丹参酮ⅡA注射液对缺血缺氧性脑损伤新生大鼠皮质神经元自噬及Akt-mTOR通路的影响

中 图 分 类 号 ：R 2 8 5 .5 文 献 标 志 码 ： A 文 章 编 号 ：1004-745X (2019)02-0204-05 doi ：10.3969/j.issn.1004-745X.2019.02.005
【摘 要 】 目 的 观 察 丹 参 酮 ！A 注 射 液 对 缺 血 缺 氧 性 脑 损 伤 新 生 大 鼠 皮 质 神 经 元 自 噬 及 A k t-m T O R 通 路 影
! 基 金 项 目 ：湖 北 省 自 然 科 学 基 金 项 目 （2015CKB139)
中 国 中 医 急 症 2019年 2 月 第 2 8 卷 第 2 期 JETCM. Feb. 2019, V ol.28,No.2 may be mediated by activating Akt-mTOR signal transduction pathway.
据 调 查 ，围 生 期 HIBD新 生 儿 死 亡 率 高 达 2 0 % ，经治疗
幸 存 患 儿 中 约 4 0 % 存 在 脑 神 经D主 要 依 靠 亚 低 温 疗 法 进 行 治 疗 ，但 其 预 后 效 果
并 不 理 想 。相 关 研 究 指 出 ，病理性神经元自噬是造成多
HRP缀合的二
自康
德 。透 电 子 微 镜 购 自 尼 康 仪 （ ） 公 司 。酶
标仪自美国伯腾仪。
1 . 3 分 组 与 造 模 将 S D 幼 鼠 随 机 分 为 5 组 ，每 组 16
只 ， 别 为 假 手 术 组 、 型 组 、高 剂 组 （0.1mg/g)、中
剂 组 (0.05 mg/g)、低 剂 量 组 (0.02 mg/g)。假手术组仅
的质
。
模 型 组 ，高 剂 量 组 、
中 量 组 、低 量 组 中 自 噬 体
，
的
性 (！< 0 .05)。 手 术 组
，模 型 组 中
幼 鼠 脑 梗 死 面 积 显 著 增 加 (！< 0 .0 5 )。与 模 型 组 相 比 ，高 剂 量 组 、中 剂 量 组 、低 量 组 中 脑
，
且 呈 一 定 的 剂 量 依 赖 性 (！< 0.05)。 手 术 组 相 比 ，模 型 组 中 LC3- I /(L C 3- I + L C 3 - ! ) 的 比 值 与 Beclin-1
-2 0 4 -
中 国 中 医 急 症 2019年 2 月 第 2 8 卷 第 2 期 JETCM. Feb. 2019, V ol.28,No.2
•研究报告•
丹 参 酮 ！A 注射液对缺血缺氧性脑损伤新生 大 献 质 神 经 元 自 噬 及 Akt-mTOR通路的影响!
朱波杨艳苏仁意许细平孙乾朕
( 湖 北医 药 学 院 附 属 襄 阳 市 第 一 人 民 医 院 ，湖 北 襄 阳 441000)
【Key words】 Hypoxic-ischemic brain d a m a g e ; - C o r t i c a l neurons-Autophagy;Akt-mTOR pathway
- 205 -
缺 氧 缺 血 性 脑 损 伤 （HIBD)是 造 成 新 生 儿 多 种 神
经 功 能 障 碍 的 疾 病 之 一 ，严 重 威 胁 新 生 儿 生 命 健 康 [1]。
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LC3 - I 、LC3 - H 、Beclin- 1 、p -A k t、p-mTOR、p - S6 、
S A D P H 蛋白
左 颈 部 切 口 处 理 ，其 余 各 组 进 行 造 。3 % 乙醚麻醉幼
，手 术 暴 露 左 侧 颈 主 动 ，分 离 神 经 ， 扎 血 管 ，缝合
伤 口 。 回 原 饲 养 环 境 ，恢 3 h 后 ，将 幼 置 于 常 压
缺 氧 舱 内 ，温 度 37 " ，湿 度 4 5 % ~ 5 5 % ，持 续 通 入 8 %
种 神 经 元 损 伤 亡 的 重 要 之 一 [;]。因 此 ， 调节
神经元自噬
的 研 究 是 目 前 治 疗 HIBD的新
。
! A 是 主 要 效 成 之 一 ， 溶 于 水 ，易溶
于机溶剂。
！A 含 型
， 多种
理效，
’
损伤、
亡 、神经
等 [4]。相关研究 ，
！A 多
种 的缺氧缺血性损伤
[5>?]。 等研
缺氧性脑损伤大脑皮质神 元自噬
的制
， 其制
为通
Akt-mTOR 号
通路
的。
A 【关 键 词 】 缺 血 缺 氧 性 脑 损 伤 丹 参 酮 ！ 皮 质 神 经 元 自 噬 A kt-m TO R 通 路
Effects of Tanshinone HA A Injection on Autophagy and Akt-mTOR Pathway in Cortical Neurons of Neonatal Rats with Hypoxic-ischemic Brain Damage Zhu B〇， Yang Yan，Su Renyi，et at. The first people"s Hospital o f Xiangyang Affiliated to Hubei Medical College，H ubei，Xiangyang 441000，China. 【Abstract】 Objective: To investigate the effects of Tanshinone ! A Injection on autophagy and Akt-mTOR pathway in cortical neurons of neonatal rats with hypoxic -ischemic brain damage. Methods ：80 7-day old SD rats were randomly divided into 5 groups：sham operation group (Sham ) ，the model group (HIBD) and Tanshinone A high dose group(0.1 mg/g，H D )，middle dose group(0.05 mg/g，MD) and low dose group(0.02 mg/g，LD). The HIBD model was constructed by Rice method. Changes of neurons in cerebral cortex of neonatal rats were ob­ served by transmission electron microscopy ；TTC staining was used to detect the cerebral infarction，and the ex­ pression of L C 3-I，LC3- H ，Beclin-1，p-A k t，p-mTOR and p-S6 protein was detected in brain tissue with West­ ern blot. Results：Neurons in sham-operated group had normal structure. In HIBD group，a large number of au­ tophages and autophagic lysosomes were observed in cortical neurons and the vesicular autophages contained visi­ ble cytoplasmic structure ；the infarct area of young rats increased significantly (P < 0.05). The ratio of LC3- I / (LC3- I _LC3-H ) and the expression of Beclin-1 protein increased significantly(P< 0.05). The expression lev­ els of p-A k t，p-mTOR and p-S6 decreased significantly (P < 0.05). Compared with HIBD group，the number of autophages and the area of cerebral infarction and the ratio of LC3- I /(L C 3- I _LC3- H ) and the expression level of Beclin-1 protein decreased significantly，and the expression levels of p -A k t，p-mTOR and p-S6 protein increased significantly in a dose-dependent manner in other groups (P< 0.05). Conclusion：Tanshinone! A can significantly inhibit the autophagy of cortical neurons in neonatal rats with hypoxic-ischemic brain injury，which
大鼠 80， 不 ，
11.6~12.17g ，
(11.98±0.32) g ，
中
，
：SYXK( (2015-0003。
1 . 2 试剂与仪器
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