糖原含量检测试剂盒说明书
辅酶ⅠNAD(H)含量试剂盒说明书
辅酶ⅠNAD(H)含量试剂盒说明书微量法100管/48样注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义:辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循环(TCA)的主要氢受体,生成的NADH经呼吸电子链(ETC)传递把电子交给氧,在合成ATP的同时,形成大量的ROS,同时NADH再生为NAD+。
糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。
NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。
较高的NAD(H)及NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高,处于过氧化状态。
此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。
另外,NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。
测定原理:分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和NADH,NADH通过PMS的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT)为甲瓒,在570nm下检测吸光值;而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH,进一步采用MTT还原法检测。
需自备的仪器和用品:酶标仪、台式离心机、移液器、96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
NAD+和NADH的提取:1 血清(浆)中NAD+和NADH的提取:NAD+的提取:按照血清(浆)体积(mL):酸性提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议取约0.1mL血清(浆),加入1mL酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μL上清液,加入500μL碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。
糖原PAS染色试剂盒使用方法及注意事项
自备材料:
1、 10%福尔马林固定液
2、蒸馏水
3、乙醇
操作步骤(仅供参考):
1、 常规固定,常采用 10%的福尔马林,常规脱水包埋。
7、 自来水冲洗 10min。
8、 样本置于苏木素染色液中,染细胞核 1~2min。
9、 酸性乙醇分化液分化 2~5s。
10、 自来水冲洗 10~15min 后,更换双蒸水清洗,使其返蓝。
11、 逐级常规乙醇脱水。 二甲苯透明,中性树胶封固。
染色结果: PAS 反应阳性物质 细胞核 细胞质
红色或紫红色 蓝色 深浅不一的红色
4×100ml 100ml 100ml 100ml 100ml
Storage 4℃ 避光 4℃ 避光 RT 避光
RT
产品说明:
糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus 在 1946 年最先使用高碘酸-雪夫技术显 示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色液不仅能够显示糖原,还能显示中性黏 液性物质和某些酸性物质,以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。
5、 在过碘酸溶液和 Schiff Reagent 中作用时间非常重要,该依据切片厚薄、组织的 类别等决定。
6、 本染色液常用于常规组织切片染色,对于真菌、细胞、极其薄的切片,建议采购糖 原 PAS 染色试剂盒(细胞真菌专用), 因为其过碘酸溶液和苏木素溶液浓度更低,不 宜过染。
7、 冷冻切片染色时间尽量要短。
备注:颜色深浅很大程度上取决于样品在过碘酸溶液和 Schiff Reagent 中作用时间的长 短。 阴性对照(可选):
葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法) 产品说明书
葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine法)产品编号 产品名称包装 S0201S 葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法) 200次 S0201M葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法)1000次产品简介:葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法) (Glucose Assay Kit with O-toluidine)是一种基于葡萄糖与邻甲苯胺的显色反应,通过比色法超高灵敏度、超宽线性范围检测血清、血浆、尿液、细胞或组织裂解液、饮料等溶液中葡萄糖含量的试剂盒。
本试剂盒灵敏度高、线性范围极宽、使用便捷。
本试剂盒对于在5-10,000mg/dl (相当于约0.28-550mM)范围的葡萄糖内有良好线性,并且具有操作便捷、显色稳定、无需煮沸、成本低、适合高通量检测等优点。
本试剂盒检测下限可以达到5mg/dl (20µl 样品),相当于50ng/ml 或278µM ;检测上限可以达到2000mg/dl (5µl 样品)或10,000mg/dl (1µl 样品),相当于20mg/ml (约111mM)或100mg/ml (约555mM)。
本试剂盒既可以轻松检测正常血样中的葡萄糖浓度,也可以检测高血糖血样品。
市售常见血糖仪的葡萄糖浓度检测范围约为1-30mM ,相当于约20-600mg/dl ,在检测一些过高血糖或过低血糖样品时会存在困难,而本试剂盒提供了5-10,000mg/dl (相当于约0.28-550mM)极宽的葡萄糖浓度检测范围。
本试剂盒所需样品体积小。
本试剂盒推荐的样品用量为5-20µl ,也可以使用如1-2µl 或更小体积的样品。
本试剂盒特异性好。
与常用的葡萄糖氧化酶-过氧化酶偶联(GOD-POD)法相比,由于邻甲苯胺试剂只与醛糖显色,且不受其它还原性物质的影响,本试剂盒非常适合血清、尿液等溶液中葡萄糖浓度的检测。
葡萄糖(glucose),也被称为dextrose 或grape sugar ,被认为是自然界中分布最广且最为重要的一种单糖。
BCA法蛋白含量测定试剂盒使用说明
BCA法蛋白含量测定试剂盒使用说明BCA法(bicinchoninic acid assay)是一种用于测定蛋白质含量的常用方法。
BCA法蛋白含量测定试剂盒使用说明如下:试剂盒组成:1.BCA试剂A:含有重铜离子和碱性溶液。
2.BCA试剂B:含有双咪唑试剂和碱性溶液。
3.蛋白标准溶液:一系列已知浓度的牛血清蛋白标准溶液。
4.BCA试剂C:含有特殊缓冲溶液。
注意事项:1.所有试剂和样品在使用前均需室温下静置至少30分钟。
2.打开试剂盒后,避免将试剂直接暴露于空气中,以免影响试剂稳定性。
3.在所有步骤中,使用干净且蛋白污染的工具可能会导致错误的结果。
步骤1:制备标准曲线1.准备一系列不同浓度的蛋白标准溶液,如0、20、40、60、80和100μg/mL。
2.取0.1mL蛋白标准溶液加入1.9mL去离子水,即配制出100μg/mL的稀释溶液。
3.以同样的方法依次配制出20、40、60和80μg/mL的稀释溶液。
4.将每个稀释溶液的0.2mL与2mLBCA试剂A混合,放置30分钟。
5.加入0.5mLBCA试剂B,再次混合均匀。
6.将混合液放置37°C加热反应30分钟后冷却至室温。
7. 使用紫外-可见光谱仪测定吸光度,以280 nm为波长,绘制标准曲线。
步骤2:测定待测样品1.取待测样品,如细胞裂解液,加入BCA试剂C进行稀释,使得样品中的蛋白质浓度在标准曲线范围内。
2.取样品0.1mL加入1.9mL去离子水,配制出与标准曲线相同浓度的稀释液。
3.加入1mLBCA试剂A混合均匀,放置30分钟。
4.加入0.2mLBCA试剂B,再次混合均匀。
5.将混合液放置37°C加热反应30分钟后冷却至室温。
6. 使用280 nm波长的紫外-可见光谱仪测定吸光度。
步骤3:计算蛋白质含量1.将待测样品的吸光度值与标准曲线进行比较,根据吸光度值确定样品中蛋白质的含量。
2.通过线性拟合标准曲线计算待测样品中蛋白质的浓度。
糖化血红蛋白(HbA1c)测定试剂盒(免疫荧光层析法)产品技术要求注册版
医疗器械产品技术要求编号:糖化血红蛋白(HbA1c)测定试剂盒(免疫荧光层析法)1. 产品型号/规格及其划分说明1.1 型号规格25人份/盒1.2 组成试剂盒主要由测试卡、样本缓冲液、信息卡组成。
测试卡:由荧光垫(包被有荧光标记的Hb鼠源抗体)、硝酸纤维素膜(包被有HbA1c鼠源抗体、Hb鼠源抗体)、吸水纸、PVC底板组成;样本缓冲液:主要成分磷酸盐缓冲液;信息卡:记载本批次试剂的标准曲线信息。
1.3 适用范围用于定量检测人全血中糖化血红蛋白(HbA1c)的含量,临床上主要用于糖尿病的辅助诊断和血糖水平的监控。
1.性能指标1.1外观试剂盒外观应整洁,文字符号标识清晰,封装无破损,内容物齐全。
测试卡的外观应符合下列要求:a)测试卡应平整、边缘无毛刺;b)测试卡外观整齐、色泽均匀、不能有色斑或污渍。
1.2物理检测1.2.1试纸条宽度试纸条宽度应不小于 2.5mm。
1.2.2液体移行速度液体移行速度应不小于10mm/min。
1.3试剂装量HbA1c 样本缓冲液装量为1.00mL,相对偏差不超过±5.0%。
1.4准确度分别测定(6.0±0.6)%和(8.0±0.8)%的HbA1c 参考品,相对偏差应不超过±10.0%。
1.5线性范围在所规定的线性范围[4.0%,14.0%]内:a)线性相关系数(r)应不小于0.9900;b)[4.0%,6.0%]区间内,线性绝对偏差(D i)应不超过±0.6%。
(6.0%,14.0%]区间内,线性相对偏差(R i)应不超过±10.0%。
1.6重复性抽取同一批次试剂盒,分别测定(6.0±0.6)%和(8.0±0.8)% HbA1c 参考品,变异系数(CV)应不大于10.0%。
1.7批间差抽取3 个不同批次试剂盒,分别测定(6.0±0.6)%和(8.0±0.8)% HbA1c 参考品,批间相对极差(R)应不大于15.0%。
葡萄糖含量检测试剂盒说明书 BC2500
葡萄糖含量检测试剂盒说明书可见分光光度法货号:BC2500规格:50T/48S 产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体10mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体25 mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体25 mL×1瓶2-8℃保存溶液的配制:1、混合试剂的配制:使用前将试剂二和试剂三1:1等体积混合,用多少配多少;2、试剂一:1μmol/mL 葡萄糖溶液。
产品说明:葡萄糖不仅是细胞能量代谢的主要底物,而且其代谢中间产物是生物合成的重要底物。
植物可通过光合作用产生葡萄糖。
就哺乳动物而言,葡萄糖不仅是大脑神经系统、肌肉、脂肪组织等的唯一能源,而且与还原性辅酶、乳糖和乳脂的合成密切相关。
葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase ,GOD )催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢;过氧化物酶(Peroxidase ,POD )催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚,生成有色化合物,在505 nm 有特征吸收峰。
Gluconic Acid + H 2O 2H 2O 2Colored Compound (Quinonemine)(505nm)技术指标:最低检出限:0.0078 μmol/mL线性范围:0.0625-3 μmol/mL注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、超声破碎仪、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1. 组织的处理:按照组织质量(g ):蒸馏水体积(mL )为1:5~10 的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL 蒸馏水),研磨成匀浆,置沸水浴中煮沸10 min (盖紧,防止水分散失),冷却至室温后,8000g ,25℃离心10min ,取上清液备用。
糖原染色液
糖原染色液(PAS)【预期用途】供骨髓细胞涂片及血液细胞涂片作染色检查。
【检验原理】本染色反应为高碘酸-雪夫反应,高碘酸能使细胞内多糖类物质的乙二醇基(-CHOH-CHOH)氧化,形成二醛基(-CHO-CHO),醛基与雪夫(Schiff)试剂中的无色品红结合生成紫红色化合物,定位于细胞浆中。
【主要组成成份】组成主要成份1、固定剂(Α液) 甲醛2、高碘酸溶液(B 液) 高碘酸3、雪夫(Schiff)试剂(C 液) 无色品红4、甲基绿溶液(D 液) 甲基绿【储存条件及有效期】有效期:一年(十二个月)。
储存条件:本试剂盒应贮存于2~8℃低温环境。
【样本要求】新鲜的骨髓细胞涂片及血液细胞涂片。
【检验方法】一、浸染(一份浸染液量为40ml,至少可以同时放置8—10张涂片):1、干燥涂片,滴加A液(用前恢复室温,并充分摇匀)布满涂片固定约30~60秒,蒸馏水冲洗,待干或滤纸吸干。
2、浸入B液室温染色5~10分钟,蒸馏水冲洗,待干或滤纸吸干;3、浸入C液室温染色10~15分钟,蒸馏水冲洗,待干或滤纸吸干;4、D液复染2~5分钟,蒸馏水冲洗,干后镜检。
二、滴染(一份滴染液量为2ml)1、干燥涂片,滴加A液(用前恢复室温,并充分摇匀),布满图片固定约30~60秒,蒸馏水冲洗,待干或滤纸吸干。
2、滴加B液布满涂片作用5~10分钟,蒸馏水冲洗5分钟。
3、滴加C液布满涂片作用10~15分钟,蒸馏水冲洗5分钟。
4、D液复染2~5分钟,干后镜检。
【参考范围】一般原粒细胞呈阴性反应,早幼粒细胞以下随着细胞成熟而阳性增强,成熟中性粒细胞最强;嗜酸性粒细胞颗粒不着色,细胞质为阳性,嗜酸性粒细胞阳性。
原淋巴细胞阳性程度降低,随着细胞成熟阳性程度增加。
单科细胞仅有少量细小颗粒。
幼红细胞为阴性,巨核细胞和血小板为阳性。
【检验结果的解释】胞浆中有红色或紫色颗粒者为阳性,其判断标准随着细胞不同而稍有差距。
有核红细胞判断:“0”胞浆中无红色颗粒;“+”胞浆中有分散少数阳性颗粒或是呈浅红色,但应比正常红细胞染色深;“2+”胞浆中有1或2个浓的颗粒环,或胞浆呈中等度弥散的红色;“3+”胞浆中有较粗的颗粒至小块或大块红色物质。
索莱宝 BC0345 糖原含量检测试剂盒 微量法说明书
糖原含量检测试剂盒说明书微量法注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC0345规格:100T/96S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体100 mL×1瓶2-8℃保存试剂一粉剂×1支2-8℃保存试剂二粉剂×2瓶2-8℃保存溶液的配制:1.试剂一:10 mg葡萄糖。
临用前加1 mL蒸馏水充分溶解,2-8℃保存两周。
2.工作液的配制:临用前取1瓶试剂二倒入3 mL蒸馏水,缓慢倒入12 mL浓硫酸,充分溶解混匀后使用。
用不完的的试剂2-8℃保存一周。
产品说明:糖原是由葡萄糖单位构成的高分子多糖,是糖的主要的储存形式之一,主要贮存在肝和肌肉中作为备用能量,分别称为肝糖原和肌糖原。
肝糖原可调节血糖浓度,当血糖升高时可在肝脏合成糖原,血糖降低时,肝糖原则分解为葡萄糖以补充血糖。
因此,肝糖原对维持血糖的相对平衡十分重要。
肌糖原是肌肉中糖的储存形式,在剧烈运动消耗大量血糖时,肌糖原不能直接分解成血糖,必须先分解产生乳酸,随血液循环到肝脏,通过糖异生转变为肝糖原或葡萄糖。
测定原理:蒽酮法。
利用强碱性提取液提取糖原,在强酸性条件下利用蒽酮显色剂测定糖原含量。
Furfural Derivatives(620nm)Glycogen+ H2SO4 Array技术指标:最低检出限:0.002 mg/mL线性范围:0.003125-0.25 mg/mL注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、离心机,可调式移液器、微量比色皿/96孔板、浓硫酸(不允许快递)和蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1﹑细胞或细菌:收集500~1000 万细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;加入0.75mL提取液超声波破碎细菌或细胞(功率200W,超声3s,间隔10s,重复30次);转移至10mL试管中,置于沸水浴中煮沸20min(盖紧,防止水分散失),隔5min振摇试管1次,使充分混匀;取出试管冷却后,用蒸馏水定容到5mL,混匀,8000g 25℃离心10min,取上清液待测。
糖原合成酶(GCS)活性检测试剂盒说明书 微量法
糖原合成酶(GCS)活性检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC3335规格:100T/96S产品简介:糖原合成酶(Glycogen synthase,GCS)将UDPG的糖基加到原有糖原或是糖原蛋白的非还原端,以α-1,4糖苷键连接。
GCS是动物机体糖原合成过程的限速酶,同时也是胰岛素作用的主要靶酶,在糖代谢及维持血糖相对稳定的过程中有着重要作用。
GCS催化UDPG和葡萄糖残基生成糖原和UDP,丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH生成NAD+,在340nm下测定NADH的下降速率,即可反映GCS活性。
试验中所需的仪器和试剂:紫外分光光度计/酶标仪、低温台式离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
产品内容:提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体18mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体7.5mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体14μL×1支,4℃避光保存。
试剂四:粉剂×1支,-20℃保存。
试剂五:粉剂×1支,-20℃保存。
试剂六:液体48μL×1支,4℃避光保存。
试剂七:粉剂×1支,-20℃保存。
试剂八:粉剂×1瓶,4℃避光保存。
工作液的配制:临用前将试剂三、试剂四和试剂五转移到试剂一中混合溶解后待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,避免反复冻融。
-20℃保存2周。
试剂八的配制:临用前在试剂八中加入5mL试剂二充分溶解,再将试剂六和试剂七转移到试剂八中混合溶解后待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,避免反复冻融。
-20℃保存1周。
操作步骤:一、粗酶液提取:组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后,8000g,4℃离心10min,取上清置于冰上待测。
β-半乳糖苷酶(β-GAL)活性检测试剂盒说明书
β-半乳糖苷酶(β-GAL)活性检测试剂盒说明书微量法注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC2585规格:100T/48S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体100 mL×1瓶2-8℃保存试剂一粉剂×2支-20℃保存试剂二液体4 mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体15 mL×1瓶2-8℃保存标准品液体1 mL×1支2-8℃保存溶液的配制:1、试剂一:临用取1支加入1.25mL蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂-20℃分装保存4周,避免反复冻融(1瓶粉剂溶解后可做100T,为了延长使用时间,此产品多给1瓶粉剂)。
2、标准品:5μmol/mL的对硝基苯酚溶液。
产品说明:β-GAL(EC 3.2.1.23)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,能够催化β-半乳糖苷化合物中β-半乳糖苷键水解,此外还具有转半乳糖苷的作用。
β-GAL不仅可为植物的快速生长释放储存的能量,还能在正常的多糖代谢、细胞壁组分代谢以及衰老时细胞壁降解过程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖残基的水解,释放自由的半乳糖。
β-GAL分解对-硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算β-GAL活性。
p-Nitrophenol(400nm)p-Nitrophenyl β-D-Galactopyranoside需自备的仪器和用品:可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、超声破碎仪、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1、细菌或培养细胞的处理:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率200W,超声3秒,间隔10秒,重复30次),15000g,4℃,离心10min,取上清,置冰上待测。
直链淀粉含量检测试剂盒
直链淀粉含量检测试剂盒说明书(货号:NM-W-0214 微量法100T/96S)一、产品简介:直链淀粉是D-葡萄糖基通过α-(1,4)糖苷键以直链状结构连接而成的大分子物质。
直链淀粉的含量是影响食品感官品质和加工特性的一个重要因素,并且与淀粉的特性密切相关,其含量测定对食品营养价值评价、粮食的合理加工,淀粉的合理利用和农业育种等具有重要意义。
直链淀粉与碘能够形成蓝色络合物,通过测定605 nm 和435 nm 处吸光值的变化即可定量检测直链淀粉的含量。
二、试剂盒组分与配制:三、需自备的仪器和用品:酶标仪、96孔板、台式离心机、恒温水浴锅/培养箱、研钵/匀浆器、天平、60目筛、可调式移液器、乙醚、蒸馏水。
四、操作步骤:建议正式实验前选取2个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!1、预实验样本制备℃ 将样本烘干后充分研磨,准确称取0.01g样本至2mL的EP管中,加入1mL试剂一,充分匀浆,80℃水浴提取30min,冷却至室温,4000g,25℃离心5min,弃上清,留沉淀(尽量保留沉淀)。
℃ 向沉淀中加入1mL试剂二,混匀并振荡5min,4000g,25℃离心5min,弃上清,留沉淀(尽量保留沉淀)。
℃ 向上步沉淀中,加入1mL试剂三,混匀(使样本全部浸在液体中),封口,90℃水浴10min(密封以防止水分散失)。
℃ 冷却至室温,将EP管中全部液体转移至10mL EP管中(用1mL蒸馏水冲洗EP管,全部转至10mL EP管中,重复三次),再加蒸馏水准确定容至10mL,混匀,4000g,25℃离心5min,取上清液作为待测样本。
2、标准溶液的配制:把10mg/mL的标准品母液用试剂四稀释成2、1、0.5、0.25、0.125、3、预实验上机操作:℃ 酶标仪预热30min以上,调节双波长至605 nm 和435 nm。
℃ 操作表:4、正式实验:℃ 若预实验测定吸光值超出标准吸光值线性范围:高于最高值建议将待测样本用试剂四适当稀释后再进行测定,低于最低值建议适当增加样本质量W后再进行测定,并将改变后的D和W代入公式计算;℃ 确定好最适实验条件后,正式实验样本制备同预实验样本制备;℃ 正式实验按照预实验上机操作步骤进行(标准管和空白管预实验已做,正式实验可选做)。
肝糖原观察实验报告
一、实验目的1. 了解肝糖原的生理作用和功能;2. 掌握肝糖原的检测方法;3. 通过实验观察肝糖原在动物体内的变化。
二、实验原理肝糖原是动物体内的一种多糖,主要储存于肝脏和肌肉中。
当血糖水平下降时,肝糖原可以分解为葡萄糖,维持血糖的稳定。
本实验通过观察小鼠肝糖原含量的变化,了解肝糖原在动物体内的作用。
三、实验材料1. 实验动物:小鼠(体重20-25g);2. 试剂:肝糖原检测试剂盒、生理盐水、葡萄糖溶液;3. 仪器:离心机、电子天平、移液器、烧杯、试管等。
四、实验方法1. 将实验小鼠分为实验组和对照组,每组10只;2. 实验组:将小鼠禁食12小时,然后腹腔注射胰岛素溶液,观察小鼠肝糖原含量的变化;对照组:将小鼠禁食12小时,然后腹腔注射等量的生理盐水,观察小鼠肝糖原含量的变化;3. 在注射胰岛素或生理盐水后,分别取实验组和对照组小鼠的肝组织,进行肝糖原检测;4. 肝糖原检测方法:将肝组织剪碎,加入肝糖原检测试剂盒中的试剂,按照说明书操作,观察颜色变化,根据比色结果计算肝糖原含量;5. 记录实验数据,分析实验结果。
五、实验结果1. 实验组小鼠在注射胰岛素后,肝糖原含量明显下降,与对照组相比有显著差异(P<0.05);2. 对照组小鼠在注射生理盐水后,肝糖原含量无明显变化;3. 在注射胰岛素后,部分实验组小鼠出现惊厥现象,经葡萄糖溶液抢救后恢复正常。
六、实验分析1. 实验结果表明,胰岛素可以降低小鼠肝糖原含量,说明胰岛素具有促进肝糖原分解的作用;2. 对照组小鼠在注射生理盐水后,肝糖原含量无明显变化,说明生理盐水对肝糖原含量没有影响;3. 实验组小鼠在注射胰岛素后出现惊厥现象,经葡萄糖溶液抢救后恢复正常,说明胰岛素过量会导致血糖降低,出现惊厥现象。
七、实验结论本实验通过观察小鼠肝糖原含量的变化,验证了胰岛素具有降低肝糖原含量的作用。
实验结果表明,胰岛素在动物体内可以促进肝糖原分解,维持血糖稳定。
百度文库-糖原染色液
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糖原染色液(PAS)说明书
货号:S-1509
规格:20ml
有效期:6个月有效。
试剂盒组成:
规格保存试剂A:氧化液20ml 2-4℃密闭
试剂B:Schiff Reagent 20ml 2-4℃避光
试剂C:Mayer苏木素20ml 4℃避光
产品简介:高碘酸钠是一种氧化剂,它能破坏多糖类结构的碳键。
组织切片首先用高碘酸液氧化,使存在于组织内多糖分子的乙二醇基或氨羟基的碳键打开,生成醛类化合物。
其后暴露出来的游离醛基与无色品红液作用,生成新的红至紫红色复合物而得到定位。
保存:氧化液存放2-4℃密闭保存,Schiff液需2-4℃避光冷冻保存,下次实验临用前,需平衡到室温再使用。
操作步骤:
1.切片脱蜡至水。
2.蒸馏水洗1-2分钟。
3.高碘酸液氧化20分钟。
4.充分蒸馏水洗2min×3,吸干纸吸干切片。
5.Schiff液40℃孵育4min或4℃冰箱15-20min,自来水流水充分水洗10min。
6.苏木素复染细胞核,自来水流水冲洗返蓝。
7.梯度酒精脱水,二甲苯透明,封片。
显微镜观察。
注意事项:
1.高碘酸液平时应置于冰箱内保存。
2.Schiff试剂平时也放于冰箱内保存,溶液出现淡红色时不能使用。
染色结果:
肠组织×200 结果判定:
糖原、中性粘液物质呈红色,胞核呈蓝色。
糖类抗原CA50测定试剂盒(磁微粒化学发光免疫分析法)产品技术要求惠中
糖类抗原CA50测定试剂盒(磁微粒化学发光免疫分析法)适用范围:本试剂盒用于体外定量测定人血清中糖类抗原50(CA50)的含量。
1.1规格50测试/盒、100测试/盒、200测试/盒。
1.2主要组成成分2.1外观2.1.1试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏;2.1.2磁分离试剂摇匀后应为均匀悬浊液,无明显凝集;2.1.3液体组分应澄清,无沉淀或絮状物;2.1.4包装标签应清晰,无磨损。
2.2准确度将已知浓度的CA50样品加入到相应基质的低浓度样本中,其回收率应在85%~115%范围内;2.3最低检测限应不大于0.5U/mL。
2.4线性在[0.5,200]U/mL的检测范围内,试剂盒的相关系数r应≥0.99。
2.5重复性用浓度分别为(20±4)U/mL和(100±20)U/mL的样本各重复检测10次,其变异系数(CV)应≤10%。
2.6质控品测值质控品的检测结果应在质控范围内。
2.7批间差用三个批号试剂盒分别检测浓度为(20±4)U/mL和(100±20)U/mL的样本,三个批号试剂盒之间的批间变异系数(CV)应≤15.0%。
2.8溯源性根据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容,校准品溯源至企业工作参考校准品。
2.9稳定性效期稳定性:本试剂盒在2℃~8℃储存,避免阳光直射,有效期为12个月,取失效后两个月内的样品检测外观、准确度、最低检测限、线性、重复性和质控品测值,应符合2.1~2.6的要求。
糖化酶活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-4240
糖化酶活性检测试剂盒说明书微量法UPLC-MS-4240100T/48S试剂名称规格保存条件提取液液体70mL×2瓶2-8℃保存试剂一粉剂×2瓶2-8℃保存试剂二液体18mL×1瓶2-8℃保存标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制:1、试剂一:临用前取1瓶加入10mL提取液,充分混匀后沸水浴直至溶解(约10min),2-8℃保存4周;2、标准品:10mg无水葡萄糖,临用前加1mL提取液溶解为10mg/mL的葡萄糖标准品备用,2-8℃保存两周;糖化酶,即葡萄糖淀粉酶(EC3.2.1.3),又称γ-淀粉酶。
糖化酶是由一系列微生物分泌的,具有外切酶活性的胞外酶,主要作用是从淀粉、糊精、糖原等碳链上的非还原性末端依次水解α-1,4糖苷键,切下一个个葡萄糖单元,对于支链淀粉,当遇到分支点时,它也可以水解α-1,6糖苷键由此将支链淀粉全部水解成葡萄糖。
多应用于酒精、白酒、抗生素、氨基酸、有机酸,甘油,淀粉糖等工业中,是我国重要的工业酶制剂之一。
糖化酶将可溶性淀粉生成葡萄糖,碱性条件下,葡萄糖与3,5-二硝基水杨酸共热后生成红棕色化合物,在540nm 处有最大光吸收,在一定范围内葡萄糖的量与反应液颜色深浅成正比,以此测定糖化酶的活力。
Soluble Starch Glycosylase GlucoseGlucose+3,5-Dinitrosalicylic Acid3-Amino-5-Nitrosalicylate(540nm)注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、恒温水浴锅、研钵/匀浆器,超声破碎仪、冰和蒸馏水。
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1.按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于4℃,10000g离心10min,取上清置于冰上待测。
南京建成葡萄糖试剂盒说明书
南京建成葡萄糖试剂盒说明书葡萄糖试剂盒是一种用于检测血液中葡萄糖浓度的工具,被广泛应用于医疗卫生领域以及个人健康管理中。
南京建成葡萄糖试剂盒作为一种高质量的产品,具有精准、快速、便捷的特点,为用户提供了可靠的结果。
1. 产品特点南京建成葡萄糖试剂盒采用了最新的生物化学检测技术,具有以下特点:1.1 精准可靠:试剂盒内置了精确的标准浓度葡萄糖溶液,通过与待测样本反应后,可以得到准确的血液葡萄糖浓度数据。
这对于需要经常监测血糖的糖尿病患者尤为重要,可以帮助他们更好地控制血糖水平。
1.2 快速便捷:试剂盒操作简单,只需将待测样本滴入试剂盒中,待一定时间后即可得到结果。
这种便捷的操作方式使得用户可以随时随地进行血糖检测,无需前往医院或实验室。
1.3 适用范围广:南京建成葡萄糖试剂盒适用于不同年龄段的人群,无论是糖尿病患者还是普通人,都可以使用该产品进行血糖监测。
对于糖尿病患者来说,合理地控制血糖水平对于预防并发症的发生至关重要。
2. 使用方法南京建成葡萄糖试剂盒的使用方法简单明了:2.1 准备工作:取出试剂盒并打开,将试剂盒内的试剂溶液充分摇匀。
2.2 采集样本:用无菌针头在指尖轻微刺破,用试剂盒吸取刺破的指尖血液,然后将血液滴于试剂盒上。
2.3 反应时间:等待约15秒至一分钟,视试剂盒产品不同而有所差异。
2.4 观察结果:等待反应结束后,可以根据试剂盒上颜色变化或数字显示来判断血糖浓度。
3. 注意事项在使用南京建成葡萄糖试剂盒时,请注意以下几点:3.1 避免受到外界干扰:使用试剂盒时,确保在干净、安静的环境下操作,避免由于外界干扰导致结果不准确。
3.2 温度要适宜:操作环境的温度对试剂盒的使用结果会有影响,建议在通风、常温的环境下进行。
3.3 使用后要妥善处理:试剂盒一次性使用,请勿重复使用。
使用过的试剂盒要妥善处理,避免被儿童误食。
4. 常见问题解答以下是一些用户可能遇到的问题及解答:4.1 为何使用同一试剂盒测试结果会有差异?试剂盒中的试剂溶液使用后可能会有一定挥发,影响测量结果。
格锐思可溶性糖含量试剂盒说明书 (货号:G0501W 微板法 96 样)
可溶性糖含量试剂盒说明书(货号:G0501W微板法96样)一、产品简介:糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。
糖类在浓硫酸作用下经脱水反应生成糠醛或羟甲基糖醛,生成的糠醛或羟甲基糖醛与蒽酮脱水缩合,形成糠醛的衍生物,呈蓝绿色物质,其在可见光区620nm波长处有最大吸收,且其光吸收值在一定范围内与糖的含量成正比关系。
该方法用于可溶性单糖、寡糖和多糖的含量测定,具有灵敏度高﹑简便快捷﹑适用于微量样品的测定等优点。
该方法的特点是几乎可以测定所有的糖类(包括单糖:戊糖、己糖、糖原、多缩葡萄糖等),所以用该方法测出的糖类含量是溶液中全部可溶性糖类总含量。
二、试剂盒组分与配制:试剂名称规格保存要求备注试剂一粉剂×1瓶4℃避光保存试剂二液体5mL×1瓶4℃保存标准品粉剂×1支4℃保存若重新做标曲,则用到该试剂工作液配制:吸取4mL试剂二加入到试剂一的试剂瓶中,混匀并充分溶解,即得工作液。
(如难溶解,可60℃水浴溶解;剩余试剂4℃保存一周)三、所需的仪器和用品:酶标仪、96孔板、水浴锅、可调式移液器、乙醇、浓硫酸(不允许快递)、研钵。
四、可溶性糖含量的测定:建议正式实验前选取2个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!建议:选取样本做几个梯度的稀释,选取适合本次实验的稀释倍数D。
1组织样本:称取0.1g样本(若是干样,如烘干烟叶等可取0.05g;若是水分充足的样本可取0.2g),先加入0.8mL的80%乙醇(自备:取80mL乙醇溶于20mL蒸馏水中),冰浴匀浆,倒入有盖离心管中,再用80%乙醇冲洗研钵并转移至同一EP管中,使EP管中粗提液终体积定容为1.5mL(若用自动研磨机可直接加入1.5mL的80%乙醇研磨);置50℃水浴20min(封口膜缠紧,防止液体散失,且间隔2min振荡混匀一次),冷却后(若有损失,可加80%乙醇补齐至1.5mL),12000rpm,室温离心10min,取上清液备用。
ATP含量试剂盒使用说明
ATP含量试剂盒使用说明一、试剂盒的组成1.ATP酶:可催化ATP与啶酮核苷酸底物反应,产生荧光发射。
2.底物液:包含啶酮核苷酸底物、辅酶CoA、磷酸化底物和缓冲液等成分。
3.酶反应终止液:用于停止ATP酶的活性,停止荧光信号的产生。
4.荧光标准品:已知浓度的ATP溶液,用于绘制标准曲线。
5.读取缓冲液:用于在荧光分析仪上读取荧光信号。
二、使用步骤1.试剂室温平衡:将试剂盒中的所有试剂恢复到室温,并确保所有试剂充分均匀混合。
2.样品预处理:根据实验需要,选择合适的方法提取细胞或组织中的ATP,并计算样品的蛋白质含量。
3.准备标准曲线:取不同浓度的荧光标准品,并用读取缓冲液稀释到一系列已知浓度的溶液。
每个浓度至少重复3次。
将这些标准品稀释到试管中。
4.样品处理:将不同待测样品分别加入到试管中,各样品至少重复3次。
同时加入空白对照组,只加读取缓冲液而无待测样品。
5.加入试剂:将相应体积的底物液加入到每个试管中,充分混合。
立即向每个试管中加入适量的ATP酶,同时进行混合。
6.反应:将试管密封,并在37℃下孵育一段时间,一般为10-30分钟。
7.停止反应:向每个试管中加入相应体积的酶反应终止液,停止ATP酶的活性,停止荧光信号的产生。
8.读取荧光:将每个试管置于荧光分析仪上,使用适当的激发波长和发射波长对荧光信号进行测量,记录下荧光单位值。
9.绘制标准曲线:将标准曲线上的荧光单位值与标准品的ATP浓度进行对应,绘制标准曲线。
10.计算样品ATP含量:根据样品荧光单位值和标准曲线,计算出样品中的ATP含量。
三、注意事项1.所有试剂的操作应按照试剂盒说明进行,不同品牌可能有些许差异,应严格按照相应说明进行操作。
2.手术操作时应采取无菌操作,避免对样品的污染。
3.混合试剂时需充分振荡,确保试剂均匀混合。
4.在实验过程中,所有试管、吸头等实验用具应标注清楚,避免混淆和误操作。
5.反应时间会影响结果,不同实验目的可根据需要进行时间的调整,一般30分钟内可得到稳定的信号。
肝糖原测定实验报告
肝糖原测定实验报告引言:材料与方法:实验组织了6只健康小鼠,体重范围在18-22g之间。
为了控制干扰因素,小鼠在实验前24小时内禁食但可以饮水。
实验分为两组,其中一组为正常对照组,另一组进行饥饿处理。
正常对照组小鼠在实验前24小时内采食正常饲料,而饥饿组小鼠在实验前24小时内不提供饲料。
实验过程中,我们使用了生化试剂盒进行肝糖原测定。
结果:使用酶促色谱法测定,正常对照组小鼠肝糖原平均含量为X mg/g,标准差为S mg/g;饥饿组小鼠肝糖原平均含量为Y mg/g,标准差为Zmg/g。
根据t检验的结果,两组之间肝糖原含量存在显著差异(p<0.05)。
讨论与分析:实验结果表明,在饲养正常鼠类的情况下,小鼠肝脏中的糖原含量较高。
这与肝脏是糖原主要储存器之一的事实相符。
糖原是机体在需求能量时首先被分解的物质,在需要时可通过糖原的分解补充能量。
另一方面,饥饿组小鼠的肝糖原含量明显下降。
这意味着在长时间饥饿的情况下,小鼠体内糖原储备被耗尽。
这可能是由于机体需求能量增加,导致糖原被快速分解以满足机体各种生理活动的需要。
糖原含量的减少表明饥饿状态下机体会不断消耗储备能量,以维持正常生理功能。
然而,本实验存在一些局限性。
首先,样本容量较小,可能会影响结果的统计学意义。
其次,仅仅通过测定肝糖原含量无法全面了解机体的能量代谢情况,后续实验需要进一步考虑其他因素的影响。
结论:通过本实验发现,肝糖原在正常和饥饿状态下存在差异。
正常情况下小鼠肝中的糖原含量较高,而长时间饥饿会导致肝糖原含量的显著下降。
这些结果对于了解机体能量代谢和糖原储存具有重要意义。
在进一步研究中,我们将探索不同条件下糖原的动态变化,以更深入地了解机体能量代谢的机制。
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货号:QS2603 规格:50管/48样
糖原含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
糖原是由葡萄糖单位构成的高分子多糖,是糖的主要的储存形式之一,主要贮存在肝和肌肉中作为备用能量,分别称为肝糖原和肌糖原。
肝糖原可调节血糖浓度,当血糖升高时可在肝脏合成糖原,血糖降低时,肝糖原则分解为葡萄糖以补充血糖。
因此,肝糖原对维持血糖的相对平衡十分重要。
肌糖原是肌肉中糖的储存形式,在剧烈运动消耗大量血糖时,肌糖原不能直接分解成血糖,必须先分解产生乳酸,随血液循环到肝脏,通过糖异生转变为肝糖原或葡萄糖。
测定原理:
蒽酮法。
利用强碱性提取液提取糖原,在强酸性条件下利用蒽酮显色剂测定糖原含量。
自备实验用品及仪器:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、浓硫酸(不允许快递)和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:0.1mg/mL 的葡萄糖标准液10mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存;
糖原提取:
1﹑细胞或细菌:收集500~1000万细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;加入0.75mL提取液超声波破碎细菌或细胞(功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);转移至10mL 试管中,95℃水浴20min(盖紧,防止水分散失),隔5min振摇试管1次,使充分混匀;取出试管冷却后,用蒸馏水定容到5ml,混匀,8000g 25℃离心10min,取上清液待测。
2﹑组织:称取0.1~0.2g样品,加入0.75ml提取液充分匀浆;转移至10ml试管中;95℃水浴20min(盖紧,防止水分散失),隔5min振摇试管1次,使充分混匀;待组织全部溶解后,取出试管冷却后,用蒸馏水定容到5ml,混匀,8000g 25℃离心10min,取上清液待测。
步骤和加样表:
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至620nm,蒸馏水调零。
2、调节水浴锅至95℃。
3、试剂二工作液的配制:在试剂二中倒入10mL蒸馏水,缓慢倒入40mL浓硫酸,充分溶解混匀后使用;用不完的试剂4℃保存一周;
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混匀,95℃水浴10min(盖紧,防止水分散失),冷却,于620nm波长处,以蒸馏水调零,分别读取空白管、标准管和测定管吸光度,分别记为A1、A2和A3。
注意:1、空白管和标准管只要测一次。
2、如果A3-A1大于2,需要将样本用蒸馏水稀释,计算公式中乘以相应稀释倍数。
糖原含量的计算:
1、按照样本质量计算
糖原(mg/g鲜重)=1.11×(C标准×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)=
0.555×(A3-A1)÷(A2-A1)÷W
2、按照蛋白质含量计算
糖原(mg/mg prot)=1.11×(C标准×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)=0.111×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷Cpr
1.11:是此法测得葡萄糖含量换算为糖原含量的常数,即111ug糖原用蒽酮试剂显色相当于100ug葡萄糖用蒽酮所试剂显示的颜色;C标准管:标准管浓度,0.1mg/mL;V1:加入反应体系中糖原提取液体积,0.25mL;V2:加入提取液体积,5mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。
注意:最低检测限为10ng/g鲜重或0.1ng/ mg prot。
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