平菇液体种子培养基优化
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第 30卷第 5期 2008年 10月
江西 农 业大 学 学 报 Acta Agr icu lturae Un iversitatis Jiangx iensis
文章编号: 1000- 2286( 2008) 05- 0915- 04
Vo.l 30, No. 5 Oc.t , 2008
平菇液体种子培养基优化
( Departm ent o f L ife Science , Y angtze Norm al Un iversity, Chongq ing 408100, Ch ina)
Abstract: The appropriate liquid strain cultural m edium of P. ostreatus FL10 w as optim ized. T he results show ed that co rn m ea l w as su itab le fo r the grow th o fP. ostreatus. A satisfactory n itrogen source w as yeast ex trac.t C /N ratio o f 50 1 w as su itable for the g row th. It w as a lso found that KH2 PO4 and v itam in B1 cou ld greatly st imu late the g row th. The optim um form ula for the m ycelial grow th o fP. ostreatus w as as fo llow s: 30 g / L corn m ea,l 3 g /L yeast ex trac,t 1. 5 g /L KH 2PO4, 1. 0 g /LM gSO4 7H2O and 0. 01 g /L v itam in B1.
1. 2. 3 C /N 比试验 固定酵母膏用量, 改变葡萄糖用量设计培养液的 C /N 比 ( 碳元素与氮元素含量
比 ) 分别为 20 1、30 1、40 1、50 1、60 1和 70 1进行试验, 设 3次重复, 方法同 1. 2. 1。
1. 2. 4 矿质盐试验 将 1 g /L K2 SO4、KH 2 PO4、CaSO4、N a2 SO4 和 M gSO4 7H2 O 分别加入矿质盐基础培 养基中, 设 3次重复, 方法同 1. 2. 1。
1. 2. 5 维生素试验 将 0. 01 g /L 的维生素 B1、维生素 B2、维生素 B6、维生素 B12和维生素 C 5种维生
素分别加入基础培养基中, 设 3次重复, 方法同 1. 2. 1。
1. 2. 6 培养基筛选 根据上述试验结果, 选取玉米粉、酵母膏、KH2 PO4和维生素 B1设计四因子、三水 平的 L9 ( 34 )正交试验, 筛选平菇的最适培养基组成, 设 3次重复, 试验因子和水平见表 1。试验结果数 据用 DPS7. 05软件处理。
457. 37 m g / ( 100 mL ), 比 对照减少 28. 37%
( 图 3) 。
2. 5 维生素试验结果
在维生素 B1 培养液中, 菌丝 球数量
多, 菌丝体生长速度快; 菌丝体的干质量最
大为 673. 58 m g / ( 100 mL ), 比 对照 增加
40. 23% 。在维生素 C 培养液中, 菌丝球数
916
江西 农业 大学 学报
第 30卷
1. 2 方法
1. 2. 1 碳源试验 将 20 g /L 的葡萄糖、蔗糖、果糖、可溶性淀粉和玉米粉分别加入碳源基础培养基
中, 装液量 为 250 mL 三角瓶 盛 75 mL 培养液, 以 基础 培养 基为 对照, 设 3 次重 复。 121. 3 ! 灭 菌
2 结果与分析
2. 1 碳源试验结果 平菇 FL10菌丝在 5种碳源中均能正常生长, 但在不同碳源中菌丝体生长的情况不同。在玉米粉培
养基中菌丝球数量多, 菌 丝体生长速度 快; 菌丝 体干质量最大 为 654. 47 m g / ( 100 mL ) , 比对照 增加 151. 54% 。而在果糖培养基中菌丝球数 量少, 菌 丝体生长速度慢; 菌丝体 干质量最小为 275. 35 m g / ( 100 mL ), 比对照增加 2. 69% ( 图 1)。 2. 2 氮源试验结果
注: 1. 蔗糖; 2. 可溶性淀 粉; 3. 基础 培养 基; 4. 玉米 粉; 5. 果糖; 6.
葡萄糖。
体的干质量最大为 770. 41 mg / ( 100mL),
第 5期
陈今朝等: 平菇液体种子培养基优化
9 17
比对照增加 191. 53% 。而 C /N 比为 20 1
时, 菌丝球数量少, 菌丝体生长速度慢; 菌
图 2 不同氮源菌丝 体的产量 F ig. 2 M yce lia l b iomass o f diffe rent nitrogen sources 注: 1. 蛋白胨; 2. 麦皮; 3. 酵母膏; 4. 基础培养基; 5. 硫酸铵; 6. 尿素。
10. 51% 。在 N a2 SO4 培养基中, 菌丝球数量 少, 菌丝体生长速度慢; 菌丝体干质量最小为
关键词: 平菇; 液体种子; 培养基优化 中图分类号: S646. 1+ 4. 041 文献标识码: A
The Optim iztion of CulturalM edium of L iquid Strain of Pleurotus ostreatus FL10
CH EN Jin- zhao, DA I X uan, TAN Y ong- zhong, W ANG Q ing
1 材料与方法
1. 1 材料 1. 1. 1 供试菌株 平菇 FL10菌株, 2007年 4月分离自武陵山涪陵金山产新鲜野生平菇子实体。 1. 1. 2 培养基 碳源、氮源试验基础培养基 ( 马铃薯 200 g /L, KH 2PO 4 2 g /L, M gSO 4 7H2O 1 g /L, 维 生素 B1 0. 01 g /L ) ; C /N 比、正交试验基础培养基 ( KH2 PO4 2 g /L, M gSO4 7H2 O 1 g /L, 维生素 B1 0. 01 g / L ); 矿质盐、维生素试验基础培养基 ( 葡萄糖 20 g /L, 蛋白胨 2 g /L, KH 2PO4 2 g /L, M gSO4 7H 2O 1 g / L ); 母种培养基 PDA。
20 m in, 接种 0. 5 cm2 菌丝块, 25 ! 、150 r/m in振荡培养 7 d。过滤, 用纯净水洗涤 3次, 80 ! 烘干至恒
重, 用电子天平称菌丝体的干质量。
1. 2. 2 氮源试验 将 2 g /L 的酵母膏、蛋白胨、尿素、( NH 4 ) 2 SO4 和麸皮 20 g /L 分别加入氮源基础培 养基中, 以基础培养基为对照, 设 3次重复, 方法同 1. 2. 1。
2. 6 正交试验结果
基础培养基。
从表 3中极差值 R 可知, 玉米粉对平
菇菌丝生长量 的影响最大; 其次是酵母膏
和 KH2 PO4; 维生素 B1 的影响最小。其最佳
配方为 A 3 B3 C2 D1,ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ即玉米粉 30 g /L, 酵母膏
3 g /L, KH2 PO4 1. 5 g /L, 维生素 B1 0. 01 g /L。 该配方包含在本正交试验表中, 其菌丝体
K ey w ord s: F lammulina velutip es FL10; liqu id strain; optim izat ion of cu ltural m edium
平菇 ( P leurotus ostreatus) , 又名侧耳, 属担子菌亚门、伞菌目、口蘑科、侧耳属, 是我国广泛栽培的食 用菌之一 [ 1] 。平菇富含蛋白质、纤维素、矿质元素和维生素等, 肉质细嫩, 味道鲜美 [ 2] 。虽然平菇栽培 一般采用固体菌种, 但最新的研究结果表明: 液体菌种具有生产周期短、菌种纯度高、萌发点多、发菌快 和生产成本低等优点, 是食用菌菌种生产发展的方向 [ 3] 。因此, 我们用液体培养法研究了从涪陵金山 分离到的平菇 FL10菌种的营养生理特性, 并对其培养基进行了筛选, 旨在为平菇 FL10液体菌种的培养和 规模化栽培提供理论依据。
陈今朝, 戴 玄, 谭永忠, 王 庆
(长江师范学院 生命科学系, 重庆 408100)
摘要: 对平菇 FL10液体 种子的培养基进行了优化, 结果表明, 平菇菌丝在玉米粉培养基中生长最好; 酵母膏为适 宜氮源; C /N 比为 50 1时 菌丝生长最佳; KH 2 PO4 和维生素 B1 对菌丝生长有促进作用。最适培养基组成为: 玉 米粉 30 g /L, 酵母膏 3 g /L, KH2 PO4 1. 5 g /L, M gSO4 7H 2O 1 g /L 和维生素 B1 0. 01 g /L。
产量为 975. 92 m g / ( 100 mL ), 也是本正交
试验中菌丝体产量最大的配方。
图 4 不同维生素菌丝体的产量
从表 4 可知, 玉米粉的 F 值 最大; 酵
F ig. 4 M yce lia l b iomass o f d iffe rent v itam ins
母膏和 KH2 PO4 次之; 维生素 B1 最小。即
表 1 培养基筛选的四因子三水平设计
T ab. 1 T he d ifferen t level and factors
g/L
水平
1 2 3
玉米粉 ( A ) 10 20 30
酵母膏 ( B) 1 2 3
因素
KH2 PO 4 ( C) 1 1. 5 2
维生素 B1 ( D ) 7 0. 01 0. 015 0. 02
收稿日期: 2008- 05- 12 修回日期: 2008- 07- 11 基金项目: 重庆市科委科技攻关项目 ( 2006AC1045 )和重庆市教委科研项目 ( K J07130 ) 作者简介: 陈今朝 ( 1964- ), 男, 副教授, 硕士, 主要从事食用菌研究; E - m a i:l chen jinzhao@ 126. com。
影响了菌丝生长。
2. 3 C /N 比试验结果
在不同 C /N 比培养液中, 平菇菌丝体
图 1 不同碳源菌丝体的产量
的干质量不同 (表 2)。当 C /N比为 50 1时,
F ig. 1 M yce lial biom ass of d ifferent carbon sources
平菇菌丝球数量多, 菌丝体生长速度快; 菌丝
丝体干质量最小为 594. 59 m g / ( 100 mL ) ,
比对照增加 125. 00% 。在不同 C /N 比培 养液中菌丝体干质量大小依次为: 50 1, 60
1, 40 1, 30 1, 70 1, 20 1。
2. 4 矿质盐试验结果 在 KH2 PO4 培养基中, 平菇菌丝球数
量多, 菌丝体生长速度快; 菌丝体干质量最 大为 695. 10 m g / ( 100 mL ), 比 对照 增加
以酵母膏做氮源时, 平菇菌丝球数量之多, 菌丝体生长速度之快; 菌丝体干质量最大为 659. 71 m g /
( 100 mL ), 比对照增加 61. 26% 。尿素做 氮源时, 菌丝球数量少, 菌丝体生长速度
慢; 菌 丝 体 干 质 量 最 低 为 293. 24 m g /
( 100 mL ), 比对照减 少 26. 40% ( 图 2), 这可能是因为尿素水解产生的中间产物
注: 1. 维生素 B1; 2. 维生素 B2; 3. 维 生素 B6; 4. 维 生素 B12; 5. 维
量少, 菌丝体生长速度慢; 菌丝体干质量最小
图 3 不同无机盐菌丝体的产量
为 489. 44 mg / ( 100 mL), 比对照增加 1. 90%
F ig. 3 M yce lia l b iomass o f different inorg an ic sources
( 图 4) 。
注: 1. 硫酸钾; 2. 硫酸镁; 3. 硫酸钙; 4. 硫酸钠; 5. 磷酸二氢 钠; 6.
江西 农 业大 学 学 报 Acta Agr icu lturae Un iversitatis Jiangx iensis
文章编号: 1000- 2286( 2008) 05- 0915- 04
Vo.l 30, No. 5 Oc.t , 2008
平菇液体种子培养基优化
( Departm ent o f L ife Science , Y angtze Norm al Un iversity, Chongq ing 408100, Ch ina)
Abstract: The appropriate liquid strain cultural m edium of P. ostreatus FL10 w as optim ized. T he results show ed that co rn m ea l w as su itab le fo r the grow th o fP. ostreatus. A satisfactory n itrogen source w as yeast ex trac.t C /N ratio o f 50 1 w as su itable for the g row th. It w as a lso found that KH2 PO4 and v itam in B1 cou ld greatly st imu late the g row th. The optim um form ula for the m ycelial grow th o fP. ostreatus w as as fo llow s: 30 g / L corn m ea,l 3 g /L yeast ex trac,t 1. 5 g /L KH 2PO4, 1. 0 g /LM gSO4 7H2O and 0. 01 g /L v itam in B1.
1. 2. 3 C /N 比试验 固定酵母膏用量, 改变葡萄糖用量设计培养液的 C /N 比 ( 碳元素与氮元素含量
比 ) 分别为 20 1、30 1、40 1、50 1、60 1和 70 1进行试验, 设 3次重复, 方法同 1. 2. 1。
1. 2. 4 矿质盐试验 将 1 g /L K2 SO4、KH 2 PO4、CaSO4、N a2 SO4 和 M gSO4 7H2 O 分别加入矿质盐基础培 养基中, 设 3次重复, 方法同 1. 2. 1。
1. 2. 5 维生素试验 将 0. 01 g /L 的维生素 B1、维生素 B2、维生素 B6、维生素 B12和维生素 C 5种维生
素分别加入基础培养基中, 设 3次重复, 方法同 1. 2. 1。
1. 2. 6 培养基筛选 根据上述试验结果, 选取玉米粉、酵母膏、KH2 PO4和维生素 B1设计四因子、三水 平的 L9 ( 34 )正交试验, 筛选平菇的最适培养基组成, 设 3次重复, 试验因子和水平见表 1。试验结果数 据用 DPS7. 05软件处理。
457. 37 m g / ( 100 mL ), 比 对照减少 28. 37%
( 图 3) 。
2. 5 维生素试验结果
在维生素 B1 培养液中, 菌丝 球数量
多, 菌丝体生长速度快; 菌丝体的干质量最
大为 673. 58 m g / ( 100 mL ), 比 对照 增加
40. 23% 。在维生素 C 培养液中, 菌丝球数
916
江西 农业 大学 学报
第 30卷
1. 2 方法
1. 2. 1 碳源试验 将 20 g /L 的葡萄糖、蔗糖、果糖、可溶性淀粉和玉米粉分别加入碳源基础培养基
中, 装液量 为 250 mL 三角瓶 盛 75 mL 培养液, 以 基础 培养 基为 对照, 设 3 次重 复。 121. 3 ! 灭 菌
2 结果与分析
2. 1 碳源试验结果 平菇 FL10菌丝在 5种碳源中均能正常生长, 但在不同碳源中菌丝体生长的情况不同。在玉米粉培
养基中菌丝球数量多, 菌 丝体生长速度 快; 菌丝 体干质量最大 为 654. 47 m g / ( 100 mL ) , 比对照 增加 151. 54% 。而在果糖培养基中菌丝球数 量少, 菌 丝体生长速度慢; 菌丝体 干质量最小为 275. 35 m g / ( 100 mL ), 比对照增加 2. 69% ( 图 1)。 2. 2 氮源试验结果
注: 1. 蔗糖; 2. 可溶性淀 粉; 3. 基础 培养 基; 4. 玉米 粉; 5. 果糖; 6.
葡萄糖。
体的干质量最大为 770. 41 mg / ( 100mL),
第 5期
陈今朝等: 平菇液体种子培养基优化
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比对照增加 191. 53% 。而 C /N 比为 20 1
时, 菌丝球数量少, 菌丝体生长速度慢; 菌
图 2 不同氮源菌丝 体的产量 F ig. 2 M yce lia l b iomass o f diffe rent nitrogen sources 注: 1. 蛋白胨; 2. 麦皮; 3. 酵母膏; 4. 基础培养基; 5. 硫酸铵; 6. 尿素。
10. 51% 。在 N a2 SO4 培养基中, 菌丝球数量 少, 菌丝体生长速度慢; 菌丝体干质量最小为
关键词: 平菇; 液体种子; 培养基优化 中图分类号: S646. 1+ 4. 041 文献标识码: A
The Optim iztion of CulturalM edium of L iquid Strain of Pleurotus ostreatus FL10
CH EN Jin- zhao, DA I X uan, TAN Y ong- zhong, W ANG Q ing
1 材料与方法
1. 1 材料 1. 1. 1 供试菌株 平菇 FL10菌株, 2007年 4月分离自武陵山涪陵金山产新鲜野生平菇子实体。 1. 1. 2 培养基 碳源、氮源试验基础培养基 ( 马铃薯 200 g /L, KH 2PO 4 2 g /L, M gSO 4 7H2O 1 g /L, 维 生素 B1 0. 01 g /L ) ; C /N 比、正交试验基础培养基 ( KH2 PO4 2 g /L, M gSO4 7H2 O 1 g /L, 维生素 B1 0. 01 g / L ); 矿质盐、维生素试验基础培养基 ( 葡萄糖 20 g /L, 蛋白胨 2 g /L, KH 2PO4 2 g /L, M gSO4 7H 2O 1 g / L ); 母种培养基 PDA。
20 m in, 接种 0. 5 cm2 菌丝块, 25 ! 、150 r/m in振荡培养 7 d。过滤, 用纯净水洗涤 3次, 80 ! 烘干至恒
重, 用电子天平称菌丝体的干质量。
1. 2. 2 氮源试验 将 2 g /L 的酵母膏、蛋白胨、尿素、( NH 4 ) 2 SO4 和麸皮 20 g /L 分别加入氮源基础培 养基中, 以基础培养基为对照, 设 3次重复, 方法同 1. 2. 1。
2. 6 正交试验结果
基础培养基。
从表 3中极差值 R 可知, 玉米粉对平
菇菌丝生长量 的影响最大; 其次是酵母膏
和 KH2 PO4; 维生素 B1 的影响最小。其最佳
配方为 A 3 B3 C2 D1,ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ即玉米粉 30 g /L, 酵母膏
3 g /L, KH2 PO4 1. 5 g /L, 维生素 B1 0. 01 g /L。 该配方包含在本正交试验表中, 其菌丝体
K ey w ord s: F lammulina velutip es FL10; liqu id strain; optim izat ion of cu ltural m edium
平菇 ( P leurotus ostreatus) , 又名侧耳, 属担子菌亚门、伞菌目、口蘑科、侧耳属, 是我国广泛栽培的食 用菌之一 [ 1] 。平菇富含蛋白质、纤维素、矿质元素和维生素等, 肉质细嫩, 味道鲜美 [ 2] 。虽然平菇栽培 一般采用固体菌种, 但最新的研究结果表明: 液体菌种具有生产周期短、菌种纯度高、萌发点多、发菌快 和生产成本低等优点, 是食用菌菌种生产发展的方向 [ 3] 。因此, 我们用液体培养法研究了从涪陵金山 分离到的平菇 FL10菌种的营养生理特性, 并对其培养基进行了筛选, 旨在为平菇 FL10液体菌种的培养和 规模化栽培提供理论依据。
陈今朝, 戴 玄, 谭永忠, 王 庆
(长江师范学院 生命科学系, 重庆 408100)
摘要: 对平菇 FL10液体 种子的培养基进行了优化, 结果表明, 平菇菌丝在玉米粉培养基中生长最好; 酵母膏为适 宜氮源; C /N 比为 50 1时 菌丝生长最佳; KH 2 PO4 和维生素 B1 对菌丝生长有促进作用。最适培养基组成为: 玉 米粉 30 g /L, 酵母膏 3 g /L, KH2 PO4 1. 5 g /L, M gSO4 7H 2O 1 g /L 和维生素 B1 0. 01 g /L。
产量为 975. 92 m g / ( 100 mL ), 也是本正交
试验中菌丝体产量最大的配方。
图 4 不同维生素菌丝体的产量
从表 4 可知, 玉米粉的 F 值 最大; 酵
F ig. 4 M yce lia l b iomass o f d iffe rent v itam ins
母膏和 KH2 PO4 次之; 维生素 B1 最小。即
表 1 培养基筛选的四因子三水平设计
T ab. 1 T he d ifferen t level and factors
g/L
水平
1 2 3
玉米粉 ( A ) 10 20 30
酵母膏 ( B) 1 2 3
因素
KH2 PO 4 ( C) 1 1. 5 2
维生素 B1 ( D ) 7 0. 01 0. 015 0. 02
收稿日期: 2008- 05- 12 修回日期: 2008- 07- 11 基金项目: 重庆市科委科技攻关项目 ( 2006AC1045 )和重庆市教委科研项目 ( K J07130 ) 作者简介: 陈今朝 ( 1964- ), 男, 副教授, 硕士, 主要从事食用菌研究; E - m a i:l chen jinzhao@ 126. com。
影响了菌丝生长。
2. 3 C /N 比试验结果
在不同 C /N 比培养液中, 平菇菌丝体
图 1 不同碳源菌丝体的产量
的干质量不同 (表 2)。当 C /N比为 50 1时,
F ig. 1 M yce lial biom ass of d ifferent carbon sources
平菇菌丝球数量多, 菌丝体生长速度快; 菌丝
丝体干质量最小为 594. 59 m g / ( 100 mL ) ,
比对照增加 125. 00% 。在不同 C /N 比培 养液中菌丝体干质量大小依次为: 50 1, 60
1, 40 1, 30 1, 70 1, 20 1。
2. 4 矿质盐试验结果 在 KH2 PO4 培养基中, 平菇菌丝球数
量多, 菌丝体生长速度快; 菌丝体干质量最 大为 695. 10 m g / ( 100 mL ), 比 对照 增加
以酵母膏做氮源时, 平菇菌丝球数量之多, 菌丝体生长速度之快; 菌丝体干质量最大为 659. 71 m g /
( 100 mL ), 比对照增加 61. 26% 。尿素做 氮源时, 菌丝球数量少, 菌丝体生长速度
慢; 菌 丝 体 干 质 量 最 低 为 293. 24 m g /
( 100 mL ), 比对照减 少 26. 40% ( 图 2), 这可能是因为尿素水解产生的中间产物
注: 1. 维生素 B1; 2. 维生素 B2; 3. 维 生素 B6; 4. 维 生素 B12; 5. 维
量少, 菌丝体生长速度慢; 菌丝体干质量最小
图 3 不同无机盐菌丝体的产量
为 489. 44 mg / ( 100 mL), 比对照增加 1. 90%
F ig. 3 M yce lia l b iomass o f different inorg an ic sources
( 图 4) 。
注: 1. 硫酸钾; 2. 硫酸镁; 3. 硫酸钙; 4. 硫酸钠; 5. 磷酸二氢 钠; 6.