革兰氏染色实验报告
微生物的革兰氏染色实验报告
微生物的革兰氏染色一、实验目的：1、学习并初步掌握革兰氏染色法；2、了解革兰氏染色的原理；3、巩固显微镜的使用。
二、实验原理：革兰氏染色是细菌学中最重要的鉴别染色法。
染色步骤分为四个部分：1、初染：加入碱性染料结晶紫固定细菌图片；2、媒染：加入碘液，碘与结晶紫形成一种不溶于水的复合物；3、脱色：利用有机溶剂乙醇或丙酮进行脱色；4、复染：复红配成碳酸复红作为复染剂。
G-和G+细胞壁的比较：1、阳性（G+）菌细胞壁特点：细胞壁厚，只有一层，主要由肽聚糖构成，肽聚糖含量高，结构紧密，脂类含量低。
当乙醇脱色时，细胞壁肽聚糖层孔径变小，通透性降低，结晶紫和碘的复合物被保留在细胞壁内，复染后仍显紫色（如芽孢杆菌）。
2、阴性（G-）菌细胞壁特点：细胞壁薄，由两层构成，内壁层和外壁层，细胞壁中脂类中脂类物质含量较高，肽聚糖含量较低，网状结构交联程度低，乙醇脱色时溶解了脂类物质，通透性增强，结晶紫与碘的复合物易被乙醇抽提出来，因此，革兰氏阴性菌细胞被脱色，当复染时，脱掉紫色的细胞的细胞壁又着上红色（例如大肠杆菌）。
三、实验步骤：1、取一个载玻片，将其洗净并沿一个方向擦拭干净，直至液体不再其上收缩为止；将接种环整平，用灼烧过的接种环在混匀的菌种中取菌，按常规方法图片，应涂大，不宜过厚。
2、将涂片用火焰固定，不宜烤得太狠，否则菌种呈假阳性。
3、滴加1滴结晶紫染液，染色1min，水洗。
4、滴加革兰氏碘液，作用1min，水洗5、滴加脱色乙醇，脱色30~40s，不宜脱色太狠，否则菌种呈假阴性。
6、水洗，滴加番红复染液，复染1min，水洗，晾干7、镜检并拍照。
四、注意事项：1、选用活跃生长期菌种染色，老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性。
2、涂片不宜过厚，以免脱色不完全造成假阳性。
3、脱色是革兰氏染色是否成功的关键，脱色不够造成假阳性，脱色过度造成假阴性。
实验结果与讨论：1、结果：高倍镜下观察的菌体图像：大肠杆菌金黄色葡萄球菌2、思考与讨论：。
实验二革兰氏染色及细菌特殊结构观察
添加标题
镜检：观察染色结果并绘图。
枯草杆菌芽孢的观察
细菌记录所观察到的三种菌革兰氏染色结果的差别
记录枯草杆菌Gram染色结果，并判断是阳性还是阴性
六、问题与讨论
要得到正确的革兰氏染色结果必须注意哪些操作？哪一步是关键？Why?
内容回顾
原理 细菌革兰氏染色的原理 方法 细菌革兰氏染色的方法 简要介绍了芽孢染色、荚膜染色、鞭毛染色的方法
革兰氏染色
丹麦C.Gram创立，用于细菌分类学研究 细菌细胞壁的结构
G＋细胞壁结构致密，用脱色剂处理后，肽聚糖层孔径缩小，通透性降低，故细菌仍保留初染时的紫色。
G－肽聚糖层较薄，交联度低，含较多脂质，故用乙醇等有机溶剂脱色时融解了类脂质，增加了细胞的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，经沙黄复染呈红色。
实验二 革兰氏染色及细菌特殊结构观察
Annual Work Summary Report
2022 - 2023
一、实验目的
Catalogue
学习细菌的革兰氏染色原理和方法
O1
芽孢、荚膜、鞭毛
了解细菌的特殊形态结构：
单击添加文本
O2
O3
O4
二、实验原理
单染色法：只能观察微生物的大小、形状、和细胞排列状况，但不能鉴别微生物以及它的特殊构造等。 复染色法：用两种或两种以上染色液进行染色，有协助鉴别微生物的作用，故也称鉴别染色法。常用的有： 革兰氏染色法、抗酸染色法、芽孢染色法、鞭毛染色法等。
添加标题
本次实验课结束
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下周再见！
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请确保油镜头擦拭干净！
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请第二排同学留下值日
革兰氏（Gram）染色法
添加标题
革兰氏染色实验报告
革兰氏染色法的原理摘要：革兰氏染色反应是细菌重要的鉴别特征，所以学习微生物学，进行革兰氏染色实验是很重要的。
为保证染色结果的正确性，采用规范的的染色操作方法是十分必要。
本实验主要对大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus Rosenbach）、枯草杆菌（Bacillus subtilis）进行革兰氏染色，观察它们的染色特征，辨别是革兰氏阴性还是阳性，从而掌握其染色方法。
染色方法与过程很清晰，但实验结果中金黄色葡萄球菌(S.aureus Rosenbach）多组呈现假阴性。
本实验的主要目的是熟悉并掌握革兰氏染色方法及原理，但要想做出很好的染色得多加练习。
本实验还可以锻炼显微镜操作技术和无菌操作技术。
关键词：革兰氏染色大肠杆菌(E.coli) 金黄色葡萄球菌(S.aureus Rosenbach) 枯草杆菌(B.subtilis)引言革兰氏染色是微生物学中最重要的鉴别染色方法，它可以直接将细菌分为革兰氏阴性和革兰氏阳性。
革兰氏染色法可将细菌分为革兰氏阳性（G+）和革兰氏阴性（G-）两种类型，这是由这两种细菌细胞壁结构组成与结构的差异所决定的。
经过一定的染色过程后，革兰氏阳性的细菌会因为细胞壁肽聚糖的含量高，脂质含量低而保持第一次染色的蓝紫色。
革兰氏阴性细菌细胞壁的脂质含量高，乙醇处理时脂质溶解，蓝色被洗脱，复染后变为红色。
革兰氏染色原理很简单，染色时需注意要注意使用处在活跃生长期的细菌，涂片不宜过厚，严格控制脱色时间。
大肠杆菌(E.coli)是革兰氏阴性细菌，金黄色葡萄球菌(S.aureus Rosenbach)与枯草杆菌 (B.subtilis)都是革兰氏阳性细菌，染色后在显微镜下容易区别。
同时它们的形态各异，可以根据具体颜色和形态差异来判断染色是否成功。
本实验还涉及到高倍油镜的使用。
使用油镜与用一般的镜头不同，具体使用在实验方法中描述。
细菌革兰氏染色实验报告
细菌革兰氏染色实验报告实验目的，通过革兰氏染色技术，观察细菌的形态特征，进一步了解细菌的分类和结构。
实验原理，革兰氏染色是一种常用的细菌染色技术，通过革兰氏阳性和阴性细菌在染色过程中的不同反应，来区分细菌的特性。
革兰氏阳性细菌在染色后呈紫色，而革兰氏阴性细菌在染色后呈粉红色。
实验步骤：1. 取一架无菌玻片，用无菌针头沾取待检测的细菌样本，涂抹在玻片上形成薄而均匀的细菌涂片。
2. 将玻片在火焰中加热灭菌，使细菌附着在玻片上。
3. 用染色剂革兰氏紫涂染玻片，静置1分钟后用水冲洗干净。
4. 用碘液滴在玻片上，静置1分钟后用水冲洗干净。
5. 用去色剂酒精滴在玻片上，静置数秒后用水冲洗干净。
6. 用染色剂粉红色涂染玻片，静置1分钟后用水冲洗干净。
7. 用纸巾吸干玻片上的水分，然后在玻片上滴一滴甘油作为封片剂。
8. 将盖玻片贴在涂片上，用显微镜观察细菌的染色情况。
实验结果及分析：经过革兰氏染色处理后，观察到样本中细菌的染色情况。
根据染色结果，可以初步判断细菌的分类。
革兰氏阳性细菌呈紫色，而革兰氏阴性细菌呈粉红色。
通过观察细菌的形态特征，可以进一步了解细菌的分类和结构。
实验结论：通过本次实验，我们成功使用了革兰氏染色技术，观察到了细菌的染色情况，并初步判断了细菌的分类。
革兰氏染色技术是一种简单而有效的细菌分类方法，对于细菌学研究具有重要意义。
总结：细菌革兰氏染色实验是细菌学实验中的基础实验，通过本次实验，我们深入了解了革兰氏染色技术的原理和步骤，掌握了正确的实验操作方法。
通过观察细菌的染色情况，我们对细菌的分类和结构有了更深入的认识，为今后的细菌学研究奠定了基础。
在今后的实验中，我们将继续深入学习细菌学知识，不断提高实验技能，为科学研究和实验应用做出更大的贡献。
微生物实验3之革兰氏染色
华中科技大学微生物学实验报告班级：生物制药1101班日期：2013 年 3 月16 日指导教师：邬建国实验组别：启明七组姓名：何明组员姓名：张玉涛、王远馨实验名称：革兰氏染色一、实验目的1.学习并掌握革兰氏染色的方法。
2.简单进行样品的革兰氏染色辨别样品中细菌类别二、实验原理1.革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，细菌先经碱性染料结晶紫染色，再经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌紫色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌（G+），后者为革兰氏阴性菌（G-）。
2为观察方便，脱色后再用一种红色染料，如碱性番红等进行复染。
阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。
有芽孢的杆菌和绝大多数球菌，以及所有的放线菌和真菌都成革兰氏正反应；弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽孢杆菌都成负反应。
3.革兰式阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别，染色反应不一样，染色与细菌细胞壁的化学组成及结构有关。
4.阳性菌菌体等电点较阴性菌低，在相同pH条件下染色，阳性菌吸附碱性染料较多，因此不易脱去，阴性菌则相反。
三、实验材料菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌；检测样品：含活菌酸奶染料：草酸铵结晶紫液、路哥氏碘液、95%乙醇、番红液其他：显微镜、载玻片、接种环、酒精灯、无菌生理盐水、香柏油、二甲苯四、实验方法(一)涂片→干燥→固定→草酸铵结晶紫染色（1min ）→水洗→路哥氏碘液媒染（1min ）→水洗→95%乙醇脱色（30s ）→水洗→番红复染（5min ）→水洗→干燥→镜检。
关键点：1.严格掌握乙醇脱色程度，如脱色过度，则阳性菌被误染为阴性菌； 而脱色不够时，阴性菌被误染为阳性菌；2.菌龄也影响染色结果，如阳性菌培养时间很长，或已死亡及部分自行溶解了，都常呈阴性反应。
（二)黑曲霉菌属于真菌,细胞较大,可用水片进行观察,,先在载玻片上滴一滴水,接种,盖上载玻片,即可拿到显微镜下观察.五、实验结果与分析1.对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌分别进行革兰氏染色（拍照，注明放大倍数）大肠杆菌放大倍数40x 金黄色葡萄球菌，放大倍数100x ，油浴2.对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌混合涂片进行革兰氏染色（拍照，注明放大倍数）大肠杆菌和金黄色葡萄球菌混合涂片，放大倍数100x,油浴3.酸奶中乳酸菌的革兰氏染色（拍照，注明放大倍数）4.黑曲霉菌水片观察六、思考题1.你的实验结果与课本中所述是否一致？如果不一致，试分析原因。
革兰氏染色法实验报告共5篇
革兰氏染色法实验报告篇一革兰氏染色法是一种常用的细菌染色方法，可用于鉴定细菌的类型和形态。
以下是一份革兰氏染色法的实验报告范例，包含实验目的、实验原理、实验步骤、实验结果和结论等部分。
实验目的： 1.了解革兰氏染色法的原理和步骤； 2.掌握细菌的革兰氏染色方法； 3.观察细菌在革兰氏染色中的反应，并进行鉴定。
实验原理：革兰氏染色法是根据细菌细胞壁的特性而设计的一种染色方法。
细菌细胞在染色过程中会根据细胞壁的结构不同，分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
革兰氏阳性菌具有较厚的细胞壁，含有较多的革兰氏染色阳性物质（如染色时用的紫檀碱），因此在染色后会呈现紫色。
革兰氏阴性菌细胞壁较薄，不含有革兰氏染色阳性物质，染色时使用的碘酒（革兰氏碘化酒）能使它产生复合革兰氏染色阳性物质（碘靛紫），再用酒精脱色，再用洋红着色，使其产生颜色变化，最终呈现红色。
实验步骤： 1.准备好菌液：选取需检测的菌株，用无菌盘收集少量菌落，用少量生理盐水悬浮，制备菌液。
2.片玻璃片：在清洁无菌玻璃片上滴上一滴菌液。
3.烘干：将玻璃片架起，自然风干。
4.固定：将玻璃片的细菌涂片在火焰上迅速烘烤，使其牢固地附着在玻璃片上。
5.染色：将烘烤后的玻璃片放入紫檀液中，染色1分钟。
6.脱色：用酒精脱色10-30秒。
7.洗净：用自来水清洗片上的超染色剂。
8.再染：将片浸入碘靛紫溶液中，染色1-2分钟。
9.脱色：用酒精脱色10-30秒。
10.洗净：用自来水清洗片上的超染色剂。
11.观察：利用显微镜观察和比较细菌的形态和染色情况。
12.记录：记录细菌的形态、颜色等观察结果。
实验结果：通过观察细菌的形态和颜色，我们可以得出以下结论：•革兰氏阳性菌在染色后呈现紫色；•革兰氏阴性菌在染色后呈现红色。
结论：革兰氏染色法是一种常用的细菌染色方法，通过染色反应可以初步鉴定细菌的类型。
本次实验中，我们成功地使用革兰氏染色法对细菌进行了染色和鉴定，观察到了不同细菌的染色结果，并且将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。
革兰氏染色实验总结[技巧]
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革兰氏染色实验总结[技巧]革兰氏染色法革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师、细菌学家 Christain Gram创立。
细菌先经碱性染料结晶染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌(G+)，后者为革兰氏阴性菌(G—)。
为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红、稀释复红等进行复染。
阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。
有芽胞的杆菌和绝大多数的球菌，以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应;弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。
革兰氏阳性菌对青霉素敏感，革兰氏阴性菌对链霉素敏感。
可根据革兰氏染色法鉴别不同菌种并对症下药。
革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别，染色反应不一样。
现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物，它与碘和结晶紫的复合物结合很牢，不易脱色，阴性菌复合物结合程度底，吸附染料差，易脱色，这是染色反应的主要依据。
另外，阳性菌菌体等电点较阴性菌为低，在相同PH条件下进行染色，阳性菌吸附碱性染料很多，因此不易脱去，阴性菌则相反。
所以染色时的条件要严格控制。
例如，在强碱的条件下进行染色，两类菌吸附碱性染料都多，都可呈正反应;PH很低时，则可都呈负反应。
此外，两类菌的细胞壁等对结晶紫—碘复合物的通透性也不一致，阳性菌透性小，故不易被脱色，阴性菌透性大，易脱色。
所以脱色时间，脱色方法也应严格控制。
G，菌:细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。
呈紫色。
Gˉ菌:肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是: ,)涂片固定。
实验1(实验二：细菌的革兰氏染色)实验报告
实验二细菌的革兰氏染色一、目的与要求了解革兰氏染色的原理，掌握革兰氏染色的主要操作步骤，学会革兰氏染色的方法。
二、实验原理革兰氏染色法能将细菌分成两大类，即革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
在用乙醇进行脱色时，两种菌的细胞壁结构不同，阳性菌细胞壁为网状结构，比较厚，结晶紫-碘的复合物不易被洗脱而保留在细胞内，而阴性菌细胞壁比较薄，颜色更容易洗脱出来，所以最终革兰氏阴性菌为红色，阳性菌为紫色。
三、实验材料菌种：大肠杆菌（Escherichia coli）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）。
染色液：草酸铵结晶紫染液、路戈氏碘液、95%酒精、番红染液。
器皿及材料：洁净载玻片、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、酒精灯、接种环、镊子、无菌水、洗瓶、染色盘、载玻片架、记号笔、75%消毒酒精瓶、废玻片缸、火柴等。
仪器：显微镜。
四、实验方法与步骤1.染色步骤：（1）制片：接种环蘸取细菌液置于载玻片，酒精灯外焰加热玻片进行细菌固定。
（2）初染：添加结晶紫染色，1min后倾去染色液，蒸馏水冲洗至无色。
（3）媒染：吸干残留蒸馏水后，加入一滴碘液，作用1min，水洗。
（4）脱色：吸干残液后，加入95%酒精进行脱色，30s后水洗。
（5）复染：吸干残液后，用番红液复染，1min后，水洗。
（6）镜检：吸干残液后，低倍镜寻找目标物体，再用高倍镜放大目标物，目标视野添加香柏油进行观察。
2.平板划线（1）左手中指、无名指和小拇指托住无菌平皿。
（2）盖子用食指和拇指掰开，右手持接种环进行第一区划线。
（3）酒精灯灼烧接种环至通红，晾凉后进行第二区划线（4）重复（3）进行第三、四区划线（5）将平皿置于适宜温度的培养箱培养过夜。
五、实验结果将显微镜下观察到的2个菌种的革兰氏染色结果填于下表中，并描述菌体的颜色、形态、排列方式。
菌种名称大肠杆菌枯草芽孢杆菌菌体形态图菌体颜色紫色红色菌体形态圆形椭圆形菌体排列方式并列分散结论(G+或G-) G+G-。
革兰氏染色的实验报告（共9篇）
革兰氏染色的实验报告(共9篇)革兰氏染色实验报告革兰氏染色法的原理及其练习摘要：革兰氏染色反应是细菌重要的鉴别特征，所以学习微生物学，进行革兰氏染色实验是很重要的。
为保证染色结果的正确性，采用规范的的染色操作方法是十分必要。
本实验主要对大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus Rosenbach）、枯草杆菌（Bacillus subtilis）进行革兰氏染色，观察它们的染色特征，辨别是革兰氏阴性还是阳性，从而掌握其染色方法。
染色方法与过程很清晰，但实验结果中金黄色葡萄球菌(S.aureus Rosenbach）多组呈现假阴性。
本实验的主要目的是熟悉并掌握革兰氏染色方法及原理，但要想做出很好的染色得多加练习。
本实验还可以锻炼显微镜操作技术和无菌操作技术。
关键词：革兰氏染色大肠杆菌(E.coli) 金黄色葡萄球菌(S. aureus Rosenbach) 枯草杆菌(B.subtilis)引言革兰氏染色是微生物学中最重要的鉴别染色方法，它可以直接将细菌分为革兰氏阴性和革兰氏阳性。
革兰氏染色法可将细菌分为革兰氏阳性（G+）和革兰氏阴性（G-）两种类型，这是由这两种细菌细胞壁结构组成与结构的差异所决定的。
经过一定的染色过程后，革兰氏阳性的细菌会因为细胞壁肽聚糖的含量高，脂质含量低而保持第一次染色的蓝紫色。
革兰氏阴性细菌细胞壁的脂质含量高，乙醇处理时脂质溶解，蓝色被洗脱，复染后变为红色。
革兰氏染色原理很简单，染色时需注意要注意使用处在活跃生长期的细菌，涂片不宜过厚，严格控制脱色时间。
大肠杆菌(E.coli)是革兰氏阴性细菌，金黄色葡萄球菌(S. aureus Rosenbach)与枯草杆菌(B.subtilis)都是革兰氏阳性细菌，染色后在显微镜下容易区别。
同时它们的形态各异，可以根据具体颜色和形态差异来判断染色是否成功。
本实验还涉及到高倍油镜的使用。
革兰染色实验报告
革兰染色实验报告革兰染色实验报告一、实验目的：通过革兰染色法，观察并区分细菌的革兰氏阳性和革兰氏阴性的特征，进一步了解革兰氏染色的原理和过程。
二、实验原理：革兰染色是病原微生物鉴定和分类的重要方法之一，可用于判断微生物是革兰氏阳性菌还是革兰氏阴性菌。
原理是革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁组成不同，前者细胞壁中含有厚壁的murein层和一些多糖类物质，后者细胞壁中只含有薄壁的murein层，革兰染色的原理是根据这一差别来进行染色。
染色步骤如下：1.准备菌液：取一株具有不完全结构的细菌菌落，悬浮在蒸馏水中制备菌液。
2.烘干菌液：从菌液中取一滴，滴在清洁的玻片上，用火焰烘烤几秒钟，待菌液干燥。
3.革兰素溶液：制备革兰染色工作溶液，将1%的革兰素溶液稀释到10倍。
4.染色过程：将烘干的菌液滴在玻片上，滴上革兰素溶液，静置1分钟后用蒸馏水洗净，然后在玻片上滴上碱性紫试剂，再用蒸馏水冲洗，最后在玻片上滴上碘试剂，再用蒸馏水冲洗，使背景显色。
将玻片在浓度逐渐增大的乙酸酒精中漂洗，直到玻片漂洗后无色即可，然后用蒸馏水冲洗。
最后，在玻片上滴上红染试剂，染色10秒钟后用蒸馏水冲洗干净，晾干后，镜下观察。
三、实验步骤：1.准备菌液：取一株细菌菌液，用蒸馏水制备悬浮液。
2.烘干菌液：取一滴菌液滴在玻片上，用火焰烘干几秒钟，使菌液干燥。
3.加染料：滴上革兰素溶液，静置1分钟后用蒸馏水冲洗。
4.加试剂：滴上碱性紫试剂，再用蒸馏水冲洗；滴上碘试剂，再用蒸馏水冲洗。
5.漂洗：用浓度逐渐增大的乙酸酒精漂洗，直到玻片漂洗后无色。
6.染色：滴上红染试剂，染色10秒钟后用蒸馏水冲洗干净，晾干后，放在显微镜下观察。
四、实验结果和分析：在显微镜下观察，发现革兰染色后，革兰氏阳性菌呈紫色或蓝色，而革兰氏阴性菌呈红色。
革兰氏阳性菌的细胞壁厚，染色较蓝色。
而革兰氏阴性菌的细胞壁薄，染色较红色。
这是由于革兰染色方法中经过上述的染色步骤，革兰氏阳性菌能够保留革兰蓝的颜色，而革兰氏阴性菌会被红染剂覆盖掩盖住。
实验细菌的革兰氏染色
• 革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。
• 它是1884年由丹麦医师Gram创立的。
• 革兰氏染色法（Gram stain）不仅能观察到细菌 的形态而且还可将所有细菌区分为两大类：染色 反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表示； 染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏阴性 细菌，用G-表示。 • 细菌对于革兰氏染色的不同反应，是由于它们细 胞壁的成分和结构不同而造成的。
（二）细菌细胞的革兰氏染色
1．涂片：将培养24小时的枯草芽孢杆
球菌、大肠杆菌和未知菌分别作涂片
（注意涂片切不可过于浓），干燥、
固定。固定时通过火焰1～2次即可，
不可过热，以载玻片不烫手为宜。
2．染色
（1）初染加草酸铵结晶紫一滴，约一分钟， 水洗。 （2）媒染滴加碘液冲去残水，并覆盖约一分 钟，水洗。 （3）脱色将载玻片上面的水甩净，并衬以白 背景，用95％酒精滴洗至流出酒精刚刚不 出现紫色时为止，约20～30秒钟，立即用 水冲净酒精。 （4）复染用番红液染1～2分钟，水洗。
4、染色：放标本于水平位置，分别滴加染色 液于涂片薄膜上，染色时间长短随不同染 色液而定。结晶紫染色液染2—3分钟，石 炭酸复红染色液约染1—2分钟。
5、水洗： 染色时间到后，用自来水冲洗， 直至冲下之水无色时为止。注意冲洗水流 不宜过急，过大，水由玻片上端流下，避 免直接冲在涂片处。冲洗后，将标本晾干 或用吹风机吹干，待完全干燥后才可置油 镜下观察。
三、实验器材
• 1、菌种：大肠杆菌，枯草芽孢杆 菌,未知菌； • 2、试剂：草酸铵结晶紫，番红水 溶液，碘液，95%乙醇， • 3、仪器：显微镜，载玻片等。
四、实验步骤
（一）细菌细胞的简单染色 1、涂片 ：取两块干净的载玻片，各滴一小滴生理 盐水于载玻片中央，用无菌操作挑取大肠杆菌和 枯草芽孢杆菌于载玻片的水滴中，调匀并涂成薄 膜。注意滴生理盐水时不宜过多，涂片必须均匀。 2、干燥 ： 室温中自然干燥。 3、固定： 涂片面向上，于火焰上通过2—3次，使 细胞质凝固，以固定细菌的形态，并使其不易脱 落。但不能在火焰上烤，否则细菌形态将毁坏。
革兰氏染色实验报告
革兰氏染色实验报告实验目的：通过革兰氏染色方法，对细菌进行染色，观察染色后细菌的形态及染色结果，判断细菌的革兰氏阴性或阳性。
实验原理：革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法，通过改变细菌胞壁结构的颜色，使得细菌可以在显微镜下通过染色观察。
该方法通过染色剂的作用，区分细菌的革兰氏阴性和阳性特征：- 革兰氏阳性细菌：由于细菌细胞壁富含的脂多糖层和多肽聚糖层的作用，革兰氏阳性细菌可以在染色过程中保留紫色的结晶紫染色剂，因此染色后呈紫色。
- 革兰氏阴性细菌：由于细菌细胞壁含有较多的脂脂多糖层，革兰氏阴性细菌在染色过程中难以保留紫色的结晶紫染色剂，而在除色过程中被洗去染色，再与著色剂（如蔗糖胺粉红色）发生反应，呈红色。
实验步骤：1. 取一片洁净的载玻片，用酒精灯或培养基灶烧热消毒。
2. 取一株已培养好的细菌涂抹于玻片上，并用酒精灯烘烤进行固定。
3. 将玻片放入蒸馏水中冲洗，以去除多余的细菌。
4. 滴加结晶紫染色液，静置1分钟，然后用蒸馏水冲洗。
5. 滴加碘酒，静置1分钟，然后用蒸馏水冲洗。
6. 滴加脱色剂（乙醇或乙醚），直到滴下的溶液不再有紫色为止，然后用蒸馏水冲洗。
7. 快速滴加蔗糖胺粉红色著色剂，静置1分钟。
8. 用蒸馏水冲洗玻片，使其不再出现颜色溢出。
9. 化干净后，将载玻片放在显微镜下，使用100倍至1000倍的放大倍数进行观察。
实验结果：经过革兰氏染色处理后，染色后的细菌呈现不同的颜色和形态，根据染色结果可以判断细菌的革兰氏阴性或阳性。
革兰氏阳性细菌染色后呈紫色，常见的如链球菌和葡萄球菌；革兰氏阴性细菌染色后呈红色，常见的如大肠杆菌和沙门氏菌。
实验结论：通过革兰氏染色方法，我们可以对细菌进行染色，观察细菌的形态及染色结果，并根据染色结果判断细菌的革兰氏阴性或阳性。
这对于细菌的鉴定及临床诊断具有重要意义。
实验结果表明，染色后的细菌呈现明显的颜色差异，根据形态及染色结果可以准确判断细菌的革兰氏染色特性。
革兰氏染色的实验报告
革兰氏染色的实验报告革兰氏染色的实验报告导言：革兰氏染色是一种常用的细菌染色技术，它能够将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两类。
本实验旨在通过革兰氏染色技术，对不同细菌进行染色观察，以便更好地了解细菌的形态和结构。
实验材料和方法：1. 实验材料：- 细菌培养物- 革兰氏染色试剂：紫晶染液、碘液、酒精、脱色剂、蔗糖水- 显微镜- 玻璃片- 消毒棉球2. 实验方法：1) 取一滴细菌培养物，涂抹在玻璃片上。
2) 将玻璃片放入火焰中进行固定。
3) 滴加紫晶染液，静置1分钟。
4) 用蒸馏水洗净玻璃片，使其呈现紫色。
5) 滴加碘液，静置1分钟。
6) 用蒸馏水洗净玻璃片，使其呈现紫色。
7) 滴加酒精，静置数秒钟。
8) 用蒸馏水洗净玻璃片，使其呈现紫色。
9) 滴加脱色剂，静置数秒钟。
10) 用蒸馏水洗净玻璃片，使其呈现紫色。
11) 滴加蔗糖水，静置数秒钟。
12) 用蒸馏水洗净玻璃片，使其呈现紫色。
13) 用消毒棉球擦干玻璃片。
14) 将玻璃片放在显微镜下观察。
实验结果：经过革兰氏染色处理后，观察到细菌呈现出不同的颜色和形态。
根据染色结果，我们将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
1. 革兰氏阳性菌：革兰氏阳性菌呈现紫色，形态多为球形或椭圆形。
其细胞壁含有较多的肽聚糖和穿孔素，因此在染色过程中能够保留紫晶染液并呈现紫色。
2. 革兰氏阴性菌：革兰氏阴性菌呈现粉红色或无色，形态多为椭圆形或棒状。
其细胞壁含有较少的肽聚糖和穿孔素，因此在染色过程中无法保留紫晶染液，而被脱色剂脱色。
讨论：革兰氏染色技术通过染色剂的作用，能够将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
这一技术在细菌学研究中具有重要意义。
首先，革兰氏染色能够帮助鉴定细菌的类型。
根据染色结果，我们可以初步判断细菌的分类，从而为后续的研究提供指导。
例如，对于临床医学来说，革兰氏染色结果可以帮助医生判断细菌感染的种类，从而选择合适的抗生素进行治疗。
其次，革兰氏染色还能够帮助观察细菌的形态和结构。
细菌的简单染色与革兰氏染色实验报告（共4篇）
细菌的简单染色与革兰氏染色实验报告(共4篇)细菌的简单染色和革兰氏染色实验细菌的简单染色和革兰氏染色实验实验目的1. 学习微生物涂片，染色的基本技术，掌握细菌的单染色方法及无菌操作技术。
、2. 巩固显微镜的使用方法。
基本原理1. 简单染色法:用单一染料对细菌进行染色的方法。
此法操作简单，适用于一般形态的观察。
在中性，碱性或酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，所以用碱性染料进行染色。
碱性染料并不是碱，和其他染料一样是一种盐，电离时染料离子带正电，易于带负电荷的细菌结合而是细菌着色。
带正电的染料离子可使细菌细胞染成蓝色。
通常的碱性染料除了美蓝外，还有结晶紫，碱性复红，番红等。
细菌体积较小，较透明，如未经染色常不易识别，而经染色后与背景形成鲜明的对比，是易于在显微镜下观察。
2. 革兰氏染色法:将所有的细菌分成革兰氏阳性菌G+)和革兰氏阴性菌(G-)两大类，是细菌上最常用的鉴别染色法。
该染色法所以将细菌分为G+和G-菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同决定的。
G-菌的细胞壁中含有较多易被乙酸溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄，交联度低，故用乙醇脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使染色的结晶紫和碘的复合物易于渗透，结果细菌被脱色，在经复红染色后就成了红色。
G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时颜色。
革兰氏染色需要四种不同的溶液，碱性染料初染液，煤染剂，脱色剂和复染液。
碱性染料初染液的作用像在细菌的单染色法基本原理中所述的那样，而用于革兰氏染色的初染液一般是结晶紫。
媒染剂的作用是增加染料和细胞之间的亲和性或付着力，即已某种方式帮助染料固定在细胞上，是不易脱落，碘是常用的媒染剂。
脱色剂是被染色的细胞进行脱色，不同类型的细胞脱色反应不同，有的能被脱色，有的则不能，脱色剂常用95%的酒精。
复染液也是一种碱性染料，其颜色不同于初染剂，复染的目的是使被脱落的细胞染上不同于初染液的颜色，从而将细胞区分成G+和G-两大类群，常用的染色液是复红。
微生物实验报告：普通染色和格兰染色参考模板
实验二细菌的分离和革兰氏染色一、实验目的1．掌握细菌涂片标本的制备方法和普通染色的步骤；2．掌握革兰氏染色法的步骤和关键点；3．识别细菌的革兰氏染色结果；4．学习无菌操作技术。
二、实验原理一般认为革兰阳性细菌的肽聚糖层较厚，经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小，结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色；而革兰阴性细菌的肽聚糖层很薄，脂肪含量高，经乙醇处理后部份细胞壁可能被溶解并改变其组织状态，细胞壁孔径大，不能阻止溶剂透入，因而将结晶紫与碘的复合物洗去而被脱色。
虽然如此，革兰染色的差异并不能完全认为是化学的差别，也有物理结构不同的结果，因为酵母菌细胞壁的成份完全和细菌不同，但具有革兰染色阳性反应。
三、实验器材载玻片，盖玻片，接种环，酒精灯，显微镜、擦镜纸、镜油、擦镜液；结晶紫、革氏碘染液、95%酒精、番红染液；枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和未知菌的18小时的液体培养液，酵母菌平板，大肠杆菌平板，牙垢。
四、实验步骤1、涂片左手持菌液EP管，右手持接种环，在火上对接种环灭菌后，从EP管中取一环培养液，于载玻片中央涂成薄层（事先在背面做好标记圆圈），将接种环在火焰上烧灼灭菌。
若是从平板上取材，则事先在载玻片上滴一小滴水，在火焰附近把平板打开一小口，用接种环调取菌落边缘的物质涂于水滴上。
室温下自然干燥。
2、固定手持或镊子夹载玻片一端，标本面朝上，在灯的火焰外侧快速来回移动3~4次，共约3~4秒。
要求玻片温度不超过60℃，以玻片背面触及手背皮肤不觉过烫为宜，放置待冷后染色。
3、初染滴加1滴草酸铵结晶紫染液，染色1分钟，水洗，吸干。
4、媒染用碘液冲去残留水，再加1滴碘液覆盖涂片1分钟，水洗，吸干。
5、脱色用吸水纸吸去玻片上的残留水，滴加95%的乙醇脱色，轻轻摇动玻片，倒掉脱色液，直至流出的乙醇无紫色时，立即水洗，吸干。
脱色时间20~30秒。
6、复染滴加1滴蕃红染液复染1-3分钟以上，水洗。
7、显微镜观察吸干载玻片背面及标本周围水渍，先用4*10的倍数找到合适的视野，再油镜观察。
革兰氏染色实验报告
革兰氏染色实验报告一、实验目的该实验的目的是通过革兰氏染色的方法观察细胞壁的性质，以区分细菌的分类，同时了解该染色方法的原理以及使用技巧。
二、实验原理革兰氏染色是以口红染（crystal violet）、碘液（iodine）、乙醇（alcohol）和伊红染（safranin）四种反应液交替作用的方法。
其中口红染为紫色，对细胞壁有亲和力；碘液是紫色的，可与口红染结合形成复合物，稳定染料，使之更不易脱落；而乙醇是溶液中的剂量比较重要的成分,它起到去除革兰氏染色中未结合的色素的作用；最后加入伊红染，使阳性细胞着色为紫色，阴性细胞则着色为红色。
这样进行染色后，可以通过高倍显微镜观察细胞壁性质的不同，进而分辨出细菌的种类和性质三、实验步骤1、取一块无菌平板，在其上滴一滴水或者菌液，用消毒针在平板上转动，使其涂匀。
2、将涂有菌落的无菌平板放至恒温箱内培养，直至形成细胞团后，并将所需观察的分离菌落移涂到玻片上。
3、用滴管滴上稍多的口红染液，待其停留1-3分钟后，倒出沥尽，然后用蒸馏水洗一下。
染涂口红染的时间要掌握好，超过时间长度则细胞未着色的区域较大，时间过短则细胞着色的区域不准确。
4、滴加碘水，待其停留1-2分钟，然后倒出沥尽，并用酒精缓慢淋洒使其不断滴至片上，滴过程中适当旋转玻片。
5、快速地用蒸馏水将玻片冲洗清洗，即可立即就可看到染色结果，此时使用高倍显微镜观察染色的效果。
6、最后滴上伊红染液，保持片面不干，然后观察细胞壁的不同性质四、实验结果和分析观察到经革兰染色后，革兰阳性菌会呈现紫色，而革兰阴性菌则会呈现红色。
这个实验结果体现了我们可通过革兰氏染色的方法，来鉴别出不同类型的细菌，使得我们可在疾病的检验诊断和治疗过程中得到及时的救治和有效的治疗。
五、实验小结革兰氏染色是一种广泛用于细线菌、球菌、杆菌等细菌的染色方法，该方法采取了多种不同液体的交替反应，通过观察不同菌的细胞壁性质的不同来区分不同的细菌种类，从而为及时的疾病检测和治疗提供了基础实验数据。
革兰氏染色实验总结[整理版]
![革兰氏染色实验总结[整理版]](https://img.taocdn.com/s3/m/6006795aff4733687e21af45b307e87101f6f87e.png)
革兰氏染色法革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师、细菌学家Christain Gram创立。
细菌先经碱性染料结晶染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌（G+），后者为革兰氏阴性菌（G—）。
为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红、稀释复红等进行复染。
阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。
有芽胞的杆菌和绝大多数的球菌，以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应；弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。
革兰氏阳性菌对青霉素敏感，革兰氏阴性菌对链霉素敏感。
可根据革兰氏染色法鉴别不同菌种并对症下药。
革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别，染色反应不一样。
现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物，它与碘和结晶紫的复合物结合很牢，不易脱色，阴性菌复合物结合程度底，吸附染料差，易脱色，这是染色反应的主要依据。
另外，阳性菌菌体等电点较阴性菌为低，在相同PH 条件下进行染色，阳性菌吸附碱性染料很多，因此不易脱去，阴性菌则相反。
所以染色时的条件要严格控制。
例如，在强碱的条件下进行染色，两类菌吸附碱性染料都多，都可呈正反应；PH很低时，则可都呈负反应。
此外，两类菌的细胞壁等对结晶紫—碘复合物的通透性也不一致，阳性菌透性小，故不易被脱色，阴性菌透性大，易脱色。
所以脱色时间，脱色方法也应严格控制。
G﹢菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。
呈紫色。
Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：１）涂片固定。
在无菌操作条件下，用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀，固定。
革兰染色实验报告心得
革兰染色实验报告心得革兰染色实验是微生物学实验中的基础实验之一，通过此实验可以对细菌进行分类、鉴定以及区分。
通过观察细菌的染色性质可以快速分辨出细菌的属于革兰氏阳性菌还是革兰氏阴性菌，为后续的菌株鉴定提供了重要的参考。
在实验开始前，我们需要先制备好革兰染色所需的试剂和材料，例如革兰染色液、细菌培养物、50%甲醇溶液等。
同时还需要准备好显微镜和镜片，以便观察染色结果。
在实验过程中，我们首先需要取一滴细菌培养物放在一张干净的玻璃片上，然后将玻璃片放入火焰中进行固定。
这一步是非常重要的，因为固定能够使细菌牢固地附着在玻璃片上，方便后续的染色和观察。
在固定完细菌后，我们需要将革兰染色液倒入一只容器中，然后将固定好的玻璃片放入染色液中浸泡。
革兰染色液中的靛洋红染料能够与革兰氏阳性菌的细胞壁形成结合，使其变为紫色，而革兰氏阴性菌则不会被染色。
浸泡时间一般为1分钟左右，过长或过短都会对结果产生影响。
染色完成后，我们需要将染色玻璃片取出并用纯净水冲洗，以去除多余的染料。
接下来我们需要使用甲醇溶液进行脱色，将之前染为紫色的细菌进行脱色处理。
此步骤的目的是使革兰氏阴性菌的细胞壁透明，方便后续的染色观察。
最后，我们需要将玻璃片干燥后，取一滴显微镜油放在染色后的细菌上方，然后将镜片放在显微镜的平台上进行观察。
革兰氏阳性菌的细胞壁会呈现为紫色，而革兰氏阴性菌则不会染色，呈现为粉红色。
通过观察细菌的染色性质，我们可以初步推测出细菌的分类和鉴定结果。
通过实验，我深刻体会到了革兰染色的重要性和实用性。
革兰染色是一种简单快速的细菌鉴定方法，能够快速判断出细菌的类型，对于后续进行菌株鉴定和鉴别具有重要的意义。
同时，通过观察细菌的染色结果，还能初步判断出细菌的形态特征、生长习性以及致病性等信息。
在实际应用中，革兰染色被广泛应用于临床检验、食品安全、环境监测等领域。
此外，革兰染色实验还需要注意的是每个步骤的操作要规范，尤其是固定和冲洗的时间掌握要准确，否则会影响染色结果的准确性。
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革兰氏染色实验报告
摘要：
革兰氏染色是一种细菌分类和鉴定的基本方法。
本实验通过对不同菌株的革兰氏染色，观察细菌的形态、结构和染色反应，从而初步鉴定不同菌株的属性。
结果表明，革兰氏染色是一种简便、快捷、经济的细菌分类和鉴定方法，具有重要的应用价值。
引言：
革兰氏染色是一种广泛应用于细菌分类和鉴定的基本方法。
它是由丹麦微生物学家革兰于1884年发明的。
革兰氏染色的原理是利用染色剂的作用，将细胞壁结构不同的细菌分成两类：革兰阳性菌和革兰阴性菌。
革兰氏染色方法简便、快捷、经济，是细菌分类和鉴定的重要手段之一。
本实验旨在通过对不同菌株的革兰氏染色，观察细菌的形态、结构和染色反应，从而初步鉴定不同菌株的属性。
材料与方法：
材料：革兰氏染色试剂盒、细菌培养物、草酸、乙醇、碘酒、脱色剂。
方法：
1.取细菌培养物，将其涂抹于玻片上。
2.将玻片放在温箱中，使其干燥。
3.用草酸涂抹干燥后的菌片，使其受到草酸的溶解作用。
4.用水洗去草酸，使其残留在菌片上的草酸被冲掉。
5.用乙醇涂抹草酸处，使其受到乙醇的脱水作用。
6.用水洗去乙醇，使其残留在菌片上的乙醇被冲掉。
7.用碘酒涂抹乙醇处，使其受到碘酒的着色作用。
8.用水洗去碘酒，使其残留在菌片上的碘酒被冲掉。
9.用脱色剂涂抹碘酒处，使其受到脱色剂的去色作用。
10.用水洗去脱色剂，使其残留在菌片上的脱色剂被冲掉。
11.将菌片放在显微镜下观察。
结果与分析：
本实验选取了两个不同菌株进行革兰氏染色。
一个是革兰阳性菌——金黄色葡萄球菌，另一个是革兰阴性菌——大肠杆菌。
观察结果表明，金黄色葡萄球菌染色后呈紫色，细胞呈球形，直径约为1μm。
而大肠杆菌染色后呈红色，细胞呈梭形，长度约为2-3μm。
这说明革兰氏染色方法可以将细菌分成革兰阳性菌和革兰阴性菌两类，并且可以初步鉴定不同菌株的属性。
革兰阳性菌的细胞壁主要由厚壁的肽聚糖和少量的脂质组成，其细胞壁较厚，抗酸碱性能较强，所以在革兰氏染色中染色液不易穿透，呈紫色。
而革兰阴性菌的细胞壁主要由薄壁的肽聚糖和较多的脂质组成，其细胞壁较薄，抗酸碱性能较弱，所以在革兰氏染色中染色液易穿透，呈红色。
革兰氏染色方法可以初步鉴定不同菌株的属性，是一种简便、快捷、经济的细菌分类和鉴定方法。
结论：
本实验通过对不同菌株的革兰氏染色，观察细菌的形态、结构和染色反应，初步鉴定了不同菌株的属性。
结果表明，革兰氏染色是一种简便、快捷、经济的细菌分类和鉴定方法，具有重要的应用价值。
革兰氏染色方法可以将细菌分成革兰阳性菌和革兰阴性菌两类，并且可以初步鉴定不同菌株的属性。
因此，在实际应用中，革兰氏染色方法具有广泛的应用前景。