UPLC 法测定葛根中β - 谷甾醇的含量
不同提取方法测定葛根中三种有效成分
不同提取方法测定葛根中三种有效成分一、实验目的及意义1. 了解水煮法、醇提法、微波辅助萃取法、超声波法、索氏提取法和溶剂浮选法；2. 熟悉相关仪器的使用操作。
二、研究背景简介葛根为临床常用中药，具有解肌退热、升阳透疹、生津止泻的功效。
葛根的主要活性成分是葛根素、大豆甙、大豆甙元等多种异黄酮类物质。
并含有多糖及多种微量元素，现代药理研究表明，葛根黄酮具有改善心脑血液循环，扩张冠状动脉，降血压，降血糖等作用；大豆甙元有明显抗心律失常作用，一直白血细胞的增殖及黑色素瘤细胞的分化。
民间常用葛根一味退热生津。
近几年临床上应用含葛根的的制剂愈风宁心片、葛根素注射液等治疗偏头痛、高血压、冠心病等疾病。
目前正在研制的还有葛根黄铜生物粘附性缓释片、葛根黄铜缓释胶囊、葛根素微乳、葛根素滴丸、葛根素复合骨架稀释片、配方颗粒等。
由于葛根属于药食同源，也被广泛的应用于保健品和食品中。
本课题对湖南和安徽两个地区的葛根采用水煮法、超声提取法、醇提法、微波辅助萃取法、索氏提取法、溶剂浮选法的提取方法，并针对其三种有效成分葛根素、大豆甙、大豆甙元的HPLC测定结果进行了分析比较。
三、实验内容1. 主要仪器安捷伦液相色谱仪1100系列（美国安捷伦公司）AB204-N电子天平（瑞士梅特勒公司）PHS-3B型pH计（上海精密科学仪器有限公司）MSP-100E微波萃取装置（雷鸣科技仪器公司）2. 主要试剂乙醇、正丁醇（分析纯，北京化工厂）；甲醇（色谱纯，天津西华特种试剂厂）；去离子水（自制）；葛根样品产地分别为安徽和湖南，葛根素、大豆甙和大豆甙元标准品（中国药品生物制品检定所）。
3. 实验步骤（1）水煮法水煮法是用水做溶剂，加热一定时间，能提出较多成分，符合传统用药习惯，时常用的一种提取方法。
此方法生产成本低，适合工业化生产。
（2）醇提法醇提法是葛根提取工艺中最常用的提取方法。
称取适量的葛根加乙醇进行回流，冷却后待测。
（3）微波辅助萃取法称取适量的葛根，用75%乙醇作为溶剂，在一定微波萃取条件下进行萃取，冷却后待测。
高效液相色谱法测定油脂中β-谷甾醇的含量
高效液相色谱法测定油脂中β-谷甾醇的含量邱丰艳;丁力;曹红云【摘要】建立了高效液相色谱法准确、高效测定油脂混合体系中β-谷甾醇含量的方法，并对油脂混合物中β-谷甾醇的提取工艺进行了优化。
采用C18反相色谱柱对β-谷甾醇含量进行测定，流动相为甲醇-水(体积比98．5：1．5)，检测波长210 nm。
结果表明：β-谷甾醇在25~500μg/mL范围内，质量浓度与峰面积呈良好的线性关系(R2=0．9998)，仪器检出限为7．5μg/mL，相对标准偏差(RSD)为0．85%；油脂混合物中β-谷甾醇的最佳提取工艺条件为提取次数4次，离心转速2000 r/min，皂化温度80℃，皂化时间210 min；在最佳提取工艺条件下β-谷甾醇的回收率为93．44%~96．48%，RSD为1．70%。
%The accurate and efficient method for determing β-sitosterol content of oil mixture by HPLC was established,and the extraction process of β-sitosterol from oil mixture was optimized. C18 reverse-phase chromatography column was used for the determination ofβ-sitosterol content under the conditions of mobile phase methanol - water (volume ratio 98. 5:1. 5 ) and detection wavelength 210 nm. The re-sults showed that the mass concentration of β-sitosterol had a good linear relationship with peak area in the range of 25-500μg/mL. The correlation coefficient, the instrumental limit of detection and the rela-tive standard deviation (RSD) were 0. 999 8, 7. 5 μg/mL and 0. 85% respectively. The optimal extrac-tion conditions of β-sitosterol from oil mixture were obtained as follows:extraction times four, centrifugal speed 2 000 r/min, saponification temperature 80℃ and saponification time 210min. Under these conditions,the recovery rate and RSD of β-sitosterol were 93. 44% -96. 48% and 1. 70%, respectively.【期刊名称】《中国油脂》【年(卷),期】2014(000)007【总页数】5页(P91-94,95)【关键词】HPLC;β-谷甾醇;油脂混合物【作者】邱丰艳;丁力;曹红云【作者单位】龙岩学院生命科学学院，福建龙岩364012;龙岩学院生命科学学院，福建龙岩364012;龙岩学院生命科学学院，福建龙岩364012【正文语种】中文【中图分类】TS225.1;TQ646β-谷甾醇是天然植物脂质中分布最广的甾醇类物质，具有良好的生理活性和安全性，不仅可降低人体对胆固醇的吸收，还可降低血浆中总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量[1-3]。
保健食品中葛根素的测定 标准
保健食品中葛根素的测定1. 范围本标准规定了保健食品中葛根素的测定方法。
本标准适用于以保健食品为原料或产品中葛根素的测定。
2. 原理本方法采用高效液相色谱法测定保健食品中葛根素的含量。
样品经提取、净化后，采用高效液相色谱仪进行分离，以紫外检测器检测，外标法定量。
3. 试剂与溶液本标准所用试剂均为分析纯，水为超纯水。
3.1 甲醇：色谱纯。
3.2 乙腈：色谱纯。
3.3 葛根素标准品：纯度≥98%。
3.4 葛根素标准储备液（ρ=1mg/mL）：称取适量葛根素标准品，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。
3.5 葛根素标准工作液：将葛根素标准储备液稀释至所需浓度。
4. 仪器和设备4.1 高效液相色谱仪：配有紫外检测器。
4.2 分析天平：感量为0.0001g。
4.3 超声波清洗器。
4.4 离心机。
4.5 混合器。
5. 样品处理5.1 提取：称取适量样品，加入适量的甲醇，超声波提取一定时间，取出冷却至室温。
5.2 离心：将提取液以转速×g离心一定时间，取上清液备用。
5.3 过滤：取适量上清液，通过适当的滤膜进行过滤，备用。
6. 分析步骤6.1 液相色谱条件：色谱柱为C18柱，流动相为甲醇+乙腈（1:1），流速为1.0mL/min，检测波长为254nm，进样量为20μL。
6.2 测定：分别将样品溶液和葛根素标准工作液注入高效液相色谱仪中，记录色谱图，以葛根素标准工作液的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
根据样品的峰面积，从标准曲线上查出对应的浓度，计算出样品中葛根素的含量。
高效液相色谱法测定降脂减肥颗粒中葛根素含量
高效液相色谱法测定降脂减肥颗粒中葛根素含量一、背景降脂减肥颗粒是近年来市场上广泛流行的一种减肥产品。
其中的葛根素是一种生物活性成分，具有减轻体重、调节脂质代谢等功效，是降脂减肥颗粒的重要成分。
因此，准确地测定降脂减肥颗粒中葛根素的含量，对保证产品质量、确保安全有效性至关重要。
二、实验方法2.1 试剂和仪器•高效液相色谱仪 (HPLC)•Eclipse Plus C18色谱柱 (250mm×4.6mm，5μm)•甲醇•磷酸二氢钾•三氯乙酸•纯净水•过滤膜(0.22μm)2.2 样品制备将降脂减肥颗粒样品（1g）加入50mL锥形瓶中，加入5mL甲醇，超声处理20min，离心10min，过滤取滤液并将甲醇挥发至干燥，加入5mL红外级纯水，摇匀，滤过0.22μm滤膜备用。
2.3 色谱条件•柱温：35℃•流速：1.0mL/min•注射体积：10μL•检测波长：254nm•补偿波长：360nm•分离时间：20min2.4 制备标准曲线取葛根素标准品，精密称取不同质量的标准品，加入锥形瓶中并精密加入纯净水稀释至适量浓度。
取不同浓度的标准品溶液，分别进行色谱检测，绘制标准曲线。
2.5 样品测定将样品溶液注入色谱仪检测，读取峰面积，根据标准曲线计算得到样品中葛根素的含量。
三、结果分析本研究通过高效液相色谱法测定降脂减肥颗粒中葛根素含量，结果如下：样品标识葛根素含量(μg/g)样品A 5.76样品B 4.93样品C 5.15四、结论本研究成功地建立了一种高效液相色谱法测定降脂减肥颗粒中葛根素含量的方法，并对三个样品进行了检测，结果表明样品中均含有葛根素，其中样品A的含量最高，样品B的含量最低，样品C的含量次之。
该方法简便、快速、准确，可用于降脂减肥颗粒中葛根素的含量测定。
葛根素含量测定方法
葛根素含量测定方法
葛根素是一种生物活性成分，通常使用色谱法进行测定。
以下是一种常见的葛根素含量测定方法：
1. 仪器准备：高效液相色谱仪（HPLC），色谱柱（常用的为
C18柱），紫外检测器，注射器，数据处理软件等。
2. 样品制备：将葛根粉末经过适当的提取工艺得到提取液，通常可以选择水、甲醇或乙醇等溶剂进行提取。
将提取液过滤并稀释到适当的浓度。
3. 色谱条件设定：设置色谱柱温度、流速、洗脱液组成和等其他条件。
常见的流动相为A：乙腈，B：水，采用梯度洗脱进
行分离。
4. 标准曲线绘制：准备一系列不同浓度的葛根素标准溶液，通过色谱仪进行检测并记录峰面积。
将峰面积与标准溶液浓度绘制标准曲线。
5. 样品测定：将经过稀释的样品注射到色谱仪中，记录峰面积。
6. 结果计算：将样品的峰面积代入标准曲线中，根据峰面积与浓度的线性关系计算出葛根素的含量。
需要注意的是，葛根素的含量测定方法可以根据实际需求进行调整，上述方法仅为一种常见的测定方法，具体应根据实验条件和仪器设备进行调整。
高效液相色谱法测定葛粉保健品中葛根素的含量
高效液相色谱法测定葛粉保健品中葛根素的含量
孙林超
【期刊名称】《理化检验-化学分册》
【年(卷),期】2008(044)010
【摘要】对不同产区葛粉保健品中葛根素的含量进行分析,拟建立高效液相色谱法快速测定葛粉保健品中葛根素含量的方法.固定相为Agilent-C18柱(4.6 mm×300 mm,5μm),流动相为甲醇一水(70+30,体积比)溶液,流速为1.0 mL·min-1,波长为250 nm,进样量10μL.结果表明:葛根素的质量浓度在10.00～100.00 mg·L-1范围内与峰面积呈线性关系,加标回收率为99.0%～99.8%,检出限(3S/N)为1.0 mg·L-1,相对标准偏差分别为0.57%,0.64%,1.71%.
【总页数】3页(P945-946,949)
【作者】孙林超
【作者单位】江苏食品职业技术学院,淮安,223003
【正文语种】中文
【中图分类】O657.1
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涛
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UPLC法测定葛丹颗粒中葛根素的含量
ｔ ｒ ｏ ｌ ｔ ｈ ｅ ｑ ｕ ａ ｌ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆ ｐ ｕ ｅ ｒ ａ ｒ ｉ ｎ ｉ ｎ ｇ ｅ ｄ ａ ｎ ｒａ ｇ ｎ ｕ ｌ ｅ ｂ ｅ ｔ ｔ ｅ ｒ ． Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄ ｓ ： ｇ ｅ ｄ ａ ｎ ｇ ｒ ａ ｎ ｕ ｌ ｅ ； ＵＰ Ｌ Ｃ； ｐ ｕ ｅ ｒ ａ ｒ ｉ ｎ； ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ
０ ． ３ ９ ０ ０ ｇ・ Ｌ 一， ｒ ＝ ０ ． ９ ９ ９ ９ ． Ｔ ｈ ｅ ａ ｖ ｅ ｒ ａ ｇ ｅ ｒ ｅ ｃ ｏ ｖ ｅ ｒ ｙ ｒ ａ ｔ ｅ ｗ ａ ｓ ９ ８ ． ８ ４ ％（ Ｒ Ｓ Ｄ：０ ． ７ １ ％） ． Ｃ ｏ ｎ ｃ ｌ ｕ ｓ ｉ ｏ ｎ Ｔ ｈ ｉ ｓ ｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｃ ａ ｎ ｂ ｅ ｕ ｓ ｅ ｄ ｔ ｏ ｃ ｏ ｎ —
ｒ ： ０ ． ９ ９ ９ ９ ， 平均 回收率为 ９ ８ ． ８ ４ ％， Ｒ Ｓ Ｄ＝ ０ ． ７ １ ％。结论 该法简单 、 快捷 ， 适用于葛丹颗粒 中葛根素 的含量测定 。
关键词 ： 葛丹颗粒 ； Ｕ Ｐ Ｌ Ｃ ； 葛根素 ； 含量测定
ＵＰＬＣ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｐ ｕｅ ｒ ａ ｒ ｉ ｎ ｉ ｎ ｇ ｅ ｄ ａ ｎ ｇ ｒ ａ ｎ ｕ ｌ ｅ
葛根含量测定方法(葛根素)
葛根含量测定方法（葛根素）葛根为豆科植物野葛Pueraria lobata(Willd.)Ohwi的干燥根。
2005版《中国药典》一部采用高效液相色谱法测定其葛根素的含量。
一、高效液相色谱法2005版《中国药典》葛根含量测定项下：色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（25：75）为流动相；检测波长为250nm。
理论板数按葛根素峰计算应不得低于4000。
供试品溶液的制备：取本品粉末约0.1g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入30%乙醇50ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用30%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
HPLC法测定葛根及其制剂中葛根素的含量时，使用最多的流动相系统为甲醇-水系统，另外还有甲醇-水，加醋酸调节pH等。
A：以甲醇-水为系统的，常见的比例及实验条件为：①Waters2695/ 2996/ Empower 色谱系统；色谱柱Symmetry C18 柱( 3.9mm150mm, 5μm)；流动相：甲醇-水(25：75)；DAD检测波长254nm；柱温35℃。
②SP8800 型高效液相色谱泵；Hypersil ODS (4.6mm250mm,5μm大连依利特科学有限公司)；流动相：甲醇-水(30：70)；柱温40℃；检测波长250nm。
③Waters高效液相色谱仪；十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱（4.6mm250mm,5μm）；甲醇-水（40：60）为流动相；检测波长为250nm；柱温30℃。
④美国Spectra-Physics 液相色谱仪；色谱柱Lunm C18 (150mm4.6mm, 5μm ) 不锈钢柱(美国Phenom enex 公司)；流动相为甲醇-水(28：72)；检测波长250nm；柱温30℃。
B：乙腈-水系统：①LC-10ATvp高效液相色谱仪；Hypersil ODS 色谱柱(4.6mm150mm,5μm)；乙腈-水(15：85)为流动相；检测波长250nm。
HPLC法测定葛根保健酒中葛根素的含量
葛根保健酒是以白酒为溶剂，以葛根为主要原料，精制而成的一种保健酒。
葛根素是由豆科植物野葛的干燥根中提取，分离得到的8-β-D-葡萄吡喃糖-4＇，7-二羟基异黄酮，具有提高免疫，增强心肌收缩力，保护心肌细胞，降低血压等作用。
最近几年，葛根保健酒因其特有的保健功效，受到人们的欢迎。
利用高效液相色谱法测定葛根素的含量，可为葛根保健酒的质量控制提供依据。
1材料1.1仪器Waters e2695型高效液相色谱仪，美国Waters ACQUITY H-CLASS/TUV ,FA1004B 型电子天平，KQ-300DE 超声波清洗器（昆山超声仪器有限公司），优普纯水系统及超纯水机（成都超纯科技有限公司）。
1.2药品与试剂甲醇，乙腈：色谱纯，莫克公司；超纯水（自制）；葛根素标品：昊睿化学（上海）有限公司。
样品：市售葛根保健酒2方法与结果2.1葛根素标准溶液制备精密称取葛根素对照品约10mg ，用甲醇定容于50mL 容量瓶中，超声震荡，摇匀备用。
2.1.1对照品溶液制备分别精密吸取上述葛根素标准溶液1000μL 、500μL 、250μL 、100μL 、25μL 、5μL 于进样瓶中，各用甲醇定容至1mL ，摇匀即得对照品溶液。
2.2供试品溶液制备将待测葛根保健酒酒样用0.2μm 滤膜过滤至样品瓶中，即得供试品溶液。
HPLC 法测定葛根保健酒中葛根素的含量朱晓英，崔帆（山西杏花村汾酒厂股份有限公司技术中心，山西杏花村032205）摘要:目的：利用HPLC 法测定某葛根保健酒中葛根素的含量。
考察葛根素质量浓度的线性范围及该方法的精密度、稳定性、重复性和回收率。
结果表明，该保健酒中葛根素含量的平均含量为0.026mg/mL 。
该方法具有良好的线性关系，平均回收率为94.8%，RSD=1.4%,精密度、稳定性和重现性都符合要求(RSD<2%)。
此法可作为葛根保健酒中葛根素的含量测定。
关键词：葛根素；高效液相色谱法；含量测定中图分类号：TS262.91；TS207.3文献标识码：BHPLC Method for Determining the Content of Puerarin in PuerariaLobata Health WineZHU Xiaoying,CUI Fan(Technical Center of Xinghuacun Fen jiu Distillery Co.,Ltd.,Xinghuacun 032205,Shanxi,China)Abstract:Objective:using HPLC method for determining the content of puerarin in pueraria lobata health wine.Puerarin quality volume concentration of linear range and precision,stability,repeatability and recovery of this method.The results showed that the average content of Puerarin in the wine was 0.026mg/ml.The method has a good linear relationship,the average recovery is 94.8%,RSD =1.4%,and the precision,stability and reproducibility meet the requirements (RSD <2%).This method can be used as the determination the content of puerarin in radix puerariae health wine.Key words:Puerarin;HPLC ；Determination of content收稿日期：2020-03-19作者简介：朱晓英（1983-），女，山西汾阳人，大学本科，主要从事工艺技术标准评审、制修订工作。
LC—MS／MS法同时测定葛根药材中14种异黄酮类成分的含量
LC—MS／MS法同时测定葛根药材中14种异黄酮类成分的含量目的：建立同时测定葛根药材中14 种异黄酮类成分含量的方法。
方法：采用液相色谱串联质谱法同时测定14批葛根药材（野葛：PL-1～PL-7，粉葛：PT-1～PT-7）中14种异黄酮类成分的含量。
色譜柱为Extend C18，流动相为甲醇-水（梯度洗脱），流速为0.8 mL/min，柱温为22 ℃，进样量为5 μL；离子源为电喷雾离子源，检测方式为负离子检测，扫描方式为多级反应监测模式，喷射电压为-4 500 V，离子源温度为600 ℃，雾化气为60 psi ，辅助气为60 psi，碰撞气为7 psi，气帘气为30 psi。
采用SIMCA 13.0软件对上述14批药材进行聚类分析。
结果：14种待测异黄酮类成分在10～1 000 ng/mL（葛根素为10～5 000 ng/mL）范围内具有良好的线性关系（r均大于0.990 0），精密度、稳定性和重复性试验的RSD均小于5%，加样回收率范围为95%～105%，RSD范围为0.8%～4.5%（n=6）。
野葛与粉葛中异黄酮类总含量差异较大，不同产地的葛根药材异黄酮含量差异较大；14种异黄酮类成分中，葛根素含量最高。
聚类分析结果显示，14批葛根药材可聚为4类，PL-2为Ⅰ类，PL-3、PL-4为Ⅱ类，PL-5、PL-6、PL-7为Ⅲ类，其余为Ⅳ类。
结论：该方法操作简单、重复性良好，可用于检测葛根药材中14 种异黄酮成分的含量，适用于该药材的整体质量控制。
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish the method for simultaneous determination of 14 kinds of isoflavones in Pueraria radix. METHODS：LC-MS/MS was adopted to detect 14 kinds of isaflavones in 14 batches of P. radix （P. radix：PL-1 to PL-7，P. thomsonii：PT-1 to PT-7）. The determination was performed on Extend C18 with mobile phase consisted of methanol-water （gradient elution）at the flow rate of 0.8 mL/min. The column temperature was set at 22 ℃. The sample size was 5 μL. Ion source was ESI source. The detection mode was negative ion detection. Scanning mode was MRM with jet voltage of -4 500 V；ion source temperature was set at 600 ℃，and atomization gas was 60 psi. The auxiliary gas was 60 psi，collision gas was 7 psi，air curtain gas was 30 psi. SIMCA 13.0 software wasused for cluster analysis of above batches. RESULTS：The linear range of 14 kinds of isoflavones ranged 10-1 000 ng/mL（puerarin of 10-5 000 ng/mL，r>0.990 0）. RSDs of precision，stability and reproducibility tests were all lower than 5%. The recoveries were 95%-105%（RSD were 0.8%-4.5%，n=6）. The total content of isoflavones were different significantly between P. radix and P. thomsonii. The contents of isoflavones in P. radix from different origins were different significantly. Among 14 kinds of isoflavones，the content of puerarin was the highest. Results of cluster analysis showed that 14 batches of P. radix could be clustered into 4 categories，including PL-2 as Ⅰcategory，PL-3 and PL-4 as Ⅱcategory，PL-5，PL-6 and PL-7 as Ⅲcategory，other as Ⅳcategory. CONCLUSIONS：The method is simple and reproducible. It can be used for content determination of 14 kinds of isoflavones in P. radix and quality control.KEYWORDS Pueraria radix；Pueraria thomsonii；Isoflavones；LC-MS/MS；Content determination 葛根和粉葛分別为豆科植物野葛[Pueraria lobata（Willd.）Ohwi]和甘葛藤（P.thomsonii Benth.）的干燥根，在中医用药史上二者均作为葛根（P. radix）药材使用，具有解肌退热、透发麻疹、生津止渴、升阳止泻的作用[1]。
一种葛根中多种黄酮苷元含量同时测定的方法[发明专利]
![一种葛根中多种黄酮苷元含量同时测定的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/3b759a4c59fafab069dc5022aaea998fcc2240dc.png)
专利名称：一种葛根中多种黄酮苷元含量同时测定的方法专利类型：发明专利
发明人：侯建波,谢文,史颖珠,李杰,陆顺,毛壬熠,汪鹏
申请号：CN202010388778.X
申请日：20200509
公开号：CN111505180B
公开日：
20220621
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及葛根中多种黄酮苷元含量同时测定的方法，尤其涉及一种水解黄酮苷，并经过固相萃取净化，液相色谱‑串联质谱法同时测定葛根中11种黄酮苷元含量的方法。
一种葛根中多种黄酮苷元含量同时测定的方法，该方法包括提取、净化和测定步骤，提取采用盐酸乙醇溶液水解提取法，在提取时在试样中加入T‑丁基‑1,4‑苯酚作为抗氧化剂。
该方法采用在提取时在试样中加入T‑丁基‑1,4‑苯酚作为抗氧化剂，研究发现水解过程中各苷元的损失率低于20%。
进一步，本申请为了解决葛根中黄酮类化合物全面准确测定的技术问题，本申请提供了一种盐酸水解‑固相萃取净化‑液相色
谱‑串联质谱法同时测定葛根中11种黄酮苷元含量的方法，该方法简便快捷，消耗资源小，检测成本低的特点。
申请人：杭州海关技术中心
地址：310016 浙江省杭州市上城区富春路126号
国籍：CN
代理机构：杭州恒翌专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：王从友
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HPLC法比较河南8个产地葛根中5种成分
HPLC法比较河南8个产地葛根中5种成分方晓艳;张蕾;冯素香;郝蕊;李蒙蒙;王哲;李先贺【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2016(038)009【摘要】目的采用HPLC法比较河南8个产地(林州、焦作、嵩县、方城、信阳、禹州、西峡和浙川)葛根Pueraria lobata(Willd.)Ohwi中5种成分的含有量.方法分析采用Phenomenex Luna C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以甲醇-0.1％甲酸为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长250 nm;柱温25℃.结果3'-羟基葛根素、葛根素、3'-甲氧基葛根素、大豆苷、大豆苷元分别在0.029 ～0.86 μg(r=0.999 8)、0.050 ～1.5μg(r=0.999 4)、0.024 ～0.72μg(r=0.999 6)、0.021 ～0.62 μg (r=0.999 9)、0.001 2～0.037 μg (r=0.9999)范围内线性关系良好,平均加样回收率(n=6) 98.1％～100.1％,RSD值1.03％～1.95％.结论各成分含有量均具有一定差异,其中以嵩县和林州产者较高.【总页数】3页(P2073-2075)【作者】方晓艳;张蕾;冯素香;郝蕊;李蒙蒙;王哲;李先贺【作者单位】河南中医药大学,河南郑州450046;河南中医药大学,河南郑州450046;河南中医药大学,河南郑州450046;呼吸疾病诊疗与新药研发河南省高校协同创新中心,河南郑州450046;河南中医药大学,河南郑州450046;河南中医药大学,河南郑州450046;河南中医药大学,河南郑州450046;河南中医药大学,河南郑州450046【正文语种】中文【中图分类】R284.1【相关文献】1.不同产地葛根挥发油成分的比较分析 [J], 李耀华;卢澄生;曾颖虹;陈兵2.HPLC法比较不同产地白花蛇舌草中两种香豆素类成分的含量 [J], 于亮;吕青涛;黄祝刚;左琳;满其倩;容蓉;巩丽丽;蒋海强3.HPLC法比较不同产地白花蛇舌草中两种香豆素类成分的含量 [J], 于亮;吕青涛;黄祝刚;左琳;满其倩;容蓉;巩丽丽;蒋海强;4.基于HPLC法和多元统计分析的不同产地香附挥发油中4种成分含量的比较研究[J], 许娜;牟玉侦;李文兵;傅超美;陈胡兰;王世宇;卢君蓉5.HPLC法测定不同产地葛根中葛根素的含量 [J], 肖学凤;高岚因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
葛根芩连丸UPLC指纹图谱建立及7种成分测定
葛根芩连丸UPLC指纹图谱建立及7种成分测定吴亿晗;王迪;杨晓琴;李维;傅超美;章津铭;邹亮【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2018(040)005【摘要】目的建立葛根芩连丸(葛根、黄芩、黄连、炙甘草)UPLC指纹图谱,并测定葛根素、黄芩素、巴马汀、汉黄芩素、大豆苷、大豆苷元、药根碱的含有量.方法该药物70％甲醇提取液的分析采用Waters ACQUITY UPLC(C)BEH C18色谱柱(2.1 mm×50mm,1.7 μm);甲醇-0.1％冰醋酸为流动相,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;检测波长260 nm;柱温30℃.结果 10批样品指纹图谱中有25个共有峰,相似度大于0.98.7种成分在各自范围内线性关系良好(r＞0.999 0),平均加样回收率98.99％～103.6％,RSD 1.13％～2.03％.结论该方法简便可靠,重复性好,可用于葛根芩连丸的质量控制.【总页数】5页(P1083-1087)【作者】吴亿晗;王迪;杨晓琴;李维;傅超美;章津铭;邹亮【作者单位】成都中医药大学药学院,四川成都611137;成都大学医学院,四川成都610106;成都中医药大学药学院,四川成都611137;成都大学医学院,四川成都610106;成都中医药大学药学院,四川成都611137;成都中医药大学药学院,四川成都611137;成都大学医学院,四川成都610106【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.扭肚藤UPLC指纹图谱建立及2种成分测定 [J], 胥爱丽;毕晓黎;刘布鸣;江洁怡;陈昭;丁平2.妇科再造丸多指标成分测定及UPLC特征图谱建立 [J], 刘利辉; 徐剑; 张永萍3.天葵子UPLC指纹图谱建立及指标性成分测定 [J], 刘晓霞;丁青;陈芳;梁月仪;王利伟;李乐;孙冬梅4.龙骨风HPLC指纹图谱建立及5种成分测定 [J], 卢汝梅;张进燕;王肖;杨新洲;韦建华;李兵5.筋骨伤喷雾剂HPLC指纹图谱建立及8种成分测定 [J], 王彬宇;黄家宇;陈思忆;杜秋莹;鲁婷婷;张会;李莉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
UPLC法测定葛丹颗粒中葛根素的含量
UPLC法测定葛丹颗粒中葛根素的含量许元宝【摘要】目的建立葛丹颗粒中葛根素含量的测定方法.方法采用超高效液相色谱法(UPLC)对方中君药葛根的主要活性成分葛根素进行含量测定,色谱条件为ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7 μm)色谱柱,流动相:乙腈-0.1%磷酸(15:85);流速:0.2 ml·min-1;柱温:30℃;检测波长:250 nm.结果葛根素在0.021 9~0.390 0 g?L-1范围内呈良好的线性关系,r=0.999 9,平均回收率为98.84%,RSD＝0.71%.结论该法简单、快捷,适用于葛丹颗粒中葛根素的含量测定.%Objective To establish a method for determination of puerarin in gedan granule. Methods The content of puerarin was determined by UPLC. The chromatographic conditions were as follows: ACQUITY UPLC BEHC18( 2. 1 mm × 50 mm ,1.7 μm ) used as analytical column. The mobile phase consisted of a mixture of V( acetonitrile ): V( ortho-phosphoric acid ) = 15:85 and the flow rate was 0. 2 mL · min-1 ,with column temperature at 30℃ ,and UV detection at 250 nm. Res ults The puerarin was linear in the range of 0. 021 9 ~ 0. 390 0 g · L-1 ,r = 0. 999 9. The average recovery rate was 98. 84% ( RSD =0. 71% ). Conclusion This method can be used to control the quality of puerarin in gedan granule better.【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2013(017)002【总页数】2页(P210-211)【关键词】葛丹颗粒;UPLC;葛根素;含量测定【作者】许元宝【作者单位】安徽医科大学第一附属医院药剂科,国家中医药管理局中药化学三级实验室,安徽,合肥,230022【正文语种】中文葛丹颗粒由葛根、丹参、黄芪等6味药材组成，具有益气活血，化浊通络之功效，在临床应用多年，用于治疗2型糖尿病、代谢综合征及其引起的慢性血管并发症等，疗效确切。
葛根中黄酮类化学成分的UHPLC-Q-TOFMS分析
葛根中黄酮类化学成分的UHPLC-Q-TOFMS分析周永刚;吴思;毛飞;吴婷婷;吴海棠;柴逸峰【摘要】目的通过超高效液相-单重四级杆-飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOFMS)联用技术,对中药葛根的主要化学成分进行有效的鉴定.方法色谱分离采用ACQUITY UPLC HSS T3(100 mm ×2.1 mm,1.8 μm),流动相组成分别为0.1％甲酸水溶液和乙腈,梯度洗脱,流速为0.4 ml/min；质谱定性采用飞行时间质谱,正离子模式扫描.结果在优化的液质联用条件下,通过单重四级杆-飞行时间质谱鉴定出葛根中18个成分.结论通过UHPLC-Q-TOFMS联用技术,为鉴定葛根中的化学成分建立起了一种快速、高效的分析方法.%Objective To analyze chemical constituents of Pueraria lobata by ultrahigh pressure liquid chromatography-qua-drupole-time of flight mass spectrometry (UHPLC-Q-TOFMS). Methods A ACQUITY UPLC HSS T3 (100 mm × 2.1 mm, 1.8 μm) column was used to separate. The mobile phase consisted of water containing 0. 1 % methane acid and acetonitrile was used as gradient elute. The flow rate was 0. 4 ml/min. TOFMS was applied for qualitative analysis under positive ion mode. Results Under optimized condition, 19 major constituents in Gardenia jasminoides Ellis were identified by quadrupole-time of flight mass spectrometry and structure-relevant fragment ions. Conclusion A simple and reliable method using UHPLC-Q-TOFMS was established to identify the chemical constituents of Pueraria lobata.【期刊名称】《药学实践杂志》【年(卷),期】2013(031)002【总页数】4页(P116-119)【关键词】葛根;超高效液相-单重四级杆-飞行时间质谱;化学成分【作者】周永刚;吴思;毛飞;吴婷婷;吴海棠;柴逸峰【作者单位】第二军医大学药学院,上海200433【正文语种】中文【中图分类】R927葛根始载于《神农本草经》，为常用中药之一。
HPLC法测定葛根配方颗粒中葛根素的含量
HPLC法测定葛根配方颗粒中葛根素的含量
阮毅铭
【期刊名称】《黑龙江医药》
【年(卷),期】2008(021)005
【摘要】目的:建立葛根配方颗粒含量测定的质量标准.方法:高效液相色谱法测定含量.色谱条件为:岛津VP-ODSC18(150mm×4.6mm)色谱柱.甲醇:水:醋酸(27:73:0.365).流速:1ml/min.柱温:30℃.检测波长:250nm.结果:此方法能有效检测出葛根配方颗粒中葛根素的含量.结论:本法简便、准确、快速,适用于葛根配方颗粒中葛根素含量测定的质量控制.
【总页数】3页(P19-21)
【作者】阮毅铭
【作者单位】广东中山市中医院药剂科,528400
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定葛根配方颗粒中葛根素的含量 [J], 李树国
2.HPLC法测定升麻葛根颗粒中葛根素的含量 [J], 李建华;胡倩;申庆亮
3.HPLC-DAD同时测定鸢都感冒颗粒中绿原酸、葛根素、3'-甲氧基葛根素和牛蒡苷的含量 [J], 张娟; 杜武; 刘宏明
4.HPLC-DAD同时测定鸢都感冒颗粒中绿原酸、葛根素、3′-甲氧基葛根素和牛蒡苷的含量 [J], 张娟; 杜武; 刘宏明
5.HPLC法测定葛根素葡萄糖注射液中葛根素及3′-甲氧基葛根素含量 [J], 赵晓莉;崔小兵;狄留庆
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葛根-石膏药对不同配伍比例中有效成分含量变化研究
葛根-石膏药对不同配伍比例中有效成分含量变化研究吴娇;李进;陈涛;孟萌;王进博【期刊名称】《天津中医药》【年(卷),期】2013(0)9【摘要】[目的]通过建立超高效液相色谱(UPLC)法测定葛根-石膏药对中葛根素和大豆苷的含量,并通过此法探讨有效成分随葛根石膏配比变化的溶出规律。
[方法]不同比例葛根石膏配伍,水煎提取,采用超高效液相色谱(UPLC)法,色谱柱:Acqioty UPLC C18,2.1 mm×100 mm,1.7μm,检测器:二极管阵列检测器,工作站:Empower 3,流动相:乙腈-甲醇-1.5‰磷酸水溶液梯度洗脱,检测波长:254 nm。
[结果]葛根配伍石膏,葛根素和大豆苷煎出量均比葛根单煎高。
以葛根-石膏(1∶2)时葛根素、大豆苷的煎出率最高。
[结论]说明葛根配伍石膏有利于葛根素和大豆苷的煎出,从而增加有效成分的溶出。
【总页数】4页(P557-560)【关键词】葛根-石膏;配伍;葛根素;大豆苷;超高效液相色谱【作者】吴娇;李进;陈涛;孟萌;王进博【作者单位】天津中医药大学;天津中医药大学第一附属医院【正文语种】中文【中图分类】R284【相关文献】1.HPLC法同时测定不同配伍比例黄连-吴茱萸药对中4种有效成分的含量 [J], 周素芹;李洪兵2.黄柏-苍术药对不同比例配伍中生物碱含量的变化 [J], 傅春升;王琰;李玥;张学顺3.不同比例配伍对交泰丸有效成分含量变化的影响 [J], 全世建;刘妮;王红丹4.黄连-姜的不同比例配伍使用对有效成分含量的影响 [J], 黄文娟;刘晶;陈良;轩辕欢5.不同配伍比例对麻黄-杏仁药对有效成分含量的影响 [J], 谢颖;汤庆发;徐文杰;周慧芳;罗佳波因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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阳止泻等功 效，临 床 用 治 表 证 发 热、项 背 僵 痛、麻 疹不透、热病口渴、阴虚消渴、脾虚泄泻等［2］。葛 根药材广泛用于糖尿病（ 消渴病） 及其并发症治
基金项目： 贵州省优秀青年科技人才培养对象专项资金，项目编号： 黔科合人字（ 2013） 46 号 作者简介： 吴红梅，女，副教授，博士，主要从事中药及民族药新制剂及质量控制研究工作。
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Key words： Pueraria lobata； β-sitosterol； UPLC； Determination of content
葛根为豆科植物野葛 Pueraria lobata（ Wild1 ） Ohwi 的干燥根，习称野葛［1］。葛根始载于《神农 本草经》，具 有 解 肌 透 热、透 发 麻 疹、生 津 止 渴、升
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合物，此实验考察了甲醇和无水乙醇的提取效率， 结果发现甲醇提取的含量大于无水乙醇。因此选 用甲醇作为提取溶剂。提取方法考察了超声提取 和回流提取，结 果 发 现 回 流 提 取 的 含 量 大 于 超 声 提取，故选用回流进行提取。
葛根药材 临 床 应 用 广 泛，但 在 质 量 控 制 方 面 主要以葛根 素 和 总 黄 酮 为 主，不 能 为 葛 根 药 材 的 质量提供更全面的控制。本实验建立葛根药材的 有效成分 β － 谷甾醇的含量测定方法，具有灵敏 度高，重现性好，分离度高，分析时间短等优点，可 以为葛根药材质量全面控制提供参考。
成分 β － 谷甾醇
称样量 /g
1. 0002 1. 0010 1. 0001 1. 0012 1. 0017 1. 0038 1. 0026 1. 0042 1. 0047
表 1 β － 谷甾醇的加样回收率试验
样品含量 μg / g
316. 69 316. 95 316. 11 317. 01 317. 17 317. 83 317. 45 317. 96 318. 12
摘 要： 目的： 建立葛根中 β － 谷甾醇的测定方法。方法： 采用超高效液相色谱法，色谱柱为 Agilent ZOＲBAX ＲＲHD Eclipse Plus C18（ 2. 1 × 100mm，1. 8μm） ，流动相为甲醇 － 0. 1% 乙酸水（ 100： 4 单泵） ，流 速为 0. 15mL / min，检测波长为 206nm，柱温为 50℃ 。结果： β － 谷甾醇浓度在 0. 0186 ～ 0. 186μg 范围内线 性关系良好，回归方程为 y = 1260. 5x + 1. 9164 （ r = 0. 9996） ，平均加样回收率为 96. 68% ，ＲSD（ % ） 值为 2. 63。结论： 该法专属性强、快速、简便、准确，可以用于葛根中 β － 谷甾醇的含量测定，为葛根的质量控 制提供依据。
WANG yuan-min，WU hong-mei，WANG Xiang-pei，XU Feng （ Guiyang College of Traditional Chinese Medicine，Guiyang 550002，Guizhou China）
Abstract： Objective： To establish a method for determining β-sitosterol in Pueraria lobata. Method： The method of UPLC-DAD was taken. The separation was performed on Agilent ZOＲBAX ＲＲHD Eclipse Plus C18 column （ 2. 1 × 100 mm，1. 8 μm） with methanol and （ 0. 1% ） acetic acid solution （ 100： 4 ） and the rate of flow was 0. 15mL · min-1. The Detection wavelength was 206nm and the column temperature was 50℃ . Ｒesult： β-sitosterol with the concentration of 0. 0186 to 0. 186μg has a good linear relationship. The linear equation is y = 1260. 5x + 1. 9164（ r = 0. 9996） . The average sample recovery rate was 96. 67% ，and ＲSD（ % ） was 2. 63. Conclusion： This method is specific，quick，simple and accurate. It can be applied to determine βsitosterol in Pueraria lobata，which provides the basis for quality control of the root of kudzu vine.
·24·
第 37 卷 第 4 期 2015 年 7 月
贵阳中医学院学报 Journal of Guiyang college of TCM
No. 4 Vol. 37 July 2015
UPLC 法测定葛根中 β － 谷甾醇的含量
王远敏，吴红梅，王祥培，徐 峰
（ 贵阳中医学院，贵州贵阳 550002）
精密量取 5mL 储备液于 10mL 的容量瓶中， 加甲醇定容，制备成 0. 186mg / mL 的对照品溶液。 2. 4 系统适应性试验
在上述的 色 谱 条 件 下，分 别 吸 取 对 照 品 溶 液 和供试品溶液注入液相色谱仪，色谱图见图 1，图 2，β － 谷甾醇与相邻峰的分离度均大于 1. 5，理论 塔板数按 β － 谷甾醇计算不低于 8000。 2. 5 线性关系考察
测定，记录色谱峰，以 β － 谷甾醇的对照品作为对 照，并计算 β － 谷甾醇的含量，结果见表 2。
第4 期
王远敏，吴红梅，王祥培，等． UPLC 法测定葛根中 β － 谷甾醇的含量
·27·
表 2 不同产地葛根中 β － 谷甾醇的含量 （ n = 3）
来源
mg. g － 1
ＲSD / %
贵阳芝林大药房
第4 期
王远敏，吴红梅，王祥培，等． UPLC 法测定葛根中 β － 谷甾醇的含量
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疗［3］，口服葛根煎剂还具有降低胆固醇、升高甘油 三酯现象［4］。葛 根 药 材 主 要 含 有 葛 根 素、葛 根 总 黄酮、大豆苷元、β － 谷甾醇等多种成分［5 － 7］，其中 葛根素具有降血糖、抗氧化的作用［8］，而葛根中的 β － 谷甾醇除抗炎、止咳、抗溃疡、抗癌、抗氧化等 药理作用外，还 具 有 明 显 的 降 低 胆 固 醇 和 降 血 糖 的作用［9 － 11］，说明 β － 谷甾醇也是葛根药材的有 效成分之一。目前葛根药材的质量控制主要集中 于葛根素及 总 黄 酮 方 面，不 利 于 更 全 面 的 控 制 葛 根药材质量。
采用 Agilent ZOＲBAX ＲＲHD Eclipse Plus C18
（ 2. 1 × 100mm，1. 8μm ） 色 谱 柱，流 动 相 甲 醇 － 0. 1% 乙酸水（ 100∶ 4，单泵） ，流速 0. 15mL / min，检 测波 长 为 206nm，柱 温 50℃ ，对 照 品 进 样 量 为 1μL，样品进样量为 2μL。 2. 2 供试品溶液的制备
回收率 /%
95. 00 97. 45 91. 57 96. 04 98. 42 96. 94 100. 00 99. 40 95. 27
平均回 . 10 样品测定 取 11 批 购 于 不 同 地 方 不 同 药 房 的 葛 根，按
2. 2 项下方法制备供试品溶液，在上述色谱条件下
图 1 对照品色谱图
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贵阳中医学院学报
第 37 卷
图 2 葛根色谱图
2. 6 精密度试验 精密吸取对照品溶液 1μL，重复进样 6 次，测
得 β － 谷甾醇的峰面积的 ＲSD 值为 1. 60% ，表明 仪器的精密度好。 2. 7 稳定性试验
取供试品溶液，分别于 0，2，4，6，8，10，12h，进 样测定，记录峰面积。计算 β － 谷甾醇的峰面积 的 ＲSD 值 为 0. 27% ，表 明 供 试 品 溶 液 在 12h 内 稳定。 2. 8 重复性试验
加入量 μg
186. 00 186. 00 186. 00 372. 00 372. 00 372. 00 744. 00 744. 00 744. 00
测得量 μg
493. 39 498. 20 487. 32 673. 34 683. 30 677. 34 1063. 81 1057. 46 1026. 96
将葛根药材粉碎，过 40 目筛，取粉末约 1. 0g， 精密称定，加 50mL 甲醇，水浴回流 1. 5h，连续回 流三 次，合 并 滤 液，挥 干，将 残 渣 加 甲 醇 定 容 于 10mL 的容量瓶，摇匀，用 0. 22μm 的微孔滤膜滤 过，即得供试品溶液。 2. 3 对照品溶液的制备
精密称取 β － 谷甾醇对照品适量，置 25mL 的 容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，制成 0. 372mg / mL 的对照品储备液。