食品微生物学基础实验之培养基的制备与无...
《食品微生物检验技术》教学课件— 培养基的制备
试管1/3（半固体培养基）； 试管1/4（液体培养基）； 试管1/5（固体培养基）；
将试管带棉塞的一端搁在一根木棒上，使培养基形成的斜面的 长度不超过试管总长的一半。
实验步骤
• 培养基的配制 • 分离培养微生物常用器皿的准备 • 培养基和玻璃器材的灭菌
常用凝固剂 琼脂（其次为明胶），又叫洋菜、冻粉。
分类
据组成成分可分为: 1.合成培养基：由各种纯化学物质按一定比例配制而成。 2.半合成培养基：有一部分纯化学物质和另一部分天然
物质配制而成。 3.天然培养基：利用天然来源的有机物配制而成。
分类
• 用途可分为 1. 基础培养基：能满足各种微生物的营养需求。 2.加富培养基：加入某种微生物生长繁殖所需的营养物质， 使其快速生长，便于分离。 3.鉴别培养基：用来检测微生物的某些代谢特性。 4.选择培养基：加入某种物质抑制其他微生物生长，使目 标微生物得到富集，便于分离。
121
112
1.40 20
126
118
1.75 25
130
124
2.10 30
134
128
不排除 空气 72 90 100 109 115 121
表4 芽孢数目和灭菌所需时间的关系
芽孢数／mL
100 000 000 75 000 000 50 000 000 25 000 000 1 000 000 100 000
15min 20min
20min
破坏(%) 破坏(%)
破坏(%)
24.00 18.15
0.60
32.10 14.30
4.73
培养基的制备与消毒灭菌 实验记录表
1、称量2、溶化3、调pH4、过滤5、分装6、加塞7、灭菌9、无ຫໍສະໝຸດ 检查（二）高压蒸汽灭菌法步骤
1、加水2、装料3、加盖4、加热排气5、加压6、保压
7、自然降压8、保养9、无菌检查
各步骤现象记录：按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯（或1000ml刻度搪瓷杯）中．牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。也可放在称量纸上，称量后直接放人水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。
注意事项与建议：
1.要严格按配方配制。
2.调pH不要过头。
3.干热灭菌要注意物品不要堆放过紧，注意温度的时间控制，70ºC以下放物、取物。
4.高压灭菌要注意物品不要过多，加热后排除冷空气，到时降压回零取物。
5.过滤除菌要注意各部件灭菌，压滤时，压力要适当，不可太猛太快，滤膜要注意清洗保存。
注：如本页记录不下，可以添加附表加以说明。
培养基的制备与消毒灭菌实验记录表
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目的要求：1.学习和掌握配制培养基（以牛肉膏蛋白胨培养基的配制为例）的一般方法和原理。
2.了解消毒和灭菌的原理，掌握常用灭菌方法的操作步骤。
实验原理：1、培养基是按照微生物生长发育的需要，同不同组分的营养物质调制而成的营养物质。
2、人工制备的培养基的目的，在于给微生物创造一个良好的营养条件。
结果计算与分析：
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供作微生物生长繁殖之用。基础培养基含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。其中牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和维生素，蛋白胨主要提供氮源和维生素，而NaCl提供无机盐。在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂，琼脂在常用浓度下96℃时溶化，实际应用时，一般在沸水浴中或下而垫以石棉网煮沸溶化，以免琼脂烧焦。琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
培养基的配制与灭菌实验报告
培养基的配制与灭菌实验报告篇一：培养基的制备与灭菌实验报告陕西师范大学远程教育学院生物学实验报告报告题目培养基的制备与灭菌姓名刘伟学号专业生物科学批次/层次指导教师学习中心培养基的制备与灭菌一、目的要求1. 掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。
2. 掌握培养基的配置原则和方法。
3. 掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。
二、基本原理牛肉膏蛋白胨培养基：是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供细菌生长繁殖之用。
高压蒸汽灭菌：主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。
将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。
待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽，关闭排气阀继续加热。
此时蒸汽不溢出，压力增大，沸点升高，获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性，而达到灭菌的目的。
三、实验材料1. 药品：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、1mol/L的NaOH和HCl溶液。
2. 仪器及玻璃器皿：天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。
3. 其他物品：药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花等。
四、操作步骤（一）玻璃器皿的洗涤和包装1．玻璃器皿的洗涤玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。
将三角瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中．用毛刷刷洗，然后用自来水及蒸馏水冲净。
移液管先用含有洗涤剂的水浸泡，再用自来水及蒸馏水冲洗。
洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用。
2．灭菌前玻璃器皿的包装（1）培养皿的包扎：培养皿由一盖一底组成一套，可用报纸将几套培养皿包成一包，或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内，加盖灭菌。
包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。
（2）移液管的包扎：在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脱脂棉)，它的作用是避免外界及口中杂菌进入管内，并防止菌液等吸入口中。
微生物学实验-1培养基的制备与高压蒸汽灭菌
2. 放回内层锅，并装入待灭菌物品。 放回内层锅，并装入待灭菌物品。
3. 加盖，并将盖上的排气软管插入内层锅的 加盖， 排气槽内。 排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相 对的两个螺 栓。
4. 通电加热，待冷空气完全排尽后，关上排气 通电加热，待冷空气完全排尽后， 阀。当锅内压力升到所需压力时，控制热源，维 当锅内压力升到所需压力时，控制热源， 持压力至所需时间。本实验用 持压力至所需时间。本实验用0.1Mpa，121.5℃， ， ℃ 20min灭菌。 灭菌。 灭菌 5. 灭菌所需的时间到后，关闭电源，让灭菌锅 灭菌所需的时间到后，关闭电源， 内温度自然下降，当压力表降至“ 时 内温度自然下降，当压力表降至“0”时，打开排 气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。 气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。 6. 将取出的灭菌培养基放入 ℃温箱培养 将取出的灭菌培养基放入37℃温箱培养24h， ， 经检查若无杂菌生长，即可待用。 经检查若无杂菌生长，即可待用。
6. 加塞 在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞，以 在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞， 阻止外界微生物进人培养基内而造成污染， 阻止外界微生物进人培养基内而造成污染，并保 证有良好的通气性能。 证有良好的通气性能。 7. 包扎 在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时 在棉塞外包一层牛皮纸， 冷凝水润湿棉塞，其外再用绳子扎好。 冷凝水润湿棉塞，其外再用绳子扎好。注明培养 基名称、组别、配制日期。 基名称、组别、配制日期。 8. 灭菌 将上述培养基以 0.103 MPa 121℃ ， ℃ 20min高压蒸汽灭菌。 高压蒸汽灭菌。 高压蒸汽灭菌
高压蒸汽灭菌
实验目的
了解高压蒸汽灭菌的基 本原理及应用范围。 本原理及应用范围。 学习高压蒸汽灭菌的操 作方法。 作方法。
食品微生物实验
实验方法
1) 斜面接平板
a. 划线法：见平板划线分离法。 b. 点种法：常用于观察霉菌和酵母细胞，轻点 在平板的表面（根霉点一点，曲霉、酵母可 点3-4点）。
2) 平板接斜面：一般是将经平板分散培养得到 的单菌落接种到斜面，以便作鉴定或扩大培 养、保存之用。
实验方法
平板划线
三点接种
实验方法
挑孢子： 将灭过菌的接种针在菌种管斜面上端冷却并湿润后，再
紫外线灭菌法： 一般30W灯管，9m3空间，距地面2m每次打开紫外线 照射0.5h，就使室内空气灭菌。若照射紫外线时先喷 洒石炭酸等化学消毒剂，可增强灭菌效果。紫外线虽 有较强的杀菌力，但穿透力弱，即使一薄层玻璃或水 层就能将大部分紫外线滤除，因此只适用于空气及表 面杀菌。 化学药剂消毒灭菌： 微生物实验室中常用的化学杀菌剂有升汞、甲醛、高 锰酸钾、酒精、碘酒、龙胆紫、石炭酸、漂白粉、新 洁尔灭、煤酚皂溶液，它们有的是杀菌剂，有的是抑 菌剂。
个个肉眼可见的细胞群体，此即为菌落。 接种是指在无菌操作条件下，将某种微生物 的纯种移接到适合其生长繁殖的新鲜培养基中或 生物体内的一种操作过程。实验室常用的接种方
法有斜面接种、穿刺接种、三点接种和液体接种。
实验器材
1. 菌种 实验室环境微生物、大肠杆菌、酿酒酵母、 放线菌及霉菌。 2. 培养基 马铃薯固体培养基、牛肉膏蛋白胨固体培 养基、高氏一号固体培养基
不断搅拌，以免糊底，并防止沸腾外溢； 分装量根据试管大小和实际需要而定，固体培养基装量 约为管高的1/5，液体培养基约为管高的1/4，三角瓶不 超过瓶体的1/2 ；
分装时不要将培养基沾在管（瓶）口上，以免引起污染。
思考题
1. 思考牛肉膏蛋白胨培养基属于何种培 养基？
培养基制备与无菌操作
培养基制备与无菌操作培养基制备与无菌操作是微生物学实验中非常关键的一环，它可以确保实验的结果准确、可靠，并防止实验中的污染。
在培养基制备过程中，无菌操作是至关重要的，它可以避免外源性微生物的污染，保证培养基中只有我们所需要的微生物生长。
培养基是供养微生物生长和繁殖的营养物质的混合物。
制备培养基的关键是确保培养基的成分准确、浓度合适，并且不含污染物。
以下是一个常用的培养基制备步骤：1. 准备所需成分：根据所要培养的微生物的特性和需求，选择相应的培养基制备配方。
准备所需的成分，如蛋白胨、葡萄糖、胆盐、琼脂等。
确保所用的成分都是干燥、无污染的。
2. 称量和混合：按照配方要求，将所需成分按比例称量并混合。
注意在称量过程中要使用无菌操作的称量器具，并避免成分的二次污染。
混合时可使用无菌的玻璃棒或磁力搅拌器进行均匀混合，确保各成分充分溶解。
3. pH调节：根据培养基配方要求，调节溶液的pH值。
可以使用pH计进行准确的测量，并使用酸或碱溶液进行调节。
在调节pH值时同样要进行无菌操作，避免外源性微生物的污染。
4. 煮沸杀菌：将混合好的培养基溶液倒入培养瓶中，并盖上无菌的塞子或锡纸。
将培养瓶放入高压锅中，进行煮沸杀菌。
煮沸时间一般为15-20分钟，确保培养基中的微生物全部被杀灭。
注意在煮沸杀菌过程中要保持锅内压力，并避免培养瓶的破裂。
5. 冷却和贮存：将煮沸好的培养基冷却到室温或适宜的温度，并进行无菌操作倒入无菌培养皿或管中。
确保容器表面无菌，避免外源性微生物的污染。
之后可以密封、贴标签并储存于适当的环境中，以备后续实验使用。
无菌操作是培养基制备过程中不可或缺的一部分，它可以避免外界微生物的污染，确保培养基中只有所需的微生物。
以下是一些常用的无菌操作步骤：1. 消毒环境：在无菌操作开始前，首先需要进行空气和工作区域的消毒。
可以使用紫外线灯进行空气消毒，使用75%乙醇或其他消毒液擦拭工作区域表面。
2. 穿戴无菌服装：进行无菌操作时，需要穿戴无菌手套、无菌操作衣和帽子。
培养基的制备与灭菌实验报告
培养基的制备与灭菌实验报告一、实验目的本实验旨在掌握培养基的制备方法和灭菌技术，为后续的微生物培养提供保障。
二、实验原理1. 培养基的制备方法：（1）选用适当的基质：如蛋白胨、肉汤、蔗糖等；（2）添加必需元素：如氮源、碳源、矿物质盐等；（3）调节pH值：使其接近微生物生长最适pH值；（4）加入琼脂：使液态培养基凝固成固态培养基。
2. 灭菌技术：灭菌是指将微生物及其孢子全部杀灭或去除，以保证培养基无菌。
常用的灭菌方法有高温灭菌法和化学药剂灭菌法。
三、实验材料和设备材料：蛋白胨、肉汤、琼脂、氧化钠等。
设备：量筒、天平、自动移液器、恒温水浴器等。
四、实验步骤1. 制备液态培养基：（1）称取所需的蛋白胨和肉汤，按比例混合加入适量的蒸馏水中，搅拌均匀；（2）调节pH值至7.0-7.2，若pH值过高可加入适量的氧化钠溶液；（3）将制好的液态培养基分装到不锈钢培养皿中，每个培养皿约20ml；（4）将分装好的液态培养基在恒温水浴器中加热至沸腾，持续煮沸10分钟。
2. 制备固态培养基：（1）按照液态培养基制备方法制备好液态培养基；（2）将琼脂加入到液态培养基中，搅拌均匀；（3）将制好的固态培养基分装到无菌试管或无菌平板中；（4）在恒温水浴器中加热至琼脂完全溶解。
3. 灭菌：将制备好的液态和固态培养基放入高压灭菌锅中进行灭菌处理，温度和时间根据不同材料和设备而定。
五、实验结果经过灭菌处理后，制备好的液态和固态培养基均无菌，可以用于微生物培养。
六、实验注意事项1. 实验过程中要严格遵守无菌操作规范，以保证培养基无菌。
2. 制备液态培养基时，要注意加入必需元素的比例和pH值的调节。
3. 制备固态培养基时，要注意琼脂的加入量和溶解度。
4. 灭菌处理时，要根据实验材料和设备选择合适的灭菌方法和时间。
5. 实验结束后，要对实验器材进行消毒处理。
七、实验结论本实验通过制备液态和固态培养基以及灭菌处理等操作，掌握了培养基制备和灭菌技术。
培养基的制备实验报告
培养基的制备实验报告
实验目的，通过本次实验，掌握培养基的制备方法，为后续微生物实验提供基
础条件。
实验原理，培养基是微生物生长繁殖的营养物质，其主要成分包括碳源、氮源、磷源、微量元素和水。
培养基的制备需要根据不同微生物的生长需求进行配方，通常包括基础培养基和选择性培养基两种类型。
实验步骤：
1. 称取适量蔗糖和琼脂，加入蒸馏水中，混合搅拌至完全溶解；
2. 加入适量氨基酸、磷酸盐和微量元素，搅拌均匀；
3. 调节pH值至7.0，加热煮沸，然后灭菌；
4. 倒入培养皿中，待凝固后即可使用。
实验结果，制备好的培养基呈黄色透明凝胶状，无异味，pH值稳定在7.0左右。
实验分析，本次实验中，我们成功制备了基础培养基，为后续微生物的培养提
供了必要条件。
在实验过程中，需要注意控制好各种原料的比例和加热时间，以保证培养基的质量和稳定性。
实验结论，通过本次实验，我们掌握了基础培养基的制备方法，并取得了良好
的实验结果。
培养基的质量对微生物的培养和研究具有重要影响，因此在实验过程中需要严格按照配方和操作规程进行操作，确保培养基的质量和稳定性。
实验改进，在今后的实验中，可以尝试制备不同类型的培养基，以满足不同微
生物的生长需求，并且可以对培养基的配方和制备工艺进行进一步优化，提高培养基的质量和效率。
总结，培养基的制备是微生物实验的基础，掌握好培养基的制备方法对于后续实验的顺利进行具有重要意义。
通过本次实验，我们对培养基的制备方法有了更深入的理解，为今后的实验工作奠定了基础。
以上就是本次培养基的制备实验报告内容，希望对大家有所帮助。
微生物实验.doc
微生物基础试验实验一常用培养基的制备、灭菌与消毒一、实验目的1、掌握配制培养基的一般方法和步骤；掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法；2、了解培养基的配制原理；了解常见灭菌、清毒基本原理及方法。
二、实验原理培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。
培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。
根据微生物的种类和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供微生物生长繁殖之用。
干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。
三、试剂与器材1、器材试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、培养基、分装器、天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅、pH度纸、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、吸管、培养皿、电烘箱、注射器、微孔滤膜过滤器、镊子等。
2、试剂牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂四、实验内容1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查2、干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温摇床→降温→开箱取物3、高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查4、过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌五、关键步骤及注意事项1、要严格按配方配制。
2、调pH不要过头。
3、干热灭菌要注意物品不要堆放过紧，注意温度的时间控制，70oC以下放物、取物。
4、高压灭菌要注意物品不要过多，加热后排除冷空气，到时降压回零取物。
5、过滤除菌要注意各部件灭菌，压滤时，压力要适当，不可太猛太快，滤膜要注意清洗保存。
六、思考题1、培养基配好后，为什么必须立即灭菌？如何检查灭菌后的培养基是无菌的？2、在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题?为什么？3、培养微生物的培养基应具备哪些条件?为什么？4、培养基的配制原则是什么？实验二土壤中微生物分离纯化培养一、实验目的1、掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术；掌握微生物培养方法；2、了解不同的微生物菌落在斜面上、半固体培养基和液体培养基中的生长特征；进一步熟练和掌握微生物无菌操作技术。
[理学]微生物工程工艺原理 第二章 培养基的制备与灭菌3
![[理学]微生物工程工艺原理 第二章 培养基的制备与灭菌3](https://img.taocdn.com/s3/m/abad7d3b650e52ea54189816.png)
第 二
Ⅴ.生长因子：硫胺素、生物素、对氨基苯甲
章 酸、肌醇等
培 养
功能：酶的辅助部分，维持生命活动；
基 的
Ⅵ.水分
制 功能：生化反应均在水溶液中进行；
备
与
灭
菌
第一篇 微生物工业菌种与培养基
第 二、培养基的类型
二
章 1.依营养物质的来源分类
培 养
天然培养基；合成培养基，也称组合培养基
基 （多用于定量研究）；半合成培养基，（用
第 二
3.酸酶结合法
章
培 养
酸酶法 酶酸法
基
的
制
备
与
灭
菌
第一篇 微生物工业菌种与培养基
二、淀粉酸水解理论基础
第
二 淀粉水解成葡萄糖的反应过程中同时发生着： 章 水解反应、复合反应、分解反应；其中水解 培 反应是主要的。
养 基 的 制 备 与 灭 菌
第一篇 微生物工业菌种与培养基
第 ㈠淀粉的水解反应
二 章
1.淀粉水解过程 淀粉 糊精 低聚糖 葡萄糖
培 2.淀粉酸水解反应动力学
养
基 属于单分子一级反应类型：
的
dc k c dt
制 备
3.影响酸水解的因素
与 灭
主要因素:酸的种类、浓度、水解温度、时间
菌
第一篇 微生物工业菌种与培养基
第 ㈡葡萄糖的复合反应
二 章
在淀粉的酸糖化过程中，水解生成的葡萄糖
培
养 2.添加化学药剂处理法：
基
的 添加青霉素法、添加表面活性剂、添加抗氧
制 剂法
备
与 灭
3.追加糖蜜法
菌
第一篇 微生物工业菌种与培养基
实验六七食品微生物培养基的制备和灭菌微生物的分离培养和菌种保藏
实验六微生物培养基的制备和灭菌实验项目性质：综合实验所属课程名称：《微生物学实验》实验计划学时：5学时一、实验目的1.了解并掌握培养基的配制、分装方法；2.掌握各种实验室灭菌方法及技术。
二、实验原理培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。
由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的要求也各不相同，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，使用的原料也各有差异，但从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。
另外，培养基还应具有适宜的pH值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。
琼脂是从石花菜等海藻中提取的胶体物质，是应用最广的凝固剂。
加琼脂制成的培养基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固。
但多次反复融化，其凝固性降低。
任何一种培养基一经制成就应及时彻底灭菌，以备纯培养用。
一般培养基的灭菌采用高压蒸汽灭菌。
三、实验材料1、器皿及材料天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、量筒、刻度搪瓷杯、试管、三角瓶、漏斗、分装架、移液管及移液管筒、培养皿及培养皿盒、玻璃棒、烧杯、试管架、铁丝筐、剪刀、酒精灯、棉花、线绳、牛皮纸或报纸、纱布、乳胶管、电炉、灭菌锅、干燥箱。
2、药品试剂蛋白胨、牛肉膏、NaCl、K2HPO4、琼脂、NaNO3、KCl、MgSO4、FeSO4、蔗糖、麦芽糖、木糖、葡萄糖、半乳糖、乳糖、土豆汁、豆芽计、磷酸铵、5%NaOH溶液、5%HCl溶液。
3、流程称药品→溶解→调pH值→融化琼脂→过滤分装→包扎标记→灭菌→摆斜面或倒平板。
四、实验步骤1 培养基的制备1.1 称量药品根据培养基配方依次准确称取各种药品，放入适当大小的烧杯中，琼脂不要加入。
蛋白胨极易吸潮，故称量时要迅速。
1.2 溶解用量筒取一定量(约占总量的1/2)蒸馏水倒入烧杯中，在放有石棉网的电炉上小火加热，并用玻棒搅拌，以防液体溢出。
待各种药品完全溶解后，停止加热，补足水分。
培养基的制备实验报告
培养基的制备实验报告实验目的，通过制备培养基，培养微生物，观察微生物的生长情况，了解培养基对微生物生长的影响。
实验原理，培养基是为了提供微生物生长所需的营养物质而制备的一种特定的生长环境。
培养基的制备包括选择合适的基础成分、添加适当的营养物质和调节pH值等步骤。
实验步骤：1. 准备所需材料和设备，蒸馏水、琼脂、培养基粉、试管、培养皿、pH试纸、称量器等。
2. 精确称量培养基粉，并加入适量的蒸馏水中，搅拌均匀。
3. 将培养基溶液加热至沸腾，使琼脂完全溶解。
4. 调节培养基的pH值，使其达到微生物生长所需的最适pH。
5. 将培养基倒入培养皿中，待其凝固后，即可用于培养微生物。
实验结果与分析：经过制备的培养基，观察到微生物在培养基上生长良好，形成了典型的菌落。
通过不同培养基的制备，我们发现不同的微生物对培养基的要求也有所不同，有些微生物对酸性培养基更适应，有些对碱性培养基更适应。
因此，制备不同类型的培养基对于不同微生物的培养具有重要意义。
实验总结：通过本次实验，我们深入了解了培养基的制备过程和对微生物生长的影响。
制备培养基是微生物学实验中的重要环节，合理的培养基制备可以为微生物的培养提供良好的生长环境，有利于我们对微生物的研究和应用。
同时，我们也意识到不同微生物对培养基的要求不同，因此在实际应用中需要根据具体微生物的特性来选择合适的培养基。
通过本次实验，我们不仅掌握了培养基的制备方法，还加深了对微生物生长环境的理解，为今后的微生物学研究奠定了坚实的基础。
参考文献：1. 李华. 微生物学实验教程. 北京，高等教育出版社，2008.2. 微生物学实验指导. 北京，科学出版社，2015.3. 培养基制备与应用. 北京，化学工业出版社，2012.。
实验二 微生物培养基的配制和灭菌
培养基成分 牛肉膏 0.3g;蛋白胨 1g;氯化钠 0.5g;琼脂 2g;蒸馏水
100mL;pH 7.0～7.2;灭菌 1.05kg/cm2，20-25min
用量：
100-150mL/行；制备8-10个平板；2个/组（涂布/划线）
制作斜面（只需1个组制备）：无需抗生素
化学药剂消毒灭菌： 微生物实验室中常用的化学杀菌剂有升汞、甲醛、高锰酸钾、酒 精、碘酒、龙胆紫、石炭酸、漂白粉、新洁尔灭、煤酚皂溶液， 它们有的是杀菌剂，有的是抑菌剂。
培养基和玻璃器材的 灭菌方法
培养基配制的原则
配制培养基的配方，及方法 培养基蒸汽灭菌原理，方法
牛肉膏蛋白胨琼脂培养基
自养细菌能利用铵盐、硝酸盐作为机体生长的氮源与能源， 某些厌氧细菌在厌氧与糖类物质缺乏的条件下，也可以利用 氨基酸作为能源物质。 无机氮源：碳酸铵、硝酸盐、硫酸铵、尿素 有机氮：蛋白胨、牛肉膏、酵母膏等。
生产上常用的氮源有硝酸盐、铵盐、尿素、氨以及蛋白含 量较高的鱼粉、蚕蛹粉、黄豆饼粉、花生饼份、玉米浆等。
培养基的配制原则
一、营养成分 二、PH值 三、渗透压 四、氧化还原电位
培养基的配制原则
一、营养成分 总体原则
1. 根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基， 如自养型微生物：由简单的无机物质组成
异养做生物：至少需要含有一种有机物质。
按微生物的主要类群来说，又有细菌、放线菌、酵母
菌和霉菌之分。它们所需要的培养基成分也不同，分别
实验程序2:分离培养微生物常用器皿的准备
清洗一些玻璃仪器：如三角烧瓶、试管、培养皿、吸管等。 棉塞的制作
包装培养皿和吸管等。
湿热灭菌法原理
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《食品科学与工程专业实验实习指导用书》作者张爱民、周天华在从事高等院校食品科学与工程实验实习的教学与科研工作的基础上，经多年探索与实践，逐步形成了本教材的编写体系。
本书在详细介绍食品微生物学与食品理化检验方面的基础实验和综合提高型实验的基础上，系统地介绍了食品的贮藏加工工艺与设备方面的实验及实习实训内容，有利于学生熟悉和掌握食品科学与工程相关课程的理论原理与实验方法，并在运用所学知识解决实际问题的过程中，提升实验操作技能及独立分析问题、解决问题的能力。
《食品科学与工程专业实验实习指导用书》可作为高等院校食品科学与工程、食品质量与安全、生物工程及其他相关专业本专科学生的实验实习教材，也可供相关专业的研究生及专业技术人员参考。
第1篇食品微生物与检验实验第1章食品微生物学实验食品微生物学实验室管理制度实验1 显微镜使用与细菌显微特征观察实验2 培养基的制备与灭菌实验3 微生物的接种技术实验4 微生物的分离与纯化技术实验5 细菌的简单染色和革兰氏染色实验6 细菌和酵母菌菌体大小的测定实验7 微生物细胞的显微直接计数实验8 几种常见微生物菌落形态的观察实验9 微生物菌种的保存实验10 细菌的生理生化反应试验实验11 空气卫生状况的检查实验12 食品车间设施卫生状况的检查显示全部信息第1篇食品微生物与检验实验第1章食品微生物学实验食品微生物学实验室管理制度实验1 显微镜使用与细菌显微特征观察实验2 培养基的制备与灭菌实验3 微生物的接种技术实验4 微生物的分离与纯化技术实验5 细菌的简单染色和革兰氏染色实验6 细菌和酵母菌菌体大小的测定实验7 微生物细胞的显微直接计数实验8 几种常见微生物菌落形态的观察实验9 微生物菌种的保存实验10 细菌的生理生化反应试验实验11 空气卫生状况的检查实验12 食品车间设施卫生状况的检查实验13 食品接触人员卫生状况的检查第2章食品微生物学检验实验食品微生物学检验总则实验14 食品中菌落总数的测定实验15 食品中大肠菌群的检验实验16 食品中金黄色葡萄球菌的检验实验17 食品中霉菌和酵母菌的检验实验18 食品中乳酸菌的检验实验19 食品中单增李斯特菌的检验实验20 食品中阪崎肠杆菌的检验第2篇食品化学与分析实验第3章食品化学实验实验21 食品中水分活度的测定实验22 淀粉类食品中α—化度的测定实验23 高效液相色谱法测定香菇多糖的含量实验24 食品中羰胺反应速度的影响因素实验25 油脂过氧化值与酸价的测定实验26 果蔬组织中多酚氧化酶与淀粉酶活性的测定实验27 食品中酶促反应的影响因素实验28 酱油中α—氨基氮含量的测定实验29 食品中花青素稳定性的影响因素实验30 辣椒中红色素的分离与含量测定第4章食品分析实验实验31 食品中钙含量的测定实验32 牛乳酸度的测定实验33 食品中粗脂肪含量的测定实验34 食品中还原糖含量的测定实验35 旋光法测定食品中淀粉、蔗糖、味精的含量实验36 食品中粗纤维含量的测定实验37 食品中蛋白质含量的测定实验38 果蔬中抗坏血酸含量的测定实验39 啤酒中双乙酰含量的测定实验40 食品中合成色素含量的测定实验41 原子吸收光谱法测定食品中铅、镉、铬的含量实验42 分光光度法测定大蒜中微量硒的含量实验43 花生中黄曲霉毒素含量的测定第3篇食品工艺与设备实验第5章果蔬贮运学实验实验44 果蔬一般物理性状的测定实验45 果蔬组织含水量和比热的测定实验46 果蔬冰点温度的测定实验47 果蔬细胞膜电解液渗漏率的测定实验48 果蔬呼吸强度的测定实验49 果蔬贮运环境中O2和CO2含量的测定实验50 果蔬贮藏期间缺氧呼吸中间代谢产物的测定实验51 气相色谱法测定果蔬组织中内源乙烯的含量实验52 果蔬组织中ACC含量的测定实验53 果蔬采后病害的识别与防治实验54 乙烯脱除剂的制作及其保鲜效果试验实验55 果蔬成熟度的判断与采收实验56 果蔬采后商品化处理——催熟与脱涩实验57 果蔬的冷藏与气调贮藏第6章果蔬加工工艺学实验实验58 果蔬加工中叶绿素的变化与护绿实验实验59 果蔬加工中酶活性的检测与酶促褐变的抑制实验60 鲜切马铃薯的褐变控制与保鲜剂的筛选实验61 果蔬加工品中二氧化硫含量韵测定实验62 果蔬罐头的制作实验63 果蔬糖制品的加工实验64 蔬菜腌制品的加工实验65 红葡萄酒的酿造与工艺控制实验66 柑橘皮中果胶的提取与果冻的制作实验67 果蔬加工品的感官评定第7章畜产品工艺学实验实验68 肉新鲜度的检测实验69 肉质的评定实验70 猪肉灌肠的加工实验71 广式腊肉的加工实验72 牛肉干的加工实验73 乳与乳制品的感官评定实验74 掺假掺杂乳的检验实验75 乳及乳制品中脂肪含量的测定实验76 凝固型酸乳的制作实验77 全脂加糖乳粉的生产实验78 乳粉质量的感官评定实验79 HPLC测定液态乳中三聚氰胺的含量实验80 鲜蛋的检验实验81 蛋的物理性质的检验实验82 松花蛋的加工实验83 咸蛋的加工第8章粮油食品工艺学实验实验84 小麦粉湿面筋含量及性质的测定实验85 面包的制作实验86 饼干的制作实验87 桃酥的制作实验88 广式月饼的制作实验89 即食玉米片的制作实验90 内酯豆腐的制作第9章水产品工艺学实验实验91 水产品鲜度的感官鉴定实验92 鱼肉松的加工实验93 鱼肉脯的加工实验94 鱼香肠的加工实验95 鱼罐头的加工实验96 琼脂的制备第10章软饮料工艺学实验实验97 橙汁饮料的加工实验98 碳酸饮料的加工实验99 绿茶饮料的加工实验100 花生乳饮料的加工实验101 运动饮料的加工第11章发酵食品工艺学实验实验102 土壤中发酵菌种的筛选实验103 工业发酵用菌株的初筛与复筛实验104 紫外线法诱变选育优良的发酵菌株实验105 发酵用菌种的扩大培养实验106 比浊法测定发酵菌种的生长曲线实验107 发酵过程中菌种对糖的利用实验实验108 发酵过程中杂菌污染的检测和判断实验109 酵母菌摇床发酵培养条件的确定实验110 发酵液黏度的测定实验111 酵母细胞的破碎及破碎率的测定实验112 协定糖化法制备麦芽汁实验113 啤酒的酿造实验114 啤酒风味保鲜期的测定实验115 糖化酶的液体发酵与酶活性的测定实验116 酱油的固态发酵第12章食品机械与设备实验实验117 农产品清理分级设备的结构与使用实验118 螺旋压榨设备的结构与使用实验119 锤片式粉碎机的结构与使用实验120 均质设备的结构与使用实验121 离心泵的结构与使用实验122 板框过滤机的结构与使用实验123 喷雾干燥机的结构与使用实验124 真空冷冻干燥机的结构与使用实验125 制冷压缩机的结构与使用实验126 真空包装机的结构与使用实验127 生物反应器的安装与拆卸实验128 反应器培养液的灭菌与接种培养实验129 体积溶氧传递系数的测定实验130 离子交换树脂法提取发酵液中的谷氨酸。
培养基的配制和灭菌实验报告（共8篇）
培养基的配制和灭菌实验报告(共8篇) 培养基的制备与灭菌实验报告(详细)一、实验题目：培养基的制备与灭菌二、实验目的：1、明确培养基的配置原则，掌握配置方法。
2、了解灭菌的原理，学习掌握灭菌器的使用方法。
三、实验器材：1、药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。
2、仪器：三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。
四、实验原理：1、培养基的制备包括一下几种成分：（1）水分：主要成分。
（2）N源：包括无机氮和有机氮。
（3）C源：主要是含碳有机物、碳氢化合物等。
（4）无机盐：如NaCl、KH2PO4等。
微量元素：Cu、K、Mg、S、P、Zn。
有些还需要添加“生长因子”，通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。
2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的，选用不同的培养基，但有机物总量不得超过15%，盐类一般不超过1%。
培养基有以下分类：按成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态：固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途：基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌，防止营养物质中的微生物富集。
3、灭菌：用理化手段杀灭一切微生物的营养体，包括芽孢和孢子，在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。
（1）高压蒸汽灭菌：将物品放入封闭的加压灭菌器，加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽，将冷空气排尽，压力上升，使水沸点变高，导致菌体蛋白质变性，一般0.1MPa、121℃、15~30min 可以彻底灭菌，本次实验灭菌20min。
若是含糖培养基，110℃、30min。
（2）干热灭菌：微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。
因高温，所以含水量小，不利于蛋白质受热变性，所以温度高，时间长。
（3）紫外灭菌：诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DNA复制。
（4）过滤除菌：实验室中用微孔滤膜（孔径一般为0.22μm）。
除病菌需更小。
五、实验步骤：1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备依次准确称取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白胨、0.5gNaCl放入烧杯，加入100mL水，用玻璃棒搅匀溶解，移入三角瓶，并加入1.5g琼脂。
培养基的制备实验报告
培养基的制备实验报告导言：培养基是微生物学和生物学研究中不可或缺的实验材料，它可以提供细胞生长所需的营养物质和理想的环境条件。
制备高质量的培养基对于细胞的生长和繁殖至关重要。
本次实验旨在探究如何制备一种适合细菌生长的常规培养基。
实验步骤：1. 准备所需材料：琼脂、蔗糖、蛋白胨、食盐、磷酸二氢钠、硫酸镁、酵母提取物等。
确保材料的质量和纯度。
2. 称量所需质量的琼脂，并加入适量的蒸馏水，加热搅拌溶解。
3. 将琼脂溶液过滤，去除其中的杂质和颗粒。
4. 在琼脂溶液中加入蔗糖、蛋白胨、食盐、磷酸二氢钠、硫酸镁以及酵母提取物等营养物质，调整pH值至适合细菌生长的范围。
5. 将培养基分装至无菌培养皿中。
6. 用自制培养基培养细菌，观察其生长情况。
讨论和结果：通过本次实验，我们成功地制备了一种适合细菌生长的常规培养基。
制备培养基的关键要点如下：质量和纯度：培养基的质量和纯度直接影响细菌的生长情况。
因此，选择高质量的原料并进行过滤是十分重要的。
琼脂作为固化剂必须具备高纯度和良好的溶解性，否则可能会影响培养基的凝固和养分释放。
营养物质：培养基中的营养物质包括碳源、氮源、磷源、硫源和微量元素等，它们是细菌生长所必需的。
在制备培养基时，需要选择适当的营养物质，并根据细菌的需求量进行合理的配比。
蔗糖、蛋白胨和酵母提取物通常是常用的碳氮源，食盐和磷酸二氢钠可提供细菌所需的无机盐。
pH值控制：不同的细菌对于pH值的要求有所不同。
在制备培养基时，需要测定细菌所需pH范围，并通过添加适量的酸碱溶液或调整营养物质的比例来调节pH值。
细菌生长观察：用制备好的培养基培养细菌，并观察其生长情况，可以评估培养基的质量。
细菌的快速生长、活跃移动以及胞内颗粒的形成等指标可以提供有关培养基质量的初步评估，但最终评估培养基质量还需要通过更复杂的方法（如细菌形态、生理和代谢特征的综合分析）进行确认。
在实验过程中，我们制备的培养基成功地培养了细菌，并观察到了细菌的正常生长。
培养基的制作实验报告
一、实验目的1. 掌握培养基的配制原理和方法。
2. 了解培养基在微生物培养中的应用。
3. 熟悉灭菌和消毒的方法及注意事项。
二、实验原理培养基是微生物生长繁殖所必需的营养物质混合物。
根据微生物种类和实验目的，培养基的配方和种类有所不同。
本实验以牛肉膏蛋白胨培养基为例，介绍培养基的配制、灭菌和消毒方法。
三、实验材料与试剂1. 材料：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水、pH试纸等。
2. 试剂：1M HCl、1M NaOH、无菌水等。
四、实验步骤1. 培养基配制（1）称取牛肉膏10g、蛋白胨10g、氯化钠5g，加入1000ml蒸馏水；（2）加入琼脂15g，搅拌均匀；（3）将混合液煮沸，溶解琼脂；（4）用pH试纸检测培养基pH值，调节至7.0-7.2；（5）将培养基冷却至50-60℃，过滤去除杂质；（6）分装至灭菌试管中，每管10ml。
2. 灭菌（1）将装有培养基的试管放入高压蒸汽灭菌锅中；（2）关闭锅盖，加热至压力达到0.1MPa，维持15-20分钟；（3）待压力降至0时，打开锅盖，取出灭菌试管。
3. 消毒（1）将灭菌后的试管置于超净工作台；（2）用无菌镊子取出试管，放入无菌培养皿中；（3）用酒精灯对试管进行消毒；（4）将培养皿放入培养箱中，待培养基凝固。
五、实验结果与分析1. 培养基配制：按照实验步骤，成功配制了牛肉膏蛋白胨培养基。
2. 灭菌：高压蒸汽灭菌法能够有效杀死培养基中的微生物，保证培养基的无菌状态。
3. 消毒：酒精灯消毒可以进一步降低培养基的污染风险。
六、实验讨论1. 在培养基配制过程中，应注意控制pH值，以保证微生物的正常生长。
2. 灭菌和消毒是保证培养基无菌的关键环节，应严格按照操作规程进行。
3. 实验过程中，应注重无菌操作，避免外界微生物的污染。
七、实验结论通过本次实验，掌握了培养基的配制、灭菌和消毒方法，为微生物培养提供了基础条件。
在实验过程中，应严格遵守无菌操作规程，确保实验结果的准确性。
培养基的制备方法
培养基的制备方法
培养基的制备方法可以根据不同的用途和需要进行调整，但一般步骤如下：
1. 确定培养基的配方：根据需要培养的微生物种类和特性，确定培养基的组成，包括有机物、矿物质、氮源、碳源等。
2. 准备原料：根据配方，准备相应的原料和试剂。
一般使用的有琼脂、葡萄糖、胰蛋白胨、氯化钠等。
3. 称取和混合：按照配方要求，称取适量的原料，并将其混合均匀。
4. 加入溶剂：将混合的原料加入适量的蒸馏水或其他溶剂中，搅拌溶解。
5. 调整pH值：使用pH计测量溶液的pH值，根据需要调整pH值，一般范围为
6.8-
7.2。
6. 灭菌：将调制好的培养基分装入培养瓶或琼脂平板中，使用高压灭菌器或高温灭菌法进行灭菌处理，杀灭其中的微生物。
7. 琼脂平板的制备：将灭菌好的培养基倒入平板中，倾斜平板使培养基均匀摊开，培养基凝固后就可以使用。
8. 储存和保存：将制备好的培养基储存在4下，或根据需要添加适当的防腐剂保存。
需要注意的是，制备培养基时要注意无菌操作，避免进一步污染。
同时，不同的微生物可能需要不同的培养基配方和条件，需根据具体需求进行相应调整。
培养基制作的原理及步骤
培养基制作的原理及步骤培养基是一种用于培养和繁殖微生物的营养物质，它提供了微生物生长所需的主要营养物质和环境条件。
培养基制作的原理是根据微生物的营养需求和生长条件来选择合适的成分，并通过一系列步骤进行配制和消毒。
培养基制作的步骤主要包括选择培养基类型、选择成分、配制培养基、消毒和灭菌。
选择培养基类型：根据需要培养的微生物种类和目的选择合适的培养基类型。
常见的培养基类型有固体培养基、液体培养基、选择性培养基和特殊培养基等。
不同类型的培养基适合于不同的实验要求。
选择成分：根据微生物的生理特点和代谢需求选择合适的成分。
培养基成分主要包括碳源、氮源、无机盐和辅助因子等。
碳源是微生物生长所需的能量来源，如葡萄糖、木糖等；氮源是微生物合成蛋白质和核酸的主要来源，如氨基酸、胺类等；无机盐提供微量元素和离子平衡，如钙离子、镁离子等；辅助因子则是一些微量的生长因子，如维生素、酶等。
配制培养基：根据选择的培养基类型和成分，按照一定比例将各种成分溶解在适量的蒸馏水中，配制成液体培养基。
固体培养基则需要将配制好的液体培养基加入适量的琼脂（或者其他凝胶物质），并在高温条件下搅拌均匀，使其凝固成为固体。
消毒：配制好的培养基需要进行消毒，以杀死或去除其中的微生物。
消毒的方法有多种多样，常用的包括高温灭菌、滤过灭菌和化学消毒等。
高温灭菌是将培养基加热到一定温度，如121，在一定时间内保持高温，以达到消毒的目的。
滤过灭菌则是通过微孔过滤膜将培养基中的微生物过滤掉。
化学消毒则是将消毒剂加入培养基中，通过化学作用杀死微生物。
灭菌：消毒后的培养基需要进行灭菌，以避免在培养过程中混入其他微生物。
灭菌的方法有干热灭菌和湿热灭菌。
干热灭菌是将消毒后的培养基在高温下进行加热，以达到灭菌的目的。
湿热灭菌则是将消毒后的培养基装入无菌瓶中，利用高温高压蒸汽进行灭菌。
总结来说，培养基制作的原理是根据微生物的营养需求和生长条件来选择合适的成分，并通过一系列步骤进行配制和消毒。
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分 装
漏 斗 乳胶管
玻璃管
弹簧夹
铁架台
分装试管
灭菌后,固体培养基如需制成斜面, 灭菌后,固体培养基如需制成斜面,应趁热将试管上部垫于 一根玻棒或木条上,使培养基斜面长度为试管长度的1 一根玻棒或木条上,使培养基斜面长度为试管长度的1/2
摆斜面
五,实验报告 简述你所制备培养基的制备程序. 六,思考题 (1)在你制备的培养基中,何为碳源?何 为氮源? (2)配制合成培养基加入微量元素时,最 好用什么方法加入?天然培养基为什么不需 另加微量元素? (3)做过本次实验后,你有什么体会?你 认为在配制培养基的各步操作中应注意些 什么问题?
二,微生物实验室的要求
5,实验过程中,切勿使乙醚,丙酮,酒精等易燃药 品接近火源,如遇火险,应先关掉火源,再用湿布 或沙土掩盖灭火.必要时用灭火器. 6,凡实验用过的菌种以及带有活菌的各种器皿,应 先经高压灭菌后才能洗涤.制片上的活菌标本应先 浸泡于3%来苏儿溶液或5%石炭酸溶液中,半小时 以后再行洗刷.如系芽孢杆菌或有孢子的菌,则应 适当延长浸泡时间. 7,实验中需进行培养的材料,应注明组别,名称及 处理方法,实验完毕,应将仪器,用具等洗净,放 好,做好桌面及地面的清洁工作.
消毒与灭菌
消毒:消灭病原菌和有害微生物的营养体 灭菌:杀灭一切微生物的营养体,芽胞和 孢子.
方法:
一,物理的方法:加热,过滤,辐射 二,化学的方法:用化学试剂抑制或杀灭 微生物.主要破坏细菌代谢机能.如重 金属离子,磺胺类药物及抗生素等.物理状态分 (1)固体培养基 (2)半固体培养基 (3)液体培养基 (4)脱水培养基(干燥培 养基)
1,培养基:人工配制,适合微生物生长繁殖或产生 培养基:人工配制, 代谢产物的混合基质. 代谢产物的混合基质. 2,营养要素:碳源,氮源,能源,生长因子,无机 营养要素:碳源,氮源,能源,生长因子, 盐和水 应具备6大营养要素;物质比例合适; 3, 要 求:应具备6大营养要素;物质比例合适; 必须灭菌. 必须灭菌.
实验一
常用培养基的制备, 常用培养基的制备,灭 菌与无菌检测技术
一,实验目的
1,通过本次实验证明实验室内有各种微 生物的存在. 2,了解配制培养基的一般程序,掌握配 制,分装培养基的方法 3,掌握高压蒸汽灭菌的原理及操作技术
(一)环境中微生物的检测
一,目的和要求 1,微生物在自然界广泛存在,在实验室内亦不例外.由于 微生物在自然界广泛存在,在实验室内亦不例外. 其个体小,人们用肉眼看不到. 其个体小,人们用肉眼看不到.只有通过微生物的大量繁 殖形成微生物群体,即菌落,肉眼才能看到它们. 殖形成微生物群体,即菌落,肉眼才能看到它们. 2,通过本次实验证明实验室内有各种微生物的存在,对微 通过本次实验证明实验室内有各种微生物的存在, 生物有初步的认识, 生物有初步的认识,并在今后的微生物学实验中注意无菌 操作,防止杂菌污染,保证实验结果的可靠性. 操作,防止杂菌污染,保证实验结果的可靠性. 二,实验材料 1,牛肉膏蛋白胨(营养琼脂)培养皿,75%酒精棉球 ,牛肉膏蛋白胨(营养琼脂)培养皿, 酒精棉球 2,37℃恒温箱,酒精灯,剪刀,火柴,镊子,灭菌棉球, , ℃恒温箱,酒精灯,剪刀,火柴,镊子,灭菌棉球, 灭菌牙签, 灭菌牙签,记号笔等
二,微生物实验室的要求
为了上好微生物学实验课,并保证安全,实验时要注意如下 事项: 1,为了保证实验室的整洁和实验的顺利进行,非必要的物品 和书包,不得带入室内,实验时不得高声谈话和随意走动 2,每次实验前要对实验内容进行充分预习,了解实验的目的, 原理和方法,做到心中有数,并作合理安排. 3,实验中要认真观察,及时做好实验记录.对于当时不能得 到结果而需要连续观察的实验,则需记下每次观察的现象和 结果,以便分析. 4,实验操作应严格按操作规程进行,万一遇有带菌物品洒漏, 皮肤破伤或菌液吸入口中等意外情况发生时,应立即报告指 导教师,及时处理,切勿隐瞒.
微生物实验室常用仪器设备
显微镜
电子天平
超净工作台
立式灭菌锅
霉菌和生化培养箱
恒温培养箱
谢
谢
2010年03月 201 03月
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一,实验原理
4,培养基的凝固剂: 培养基的凝固剂: 琼脂:融化温度96 96℃ 凝固温度40 45℃ 常用浓度: 40琼脂:融化温度96℃,凝固温度40-45℃.常用浓度:1.5-2.0% 无营养价值,不易分解,耐压灭菌 无营养价值,不易分解, 明胶:融化温度25 25℃ 凝固温度20 20℃ 常用浓度: 12% 明胶:融化温度25℃,凝固温度20℃. 常用浓度:5-12% 作氮源,易分解,不耐压. 作氮源,易分解,不耐压. 5 , 灭菌 : 用高压蒸气对培养基进行灭菌时必须根据培养基的 灭菌: 种类,容器的大小及数量采用不同的温度及时间. 种类,容器的大小及数量采用不同的温度及时间.一般少量 分装的基础培养基通常为121 15min灭菌. 121℃ min灭菌 分装的基础培养基通常为121℃15min灭菌.如盛装培养基的 容器较大,则应适当增加其灭菌的温度和时间.含糖培养基, 容器较大,则应适当增加其灭菌的温度和时间.含糖培养基, 一般采用115 20—30min灭菌,以免糖类因高热而分解. 115℃ min灭菌 一般采用115℃20—30min灭菌,以免糖类因高热而分解.由 于高压蒸气灭菌是通过提高蒸气压力而使其升高温度以杀死 微生物,所以加压前应尽量排净锅内的空气. 微生物,所以加压前应尽量排净锅内的空气
不加琼脂
2,营养成分分 (1)天然培养基 (2)合成培养基 高氏一号 (3)半合成培养基
营养琼脂 PDA
3,不同功能分 (1)选择性培养基
(2)鉴别培养基
乳酸菌培养基MRS
EMB
二,实验材料及仪器
(一)药品 牛肉膏,蛋白胨,葡萄糖,可溶性淀粉,NaCl, KNO3,K2HPO4,MgSO4,FeSO4,琼脂等. (二)试剂 40%KOH,l0%HCl. (三)其它 电子天平,电炉,硫酸纸,牛皮纸,线绳,棉 花,纱布,石棉网,精密pH试纸,标签,烧杯,量 简,玻棒,三角瓶,滴管,灭菌锅等.
三,方法步骤 1,培养基的种类很多,配制方 法也不完全相同,但其基本程 序和要求是大体相同的.一般 培养基的配制程序如下
一般培养基的配制程序如下
计算 称量 溶解定溶调节PH值
加琼脂并溶解
过滤 灭菌 摆斜面 包扎
分装 加塞
无菌检查.
四,实验内容
1,每4人一组分别制备一种培养基200ml. 灌装7支试管后,装入三角瓶. (1)牛肉膏蛋白胨琼脂培养基.(1-6组) (2)马铃薯葡萄糖琼脂培养基.(7-12组) (3)高氏1号培养基.(13-16组) 2,分装试管和三角瓶,灭菌后摆斜面.
四,结果观察
1,同组成员共同观察并记录结果,并 与对照皿进行比较. 2,描述你处理的培养皿中长出的菌落, 如形状,颜色,大小,边缘等特征
五,思考题
1,本组内不同处理的培养皿 上的菌落是否相同,从本实 验中得到了什么启示? 2,在今后的实验操作中要注 意的问题是什么?
(二)培养基的制备与灭菌
一,实验原理
微生物学实验的目的及 实验室的要求
主讲:郑海涛 主讲:
一,微生物学实验的目的
1,微生物学实验是微生物学的重要组成 部分,也是学习微生物学的一个重要环节 2,通过实验操作,可以加深和巩固对课堂 讲授内容的理解. 3,训练学生掌握最基本的操作技能;了解 微生物学的基本知识;培养学生观察,思 考,分析解决实际问题的能力;实事求是, 严肃认真的科学态度和勤俭节约,爱护公 物的良好作风.
三,操作步骤
人为一组, 块灭菌的营养琼脂培养皿, 以4人为一组,取5块灭菌的营养琼脂培养皿,一皿对照不要打开 其余每人1 盖,其余每人1皿,每组成员分别选择下列任何一种方法加以处理并 在皿上写明班级,姓名,日期及处理方法. 在皿上写明班级,姓名,日期及处理方法. (1)打开培养皿盖 在空气中暴露约10分钟,然后盖上皿盖. 打开培养皿盖, 10分钟 (1)打开培养皿盖,在空气中暴露约10分钟,然后盖上皿盖. (2)打开培养皿盖,用手指触摸培养基表面2 (2)打开培养皿盖,用手指触摸培养基表面2—3个点,注意不要将培 打开培养皿盖 个点, 养基弄破,然后盖上皿盖. 养基弄破,然后盖上皿盖. (3)取自己的头发约5cm长3—5根打开皿盖用镊子放于培养基表面.然 (3)取自己的头发约5cm长 取自己的头发约5cm 根打开皿盖用镊子放于培养基表面. 后盖上皿盖. 后盖上皿盖. (4)用灭菌棉球在实验台(或凳子)上擦两下,打开皿盖,在培养基表 用灭菌棉球在实验台(或凳子)上擦两下,打开皿盖, 面轻轻涂抹,然后盖上皿盖.注意不要将培养基弄破. 面轻轻涂抹,然后盖上皿盖.注意不要将培养基弄破. (5)将接种的培养皿放入培养箱适温培养24-48小时. 将接种的培养皿放入培养箱适温培养24-48小时 24