小鼠脑组织中单胺类神经递质含量测定方法的建立与比较_张海
高效液相色谱法对大鼠各器官中单胺类神经递质的测定
高效液相色谱法对大鼠各器官中单胺类神经递质的测定毛有彦;李爱芝【期刊名称】《中国误诊学杂志》【年(卷),期】2007(7)25【摘要】目的:以高效液相色谱法同时测定五种神经递质的含量,为神经递质的检测探索新的实验方法。
方法:色谱柱为C18柱,流动相为甲醇水(体积比为4∶6,其中每升中含EDTA-Na20.028g、SDS0.15g及浓硫酸0.22ml),流速1.0ml/min。
结果:本实验方法对大量样品进行过测定,其中包括正常、肝气郁症、肝气逆症等动物模型测定及用药后动物模型的测定,取得了可靠的结果。
结论:本方法实验成本低、样品处理量大,为稳定性及精密度、准确性都可靠的检测方法。
【总页数】2页(P5983-5984)【关键词】色谱法;高压液相;神经递质/分析;生物源单胺类/分析;动物【作者】毛有彦;李爱芝【作者单位】山东省潍坊市人民医院检验科;山东省潍坊市市立医院妇产科【正文语种】中文【中图分类】R122.11【相关文献】1.库仑阵列电化学高效液相色谱法测定大鼠脑组织中单胺类神经递质及代谢产物[J], 张向晖;刘军;苏林雁2.荧光-反相高效液相色谱法同时测定小鼠脑组织中3种单胺类神经递质 [J], 魏小娟;许建华3.库仑阵列电化学-高效液相色谱法同时检测大鼠不同脑区中的8种单胺类神经递质 [J], 邓少东;卢洪梅;林励;肖凤霞;成晓燕4.高效液相色谱法测定百草枯染毒后小鼠脑组织中8种单胺类神经递质的含量变化[J], 昝富文; 解裴育; 贾昊然; 刘迎; 马莉5.柱前衍生-高效液相色谱法同时测定血清中氨基酸类及单胺类神经递质 [J], 白洁;王妲;刘泽平;张佳琪;刘丽艳;韩艳梅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
荧光-反相高效液相色谱法同时测定小鼠脑组织中3种单胺类神经递质
１３ ３ 线 性 范 围 ： 制 ５ ０ ｇ ｍＬ ， 百 草 枯溶 液 ， 其 用 ．． 配 ０ ・ 一 的 将 健康 人 血 清 逐 级 稀 释 成 ５ 、 ０ ４ ２ ０８ ０ ４ ０ ２ ０ １ ０ １ 、 、 、 ．、 ．、 ．、 ．、
００ ・ ． ５ ｇ ｍＬ ， 照 １ ３ １节 方 法 处 理 。在 ２ ７ ｍ 处 测 定 吸 按 ．． ５ｎ
［］ 环 境 与 健 康 杂 志 ．０ ７ ２ （ ）３ ５ Ｊ． ２ ０ ，４ ５ ：４ ．
１ ３６ 反 应 条 件 的选 择 ： 第 ～ 和 第 二 方 法 使 用 连 二 亚 硫 酸 ．． 与 钠法 比较 ， 面 二 法 操 作 条 件 较 为 苛 刻 ， 为连 二 亚 硫 酸 钠 溶 前 因
理， 清中百草枯浓度分别为 １ ． 血 ７２和 ９ ９ ／ ・ ．１ ｇ ｍＬ＿。 ｚ 。
２ 讨 论
百草 枯 是 毒 性 较 大 的 农 药 ． 旦 中 毒 时 ， 死 亡 率 可 达 一 其
５ ％～８ ％ ； 报 告 【 认 为可 达 ８ ％ ～９ ％ 。 体 液 中 的 浓 度 ０ ０ 有 ５ ］ ５ ５ 检 测 常 可 预 测 抢救 的 成 功 率 。 文 献 报 道 的 检 测 方 法 有 气 相 色
液本 身 稳 定 性 较 差 （ ．ｈ后 就 不 能 再 用 ） 须 随 用 随 配 ， 便 １５ ， 不
（］ 瑞 萍 ， 泽 武 ． ５张 邱 循证 医学 在 中毒 领 域 中 的 应 用 ［］ Ｊ ．中 国 急 救 医
时 较 长 ， 利 于 突 发 事 件 的 检 测 。 分 光 光 度 计 由 于 已 较 为 普 不
及， 作 简 便 快 速 。 敏 度 高 ， 有 实际 的 临 床 意 义 ， 操 灵 具 尤其 是 本
高效液相色谱_荧光法测定小鼠脑组织中单胺递质及其相关物质_张璐璐
学报Journal of China Pharmaceutical University2010，41（4）：367－371高效液相色谱-荧光法测定小鼠脑组织中单胺递质及其相关物质张璐璐1，冯芳1，2*，叶小敏1，朱杰1，马冯飞1（中国药科大学1药物分析教研室；2药物质量与安全预警教育部重点实验室，南京210009）摘要建立高效液相色谱-荧光分析方法，研究小鼠脑皮层、海马、纹状体、丘脑等不同部位的单胺类神经递质及其相关物质。
脑组织样本经高氯酸沉淀蛋白后进行色谱分析，采用Lichrospher C18柱（250mmˑ4.6mm，5μm），流动相为pH 3.06缓冲液（含1mmol/L庚烷磺酸钠；30mmol/L磷酸二氢钠-磷酸溶液）-甲醇（85ʒ15）；流速：1.0mL/min；柱温：35ħ。
荧光检测：激发波长为280nm，发射波长为315nm。
采用建立的方法，鉴别出小鼠脑中存在去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）、5-羟色胺（5-HT）、酪氨酸、色氨酸、3，4-二羟苯乙酸和5-羟吲哚乙酸等物质；对NE、DA和5-HT进行定量研究，确定它们的线性范围分别为2.4 471.0ng/mL（r=0.9996），2.6 519.5ng/mL（r=0.9994），2.4 469.3ng/mL（r= 0.9991），日内、日间RSD均小于9.0%，准确度达到限度要求，提取回收率大于90%。
本法专属性好，准确度高，可以反映不同鼠脑区域单胺类神经递质及相关物质含量上的差异。
关键词高效液相色谱-荧光分析；单胺类神经递质；相关物质；脑组织中图分类号R917文献标识码A文章编号1000－5048（2010）04－0367－05Determination of monoamine neurotransmitters and related substances in mouse brain tissue by HPLC-FLDZHANG Lu-lu1，FENG Fang1，2*，YE Xiao-min1，ZHU Jie1，MA Feng-fei11Department of Pharmaceutical Analysis;2Key Laboratory of Drug Quality Control and Pharmacovigilance(Ministry of Education)，China Pharmaceutical University，Nanjing210009，ChinaAbstract To establish an HPLC-FLD method for the investigation of monoamine neurotransmitters and related substances in mouse frontal cortex，hippocampus，striatum，and hypothalamus.Mouse brain samples were depro-teinized by perchloric acid and analyzed.The separation was carried out on a Lichrospher C18column(250mmˑ4.6mm，5μm).The mobile phase was composed of pH3.06buffer(including1mmol/L heptanesulfonic acidsodium salt，30mmol/L NaH2PO4-H3PO4solution)and methanol in the ratio of85ʒ15;the flow rate was1.0mL/min and the column temperature was35ʎC.Fluorescence detection:the excitation and emission wavelengthswere set atλex =280nm，λem=315nm.Under the optimized conditions，norepinephrine(NE)，dopamine(DA)，5-hydroxytryptamine(5-HT)，3，4-dihydroxy-phenyl acetic acid(DOPAC)，5-hydroxyindoleacetic acid(5-HIAA)，tyrosine(Tyr)，and tryptophan(Trp)in mouse brain were detected.NE，DA，and5-HT were quantified.The line-arity ranges of NE，DA，and5-HT were2.4-471.0ng/mL(r=0.9996)，2.6-519.5ng/mL(r=0.9994)，and 2.4-469.3ng/mL(r=0.9991)，respectively.The intra-and inter-day precision was always lower than9.0%．The accuracy could attain the demands and the absolute recovery values were always higher than90%．The pro-posed method has good specificity and accuracy.It could be used to analyze the content differences of monoamine neurotransmitters and related substances in different mouse brain areas.Key words HPLC-FLD;monoamine neurotransmitter;related substances;brain tissueThis study was supported by the National Natural Science Foundation of China(No.30973858)763*收稿日期2010-03-12*通讯作者Tel：025－83271301E-mail：fengfang1@基金项目国家自然科学基金资助项目（No.30973858）学报Journal of China Pharmaceutical University第41卷单胺神经递质，如去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）和5-羟色胺（5-HT）是中枢神经系统中非常重要的生物活性物质，它们的前体是酪氨酸（Tyr）和色氨酸（Trp），酸性代谢产物有3，4-二羟苯乙酸（DOPAC）、5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）等。
高效液相色谱_荧光法测定小鼠脑组织中的单胺类神经递质
·774· ◇调查与分析 ◇
安徽医科大学学报 A cta U n iversita tis M ed icina lis A nhu i 2009 Dec; 44 (6)
急性白血病 1 185例次住院患者血流感染特点及危险因素分析
秦 慧 ,杨明珍 ,宋万灯 ,武琳琳 ,缪华伟 ,程 歆 ,吴 炜 ,刘沁华 ,王永庆
安徽医科大学学报 A cta U n iversita tis M ed icina lis A nhu i 2009 Dec; 44 (6)
·773·
1. 4 统计学处理 数据结果以 x ±s表示 ,采用线 性回归最小二乘法计算单胺类神经递质的标准曲 线。
2 结果
2. 1 标准色谱图 实验得到各标准物质谱图见图 1, 3种标准物质都达到了基线分离 。得到了小鼠脑 组织匀浆样品的色谱图 (图 2) ,除了多巴胺前有一 大的未知峰与多巴胺未达到基线分离外 ,其余各种 化合物均达到基线分离 。标准液和脑匀浆样品中的 NE、DA 和 52HT的峰之间分离较好 (样品中 DA 与 杂质峰的分离尚有待改善 ) 。
相关系数 0. 999 7 0. 999 9 0. 998 9
2. 3 回 收率 和精 密度 的测 定 按 113 操 作 , 按 0110 g脑 (湿重 )加入 110 m l的比例加入低 、中 、高 浓度的标准溶液 ,于同日内分别测定 NE、DA 和 52 HT加入量的对照品脑组织匀浆样品 ,每种加入量样 品平行测定 5次 ,计算各种标准物不同浓度的脑组 织匀浆样品回收率 ,结果如表 3。连续测定混合标 准液 5次 , NE、DA 和 52HT的峰面积日内测定的相 对标准偏差分别为 217%、215%和 314%。
图 1 3种神经递质混合标准溶液色谱图 (1: NE; 2: DA; 3: 52HT)
库仑电化学法快速测定单胺类神经递质的方法学研究
库仑电化学法快速测定单胺类神经递质的方法学研究【摘要】目的建立库仑阵列电化学高效液相色谱法快速测定大鼠脑组织中的单胺类神经递质的含量。
方法采用库仑阵列电化学检测器检测去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5�掺巧�胺(5��HT)、5�掺沁胚嵋宜�(5��HIAA)，采用Phenomenex C18反相色谱柱(150 mm×4.60 mm，5 μm)，流动相为缓冲液�惨译�(体积比87∶13)，流速为1 mL・min-1，柱温为35 ℃。
结果 4种单胺类神经递质的最低检测限为0.015 15～0.018 15 ng ，回收率为85.3 %～100.5 %。
结论该法具有快速、准确、灵敏、样品制备简便等优点，可用于大鼠脑组织中单胺类神经递质的分离检测。
【关键词】高效液相色谱法;单胺类神经递质;库仑阵列电化学检测器(1.School of TCM，Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine，Guangzhou Guangdong 510006，China; 2.Taishan Medical University，Taian，Shandong 271016，China)Abstract:Objective Toestablish a rapid method for determining monoamine neurotransmitters in rats’ brain tissue by HPLC with coularray detector.Methods HPLC was performed on a Phenomenex C18 column(150×4.60 mm，5 micron). The mobile phase，consisted of acetonitrile��water phase(13∶87)，was at aflow��rate of 1 mL・min-1. The column temperature was kept at 35 ℃. The levels of NE，DA，5��HT and 5��HIAA were determined.Results Theminimum measurement limit was 0.015 15-0.018 15 ng. The average recoveries were 85.3 %-100.5%.Conclusion This method is rapid，accurate，highly sensitive and easy to operate. The procedure issuitable for determining the monoamine neurotransmitters in rats’ brain tissue.Key words:HPLC; monoamine neurotransmitters; coularray detector单胺类物质包括去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5�掺巧�胺(5��HT)、五羟吲哚乙酸(5��HIAA)等物质，是哺乳动物和人类中枢神经重要的信息传递物质。
高效液相色谱-荧光法测定小鼠脑组织中的单胺类神经递质
高效液相色谱-荧光法测定小鼠脑组织中的单胺类神经递质金忠秀;许媛媛;李平;储成顶
【期刊名称】《安徽医科大学学报》
【年(卷),期】2009(44)6
【摘要】目的建立同时检测小鼠脑内的去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)3种神经递质的高效液相色谱方法 .方法采用的色谱条件为:C18柱分离,梯度洗脱.结果方法的检测限(以3倍信噪比计算)2.5μg/L以下,回收率均在
87.8%～105.7%之间,样品日内测定峰面积的相对标准偏差在3.4%以下.结论该方法具有检测灵敏度高、样品制备简便等优点,对小鼠脑内的3种单胺类递质的检测具有实用价值.
【总页数】3页(P772-774)
【作者】金忠秀;许媛媛;李平;储成顶
【作者单位】安徽医科大学附属省立医院脑外科,合肥,230001;安徽医科大学公共卫生学院,合肥,230032
【正文语种】中文
【中图分类】R329.54;R971
【相关文献】
1.固相萃取-高效液相色谱-荧光法测定人体尿液中单胺类神经递质 [J], 高慧;邢燕;汪洋;宋金枝;王旭
2.高效液相色谱-电化学检测法研究大蒜素对百草枯中毒小鼠脑组织中单胺类神经
递质含量的影响 [J], 檀笑昕;张淑娟;刘坤;张铧尹;连靠奇;徐向东;康维钧
3.荧光-反相高效液相色谱法同时测定小鼠脑组织中3种单胺类神经递质 [J], 魏小娟;许建华
4.高效液相色谱法测定百草枯染毒后小鼠脑组织中8种单胺类神经递质的含量变化[J], 昝富文; 解裴育; 贾昊然; 刘迎; 马莉
5.高效液相色谱-荧光法测定小鼠脑组织中单胺递质及其相关物质 [J], 张璐璐;冯芳;叶小敏;朱杰;马冯飞
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氨基酸类神经递质含量测定
一、样品处理
方法1 方法 【高效液相色谱法检测小鼠脑组织中氨基酸类神经递质 】 脑组织称重， 倍体积的甲醇 脑组织称重，加入 9倍体积的甲醇 水，冰浴匀 倍体积的甲醇/水 离心，上清液低温保存。 浆；离心，上清液低温保存。 衍生化反应：小脑组织液加入乙睛，混匀离心， 衍生化反应：小脑组织液加入乙睛，混匀离心， 二硝基氟苯， 取上清液加入 NaHCO3和2,4 -二硝基氟苯，混匀， 二硝基氟苯 混匀， 暗中衍生 (水浴 65 ℃ )，进样。 水浴 ，进样。
方法5 方法 【高效液相色谱 - 质谱 - 质谱法测定脑组织中氨基酸类神经递质】 脑组织称重， 脑组织称重，加入 HCl，冰浴超声粉碎 匀浆 ，冰浴超声粉碎, 液加入内标，离心取上清加入甲醇 甲醇， 液加入内标，离心取上清加入甲醇，振荡 30 s， ， 离心，上清液备用。 离心，上清液备用。 衍生化反应：组织液60 吹干， 衍生化反应：组织液 ℃加热并 N2吹干，取 出后加入盐酸正丁醇 盐酸正丁醇， 出后加入盐酸正丁醇，60 ℃衍生化反应 30 min。 。 吹干，残渣用甲醇 醋酸铵水溶液 甲醇-醋酸铵 60 ℃ 加热并 N2吹干，残渣用甲醇 醋酸铵水溶液 溶解，过滤后待用。 溶解，过滤后待用。
二、测试方法
方法1 方法 【高效液相色谱荧光法同时测定小鼠脑组织中4种氨基酸类神经递质 】 液相色谱仪系统：购自日本岛津， 液相色谱仪系统：购自日本岛津，RF-10AXL荧光 日本岛津 检测器 色谱条件：色谱柱为Agilent C18柱 色谱条件：色谱柱为Agilent ZORBAX C18柱 (4.6 mm× 150mm，5µm)，采用梯度洗脱。流动相 × ， ，采用梯度洗脱。 缓冲液。 A为甲醇，流动相 为醋酸钠缓冲液。柱温 ℃，进 为甲醇，流动相B为醋酸钠缓冲液 柱温30℃ 样量20µL。 样量 。 荧光检测波长： 荧光检测波长：激发光波长为 340 nm，发射光 ， 波长为 450 nm。 。
一种C57小鼠脑组织和血浆中18种氨基酸测定的前处理方法[发明专利]
![一种C57小鼠脑组织和血浆中18种氨基酸测定的前处理方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/563a963102d8ce2f0066f5335a8102d276a261b6.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010726469.9(22)申请日 2020.07.25(71)申请人 重庆医科大学地址 400016 重庆市渝中区医学院路1号(72)发明人 蒋心惠 李建沙 张静 龚涛 (51)Int.Cl.G01N 1/28(2006.01)G01N 21/31(2006.01)G01N 30/06(2006.01)G01N 30/74(2006.01)(54)发明名称一种C57小鼠脑组织和血浆中18种氨基酸测定的前处理方法(57)摘要本发明公开了一种C57小鼠脑组织和血浆中18种氨基酸测定的前处理方法，属于生物样品内源性物质前处理领域。
该方法使用紫外分光光度计和高效液相色谱仪，对采取液液萃取结合蛋白质沉淀法处理脑组织匀浆和血浆的方法进行考察，主要考察了样品前处理方法对样品中蛋白质去除量、总脂质去除量、18种氨基酸提取量的影响，进一步优化得到一种C57小鼠脑组织和血浆中18种氨基酸测定的最佳前处理方法。
权利要求书1页 说明书4页 附图5页CN 111829851 A 2020.10.27C N 111829851A1.一种C57小鼠脑组织和血浆中18种氨基酸测定的前处理方法，其特征在于，包括如下步骤：第一步，制备脑组织匀浆与血浆精密称定C57小鼠脑组织，按1：5～1：20(脑组织重量:超纯水＝mg：μL)的比例加入超纯水，以手持匀浆器匀浆30～90s，得到脑组织匀浆，将从眼眶取血得到的样品，离心取上清，得到待处理血浆；第二步，样品处理取100μL～300μL样品，加入100μL～300μL的甲基叔丁基醚，经涡旋震荡、离心、弃上层，以除去样品中的脂质；取100μL～300μL的上述去脂质样品，加入100μL～300μL的蛋白沉淀剂，经涡旋震荡、离心、取上清，以除去样品中的蛋白质；第三步，样品处理后总蛋白质和总脂质含量考察取100μL～300μL经处理后的样品，使用紫外分光光度计在280nm处测定样品的吸光度，考察经处理后的脑组织样品中总蛋白质含量；取100μL～300μL上述经处理后的样品于玻璃试管内，挥干溶剂，加入200μL浓H 2SO 4(96％)，涡旋，90℃水浴加热20min后迅速冷却至室温，再加入200μL 1mg ·mL -1香草醛溶液(17％的磷酸溶液配制)，常温下避光反应后，在500nm～550nm波长下测定吸光度；第四步，HPLC二极管阵列检测器切换荧光检测器考察杂质去除量和氨基酸提取量HPLC的液相条件包括色谱柱、流动相A和流动相B，其中色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱，流动相A为甲醇，流动相B为30mmol ·L -1和pH为6.20的乙酸钠缓冲溶液，脑组织和血浆样品中的氨基酸通过邻苯二甲醛衍生后测定，进样量为20μL，流速为0.9mL ·min -1，柱温为30℃，PDA检测器的检测波长选取230nm，荧光检测器的激发波长为340nm，发射波长为450nm；第五步，确定样品前处理条件经第四步的结果选择前处理方法，选择直接采用0.1～0.5mol ·L -1的高氯酸溶液去除样品中的脂质和蛋白质，为进一步优化样品前处理方法，对高氯酸的用量进行优化，按照1：3～1：9(样品：高氯酸溶液＝μL：μL)比例处理样品，按不同比例的0.1～0.5mol ·L -1高氯酸处理后的样品，经总蛋白质和总脂质含量考察，优化得到样品前处理方法；2.本文中所述的样品是C57小鼠脑皮层和血浆，18种氨基酸是：谷胱甘肽(Gsh)、天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、丝氨酸(Ser)、谷氨酰胺(Gln)、瓜氨酸酸(Cit)、甘氨酸(Gly)、精氨酸(Arg)、牛磺酸(Tau)、酪氨酸(Tyr)、丙氨酸(Ala)、γ-氨基丁酸(GABA)、、色氨酸(Trp)、甲硫氨酸(Met)、缬氨酸(Val)、苯丙氨酸(Phe)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)。
库仑电化学法快速测定单胺类神经递质的方法学研究
库仑电化学法快速测定单胺类神经递质的方法学研究摘要本文研究了一种利用库仑电化学法快速测定单胺类神经递质的方法学。
该方法基于库仑电位和扫描电位分析，利用三电极系统进行电极化与测量，最终通过计算电流或电压的变化来确定单胺类神经递质的含量。
实验结果表明，该方法简单、迅速、准确，可用于快速测定单胺类神经递质在生物样品中的含量。
研究背景神经递质是神经系统中的重要信号传递分子，对神经系统的正常功能起着关键作用。
单胺类神经递质包括多巴胺、去甲肾上腺素和肾上腺素等，其含量的变化与多种神经系统疾病密切相关，因此测定单胺类神经递质的含量对于神经系统疾病的诊断和治疗具有重要意义。
目前，测定单胺类神经递质主要采用高效液相色谱法、气相色谱法和电化学法等技术，这些方法各有优缺点，如高效液相色谱法虽然灵敏、准确，但需要较长时间进行样品制备、分离和检测；气相色谱法具有分离效果好、检出灵敏度高等优点，但同样需要进行样品制备、分离和净化等操作。
电化学法作为一种快速、准确、易操作的方法，具有测定单胺类神经递质优越性，因此被广泛应用于单胺类神经递质的测定。
实验方法试剂及仪器•制备单胺类神经递质标准品溶液（0.1 mM），使用双氯芬酸溶解。
•物理生化实验仪器，包括双电极、三电极、电位计、波形发生器等。
实验步骤1.标准曲线的建立利用双电极记录单胺类神经递质的循环伏安图，以扫描电位为变量，确定库仑电位。
在电位差为0.1～0.2 V的范围内进行多次循环检测，统计电流或电压的平均值。
2.标本处理将生物样品加入生理盐水中，进行超声处理和离心处理，制备样品，最终得到0.1 mM的样品溶液。
使用实验方法1记录循环伏安图，测量电流或电压的变化。
3.数据分析根据标准曲线和样品电流或电压的变化值，计算样品中单胺类神经递质的含量。
结果与分析本实验使用库仑电化学法快速测定单胺类神经递质的含量。
通过建立标准曲线和对样品的处理，测量电流或电压的变化，计算出样品中单胺类神经递质的含量。
小鼠脑组织实验报告
一、实验背景抑郁症是一种常见的心理健康疾病，其发病机制复杂，涉及神经生物学、遗传学、环境等多方面因素。
近年来，外泌体作为细胞间通讯的重要介质，其功能在精神疾病中的作用逐渐受到关注。
本研究旨在通过构建慢性社交挫败实验应激模型（CSDS）的敏感型青春期小鼠模型，探究脑组织外泌体中miRNA的表达变化，以期为抑郁症的发病机制研究提供新的思路。
二、实验材料与方法1. 实验动物：选取雄性C57BL/6小鼠，体重18-22g，随机分为实验组和对照组。
2. 实验方法：（1）构建CSDS模型：将实验组小鼠置于社交挫败环境中，对照组小鼠置于正常社交环境中，连续7天。
（2）行为学评估：采用糖水偏好和旷场实验评估小鼠抑郁样行为。
（3）脑组织外泌体提取：采用超速离心法提取小鼠脑组织外泌体。
（4）外泌体鉴定：采用透射电子显微镜、纳米流式检测技术以及蛋白质印记对外泌体形态、粒径大小和表面标志蛋白进行鉴定。
（5）高通量测序：采用高通量测序技术评估实验组和对照组小鼠脑组织外泌体miRNAs表达。
（6）生物信息学分析：基于生物信息学进行GO和KEGG通路富集分析。
三、实验结果1. CSDS模型构建成功：通过糖水偏好和旷场实验评估，实验组小鼠表现出明显的抑郁样行为，与对照组相比差异显著。
2. 外泌体鉴定：实验组小鼠脑组织外泌体颗粒大小在50～100 nm之间，呈典型圆盘状的囊泡结构，检测到外泌体阳性蛋白TSG101和Syntenin。
3. miRNA表达变化：CSDS诱导抑郁样行为的青春期小鼠脑组织外泌体中有13个miRNA显著上调，4个miRNA显著下调。
4. 通路富集分析：差异表达的miRNA在PI3K-Akt信号通路、轴突导向以及缺氧反应等显著富集。
四、讨论本研究通过构建CSDS模型，发现青春期小鼠脑组织外泌体中miRNA表达发生显著变化，提示外泌体可能在抑郁症的发生发展中发挥重要作用。
具体表现为：1. CSDS模型成功构建，实验组小鼠表现出明显的抑郁样行为，与已有研究结果一致。
C57BL-6鼠脑组织中胺类神经递质及体液中阴、阳离子的毛细管电泳在线预富集及检测新方法
C57BL-6鼠脑组织中胺类神经递质及体液中阴、阳离子的毛细管电泳在线预富集及检测新方法C57BL/6鼠脑组织中胺类神经递质及体液中阴、阳离子的毛细管电泳在线预富集及检测新方法摘要:胺类神经递质在神经系统中起着重要的调整作用。
准确测定胺类神经递质在脑组织和体液中的含量和分布是探究神经系统功能和疾病的关键。
本探究开发了一种新的毛细管电泳在线预富集及检测方法，用于C57BL/6鼠脑组织中胺类神经递质（如多巴胺、去甲肾上腺素和肾上腺素）以及体液中的阴、阳离子（如钠离子和钾离子）的分析。
背景:胺类神经递质在神经系统中起着重要的调整作用，如参与情绪、认知和运动等功能调整。
因此，准确测定胺类神经递质在脑组织中的含量和分布对于探究神经系统功能和疾病具有重要意义。
阴、阳离子是维持生物活性的重要成分之一，其含量和分布异常与多种疾病有关。
因此，开发一种高灵敏度、高选择性的方法用于胺类神经递质和阴、阳离子的分析是分外必要的。
方法:我们构建了一种新的毛细管电泳在线预富集及检测方法。
起首，使用胰蛋白酶对标准溶液或样品进行预处理，以获得更高的灵敏度。
然后，使用polybrene修饰的微柱进行在线预富集，以提高样品浓缩效率，并缩减背景信号干扰。
最后，进行毛细管电泳分离和检测，可以实现胺类神经递质和阴阳离子的准确分析。
结果:使用本方法，成功地在C57BL/6鼠脑组织中分析了多巴胺、去甲肾上腺素和肾上腺素的含量和分布。
结果显示，这些胺类神经递质在不同脑区的含量存在差异，这与其不同的调整功能相吻合。
此外，通过检测体液样品，我们也成功地分析了钠离子和钾离子的含量。
结论:本探究成功地开发了一种新的毛细管电泳在线预富集及检测方法，该方法具有高灵敏度、高选择性和高准确性的特点。
使用该方法，我们成功地分析了C57BL/6鼠脑组织中的胺类神经递质和体液中的阴阳离子。
这一方法为探究神经系统功能和疾病提供了重要的工具，并对于药物研发和临床诊断有着重要的应用前景。
高效液相色谱法测定百草枯染毒后小鼠脑组织中8种单胺类神经递质的含量变化
高效液相色谱法测定百草枯染毒后小鼠脑组织中8种单胺类神经递质的含量变化昝富文; 解裴育; 贾昊然; 刘迎; 马莉【期刊名称】《《理化检验-化学分册》》【年(卷),期】2019(055)010【总页数】6页(P1126-1131)【关键词】高效液相色谱法; 荧光检测器; 单胺类神经递质; 小鼠脑组织; 百草枯【作者】昝富文; 解裴育; 贾昊然; 刘迎; 马莉【作者单位】河北医科大学公共卫生学院石家庄 050017; 河北省环境与人群健康重点实验室石家庄 050017【正文语种】中文【中图分类】O657.7百草枯(1,1′-二甲基-4,4′-联吡啶)又称克芜踪,属于有机杂环类触杀型除草剂,是我国乃至世界上应用最广泛的广谱高效除草剂,用量仅次于草甘膦。
百草枯虽然除草效果好,对环境、土壤无污染,但对人毒性大,成人口服20%(质量分数,下同)百草枯溶液时,中毒者病死率高达95%,口服大于15 mL以上者鲜见存活报道[1]。
百草枯在人体内经历了氧化还原循环反应,直接或间接地触发活性氧(ROS)和氮物种(RNS)的产生和氧化应激,可导致器官损伤[2]。
对于百草枯中毒,目前没有特效的药物来治疗[3-4],最终死亡多因器官的衰竭[5-6]。
单胺类神经递质包括儿茶酚胺类化合物,主要有去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺及其相关代谢产物左旋多巴、二羟基苯乙酸、高香草酸、5-羟基吲哚乙酸。
有报道指出,百草枯可穿过血脑屏障,损害脑组织[7],特别是多巴胺能神经元,还可能通过影响多巴胺的合成、储存、转运和降解等环节破坏多巴胺递质的稳态,引发神经元凋亡,从而导致帕金森样症状[8]。
因此,测定脑组织中单胺类神经递质的含量,并研究其含量随着百草枯中毒时间的变化情况,对毒物引起的神经毒性的研究具有重要的意义。
目前,单胺类神经递质的测定方法有很多,主要有放射酶学法、高效液相色谱法(HPLC)[9]、毛细管电泳法[10]、电化学分析法[11]。
RP-HPLC-荧光检测法测定小鼠脑组织中5种神经递质的含量
RP-HPLC-荧光检测法测定小鼠脑组织中5种神经递质的含量鲁燕侠;崔佳;蔺兴遥;逯振宇【期刊名称】《解放军药学学报》【年(卷),期】2003(019)004【摘要】目的建立一种定量分析脑组织中神经递质的方法.方法采用反相高效液相色谱-荧光检测法,测定小鼠脑组织中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(L-DA)、5-羟色胺(5-HT)、5-羟色胺酸(5-HTP)、5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)5种神经递质的含量.结果由色谱图显示5种成分完全分离.小鼠脑组织中的L-NE为70.05±6.28、LDA110.33±10.56、5-HT50.12±6.85、5-HTP690.44±60.21、5-HIAA960.98±80.72ng*g-1.结论本方法简便、快速、准确,为临床监测及科研提供参考.【总页数】3页(P262-263,268)【作者】鲁燕侠;崔佳;蔺兴遥;逯振宇【作者单位】中国人民武装警察部队总医院,药剂科,北京,100039;中国人民武装警察部队总医院,药剂科,北京,100039;中国人民武装警察部队总医院,药剂科,北京,100039;中国人民武装警察部队总医院,药剂科,北京,100039【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.RP-HPLC-荧光法测定大鼠海马组织中5种氨基酸类神经递质 [J], 白钰;张莉;马晓丽;孔彬;李新霞;李新宇2.高效液相色谱-电化学检测法研究大蒜素对百草枯中毒小鼠脑组织中单胺类神经递质含量的影响 [J], 檀笑昕;张淑娟;刘坤;张铧尹;连靠奇;徐向东;康维钧3.高效液相色谱-荧光法测定小鼠脑组织中的单胺类神经递质 [J], 金忠秀;许媛媛;李平;储成顶4.高效液相色谱法测定百草枯染毒后小鼠脑组织中8种单胺类神经递质的含量变化[J], 昝富文; 解裴育; 贾昊然; 刘迎; 马莉5.HPLC-荧光检测法测定大鼠脑组织中的单胺类神经递质及相关物质 [J], 林凌云;李慧;许崇涛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
【推荐下载】龙胆碱对高热惊厥模型大鼠脑内氨基酸类神经递质含量及海马区GABA分析
龙胆碱对高热惊厥模型大鼠脑内氨基酸类神经递质含量及海马区GABA分析 【编者按】：医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。
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龙胆碱对高热惊厥模型大鼠脑内氨基酸类神经递质含量及海马区GABA分析 作者：姚素媛，刘学伟，刘树民 【摘要】目的通过对脑内类氨基酸含量的及相应受体的测定，推测龙胆碱对脑损伤保护作用的可能机制。
方法21日龄Wister大鼠100只，经筛选后随机分为空白对照组、模型组(FS组)、龙胆碱高剂量组(GT1组)、龙胆碱低剂量组(GT2)，热水浴法诱导高热惊厥模型，采用茚三酮染色法，借助全自动生化分析仪，计算脑组织氨基酸含量：氨基酸含量(mg/g湿组织)= 每20 l上清液中氨基酸的含量/20 上清液总量( l)/脑组织湿重(g)。
免疫组化法观察海马区GABAB、Glu受体蛋白表达变化。
结果GT各组大鼠脑组织中Glu含量高于模型组，GABA含量低于FS组，Asp 、Gly与FS组无显著性差异。
GT1、GT2与FS组相比，差异具有显著性(P 0.05);GABA蛋白表达，GT1、GT2组在海马CA1 ～CA3区GABAB蛋白表达明显高于FC组，但低于对照组，差异具有显著性;Glu各组间比较，差异均无显著性。
结论龙胆碱对惊厥所致的脑损伤的保护作用机制与脑内神经递质GABA、Glu改变有关，GABA递质的增高与GABAB受体的相应增加是其作用的机制之一。
【关键词】龙胆碱; 高热惊厥; 神经递质 Abstract：ObjectiveTo study possible mechanisms of the protective effects on brain damage of gentianine. Methods21-day old wistar rats were randomly divided into 4 groups: Normal control group(n=15),FS group(n=20),gentianine high-dose group(GT1 group,n=20), gentianine low-dose group(GT2,group.n=20). Automatic amino acid analyzer was used to observe the content changes of exactatory-inhibitory amino acid neurotransmitters (Glu,Asp, GABA, Gly)，and protein expression of GABABR, Glu receptor in hippocampus were detected by immunohistochemistry. ResultsThe contents of GABA in the GT1、GT2 group were those of glu were lower FS group ,the difference was significant between GT1、GT2 groups and FS group but the contents of Asp, Gly had no significant difference from FS group. The reslut of GABABR showed that the expression of GABAB was higher than FS group but lower than NG group in the GT1 .GT2 group ,and the difference was significant,but the GluR had no significant difference.ConclusionThe protective effect on the damage of brain of gentianine is related to the change of GABA and Glu contents in the rat brain, one of pharmacological mechanism on brain damage protection of gentianine is to increase the protein expression of GABABR and the content of GABA and decrease the contents of Glu in Key words：Febrile Convulsions; Gentianine; Brain damage; Neurotransmitter 频繁或长时间高热惊厥发作可以造成婴幼儿中枢神经系统损伤，并对远期的惊厥易感性、学习记忆功能造成影响[1～3]。
RP-HPLC-荧光法测定大鼠海马组织中5种氨基酸类神经递质
RP-HPLC-荧光法测定大鼠海马组织中5种氨基酸类神经递质白钰;张莉;马晓丽;孔彬;李新霞;李新宇【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2014(000)001【摘要】目的：采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）-荧光检测技术建立一种用于测定脑海马组织中5种氨基酸[天门冬氨酸（Asp）、谷氨酸（Glu）、天冬酰胺（Aspa）、谷胺酰胺（Gln）、甘氨酸（Gly）]类神经递质的方法。
方法采用甲醇∶水＝1∶1提取大鼠脑海马组织中多种氨基酸类神经递质。
用6-氨基喹啉基-N-羟基-琥珀酰亚胺氨基甲酸酯（AQC）柱前衍生RP-HPLC-荧光法测定海马组织中Asp、Glu、Aspa、Gln、Gly含量。
结果5种氨基酸类神经递质在15 min内完全分离，分离效果良好；在0．5～100．0μg/μL范围有较好的线性关系，相关系数（r）≥0．99990；Asp、Glu、Aspa、Gln、Gly的检出限分别为0．05、0．068、0．037、0．05、0．02μg/μL。
精密度[相对标准偏差（RSD）]为0．4％～2．5％，加样回收率为70．27％～128．20％，RSD均＜5％；8只正常大鼠海马组织中Asp、Glu、Aspa、Gln、Gly含量分别为38．98±9．66、126．42±34．06、216．00±0．75、90．44±33．75、（12．95±4．42）μg/g。
结论 RP-HPLC-荧光法快速、准确、灵敏度高，适用于脑组织中氨基酸类神经递质含量的测定。
【总页数】4页(P69-72)【作者】白钰;张莉;马晓丽;孔彬;李新霞;李新宇【作者单位】新疆医科大学附属中医医院，新疆乌鲁木齐830011;石河子大学医学院，新疆石河子832002;新疆医科大学分析测试中心，新疆乌鲁木齐830011;新疆医科大学分析测试中心，新疆乌鲁木齐830011;新疆医科大学分析测试中心，新疆乌鲁木齐830011;兰州军区乌鲁木齐总医院，新疆乌鲁木齐830011【正文语种】中文【中图分类】Q517【相关文献】1.高效毛细管电泳测定海马组织和脑脊液中氨基酸类神经递质 [J], 宣柳;沈佐君;何晓东;伊茂礼;金鑫;鲁明;傅先明2.AQC柱前衍生RP-HPLC荧光法测定颅脑损伤患者脑脊液中氨基酸类神经递质[J], 陈为;柯雪红;杨小催3.反相高效液相色谱荧光法测定大鼠脑组织中氨基酸类神经递质 [J], 吴强恩;郑力行;谢芳;吴同俊;阮国洪;周志俊4.高效液相荧光法测定大鼠脑内氨基酸类神经递质方法的改良 [J], 张丽;叶翠飞;沈芊;李林5.反相高效液相色谱荧光法测定氨基酸类神经递质 [J], 顾拥军;倪文因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
小鼠神经递质检测报告
小鼠神经递质检测报告
委托单位：XXX实验室
检测单位：XXX生物技术有限公司
样品信息：
样品名称：小鼠神经组织
样品数量：3份
检测参数：
神经递质检测方法检测器
谷氨酸高效液相色谱-荧光检测器 Shimadzu RF-550丙酮酸高效液相色谱-荧光检测器 Shimadzu RF-550乙酸胆碱高效液相色谱-荧光检测器 Shimadzu RF-550
检测结果：
样品编号神经递质含量（μmol/g protein）
1 谷氨酸 8.5
丙酮酸 5.2
乙酸胆碱 2.3
2 谷氨酸 7.8
丙酮酸 4.9
乙酸胆碱 2.1
3 谷氨酸 6.9
丙酮酸 4.2
乙酸胆碱 1.8
结论：
从以上结果可以看出，样品中谷氨酸、丙酮酸和乙酸胆碱的含
量分别为8.5μmol/g protein、5.2μmol/g protein和2.3μmol/g protein，7.8μmol/g protein、4.9μmol/g protein和2.1μmol/g protein，
6.9μmol/g protein、4.2μmol/g protein和1.8μmol/g protein。
通过分
析数据可以发现，不同样品中神经递质含量存在差异，但均在正
常范围内。
因此，可以认为该小鼠神经组织的神经递质水平正常。
说明：
本报告仅对所测定的参数进行分析，不对其他可能存在的异常
情况进行评估。
如有疑问，请委托单位联系检测单位进行进一步
的咨询和解决。
签发单位：XXX生物技术有限公司
日期：XXXX年XX月XX日。
大鼠脑组织中儿茶酚胺类神经递质的rP—HPLC—ECD定量分析
大鼠脑组织中儿茶酚胺类神经递质的rP—HPLC—ECD定量
分析
张纬;祁艳斌
【期刊名称】《天津医科大学学报》
【年(卷),期】1998(004)003
【摘要】目的：建立一种定量分析脑组织中儿茶酚胺类神经递质的方法。
方法：采用反相高效液相色谱电化学色谱法（ｒＰ－ＨＰＬＣ－ＥＣＤ）测定大鼠脑组织中去甲肾上腺素（ＮＥ）、肾上腺素（Ｅ）、多巴胺（ＤＡ）、５羟色胺（５－ＨＴ）。
结果：由色谱图显示各单受类成分分离完全。
结论：本方法快速、简单、准确为医务工作者提供方便与帮助。
【总页数】2页(P218-219)
【作者】张纬;祁艳斌
【作者单位】天津医科大学生化教研室;天津医科大学生化教研室
【正文语种】中文
【中图分类】Q593.2
【相关文献】
1.OPA柱前衍生RP-HPLC-FLD测定小鼠脑组织中6种氨基酸类神经递质 [J], 黄冰琳
2.RP-HPLC-荧光检测法测定小鼠脑组织中5种神经递质的含量 [J], 鲁燕侠;崔佳;蔺兴遥;逯振宇
3.急性重复性缺氧小鼠脑组织中儿茶酚胺类神经递质含量变化的研究 [J], 黄如彬
4.大鼠脑组织中氨基酸类神经递质的rP—HPLC—UV柱前衍生定？… [J], 祁艳斌;张纬
5.RP-HPLC法测定大鼠脑组织及脑脊液中四种氨基酸类神经递质的含量 [J], 周卿;代广会;左巨波;尚京川
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锰对雄性小鼠中脑单胺类神经递质含量影响
锰对雄性小鼠中脑单胺类神经递质含量影响邓晓辉;冯三畏;王振全;张义江;柴晓静;赵翊【期刊名称】《中国公共卫生》【年(卷),期】2008()1【摘要】目的探讨锰对雄性小鼠中脑单胺类神经递质含量的影响。
方法将90只雄性昆明系小鼠随机分为3组(30,15 mg/kg,盐水对照组),每日腹腔注射染毒,连续染6 d停染1 d。
分别于染毒20,40,60 d以后,颈椎脱臼处死。
迅速剥出小鼠的全脑用锡箔包好后,置于液氮中保存。
然后将组织制成匀浆并冷冻离心,取上清液移入离心管中。
用高效液相色谱仪的紫外检测器测定其中单胺类神经递质的含量,并同时计算小鼠脏器系数。
结果3种单胺类神经递质多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、五羟色胺(5-HT)的含量均低于盐水对照组,呈不断下降趋势。
其中多巴胺的含量在40,60 d时下降明显,差异有统计学意义,P<0.05。
同时发现,2个染毒组的雄性小鼠肝脏、脾脏、脑组织、以及睾丸的脏器系数与盐水对照组比较,均有不同程度变化,肝脏、脾脏的脏器系数增高,而脑组织、睾丸的脏器系数却降低。
结论金属锰的长期接触可能会影响雄性小鼠中脑单胺类神经递质含量,并且对某些脏器有一定的毒性作用。
【总页数】2页(P95-96)【关键词】锰;单胺类神经递质;雄性小鼠;中脑【作者】邓晓辉;冯三畏;王振全;张义江;柴晓静;赵翊【作者单位】兰州大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室,兰州730000;兰州石化总医院西区【正文语种】中文【中图分类】R181.1【相关文献】1.通窍活血汤对脑缺血再灌注小鼠血脑屏障通透性及脑内单胺类神经递质含量的影响 [J], 刘亚芳;汪宁2.高效液相色谱-电化学检测法研究大蒜素对百草枯中毒小鼠脑组织中单胺类神经递质含量的影响 [J], 檀笑昕;张淑娟;刘坤;张铧尹;连靠奇;徐向东;康维钧3.力竭运动对大鼠纹状体、中脑及下丘脑单胺类神经递质含量的影响 [J], 王斌;张蕴琨;李靖;蒋晓玲4.盐酸哌替啶诱发大鼠类帕金森病及中脑匀浆单胺类神经递质含量分析 [J], 魏宝强;暴爱丽;李开明;牛丽凤;张广新;崔培红;何晓明;苏丹5.电针百会及神庭穴对抑郁小鼠行为学及不同脑区单胺类神经递质含量的影响 [J], 邹天雨; 赵宇; 马莉; 程为平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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第二军医大学学报 ２０１７年９月第３８卷第９期 ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ａｊｓｍｍｕ．ｃｎＡｃａｄｅｍｉｃ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｅｃｏｎｄ Ｍｉｌｉｔａｒｙ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｅｐ．２０１７，Ｖｏｌ．３８，Ｎｏ．９ＤＯＩ：１０．１６７８１／ｊ．０２５８－８７９ｘ．２０１７．０９．１１７１·论 著·［收稿日期］ ２０１７－０３－２５ ［接受日期］ ２０１７－０５－１５［基金项目］ 国家自然科学基金（８１５７１２９９），军队医学创新工程（１６ＣＸＺ０１２）．Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｂｙ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｉｎａ（８１５７１２９９）ａｎｄ Ｍｉｌｉｔａｒｙ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ Ｐｒｏｊｅｃｔ（１６ＣＸＺ０１２）．［作者简介］ 张 海，博士，副主任药师，硕士生导师．Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈｘｄｋｓ２００５＠１２６．ｃｏｍ＊通信作者（Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ）．Ｔｅｌ：０２１－３１１６２３０９－８０４，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｍ＿ｙａｏｆｅｎ２００３＠１６３．ｃｏｍ小鼠脑组织中单胺类神经递质含量测定方法的建立与比较张 海１，２，孙 旭３，孙 森１，钱 跹１，刘 敏４＊１．第二军医大学东方肝胆外科医院药材科，上海２００４３８２．同济大学附属第一妇婴保健院药剂科，上海２０１２０４３．第二军医大学长海医院神经内科，上海２００４３３４．第二军医大学长海医院药材科，上海２００４３３ ［摘要］ 目的 比较高效液相色谱（ＨＰＬＣ）－紫外光（ＵＶ）、ＨＰＬＣ－荧光（ＦＬＤ）和ＨＰＬＣ－质谱（ＭＳ）３种检测方法测定小鼠不同脑组织中单胺类神经递质含量的优劣性，并应用最优方法测定血管性抑郁小鼠不同脑组织中单胺类神经递质的含量。
方法 分别采用ＨＰＬＣ仪器搭配ＵＶ、ＦＬＤ和ＭＳ检测器建立小鼠不同脑组织中多巴胺（ＤＡ）、去甲肾上腺素（ＮＥ）和５－羟色胺（５－ＨＴ）的含量测定方法，并进行系统的方法学验证，采用ＨＰＬＣ－ＦＬＤ法对血管性抑郁小鼠不同脑组织中单胺类神经递质ＤＡ、ＮＥ和５－ＨＴ含量进行测定。
结果 ＨＰＬＣ－ＵＶ法的定量限分别为ＤＡ １０３．５ｎｇ／ｍＬ、ＮＥ １０７．５ｎｇ／ｍＬ、５－ＨＴ ９３．６ｎｇ／ｍＬ；ＨＰＬＣ－ＦＬＤ法的定量限分别为ＤＡ １０．３５ｎｇ／ｍＬ、ＮＥ １０．７５ｎｇ／ｍＬ、５－ＨＴ９．３６ｎｇ／ｍＬ；ＨＰＬＣ－ＭＳ法的定量限分别为ＤＡ １０．３５ｎｇ／ｍＬ、ＮＥ ３２．２５ｎｇ／ｍＬ、５－ＨＴ ９．３６ｎｇ／ｍＬ。
ＨＰＬＣ－ＦＬＤ和ＨＰＬＣ－ＭＳ法对ＤＡ和５－ＨＴ的测定优于ＨＰＬＣ－ＵＶ法，ＨＰＬＣ－ＦＬＤ法对于ＮＥ的测定优于ＨＰＬＣ－ＭＳ法，而ＨＰＬＣ－ＭＳ法存在较强的基质效应。
ＨＰＬＣ－ＦＬＤ法检测结果示血管性抑郁小鼠海马组织中ＤＡ含量最低，大脑皮质中５－ＨＴ含量最低，而不同脑组织中ＮＥ含量没有明显差别。
结论 与ＨＰＬＣ－ＵＶ法和ＨＰＬＣ－ＭＳ法相比，ＨＰＬＣ－ＦＬＤ法更适用于小鼠脑组织中单胺类神经递质（ＤＡ、ＮＥ、５－ＨＴ）的含量测定。
ＤＡ和５－ＨＴ可以用作血管性抑郁症疾病的诊断标志物。
［关键词］ 单胺类神经递质；液相色谱－紫外检测器；液相色谱－荧光检测器；液相色谱－质谱检测器；血管性抑郁症 ［中图分类号］ Ｒ ９１７．１ ［文献标志码］ Ａ ［文章编号］ ０２５８－８７９Ｘ（２０１７）０９－１１７１－０７Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ａｎｄ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ ｍｏｎｏａｍｉｎｅ ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓ ｉｎ ｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅ ｏｆ ｍｉｃｅＺＨＡＮＧ Ｈａｉ １，２，ＳＵＮ Ｘｕ３，ＳＵＮ Ｓｅｎ１，ＱＩＡＮ Ｘｉａｎ１，ＬＩＵ Ｍｉｎ４＊１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｅａｓｔｅｒｎ Ｈｅｐａｔｏｂｉｌｉａｒｙ Ｓｕｒｇｅｒｙ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｅｃｏｎｄ Ｍｉｌｉｔａｒｙ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２００４３８，Ｃｈｉｎａ２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｆｉｒｓｔ Ｍａｔｅｒｎｉｔｙ ａｎｄ Ｉｎｆａｎｔ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ａｆｆｌｉａｔｅｄ ｔｏ Ｔｏｎｇｊｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０１２０４，Ｃｈｉｎａ３．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，Ｃｈａｎｇｈａｉ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｅｃｏｎｄ Ｍｉｌｉｔａｒｙ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２００４３３，Ｃｈｉｎａ４．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｃｈａｎｇｈａｉ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｅｃｏｎｄ Ｍｉｌｉｔａｒｙ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２００４３３，Ｃｈｉｎａ ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｃｏｍｐａｒｅ ｔｈｅ ａｄｖａｎｔａｇｅｓ ａｎｄ ｄｉｓａｄｖａｎｔａｇｅｓ ｂｅｔｗｅｅｎ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）－ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ（ＵＶ，ＨＰＬＣ－ＵＶ），ＨＰＬＣ－ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｄｅｔｅｃｔｏｒ（ＦＬＤ，ＨＰＬＣ－ＦＬＤ）ａｎｄ ＨＰＬＣ－ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ（ＭＳ，ＨＰＬＣ－ＭＳ）ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｍｏｎｏａｍｉｎｅ ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓ（ＭＮｓ）ｉｎ ｂｒａｉｎ ｔｉｓｓｕｅｓ ｏｆｍｉｃｅ，ａｎｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ＭＮｓ ｉｎ ｂｒａｉｎ ｔｉｓｓｕｅｓ ｏｆ ｖａｓｃｕｌａｒ ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ ｍｉｃｅ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｍｅｔｈｏｄ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｗｅ ｕｓｅｄ ｔｈｅ ＵＶ，ＦＬＤ ａｎｄ ＭＳ ｄｅｔｅｃｔｏｒｓ ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｏｐａｍｉｎｅ（ＤＡ），ｎｏｒｅｐｉｎｅｐｈｒｉｎｅ（ＮＥ）ａｎｄ ５－ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ（５－ＨＴ）ｉｎ ｂｒａｉｎ ｔｉｓｓｕｅｓ．Ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄｓ ｗａｓ ｖｅｒｉｆｉｅｄ ｗｉｔｈｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ．Ｔｈｅ ＨＰＬＣ－ＦＬＤ ｗａｓ ａｐｐｌｉｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ＤＡ，ＮＥ ａｎｄ ５－ＨＴ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｂｒａｉｎ ｔｉｓｓｕｅｓｏｆ ｖａｓｃｕｌａｒ ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ ｍｉｃｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｉｔ ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｌｉｍｉｔｓ ｏｆ ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｆｏｒ ＨＰＬＣ－ＵＶ，ＨＰＬＣ－ＦＬＤ ａｎｄＨＰＬＣ－ＭＳ ｗｅｒｅ ＤＡ １０３．５ｎｇ／ｍＬ，ＮＥ １０７．５ｎｇ／ｍＬ ａｎｄ ５－ＨＴ ９３．６ｎｇ／ｍＬ；１０．３５ｎｇ／ｍＬ，１０．７５ｎｇ／ｍＬ ａｎｄ９．３６ｎｇ／ｍＬ；ａｎｄ １０．３５ｎｇ／ｍＬ，３２．２５ｎｇ／ｍＬ ａｎｄ ９．３６ｎｇ／ｍＬ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｂｏｔｈ ＨＰＬＣ－ＦＬＤ ａｎｄ ＨＰＬＣ－ＭＳ ｆｏｒ ＤＡ·１７１１·第二军医大学学报 ２０１７年９月，第３８卷ａｎｄ ５－ＨＴ ｗｅｒｅ ｓｕｐｅｒｉｏｒ ｔｏ ＨＰＬＣ－ＵＶ．ＨＰＬＣ－ＦＬＤ ｆｏｒ ＮＥ ｗａｓ ｓｕｐｅｒｉｏｒ ｔｏ ＨＰＬＣ－ＭＳ．Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ＨＰＬＣ－ＵＶ ａｎｄＨＰＬＣ－ＦＬＤ，ＨＰＬＣ－ＭＳ ｓｈｏｗｅｄ ｒｅｍａｒｋａｂｌｅ ｍａｔｒｉｘ ｅｆｆｅｃｔｓ．ＨＰＬＣ－ＦＬＤ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆＤＡ ｗａｓ ｔｈｅ ｌｏｗｅｓｔ ｉｎ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ，５－ＨＴ ｗａｓ ｔｈｅ ｌｏｗｅｓｔ ｉｎ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｃｏｒｔｅｘ，ａｎｄ ＮＥ ｄｉｄ ｎｏｔ ｄｉｆｆｅｒ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅｓ ｏｆ ｖａｓｃｕｌａｒ ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ ｍｉｃｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ＨＰＬＣ－ＵＶ ａｎｄ ＨＰＬＣ－ＭＳ，ＨＰＬＣ－ＦＬＤ ｃａｎ ｍｏｒｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ＭＮｓ（ＤＡ，ＮＥ ａｎｄ ５－ＨＴ）．ＤＡ ａｎｄ ５－ＨＴ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ｍａｒｋｅｒｓ ｏｆｔｈｅ ｖａｓｃｕｌａｒ ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ ｄｉｓｅａｓｅｓ．［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］ ｍｏｎｏａｍｉｎｅ ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓ；ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ ｄｅｔｅｃｔｏｒ；ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｄｅｔｅｃｔｏｒ；ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ ｄｅｔｅｃｔｏｒ；ｖａｓｃｕｌａｒ ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ［Ａｃａｄ Ｊ Ｓｅｃ Ｍｉｌ Ｍｅｄ Ｕｎｉｖ，２０１７，３８（９）：１１７１－１１７７］ 多巴胺（ＤＡ）、去甲肾上腺素（ＮＥ）和５－羟色胺（５－ＨＴ）是中枢神经调节系统中最重要的神经递质，它们在维持、调节神经系统和各器官的功能中发挥着重要作用［１－４］。
研究发现，一些重要的疾病与神经递质含量的变化关系密切，如帕金森病是一种神经退行性疾病，与脑内ＤＡ含量的变化密切相关［５－７］。
血管性抑郁是老年迟发性抑郁症的一种主要类型，与脑血管疾病及其危险因素相关［８］。
近年研究显示一些炎症细胞因子可导致５－ＨＴ含量下降、色氨酸代谢物的毒性增加，并促使海马神经元坏死和凋亡，导致了抑郁症的发生和认知功能障碍［９－１０］。
因此有必要建立一种灵敏的单胺类神经递质含量测定方法，用于体液中单胺类神经递质的含量测定和疾病诊断。
高效液相色谱（ＨＰＬＣ）、气相色谱（ＧＣ）和毛细管电泳（ＣＥ）均可用于生物样品中神经递质的检测。
其中ＨＰＬＣ仪器较为常见，且可以搭配紫外（ＵＶ）、荧光（ＦＬＤ）、质谱（ＭＳ）以及电化学（ＥＣＤ）等不同的检测器进行检测。
然而这些检测器都有其局限性和缺点，其中ＵＶ检测器不够灵敏；ＥＣＤ受流动相的组成限制，且缺乏重现性；ＭＳ分析生物样品时，干扰峰常常发生在低质荷比区域，导致灵敏度和特异性较差。
因此，对生物样品中的神经递质进行准确测定仍面临着很多挑战。