HPLC法测定连翘中的连翘苷
HPLC法测定连翘中的连翘苷
HPLC法测定连翘中的连翘苷第一部分前言1.连翘药材连翘是中国临床常用传统中药之一，为木犀科连翘属植物连翘的干燥果实。
主产于我国的山西、河南、陕西。
连翘有清热解毒，散结消肿之功效。
连翘的化学成分主要有挥发油类，苯乙醇苷类、木脂素类、三萜及黄酮类等化合物。
木脂素分为木脂内酯和双环氧木脂素。
2.连翘苷而连翘苷（Phillyrin），是双环氧木脂素类化合物的葡萄糖苷，化学式为C27H34O11，分子量534.56，熔点181℃，难溶于水，溶于乙醇、甲醇等有机溶剂。
《中国药典2010年版一部》将连翘苷作为控制连翘质量的重要指标，规定按干燥品计算，含连翘苷不得少于0.15%。
3.研究目的据文献报道连翘苷含量测定方法有薄层扫描法、HPLC-UV法、毛细管区带电泳法、拉曼光谱法、近红外漫反射光谱法、近红外光谱法。
我们考虑到实际情况，拟采用HPLC法对连翘中连翘苷的含量进行测定，建立起连翘药材中连翘苷的含量测定方法。
第二部分实验一、条件的选择1、提取条件的选择对同一连翘药材，我们采用甲醇为溶剂，回流提取、超声波提取、索氏提取三种方法对药材进行处理，结果发现，在三种提取方法中以超声波法从连翘中提取连翘苷的提取率较高，且能将有效成分进行分离。
而且这种方法进行提取操作简单，便于实际操作。
2、检测波长的选择配制好的连翘苷对照品，我们拿到紫外室，使用紫外扫描检测器在190～400nm范围内对其进行扫描，发现在波长230nm和270nm处均有最大吸收峰，在后面的进一步实验验证，结果表明，在230nm处吸光度较大，灵敏度高。
因此确定选择检测波长为230nm，效果较好。
3、色谱流动相的选择实验中，我们分别比较了多种比例的流动相，曾选用甲醇—水（40：60）、乙腈—水（30：70）、乙腈—水（21：79）、乙腈—甲醇（25：75）等，结果显示峰形较好的流动相比例乙腈—水（21：79），在此比例的流动相条件下，可以有效的改善峰形，分离效果明显。
一测多评法同时测定连翘和连翘叶中多种成分
2.
4.
1 线性关系考察
精密吸取 2.
2 节中混合对照品溶液适量,加入到
2.
4.
4 重复性
精密称取同一批号的青 翘 样 品(
Q1)约 0.
25g,
41~50
42~53
58~47
5mL 棕色容量瓶中并用甲醇稀释溶解,即得一系列
不同浓度梯度 的 溶 液,分 别 编 号 为Ⅰ、
Ⅱ、
Ⅲ、Ⅳ、
Ⅴ、Ⅵ、
Ⅶ。按2.
has
i
ng
l
e
-ma
r
ke
r QAMS f
o
r
y
s
imu
l
t
ane
ous
l
t
e
rmi
na
t
i
ono
fs
e
venc
omponen
t
s Ch
l
o
r
ogen
i
ca
c
i
dr
u
t
i
nf
o
r
sy
t
ho
s
i
deB f
o
r
sy
t
ho
s
i
deA p
i
no
r
e
s
i
no
l
yde
-Dl
uc
o
s
i
de ph
i
l
l
r
i
n ph
β
翘酯素 7 种成分的一测多评(
QAMS)方法。方法:采用 HPLC 法,以 连 翘 苷 为 内 参 物,分 别 建 立 连 翘 苷 与 其 余 6 种 成 分
连翘含量测定方法连翘苷
连翘含量测定方法（连翘苷）来源: 作者:佚名连翘为木犀科植物连翘Forsythia suspense（Thunb.）Vahl的干燥果实。
2005版《中国药典》采用高效液相色谱法测定了连翘苷的含量。
文献报道的连翘苷的含量测定方法主要有高效液相色谱法和薄层扫描法。
一、高效液相色谱法2005《中国药典》连翘含量测定项下：色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（25：75）为流动相，检测波长为277nm；理论板数按连翘苷峰计算应不低于3000。
供试品溶液的制备：取本品粉末约1克，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇15ml，称定重量，浸渍过夜，超声处理25分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。
精密量取续滤液5ml，蒸至近干，加中性氧化铝0.5g拌匀，加置中性氧化铝（100～120目，1g，内径1～1.5cm）上，用70%乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣用50%甲醇溶解，转移至5ml 量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
文献报道的HPLC法，流动相系统以乙腈-水为多，也有以乙腈-冰醋酸溶液为流动相的。
现总结如下：王隶书等用HPLC法测定抗病毒滴丸中连翘苷的含量。
采用日本岛津LC210AT高效液相色谱仪，紫外分光检测器；日立U23400型分光光度计；日本岛津ODS-C18柱(150mm×4.6mm，5μm)；以乙腈-水(24：76)为流动相；柱温30℃；检测波长277nm。
杨德柱等采用高效液相色谱法测定夏莲颗粒剂中连翘苷的含量时，采用日本岛津公司高效液相色谱仪；色谱柱：Shim-pack ODS柱（日本岛津公司, 5μm，150mm×4.6mm）；柱温：25℃；流动相：乙腈-水-三乙胺（24：76：0.02）；流速：1.0mL/min；检测波长：276nm。
样品的制备方法同药典。
徐晓梅等采用RP-HPLC法测定病毒清口服液中连翘苷的含量。
HPLC-ESI／MS法测定不同连翘有效成分的含量
HPLC-ESI／MS法测定不同连翘有效成分的含量曹冉冉;李海平;黄艳杰;尹卫平【摘要】利用高效液相色谱－电喷雾／质谱（HPLC-ESI／MS）分析鉴定不同产地的连翘，包括青翘和老翘中主要有效成分连翘苷、连翘酯苷 A和连翘酯素的含量，以此探讨各产地连翘品种主要成分之间的变化及差异程度，为建立野生连翘中药资源综合评价提供科学依据。
通过采集中国3个主产地野生连翘6个样品，选用Hypersil Gold C18色谱柱（100．0 mm ×2．1 mm，5μm），柱温30℃，以甲醇－水溶液（含体积分数为0．01％甲酸）为流动相进行梯度洗脱，流速为0．55 mL／min，进样量10μL；加热式电喷雾电离源为正、负离子模式监测，源喷雾电压为3．0 kV，鞘气流速为8．0 L／min ，离子传输毛细管温度为320℃。
研究结果表明：连翘酯苷A和连翘苷两种化学成分的峰面积和浓度在测定浓度范围内均具有良好的线性关系，加样平均回收率分别为113．4％和90．5％，相对标准偏差分别为8．20％和8．30％。
【期刊名称】《河南科技大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2015(000)001【总页数】4页(P101-104)【关键词】连翘苷;连翘酯苷A;连翘酯素;液相色谱-电喷雾/质谱;品质资源【作者】曹冉冉;李海平;黄艳杰;尹卫平【作者单位】河南科技大学化工与制药学院，河南洛阳 471023;黎明化工研究设计院有限责任公司分析测试中心，河南洛阳471001;河南科技大学化工与制药学院，河南洛阳 471023;河南科技大学化工与制药学院，河南洛阳 471023【正文语种】中文【中图分类】R286.0连翘Forsythiasuspensa (Thunb.) Vahl是中国的传统中药。
作为清热解毒的主药材，连翘果被分为“青翘”和“老翘”直接进入流通环节,这是造成该中药材质量参差不齐、药用成分不稳定的主要原因[1]。
HPLC法测定双黄连颗粒中连翘苷的含量
中图分类 号 ：Ｒ ８ ；Ｒ９ ７ ２ ２４ ２．
文献 标 识码 ：Ａ
文章 编号 ：１ ０ —７ ７ （０ ０ ８０ ５ — ３ ０ ２７ ７ ２ １ ）０ —７ ４０
Ｄｅｅ ｍｉ ａｔｏ ｆＦｏ ｓ ｔ ｎ ｉ ｈｕ ｎｇ ａ ｌａ Ｐａ ｔｃ ｅ ｙ ＨＰＬＣ ｔ ｒ ｎ ｉ ｎ ｏ ｒ ｙ ｈｉ ｎ Ｓ ａ ｈｕ ｎｇＩ ｎ ｒ ｉｌｓ ｂ ｉ
ｂ ｙ ＨＰＬＣ．Ｍ ｅｈ ｄ ｅ ｏ ｔ ｉｅ ｅｈ ｄ ｗａ ｃ ｉｖ ｄ ｆ ｒ ｔ ｅ ｓ ｐ ｒｔｏ ｎ ｅｅ ｔ ｎ ｏ ｈ ｅｅ ｔ ｄ ｔ ｏ ｓＴｈ ｐ ｉ ｚ ｄ ｍ ｔ ｏ ｓａ ｈ ｅ ｅ ｏ ｈ ｅ ａ ａｉｎ ａ ｄ ｄ ｔｃｉ ｆｔ ｅ ｓ ｌｃｅ ｍ ｏ
连 翘 中连 翘 苷 含量 测 定 方 法 进 行 了研 究 ＿ Ｊ １ 。结 果
号 ：１Ｏ ２ —２ｏ０ ） 双 黄连 颗粒 （ １８ １ ０ ６９ 哈尔 滨儿 童 制 药 厂有 限 公 司 ，批 号 ：０ ０ ０ 、０ ０ ０ 、０ ０ ０ 、 ７ ８ １ ７ ８ ２ ７ ６ ３
７４ ５
中 国药 事 ２ １ 第 ２ 卷 第 ８期 ０ ０年 ４
ＨＰ Ｃ法 测 定 双 黄 连 颗 粒 中连 翘 苷 的 含 量 Ｌ
杨 立 志 ，杨 瑞 琪 ，姜 雪 敏 （ 龙 省 西 药品 验 鸡西 １ １ ； 黑 江 药品 验 ） 黑 江 鸡 市 检 所， ｔ ， ｎ ｔｃ ｎ ｂ ｐ ｌ ｄｆ ｒｔ ｅ ｑ ａｉｙ ｃ ｎ ｒ ｌｏ ｈ ａ ｇ ｕ ｎ ｌ ｎ Ｐ ｒｉｌｓ ｉ ｌ ｎ ｃ ｕ ａ ｅ ａ ｄ ｉ ａ ｅａ ｐ ｉ ｏ ｈ ｕ ｌ ｏ ｔｏ ｆＳ ｕ ｎ ｈ ａ ｇ ｉ ａ ｔｃｅ ． ｅ ｔ ａ ＫＥＹ ＯＲＤＳ ｆ ｒｙ ｈ ｎ￣ ｈ ａ ｇ ｕ ｎ １ ｎ Ｐ ｒｉｌｓ Ｈ Ｐ Ｗ ： ｏ ｓ ｔ ｉ Ｓ ｕ ｎ ｈ ａ ｇｉ ａ ｔｃｅ ； ＬＣ ａ
HPLC法测定银翘汤剂中连翘苷_牛蒡子苷和绿原酸
同的提取方法。
结果表明：两种提取方法的提取效率均可，但超声提取相对操作简便、快捷，故本实验研究确定以超声处理作为提取方法。
参照《中国药典》（2010年版一部）及相关文献［4，9-15］中山茱萸及葛根的提取方法，考察不同提取溶剂（30%、50%、80%、100%甲醇及30%、50%、70%乙醇）对马钱苷及葛根素量的影响，结果表明两者以80%甲醇作为提取溶剂时的提取效率最高，所以采用80%甲醇作为提取溶剂。
同时本实验研究还考察了不同超声时间（15、30、45min ）对两者的影响，结果表明超声30min 和45min 二者的量差别不大，故确定供试品溶液制备方法采用超声提取30min 。
参考文献：［1］郝海平，许惠琴，朱荃，等．环烯醚萜总苷对糖尿病血管并发症大鼠NO 、NOS 和ET 的影响［J ］．南京中医药大学学报，2003，19（3）：157-159．［2］杜道辉，刘亚明．葛根有效成分治疗2型糖尿病及其并发症的研究进展［J ］．中华中医药学刊，2008，26（10）：2157-2160．［3］吴宏伟，李洪梅，唐仕欢，等．姜黄药效物质基础研究进展［J ］．中国中医药信息杂志，2011，18（2）：104-106．［4］国家药典委员会．中华人民共和国药典：2010年版一部［S ］．北京：中国医药科技出版社，2010．［5］郭巧技，肖丽和，熊英．降糖宁胶囊的薄层色谱鉴别［J ］．中国药师，2010，13（3）：444-445．［6］刘元，文志云，宋志钊，等．TLC 法定性鉴别千斤脑康宁胶囊中5味中药［J ］．中国实验方剂学杂志，2009，15（11）：17-18．［7］盛蓉，王江林，呼梅，等．尿畅舒胶囊质量标准研究［J ］．中成药，2008，30（6）：875-878．［8］王宁，何伟，朱立俏．芪贞舒痞颗粒质量控制方法的研究［J ］．中国中药杂志，2005，30（2）：151-153．［9］陈学艳，王艳，李晶，等．山茱萸不同炮制品中莫诺苷和马钱苷含量测定［J ］．天津中医药，2010，27（3）：254-256．［10］宋平顺，王兰霞，丁永辉．HPLC 测定山茱萸不同炮制品中马钱苷的含量［J ］．中成药，2008，30（5）：707-708．［11］魏惠珍，邱伟华，饶毅，等．HPLC 法测定六味地黄片中马钱苷和丹皮酚［J ］．中草药，2010，41（3）：405-407．［12］戎欣玉，邵文亮，马燕，等．HPLC 法测定参葛颗粒中葛根素的含量［J ］．中草药，2004，35（9）：1013-1014．［13］顾艳，何华，罗兴洪．HPLC 测定通脉胶囊中葛根素的含量［J ］．中成药，2007，29（5）：12-13．［14］许宏伟，梁文能，陈若筠．高效液相色谱法测定加味葛根片中葛根素的含量［J ］．时珍国医国药，2002，13（8）：468-469．［15］徐强，章曙丹，冯瑛．HPLC 测定糖肾颗粒中葛根素的含量［J ］．中成药，2007，29（4）：621-623．HPLC 法测定银翘汤剂中连翘苷、牛蒡子苷和绿原酸王力宁1，王志萍2*，贺颖2，黎芳2，王振宁2（1．广西中医药大学第一附属医院，广西南宁530001；2．广西中医药大学药学院，广西南宁530001）收稿日期：2012-04-23基金项目：广西科技攻关课题（桂科攻11107009-3-8）；广西自然科学基金创新研究团队项目《中药新药基础研究》（2011GXNSFF018006）作者简介：王力宁（1956—），女，教授，硕士生导师，研究方向：小儿呼吸系统疾病的防治研究。
连翘苷
连翘苷
【英文名】Phillyrin
【分子式】C27H34O11
【分子量】534.56
【CAS号】487-41-2 @新乡博凯生物技术有限公司
【检测方式】高效液相色谱法HPLC≥98%
【性状】本品为结晶粉末
【提取来源】本品为木犀科植物连翘的干燥果实
【药理性质】熔点184℃～185℃
【用法】色谱条件：流动相；乙腈-水（25：75）为流动相，检测波长为277nm
【性味与归经】苦，微寒。
归肺、心、小肠经
【功能与主治】清热解毒，消肿散结。
用于痈疽，瘰疬，乳痈，丹毒，风热感冒，温病初起，温热入营，高热烦渴，神昏发斑，热淋尿闭。
连翘苷可药用，具有清热、解毒、散结排脓等功效。
主治温热、疮疡、瘰疬、丹毒、班疹、流感，可水煎服，或加入方剂中。
人药，兽药，农业用途广泛。
常用于风热感冒。
【来源】在中国，作为药用的为木犀科植物连翘的干燥果实的提取物。
一般每公斤含量可达3%左右。
HPLC测定VC银翘片中连翘苷的含量
程 ｃ＝１５ １ ．８２×１ ～ 一０ ０ １６ 相 关 系 数 ，＝０９ ９ ， ０ ． ９， ４ ．９ ９
试 剂 及 试样 ：乙腈 为 色 谱 纯 、 余 试 剂 均 为分 析 其
纯 、 为重 蒸水 、 Ｃ银 翘 片 （ 安 阿 房 宫 药业 有 限 公 水 Ｖ 西
司 ，国 药 准 字 Ｚ ０ ２ ８５ ２ ０ ７ ５ ；批 号 ：００ １ 、０ ０ ０ 、 ５ ３ ３ ５ ２ １
０ １ ２ ） ４２２ 。
ｒｐｉ ｒ ｐ ｏ ｕｃｂ ｅ ａ ｄ ｓ ｉ ｂｅ ｆｒｔｅ ｑ ｌｉ ｏ ｔｏ ｆｔ ｉ ｒ ｐ ｒｔ ｎ． ａ ｄ、 ｒｄ ｉｌ ｎ ｕｔ ｌ ｏ ｕａ ｔ ｃ ｎｒ ｌｏ ｈｓｐ ｅ ａａｉ ｅ ａ ｈ ｙ ｏ
Ｋｅ ｒ ｓ： ｎ ｉｏ ａ ｙ ｗｏ ｄ ＶＣ Ｙｉ ｑａ ｐｉｎ；Ｆｏ ｙｈ ｎ； ＨＰＬ ｓ ｒ ｔｉ Ｃ
Ｈｕ ｎ ｈｉａ Ｐ ｏ ｌ ｓ Ｈｏｐｉ ｌｏ ｙ ｎ ａ ｇＺ ｈｉ ｅ ｐｅ’ ｓ ｔ ｆＹｉａ ｇ， Ｙｉａ ｇ，Ｈｕ ａ ３ ０１ ａ ｙｎ ｎ ｎ ４１ ０
Ａ ｓｒｃ ： ｂ ｃ ｖ ：ｏｅｔ ｌｈ ｍ ｔ ｄｆ ｅｄｔ ｍ ｎ ｔ ｎｏ Ｆ ｒ ｔｉ ｉ Ｖ ｉ ｉ ｐ ｎ Ｍ ｔ ｄ ： ｅｓ ａａ ｏ ａ ｃ ｒｅ ｔ ｎＣ １ （ ． ｂ ｔ ｔ Ｏ ｊ ｔ ｅ Ｔ ｓ ｂ ｓ ｅ ｏ ｒ ｈ ｅ ｒ ｉ ｉ ｆ ｏｓ ｈｎ ｎ ＣＹ ｎ ａ ｉ ； ｅ ｏ ｓＴ ｅ ｒ ｎｗ ｓ ａ ｉ ｏ ８ ３ ９ ａ ｅｉ ａｉ ｈ ｏｔ ｅ ａｏ ｙ ｑｏａ ｈ ｈ ｐ ｔ ｉ ｒｄ ｕ ｏ ×１０ ｍ，ｔ ） ｏ ｍ ； ｅｍ ｂ ｅｐ ａｅｗ ｓｃｍ ｏｅ ｆ ｃ ｔ ｉｉ － ２ （ ５ ７ ） Ｄ ｔ ｔ ｎｗ ｖ ｌ ｇ ａ ７ ｎ Ｒ ｓｌ ： ｅ ｉ ａ ｒｎｅｏ ５ ｍ ５ ｍ ｃ ｌ ｎ Ｔ ｏ ｉ ｈｓ ａ ｏ ｐ ｓｄｏ ａｅ ｎ ｒｅＨ ０ ２ ：５ ， ｅ ｃ ｏ ａｅ ｎ ｔ ｗ ｓ ７ ｍ； ｅｕ ｓＴ ｎ ｒ ａ ｇ ｆ ｔ ｕ ｈ ｌ ｏ ｔｌ ｅｉ ｅ ｈ ２ ｔ ｈ ｌｅ
高效液相色谱法测定连翘药材中连翘苷的含量
０ ８４ ｇ 超声辅助催 溶 ，０ 甲醇稀释补全至相应 刻度 ， ．２ ４ｍ ， ７％ 分
别吸取 上述稀释溶液 ２ 注 入 ， 按拟 订的 色谱 条件 测定 Ｏ 并
连翘 苷含量 ， 算 回收率 ， 计 显示 回收率 为 ９ ． ％ 一１１０ ， ８１ ０．％ 平均 回收率 为 ９ ． ％ ， Ｓ ９ ３ Ｒ Ｄ为 ０ １％ 。 ．９ ２ ２ 样 品测定 对 ３批 样 品按 照样 品制 备方 法 制备 供试 ． 液， 按外标法 测定 含量 ， 每个样 品平 行测定 ３次 ， 果连翘苷 结 的质量分数分别为 ０６ ７ ０６ １０ ６３ｍｇｇ ． ８ 、．８ 、．８ ／ 。
—
２ ００ ） 连翘对 照药材 （ 自张仲 景大药 房 ， ０４１ ， 购 经专 家鉴定
为药 用 连 翘 Ｆ ｒ ｔｉ ｓｓｅｓ （ ｈ ｎ ． Ｖ ｈ 的干 燥 果 实 ， ｏｓ ｈａ ｕｐｎａ Ｔ ｕ ｂ ） ａ ｌ ｙ 甲
醇、 乙腈 为色谱纯 ， 水为超纯水 ， 其他试剂均为分析纯 。
２ ４ｈ内基本稳定 。 ２ １６ 精 密度试验 ．． 精 密吸取对 照品溶液 ２ １ ０ 连续 注人 五次 ， 按照上述色谱 条件测 定连 翘苷 的峰 面积 ， 计算 峰面 积 的平均 Ｒ Ｄ值为 １２ ％ ， Ｓ ． １ 结果显示仪器精密度 良好。 ２ １７ 重现性试 验 ．． 精 密秤取 同一批 药材 ， 按样 品制备 方 法平行制备 ５份供试品溶液 ， 照上述 色谱条件测 定连翘苷 按 峰面积 ， 计算平均 Ｒ Ｄ值 为 １３ ％ ， Ｓ ．５ 结果 表明测定数 据重现 色谱柱 ： ｇｌ ｔ １ 柱 （５ Ａ ｉ ｎ ８ １０ｍｍ× ． ｍ ｅ Ｃ ４６ｍ
胡旭 涛
【 摘要】 目的 建立连翘 药材 中连翘苷含量的测定方法 。方 法 采用高效液相色谱法 ， 色谱柱为 Ａ ｉ ｎ Ｃ ８ ｇ ｅｔ １ ｌ
HPLC法测定小儿金翘颗粒中连翘苷的含量
４ 、０６ ｉ，结 果 表 明２０ｇ 试 品 加 入 ２ Ｌ ０５ 、０ｒ ｎ ａ ． 供 ０ｍ ８％的 甲醇 超声 提取 ３ ｉ，供 试 品 中连翘 苷 即 可 ０ ０ｒｎ ａ
提取 完全 。
２精 密称 取 连 翘 苷 对 照 品
大理 学 院学 报
Ｊ ＯＵＲＮＡＬＯＦ ＤＡＬ Ｉ ＲＳ ＴＹ Ｉ ＵＮ ＶＥ Ｉ
第 １ 卷 第６ ２ １ 年６ １ 期 ０２ 月
Ｖｏ． ｌ Ｎ ． Ｊ ｎ ２ ２ １ １ ｏ６ ｕ ． ０１
Ｈ Ｌ 法测定ｄ ＰＣ ｑＬ 金翘颗粒中连翘苷的含量
李志成 ， 邓 涛， 杨永寿
Ｄ ｔｒ ｎ ｔ ｎｏ ｏ ｓ ｔｉ ｉｏ ｒｉｑ ａ ｒ ｎ ｌｓ ｙＨＰ Ｃ ｅｅ ｍｉ ａｉ ｆ ｒｙｈ ｎｉ Ｘ ａ ｅ ｊ ｉｏ Ｇ ａ ｕｅ Ｌ ｏ Ｆ ｎ ｎ ｂ
Ｌ ｉｈ ｎ ， Ｉ Ｚｈｃ ｅ ｇ ＤＥＮＧ Ｔ ｏ ＹＡＮＧ ｎ ｓ ｏ ａ ， Ｙｏ ｇ ｈ ｕ
纯水 。
常用 于儿童咳嗽、 咽痛 、 风热袭肺所致乳蛾等症… 。
金银 花 和 连翘 是该 制 剂 的 主药 ， 连翘 苷 为 连翘 的主 要 成 分 ｒ］研究 表 明连翘 苷 有 一定 的抑 菌 能 力 ［ ， ２， 部分 含 有 连翘 的 复方 ， 以连翘 苷含 量 作 为质 量评 多 价依 据 ， 小儿 金 翘 颗粒 的 现行 质量 标 准 中并 未 对 但 其含 量 进行 控 制 ，为 了有 效 控制 该 制 剂 的质量 ， 本 研 究 采 用 高效 液 相 色 谱 法 对 ｄ ． 金 翘 颗 粒 中 连 翘 ，Ｌ Ｉ
HPLC法测定银翘解毒颗粒中连翘苷和牛蒡子苷的含量
ｆ ．ｈ ｈｒ ｆ ｌ ｔｄ Ｈｏｐ ｔ ｆＳ ｎ Ｙ ｔ ｓ ｎ Ｕ ｉｅｓ ｙ Ｇ ａ ｇ ｈ ｕ ５ ３ ，Ｃ ｉａ ． ｅ ａｔ ｎ ｆＰ ａ ｍａ ｙ ｈ １ ｅ Ｔ ｉ Ａ ｆ ｉ ｅ ｓ ｉ ｌｏ ｕ ａ － ｅ ｎ ｖ ｒｉ ， ｕ ｎ ｚ ｏ ６ ０ ｈｎ ；２Ｄ ｐ ｒ Ｔ ｄ ｉａ ａ ｔ １ ０ ｍｅ ｔ ｈ ｒ ｃ ， ｅ ｏ ｔ
量 瓶 中 ， 甲醇 稀 释至 刻 度 ， 匀 ， 加 摇 分别 精 密 吸取 １ ｌ 入 ０¨ 注 液 相 色谱 仪 ， 上 述条 件测 定 连翘 苷 和牛 蒡子 苷 峰 面积 ．以 按 进 样量 为横 坐 标 （ ， 面 积分 值 为纵 坐标 （， ， 制标 准 曲 ）峰 １） 绘 线 ， 线 性 回 归 方 程 ， 翘 苷 回 归 方 程 ： ＝６１ ｘ ＯＸ一 ．２ 得 连 ｙ ． ｌＳ １ ｘ ２ ０
・
药 品鉴定 ・
２１ ０ １年 １月第 ８卷 第 １期
温 为 ３￣ ０Ｃ。在 本条 件下 ， 连翘 苷 和牛 蒡子 苷能 达 到较 好地 分 离 ， 品其他 成 分对 两者 的测 定无 干 扰 。结果 见 图 １ 样 。
和 牛 蒡 子 苷 对 照 品贮 备 液 １ 、．、．、．、． ｍｌ置 同 一 １ ． ２ ４ ６０ ８ ， ０ ０ ０ ０ ０ｍｌ
２ 方 法 与 结 果
报道 较少 。为 了更 好地 控 制处 方 中有 效 成分 的含量 ， 文 采 本 用 高效 液 相 色谱 法 同时 测 定 银 翘解 毒颗 粒 中连 翘 苷 和 牛 蒡
［ 者 简 介］ 宋 伟 峰 ， 药 师 ， 要研 究 方 向 为 医 院 药 学 。 作 管 主
HPLC法测定连菊清热胶囊中连翘苷的含量
Ｒ Ｄ为 ２ ４ ％ （ ６ 。 结论 Ｓ ．４ ｎ＝ ）
Ｄ ｔｒ ｎ ｔ ｎｏ ｎ ｎｓｏ ｈｌ ｒ ｉｎｕ ｉｇｅｃｐ ｕｅｂ Ｐ Ｃ ｅｅｍｉａｉ ｆｃ ｔ ｔ ｆ ｉｙ ｉ ｉ Ｌ ａｊ ｑｎ ｒ ａ ｓ ｌ ｙＨ Ｌ ｏ ｏｅ ｐ ｌ ｎ ｎ
Ｌ ａ ． ．ＨＡ Ｇ ＨｏｇＣ Ｅ ｉｎ—ｎ Ｄｐ ｉ ｈ ｒ￣ ｅｔａ ｎｉｅｒ ｇ，ｈ ｎｉ ｏａｉ ａ ｓｔｔ ｏ ｈ ｒ ａｙ Ｔ ｉ ａ Ｉ ｎ１ Ｚ Ｎ ｎ ， Ｈ Ｎ Ｘ ａｇｌ ｇ（ ｅｔｆＢｏ ａｍ ｃｕ ｃｌ ｇｎｅｎ Ｓａ ｘ Ｖｃｔ ｎ ｌｎｔｕｅ Ｐ ａｍ ｃ ，ａｙ ｎ Ｙ ｉ ｉ ｏ ｐ ｉ Ｅ ｉ ｏ Ｉ ｉ ｆ ｕ
山西医科大学 报
生 ：笙 箜 鲞 箜 ！ 塑 Ｑ Ｑ
・
７ ７・ ４
Ｈ Ｌ 法 测 定 连 菊 清 热 胶 囊 中连 翘 苷 的含 量 Ｐ Ｃ
李艳 丽 ， 张
摘要 ： 目的 ｍ ５ ｍ，
量。 结果
虹 ， 陈 湘玲
（ 山西药科职业学院生物制药工程系， 太原 ００３ ） ３０ １
ｍｅｈ ｄ Ｔ ｅ ｃ ｌ ｒ ｔ ｎ ｃ ｒ ｅ ｍｅ ｈ ｄ ｗａ ｎ ｅ ｔ ａｅ ｏ ｄ ｔ ｒ ｉ ｅ ｔ ｅ ｃ ｎｅ ｔ ｆｐ ｉ ｙ ｉ ． Ｒｅｕ ｔ Ｐ ｉ ｙ ｉ ｈ ｗ ｄ ａ ｇ ｏ ｉｅ ｒ ｔ ｏ ． ｈ ａｉ ａｉ ｕ ｖ ｔ ｏ ｓｉ ｖ ｓｉ ｔｄ ｔ ｅｅ ｎ ｈ ｏ ｔｎ ｈ ｌ ｒ ｂ ｏ ｇ ｍ ｏ ｌ ｎ ｓ ｌ ｈｌ ｒ ｓ ｏ ｅ ｏ ｄ ｌ ａ ｓ ｌ ｎ ｎ
高效液相色谱法测定连花清瘟胶囊的连翘苷含量
药品评价 Drug Evaluation 2021,18（09）
高效液相色谱法测定连花清瘟胶囊的连翘苷含量
方慧琼，吴应帅，肖芳红 赣州市食品药品检验检测中心，江西 赣州 341000
［摘要］目的：建立 HPLC 法测量连花清瘟胶囊中连翘苷含量的方法。方法：样品甲醇超声处理后，取续滤液，加水稀 释至刻度，采用 Welch Ultimate AQ C18 色谱柱（4.6 mm×250 mm，0.5 μm）；流动相乙腈 -0.1% 磷酸溶液（24∶76）， 流速 1.0 mL/min，检测波长 205 nm。结果：连翘苷在 1.041~20.82 μg 范围内线性关系良好，平均回收率为 99.16%， RSD=1.0%。结论：该方法简便快捷，准确度高，重复性好，可为相关测定方法的建立与改进提供参考。 ［关键词］连花清瘟胶囊；连翘苷；高效液相色谱法 DOI: 10.19939/ki.1672-2809.2021.09.07
连花清瘟胶囊是由连翘、炙麻黄、金银花、炒 苦杏仁、石膏、绵马贯众、板蓝根、大黄、鱼腥草、 广藿香等 13 味中药组成，具有宣肺泄热，清瘟解 毒的功能［1］。临床上常用于治疗流行性感冒、热 毒袭肺证［2］。治疗轻型、普通型新型冠状病毒肺 炎患者疗效颇佳 , 其在控制病情进展、改善临床症 状、抑制机体炎症反应方面有一定优势 , 可用于新 型冠状病毒肺炎早期防治［3-4］。目前有少量标准对 连翘苷的含量测定采用薄层扫描法，本文采用高效 液相法测定连翘苷的含量，不仅能减少含量测定中 的误差，且能提高准确度［5-6］。 1 仪器与试药
收稿日期：2021-03-11 定稿日期：2021-04-25
药品评价 Drug Evaluation 2021,18（09）
·535·
连翘水提液中连翘苷的含量检测
连翘水提液中连翘苷的含量检测作者：王建舫穆祥来源：《农业开发与装备》 2015年第3期王建舫，穆祥*（北京农学院兽医学（中医药）北京市重点实验室，北京 102206）摘要：本试验旨在建立一种高效液相色谱-紫外检测法（HPLC-UV）测定连翘水提液中连翘苷含量的方法。
采用博纳艾杰尔Venusil MP C18色谱柱（150mm×4.6mm，5μm），以乙腈-水（25：75）为流动相，流速1.0ml/min，检测波长277nm，柱温25℃，结果表明连翘苷在50～500μg/ml范围内线性关系良好（r=0.9998），平均加样回收率为99.98%（n=6），峰面积的相对标准偏差（RSD）为0.80%。
此方法专属性强、重复性好，可用于连翘水提液中连翘苷的含量测定。
关键词：连翘；连翘苷；高效液相色谱；含量测定0 引言连翘为木犀科植物连翘Forsythia suspensa（Thunb.）Vahl的干燥果实。
具有清热解毒，消肿散结，疏散风热之功效。
用于痈疽，瘰疬，乳痛，丹毒，风热感冒，温病初起，温热人营，高热烦渴，神昏发斑，热淋涩痛[1]。
本试验采用高效液相色谱法对连翘水提液中的连翘苷含量进行了测定，建立了一种专一性强、重复性好的测定方法，以期为连翘水提物的质量控制提供依据。
1 材料与方法1.1 仪器与试药高效液相色谱仪（Waters Alliance e2695）；美国Millipore水纯化系统；针筒式微孔滤膜过滤器（天津市科亿隆实验设备有限公司，孔径0.22μm）。
连翘苷（批号487-41-2，购自上海同田生物技术股份有限公司）；连翘水提液，本实验室自制；乙腈（色谱纯，天津市光复精细化工研究所）。
1.2 色谱条件博纳艾杰尔Venusil MP C18色谱柱（5μm，150mm×4.6mm）；流动相：乙腈-水（25：75）；流速1.0ml/min；检测波长277nm；柱温25℃。
1.3 溶液的制备1.3.1 对照品溶液的制备。
太行山区不同产地连翘中连翘苷、连翘酯苷A的含量测定
太行山区不同产地连翘中连翘苷、连翘酯苷A的含量测定齐翠翠;李竞;高英;李卫民;周海平;孔增科【摘要】目的：采用HPLC法测定太行山区不同产地、不同采集时间连翘中连翘苷及连翘酯苷A的含量。
方法：采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱，测定连翘苷以乙腈-水（25∶75）为流动相，等度洗脱；流速为1.0ml·min-1；检测波长为277nm。
测定连翘酯苷A以乙腈-0.4％冰醋酸溶液（15∶85）为流动相，等度洗脱，流速为1.0ml·min-1；检测波长为330nm。
结果：连翘苷和连翘酯苷A线性范围分别为0.206～2.060μg和0.120～1.200μg，平均回收率分别为99.52%（RSD=1.74%）和99.63%（RSD=1.21%）。
结论：太行山区不同产地连翘中连翘苷和连翘酯苷A含量差异较大，7月份采集连翘中连翘苷、连翘酯苷A含量最高。
含量测定方法准确、快速，适用于连翘的质量控制。
%Objective:To establish an HPLC method forthe determination of phillyrin and Forsythia-side A in Forsythia suspense from different sites and gathering periods in Taihang mountain. Methods:Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18 (250mm×4.6mm,5μm) was applied. For determina-tion of phillyrin,Mobile phase was with acetonitrile-water (25∶75), the separation was carried out with a gradient program at a flow rate of 1.0ml·min-1 and detection wavelength was 277nm. For determination of Forsythoside A, Mobile phase was with acetonitrile-0.4%acetic acid Solution(15∶85),the separation was carried out with a gradient program at a flow rate of 1.0ml·min-1 and detection wavelength was 330nm. Results:Phillyrin and Forsythiaside A showed good linearity in the ranges of 0.206~2.060μg and 0.120~1.200μg with average recoveriesof 99.52% and 99.63%,Respectively. Conclusions:The contents of phillyrin and Forsythiaside A in Forsythia suspensa from different sites in Taihang mountain marked difference, the contents of phillyrin and Forsythiaside Ain Forsythia suspense was the highest in July,the method is simple and rapid for determination the contents of phillyrin and Forsythiaside A in Forsythia suspense,and can be used as the quality control of Forsythia suspensa.【期刊名称】《北方药学》【年(卷),期】2014(000)001【总页数】3页(P1-2,3)【关键词】连翘;连翘苷;连翘酯苷A;高效液相色谱法【作者】齐翠翠;李竞;高英;李卫民;周海平;孔增科【作者单位】广州中医药大学广州 510006;广州中医药大学广州 510006;广州中医药大学广州 510006;广州中医药大学广州 510006;河北省邯郸市卫生局邯郸056000;河北省邯郸市食品药品检验中心邯郸 056000【正文语种】中文【中图分类】R927.2连翘是我国临床常用传统中药之一，又名旱莲子（《药性论》）、大翘子（《新修本草》），为木犀科植物连翘Forsythia suspensa（Thunb.）Vahl的干燥果实。
连翘苷的提取及其稳定性研究
连翘苷的提取及其稳定性研究赵咏梅;王雷【摘要】采用甲醇提取法提取连翘叶中的连翘苷,HPLC法进行含量测定,并用分光光度法测定温度、酸碱度、光照条件和不同食品添加剂对连翘苷提取液稳定性的影响.结果表明,样品连翘苷含量为48.182 mg·L-1,纯度为96.3％.连翘苷提取液不耐高温,50℃以上时,吸光度值下降;连翘苷提取液在中性条件下最稳定,并且光稳定性好.糖类对连翘苷稳定性无明显影响,经过蔗糖、麦芽糖、葡糖糖和果糖处理之后其吸收值在0.4035～0.4037之间;柠檬酸盐类对连翘苷提取液的稳定性影响较大,但与时间因素无关.【期刊名称】《陕西农业科学》【年(卷),期】2016(062)005【总页数】3页(P21-23)【关键词】连翘苷;食品添加剂;吸光度;稳定性【作者】赵咏梅;王雷【作者单位】西安文理学院生物与环境工程学院,陕西西安710065;西安文理学院生物与环境工程学院,陕西西安710065【正文语种】中文连翘(Forsythia suspense)属木犀科植物，主要分布于陕西、山西、四川、河南、河北等地［1］，其良好的经济效益、生态效益、以及在新药开发和新资源利用中的重要地位已被越来越多的人所认识。
连翘中的主要活性成分是木脂素类化合物连翘苷［2］。
连翘苷不仅具有清除自由基、减肥降血脂作用，同时其抑制神经细胞损伤，增加细胞活性的作用已被证实［3～5］。
笔者还就连翘苷的甲醇提取法进行了研究，认为采用甲醇提取的连翘苷具有纯度大、稳定性较好的优点，然而，其稳定性分析和研究还较缺乏［6］。
为此，笔者实验选择连翘叶为提取原料，通过单因素试验研究连翘苷提取液在不同温度、pH、糖类和光照条件下的稳定性，并检测了几种食品添加剂对连翘苷提取液稳定性的影响，为更好控制连翘提取物质量提供依据。
现报道如下。
1．1 材料、试剂和仪器设备1．1．1 植物材料连翘叶，采摘自秦岭北麓蓝田灞源段，清洗、烘干后保存备用;连翘苷标准品购自于陕西省食品药品监察局，冰箱中避光保存。
2023年中药学类之中药学(中级)模拟考试试卷B卷含答案
2023年中药学类之中药学（中级）模拟考试试卷B卷含答案单选题（共30题）1、生产毒性药品，每次配料时需复核人员A.车间领导B.2人以上C.3人以上D.5人以上E.全车间人员【答案】 B2、浓缩水蜜丸的水分为A.≤9.0％B.≤5.0％C.≤15.0％D.≤12.0％E.≤10.0％【答案】 D3、属剧毒中药的为A.信石B.芒硝C.石膏D.赭石【答案】 A4、煎煮茶剂和袋装茶剂的水分不得超过A.20.0%B.12.0%C.4.0％D.16.0%E.8.0%【答案】 B5、含有麻黄的中成药不宜与哪类物质合用A.碱性药物B.维生素C.单胺氧化酶抑制剂D.溴化物E.重金属盐【答案】 C6、易粘连的药物是（）。
A.桃仁B.枣仁C.芒硝D.乳香【答案】 D7、黄连广谱抗菌作用的成分是A.莨菪亭B.栀子素C.黄樟醚D.小檗碱E.黄酮【答案】 D8、阿胶炒制后可A.活血化瘀B.降低滋腻之性，矫嗅矫味C.止血安络D.养阴润肺E.滋阴补血【答案】 B9、人参配莱菔子属于中药配伍中的A.相须B.相使C.相畏D.相恶【答案】 D10、能全部通过五号筛，并含有能通过六号筛不少于95％的粉末A.最细粉B.极细粉C.粗粉D.细粉E.中粉【答案】 D11、正确的浸提过程为A.浸润、渗透、解吸、溶解B.浸润、渗透、解吸、溶解、扩散C.浸润、溶解、过滤、浓缩、干燥D.浸润、渗透、扩散、置换、乳化【答案】 B12、直接写药物的正名或炒制时，即付清炒或炒的品种，但哪种药物除外（）。
A.苍耳子B.百合C.牛蒡子D.槐花E.王不留行【答案】 B13、按高效液相法测定，连翘中的连翘苷不得少于（）。
A.0.1%B.0.15%C.0.2%D.0.3%E.0.5%【答案】 B14、"蚯蚓头"是形容哪一种药材的性状（）。
A.川芎B.羌活C.党参D.防风E.前胡【答案】 D15、苦楝皮对下列哪种寄生虫无驱虫或杀灭作用（）。
A.蛔虫B.绦虫C.蛲虫D.钩虫【答案】 D16、地肤子除利尿通淋外，还能A.通气下乳B.渗湿止泻C.祛风除痹D.清热止痒E.利胆排石【答案】 D17、可用于治疗痈疽疔毒，瘰疬痰核、癥瘕痞块的药物是A.半边莲B.鸦胆子C.紫花地丁D.山慈菇E.白花蛇舌草【答案】 D18、引起中药霉变的微生物如真菌的最适宜温度为（）。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
HPLC法测定连翘中的连翘苷
第一部分前言
1.连翘药材
连翘是中国临床常用传统中药之一，为木犀科连翘属植物连翘的干燥果实。
主产于我国的山西、河南、陕西。
连翘有清热解毒，散结消肿之功效。
连翘的化学成分主要有挥发油类，苯乙醇苷类、木脂素类、三萜及黄酮类等化合物。
木脂素分为木脂内酯和双环氧木脂素。
2.连翘苷
而连翘苷（Phillyrin），是双环氧木脂素类化合物的葡萄糖苷，化学式为C27H34O11，分子量534.56，熔点181℃，难溶于水，溶于乙醇、甲醇等有机溶剂。
《中国药典2010年版一部》将连翘苷作为控制连翘质量的重要指标，规定按干燥品计算，含连翘苷不得少于0.15%。
3.研究目的
据文献报道连翘苷含量测定方法有薄层扫描法、HPLC-UV法、毛细管区带电泳法、拉曼光谱法、近红外漫反射光谱法、近红外光谱法。
我们考虑到实际情况，拟采用HPLC法对连翘中连翘苷的含量进行测定，建立起连翘药材中连翘苷的含量测定方法。
第二部分实验
一、条件的选择
1、提取条件的选择
对同一连翘药材，我们采用甲醇为溶剂，回流提取、超声波提取、索氏提取三种方法对药材进行处理，结果发现，在三种提取方法中以超声波法从连翘中提取连翘苷的提取率较高，且能将有效成分进行分离。
而且这种方法进行提取操作简单，便于实际操作。
2、检测波长的选择
配制好的连翘苷对照品，我们拿到紫外室，使用紫外扫描检测器在190～400nm范围内对其进行扫描，发现在波长230nm和270nm处均有最大吸收峰，在后面的进一步实验验证，结果表明，在230nm处吸光度较大，灵敏度高。
因此确定选择检测波长为230nm，效果较好。
3、色谱流动相的选择
实验中，我们分别比较了多种比例的流动相，曾选用甲醇—水（40：60）、乙腈—水（30：70）、乙腈—水（21：79）、乙腈—甲醇（25：75）等，结果显示峰形较好的流动相比例乙腈—水（21：79），在此比例的流动相条件下，可以有效的改善峰形，分离效果明显。
4、标准品溶剂的选择
在实验中，我们首先按照药典中配制标准品的方法，使用甲醇溶解标准品后测定，发现溶剂峰过高，影响实验效果；于是就采用乙腈为溶剂溶解标准品测定，发现又会出现前延峰；因此我们选择改变溶剂的浓度大小，使其和流动相比例相近，使用25%乙腈溶解标准品后测定，发现可改善峰形，出峰效果较好。
最终，经过一系列的前期准备与实验条件摸索，我们确定下来的色谱条件为：色谱柱为C18色谱柱(4.6 mm×150 mm，5μｍ)，流动相为乙腈-水(体积比为21∶79)，流速1.0mL/min，柱温为室温，检测波长:230nm；进样量：20μl，理论塔板数不低于3000。
二、方法学考察
1、方法的专属性
按照确定下来的色谱条件，我们先吸取连翘苷标准品溶液、供试品溶液各20μl，进样，记录色谱图，结果见图所示。
在本色谱条件下，连翘苷保留时间约为10.38min。
本方法具有较高的专属性，在此条件下所测得的结果能代表连翘苷的含量。
2、线性关系考察
精密吸取连翘苷标准品稀释溶液4，8，12，16，20μL，分别进样进行分析，按色谱条件测定峰面积，以峰面积为纵坐标，以连翘苷标准品进样量(μg)为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。
3、精密度试验
精密吸取连翘苷标准品重复进样5次，每次进样20μl，以测得的峰面积为指标，连翘苷的相对标准偏差RSD为1.69%（n=5），表明仪器精密度良好。
4、稳定性试验
精密吸取同一供试品溶液，在放置 2，4，6，8，10h后进样，每次进样20μl，测定峰面积值，结果表明连翘苷在10h内稳定性良好，RSD为1.70%。
5、重复性试验
精密称取同一连翘样品5份，按上述供试品溶液制备方法和色谱条件进行测定，结果连翘苷RSD=1.65%（n=5）。
6、样品含量测定
精密吸取供试品溶液按上述色谱条件进行测定，结果连翘药材中连翘苷的含量为1.152mg/g。
7、加样回收率试验
三、结论
本实验标准曲线，连翘苷的线性范围0.264～1.32μg，线性关系良好，相关系数均达到0.999以上；日内精密度RSD%均小于2%；样品稳定性试验表明样品在10h内稳定性良好。
此法简便快捷，准确度高，可用于连翘药材的质量控制。