自制脂质微泡联合超声辐照介导pGL3-Promoter-EGFP质粒转染卵巢癌细胞的实验研究
超声靶向微泡破碎介导EGFP质粒转染肝癌细胞的研究
结论 Ｕ Ｍ Ｔ Ｄ是一种有效的基 因转染方法 ， 同的超声转 染参数 对细胞 活力和基 因传输效率有较 大影响 ， 不 对其进
行 优 化 后 可减 少 细胞 损 伤 ， 强 基 因转 染 。 增
【 关键词 】 超声靶向微泡破 碎 ； 肝癌 细胞 ； 因转染 基
Ｕｌｒ ｓ ｕ ｄ ｔ ｒ ｅ ｅ ｃ ｏ ｕ ｂ ｅ ｄ ｓｒ ｃ ｉｎ ｅ ｈ ｎ ｅ ｅ ｅ ｔ ａ ｓｅ ｔ ｎ ｉ ｔ ｐ ｃ ｌ ｎ ｖｔｏ ｔａ ｏ ｎ ａ ｇ ｔ ｄ ｍｉ ｒ ｂ ｂ ｌ ｅ ｔ ｕ ｔ ｎ ａ ｃ ｓ ｇ ｎ ｒ ｎ ｆ ｃ ｉ ｎ ｏ Ｈｅ Ｇ２ ｅｌ ｉ ｉ ． ｏ ｏ ｓ ｒ Ｚ ＮＧ ＨＡ
声强、 占空比和辐 照时间作 用下， 察 ｐ Ｇ Ｐ—Ｎ 观 ＥＦ ３质粒在 Ｈ ｐ ２细胞 中的表 达。荧光显微镜 下观 察绿 色荧光蛋 ｅＧ 白在 Ｈ ｐ ２细胞 中的表达 ， ｅＧ 流式细胞仪 检 测 细胞的 转 染率 ， Ｔ法检 测 细胞 活性 。结 果 ＭＴ 在超 声 声强 为 ２ｗ／ ｃ 占空比为 ２ ％ 、 ｍ、 ０ 照射 时间为 ６ ０Ｓ时． ｐ ２细胞的转染率最高 ， ＨｅＧ 达到 （ １５ １．３±２ １ ） ， 细胞存 活率 ＞８ ％。 ．５ ％ 且 ５
ｔ ｅ ｔａ ｓ ｃｅ ｅｌ ｉｂ ｅ Ｃｏ ｃｕ ｉ ｎ ＵＴ ｈ ｒｎ ｆ ｔ ｄ ｃ ｌ ｖａ ｌ ． ｅ ｓ ｎ ｌ ｓｏ ＭＤ ｉ ｎ ｅｆ ｃｉｅ ｍｅｈ ｄ ｏ ｅ ｅ ｄ ｌ ｅｙ，ｗ ｔ ｐ ｉ ｌ ｃ ｎ ｉ ｏ ｔｅ — ｓ ａ ｆ ｔ ｔ ｏ ｆｇ ｎ ｅ ｉ ｒ ｅ ｖ ｖ ｉ ｏｔ ｈ ｍａ ｏ ｄｔ ｎ ｉ ｎ ｉ ｈ ｎ ｅ ｒｎ ｆｅ ｉｎ ｅ ｃｅ ｃ ｉ ｏ ｔ ｉｎ ｆ ａ ｔ ｅｌｄ ａｈ ａ ｃ ｓ ｔ ｓ ｔ ｆ ｉｎ ｙ ｗ ｔ ｕ ｇ ｉ ｃ ｎ ｌ ｅ ｔ ． ａ ｅ ｏ ｉ ｈ ｓ ｉ ｃ
超声联合靶向微泡介导EGFP基因转染脉络膜新生血管
超声联合靶向微泡介导EGFP基因转染脉络膜新生血管李涛;张虹;陈志祺;王瑞霖【期刊名称】《眼科新进展》【年(卷),期】2010(030)009【摘要】目的探讨超声联合靶向微泡介导增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因转染脉络膜新生血管(choroidal neovasculafization,CNV)的可行性和应用价值.方法 BN大鼠通过半导体倍频激光(波长为532 nm)光凝方式建立CNV模型.实验分为7组:对照组、单纯超声辐照组、靶向微泡+超声辐照(TM+us)组、裸质粒(P)组、质粒+超声辐照(P+US)组、质粒+靶向微泡(P+TM)组、质粒+靶向微泡+超声辐照(P+TM+US)组.光凝后7 d,实验组鼠尾静脉注入EG-FP质粒和靶向脂质体微泡的复合物.处理7 d后摘除眼球行冰冻切片,激光共聚焦显微镜下观察CNV EGFP基因表达效率.结果对照组、单纯超声辐照组及TM+us组脉络膜无荧光表达.P组和P+us组脉络膜血管呈弱荧光表达,CNV荧光强度分别为22.49±4.61和26.87±6.73,和正常脉络膜血管荧光表达强度比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05).P+TM组和P+TM+US组可见CNV 有强荧光表达,CNV荧光强度分别为76.82±12.88和235.08±34.55,而脉络膜正常血管仅呈弱荧光.P+TM+US组CNV荧光表达最强.结论超声联合靶向微泡可高效、靶向地将质粒DNA输送至CNV.这种非侵入性的技术在CNV基因治疗上可能有很好的前景.【总页数】4页(P805-808)【作者】李涛;张虹;陈志祺;王瑞霖【作者单位】430030,湖北省武汉市,华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科;430030,湖北省武汉市,华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科;430030,湖北省武汉市,华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科;430030,湖北省武汉市,华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科【正文语种】中文【中图分类】R773.4【相关文献】1.超声靶向微泡破碎介导EGFP基因转染肝癌细胞的影响因素研究 [J], 李银鹏;朱惠明;张园;王娜;王菲;黄庆娟2.低频超声联合微泡造影剂增强脂质体介导pEGFP-N1基因转染体外前列腺癌细胞 [J], 吴作辉;白文坤;张吉臻;胡兵3.超声靶向微泡破裂联合PEI增强小鼠EGFP基因心肌转染 [J], 陈智毅;谢明星;王新房;吕清4.超声靶向微泡破裂介导EGFP质粒转染肝癌细胞的研究 [J], 刘同刚;沙凯辉;李云华;张立国;刘贤贤5.超声靶向微泡破碎介导EGFP质粒转染肝癌细胞的研究 [J], 张园;朱惠明;李银鹏;张海;王娜;吕锋因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
超声靶向辐照微泡造影剂介导重组腺相关病毒转染肾癌细胞
超声靶向辐照微泡造影剂介导重组腺相关病毒转染肾癌细胞李凡;杜联芳;王惠萍;韦芳【期刊名称】《中国医学影像技术》【年(卷),期】2011(027)005【摘要】目的以肾癌细胞为研究对象,探索超声靶向破坏微泡(UTMD)技术对重组腺相关病毒(rAAV)转染率的影响.方法应用不同感染复数(MOI)的rAAV2转染786-0细胞观察转染率.用不同条件UTMD预辐照rAAV2,观察病毒活性.以不同条件UTMD联合rAAV2转染人肾透明细胞癌(786-0)细胞,测定转染率及细胞生存率,RT-PCR检测细胞内病毒载体基因拷贝数.结果1×104～1×106 MOI的rAAV2在786-0细胞的转染率为(17.28士2.44)%.UTMD声强≤2.0 W/cm2,时间≤120 s,微泡体积比≤40%,频率1 MHz,占空比(DC)50%,脉冲重复频率(PRF)100 Hz时,UT-MD辐照不影响rAAV2的转染活性.在不影响细胞生存率及rAAV2活性的参数下(声强1 W/cm2,时间60 s,微泡体积比20%,频率1 MHz,DC 60%,PRF 100 Hz),UTMD介导rAAV2组细胞的转染率较单纯rAAV组提高2～3倍,并在5天内稳定维持提高效应;实时PCR显示,UTMD介导rAAV2组细胞内病毒载体量较单纯rAAV组提高近9倍.结论 UTMD可安全、有效且稳定地提高rAAV2在肾癌细胞的转染率.【总页数】6页(P895-900)【作者】李凡;杜联芳;王惠萍;韦芳【作者单位】上海交通大学医学院附属第一人民医院超声科,上海,200080;上海交通大学医学院附属第一人民医院超声科,上海,200080;上海交通大学医学院附属第一人民医院中心实验室,上海,200080;上海交通大学医学院附属第一人民医院中心实验室,上海,200080【正文语种】中文【中图分类】R445.1【相关文献】1.超声微泡造影剂介导PEDF基因转染大鼠视网膜与传统转染比较的实验研究 [J], 廖沁;周希瑗;王志刚2.微泡造影剂联合超声辐照介导的绿色荧光蛋白质粒转染小鼠肝癌的实验研究 [J], 聂芳;徐辉雄;吕明德;汤庆3.超声靶向破坏微泡介导腺相关病毒为载体的基因转染 [J], 金利芳;杜联芳;李凡4.超声辐照联合微泡造影剂介导人血管生成素-1基因体外转染293T细胞的研究[J], 陈茜;郭瑞强;祝成亮;周青5.寻找基因转染人脂肪来源的成体干细胞合适载体:脂质体介导质粒pEGFP-N1、重组腺病毒Ad5-EGFP与重组腺相关病毒rAAV-2/1-EGFP [J], 靳小兵;孙永生;娄思权;张克因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
门静脉注射超声微泡促进肝脏EGFP质粒表达
2.1 荧光显微镜观察EGFP的表达情况 A、B、C 3组转染后第1天开始有少量绿色荧光
于肝脏表达，A组第3天达到高峰， 此后减少，第 7天仅见微量表达，第11天未见荧光表达；B、 C两 组 第3天 达 到 高 峰 ， 第7天 仍 持 续 表 达 ， 第11天仅见 少量荧光表达(见图1)。
第3期
第7天 24645.0±6304.8a 684606.8±95943.1ab 706270.4± 98868.4 ab
第11天 0
99040.8±33374.7 a 97220.4±18679.6 a
a与同组第3天比较，P<0.05；b与A组同时间点比较，P<0.05；c表示B、C两组比较，P<0.05。
吴桂林，等. 门静脉注射超声微泡促进肝脏EGFP质粒表达
247
2.2 各组各时间点EGFP的表达量及转染率 各 组 转 染 后 第 3天 EGFP表 达 量 和 转 染 率 均 达 到
高峰，高于同组内其他时间点(第1、7、11天)，差异 有统计学意义(P<0.05)； B、C两组组转染后第 3、
7天 较 A组 相 同 时 间 点EGFP表 达 量 和 转 染 率 明 显 增 高(P<0.05)；C组转染后第3天 EGFP表达量和转染率 也高于B组(P<0.05)，两组其他时间点差异无统计学 意义。见表1、2。
运载体。
关键词：超声微泡；增强型绿色荧光蛋白；转染
中图分类号：R 445.1
文献标识码：A
ＤＯＩ： 10.3969/j.issn.1005-4057.2011.03.003
文章编号：1005-4057(2011)03-0245-04
Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｃ ＥＧＦＰ ｐｌａｓｍｉｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｂｙ ｉｎｔｒｏｐｏｒｔａｌ ｉｎｆｕｓｉｏｎ ｏｆ ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ ｍｉｃｒｏｂｕｂｂｌｅｓ
超声靶向微泡破裂介导EGFP质粒转染肝癌细胞的研究
【 摘要】 目的
探讨超声靶 向微泡破裂 （ ｌａ ｕｄ ａ ｅ ｄＭｅ ｂｂｌ Ｄ ｓｕｔｎ Ｕ Ｍ ） Ｕｔｓ ｎ ｒ ｔ ｉ ｏｕｂ ｅｒｃｏ， Ｔ Ｄ 介导 Ｅ Ｆ ｒｏ Ｔ ｇｅ ｒ ｅ ｔ ｉ Ｇ Ｐ质粒转染肝癌细
体外培养 ＨｅＧ ｐ ２细胞 ， 不同治疗超声 的声强 、 在 占空 比和辐 照时
胞株 ＨｅＧ ｐ ２的有效性 、 安全性并优化超声辐照参数 。方法
间作用下 ， 观察 ｐ Ｇ ＰＮ Ｅ Ｆ — ３质粒 在 Ｈ ｐ ２细胞中的转 染。荧光显微镜下 观察绿色荧光蛋 白在 Ｈ ｐ ２细胞 中的表 达 ， ｅＧ ｅＧ 流式 细胞 仪检测 细胞 的转染率 ， Ｔ 法 检测 细胞 活性 。结果 在超声声强为 ２ｗ ｅ 占空 比为 ２ ％ 、 Ｍ Ｙ ／ｍ 、 ０ 照射时 间为 ６ 时 ， ｅＧ ０ｓ Ｈ ｐ ２细胞的 ７转染率最高 ， 到 １．３ ±２ １％ ， 达 １５ ％ ． ５ 且细胞生存 率大于 ８ ％。结论 ５ ＵＭ Ｔ Ｄ是一种有效 的基 因转染方 法 ， 同的超声 转染 不
参数对细胞活力和基 因传输效率有较大影响 ， 对其进行优化后可减少细胞损伤 ， 增强基 因转染 。
【 关键词】 超声靶向微泡破裂 ； 肝癌细胞 ； 因转染 基 【 中图分类号】 Ｒ７５７ ３． 【 文献标识码】 Ａ 【 文章编号 】 １ ６ ７１２１ ）３ ２５ ３ ０ － ６ （０２ ０－ １－ ０４ ０ ０
２ ０ ２ （ ） ６ ５— ５ ． ０ ８，６ ６ ：５ ６ ６
１ Ｈａ Ｒｕ ｓ Ｋｏ ｗｉ ，ｔａ． ＡＴＢ１ｒｐ ｇａ １ ｎ Ｈ Ｙ， ｓｏＪ， ｈ ｅ １ Ｓ Ｙ ｅ ｒ ｒｍｍｅ ｅ ｅｅ ｐｅ — ｏ ｓｇｎ ｘ ｒｓ
磁性脂质超声微泡造影剂的制备及影像增强的实验研究_李华梅
东南大学学报(医学版)JSout h eastUn iv (M ed SciEdi)2009,Dec ;28(6):474-478 [基金项目]国家863计划项目(2007AA03Z356);国家自然科学基金资助项目(30770584)[作者简介]李华梅(1983-),女,黑龙江佳木斯人,在读硕士研究生。
E-m ai:l hu a m ei 1209@yahoo .c n [通讯作者]张东生 E-m ai:l b7712900@jl on li ne .co m磁性脂质超声微泡造影剂的制备及影像增强的实验研究李华梅,张佳,张东生(东南大学基础医学院病理学与病理生理学系,江苏南京 210009)[摘要]目的:探讨自制磁性脂质微泡超声造影剂在体外的基本特性及体内的影像增强效果,为研制既能在超声诊断中使影像增强,又能对肿瘤进行热疗的超声造影剂提供理论基础和实验依据。
方法:(1)采用化学共沉淀法制备Fe 3O 4磁性纳米材料,机械振荡法制备磁性脂质微泡。
(2)马尔文粒径测量仪测量磁性脂质微泡粒径,血球计数板测量浓度,扫描电镜及能谱分析对其形态和成分进行分析。
(3)将已制备的磁性脂质微泡原溶液放入4 冰箱里储存2周后观察其形态和粒径的变化。
(4)大型彩超仪评价其在兔肝脏的显像效果。
(5)分别将含有不同浓度磁性纳米粒子的脂质微泡置于频率230k H z 、输出电流30A 的SPG -06A 高频磁感应加热设备平板线圈上加热1h ,观察其体外升温情况。
结果:此微泡平均粒径为1127n m,浓度为3 109m l -1。
在4 冰箱中放置2周后,其形态和粒径未发生明显改变。
经耳缘静脉注入兔肝脏后,肝实质回声可见明显增强。
一定浓度的磁性脂质微泡在一定磁场作用下具有升温恒温的特性,温度可恒定在42~62 之间。
结论:此磁性脂质微泡造影剂粒径小,性质稳定,影像增强效果好,在磁场作用下具有升温恒温能力,为今后临床的进一步应用提供了实验依据。
脂质体转染_实验报告
一、实验目的本实验旨在通过脂质体转染技术将目的基因导入细胞内，研究脂质体转染方法对基因表达的影响，为后续基因功能研究提供技术支持。
二、实验材料1. 细胞：人胚肾细胞HEK2932. 载体：pGL3-Basic（含有报告基因）3. 脂质体：Lipofectamine 30004. 细胞培养试剂：DMEM培养基、胎牛血清、青霉素-链霉素溶液5. 实验仪器：超净工作台、CO2培养箱、酶标仪、显微镜、PCR仪等三、实验方法1. 细胞培养：将HEK293细胞接种于6孔板，待细胞汇合至80%时进行实验。
2. 脂质体-DNA复合物制备：将pGL3-Basic质粒DNA和Lipofectamine 3000试剂按照说明书比例混合，室温孵育20分钟。
3. 细胞转染：将脂质体-DNA复合物加入细胞培养孔中，轻轻混匀，37℃、5%CO2培养箱中孵育6小时。
4. 洗涤：弃去转染液，用PBS缓冲液洗涤细胞两次。
5. 优化培养条件：将细胞分为实验组和对照组，实验组加入脂质体-DNA复合物，对照组加入等量无DNA的脂质体。
6. 重组蛋白表达检测：收集细胞，提取总蛋白，进行Western blot检测目的蛋白表达水平。
7. 报告基因表达检测：收集细胞，提取总RNA，进行实时荧光定量PCR检测报告基因表达水平。
四、实验结果1. Western blot结果：实验组细胞中目的蛋白表达水平明显高于对照组（P<0.05），表明脂质体转染成功。
2. 实时荧光定量PCR结果：实验组细胞中报告基因表达水平明显高于对照组（P<0.05），表明脂质体转染对基因表达有显著促进作用。
五、实验讨论1. 脂质体转染技术在基因研究中的应用：脂质体转染技术具有操作简便、转染效率高、安全性好等优点，是基因研究中最常用的转染方法之一。
2. 本实验中，脂质体转染成功地将目的基因导入细胞内，并显著提高了报告基因的表达水平。
这表明脂质体转染技术在本实验中具有良好的效果。
超声微泡造影剂介导pegfp-n1质粒转染hgfs的实验研究
超声微泡造影剂介导pEGFP-N1质粒转染HGFs的实验研究骆书美，张云燕，钟晓波﹡，仲琳【摘要】目的探讨超声破坏微泡介导pEGFP-N1质粒转染人牙龈成纤维细胞的可行性、优化转染的条件及转染效率。
方法体外原代培养HGFs。
以pEGFP-N1质粒为报告基因，微泡造影剂为载体，用超声辐照介导质粒pEGFP-N1转染HGFs。
实验组分为质粒组、微泡+质粒组、超声+质粒组、超声+微泡+质粒组，超声+微泡+质粒组按不同的转染条件分成亚组对照组为空白对照。
转染48 h后倒置荧光显微镜下观察GFP的表达，MTT法检测HGFs活性。
结果超声微泡介导pEGFP-N1质粒对HGFs的转染效率明显高于其他实验组。
优化转染条件后，频率300KHZ，声强1.5w/cm2，连续波，辐照时间60s,微泡浓度10%，质粒浓度6.67ug/ml时，转染率较高。
结论在一定条件下，超声/微泡造影剂能够促进外源基因对HGFs 的转染。
【关键词】超声；微泡造影剂；人牙龈成纤维细胞；基因转染[中图分类号] [文献标识码]Ultrasound-mediated microbubble destruction enhances GFP gene expression in human gingival fibroblasts cell in vitroLuo Shu-Mei1，Zhang Yun-Yan1, Zhong Xiao-Bo1 ﹡（1.Department of conservative dentistry and endodonties, Chongqing University of Medical Sciences affiliated stomatology hospital 400015；Institute of life sciences，Chongqing Medical University，Chongqing 400016，China）【Abstract】Objective：To investigate whether ultrasound-mediated microbubble destruction could effectively deliver pEGFP-N1 plasmid to human gingival fibroblasts.Methods:The primary cultured human gingival fibroblasts were divided into five groups. pEGFP-N1 plasmid was transfected to HGFs as a gene marker with ultrasound-mediated microbubble destruction. Experiment groups include naked plasmid, microbubble+plasmid, ultrasound+plasmid, and ultrasound+ microbubble+plasmid.Based on different conditions of transfection, the last experiment group was divided further into sub groups.Control group was blank. After 48 hours, phase-contrast fluorescent microscopy was employed to evaluate the expression of green fluorescent protein(GFP).The cell vitality was measured by the MTT assay. Results: The transfection efficiency of the fourth group was higher than other experiment groups. Optimal gene expression occurred with ultrasound parameter at 1.5 w/cm2 for 60s, microbubble at the concentration of 10% and plasmid at the concentration of 6.67 ug/ml, the transfection efficiency is higher.Conclusions:Under specific conditions, ultrasound mediated microbubble destruction method can enhance the reporter gene transfection and expression.【Keywords】Ultrasound;Microbubbles; Human gingivalt fibroblasts; Gene transfection重庆医科大学附属口腔医院牙体牙髓科，重庆400015；通讯作者：钟晓波. 单位：重庆医科大学口腔医院牙体牙髓科。
比较不同频率低频超声联合微泡促进脂质体介导的pEGFP质粒转染人前
摘 要 目的
方法
蔚 白文坤
寿文德 王 玉 陈旖旎
杨 雨 胡 兵
比较 不 同频率 低频 超 声联合 微 泡促 进脂 质 体 介导 的 ｐ Ｅ Ｇ Ｆ Ｐ质 粒转 染人 前 列腺 癌 Ｐ Ｃ ３细胞 。
实 验共 分 ７组 ： 空 白对 照组仅人 前列腺癌 Ｐ Ｃ ３细胞株 ， 不进行任 何处理 ； 质粒 组每毫升 细胞悬液 中加人 １ ｔ ｘ ｇ质
Ｓ ｈ ａ ｎ ｇ ｈ ａ ｉ ２ ０ ０ ２ ３ ３， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ
Ａ Ｂ Ｓ Ｔ ＲＡ ＣＴ Ｏ ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｃ ｏ ｍｐ ａ ｒ ｅ ｔ ｈ ｅ ｌ ｉ ｐ ｏ ｓ ｏ ｍ ｅ － ｍ ｅ ｄ ｉ ａ ｔ ｅ ｄ ｐ Ｅ Ｇ Ｆ Ｐ ｐ ｌ ａ ｓ ｍｉ ｄ ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｉ ｎ ｔ ｏ ｈ ｕ ｍ ａ ｎ ｐ ｒ ｏ ｓ ｔ ａ ｔ ｅ ｃ ａ ｎ ｃ ｅ ｒ Ｐ Ｃ ３
各组 ， 各 亚组间又以 ２ ０ ｋ Ｈ ｚ 超声组绿色荧光蛋 白较 多 ； 脂质体组 和脂质 体＋ 微泡组绿色荧光蛋 白表达量亦多于空 白对照
组 和质粒组 。 流式细胞仪检测显示 ， 低频超声联合脂质体微泡组转染率高于质粒组 ， 其中 ２ ０ ｋ Ｈｚ 超声组转染率最高 ， 明显 高于其他各组 ， 差异有统计学意义（ 尸 ＜ ０ ． ０ ５ ） 。脂质体组与脂质体＋ 微泡组 之间 、 ５ ０ ０ ｋ Ｈ ｚ 超声组与 １ ＭＨ ｚ 超声组之间转染 率 比较差异无统计学意义 。 结论 低 频超 声辐照微 泡可显著促进脂质体介导的 ｐ Ｅ Ｇ Ｆ Ｐ质粒转染 人前列腺癌 Ｐ Ｃ ３细胞 。 在 相同声功 率 、 相同辐照面积下 ， 随着辐 照频率 的升高 ， 转 染率呈现下降趋势 。
超声联合微泡技术在肿瘤治疗中的研究进展
超声联合微泡技术在肿瘤治疗中的研究进展作者：李美莺章丽洁陈燕君沈俭戴莉来源：《上海医药》2019年第02期摘要随着超声分子成像技术的飞速发展，超声联合微泡（空化效应联合微泡）成为生物医学的研究热点，应用前景广阔，有望成为一种新的安全、无创的治疗手段。
目前，肿瘤治疗陷入瓶颈，如何根据现有技术及药物提高治疗效果是临床一线医师的重要课题。
全文阐述超声对比剂和空化效应的发展以及超声联合微泡技术载送肿瘤药物、靶向超声微泡介导基因、超声和微泡联合化疗药物治疗肿瘤、对肿瘤血管抑制及诱导肿瘤细胞凋亡等的研究进展。
关键词肿瘤；超声空化；微泡对比剂；靶向中图分类号：R445.1 文献标志码：A 文章编号：1006-1533（2019）02-0026-05Research progress of ultrasound combined with microvesicle technology in the treatment of tumorsLI Meiying， ZHANG Lijie， CHEN Yanjun， SHEN Jian， DAI Li（Putuo Hospital affiliated to Traditional Chinese Medicine University of Shanghai 200062，China）ABSTRACT With the rapid development of ultrasonic molecular imaging technology，ultrasound combined with microbubbles （cavitations combined with microbubbles） has become a research hotspot in biomedicine， its application prospect is broad and it is expected to become a new safe and non-invasive treatment. At present， cancer treatment is in a bottleneck， and how to improve the therapeutic effect is an important topic for clinical frontline physicians according to the existing technology and drugs. The full text explains the development of ultrasound contrast agents and cavitations effects and advances in research on ultrasound combined with microbubble technology to carry tumor drugs， targeted ultrasound microbubble-mediated genes， ultrasound and microbubbles combined with chemotherapy drugs to treat tumors， tumor angiogenesis and induction of apoptosis in tumor cells.KEY WORDS tumour； ultrasonic cavitations； microbubble contrast agent； targeting随着超声分子成像技术的飞速发展，超声联合微泡（空化效应联合微泡）成为生物医学的研究热点，应用前景广阔，有望成为一种新的安全、无创的治疗手段。
超声靶向微泡破坏联合脂质体介导pSilencer 3.1-SATB1基因转染前列腺癌
ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ，ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｂ ｕ ｂ ｂ ｌ ｅ ｒｏ ｇ ｕ ｐ，ｕ ｌ ｔ ｒ ａ ｓ ｏ ｕ ｎ ｄ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ，ｕ ｌ ｔ ｒ ａ ｓ ｏ ｕ ｎ ｄ＋ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｂ ｕ ｂ ｂ ｌ ｅ ｒｏ ｇ ｕ ｐ，ｌ ｉ ｐ ｏ ｓ ｏ ｍｅ ｒｏ ｇ ｕ ｐ， ａ ｎ ｄ ｕ ｈ ｒ ａ ｓ ｏ ｕ ｎ ｄ＋ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｂ ｕ ｂ —
Ｅ Ｇ Ｆ Ｐ 荧 光细胞 的比例 ， 计算基 因转染 率 以评价转染 效果。结果 荧光显微 镜下 ， 超 声 ＋微泡 ＋脂质 体组可 见大量 Ｅ Ｇ Ｆ Ｐ表达 ， 明显多于其他各组 。对 照组 、 微 泡组 、 超声 组 、 超声 ＋微泡组 、 脂质体组 、 超声 ＋微 泡 ＋脂 质体组基 因转
摘要： 目的
探讨超 声靶 向微泡破 坏（ Ｕ Ｔ ＭＤ） 联合 脂质体 介导 的沉默特 异性核 基质蛋 白 １基 因 （ ｐ Ｓ ｉ ｌ ｅ ｎ ｃ ｅ ｒ ３ ． １ ．
Ｓ Ａ Ｔ Ｂ １ ） 对人前列腺癌细胞 转染的效果 。方法 体 外培养人前列 腺癌雄激素非依赖 型细胞株 Ｄ Ｕ １ ４ ５ ， 分 为对 ｍｅ ｄ ｉ ａ ｔ ｅ ｄ ｐ ｌ ａ ｓ ｍｉ ｄ ｐ Ｓｉ ｌ ｅ ｎ ｃ ｅ ｒ ３． １ － ＳＡＴＢ １ ｔ ｏ ＤＵ１ ４ ５ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ
Ｚ Ｈ Ａ Ｎ Ｇ Ｊ ｕ ａ ， ＠ａ ｎ ， Ｃ Ｈ Ｅ Ｎ Ｙ ｉ ｎ ｇ ｈ ｏ ｎ ｇ ，Ｌ Ｉ Ｎ Ｘ ｕ ｈ ｏ ｎ ｇ （ Ｈ ｕ ａ ｉ ｈ ｅ Ｈ ｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｏ ｆＨ ｅ ｎ ａ ｎ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｍｉ ￣， Ｋ ａ ｉ ｆ ｅ ｎ ｇ ４ ７ ５ ０ ０ ０ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
山东 医药 ２ ０ １ ７年第 ５ ７卷第 ３ ０期
超声微泡造影剂介导EGFP对兔视网膜的转染效率
超声微泡造影剂介导EGFP对兔视网膜的转染效率程娟;顾胜利;徐斐燕;陈亚青【期刊名称】《中国医学影像技术》【年(卷),期】2012(028)010【摘要】目的探讨在不同能量超声和一定剂量微泡作用下,超声微泡造影剂介导下增强型绿色荧光蛋白(EGFP)质粒对兔视网膜转染的效率、安全性以及可行性.方法将30只新西兰大白兔随机分为6组:质粒组(A组)、质粒+微泡组(B组)、质粒+超声照射组①(C组)、质粒+超声照射组②(D组)、质粒+微泡+超声照射组①(E组)、质粒+微泡+超声照射组②(F组).将1 ml pEGFP-C1质粒与1 ml SonoVue微泡造影剂混合,由耳缘静脉注入,分别用0.5、1.0 W/cm2超声波辐照眼球.转染7天后行视网膜光镜及透射电镜检查,观察质粒、微泡及超声照射对视网膜有无损害,并在荧光显微镜下观察pEGFP-C1质粒表达情况.结果光镜及透射电镜结果显示质粒、微泡及超声照射对视网膜无损害.A～D组均可见少量绿色荧光表达(P均＞0.05),E、F组的荧光表达较强,明显高于其他4组(P均＜0.05),E、F组荧光强度差异无统计学意义(P均＞0.05).结论在一定能量的超声照射下,超声微泡造影剂能够提高携带EGFP质粒在兔视网膜的转染效率.【总页数】5页(P1788-1792)【作者】程娟;顾胜利;徐斐燕;陈亚青【作者单位】上海交通大学医学院附属新华医院超声科,上海200092;上海交通大学医学院附属新华医院超声科,上海200092;上海交通大学医学院附属新华医院超声科,上海200092;上海交通大学医学院附属新华医院超声科,上海200092【正文语种】中文【中图分类】R-332;R445.1【相关文献】1.低频超声联合微泡造影剂增强脂质体介导pEGFP-N1基因转染体外前列腺癌细胞 [J], 吴作辉;白文坤;张吉臻;胡兵2.超声微泡造影剂介导PEDF质粒转染大鼠视网膜的实验研究 [J], 廖沁;周希瑗;王志刚;李佳3.超声微泡造影剂介导EGFP质粒转染大鼠骨骼肌 [J], 劳翼;刘伊丽;修建成;黄劭;谢昌联;陈向辉;黄武锋;吴爵非;宾建平;查道刚4.超声微泡造影剂介导EGFP质粒转染大鼠视网膜的实验研究 [J], 许燕;周希瑗;王志刚;李兴升5.超声微泡介导EGFP质粒对视网膜母细胞瘤细胞转染效率的实验研究 [J], 邓鑫;周希瑗;王志刚因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
低频超声联合靶向纳米微泡介导siRNA转染肝癌细胞的实验研究
低频超声联合靶向纳米微泡介导siRNA转染肝癌细胞的实验研究吴博林;程文;乔强;韩雪;荆慧;张颢;梁宏健【期刊名称】《医学影像学杂志》【年(卷),期】2016(026)005【摘要】目的探讨低频超声联合靶向纳米微泡介导的NET-1 siRNA转染人肝癌细胞株HepG2的最佳输出声功率.方法 1)以磷脂复合物为原料、以半乳糖苷化多聚赖氨酸为靶向配体,利用薄膜水化法配合机械震荡法制备靶向纳米微泡,利用生物素-亲和素系统,将NET-1 siRNA与靶向纳米微泡偶联,制备成肝癌靶向载NET-1 siRNA纳米微泡;2)采用CGZZ型低频超声基因转染治疗仪,频率为1.00MHz,单路晶片输出声功率在0.11 ～3.5W,占空比50％;3)将HepG2细胞分别接种在培养板中,随机分为6组进行低频超声辐照实验;4)以MTT法检测细胞增殖情况;进行Quantitative Realtime PCR检测NET-1 mRNA表达情况;Western Blot法检测NET-1蛋白的表达.结果 C组、D组、E组和F组的细胞增殖能力与A组比较细胞增殖显著受到抑制(P＜0.05).C组、D组、E组和F组的细胞增殖在转染后48h分别抑制了54.39％、24.66％、42.49％和63.39％.NET-1 mRNA表达抑制率各组间差异有统计学意义(P＜0.05),D组NET-1 mRNA表达抑制率较其余组明显提高(P＜0.05).Western Blot电泳结果显示D组的条带表达最弱、范围最小,D组NET-1蛋白表达抑制率92.81％,与同期的B组(26.45％)、C组(43.39％)、F组(25.14％)比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论低频超声联合靶向纳米微泡能有效促进NET-1 siRNA对肝癌细胞的转染,并抑制肝癌细胞的增殖.【总页数】6页(P837-842)【作者】吴博林;程文;乔强;韩雪;荆慧;张颢;梁宏健【作者单位】哈尔滨医科大学附属肿瘤医院超声科黑龙江哈尔滨 150081;哈尔滨医科大学附属肿瘤医院超声科黑龙江哈尔滨 150081;哈尔滨工业大学生命科学与技术学院黑龙江哈尔滨 150001【正文语种】中文【中图分类】R735.7;R445.1【相关文献】1.超声联合SonoVue微泡介导NET-1 siRNA转染人肝癌细胞 [J], 韩雪;程文;郑建;荆慧;邵华2.比较不同频率低频超声联合微泡促进脂质体介导的pEGFP质粒转染人前列腺癌细胞的实验研究 [J], 张蔚;白文坤;寿文德;王玉;陈旖旎;杨雨;胡兵3.靶向性半乳糖化聚乙二醇-聚乙烯亚胺纳米载体介导siRNA质粒对肝癌细胞BEL-7402的转染效率检测 [J], 聂常富;韩风;张玲;庞春;王云检;陈规划4.纳米微泡搭载siRNA联合超声靶向破碎技术干扰胶质瘤细胞增殖的体外实验研究 [J], 蔡文斌;吕苇;段云友;王佳5.DR5介导的载多烯紫杉醇靶向脂质微泡联合超声靶向微泡破裂对人肝癌HepG2细胞凋亡及增殖的影响 [J], 杨健;曾妍;吴小翎;王志刚因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
超声联合声诺维辐照增强GFP基因在胰腺癌细胞中的转染
超声联合声诺维辐照增强GFP基因在胰腺癌细胞中的转染王俊峰;何鑫;高美娟;姜婷;单悦【期刊名称】《哈尔滨医科大学学报》【年(卷),期】2017(51)4【摘要】目的探讨超声联合声诺维微泡辐照对增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)在胰腺癌细胞Panc-1中的转染增效作用及安全性。
方法实验分为4组:单纯质粒组、质粒+微泡组、质粒+超声组和质粒+超声+微泡组。
辐照条件为超声频率1 MHz,声强1 W/cm2,辐照时间30 s,占空比20%。
按不同实验条件辐照后,应用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪评估基因转染效率,台盼蓝染色法评估细胞成活率。
结果经超声联合微泡辐照Panc-1细胞后,GFP基因转染效率较其他组显著增加,差异有统计学意义(P<0.01),且各组均未发现显著的细胞损伤。
结论超声联合声诺维微泡辐照可显著增强GFP基因在Panc-1细胞的转染效率,为临床胰腺癌基因治疗提供一种安全、有效的非病毒基因转染方法。
【总页数】4页(P300-303)【关键词】基因治疗;微泡;非病毒载体;胰腺癌;超声【作者】王俊峰;何鑫;高美娟;姜婷;单悦【作者单位】哈尔滨医科大学附属第一医院超声科【正文语种】中文【中图分类】R736.7;R445.1【相关文献】1.声诺维增强超声辐照介导pEGFP-N1转染RPE细胞的实验研究 [J], 伍瑛;杜联芳;顾青;王惠萍;王丰;李凡2.声诺维联合超声辐照增强绿色荧光蛋白质粒转染血管内皮细胞的实验研究 [J], 汤庆;徐辉雄;吕明德;岳殿超;李宝金;向邦德3.声诺维联合超声辐照介导PEX基因转染鼠胶质瘤C6细胞的实验研究 [J], 张瑞芳;张秀婷;孙璐璐;刘海艳;雷留彬;郭海燕4.超声联合声诺维辐照增强GFP基因在鼠胶质瘤C6细胞中的转染 [J], 吴长君;王俊峰;邱前义;郑淼5.超声辐照载腺病毒靶向微泡增强报告基因在小鼠颅内胶质瘤中的转染效果 [J], 徐忠烨;李小青;胡兴华;张俊槐;宦仁正;李雪松因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
脂质微泡造影剂的制备方法及其应用的研究进展
脂质微泡造影剂的制备方法及其应用的研究进展江琼超【摘要】脂质微泡是近年来国内外研究的热点之一.脂质微泡不仅是一种良好的超声造影剂,而且在医药实验研究及临床治疗方面应用较广泛,本文就其制备方法及应用的研究进展进行简述.【期刊名称】《中国介入影像与治疗学》【年(卷),期】2010(007)005【总页数】3页(P576-578)【关键词】微泡;造影剂【作者】江琼超【作者单位】中山大学孙逸仙纪念医院超声科,广东,广州,510120【正文语种】中文【中图分类】R445.11 普通脂质微泡的制备方法1.1 机械振荡法将脂质材料按一定的比例混合后,采用一定方法制备成混悬液,再利用声振仪在一定的频率下声振一段时间,同时向其内通入气体如全氟丙烷(C3F8)或空气制备出含稀有气体或空气的微泡。
采用该方法制备的纳米级脂质微泡粒径小[3-4],用作携带基因的载体转染率较高。
Ren等[3]用该方法制备能携带基因和破伤风抗毒素的超声微泡,其微泡直径约2.3 μ m,浓度为3.1×109/ml,包封率为 35%。
有学者[5]认为该方法是制备微泡造影剂的较好方式,可获得较高浓度的微泡,并大大节省制备时间。
采用该方法制备携带质粒DNA分子的脂质微泡可避免传统的声振法对DNA的损伤。
1.2 声振空化法是利用超声辐射来制备超声造影剂的方法。
其原理是:对某些低浓度有一定黏度的溶液进行一定域值强度的声振处理,液体便发生空化效应,同时产生微泡。
在声振过程中,需将探头浸入液面下一定深度,同时不能触碰瓶底或瓶壁,还需保持无菌操作,且存在金属污染的可能性。
此法常选用的膜材料有表面活性剂、蛋白质及脂类物质。
声振空化法方法简单,但受磷脂、白蛋白等自然物质本身的限制,不能很好地控制微泡的声学特性,粒径分布均一性欠佳,声衰减明显。
Fang等[6]采用此法制备的包含全氟化碳、椰子油等的脂质微泡,大小均匀,其包封率约为90%,平均直径为250～350 nm。
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Ｚｈｕ Ｙ ｕ ｆ ｎ ， Ｈ ｕ Ｌｉ ， ＬｉＰａ ， ｅ ｌ ａｎ ａ ｇ ｎａ ｎ。 ｔａ
粒 ＋脂 质 体 组 ， 比较 各 组 转 染效 率 。
结 果 （ ）声 强 ０ ５ ． ５Ｗ／ ｍ 超 声 辐 照 ，细 胞 死 亡 率 ＜ １ ；（ ）０ ２ × １ 。ｍｌ ０ １ × １ ｍｌ 度 的微 泡 联 合 ０ ５ １ ． 、０ ７ ｃ 的 Ｏ ２ ． ４ ０ ／ 或 ． ２ ０／ 浓 ．
１ Ｄｅ ａｒｍ ｅ ｙｎ ｃ ｌ ｇｙ， ２ ｄ Ａ ｆｉｉｔ ｄ Ｈ ｏ ｐ ｔ ｌｏ ． ｐ ｔ ｎｔｏｆＧ ｅ ｏｏ ｎ ｆｌａ ｅ ｓ ｉａ ｆＣｈｏ ｎｇｑ ｎ ｅ ｃ ｌＵ ｎ ｖ ｒ ｉｙ， Ｃｈｏｎ ｉ ４ ０１ Ｃｈｉ ｉ ｇ Ｍ ｄｉａ ｉ ｅ ｓｔ ｇｑｎｇ ００ ０ ｎａ ２ Ｄｅ ｒ ｍ ｅ ｔ ｏ ｙ ｃ ｏｇｙ， ２ ｆｌａ ｅ ｏｓ ｔ ｅ ｔ ｎ Ｃｈｉ ． ｐａ ｔ ｎ ｆＧ ｎｅ ｏｌ ｎｄ Ａｆｉｉ ｔ ｄ Ｈ ｐｉａｌｏｆＷ ｓ ｅ ｎａ， Ｓｉｈｕ ｎ ｎ ｖ ｒ ｉｙ， Ｃｈｅ ｇｄ ６ ００ Ｃｈ ｎ ｃ ａ Ｕ ｉ ｅ ｓｔ ｎ ｕ １ ４１ ｉａ ３ Ｄｅ ｒ ｍ ｅ ｔ ｆＵ ｌｒ ｏｕｎ ． ｐａ ｔ ｎ ｏ ｔａｓ ｄ， ２ ｆｉｉ ｔ ｄ Ｈｏｓ ｔ ｌｏｆＣｈｏ ｑｉ ｅ ｉａ ｎｉ ｒ ｉｙ ｎｄ Ａ ｆｌａ ｅ ｐｉａ ｎｇ ｎｇ Ｍ ｄｃ ｌＵ ｖｅ ｓｔ
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微泡 超声辐照 卵巢 癌 转 染
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中 国超 声 医学 杂 志 ２ ０ ０ ８年
第 ２ 第 ４期 ４卷
Ｃ ｉｅｅＪＵｌ ａｏ ｎ ｄＶｏ ４ Ｎｏ４ ２０ ｈｎ ｓ ｔ ｓ ｕ ｄＭｅ ｌ ｒ ２ ０８
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自制 脂 质 微 泡 联 合 超 声 辐 照 介 导 ｐ ＧＬ３Ｐ ｏ ｔｒＥＧＦ 一 ｒ ｍｏ ｅ— Ｐ 质 粒 转 染 ９ 癌 细 胞 的 实 验 研 究 Ｉ 巢
朱 元 方 胡 丽 娜 李 攀 王 志 刚
摘 要
目的 探 讨 超 声 微 泡 介 导 基 因转 染 卵 巢 癌 细胞 的 可 行 性 及 转 染 效 率 。 方 法 （ ）以 不 同 声 强 作 用 Ｓ Ｖ３ 胞 ６ ，筛 选 出 对 细 胞 活 性 无 明 显 抑 制 的 声 强 ；（ ）将 筛选 出 的 声 强 分别 与不 同浓 度 １ ＫＯ 细 Ｏｓ ２ 的微 泡 联 合 作 用 于 Ｓ ＯＶ３细 胞 ，筛 选 出 对 细 胞 无 明 显 抑 制 的 最 适 声 强 和 微 泡 浓 度 的 组 合 ；（ ）将 Ｓ ＯＶ３细 胞 分成 ５ ，不 同方 Ｋ ３ Ｋ 组 式 转 染 ｐ ３ Ｐ ｏ ｔｒＥ Ｐ质 粒 ： （ ）裸 质 粒 组 ； （ ）质 粒 ＋微 泡 组 ；（ ）质 粒 ＋超 声 组 ；（ ）质 粒 ＋超 声 ＋微 泡 组 ； （ ）质 ＧＬ 一 ｒ ｍｏ ｅ— ＧＦ １ ２ ３ ４ ５
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Ｔｏ ｎ ｅ ｔ ａ ｅ ｈ ｆａ ｉｉｔ ａ ｄ ｔａ ｓｅ ｔ ｎ ｆｉｉｎ ｙ ｆ ｃｏ ｅ ｏ ｓ ｌｓ ｄ ｉ ｖ ｓｉ ｔ ｔ ｅ ｅ ｓｂｌ ｙ ｎ ｒｎ ｆｃｉ ｅｆ ｅ ｃ ｏ ｅ ｔｇ ｎ ｕ ｐａ ｍｉ ｇ ｉ ｏ ｃ
ｔ ｅ ｓ ｒ ｅ ｄ ｕ ｔ ａ ｏｕｎ ｎｔｎｓ ｔ ｉｈ ｍ ｉｒ ｂｕｂｂ ｅ ｆｅ ｅ ｏ ｅ ｒ ｔｏｎ， Ｋ ０Ｖ ３ｃ ｌｓｗ ｅ ｅｕｎｄ ｒｔ ｍ ｐ ｔｏｆ ｈ ｃ ｅ ｎｅ ｌｒ ｓ ｄ ｉ ｅ ｉｙｗ ｔ ｃ ｏ ｌ ｓｏｆｄｉｆ ｒ ｎｔｃ ｎｃ ｎｔａ ｉ Ｓ ｅ ｌ ｒ ｅ ｈｅ ｉ ａｃ
ｗ ／ｍ 超 声 辐 照 ，细 胞 死 亡 率 ＜ １ ；（ ）第 ４ 与第 ５ 转 染 效 率 无 区 别 （ ｃ ｏ ３ 组 组 Ｐ一０ １ ３ ，但 高 于第 １ 、 ３ ．３ ） 、２ 组 （ ＜ｏ０１ 。 Ｐ ． ０ ）
结论 适 当浓 度 微 泡 联 合 超 声 辐 照 能 将 外 源 基 因在 卵 巢 癌 细 胞 中高 效 转 移 。
ｔａ ｓｅｔｄ ｉｔ ＫＯ ｅ ｓｂ ｌ ａ ｏ ｎ — ｄａｅ ｃｏ ｕ ｂｅ ． ｔ ｏ ｓ ① Ｉ ｒ ｅ ｏ ｓ ｒｅ ｕ ｈ ｐｉ ｌ ｒｎ ｆｃｅ ｏ Ｓ Ｖ３ ｃｌ ｙ ｕ ｔ ｓ ｕ ｄ ｍｅ ｉ ｄ ｍｉ ｂ ｂ ｌ Ｍｅｈ ｄ ｎ ｌ ｒ ｔ ｒ ｓ ｎ ｏ ｄ ｒｔ ｃｅ ｎ ｏ ｔ ｅｏ ｔ ｔ ｍａ
ｉｔｎ ｉ ｆ ． ， ． ５ １ ０ １ ２ ， ． ｎ ． ／ｍ ｒ ｓ ｅ ｔ ｅｙ ａ ｄｔ ｅ ｉ ０ｓ ｓ ｏ ｔ ｕ ｕ ｌ ； Ｃ ｍｂｎ ｄ ｎ ｅ ｓ ｙ ｏ ５ ０ ７ ， ． ， ． ５ １ ５ａ ｄ ２ ０ｗ ｃ ， ｅｐ ｃｉ ｌ ， ｎ ｈ ｍｅ６ ｗａ ｎ ｉ ｏ ｓ ② ｏ ｉｅ ｔ ０ ｖ ｔ ｃ ｎ ｙ