核酸扩增检测实验室设计及工作流
核酸检测实验室建设方案书
核酸检测实验室建设方案书一、平面布局（一）实验室功能分区普通核酸检测PCR实验室依据所使用的方法可分为试剂准备、标本制备、核酸扩增、产物分析等四个区域。
全自动定量PCR实验室通常设置三个工作区，即试剂准备区、标本制备区、核酸扩增和产物分析区，普通PCR 实验室后两个区合并。
一体化自动化分析PCR 实验室原则上设置两个工作区，即试剂准备区、自动检测区，普通PCR实验室后三个区合并。
各个区可组合布置，也可分散布置。
（二）实验室平面布局实验室应在建筑物中自成隔离区，应有出入控制。
试剂准备区、标本制备区和核酸扩增及产物分析区等四个区域在物理空间上必须是完全相互独立的。
可以分散布置。
为避免交叉污染，进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行，即只能从试剂准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。
不能将工作服带出。
每个工作区域必须有明确的标记，避免不同工作区域内设备、物品混用。
各实验区之间的试剂及样品传递应通过传递窗进行。
整体划分为∶PCR区域、独立缓冲间，及辅助房间区域，缓冲间可兼做防护服更换间。
当缓冲间的门设置互锁时，应在互锁门的附近设置紧急手动解除互锁开关。
保持合理梯度，保证气流从辅助房间流向核心区。
可降低扩增区内的气压以避免气溶胶从本区漏出。
（三）人流、物流流向人流∶工作人员→一更→二更→缓冲间→洁净走廊→缓冲→核心试验区域洁物∶原料→入口→样品接收→传递窗→洁净走廊→缓冲→核心试验区域污物∶污物→洁净走廊→传递窗→高压灭菌→传递窗→外部进入各个区域必须严格按照单一方向进行，不同的工作区域使用不同的工作服（例如不同的颜色）。
工作人员离开时，不得将工作服带出。
这种人员的单向流动可以降低因人员的流动带来的交叉污染风险。
所有的物品进入实验区必须经过双扉互锁传递窗，利用传递窗消毒后才可进入，实验室内所有物品也必须经过传递窗才可以传递到实验室以外的清洁公共区。
这种物品有组织的单向流动可以降低物品的差错和混淆的风险。
血站核酸扩增检测实验室工作规范
血站核酸扩增检测实验室工作规范1血站核酸扩增检测实验室工作规范为使核酸扩增检测技术有效地应用于血液筛查，保证血液安全，特制定本规范。
一、血站核酸扩增检测实验室的规范化设置及其管理血站核酸扩增检测实验室的规范化设置详见《临床基因扩增检验实验室管理办法》（卫医发[2010](待定)号文）附件《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》。
为避免污染，必须严格遵循《临床基因扩增检验实验室设置标准》设置血站核酸扩增检测实验室。
血站核酸扩增检测实验室应根据仪器设备特点设置工作区域，各区域仪器设备应固定不可移至其它区域。
各区域都必须有明确的标记，以避免设备实验器材如加样器、试管或加样器吸头架、试剂等从其各自的区域内移出从而造成不同的工作区域间设备和实验器材发生混淆。
进入各个工作区域必须严格遵循单一方向顺序，即只能从试剂贮存和准备区、标本处理（混样）、核酸纯化、扩增检测区，避免发生交叉污染。
在不同的工作区域应使用不同颜色或有明显区别标志的工作服，以便于鉴别。
此外，当工作者离开工作区时，不得将各区特定的工作服带出。
清洁方法不当也是污染发生的一个主要原因，因此实验室的清洁应按试剂贮存和准备区至扩增检测区的方向进行。
不同的实验区域应有其各自的清洁用具以防止交叉污染。
（一）试剂贮存和准备区下述操作在该区进行：贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。
贮存试剂和用于标本制备的材料应直接运送至试剂贮存和准备区，不能经过产物分析区。
在打开含有反应混合液的离心管或试管前，应将其快速离心数秒。
试剂原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的贮存试剂。
当贮存试剂溶液经检查可用后，应将其分装贮存备用，避免由于经常打开反应管吸液而造成污染。
含反应混合液的离心管或试管在冰冻前都应快速离心数秒。
大多数用于扩增的试剂都应冰冻贮存。
为避免因单次反应取液而频繁的冻融主贮存试剂，应分装冰冻贮存试剂溶液。
贮存试剂的分装体积根据通常在实验室内一次测定所需的扩增反应数来决定。
PCR实验检测标准操作规范
PCR检测实验室操作规范一、PCR 实验室的设置及管理1．目的：建立实验室的合理设置和科学管理，防止实验污染，保证检测结果的可靠性。
2．适用范围：本程序适用于分子诊断室的设置、工作流程和日常管理等。
3．负责人：4．细则：4．1流感实验室为急传所的专业实验室，从事临床标本的基因扩增检测及相关科研工作等。
4．2 本实验室采用实时荧光定量（定性）PCR 技术作为病毒基因诊断的主要手段，实验室分为三个区：试剂准备区（第一区）、标本处理区（第二区）、扩增分析区（第三区）。
每一工作区配备专用的设备、仪器、辅助设施、耗材、清洁用品、办公用品、专用工作服，并有明显的区分标识。
标本的接收则在检验科标本接收处进行。
4．3 各工作区专用的仪器设备、办公用品、工作服、实验耗材和清洁用具等，不可混用。
4．4 各工作区配置、功能和内务管理见各相关SOP 文件。
4．5 严格遵守从“试剂准备区→标本处理区→扩增分析区”的单一流向制度，不得逆向进入前一工作区。
4．6 非本实验室工作人员，未经许可不得入内；进修、实习或其他科室人员因科研活动需要，进入实验区域（试剂准备区、标本处理区、扩增分析区）需首先熟悉本程序的各项规定并严格遵守执行，在本实验室人员监督指导下进行。
4．7 实验完毕后做好清洁消毒工作。
二、PCR 实验室工作制度1．目的：保持良好的工作环境，以确保检测结果的可靠性，防止交叉污染，防止差错、事故及纠纷的发生。
2．适用范围：所有本实验室人员。
3．负责人：4．细则：4．1 本实验室进行临床基因扩增检测及相关实验工作，不得进行其它实验操作。
4．2 各区的用品不得混用。
4．3 在各区的实验操作过程中，操作者必须戴手套和帽子，严格按照操作规程。
4．4 试剂准备区只能进行试剂的贮存及配制等相关操作（见相关SOP 文件）。
4．5 标本处理区只能进行临床标本的保存，核酸提取、保存及其加入至扩增反应管和测定RNA 时cDNA 的合成（见相关SOP 文件）。
核酸扩增检测实验室设计及工作流程
核酸扩增检测实验室设计及工作流程一、核酸扩增检测实验室设计1. 实验室空间布局设计核酸扩增检测实验室空间布局应根据实验室操作流程设计，尽量使实验室布局合理、流畅。
一般实验室需要分为准备区、处理区、分析区和储存区四个区域。
（1）准备区：放置进出实验室所需的物品、试剂、耗材等。
（2）处理区：扩增、提取、检测等样品处理操作区域。
该区域需配置相应的消毒设备和抽风设备，并考虑操作人员的人流量，确保操作空间充足。
（3）分析区：PCR扩增、电泳分析等实验操作区域。
该区域需要保持相对干净和静电消除，重要仪器和设备应单独放置。
（4）储存区：将操作过的样品、耗材和试剂分类存放，且应配置低温、恒温、干燥等设备，以确保长期保存。
2. 实验室环境要求核酸扩增检测实验室的环境应符合以下要求：（1）室内温度：18~28℃。
（2）相对湿度：40%~60%。
（3）装修材料：实验室室内装修材料应为易清洁、防腐蚀材料。
（4）光照：实验室应配备恒光可调光源；（5）洁净度：除配置洁净工作台外，实验室墙、地面和物品表面均需定期消毒。
3. 实验室设备及器具要求（1）洁净工作台：核酸扩增实验涉及到高度灵敏的样品处理和PCR扩增，容易引入异物和污染物，必须配置洁净工作台。
（2）PCR仪：PCR仪是核酸扩增检测的核心仪器，具有高温度精度和均匀性，能精确控制温度变化，使PCR反应体系在恒定的温度下进行扩增。
（3）显微镜：核酸扩增检测的结果常常需要用到显微镜，观察PCR扩增产物的大小、形态、颜色等。
（4）离心机：用于离心样品沉淀，制备溶液和样品混合等。
（5）电泳仪：电泳仪用于检测PCR扩增产物，并可用于结合染色方法，对扩增产物进行定性、定量和分析。
二、核酸扩增检测实验室工作流程1. 样品获取和处理根据样品种类，样品获取后需进行不同处理。
如环境样品需要加入缓冲液，以及粉尘、沙尘、胶片、坦克等样品需要分解。
2. DNA/RNA提取将样品经过离心后，取沉淀样品，加入DNA/RNA提取试剂，进行蛋白酶处理和洗脱DNA/RNA等处理步骤，以提取出样本中的DNA/RNA。
临床基因扩增实验室建设方案
临床基因扩增实验室建设方案临床基因扩增实验室是一种专门用于进行基因扩增实验的实验室，其主要目的是为临床诊断、遗传性疾病检测和个性化治疗提供支持。
在建设临床基因扩增实验室时，需要考虑实验室的空间布局、设备和仪器选择、安全措施以及实验流程的优化等方面。
下面将介绍一种基本的临床基因扩增实验室建设方案。
一、实验室空间布局设计1.实验室布局：实验室应分为样品处理区、试剂制备区、反应区、设备区、储存区和办公区等功能区域。
各区域之间应有明确的分隔，并便于流程的连接和样品的顺利传递。
2.通风系统：实验室的通风系统应保证空气流通良好，排除有害气体和异味。
应设置排气扇和通风窗，同时注意实验室内的气压均衡，确保实验过程中的安全。
3.照明和净化：实验室的照明应充足明亮，以利于操作人员进行实验操作。
同时需要安装净化设备，如空气净化器和超净工作台等，保证实验环境的洁净度。
4.消毒区：设置专门的消毒区，用于原料、试剂和实验器具的消毒处理，预防交叉污染和实验结果的失真。
二、设备和仪器选择1.样品处理设备：选择适合实验需求的离心机、移液器、研钵、研钉等样品处理设备，保证实验操作的准确性和高效性。
2.扩增仪器：选择高质量的PCR扩增仪器，如热循环仪、扩增仪和实时PCR仪等，确保扩增反应的准确性和灵敏度。
3.净化设备：选用超净工作台、空气净化器和消毒柜等净化设备，保证实验过程的无菌无尘。
4.数据分析系统：配置数据分析软件和电脑，用于对扩增结果进行分析和解读，提高实验的准确性和可靠性。
三、安全措施1.实验操作规范：进行实验前，必须了解实验操作规范，严格按照操作流程进行实验，避免操作失误和交叉污染。
2.个人防护：操作人员应佩戴实验服、手套、口罩等个人防护用品，避免接触有害物质和致病微生物。
3.废物处理：实验结束后，应将废弃物品、试剂和生物材料按规定进行分流处理，确保废物不会对环境和他人造成危害。
四、实验流程优化1.实验标准化：建立实验操作标准和记录表，保证实验过程的追溯性和稳定性，确保实验结果的可靠性。
pcr实验室流程
pcr实验室流程PCR实验室流程一、引言PCR（聚合酶链式反应）是一种在实验室中常用的分子生物学技术，用于扩增DNA片段。
PCR实验室流程是指在进行PCR实验时所需的步骤和操作。
本文将详细介绍PCR实验室流程的各个环节。
二、实验前的准备工作1. 提取DNA样本：从待检测的生物体中提取DNA，可以通过使用DNA提取试剂盒进行提取。
2. 设计引物：根据需要扩增的目标DNA片段的序列，设计合适的引物。
引物应具有高度特异性，避免与其他非目标序列结合。
3. 制备PCR反应体系：根据所需扩增的目标DNA片段的大小和扩增效率，精确计算反应液中的各个组分的浓度。
三、PCR反应体系的配制1. 选择合适的PCR反应管：PCR反应管应具有良好的热传导性能，以保证反应的均一性。
2. 加入引物：根据所设计的引物，向反应管中加入合适浓度的引物。
引物的浓度应根据实验需要进行优化。
3. 加入模板DNA：向反应管中加入所提取的DNA模板。
模板DNA的浓度应在合适范围内，过高或过低的浓度都会影响PCR反应的效果。
4. 加入PCR反应缓冲液：PCR反应缓冲液中含有适当的离子浓度和pH值，以保证PCR反应的进行。
5. 加入dNTPs：向反应管中加入dNTPs，提供PCR反应所需的四种核苷酸单体。
6. 加入聚合酶：向反应管中加入高保真聚合酶，以保证PCR反应的准确性和高效性。
7. 加入辅助物质（如Mg2+）：根据实验需要，向反应管中加入辅助物质，如Mg2+，以优化PCR反应的条件。
四、PCR反应的进行1. 放入热循环仪：将配制好的PCR反应管放入热循环仪中，进行PCR反应。
2. 程序设定：根据实验需要，设定PCR反应的温度和时间参数。
常见的PCR反应程序包括：变性步骤、退火步骤和延伸步骤。
3. 变性步骤：将PCR反应管加热至94-98℃，使DNA解旋成单链。
4. 退火步骤：将PCR反应管降温至引物的退火温度，使引物与目标DNA序列结合。
1-核酸扩增荧光检测实验室设置和管理
核酸扩增荧光检测实验室设置和管理1．目的：依照实验室管理规范实施全面质量管理，保证检验质量。
2．适用范围：适用于所有开展核酸扩增荧光检测项目的实验室及相关人员。
3．负责人：由实验室制定程序性文件，由专业技术人员负责执行，实验室主管负责监督。
4. 内容4.1 实验室分区设置4.1.1核酸扩增荧光检测实验室设置为试剂准备区、标本制备区、扩增区和产物分析区。
前三个区独立设置，各有一个缓冲间，用于更换工作服、鞋套及维持空气流向。
产物分析区分开设置，实验室布局见附图01、02。
进入各个工作区域工作时,必须严格遵守单一方向顺序,即从第一区试剂准备区→第二区标本制备区→第三区扩增区→产物分析区。
各区门前有醒目标志，一、二区通过排风装置保持正压，三、四区通过抽风装置保持负压。
4.1.2各室的实验物品（含移液器、试管架、吸头盒、记录本、笔等），不得混用，须贴上不同标签予以区别。
4.1.3各区配有不同颜色工作服，一区为粉红色，二区为蓝色，三区和四区为白色。
进入实验室，必须更换本室有颜色标识的工作服，穿上鞋套。
4.2 核酸扩增荧光检测实验室工作制度4.2.1实验室为工作场所，应保持整洁、安静、维护良好的工作环境。
4.2.2遵守医院的规章制度，严防差错事故及纠纷的发生。
在工作期间不得接待与工作无关人员。
4.2.3实验室进行基因扩增检测及相关实验工作，不得进行其他实验操作。
4.2.4严格执行本实验室的各项操作规程，及时做好详细记录，力求准确、可靠。
实验完毕，做好清洁、整理及统计工作。
4.2.5非本室工作人员，未经许可不得入内。
进修、实习人员或其他科室人员需在本室进行相关实验，应在本室实验人员指导下进行。
4.2.6仪器由专人负责，未经许可，不得随意使用或挪用，爱护使用仪器，定期进行保养与维修。
4.2.7爱护医院财产，厉行节约，离开实验室需关好门窗及水电等。
4.3 标本接收区工作制度和工作流程4.3.1此区设在检验科标本接收室，遵守检验科标本接收制度。
核酸扩增及结果分析操作程序
赵树理（1906--1970），原名赵树礼，山西沁水县尉迟村人。
现代著名小说家、人民艺术家。
1906年9月24日出生在山西省沁水县贫苦农民家庭。
1937年加入中国共产党。
历任中国文联常务委员、中国作家协会理事、中国曲艺协会主席，曾任《曲艺》、《人民文学》编委、中国共产党第八次代表大会代表，全国人民代表大会第一、二、三届代表。
他的作品乡土气息浓厚，有一种新鲜活泼、为老百姓喜闻乐见的大众化风格，形成一个俗称“山药蛋派”的文学流派。
赵树理在中国现代文学史上占有重要地位。
早在抗日战争时期，他就致力于革命文艺的通俗化、大众化工作，写出了许多反映农村社会生活、深受广大群众欢迎的小说，如《小二黑结婚》（1943）、《李有才板话》（1943）、《李家庄的变迁》（1946）、《三里湾》、《福贵》、《登记等。
全国解放以后，继续深入农村生活，耕笔不辍，驰骋于中国文坛。
短篇小说《锻炼锻炼》、长篇评书《灵泉洞》（上集），以及《实干家潘永福》、长篇小说《三里湾》（1955）等，都令人爱不释手。
赵树理是我国真正熟悉农村、热爱人民的少有的杰出作家之一，他的作品真实地再现了我国农村几十年来的巨大变革，而且具有独特的民族形式和民族风格，在弘扬我国优秀民族文艺的传统、促进革命文艺的大众化方面，作出了富有成果的贡献。
赵树理小说与晋东南民俗在中国现当代文学史上有个小说流派“山药蛋派”。
这个流派以著名作家赵树理为代表，因其作品具有新鲜朴素的民族形式，生动活泼的群众语言，清新浓郁的乡土气息，而受到广大读者的喜爱。
这个流派还包括马烽、西戎、束为、孙谦、胡正等一批小说家。
在50年代后期，他们结成了一个作家群体，创作出众多带有“山药蛋味”的优秀作品。
如赵树理的《小二黑结婚》、《李有才板话》、《三里湾》、《李家庄的变迁》、《登记》，马烽的《三年早知道》、《我的第一个上级》，西戎的《盖马棚》、《姑娘的秘密》，孙谦的《伤疤的故事》，胡正的《两个巧媳妇》，以及年青作家韩文洲、杨茂林、李逸民、义夫、成一等人的作品。
新冠病毒核酸检测实验室设计与建设SICOLAB
新冠病毒核酸检测实验室设计与建设SICOLAB一、PCR实验室设计规范PCR（聚合酶链式反应）实验室又叫基因扩增实验室《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》（卫医发[2002]10号）《临床基因扩增检验实验室工作规范》（卫检字[2002]8号）二、PCR实验室简介及分类SICOLAB实验室内会为核酸检测准备4个区域，分别是试剂准备区、样本准备区、扩增区、扩增产物分析区。
其中试剂准备区负责接收患者样本，样本准备区则负责进行对样本的核酸进行提取，扩增区则是扩增复制核酸样本，扩增后分析区就是分析样本内核酸能能否与标准样配对，通过仪器检测的到，就判断成阳性，如果检测不到就是阴性。
PCR实验室分类：普通PCR实验室、全自动定量PCR实验室、一体自动化分析PCR实验室。
三、PCR实验室功能区域SICOLAB试剂准备区：是PCR实验室中最为“洁净”的区域，它不应有任何核酸成分的存在，否则将严重影响检测结果的准确性。
标本的制备应在生物安全柜内进行。
主要设备：冰箱、低温冰箱、混匀器、微量加样器（0.2-1000ul）、移动紫外灯。
样本准备区：核酸提取、贮存，扩增反应管制作。
主要设备：冰箱、超低温冰箱、高速冷冻离心机、混匀器、微量加样器（0.2-1000ul）、移动紫外灯、水浴锅、生物安全柜。
扩增区：扩增反应体系的配置和核酸的提取加入要在扩增区内进行。
主要设备：扩增仪、离心机、微量加样器（0.2-1000ul）、移动紫外灯。
扩增产物分析区：产物分析区最后一个工作区域，用于扩增片段的分析。
主要设备：凝胶成像分析仪、电泳仪、电泳槽、微量加样器（0.2-1000ul）、移动紫外灯。
四、PCR实验室工作流向SICOLAB进入各工作区域必须严格按照单一方向进行。
即试剂准备区→样本准备区→扩增区→扩增产物分析区。
五、PCR实验室压差及气流控制SICOLAB1）试剂准备区是工艺流线的开始，设计为正压或常压，避免外界环境的污染。
2）样品制备区一般为常压或负压，大多数情况下设计成二级生物安全实验室，避免实验产物溢出，污染外界环境。
PCR实验室工作导则
医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则一、临床基因扩增检验实验室的设计（一）临床基因扩增检验实验室区域设计原则。
原则上临床基因扩增检验实验室应当设置以下区域：试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区。
这 4 个区域在物理空间上必须是完全相互独立的，各区域无论是在空间上还是在使用中，应当始终处于完全的分隔状态，不能有空气的直接相通。
根据使用仪器的功能，区域可适当合并。
例如使用实时荧光 PCR 仪，扩增区、扩增产物分析区可合并；采用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪，则标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并。
各区的功能是：1.试剂储存和准备区：贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合液的准备，以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。
2.标本制备区：核酸（RNA、DNA）提取、贮存及其加入至扩增反应管。
对于涉及临床样本的操作，应符合生物安全二级实验室防护设备、个人防护和操作规范的要求。
3.扩增区：cDNA 合成、DNA 扩增及检测。
4.扩增产物分析区：扩增片段的进一步分析测定，如杂交、酶切电泳、变性高效液相分析、测序等。
（二）临床基因扩增检验实验室的空气流向。
临床基因扩增检验实验室的空气流向可按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区进行，防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。
可按照从试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区方向空气压力递减的方式进行。
可通过安装排风扇、负压排风装置或其他可行的方式实现。
（三）工作区域仪器设备配置标准。
1.试剂储存和准备区。
（1）2～8℃和-20℃以下冰箱。
（2）混匀器。
（3）微量加样器（覆盖 0.2-1000µl）。
（4）可移动紫外灯（近工作台面）。
（5）消耗品：一次性手套、耐高压处理的离心管和加样器吸头。
（6）专用工作服和工作鞋(套)。
（7）专用办公用品。
2.标本制备区。
（1）2-8℃冰箱、-20℃或-80℃冰箱。
（2）高速离心机。
（3）混匀器。
核酸扩增检测实验室设计及工作流-PPT精品文档
无“基因”或“核酸”概念的重要性
Evaluation only. ted with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2 Copyright 2019-2019 Aspose Pty Ltd.
理想的核酸扩增实验室设计A
产物分析区 扩增区 标本制备区 试剂准备区
Evaluation only. 空气流向 空气流向 空气流向 ted with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2 空气流向 Copyright 2019-2019 Aspose 缓冲间 Pty Ltd. 缓冲间 缓冲间
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因地制宜
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方便工作
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扩增区 门
标本制备区
门 产物分析区
门 试剂准备区
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外走廊
血液标本的接收
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通常的工作流程：标本采集
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血清分离
tedl with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2 应在四个测定区域之外的地方或区域内接 收 Copyright 2019-2019 Aspose Pty Ltd.
试剂准备区
其他实验室
其实验室
其他实验室
空气流向
其他实验室
PCR实验室(新冠核酸检测实验室)SOP文件
XXX医院检验科基因扩增实验室标准操作规程适用部门：基因扩增实验室XX医院目录第一部分工作制度及程序 (1)PCR实验室各区工作制度及程序 (1)PCR实验室人员配置及培训程序 (4)PCR实验室清洁程序 (5)PCR实验室废弃物处理程序 (6)PCR实验室生物安全防护程序 (7)抱怨的处理程序 (8)PCR实验室应急处理程序 (9)第二部分标准操作规程 (11)临床标本的采集及处理操作程序 (11)标本接收、拒收及保存程序 (12)实验室化学试剂的管理和配制标准操作程序 (14)标本前处理(核酸纯化)标准操作程序 (16)新型冠状病毒核酸检测标准操作程序 (18)人乳头瘤病毒分型检测（基因芯片法）标准操作规程 (24)核酸扩增及产物分析检测的操作程序 (30)检测结果分析的标准操作程序 (31)检测结果报告程序 (34)实验记录管理程序 (35)第三部分设备SOP文件 (36)AU1001-96全自动核酸提取仪（96 通道）操作流程、校准及维护保养程序 (36)乐普Lepgen-96全自动医用PCR 分析系统操作流程、校准及维护保养程序 (41)净化工作台SW-CJ系列操作流程及维护保养程序 (48)博科生物安全柜操作流程及维护保养程序 (49)多恒DHG-9053BS-III电热恒温鼓风干燥箱操作流程及维护保养程序 (54)多恒HH-100干式恒温器（金属浴）操作流程、校准及维护保养程序 (56)多恒TD4Z低速离心机操作流程及维护保养程序 (60)多恒DH18R台式高速冷冻离心机操作流程及维护保养程序 (66)多恒MINI10K迷你离心机操作流程及维护保养程序 (74)多恒MIX-2500微型旋涡混合/匀器操作流程及维护保养程序 (76)多恒2-96板式离心机操作流程及维护保养程序 (78)威高MSL.NC80高压灭菌器操作流程及维护保养程序 (80)紫外线消毒车操作规程操作流程及维护保养程序 (91)澳柯玛药品冷藏柜操作流程及维护保养程序 (93)澳柯玛普通冰箱操作维护规程 (95)移液器操作流程、校准及维护保养程序 (97)传递窗操作流程、校准及维护保养程序 (101)第四部分实验室质量控制 (102)实验室试剂、耗材购买管理程序 (102)试剂的质检标准操作程序 (104)实验耗材质检的标准操作程序 (105)室内质控标准操作程序 (107)室间质评管理程序 (111)第一部分工作制度及程序PCR实验室各区工作制度及程序1 目的：实现PCR实验室日常专人负责，确保实验室操作的规范性。
PCR实验室分区设置及要求
怎样编写SOP？
本区是最主要的扩增产物污染来源，因此必须注意 避免通过本区的物品及工作服将扩增产物带出。在 使用PCR-ELISA方法检测扩增产物时，必须使用 洗板机洗板，废液必须收集至1mol/L HC1中，并 且不能在实验室内倾倒，而应至远离PCR实验室的 地方弃掉。用过的吸头也必须放至1mol/L HCl中浸 泡后再放到垃圾袋中按程序处理，如焚烧。
把，此外还放置高压后 PCR 管饭盒，枪头盒、记号笔及废液缸， 这些物品均不得拿出超净工作台外。 3. 超净工作台内只进行打开和配制试剂的操作，不得在内加样。 4. 配制试剂及反应体系前应将试剂混均，粉末状试剂应先离心后再 溶解。各种酶类应放置在自制冰盒上。配制完毕后应及时将剩余 试剂放回贮存区域。 5. 反应管应放在自备的架上或夹在手指缝中带到样品制备区。 6. 试剂按位存放，最高层放高压去离子水，第一抽屉放酶、底物、 引物、缓冲液。每人分装小份试剂使用。第二、三抽屉备用试剂， 每人分装各自所用标本放于各自标本盒中，防止交叉污染。 7. 一周内经常使用的底物、引物、缓冲液可放 4℃保存。 8. 每天实验结束后，实验区紫外线照射 30 分钟。
下述工作在本区内进行：DNA或cDNA扩增。 此外，已制备的DNA模板和合成的cDNA(来 自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自 试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也 可在本区内进行。在巢式PCR测定中，通常 在第一轮扩增后必须打开反应管，因此巢式 扩增有较高的污染危险性，第二次加样必须 在本区内进行。
用于RNA扩增检测的样本制备好以后，应 立即进行cDNA合成，因为cDNA链较RNA 稳定，保存相对容易。为保证逆转录反应 的需要，应在标本制备区设置一个以上的 温育装置。
cDNA合成的理想温度依所使用的酶而定， 倾向于使用一步法：即使用在扩增反应缓 冲液条件下具有逆转录活性的热稳定的 DNA聚合酶进行逆转录，其较cDNA合成后 再开盖以调节缓冲液或加入聚合酶进行扩 增发生污染的可能性降低。
核酸检测实验室标准
核酸检测实验室标准一、实验室布局和设施1.实验室应设有独立的试剂准备区、样品处理区、扩增分析区和扩增产物分析区，各区域之间应具备有效的隔离和防护措施。
2.实验室设施应符合生物安全二级实验室的要求，并具备相应的防护设备，如实验室服、手套、口罩、眼睛保护等。
二、实验室人员1.实验室人员应具备相关的专业知识和技能，并经过相应的培训和考核。
2.实验室人员应遵守实验室的各项规章制度和工作流程，保证实验室工作的安全和质量。
三、实验室设备1.实验室应配备核酸检测所需的仪器设备，如核酸提取仪、PCR仪、电泳仪等。
2.实验室设备应定期进行维护和保养，并经过相关的校准和验证。
四、实验室物料1.实验室应使用符合要求的试剂和耗材，如核酸提取试剂、PCR扩增试剂、胶等。
2.实验室物料应按照规定进行储存和管理，并建立严格的验收和领用制度。
五、实验室操作规范1.实验室应建立完善的操作规范，包括样品采集、运输、接收、处理等环节。
2.实验室操作规范应明确各项操作的具体要求和标准，确保操作的准确性和安全性。
六、实验室安全与防护1.实验室应建立完善的安全与防护制度，包括生物安全、化学危险品管理、废弃物处理等方面。
2.实验室应配备相应的安全设备和个人防护用品，如灭火器、安全柜、紧急洗眼器等。
3.实验室人员应定期进行安全培训和演练，提高安全意识和应对能力。
七、实验室质量保证1.实验室应建立完善的质量保证体系，包括样品质量控制、试剂质量控制、仪器设备质量控制等方面。
2.实验室应定期进行内部质量审核和外部质量评估，确保实验室工作的准确性和可靠性。
3.实验室应积极开展科研和学术活动，提高自身的技术水平和质量水平。
八、实验室废物处理1.实验室应按照相关规定进行废物处理和处置，确保不污染环境和危害人员健康。
2.实验室废物处理应包括医疗废物的分类收集、运输、贮存和处置等环节，并建立相应的管理制度和操作规程。
医院大规模新冠核酸检测实验室管理制度
医院大规模新冠核酸检测实验室管理制度一、总则为规范医院大规模新冠核酸检测实验室的管理，保障实验室工作的安全和正常进行，提高工作效率和检测质量，特制定本制度。
二、实验室管理组织架构实验室设立实验室主任、实验室副主任、实验室技术人员、实验室管理人员，并设立实验室委员会，负责实验室的日常管理、技术指导和质量控制。
实验室主任：负责实验室的整体管理和指导工作，协调各部门之间的沟通和协作，确保实验室的正常运行。
实验室副主任：协助实验室主任进行管理工作，负责实验室质量管理系统的建立和持续改进。
实验室技术人员：根据工作需要，参与样本的采集、检测、分析和结果报告等工作，并负责相关数据的录入和统计分析。
实验室管理人员：负责实验室的日常管理工作，包括设备维护、耗材的采购、库存管理等。
实验室委员会：由实验室主任、实验室副主任和实验室技术人员组成，负责制定实验室的工作计划和标准操作流程，进行技术指导和质量控制。
三、实验室工作流程管理1.样本接收与管理：（1）准备相关接收区域，确保样本的安全性和隐私性；（2）建立样本接收登记系统，对每个样本进行标识和记录；（3）定期检查样本接收区域的卫生状况，保持清洁；（4）按照规定的时间和方式送样到实验室，确保样本的及时处理。
2.样本处理与检测：（1）建立标本处理的操作规范，保证质量；（2）严格控制实验室环境、试剂和设备的清洁和消毒；（3）按照检测工艺要求进行标本的提取、扩增和检测；（4）严格执行质量控制措施，确保检测结果的准确性和可靠性。
3.数据统计与结果报告：（1）建立样本数据的录入和统计分析系统；（2）对检测结果进行统计分析，并制作报告；（3）及时将结果报告录入系统，并交由相关部门处理。
四、实验室质量管理1.建立质量控制体系：（1）制定实验室的质量控制规范和标准操作流程；（2）确保设备的正常运行和维护；（3）建立合理的耗材采购和库存管理制度。
2.培训与考核：（1）组织实验室技术人员定期参加培训，提高技能和专业知识；（2）定期进行技能考核和能力评估，对不符合要求的进行再培训。
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理想的核酸扩增实验室设计A
产物分析区
扩增区
标本制备区 试剂准备区
空气流向
空气流向 缓冲间
空气流向 缓冲间
空气流向 缓冲间
专用走廊
工作流向
理想的核酸扩增实验室设计B
产物分析区
扩增区
空气流向
空气流向 缓冲间
专用走廊
标本制备区
试剂准备区
空气流向 缓冲间
空气流向 缓冲间
工作流向
核酸扩增检测实验室设计的一般原则
• （3）应在标本制备区、扩增及产物分析区等相对有可能 出现“污染物”的区域安装排风扇或其它排风和有效的装 置，以使空气按试剂准备区标本制备区扩增（及产物 分析）区方向流动。
核酸扩增实验室的工作流程
试剂准备区 标本制备区 扩增区及扩增产物分析区
试剂准备区
• 核酸扩增实验室中最为“洁净”的区域，不应有任何核酸 的存在，包括试剂中所带的标准品和阳性对照。
• 各区独立
• 注意风向 • 因地制宜
“十六字口诀”
• 方便工作
A
扩增区
门 产物分析区
标本制备区 门
门 试剂准备区
门
外走廊
门
B
扩增及产物 分析区
标本制备区 门
试剂准备区 门
门
外走廊
门
标本制备区
空气流向
空气流向
试剂准备区
门
门
扩增及产
物分析区
空气流向
门
门
扩增和产 物分析区
空气流向
其他实验室
试剂准备区
其他实验室
其他实验室
产物分析区
扩增区
标本制备区
试剂准备区
传递窗
空气流向
传递窗
空气流向
传递窗
空气流向
空气流向
缓冲间
缓冲间
缓冲间
专用走廊
工作流向
关于“区域”合并
• 如使用扩增和产物分析同时完成的实时荧 光PCR仪进行核酸扩增检测，扩增区和产 物分析区可以合并。
• 如使用核酸提取、扩增及产物分析等均在 一台仪器上完成的全自动核酸检测分析仪， 标本制备区、扩增区和产物分析区可合并。
备超净工作台。
标本制备区
• 仪器设备主要有混样设备、核酸提取仪、生物安 全柜、加样器、高速台式（冷冻）离心机、加热 模块或水浴箱、冰箱等。生物安全柜不应放在实 验室门口等易受人员走动影响的地方，也不应直 对分体式空调。
• 主要是用于血液样本的混样、核酸样本的提取。 • 加样器吸头必须带滤芯。 • 使用加热模块时，如在模块孔中填入二氧化硅细
标本的接收区的仪器设备要求
• 如果在标本接收区分离血清（浆）标本， 有1台分离血清（浆）用离心机、1台生物 安全柜、1台冰箱、加样器及相应一次性经 高压处理的消耗品如带滤芯吸头、标本接 收编号记录本以及记号笔等即可。
• 如果不在标本接收区分离血清（浆）标本， 只是简单的接收，则就不需要分离血清 （浆）用离心机、生物安全柜、加样器及 其消耗品。
砂，然后将标本管置于细砂中温育，可得到较为 一致的温育温度。
扩增及产物分析区
• 扩增反应体系的配制和提取核酸的加入，可在标本制备区 也可在本区内进行，关键是要防止产物的污染。如果空间 允许的话，也可在一个独立的区域内进行。
• 加样时，先加提取的核酸模板样本，每加完一个即盖好盖 子，然后加阳性质控核酸模板，再就是标本制备阴性质控 和仅含按样本一样稀释的主反应混合液的扩增阴性质控， 这样做的目的是，最大可能地测出以前扩增产物的交叉污 染。
• 所有实验用洁净物品如离心管、吸头等的存放和准备处。 • 商品试剂盒： 75%乙醇、焦碳酸二乙酯（DEPC）处理水、
有机溶剂等可能需要自配 • 自制试剂：一次较大量配制，然后分装成小瓶保存，每次
检测时，取出一小瓶使用，未用完的即弃掉，不再使用。 • 仪器设备主要有加样器、天平、离心机和冰箱等，最好配
无“基因”或“核酸”概念的重 要性
符合基本要求的核酸扩增检测实验室的条件
• （1）试剂准备区、标本制备区和扩增及产物分析区等三 个或四个区域在物理空间上，必须是完全相互独立的，各 区域无论是在空间还是在使用中，应始终处于完全的分隔 状态，不能有空气的直接相通。
• （2）各区的可移动的仪器设备及各种物品包括实验记录 本、记号笔、试管架及清洁用具等必须专用。
核酸扩增检测实验室设计及 工作流程
李金明 卫生部临床检验中心
核酸扩增检测实验室的设计
• 依据：卫生部颁发的《临床基因扩 增检验实验室管理暂行办法》（卫 医发[2002]10号）
血液标本的接收
• 通常的工作流程：标本采集 血清分离
编号 保存或检测
• 应在四个测定区域之外的地方或区域内接 收
• 接收的标本应收集在原始容器中 • 在核酸提取时带入至标本制备区
扩增及产物分析区
• 热循环仪的电源应专用，并配备一个 不间断电源（UPS）或稳压电源。
• 每次扩增后，可使用可移动紫外灯对 扩增热循环仪进行照射。
• 扩增仪应定期进行校准。
谢谢！Βιβλιοθήκη 空气流向其他实验室
其他实验室
走廊
走廊
其他实验室
空气流向
标本制备区
其他实验室
其他实验室
其他实验室
标本制备区
空气流向+
空气流向
试剂准备区
门
门
扩增及产
物分析区
空气流向++
门
门
扩增和产 物分析区 空气流向++
其他实验室
试剂准备 区
空气流向
其他实验室
其他实验室
空气流向
走廊
走廊
其他实验室
空气流向+
其他实验室
标本制备 区