互粘连在一起的现象,最终形成大的细胞团块,在不用显微镜时即可用肉眼看到的明显的现象。

早在1896年,Widal就利用伤寒患者的血清与伤寒杆菌发生特异性凝集的现象,有效地诊断伤寒病。

至1900年,Landsteriner在特异性血凝现象的基础上发现了人类血型,并于1930年获得了诺贝尔奖。

凝集实验灵敏度高,方法简便,迄今已成为通用的免疫学实验技术,广泛应用于临床检验。

凝集素是一种能够与糖类物质特异性结合的糖蛋白,具有一个以上同糖结合的位点,因此能够参与细胞识别和粘连,从而将不同的细胞联系起来。

常见的凝集素有刀豆素A、麦胚素、花生凝集素、大豆凝集素等。

凝集素主要的作用就是凝集细胞和刺激细胞分裂,在细胞间形成“桥”的作用,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。

细胞的凝集与细胞的细胞膜有关,细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构,脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被,目前普遍认为,细胞间的联系,以及细胞的生长分化,免疫反应等都与细胞表面的糖蛋白有关。

细胞凝集的作用很多,机体免疫中反应中,细菌等颗粒性病原体会与凝集素结合而产生凝集反应,从而被更好的清除。

细胞凝集在实际中应用广泛,在临床上血细胞的凝集作用可用于血型鉴定,同时凝集素可以作为饲料添加剂,帮助抵御感染。

【实验材料】1、试剂:土豆凝集素(已制备好)、2%兔血红细胞悬液、PBS缓冲液、生理盐水。

2、仪器:移液管、离心管、离心机、有凹坑的载玻片、带刻度的试管若干、显微镜。

【实验方法】1、检查实验所用的仪器是否完备,完好,准备实验;2、土豆切片,取2g放入10ml的PBS缓冲液中浸泡2h,获取土豆凝集素(此步骤已有老师准备好);3、梯度稀释制备不同浓度的土豆悬浮液:取1ml的土豆凝集素悬浮液原液于其中一只试管中,并编号1×;另取0.5ml的土豆悬浮液原液于另一只试管中,加入0.5ml的PBS缓冲液,并编号0.5×;再去一只试管,加入1ml的PBS缓冲液,并编号0×;4、取1ml已制备好的2%的兔血细胞悬液,通过系列稀释将血细胞悬液制备成不同浓度:在1ml的试管上编号为2%;在标号2%的试管中取0.5ml于另一只试管中,在试管中加入0.5ml生理盐水,混合均匀并编号1%;在1%的试管中取0.5ml的细胞悬液于另一只试管中,并加入0.5ml的生理盐水,混合均匀编号0.5%;(在实验时由于各方面原因,误将已制备好的2%兔细胞悬液当做兔的静脉血,而加入3ml 的生理盐水,进行离心分离,从而重复实验不必要的步骤,需要在以后实验时多注意老师讲解,准备好再进行实验,以免浪费时间)5、按如下表所示,用移液管取一滴凝集素或PBS液于载玻片凹坑内,再加一滴血细胞悬液,旋转混合摇匀,在加入血细胞悬液后即开始计时,观察细胞凝集需要多长时间,并平行三次,记录所需时间。

细胞的凝集反应 实验报告

细胞的凝集反应 实验报告

细胞生物学实验报告细胞的凝集反应(1)实验目的:(2)了解细胞膜的表面结构(3)掌握凝集素促使细胞凝集的原理(4)实验用品:(5)仪器及器材: 离心机、显微镜、镊子、注射器、离心管、滴管、双凹载玻片等(6)实验药品: PBS缓冲液、抗凝剂、生理盐水2.实验材料: 兔血、土豆去皮块茎(1)实验原理:(2)细胞质膜是由蛋白质不同程度镶嵌在脂双层中所形成的动态流动结构, 蛋白质和脂类分子又与寡糖链结合为糖蛋白和糖脂分子, 糖蛋白和糖脂分子伸至细胞表面的分枝状寡糖链在质膜表面形成细胞外被(又称为糖萼)。

许多研究结果表明:细胞间的分子识别、细胞的生长和分化、免疫反应和肿瘤发生等均与细胞外被(分枝状寡糖链)有关。

(3)凝集素是一类可逆结合特异糖基的含糖蛋白质(少数例外), 能与细胞外被的寡糖链相连接, 使细胞发生凝集。

凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接, 在细胞间形成桥的结果。

加入与凝集素互补的糖分子可以抑制细胞间的凝集反应。

(4)细胞凝集素还有促细胞分裂的作用。

(5)实验步骤:(6)取去皮土豆块茎2支, 加入到10mL PBS缓冲液中。

浸泡2小时后, 浸出的粗提取液中即含土豆凝集素。

(7)在兔的耳缘静脉处抽取兔血2mL(加抗凝剂), 再加入生理盐水3mL, 放入离心机中。

(8)离心①把离心管放入离心机, 以1000r/s离心5分钟。

②重复上述操作一次(9)按沉淀压积的红细胞体积用生理盐水配成2%红细胞悬液3.在双凹载玻片的左孔加入土豆凝集素和2%的红细胞悬液各1滴;在右孔内加入PBS缓冲液和2%的红细胞悬液各1滴。

用手摇晃载玻片, 观察现象。

①实验结果:②刚开始摇晃时, 双凹载玻片左侧细胞出现凝集现象, 呈沙粒状, 而细胞没有凝集。

③双凹载玻片上两种细胞对比④显微镜下左侧细胞出现沙粒状的凝集现象①继续摇晃, 双凹载玻片左侧细胞凝集现象更加明显, 红细胞聚成小颗粒;右侧细胞仍没有发生凝集现象。

②双凹载玻片上两种细胞的对比③显微镜下左侧细胞出现颗粒状的凝集现象4.分析与讨论(1)结果分析: 双凹片右侧细胞其对照作用, 它没有发生凝集, 说明血浆中的物质不能使细胞发生凝集;而双凹片左侧的细胞发生凝集, 说明使细胞发生凝集的是土豆凝集素。

红细胞凝集实验报告

红细胞凝集实验报告

一、实验目的1. 了解红细胞凝集反应的基本原理。

2. 掌握玻片凝集实验的操作步骤。

3. 通过实验观察红细胞凝集现象,验证ABO血型鉴定原理。

二、实验原理红细胞凝集反应是指颗粒性抗原(如细菌、红细胞等)与相应的抗体结合,在适量电解质(通常是0.85N生理盐水)存在下,形成肉眼可见的凝集现象。

本实验采用玻片凝集法,通过观察红细胞与相应抗体的凝集反应,判断受试者的ABO血型。

三、实验材料1. 实验试剂:抗A、抗B血清,O型血清,生理盐水。

2. 实验器材:显微镜、玻片、滴管、显微镜载物台、吸管等。

四、实验步骤1. 取两片玻片,分别标记为“实验”和“对照”。

2. 在“实验”玻片上滴加一滴受试者血液,再滴加一滴抗A血清。

3. 在“对照”玻片上滴加一滴受试者血液,再滴加一滴生理盐水。

4. 混匀后,将玻片置于显微镜载物台上观察。

5. 观察红细胞在抗A血清中的凝集现象,并与生理盐水对照组进行对比。

6. 重复上述步骤,分别加入抗B血清和O型血清,观察红细胞在抗B血清和O型血清中的凝集现象。

7. 根据凝集结果,判断受试者的ABO血型。

五、实验结果1. 在抗A血清中,受试者红细胞发生凝集现象,而在生理盐水对照组中无凝集现象,表明受试者为A型血。

2. 在抗B血清中,受试者红细胞无凝集现象,而在O型血清中发生凝集现象,表明受试者为B型血。

3. 在抗A血清和抗B血清中,受试者红细胞均无凝集现象,在O型血清中发生凝集现象,表明受试者为AB型血。

4. 在抗A血清、抗B血清和O型血清中,受试者红细胞均发生凝集现象,表明受试者为O型血。

六、实验讨论1. 本实验通过观察红细胞凝集现象,验证了ABO血型鉴定原理。

红细胞凝集现象是由于抗原抗体反应导致的,当抗原与相应抗体结合时,红细胞会形成肉眼可见的凝集现象。

2. 实验过程中,需要注意控制实验条件,如温度、pH值等,以确保实验结果的准确性。

3. 本实验操作简单,易于掌握,但实验结果易受人为因素影响,如操作不规范、试剂质量等。

实验十一细胞凝集反应

实验十一细胞凝集反应

三、实验用品
1. 材料
土豆块茎、家兔。
2. 器具:
显微镜、离心机、托盘天平、研钵、剪刀、离心管、细滴管、
载片、盖片。
3. 试剂:
PBS缓冲液:NaCl 7.2 g、Na2HPO4 1.48 g、KH2PO4 0.43 g,加蒸馏水,定容至1 L,调pH至7.2。 1%肝素液:0.1 g肝素溶解于10 mL 0.9%氯化钠溶液中。
1. 绘图简图表示血细胞凝集过程,并说明原因。
2. 哪些因素影响细胞凝集反应?
3. 结合凝集素的特性,简述凝集素在生物学中有何应用?
研究凝集素有何意义?
等均与细胞外被有关。
二、实验原理
凝集素(lectin)是一类可逆结合特异糖基的蛋白
质,具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。目前已 发现近千种植物中含有凝集素,在各种真菌、无脊 椎动物、脊椎动物,人体的各种组织和器官中及某 些病毒体内也含有凝集素。常用的有植物凝集素 (phytohemagglutinin, PNA),通常一起被提取 的植物命名,如伴刀豆凝集素A、麦胚凝集素、花
浸泡2 h,浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素。
3. 细胞凝集反应 土豆凝集素1滴、2%兔血红细胞液1滴,在载玻片上混匀,静置20
min;以PBS缓冲液加2%血细胞悬液作为对照,低倍镜下观察。
五、结果观察
低倍镜下可以看到对照组红细胞分布均一,无凝集;实验
组中红细胞凝集在一起。
对照
阳性
六、实验报告及思考题
生凝集素和大豆凝集素等,凝集素是他们的总称。
二、实验原理
细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起,成为一簇不规则 的细胞团。
பைடு நூலகம் 凝集素使细胞凝集的原理是:它可以与细胞表面的糖

细胞凝集反应实验

细胞凝集反应实验

细胞凝集反应王玉琼201005232142 齐鲁医学班一实验目的:1了解细胞膜的表面结构2了解血细胞凝集原理3学习研究细胞凝集反应的方法二实验原理:细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起,成为一簇不规则的细胞团。

细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构,脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。

目前认为,细胞间的联系,细胞的生长和分化,免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。

凝集素是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,如植物血球凝集素,伴刀豆凝集素和土豆凝集素等,它具有凝集细胞核刺激细胞分裂的作用。

凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。

三实验用品:PBS缓冲液显微镜双凹载玻片滴管土豆凝集素土豆凝集素的提取:去皮土豆块茎2g,加10mLPBS缓冲液浸泡24h,所得粗提液中既含有可溶性土豆凝集素.1%兔血红细胞2.1%兔血红细胞制备:抽取兔静脉血1mL加抗凝剂,加入3mL生理盐水,1000r/min离心5min,重复洗涤三次。

按红细胞压积配成1%红细胞悬浊液。

四实验步骤:1.分别用滴管吸取土豆凝集素和1%兔血红细胞各一滴,置于双凹片左孔混匀。

2.吸取PBS缓冲液各一滴置于双凹片右孔混匀。

3.摇晃5-10min观察,并以低倍镜镜检。

五实验结果:反应前反应后(左为混合了PBS的兔血红细胞,右为混合了土豆凝集素的兔血红细胞)发生凝集的细胞未发生凝集的细胞图2 低倍镜(*10)下混合了了土豆凝集素(左)和PBS缓冲溶液(右)的兔血红细胞观察结果分析:混合土豆凝集素9分钟时细胞开始发生凝集,可以观察到细小沙粒状的细胞团,随时间流逝小细胞团变大。

如图1可看到,混合了土豆凝集素的兔血红细胞(右侧)聚集成块,周围液体较澄清;而混合了PBS缓冲溶液的兔血红细胞(左侧)未发生凝集,液体浑浊。

低倍镜下镜检(图2)可看到,凝集了的细胞聚成一簇不规则的团,而未发生凝集的红细胞很均匀。

实验4 细胞凝集反应

实验4 细胞凝集反应

实验4 细胞凝集反应细胞凝集反应是一种常见的实验技术,用于检测血清中的抗体及其与相应抗原的结合情况。

本实验使用了Coombs试验,这是一种血清分析技术,以检测血液中的抗体和血液中的颗粒物质之间的结合。

Coombs试验基于一个类似天然免疫系统的作用原理。

实验目的:通过Coomb试验研究细胞凝集和血凝素作用的规律,了解抗体-抗原反应机制。

实验原理:细胞凝集反应是一种通透性反应,其功能是在一定情况下通过抗体在抗原表面形成团聚形成凝集体,抑制抗原的生物活性,从而达到识别、保护机体的作用。

凝集反应的产生,除了与抗原类型有关外,还与抗体端本身的各种性质有关。

血凝素是一种含有血凝素分子的物质,根据血凝素在血铁分子中的分布,人们将血凝素分为A、B、O三种,其中O型血的红细胞没有血凝素分子。

当与漂浮在空气中尘土、寄生虫等来源于外界的异物接触时,机体会产生抗血凝素抗体。

由于人的血液抗体体制是人种、族群和地域差异很大,所以很多混血婴儿就像亲生母亲那样,产生带有母体滴度的特殊抗体。

因此,在新生儿溶血反应的处理中,必须考虑抗体的来源。

具体实验步骤:步骤一:准备实验用品1、0.9%生理盐水2、10%明胶液3、A、B、AB、O型红细胞各一个样品4、高免辣根过氧化物酶(HRP)抗人IgG二抗和人IgG抗体6、离心管和1.5ml微量离心管7、胶体金凝集试剂8、免疫沉淀板步骤二:红细胞抗原类型的鉴定1、A、B、AB、O型红细胞各一个样品,在微量离心管中加入适量生理盐水,并离心沉淀红细胞。

2、弃去上清,加入0.5ml的生理盐水,振荡使红细胞均匀分散。

3、分别取微量离心管中的红细胞悬液,倒入相应免疫沉淀板中的坑中。

4、加入胶体金凝集试剂3-4滴,充分混合和振荡。

步骤三:Coombs试验的操作1、将红细胞样本涂在一个免疫沉淀板上,使其在板上均匀分散。

2、用高免辣根过氧化物酶(HRP)抗人IgG二抗涂覆在免疫沉淀板上的红细胞上,共孵化1小时。

细胞凝集反应实验报告

细胞凝集反应实验报告

一、实验目的1. 了解细胞膜表面的结构及其与糖分子的关系。

2. 掌握凝集素促使细胞凝集的原理和机制。

3. 熟悉细胞凝集实验的操作方法,并观察细胞凝集现象。

二、实验原理细胞膜是细胞与外界环境进行物质交换的结构,主要由双层脂质和蛋白质组成。

在细胞膜的外层,蛋白质与糖分子结合形成糖蛋白,即糖被。

凝集素是一类能与糖分子专一结合的蛋白质,它能够识别并结合细胞表面的糖分子,从而促使细胞凝集。

细胞凝集反应的原理如下:1. 细胞膜表面的糖被具有特异性,不同的细胞表面糖被的组成和结构不同。

2. 凝集素能够识别并结合细胞表面的特定糖分子,形成凝集素-糖分子复合物。

3. 凝集素-糖分子复合物在细胞间形成“桥”状结构,使细胞相互粘连,导致细胞凝集。

三、实验材料与用品1. 试剂:PBS缓冲溶液、0.9%的氯化钠溶液、不同浓度的凝集素、红细胞悬液、细胞计数板、显微镜等。

2. 仪器:天平、载玻片、滴管、加样器、恒温水浴箱等。

四、实验步骤1. 将红细胞悬液用PBS缓冲溶液稀释至一定浓度。

2. 取两块载玻片,分别标记为A、B。

3. 在A载玻片上滴加适量的红细胞悬液,用加样器吸取少量不同浓度的凝集素,滴加到红细胞悬液中,轻轻摇匀。

4. 将A载玻片放入显微镜下观察细胞凝集现象。

5. 在B载玻片上滴加适量的红细胞悬液,用加样器吸取等量的PBS缓冲溶液,滴加到红细胞悬液中,轻轻摇匀。

6. 将B载玻片放入显微镜下观察细胞凝集现象。

7. 比较A、B两块载玻片上的细胞凝集现象,分析凝集素对细胞凝集的影响。

五、实验结果与分析1. 在A载玻片上观察到明显的细胞凝集现象,细胞相互粘连,形成较大的细胞团块。

2. 在B载玻片上观察到红细胞分散,没有明显的凝集现象。

3. 分析实验结果可知,凝集素能够促使细胞凝集,而PBS缓冲溶液对细胞凝集没有影响。

六、实验结论1. 细胞膜表面的糖被具有特异性,不同的细胞表面糖被的组成和结构不同。

2. 凝集素能够识别并结合细胞表面的特定糖分子,促使细胞凝集。

细胞凝集反应实验报告

细胞凝集反应实验报告

细胞凝集反应实验报告细胞凝集反应实验报告细胞凝集反应是一种常用的实验方法,用于研究细胞间的相互作用和细胞表面的受体分布情况。

本实验旨在通过细胞凝集反应来观察和分析细胞间的黏附和凝集现象,并探究其机制和影响因素。

实验材料与方法:材料:细胞培养物、PBS缓冲液、细胞培养基、荧光显微镜、离心管、离心机、显微镜玻片、细胞计数板、细胞培养箱等。

方法:1. 细胞培养与收集:选择适当的细胞株进行培养,保持在适宜的培养条件下。

当细胞生长到合适的密度时,用PBS缓冲液洗涤细胞,使其悬浮于缓冲液中。

2. 细胞稀释:将细胞悬浮液用细胞培养基稀释至合适的浓度,以获得均匀的细胞分布。

3. 细胞凝集反应:将稀释后的细胞悬浮液分别加入不同的离心管中,加入不同浓度的试剂或药物,如抗体、抗原等。

轻轻摇动离心管,使细胞与试剂充分混合。

4. 离心:将离心管放入离心机中,进行适当的离心操作,使细胞沉积在离心管底部。

5. 观察与记录:将离心管取出,用显微镜观察细胞的凝集情况,并记录下来。

可以使用荧光显微镜观察细胞表面的荧光标记物,以更清晰地观察细胞凝集情况。

实验结果与讨论:通过实验观察和记录,我们得出了以下结果:1. 细胞凝集现象:在加入特定试剂或药物后,我们观察到细胞之间出现了明显的凝集现象。

这表明试剂或药物与细胞表面的受体结合,导致细胞间的黏附和凝集。

2. 凝集程度与浓度关系:我们发现,试剂或药物的浓度对细胞凝集程度有明显影响。

随着浓度的增加,细胞凝集程度也增加,呈现出浓度依赖性。

3. 受体特异性:不同的试剂或药物对细胞凝集的影响不同。

这表明细胞表面的受体具有特异性,只有与特定的试剂或药物结合才会发生凝集反应。

4. 温度和时间的影响:我们还观察到,在不同的温度和时间条件下,细胞凝集程度也会发生变化。

较高的温度和较长的反应时间会增加细胞凝集的程度。

综上所述,细胞凝集反应是一种重要的实验方法,可用于研究细胞间的相互作用和受体分布。

通过观察和记录细胞凝集现象,我们可以了解细胞间的黏附机制、试剂或药物的作用方式以及影响因素等。

细胞凝集反应实验报告.doc

细胞凝集反应实验报告.doc

细胞生物学实验报告题目:细胞凝集反应姓名:余振洋学号:200900140156 系年级:09级生科三班时间:2011/3/4一、【实验目的】1、了解细胞膜的表面结构2、掌握凝集素促使细胞凝集的原理二、【实验材料】1、土豆凝集素2、显微镜、双凹载玻片、滴管、离心管3、PBS缓冲液称取NaCl 7.2g、Na2HPO4 1.48g、KH2PO4 0.43g、加蒸馏水,定容至1000ml,调PH值到7.2.4、1%红细胞溶液以无菌方法抽取兔子静脉血(加抗凝剂),2000r/min离心五分钟后,倒去血清,将血浆积用生理盐水配成1%红细胞液。

三、【实验原理】1、细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构,脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。

目前认为:细胞间的联系,细胞的生长和分化,免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。

2、凝集素是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。

凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。

四、【操作步骤】1、取兔子静脉血2ml于离心管,另取2ml水于另一离心管,对称放于离心机两侧,在2000r/min条件下,离心5分钟。

2、将装血离心管内的上清液除去,加入适量生理盐水,稀释10倍。

最后取1ml 稀释后的血浆于试管,加9ml生理盐水,得1%浓度的红细胞液。

3、用滴管吸取土豆凝集素和PBS缓冲液各一滴,置双凹片的左右两孔内,再分别滴入一滴1%的红细胞液,振荡10min。

4、待红细胞液发生明显凝集反应后,将载玻片置于显微镜下观察。

五、【试验结果及绘图】结果:绘图:加土豆凝集素(10x10)加PBS缓冲液(10x10)整体外观对比六、【结果分析与讨论】从实验过程中可以看出,在加有土豆凝集素的凹片一侧,振荡过程中,红细胞液先变浑浊,随后又变澄清,同时发生凝集反应,且凝集后的块状物聚集在液滴中央。

细胞凝集反应实验报告.doc

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细胞凝集反应实验报告.doc一、实验目的1. 学习细胞凝集反应的原理。

2. 了解细胞凝集反应在临床上的应用。

3. 掌握细胞凝集反应实验的操作方法。

二、实验原理细胞凝集反应是一种反应类型,指的是在一定条件下,由于细胞表面特异性抗原与相应的抗体作用而发生的细胞凝集现象。

细胞凝集反应可以用于检查人体中的免疫球蛋白水平和相关抗体。

在实验中,将悬浮的红细胞或细胞制备与抗体反应,出现凝集反应。

如果一定量以上的抗体和抗原完全结合,会出现凝集现象。

三、实验材料1. 抗D血清2. D型血样本3. 生理盐水4. 干净玻璃杯5. 长度游程法(gel card)四、实验步骤1. 用生理盐水洗净一只净化的碗形玻璃杯,待玻璃杯干后添加一滴抗D血清。

2. 取一滴D型血样本,在玻璃杯中滴入,使用棉签进行混合,保持1-2分钟。

3. 将金属片向右移置顶端,放置长度游程法中,等待5分钟。

4. 取下金属片,用水龙头用水冲洗一下杯子,然后轻晃地使用放置良久来确定观测结果。

五、实验结果实验结果显示,抗D血清与D型血样本发生了凝集反应,证明D型血中含有D抗原。

六、实验结果分析细胞凝集反应是指特异性抗原与相应抗体作用而发生的细胞凝集现象,其过程即是抗体-抗原复合物形成的过程。

在实验中,我们用D型血样本制备、加入抗D血清,如果出现凝集,就表明血样本中包含D抗原。

所以,这项实验可用于D型血型检测,具有较高的准确性和敏感性。

七、实验注意事项1. 实验中使用的玻璃器皿要干净,以免干扰结果。

2. 棉签和金属片一定要干净,以保证实验的准确性。

3. 实验时需要严格遵守生物安全操作规范,以避免因操作不当而引发的感染。

八、实验心得通过这次实验,我学习并熟悉了细胞凝集反应的基本原理和实验操作方法,并了解了其在临床上的应用。

通过自己亲身操作,我发现在实验过程中,加入的抗原和抗体浓度、反应时间等因素都会影响到实验结果,需要仔细掌握并操作。

同时,在实验中,我们也应严格遵守实验操作安全规范,以确保实验的准确性和安全性。

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细胞凝集反应
陈素君200900140007
生命科学学院生物科学专业生科四班
联系方式:62510
实验目的:
了解血细胞凝集原理
实验原理:
细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起,成为一簇不规则的细胞团。

细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构,脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。

目前认为,细胞间的联系,细胞的生长和分化,免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。

凝集素是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,如植物血球凝集素,伴刀豆凝集素和土豆凝集素等,它具有凝集细胞核刺激细胞分裂的作用。

凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。

实验用品:
PBS缓冲液显微镜双凹载玻片滴管
土豆凝集素
土豆凝集素的提取:去皮土豆块茎2g,加10mLPBS缓冲液浸泡24h,所得粗提液中既含有可溶性土豆凝集素.
1%兔血红细胞
2.1%兔血红细胞制备:抽取兔静脉血1mL加抗凝剂,加入3mL生理盐水,1000r/min离心5min,重复洗涤三次。

按红细胞压积配成1%红细胞悬浊液。

实验步骤:
1.分别用滴管吸取土豆凝集素和1%兔血红细胞各一滴,置于双凹片左孔混匀。

2.吸取PBS缓冲液各一滴置于双凹片右孔混匀。

3.摇晃5-10min观察,并以低倍镜镜检。

实验结果:
图1a 反应前图1b 反应后
图1 细胞凝集反应的观察(左为混合了PBS的兔血红细胞,右为混合了土豆凝集素的兔血红
细胞)
图2a 发生凝集的细胞图2b未发生凝集的细胞
图2 低倍镜(*10)下混合了了土豆凝集素(左)和PBS缓冲溶液(右)的兔血红细胞观察
混合土豆凝集素9分钟时细胞开始发生凝集,可以观察到细小沙粒状的细胞团,随时间流逝小细胞团变大。

如图1可看到,混合了土豆凝集素的兔血红细胞(右侧)聚集成块,周围液体较澄清;而混合了PBS缓冲溶液的兔血红细胞(左侧)未发生凝集,液体浑浊。

低倍镜下镜检(图2)可看到,凝集了的细胞聚成一簇不规则的团,而未发生凝集的红细胞很均匀。

分析与总结:
1.浸出土豆凝集素时选发芽的或发青色的土豆。

由此可知发芽土豆不宜食用,因其所含土豆凝集素可让血细胞发生凝集。

2.滴加血红细胞悬浊液时要控制量,半滴即可,过多凝集效果不明显。

3.区分血清与血浆,血清指血液自然沉降后所得上清液,而血浆是血液加抗凝剂后离心所得上清液。

4.凝血是指多个细胞聚集成不规则细胞簇,溶血是红细胞在低渗溶液作用下,肿胀破裂放出血红蛋白的过程。

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