血球分析仪有关剖浅谈

1）校准物
使用中国药品监督管理局注册登记的国际公 认质量可靠检测系统的实验室，可使用制造商 规定的配套的校准物，也可以使用新鲜血作为校 准物。对于使用无配套校准物检测系统的实验室， 必须使用新鲜血进行仪器校准。
2）仪器的准备
先用清洁剂清洁仪器内部各通道，检测室处 理30分钟。确认仪器的背景值、精密度及携带 污染在仪器说明书规定的范围内时，才能进行校 准，否则须查找原因，必要时请维修人员检修。
9.关于性能评价
血细胞分析仪的性能评估包括：背景计数、 携带污染、批内精密度、批间精密度、准确度及 线性。 1）背景计数 方法：每天开机时仪器自动检测并记录背景计 数结果。 判断标准：厂家规定背景计数标准或可溯源文 件的相应标准。 合格判断：所有项目应不高于厂家规定的背景 计数标准，视为合格。
2）携带污染
分类、计数的局限性实质上是阻抗法原理的局限性 ☆ 有一定电阻的成份就认为是细胞； ☆ 电阻越大，细胞体积越大。 1）血小 板计数正确性不高： 不能区分尖埃与血小板 细胞碎片与血小板 大血小板与小红细胞
聚集血小板与小红细胞
2）分类计数准确性不够
☆不能正确区分各种变异细胞 如病毒感冒、病毒性肝炎、传染性单核细胞 增多症等时的变异淋巴细胞等。 ☆中间细胞群特指性不强，不能区分三种细胞 （嗜酸、嗜碱和单核细胞）中的哪一种细胞 的增高或降低
3.1.5)将两瓶校准物合在一起，混匀后再分装于两瓶内.
3.2）使用新鲜血作为校准物
3.2.1用EDTA-2K为抗凝剂的真空采血管取建康人新 鲜血10ml，每ml需用抗凝剂量为1.5~2.2mg,要求 WBC、RBC、HGB、HCT和PLT的检测结果在参 考值范围内。将混匀后分装3管，每管3ml。 3.2.2）取其中1管，用二级标准检测系统或规范操作 的检测系统连续检测11次，计算第2~11次检测结果 的均，以此均值作为新鲜血的定值。 3.2.3）其他2管血作为定值的校准物，用于仪器的校 准。
3）决方解案
☆五分类血球仪复检 ☆人工镜检
血球仪是过筛器，三分群仪更是这样，要得确
结果必须复查。目前，专家们对三分群血球仪分 类计数结果的处置意见是：当所有参数完全正常 时，可以不复检直接发报告；当其中有一项或几 项不正决方案—复检
☆ 国际复检标准41条 ☆ 各医院根据自己的实际情况制订了不同的复检标准 ☆ 我院以国际41条为依据，制定了自己的复检21条标准 复检的绝对条件 • 报警提示 • 未成熟细胞 • 原始细胞 • 有核红细胞 • 仪器分群结果异常 • 确认或疑为血液恶性肿瘤者 复检的可调节条件 • 血细胞计数超出参考值范围
三分群血细胞计数仪
米乐园
2.关于计数原理
电阻抗法—库尔特原理
电阻大小与细胞体积大小成正比。血细胞
相对于血球稀释液是不良导体，有一定的电阻， 当通过电场中的微孔时产生一个电阻信号，其信 号的频率代表细胞的多少，信号的大小代表细胞 体积的大小。把一定大小的电信号加在一起代表 一个细胞群，把所有的细胞群加在一起代表细胞 总数。
3.关于直方图
直方图— 表示细胞数量和细胞
体积及其相互比例 关
系的曲线图。 直方图解释：
在Y轴上的高低表示
细胞的多少；在X轴 上离O点的远近表示
细胞体积的大小。
直方图解释：
• WBC：正常；淋巴细胞 ↑； 中性粒细胞 ↑； 中间细胞 ↑（E、B、M、幼稚细胞）。 • RBC： 正常；MCV ↓ ； MCV ↑ ；双峰。 • PLT： 正常；大PLT、PLT聚集和小红细胞
类 别 MCV 正常人 N 缺铁性贫血 ↓ 巨幼红细胞贫血 ↑ 溶血性贫血 ↑ 铁粒幼细胞贫血 N 再障 N 单纯小细胞贫血 ↓ RDW N ↑ ↑ ↑ ↑ N N
血小板参数：
MPV：平均血小板体积 MDW：血小板体积分希宽度 L-LCR：大血小板比率 上述三参数都与血小板体积有关，说明这些 数据是有一定临床意义的。一般认为体积大的血 小板是年轻血小板，年轻血小板功能要强大一些 这可解释临床上有的血小板（MPV ↑ 、L-LCR ↑） 少，为什么没有自发性出血的原因。
5.1）计算各参数的均数与定值相差的百分数（不计正负），计算公式： （均数-定值）÷定值×100%，计算结果与表1中的标准数据比较。 5.2）各参数均数与定值的差异全部等于或小于表中第一列数值时，仪器 不需进行调整，记录检测数据即可；若各参数均值与定值的差异大于表 中的第二列数值时，需请维修人员查明原因并进行处理；若各参数均数与 定值的差异在表中第一列与第二列数值之间时，需对仪器进行调整，调 整方法可按说明书要求进行。若仪器无自动校准功能，则将定值除以所 测均值，求出校准系数，将仪器原来的系数乘以校准系数即为校准后的
8.关于异常标本及处理
6）有核红细胞
原因：正常情况下无（有核红），有核红常见于各类白血病、骨髓 纤维化、急性失血、急性溶血等疾病
表现：溶解后的有核红其核多位于小细胞区，使WBC 计数↑
处理：修正WBC计数。 WBC（修正数）= WBC（原计数）÷（100+有核红） 7）白细胞增多性白血病 正常情况下 RBC：WBC=750：1，WBC对RBC计数的影响可 以忽略不计；但WBC↑到200×109/L以上时,对RBC计数应加以修正。 RBC×109/L （修正数） = RBC（原计数）- WBC÷1000
方法：在仪器稳定的状态下连续测定1份高值 标本，3次记录为H1、H2、H3；立即连续测定1份 低值标本3次，记录为L1、L2、L3。计算WBC、 RBC、HGB、HCT、PLT各项目携带污染率：= （L1-L3）÷（H3-L3） × 100% 判断标准：厂家规定携带污染率标准或可溯 源文件的相应标准 合格判断：所有项目应不高于厂家或可溯源文 件规定的携带污染率标准，视为合格。
血为校准物。现在多用此法。
红细胞通道：
2~30fl 为血小板 >30fl 为红细胞
注意：
• RBC、PLT是它真实体积，因为血球稀释液 • 是等渗的； • WBC的体积，是加了溶血后漏出了细胞液留 下“膜包核”和内含颗粒的体积，并非真实体积； • 所以，L核小，颗粒少，故体积小，位于直方 图最前面的小细胸群区；N核多，颗粒多体 积大， 位于直方图最后面的大细胞区；E、B和 M核少，内含颗粒少，故体积较N小，位于大 细胞群之前的中间细胞区。
映RBC体积差程度的指标
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临床意义：
贫血的形态学分类
贫血类型 MCV MCH MCHC 常见疾病
正常细胞性
N
N
N
急性失血、溶 血、再障、白 血病 叶酸、维B12 缺乏
慢性炎症、尿 毒症 铁、维B2缺乏、 珠蛋白肽链合 成障碍
大细胞性
小细胞低色素性 单纯小细胞性
↑
↓ ↓
↑
↓ ↓
N
N ↓
缺铁性贫血的诊断和鉴别诊断
计数通道 WBC通道：
*小细胞群: 30~90fl 主要是淋巴细胞 *中间细胞群: 90~160fl有单核、 嗜酸、嗜碱细胞 *大细胞群： >160fl 主要是中性粒细胞
*血红蛋白： 参考方法：HiCN法，540um比色测
环保方法: 十二烷基硫酸钠法（SLS-
Hb)，540um比色，以HiCN法定值全
3）批内精密度
方法：取高中低值标本各1份，分别在仪器各 测20次，计算出均数、SD和CV值。
判断标准：厂家规定的精密度或可溯源文件 的相应标准 合格判断：所有项目应不高于厂家或可溯源 文件规定的批内精密度标准，。
4) 批间精密度
方法：取2个批号质控物每天在仪器上测定1次 ，连续20天，计算出均数、SD和CV值。 判断标准：厂家规定的批间精密度标准或可溯 源文件的相应标准 合格判断：所有项目应不高于厂家或可溯源文 件规定的批间精密度标准
5.关于标本与抗凝剂
抗凝剂：国际公认EDTAK2
抗凝剂：血=1：9 标本： 最好为静脉血 其次为末梢血
6.关于分析模式
*全血模式 最好； *预稀释模式 尽量少用或不用； 全血模式： 一是可以避免加样、加稀释液不准确带来 的稀释误差； 二是可以避免稀释液久露于空气中所造成 的液体蒸发和尖埃污染。
7.三分群血球计数仪的局限性
4.有关细胞参数 红细胞参数： MCV MCH MCHC RDW-CV或 RDW-SD
* MCV：平均RBC体积 每个RBC的平均体积
* MCH：平均RBC血红蛋白量
每个RBC所含Hb的平均量 * MCHC：平均RBC血红蛋白浓度 每升血液中平均所含Hb的浓度
红细胞参数 * RDW-CV/RDW-SD：红细胞体积分希 宽度反
系数，将校准后的系数输入仪器更换原来的系数。
6)校准结果的验证
将2管未用的校准物充分混匀，在仪器上重复检测11次，去除第一 次结果，计算2～11次检测结果，再次与表中的数值对照。如各参 数的差异全部等于或小于第一列数值，证明校准合格中。如达不到 要求，须请维修人员检修。 表1 仪器校准的判别标准 百分数 参数 一列 差异 二列
8.关于异常标本及处理
1）凝固标本 不能或严重影响计数分类。处理：退回，重采。 2）溶血标本（采集不当所致） 影响红胞和血小板计数。处理：退回，重采。 3）脂血标本 • 影响血红蛋白测定，使红蛋白升高； • 红细胞压积升高，从而影响与此有关的 MCV和MCHC的计算结果。
8.关于异常标本及处理
4)冷凝集标本 原因：寒冷凝集素增高，如原发性非典型肺炎等。 表现：RBC↓，与HGb比例明显不符，WBC不受影响 处理：将标本置37℃30分钟，立即计数。 5）EDTA诱导的PLT聚集 原因：EDTA诱导PLT膜抗原暴露，从而与血浆中 相应抗体结合而聚集。发生率1‰左右。 表现：PLT ↓↓、镜下PLT聚集 处理：＊标本不加抗凝剂直接上机测定； ＊用等量等渗盐水置换血浆后测定； ＊用非EDTA抗凝剂采集标本复检。
4）用校准物进行检测