紫外分光光度法测定Vc含量
紫外分光光度法测定常见水果维生素C的含量
紫外分光光度法测定常见水果维生素C的含量紫外分光光度法测定常见水果维生素C的含量1 序言1.1 研究的目的和意义维生素是必须得从食物中获取并且在物质代谢过程中起到了极其重要的作用的一种物质[1]。
这类物质在生物体内不能合成或者合成量特别少，不足以维持生物体的正常的生理功能，虽然生物体对维生素的需要量很少，但所需量必须经常从食物中获得，所以我们研究维生素具有重要的意义[2]。
维生素C是维生素的一种，维生素C在医学上被称作抗坏血酸，具有防治坏血病的功效，它是显示抗坏血酸生物活性的一类有机化合物的总称[3]。
维生素C广泛的存在于我们常见的水果和蔬菜中，所以我们能够准确地测定出水果中地维生素C的含量，对我们的日常饮食和健康的生活具有重要的指导意义。
1.2维生素C含量的研究史中国是人口众多的国家，人口密度相对较大，病毒发病率较高，我国在对抗病毒的战争中起到一个关键作用。
SARS病毒首先出现在我们中国，死于SARS 病毒的90%是我们中国人。
国内对于维生素C的生产水平已经处于领先地位,可以彻底解决病毒的问题，只是生产的维生素C大部分都外销，我们中国人服用维生素C的平均剂量，远远低于一些欧美国家和日本。
目前，围绕着维生素C 含量的测定产生了一系列的研究课题和任务，因为它对人们日常饮食具有重要指导意义，成为了现今国内外研究的热点，现在主要有2,4-二硝基苯肼比色法、碘量法、高效液相色谱法、紫外分光光度法等来测定维生素C的含量。
1.2.1碘量法武文等[4]利用I?的氧化性,用淀粉作指示剂,采用I?作标准溶液进行直接滴定,这叫做直接碘量法。
直接碘量法的滴定原理:维生素C分子中的二烯醇基可被I?氧化成二酮基,当维生素C分子中的二烯醇基被I?完全氧化后,过量的I?与淀粉指示剂发生显色作用,使溶液变蓝,所以当滴定到溶液中有蓝色出现时，即为滴定终点。
直接碘量法测定水果和蔬菜中维生素C的含量时，要求所测的果蔬溶液为无色和浅色的是样溶液或者提取液,该方法测维生素C不需要特殊的测定仪器,操作非常简便、准确。
紫外分光光度计法测定果蔬中维生素c的含量
紫外分光光度计法测定果蔬中维生素c的含量紫外分光光度计法是一种常用的测定果蔬中维生素C含量的方法。
维生素C具有强的紫外吸收性质，在265nm处有最大吸收峰。
通过测定样品溶液与标准溶液在相同条件下的吸光度，可以比较它们的维生素C含量。
以下是该方法的详细步骤：一、目的本实验的目的是通过紫外分光光度计法测定果蔬中维生素C的含量，了解其含量变化情况，为科学饮食提供参考。
二、原理维生素C具有强的紫外吸收性质，在265nm处有最大吸收峰。
在实验条件下，一定浓度的维生素C溶液与其吸光度呈线性关系。
通过比较样品溶液与标准溶液在相同条件下的吸光度，可以求出样品中维生素C的含量。
三、实验步骤1.标准曲线的制作（1）配制不同浓度的维生素C标准溶液。
分别称取0.05g、0.1g、0.2g、0.3g、0.4g的维生素C，用蒸馏水定容至100mL，得到浓度分别为5mg/mL、10mg/mL、20mg/mL、30mg/mL、40mg/mL的溶液。
（2）用1cm石英比色皿分别在紫外分光光度计上测定各标准溶液在265nm处的吸光度。
（3）以维生素C浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
2.样品处理（1）将果蔬样品洗净，晾干表面水分。
（2）将样品切成小块，放入榨汁机中榨汁，收集榨出的汁液。
（3）用纱布过滤，去除汁液中的杂质和果肉颗粒。
（4）将滤液倒入50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。
3.测定样品吸光度（1）用移液管准确移取5mL样品溶液于1cm石英比色皿中。
（2）在紫外分光光度计上测定样品溶液在265nm处的吸光度。
4.计算样品中维生素C的含量（1）从标准曲线上查得相应的维生素C浓度（mg/mL）。
（2）计算样品中维生素C的含量（mg/100g），公式如下：维生素C含量 = 查得浓度× 溶液体积× 稀释倍数 / 样品质量其中，溶液体积为50mL，稀释倍数为100（即5mL样品溶液稀释成50mL），样品质量为榨出的果蔬质量。
实验93 紫外分光光度法测定水果(或蔬菜)中的维生素C含量
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蔬 菜 ） 中 的 维 生 素 含 量
紫 外 分 光 光 度 法 测 定 水 果 （ 或
C
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（二）样品的测定 1．样品的提取：将果蔬样品洗净、擦干、切碎、混匀。 称取5.00 g于研体中，加入2～5 mL 1% HCl，匀浆，转 移到25 mL容量瓶中，稀释至刻度。若提取液澄清透明 ，则可直接取样测定，若有浑浊现象，可通过离心（ 10000 g, 10 min）来消除。
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93.5 问题讨论
（１）除了本实验中的方法外，抗坏血酸还有哪些测定方法?
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4 ．由待测样品与待测碱处理样品的消光值之差和 标准曲线，即可计算出样品中维生素C的含量。 5 ．也可直接以待测碱处理液为空白，测出待测液 的消光值，通过查标准曲线，计算出样品的维生素 C 的 含量。
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紫外分光光度法测定Vc含量
紫外分光光度法测定Vc含量
1. 实验原理
维C在紫外光区（200-400nm）显示特征的吸收谱带，最大光吸收（λmax）为245nm。
因此可以用标准曲线法在245nm测样品吸光度，测得维C含量。
2. 实验试剂
(I)1％的HAc溶液
(2)100ug/ml的Vc标准贮备液：准确称取0.010g的Vc，用1％的HAc定容至100mL。
(3)Vc标准使用液：吸取贮备液5．00mL，用1％HAc稀释至250mL(现用现配)。
(4)比色皿清洗剂
3. 实验步骤
3.1 Vc的提取
称取剪碎混匀的新鲜样品0.5 ～1.0 g 加酸研磨，多次过滤至50ml容量瓶中定容。
吸取10ml待测液溶液于试管。
3.2 标准曲线的绘制
分别吸取0.00、1.00、2.00、4.00、8.00、10.00ml维生素C标准溶液于10ml 比色管中用酸定容，用水稀释成一系列浓度分别为0.0、10、20、40、80、100μg/mL 维生素C标准溶液，分别测出其吸光度。
然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。
该曲线是经过原点的一条直线，可求出该曲线的斜率。
3.3 Vc的测定
波长245nm处测定。
紫外分光光度法测定VC银翘片中维生素C含量
紫外分光光度法测定VC银翘片中维生素C含量一、本文概述本文将详细阐述使用紫外分光光度法测定VC银翘片中维生素C含量的实验方法和过程。
紫外分光光度法是一种常用的化学分析方法，通过测量物质在特定波长下对紫外光的吸收程度，可以定量测定物质的含量。
该方法在化学、生物、医学等领域有着广泛的应用，尤其在药物分析领域中，对于确定药品中有效成分的含量具有重要的实用价值。
VC银翘片是一种常见的非处方药品，主要用于治疗感冒和其他上呼吸道感染。
其主要活性成分为维生素C，具有抗氧化、增强免疫力等多种药理作用。
因此，准确测定VC银翘片中维生素C的含量对于保证药品质量和疗效至关重要。
本文首先介绍了紫外分光光度法的基本原理和实验步骤，然后详细描述了实验过程，包括样品制备、波长选择、标准曲线绘制以及结果计算等。
通过实验结果的分析和讨论，验证了该方法的准确性和可靠性。
本文旨在为药品生产和质量控制提供一种有效的维生素C含量测定方法，同时也为相关领域的研究提供参考和借鉴。
二、紫外分光光度法原理紫外分光光度法是一种基于物质对紫外光的吸收特性来测定物质含量的分析方法。
在紫外区，许多有机化合物和无机离子具有吸收紫外光的特性，其吸收程度与物质的浓度成正比。
因此，通过测量待测物质在特定波长下的吸光度，可以推算出该物质的浓度。
在测定VC银翘片中维生素C含量时，紫外分光光度法利用维生素C在紫外光区具有特定吸收波长的特性。
维生素C分子中的共轭双键结构使其对紫外光具有吸收能力，且吸收峰通常出现在约245nm处。
通过制备一系列已知浓度的维生素C标准溶液，并测量其在245nm波长下的吸光度，可以建立吸光度与维生素C浓度之间的标准曲线。
然后，对待测的VC银翘片提取液进行同样波长的吸光度测量，根据标准曲线即可计算出样品中维生素C的含量。
紫外分光光度法具有操作简便、灵敏度高、重现性好等优点，因此在药物分析、生物化学等领域得到广泛应用。
然而，该方法也受到一些限制，如对于颜色较深或浑浊的样品，可能需要进行前处理以消除干扰因素；对于某些在紫外区无吸收或吸收较弱的物质，该方法可能不适用。
紫外光度法测定维生素C实验工作报告
紫外分光光度法测定维生素C片维生素C的含量一、实验目的1.学习利用紫外吸收光谱测定物质含量的原理和方法；2.熟练紫外-可见分光光度计的操作。
二、实验原理维生素C（VC）是一种酸性己糖衍生物，具有烯醇式己糖内酯立体结构，分D和L两种立体构型，但只有L型有生理功效。
维生素C具有较强的还原性,在一定条件下氧化型和还原型可以互变,两者均具有生物活性(结构式见图1),其C2和C3位上两个相邻的烯醇式羟基极易解离而释放出H+,故维生素C虽然不含自由羧基，仍具有有机酸的性质。
维生素C呈无色无臭的片状结晶体,易溶于水,不溶于脂。
在酸性环境中稳定,遇空气中氧、热、光、碱性物质,特别是有氧化酶及痕量铜、铁等金属离子存在时可促进其破坏速度。
具有π电子的共轭双键化合物、芳香烃化合物等，在紫外光谱区都有强烈吸收，其摩尔吸收系数k可达104-106数量级。
利用紫外吸收光谱进行定量分析，要借助朗伯-比尔定律。
根据维生素C在稀硫酸溶液（维生素C水溶液在pH 5～6之间稳定）中，在245 nm 波长处有最大吸收的特性，建立了紫外分光光度法测定维生素C片含量的方法。
三、实验仪器及试剂实验仪器：容量瓶（100 ml、1000 ml）、移液管（0.5 ml、5 ml）、烧杯、紫外分光光度计实验用品：98%浓硫酸（分析纯，1.84 g/ml）、维生素C对照品系以原料药经105 ℃干燥至恒重（含量为99.7 %）、维生素C片（2片）、去离子水四、实验步骤1. 0.005 mol·L-1硫酸溶液的配制用0.5 ml移液管移取0.27 ml 98%浓硫酸放入事先已盛有蒸馏水的烧杯中，搅拌，冷却至室温后移入1000 ml容量瓶，稀释至刻度，待用。
2. 0.5 g·L-1对照品溶液的配制精密称取105℃干燥至恒重的维生素C对照品50 mg置100 ml量瓶中，加0.005 mol·L-1硫酸溶液制成0.5 g·L-1对照品溶液。
实验一-紫外分光光度法测定维生素C片中的VC含量
紫外分光光度法测定维生素一、实验目的1、了解紫外分光光度计的主要结构及工作原理。
C片中的VC含量2、掌握紫外分光光度计的操作方法及紫外定性定量分析方法3．掌握紫外分光光度法测定水中维生素C含量的原理与分析条件的选择。
二、实验原理维生素C是人体重要的维生素之一，它影响胶元蛋白的形成，参与人体多种氧化-还原反应,并且有解毒作用。
人体不能自身制造Vc，所以人体必须不断地从食物中摄入Vc，通常还需储藏能维持一个月左右的Vc。
缺乏时会产生坏血病，故又称抗坏血酸。
维生素C属水溶性维生素，分子式C6H8O6。
分子结构中具有二烯醇结构，其结构如下：它易溶于水，微溶于乙醇，不溶于氯仿或乙醚。
分子中的二烯醇基具极强的还原性，性质活泼，易被氧化为二酮基而成为脱氢抗坏血酸。
维生素C分子结构中有共轭双键，固在紫外光区有较强的吸收。
根据维生素C在稀盐酸溶液中，Vc吸收曲线比较稳定，在最大吸收波长处，其吸收值A的大小与维生素C的浓度c的大小成正比，符合郎伯—比尔定律：A=εbc其中A为吸收度；c为试样中维生素C的浓度，mol·L-1；b为吸收池厚度，cm；ε为摩尔吸收系数，L·mol-1·cm-1。
若在最大吸收波长下，首先绘制出维生素C在最大吸收波长下的标准曲线，然后在相同条件下测定出吸光度A，由测得的吸光度A在标准曲线上查得浓度,换算为药品中含量(mg/片)。
三、实验仪器与试剂1．仪器TU1810型紫外分光光度计。
电子天平1台，研钵1个，50mL容量瓶7只和500mL容量瓶1只,10mL移液管2支，100mL、1000mL烧杯2只。
2．试剂维生素C标准品(抗坏血酸)，市售维生素C含片（100mg/片），冰醋酸，蒸馏水。
四、实验步骤1.配制维生素C标准贮备液500mL(浓度约为1.5×10-4mol/L):称取约0.0132g维生素C标准品于100mL的烧杯中，用超声波助溶后定容于500mL容量瓶中，摇匀，配成贮备液。
实验三 紫外分光光度法测定维生素C含量
实验三 紫外分光光度法测定维生素C 含量一、实验目的掌握UVmini-1240型紫外分光光度计的使用方法,，掌握紫外分光光度法定 量的原理，紫外吸收光谱曲线的绘制和测量波长的选择以及标准曲线的绘制。
二、实验原理紫外分光光度法进行定量分析是有快速，灵敏度高及分析混合物中各组份有时不需要事前分离，不需要显色剂，因而不受显色剂温度及显色时间等因素的影响，操作简便等优点。
目前广泛用于微量或痕量分析中。
但有一个局限性，就是待测试样必须在紫外区有吸收并且在测试浓度范围服从比耳定律才行。
利用紫外光度法测定试样中单组份含量时，通常先测定物质的吸收光谱，然后选择最大吸收峰的波长进行测定。
其原理与一般比色分析相同。
维生素C 对于人体骨骼及牙齿的构成极为重要,能阻止及治疗怀血症，又能刺激食欲，促进生长，增强对传染病的抵抗能力，是人体必需的营养之一。
维生素C 又名丙种维生素及抗坏血酸，其结构式为：易溶于水，不溶于有机溶剂。
桔类、番茄、马铃薯、绿叶蔬菜等含有丰富的维生素C 。
三、仪器与试剂1． 维生素C 贮备液100mg/L （临用前进行配制）准确称取一定量的抗坏血酸，溶于无水乙醇中，并用无水乙醇定容于1000mL 。
2． 25 ml 容量瓶8只，100ml 刻度移液管2支3． 5 ml 刻度移液管2支，1ml 刻度移液管2支4． 50ml 烧杯1只，玻棒、洗球、吸球5． UVmini-1240型分光光度计、石英比色皿2只 O O OH H CH 2OH四、配制标准溶液配制5mg/L、10mg/L、15mg/L、20mg/L和25mg/L维生素C标准溶液。
取25ml容量瓶5只，分别吸取一定量的100mg/L维生素C标准溶液贮备液，用蒸馏水稀释至刻度(计算出各溶液的浓度)。
五、数据记录及处理1)绘制维生素C吸收曲线取标准系列溶液浓度为15m g/L的样品，以无水乙醇为参比，在320～220nm 波长范围扫描，得维生素C吸收曲线，并确定λmax。
紫外分光光度法测定维生素C片维生素C的含量
紫外分光光度法测定维生素C片维生素C的含量一、实验目的1.学习利用紫外吸收光谱测定物质含量的原理和方法；2.熟练紫外-可见分光光度计的操作。
二、实验原理维生素C（VC）是一种酸性己糖衍生物，具有烯醇式己糖内酯立体结构，分D和L两种立体构型，但只有L型有生理功效。
维生素C具有较强的还原性,在一定条件下氧化型和还原型可以互变,两者均具有生物活性(结构式见图1),其C2和C3位上两个相邻的烯醇式羟基极易解离而释放出H+,故维生素C虽然不含自由羧基，仍具有有机酸的性质。
维生素C呈无色无臭的片状结晶体,易溶于水,不溶于脂。
在酸性环境中稳定,遇空气中氧、热、光、碱性物质,特别是有氧化酶及痕量铜、铁等金属离子存在时可促进其破坏速度。
具有π电子的共轭双键化合物、芳香烃化合物等，在紫外光谱区都有强烈吸收，其摩尔吸收系数k可达104-106数量级。
利用紫外吸收光谱进行定量分析，要借助朗伯-比尔定律。
根据维生素C在稀硫酸溶液（维生素C水溶液在pH 5～6之间稳定）中，在245 nm 波长处有最大吸收的特性，建立了紫外分光光度法测定维生素C片含量的方法。
三、实验仪器及试剂实验仪器：容量瓶（100 ml、1000 ml）、移液管（0.5 ml、5 ml）、烧杯、紫外分光光度计实验用品：98%浓硫酸（分析纯，1.84 g/ml）、维生素C对照品系以原料药经105 ℃干燥至恒重（含量为99.7 %）、维生素C片（2片）、去离子水四、实验步骤1. 0.005 mol·L-1硫酸溶液的配制用0.5 ml移液管移取0.27 ml 98%浓硫酸放入事先已盛有蒸馏水的烧杯中，搅拌，冷却至室温后移入1000 ml容量瓶，稀释至刻度，待用。
2. 0.5 g·L-1对照品溶液的配制精密称取105℃干燥至恒重的维生素C对照品50 mg置100 ml量瓶中，加0.005 mol·L-1硫酸溶液制成0.5 g·L-1对照品溶液。
紫外分光光度法测定维生素c的含量
紫外分光光度法测定维生素c的含量紫外分光光度法是一种常用的定量分析方法，可以用于测定维生素C的含量。
维生素C是一种具有还原性的物质，具有吸收紫外光的特性。
在一定波长下，其吸光度与浓度呈线性关系，因此可以利用紫外分光光度法测定维生素C的含量。
以下是测定维生素C含量的具体步骤：一、实验准备1.实验仪器：紫外分光光度计、100mL容量瓶、50mL移液管、30mL比色皿。
2.实验试剂：维生素C标准品、待测样品溶液、超纯水。
3.实验环境：室温、避光环境。
二、实验步骤1.制作标准曲线：取6个100mL容量瓶，分别加入0mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、4.0mL和8.0mL的维生素C标准品，用超纯水定容至100mL。
在紫外分光光度计上分别测量这6个容量瓶中溶液的吸光度，绘制吸光度与浓度之间的关系曲线，得到标准曲线。
2.测定待测样品：取30mL比色皿，加入待测样品溶液，用超纯水定容至30mL。
在紫外分光光度计上测量该溶液的吸光度。
3.数据处理：将待测样品溶液的吸光度代入标准曲线中，得出待测样品中维生素C的含量。
三、实验结果与分析1.结果记录：将待测样品溶液的吸光度代入标准曲线中，得到待测样品中维生素C的含量。
2.结果分析：通过比较待测样品中维生素C的含量与标准品中维生素C的含量，可以得出待测样品的纯度或浓度是否符合要求。
如果待测样品中维生素C的含量高于或低于标准品中维生素C的含量，则说明待测样品的纯度或浓度存在问题。
四、实验结论通过本次实验，我们成功地利用紫外分光光度法测定了维生素C的含量。
实验结果表明，待测样品中维生素C的含量符合要求，证明了紫外分光光度法的可行性和准确性。
该方法具有操作简便、快速、准确等优点，可以广泛应用于维生素C含量的测定。
需要注意的是，实验过程中要保持避光环境，避免阳光直接照射导致维生素C分解。
同时，实验操作过程中要注意卫生，避免样品污染导致测定结果不准确。
实验一-紫外分光光度法测定维生素c片中的vc含量
实验一-紫外分光光度法测定维生素c片中的vc含量一. 实验目的1. 学习维生素C的理化性质和紫外分光光度法测定原理；2. 掌握维生素C片中VC含量的测定方法，加深对常用分析仪器的理解和操作技能。
二. 实验原理维生素C，化学名为抗坏血酸，是一种弱酸性的有机物，化学式为C6H8O6，分子量为176.12g/mol。
维生素C在常温下为白色或淡黄色晶体或粉末，极易溶于水，难溶于乙醇、氯仿和乙醚。
维生素C具有氧化还原性，容易被氧化。
加热、酸、光线等条件都可以使其分解失效。
2. 紫外分光光度法原理紫外分光光度法是一种用于测定化学物质浓度和用于确定化学分子的结构的常用分析方法之一。
本实验以维生素C的最大吸收波长为265nm进行测定。
根据比尔-朗伯定律，紫外分光光度法可以根据化合物在特定波长下吸收的光的数量来计算化合物的浓度。
根据计算所需的吸光度和吸收系数值，可以使用比尔-朗伯定律推导出样品中所含物质的浓度。
3. 维生素C片中VC含量的测定方法本实验采用紫外分光光度法测定维生素C片中VC含量。
样品的制备包括提取和过滤，检测前需要检查仪器的性能，然后以样品的最大吸收波长（λmax）为265nm进行测定。
使用对照溶液、标准曲线和工作曲线进行测定，最后计算出样品中VC的含量。
操作步骤如下：（1）样品制备取约1.0g维生素C片粉末，将其加入50mL锥形瓶中，并据以加入3-5mL1%酒石酸溶液和40mL去离子水，摇晃均匀备用。
（2）对照溶液的制备（3）标准曲线的制备取维生素C标准品0.020g，溶于水中，定容至100mL，得到储存浓度为0.200mg/mL的维生素C标准溶液。
（5）测定样品将对照溶液、标准曲线各用0.45μm滤膜过滤，然后加入分别从10mL量筒中取出1.0mL样品溶液，水定容至10mL。
调节测试波长到265nm处。
测量对照液吸光度为A1，标准解各吸光度为A2、A3、A4、A5、A6；样品吸光度为Ax。
三. 实验步骤（1）仪器操作准备1) 打开仪器电源，拓扑显示屏显示后，启动UV-VIS1000分光光度计软件程序，并用移液管加入100μL试剂至样品池；2) 在菜单选项中选择"致动器"，点击"参照制备"，将10mM硝酸钾对比池放入槽中，并通过菜单项中"参照制备"对参照对比。
紫外分光光度法测定五种果蔬中维生素C的含量
紫外分光光度法测定五种果蔬中维生素C的含量一、本文概述维生素C，也被称为抗坏血酸，是一种重要的水溶性维生素，对人体健康具有多种重要作用，包括增强免疫力、促进铁的吸收和利用、参与胶原蛋白的合成等。
由于其对人体健康的重要性，了解各种食物中维生素C的含量对于合理搭配膳食、保障人体维生素C的充足摄入具有重要意义。
因此，本研究采用紫外分光光度法测定了五种常见果蔬中维生素C的含量，旨在为公众提供更为准确、科学的膳食指南。
紫外分光光度法是一种基于物质对紫外光的吸收特性进行定量分析的方法。
该方法具有操作简便、灵敏度高、重现性好等优点，因此被广泛应用于各种生物化学分析中。
在本研究中，我们通过对五种果蔬样品进行前处理，提取其中的维生素C，并利用紫外分光光度计测定其吸光度，从而计算出样品中维生素C的含量。
本研究选取的五种果蔬分别为苹果、橙子、草莓、菠菜和番茄，它们都是人们日常膳食中常见的富含维生素C的食物。
通过对这些果蔬中维生素C含量的测定，我们可以了解不同食物中维生素C含量的差异，为人们在日常饮食中合理搭配食物提供参考。
本文旨在利用紫外分光光度法测定五种常见果蔬中维生素C的含量，为公众提供更为准确、科学的膳食指南，以促进人们的健康。
二、实验材料与方法选择了五种具有代表性的果蔬样品，包括苹果、橙子、草莓、菠菜和青椒。
这些果蔬因其维生素C含量高且易得而被选中。
实验所需的主要试剂包括2,6-二氯靛酚钠、草酸、偏磷酸等。
设备方面，使用了紫外可见分光光度计、离心机、电子天平、研钵、容量瓶、移液管等。
将每种果蔬样品洗净、切碎，并去除不可食部分。
然后，将样品用偏磷酸-草酸混合液研磨，离心取上清液，用于后续的维生素C含量测定。
采用偏磷酸-草酸混合液作为提取液，通过研磨和离心，使果蔬中的维生素C充分溶解在提取液中。
准确称取一定量的2,6-二氯靛酚钠标准品，用蒸馏水溶解并定容，得到不同浓度的标准溶液。
然后，在紫外可见分光光度计上，以蒸馏水为空白对照，测定各标准溶液的吸光度，绘制标准曲线。
实验93紫外分光光度法测定水果(或蔬菜)中的维生素C含量
2 mL 蒸馏水和 0.6～ 0.8 mL 1 mol·L-1 NaOH 溶液依次放入 10
mL 容量瓶中，混匀， 15min 后加入 0.6 ～ 0.8 mL 10% HCl ，混 匀，并定容至刻度。以蒸馏水为空白。在 243 nm 处测定其消
光值。
4 ．由待测样品与待测碱处理样品的消光值之差和
93.5 问题讨论
（１）除了本实验中的方法外，抗坏血酸还有哪些
测定方法?
93.6 参考答案
（1）除了本实验中的方法外，抗坏血酸还有哪些测定方法? 答：一、氧化还原法 1. 直接碘量法 2. 2,6-二氯酚靛酚滴定法 二、分光光度法 1. 紫外快速测定法 2. 2,4-二硝基苯肼法 3. 高铁还原法测定血浆中的抗坏血酸 三、光电比浊法 四、电化学法 五、荧光分析法 1. 抗坏铁酸的微量荧光测定法 2. 抗坏铁酸总量的荧光测定法
测定标准系列抗坏血酸溶液的消光值，以抗坏血酸的含
量（μg）为横坐标，以相应的消光值为纵坐标作标准 曲线。
（二）样品的测定 1．样品的提取：将果蔬样品洗净、擦干、切碎、混匀。 称取 5.00 g 于研体中，加入 2 ～ 5 mL 1% HCl ，匀浆，转移到 25 mL容量瓶中，稀释至刻度。若提取液澄清透明，则可直接
取样测定，若有浑浊现象，可通过离心（10000 g, 10 min）
来消除。 2．样品的测定：取0.1～0.2 mL提取液，放入盛有0.2～
0.4 mL 10%盐酸的10 mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度后摇
匀。以蒸馏水为空白，在243 nm处测定其消光值。 3 ．待测碱处理液的制备：分别吸取 0.1 ～ 0.2 mL 提取液，
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
紫外测定Vc含量实验报告
紫外分光光度法测定维生素C的含量班级：xxxx 姓名：xxxx 学号：xxxx前言：紫外分光光度计的工作原理基于朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律，即物质在一定浓度的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比，其应用波长范围为200~400nm的紫外光区、主要由辐射源(光源)、色散系统、检测系统、吸收池、数据处理机、自动记录器及显示器等部件组成。
本次研究对象是维生素C，维生素C又称抗坏血酸，是一种含有6个碳原子的酸性多羟基化合物，分子式为C6H8O6，分子量为176.1。
化学结构：理化性质：无色晶体，熔点190～192℃酸性：维生素C分子结构中的烯二醇基，尤其是C3位OH由于受共轭效应的影响，酸性较强（pK =4.17)；C2位OH 由于形成分子内氢键，酸性极弱（pK =11.75）故维生素C一般表现为一元酸，可与碳酸氢钠作用生成钠盐。
紫外线吸收最大值：245nm。
不纯或天然品维生素c容易被空气和光线氧化，其水溶液很不稳定很快氧化成脱氢抗坏血酸，尤其是在中性或碱性溶液中很快被氧化。
药理作用：体内参与糖的代谢及氧化还原过程，能促使组织产生细胞间质(缺乏时可引起坏血病)，减少毛细血管通透性，加速血液的凝固，刺激造血功能，促进铁在肠内吸收，促使血脂下降，增加对感染的抵抗力，参与解毒功能，具有抗组织胺的作用及阻止致癌物质(亚硝胺)生成的作用。
文献报道测定方法：碘量测定法，HPLC法，紫外分光光度法，差示旋光法，电化学法等一、仪器与试药紫外分光光度仪（UV-2550, 日本岛津），分析天平（BS 110S，梅特勒）。
维生素C对照品，维生素C片（天津市新精细化工开发中心，批号：20110725）。
维生素C样品，维生素片（国药集团新疆制药有限公司，批号：20150870）溶剂: 0.1mol/L盐酸。
二、方法与结果2.1 溶液的配制2.1.1 对照品溶液的配制精密称取维生素C对照品10mg，加0.1mol/L HCl溶解，定容到25ml。
紫外光度法测定维生素C实验报告
紫外光度法测定维生素C实验报告Company number：【0089WT-8898YT-W8CCB-BUUT-202108】紫外分光光度法测定维生素C片维生素C的含量一、实验目的1.学习利用紫外吸收光谱测定物质含量的原理和方法；2.熟练紫外-可见分光光度计的操作。
二、实验原理维生素C（VC）是一种酸性己糖衍生物，具有烯醇式己糖内酯立体结构，分D和L两种立体构型，但只有L型有生理功效。
维生素C具有较强的还原性,在一定条件下氧化型和还原型可以互变 ,两者均具有生物活性(结构式见图1),其C2和C3位上两个相邻的烯醇式羟基极易解离而释放出H+,故维生素C虽然不含自由羧基，仍具有有机酸的性质。
维生素C呈无色无臭的片状结晶体,易溶于水,不溶于脂。
在酸性环境中稳定,遇空气中氧、热、光、碱性物质,特别是有氧化酶及痕量铜、铁等金属离子存在时可促进其破坏速度。
具有π电子的共轭双键化合物、芳香烃化合物等，在紫外光谱区都有强烈吸收，其摩尔吸收系数k可达104-106数量级。
利用紫外吸收光谱进行定量分析，要借助朗伯-比尔定律。
根据维生素C在稀硫酸溶液（维生素C水溶液在pH 5～ 6之间稳定）中，在245 nm 波长处有最大吸收的特性，建立了紫外分光光度法测定维生素C片含量的方法。
三、实验仪器及试剂实验仪器：容量瓶（100 ml、1000 ml）、移液管（ ml、5 ml）、烧杯、紫外分光光度计实验用品：98%浓硫酸（分析纯，1.84 g/ml）、维生素C对照品系以原料药经105 ℃干燥至恒重（含量为 %）、维生素C片（2片）、去离子水四、实验步骤1. 0.005 mol·L-1硫酸溶液的配制用 ml移液管移取 ml 98%浓硫酸放入事先已盛有蒸馏水的烧杯中，搅拌，冷却至室温后移入1000 ml容量瓶，稀释至刻度，待用。
2. 0.5 g·L-1对照品溶液的配制精密称取105℃干燥至恒重的维生素C对照品50 mg置100 ml量瓶中，加 mol·L-1硫酸溶液制成0.5 g·L-1对照品溶液。
紫外分光光度法测定维生素C和维生素E含量
紫外分光光度法测定维生素C和维生素E含量摘要本实验利用紫外分光光度法测定由维生素C和维生素E组成的混合物中各组分的浓度;在这两种组分组成的混合物中,彼此都不影响另一种物质的光吸收性质,根据相互间光谱的重叠的程度采用相对的方法进行定量测定;关键词紫外分光光度法；维生素C；维生素E；浓度1、引言维生素C抗坏血酸和维生素Eα-生育酚在食品中能起抗氧化剂作用,即它们在一定时间内防止油脂变性;两者结合在一起比单独使用的效果更佳,因为它们在抗氧化性能方面是“协同的”;因此,它们作为一种有用的组合试剂用于各种食品中;维生素C是水溶性的,维生素E是酯溶性的,它们都能溶于无水乙醇,因此能在同一溶液中,能够利用紫外可见分光光度法测定双组分相同的原理,在紫外光区测定它们;2、实验原理根据朗伯—比尔定律,用紫外—可见分光光度法很容易定量测定在此光谱区内有吸收的单一成分;由两种组分组成的混合物中,若彼此都不影响另一种物质的光吸收性质,可根据相互间光谱重叠的程度,采用相对的方法来进行定量测定;例如,当两组分吸收峰部分重叠时,选择适当的波长,仍可按测定单一组分的方法处理；但当两组分吸收峰大部分重叠时,则宜采用解联立方程组或双波长法等方法进行测定;混合组分中在λ1处的吸收等于组分A 和组分B 分别在λ1处的吸光度之和A λ1A +B ,即： A λ1A+B =κλ1A bc A +κλ1Bbc B 同理,混合组分在λ2处吸光度之和A λ2A +B 应为： A λ2A+B =κλ2A bc A +κλ2Bbc B 若先用A 、B 组分的标样,分别测的A 、B 两组分在λ1和λ2处的摩尔吸收系数κλ1A 、κλ2A 、κλ1B 、κλ2B ；当测的未知试样在λ1和λ1处的吸光度A λ1A +B 和A λ2A +B 后,解下列二元一次方程组： A λ1A+B =κλ1A bc A +κλ1Bbc B A λ2A+B =κλ2A bc A +κλ2B bc B 即可求得A 、B 两组分各自的浓度c A 和c B ;c A =（A λ1A +B ·κλ2B −A λ2A +B ·κλ1B ）/（κλ1A ·κλ2B −κλ2A ·κλ1B ） c B =（A λ1A+B −κλ1A ·c A ）/κλ1B 一般来说,为了提高检测的灵敏度,λ1和λ2宜分别选择在A 、B两组分最大吸收峰处或其附近;3、紫外分光光度法测定维生素C 和维生素E 含量3.1、仪器试剂仪器：紫外-可见分光光度计天津港东UV-4501S,石英吸收池一对试剂：维生素C 抗坏血酸,维生素E α-生育酚,无水乙醇3.2、实验步骤3.2.1、 检查仪器开机预热20min,并调试至正常工作状态;3.2.2、配制系列标准溶液1配制维生素C系列标准溶液：称取0.0132g维生素C,溶于无水乙醇中,定量转移入1000 mL容量瓶中,用无水乙醇稀释至标线,摇匀;此溶液浓度为7.50×10−5mol/L;分别吸取上述溶液 4.00 mL,6.00 mL,8.00 mL,10.00 mL于4只洁净干燥的50 mL容量瓶中,用无水乙醇稀释至标线,摇匀;2配制维生素E系列标准溶液：称取维生素E0.0488g,溶于无水乙醇中,定量转移入1000 mL容量瓶中,用无水乙醇稀释至标线,摇匀;此溶液浓度为 1.13×10−4mol/L. 分别吸取上述溶液 4.00 mL,6.00 mL,8.00 mL,10.00 mL于4只洁净干燥的50mL容量瓶中,用无水乙醇稀释至标线,摇匀;3.2.3、绘制吸收光谱曲线以无水乙醇为参比,在220～320 nm范围测定维生素C和维生素E的吸收光谱曲线,确定维生素C和维生素E的最大吸收波长λmax Vc 和λmax Ve,分别作为λ1和λ2;3.2.4、绘制标准曲线1维生素C标准曲线：以无水乙醇为参比,分别在波长λ1和λ2处测定5个维生素C标准溶液的吸光度值;2维生素E标准曲线：以无水乙醇为参比,分别在波长λ1和λ2处测定5个维生素E标准溶液的吸光度值;3.2.5.、未知液的测定取未知液5.00 mL于50mL容量瓶中,用无水乙醇稀至标线,摇匀.在波长λ1和λ2处分别测定其吸光度;结束工作1实验完毕,关闭电源;取出吸收池,清洗晾干后入盒保存;2清理工作台,罩上仪器防尘罩,填写仪器使用记录;4、实验数据处理4.1、λ1、λ2测定红色曲线——维生素C 光度吸收曲线黑色曲线——维生素E 光度吸收曲线由仪器作图分析直接可得λ1=273.1nm,λ2=291.9nm;4.2、Vc 与Ve 在λ1、λ2处的光度吸收图4.3、Vc 与Ve 的标准曲线图Vc 在λ1处的线性回归方程为：y=1480x+0.04991, κλ1Vc=1480.Vc 在λ2处的线性回归方程为：y=370x+0.03824,κλ2Vc =370. Ve 在λ1处的线性回归方程为：y=575.22124x+0.0556,κλ1Ve=575.22124.Ve 在λ2处的线性回归方程为：y=1834.070x+0.04076, κλ2Ve =1834.070. 4.4、Vc 、Ve 的浓度A λ1A +B =0;068 A λ2A +B =0;0724 κλ1Vc =1480 κλ2Vc =370 κλ1Ve =575.22124 κλ2Ve=1834.070 代入下式有c A =（A λ1A +B ·κλ2B −A λ2A +B ·κλ1B ）/（κλ1A ·κλ2B −κλ2A ·κλ1B） c A =3.32×10−5mol /L代入下式有c B =（A λ1A +B −κλ1A ·c A ）/κλ1Bc B =3.28×10−5mol /L5、结果分析与讨论在本实验中,要用石英比色皿而不能用玻璃比色皿,这是因为一般紫外光区用石英比色皿,可见光区用玻璃比色皿;石英比色皿可用在全波段,玻璃比色皿只能用于340nm 以上波长,因为玻璃不透紫外光;本实验中所用的参比溶液为乙醇,参比溶液又叫空白溶液,测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液,主要是用作空白调零,即直接从仪器上减去空白试验产生的干扰值;因此本实验中根据维生素C 、E 的溶解性质,需要用乙醇作为本次实验的参比溶液而不是水;紫外可见光度法测定参数是吸光度A,该值与入射光强度和透射光比值有关,入射光增大,透射光也增大,增大检测器的放大倍数,也影响入射光和透射光的检测,而且除待测物之外,其它物质也可能对入射光产生吸收,因此限制了灵敏度;对于低浓度的待测液该方法的可信度也较低,假如一种待测物质含量很低的样品用紫外可见法分析,如果透过率为T ＝99/100,则吸光度A ＝log100/99＝0.004,这个吸光值很低,几乎与噪声相近,可信度下降,几乎无法确定;。
紫外分光光度计测VC
紫外分光光度计测VC紫外分光光度法测定蓝莓中的维生素C含量（一）实验目的(1) 掌握紫外分光光度计的工作原理及使用方法。
(2) 掌握水果（或蔬菜）中的维生素C含量的测定方法。
（二）实验原理紫外分光光度快速测定法是根据维生素C具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性,于波长243nm处测定样品溶液与碱处理样品两者吸光度之差,通过查校准曲线,即可计算样品中维生素C的含量。
此法操作简单、快速准确、重现性好,结果令人满意。
特别适合含深色样品的测定。
（三）仪器与试剂仪器分析天平，蓝莓若干，研钵，容量瓶（10ml,50ml,100ml）,滤纸，漏斗，5ml移液管试剂抗坏血酸标准溶液：用分析天平准确称取抗坏血酸10 mg，加2 mL 1%盐酸，加蒸馏水定容至100 mL，混匀。
此抗坏血酸溶液的浓度为100 μg·mL-1（四）实验步骤1. 标准曲线的绘制试管标号 1 2 3 4 5 6 7 8标准VC加入体0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.8 1.0 积/ml蒸馏水9.9 9.8 9.7 9.6 9.5 9.4 9.2 9.01.02.03.04.05.06.0 8.0 10.0 VC溶液浓度/(ug/ml)2样品的测定1．样品的提取：将果蔬样品洗净、擦干、切碎、混匀。
称取5.00 g于研体中，加入2～5 mL 1% HCl，匀浆，转移到25 mL容量瓶中，稀释至刻度。
若提取液澄清透明，则可直接取样测定，若有浑浊现象，可通过离心（10000 g, 10 min）来消除。
2．样品的测定：取0.1～0.2 mL提取液，放入盛有0.2～0.4 mL 10%盐酸的10 mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度后摇匀。
以蒸馏水为空白，在243 nm处测定其消光值。
通过查标准曲线，计算出样品的维生素C的含量。
（五）计算与数据μ×V总维生素C的含量（μg/g）= ————V1×W总式中：μ——从标准曲线上查得的抗坏血酸的含量（μg）V1——测消光值时吸取样品溶液的体积（mL）V总——样品定容体积（mL）W总——称样重量（g）数据见excel表（六）思考与讨论除了本实验中的方法外，抗坏血酸还有哪些测定方法?答：一、氧化还原法1. 直接碘量法2. 2,6-二氯酚靛酚滴定法二、分光光度法1. 紫外快速测定法2. 2,4-二硝基苯肼法3. 高铁还原法测定血浆中的抗坏血酸三、光电比浊法四、电化学法五、荧光分析法1. 抗坏铁酸的微量荧光测定法2. 抗坏铁酸总量的荧光测定法。
紫外分光光度vc含量
体旳鉴别；
如乙醇中杂质
3、化合物纯度旳检测
苯测定检验
化合物在紫外区没有明显旳吸收峰，而杂质在紫外区有较强旳吸 收，就能够紫外吸收曲线检测出该化合物所含旳杂质。
有机紫外吸收光谱旳解析
了解共轭程度、空间效应、氢键等；可对饱和与不饱和化 合物、异构体及构象进行鉴别。
紫外—可见吸收光谱中有机物发色体系信息分析旳一般规 律是：
茴香醛紫外吸收曲线
紫外光谱产生旳原因及其特点
产生原因：处于基态旳电子因为吸收能量，电子在不同轨道间 发生跃迁 分析特点： 1、可用来定性鉴定和构造分析 2、不需要加显色剂，测量简朴以便 3、敏捷度高，精确度
σ→σ*＞n→σ*＞π→π* ＞n→π* 电子跃迁和吸收旳光旳波长有何关系？？
紫外光谱常用术语
模块一 紫外-可见分光光度法
清远职业技术学院 生物制药技术专业
❖教学目的 知识目的
能力目的
项目5：用紫外-可见分光光度计对化装品样品旳维生素C和砷 含量进行分析评价
子项目2：用紫外分光光度计对维生素C旳含量旳进行测定
讨论
• 有色溶液对光选择性吸收，那么某些无色旳有机溶液是 否对光没有吸收呢?
⑷若在210～250nm波长范围内有强吸收峰，则可能具有2 个共轭双键；若在260～300nm波长范围内有强吸收峰，则 阐明该有机物具有3个或3个以上共轭双键。
⑸若该有机物旳吸收峰延伸至可见光区，则该有机物可能 是长链共轭或稠环化合物。
• 哪些物质对紫外线有吸收？请举例
对紫外光区有吸收旳无色透明物质都可测定,能吸收紫外光旳 物质:具有π电子和共轭双键旳化合物.
紫外吸收曲线绘制
紫外分光光度法旳波长范围：200nm-400nm
问题:怎样绘制苯旳吸收曲线?
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紫外分光光度法测定Vc含量
1. 实验原理
维C在紫外光区（200-400nm）显示特征的吸收谱带，最大光吸收（λmax）为245nm。
因此可以用标准曲线法在245nm测样品吸光度，测得维C含量。
2. 实验试剂
(I)1％的HAc溶液
(2)100ug/ml的Vc标准贮备液：准确称取0.010g的Vc，用1％的HAc定容至100mL。
(3)Vc标准使用液：吸取贮备液5．00mL，用1％HAc稀释至250mL(现用现配)。
(4)比色皿清洗剂
3. 实验步骤
3.1 Vc的提取
称取剪碎混匀的新鲜样品0.5 ～1.0 g 加酸研磨，多次过滤至50ml容量瓶中定容。
吸取10ml待测液溶液于试管。
3.2 标准曲线的绘制
分别吸取0.00、1.00、2.00、4.00、8.00、10.00ml维生素C标准溶液于10ml 比色管中用酸定容，用水稀释成一系列浓度分别为0.0、10、20、40、80、100μg/mL 维生素C标准溶液，分别测出其吸光度。
然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。
该曲线是经过原点的一条直线，可求出该曲线的斜率。
3.3 Vc的测定
波长245nm处测定。