胰腺癌细胞系的表型及基因型介绍PPT课件

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高侵犯癌症的患者发现时,多是晚期转移性疾病,严重影响患者的预后。 细胞侵犯相关研究: Ø Capan-1和mia-paca-2在人工基质胶中有相似的侵犯特性 Ø Bxpc-3比mia-paca-2有更强的侵犯能力,有研究也表明二者近似 Ø Panc-1比mia-paca-2有更强的侵犯能力,有研究也表明mia更强
细胞的粘附性
细胞的粘附性是通过细胞外基质和细胞表面分子接触介导的: Ø 纤连蛋白,一种发现于基底膜和结缔组织的糖蛋白 Ø I型和IV型胶原蛋白,发现于组织间质和基底膜 Ø 层粘连蛋白,基底膜中主要的非胶原蛋白
相关研究: Ø Capan-1比Mia-paca-2更易连接到I型胶原蛋白 Ø Capan-1和Mia-paca-2对层粘连蛋白的粘附性无明显差异,有研究也表明Capan-1稍逊 Ø Bxpc-3和panc-1对I型胶原蛋白粘连性近似 Ø Bxpc-3和panc-1对层粘连蛋白粘附性近似,有研究也表明,Bxpc-3更强
移植瘤方法: ① 皮下注射胰腺癌细胞(免疫缺陷小鼠) ② 腹膜内注射/静脉注射肿瘤细胞 ③ 原位移植 a. 移植肿瘤组织-供体源自皮下移植瘤小鼠 b. 移植肿瘤细胞-源自人胰腺癌细胞
成瘤能力(体内)
皮下注射相关研究 Ø Bxpc-3成瘤比PANC-1大,也有研究表明PANC-1成瘤较大; Ø Capan-1注射后14周即发展成为肿瘤,bxpc-1和panc-1则超过4个月成瘤; Ø bxpc-3注射后潜伏期40天才开始生长,capan-1则需10天潜伏期开始生长;panc-1成瘤潜伏期为4
几种常见胰腺癌细胞系的来源
Ø AsPC-1细胞: ① 源自胰头癌原发肿瘤 ② 有转移,转移至腹部器官、腹水 ③ 分泌:黏蛋白、CEA Ø BxPC-3细胞: ① 源自胰体癌原发肿瘤 ② 无转移 ③ 分泌:CEA、CA199、黏蛋白等 ④ 裸鼠移植生长类似患者原位肿瘤 Ø Capan-1细胞: ① 源自胰头癌肝脏转移灶 ② 有转移,转移至区域淋巴结、肝脏等 ③ 分泌:黏蛋白
血管生成因子,其中的促因子如血管内皮生长因子和胰腺癌的TMAD密切相关。促血管生成因子的高表
达不仅促进中肿瘤血管生成,而且能够促进肿瘤细胞有丝分裂的进行。
促血管生成因子: Ø 细胞因子,如IL-1α、IL-8 Ø 趋化因子, Ø 酶类 Ø 其他肿瘤产物
COX-2在促进肿瘤血管生成中的作用: Ø 促进AA转化为PGE2,PGE2为一种血管生成因子 Ø PGE可激活NF-kB Ø NF-kB可以促进COX-2的转录和翻译
胰腺癌细胞系的表 型及基因型介绍
PPT制作:杨金收
• 胰腺癌细胞系能够用来进行胰腺癌相关实验的原因 (1)胰腺癌中常见的四种基因(K-ras、p16、p53、Smad4)突变
的比例和胰腺癌细胞系中其突变的比例接近; (2)胰腺癌细胞系不同的表型和基因型代表胰腺癌不同的亚类;
利用胰腺癌细胞系进行机制推理和因果实验,比如不同特定蛋白的表 达和肿瘤生长、侵犯、转移之间的关系,以及化疗耐药实验。
Ø Capan-2细胞: ① 源自胰头癌 ② 有侵犯,浸润十二指肠壁远端 Ø CFPAC-1细胞: ① 源自胰头癌肝脏转移灶(并发囊性纤维化) ② 有转移,广泛转移至肝脏 ③ CFTR突变:引起①先天性胰腺炎②新发胰腺癌
危险因素(存在争议) Ø HPAC细胞: ① 源自胰头癌 ② 分化稳定、良好 Ø HPAF-II细胞: 源自胰腺癌腹水癌细胞(转移至肝脏、隔及淋巴结)
***特定基质:人工基质胶(包括层粘连蛋白、IV型胶原蛋白、巢蛋白、硫酸肝素)
细胞的迁移和侵犯
细胞迁移性在癌细胞转移中发挥重要作用。 细胞迁移相关研究: Ø Panc-1(多是单细胞迁移)比bxpc-3(多是整个细胞团的迁移)有5倍的能动性 Ø Panc-1细胞在I型胶原蛋白transwell中比bxpc-3能动性更好 Ø HPAF-II比bxpc-3能动性好
几种常见胰腺癌细胞系的来源
Ø Hs 766T细胞: 源自胰腺癌淋巴结转移灶 Ø MIA Paca-2细胞: ① 源自胰体尾癌原位肿瘤 ② 有侵犯,浸润至主动脉周围 ③ 无表达大量CEA且ALP阴性 Ø PANC-1细胞: ① 源自胰头癌原位肿瘤 ② 有转移,转移至胰周淋巴结 ③ 未检测到CEA Ø SU.86.86细胞: ① 源自胰头癌肝脏转移灶 ② 有转移,广泛肝脏转移
的IL-1α; 总结:BxPC-3 和 Capan-1 表达高水平促血管生成因子,而AsPC-1 和MIA PaCa-2 表达低水平的促
血管生成因子
建议:检测肿瘤细胞系中促血管生成因子的表达,可以用作反映肿瘤血管生成能力的指标。
成瘤能力(体内)
评估致瘤性: ①肿瘤体积 ②肿瘤质量 ③发生概率 ④生长速度
细胞的迁移和侵犯
影响研究差异的变量 Ø 检测侵犯性能的试剂 Ø 细胞培养条件 Ø 细胞培养时间 Ø 细胞定量技术
对研究者建议 在得出实验中侵犯能力的的结论时,首先阐明本实验细胞系的侵犯特点。
血管生成能力
肿瘤微血管密度(TMVD)是至关重要的肿瘤发展和患者生存的预测指标,在大部分肿瘤中(如乳
腺癌、前列腺癌)介导心血管的生成。肿瘤的增殖和心血管的生成密切相关,其促血管生成因子多于抗
细胞的粘附性
影响研究差异的变量: Ø 细胞定量技术的不同,如分光光度法和光学显微镜的差异 Ø 细胞培养条件 Ø 对细胞外基质的处理方法
对研究者建议: 注意Biblioteka Baidu用既有的研究,认真阐明不同细胞系的黏附特性
细胞的迁移和侵犯
相关实验方法: Ø 细胞增殖实验 ① MTT ② CCK8 Ø 细胞迁移实验 ① transwell using Boyden chambers ② wound-healing cell migation assay(细胞划痕实验) Ø 细胞侵犯实验 • transwell(特定基质)
IL-8可以介导细胞增殖和血管内皮细胞趋化运动,从而促进肿瘤的生长
2020/7/13
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血管生成能力
相关研究: Ø BxPC-3, Capan-1,Capan-2 and HPAF-II可表达COX-2, 而AsPC-1, MIA PaCa-2、PANC-1无表
达,其中尤其是Capan-2表达大量的 COX-2; Ø BxPC-3 表达高水平的IL-1α and IL-8 ,但是Capan-2 和MIAPaCa-2 表达低水平的IL-8 和不可检测
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