铁皮石斛组织培养快繁技术
铁皮石斛的种植方法及繁殖
铁皮石斛的种植方法及繁殖
种植方法：
1、选择土壤：铁皮石斛喜欢生长在疏松、排水良好的砂砂壤土中，沙土不宜种植铁皮石斛。
2、土壤备肥：在选定的种植地点，要把土壤备好，用3公斤的粪肥和2公斤的有机肥混合，作为一次性施肥。
3、种植：以种子和种皮种植为主，播种距离约20厘米，表层土土厚度约2厘米。
4、浇水：浇水适当，不要过量，防止水分过多，造成土壤浸水和种子们烂死。
繁殖方法：
1、嫁接法：用健壮而完整的母株，和座枝上的叶芽末端做嫁接，一般选择5-7月和9-10月嫁接，可以促进母株的繁殖。
2、人工增殖法：用枯梗上的鞘切下嫩条，放入适宜的培养基中，用增殖技术，可以快速获得大量的苗木。
3、分株繁殖法：在5-7月或9-10月从母株上取下一定
数量的须根，放入适宜的培养基中，用分株繁殖技术，可以获得大量的苗木。
;。
铁皮石斛的组织培植
铁皮石斛的组织培植简介铁皮石斛（Dendrobium officinale）是一种珍贵的中药材，被公认为具有滋补养生的功效。
由于其野生资源减少，组织培植成为了其繁殖的重要途径。
本文将介绍铁皮石斛的组织培植方法，用于指导相关研究和实践。
材料与方法1. 无菌实验室条件：培养室温度为25℃，相对湿度为60%-70%，光照强度为3000-4000lx。
2. 培养基配方：- MS培养基：含有葡萄糖（30g/L）、琼脂（8g/L）、pH值调整到5.8。
- 添加生长调节剂：添加6-苄氨基酸（0.1mg/L）和吲哚-3-乙酸（0.5mg/L）。
过程1. 选取健康无病的铁皮石斛茎段作为外植体，将其进行消毒处理。
使用70%酒精浸泡2分钟，随后用0.1%高锰酸钾溶液浸泡10分钟，最后用无菌蒸馏水冲洗3次。
2. 切取消毒后的茎段偏上部位的小芽组织，每个芽组织含有1-2个小芽。
3. 将切取的芽组织置于含有MS培养基和生长调节剂的培养瓶中。
4. 培养瓶密封并置于培养室中，进行组织培养。
每周移植一次，移至新的含有培养基的培养瓶中。
结果与讨论经过适当的组织培养时间，铁皮石斛的小芽可以快速生长并分化出根系。
在合适的培养条件下，每个芽组织可以发育成为整株植物，从而实现大规模繁殖。
值得注意的是，在铁皮石斛的组织培植过程中，应加强对培养基和环境条件的控制。
培养基中添加的生长调节剂和孕育液质量对结果有重要影响。
同时，无菌操作的严格执行也是保证培植过程成功的关键。
结论铁皮石斛的组织培植方法是一种有效的繁殖途径，能够满足市场需求，并促进可持续发展。
通过合理控制培养基配方和环境条件，可以实现铁皮石斛的大规模繁殖与种植，为相关产业的发展提供有力保障。
这一研究对于进一步深入了解铁皮石斛的生物学特性和开发利用具有重要意义。
铁皮石斛的组织培养技术
铁皮石斛的组织培养技术简介铁皮石斛（Scientific name: Dendrobium officinale），是一种珍贵的药用植物，在中医药中有着悠久的历史和广泛应用。
铁皮石斛的组织培养技术是指利用无菌培养方法，通过细胞分裂和再生，培育大量优质的植株，以满足人们对铁皮石斛的需求。
本文将介绍铁皮石斛的组织培养技术的基本步骤和注意事项。
步骤1. 选择合适的外植体材料：铁皮石斛的外植体材料通常选取新鲜的茎段、叶片或花轴，并确保这些材料来自无病虫害的植株。
2. 表面消毒处理：将收集到的外植体材料进行表面消毒处理，常用的消毒剂包括漂白粉和酒精。
消毒时间和浓度应根据不同的外植体材料进行调整。
3. 建立无菌培养基：制备含有适当激素和营养物质的无菌培养基。
常用的基本培养基是MS培养基和B5培养基。
可以根据实验需要调整培养基的成分和浓度。
4. 培养和增殖：将表面消毒后的外植体材料放入含有适当培养基的培养瓶中，并置于暗室或恒温箱中进行培养。
光照和温度是影响铁皮石斛组织培养的重要因素，应根据植物的生长性进行调控。
5. 分化和再生：通过植物激素的投入和适当调控培养条件，促使外植体材料分化和再生成优质的铁皮石斛植株。
这一步骤往往需要持续几个月到数年的时间。
注意事项1. 保持无菌条件：组织培养需要在无菌条件下进行，以避免外源病原微生物的污染。
实验器具、培养基和操作环境必须经过严格的消毒和无菌处理。
2. 控制培养基成分和浓度：培养基的成分和浓度对植物的生长和分化起着重要的影响，需要根据不同的外植体材料和培养阶段进行合理的调整。
3. 确保适当的光照和温度：铁皮石斛对光照和温度有一定的要求，光照不足或温度过高都会影响植物的生长和分化。
应根据植物的生理特性，设置合适的光照和温度条件。
4. 定期检查和处理：组织培养过程中，应定期检查植株的生长状态和培养基的污染情况，并采取适当的措施处理。
需要及时除去培养瓶内的污染物，以保证植株的健康生长。
铁皮石斛组织培养
铁皮石斛的组织培养技术路线
外植体
培养基
丛生芽
生根发育
完整植株
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初代培养基的设计 诱导培养基
MS+BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖3%+琼脂6.8%【pH值5.2~5.6】
MS母液： I-V50ml,5ml,5ml,5ml 5ml。 激素母液：
BA10ml,NAA5ml
取MS母液： IV25ml,5ml,5ml,5ml, 5ml; 激素母液： NAA2~5ml
蔗糖：30g 琼脂：6.8g 香蕉汁：200ml 活性炭：20g
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生根培养将丛生芽无菌操作切下单株放在 生根培养基中于适宜条件下培养，约1~2 周后即生根，以长成完整植株。
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用洗洁剂 清洗后置 流水下冲 20~30 min。
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在超净工作台上 用75%的酒精消 30s0.1%HgCl2 灭菌5min后，用 无菌水冲洗5~6 次，放入垫有干 无菌滤纸的培养 皿中，以吸去多 余水分，茎段两 端各切 0.2~0.3cm。
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接种实验
一、接种准备工作 1、超净工作台开紫外灯照射10-20min送风 2、外植体消毒（继代培养采用已建立的无菌培养
铁皮石斛 组织培养
B1小组准备素材
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铁皮石斛的组织培养 铁皮石斛，为兰科多年生附生草本植物。生
于海拔达1600米的山地半阴湿的岩石上， 喜温暖湿润气候和半阴半阳的环境，不耐寒。 一般均能耐－5℃的低温。石斛可分为黄草、 金钗、马鞭等数十种，铁皮石斛为石斛之极 品，它因表皮呈铁绿色而得名。
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铁皮石斛种子组培繁育技术
作者简介 董薇(1985—) ,女,河北邢台人,助理研究员,硕士,从事药
用植物遗传育种研究。 ∗通信作者,研究员,博士,从事药
用植物及药食同源作物遗传育种研究。
收稿日期 2022-11-10
水分。
每瓶用 移 液 枪 吸 取 1 mL 均 匀 撒 在 诱 导 培 养 基 上。 以
培养基中原球茎增殖情况。 每处理 20 瓶,每瓶接种 5 个原
球茎,3 次重复,培养 45 d 后统计增殖情况,培养 90 d 后统计
原球茎分化生长情况。
1. 3. 4 生根壮苗。 选取继代增殖中 3 cm 左右、长势一致的
幼苗,转接至生根培养基中,以 MS+1. 0 g / L 活性炭为基础培
养基,添加不同浓度 NAA 和马铃薯泥,每种培养基接种 20
coefficient
0. 5
5. 3±0. 6
75. 4±0. 7
生长较慢,苗矮小,颜色绿,有细根
78. 9±0. 5
生长速度一般,颜色深绿,生长势强
72. 5±0. 6
生长速度较快,部分分化,颜色绿
73. 4±0. 5
生长快,颜色浅绿,部分玻璃化
0. 3
0. 3
0. 5
1. 0
0. 3
0. 5
1. 0
安徽农业科学,J. Anhui Agric. Sci. 2023,51(21) :177-179
铁皮石斛种子组培繁育技术
董 薇,余永亮,杨红旗,许兰杰,谭政委,杨 青,李 磊,安素妨,鲁丹丹,梁慧珍 ∗
( 河南省农业科学院芝麻研究中心,河南郑州 450002)
摘要 以铁皮石斛种子为材料,以马铃薯泥为培养基添加物,建立铁皮石斛种子实生苗组培体系。 结果表明,种子萌发形成原球茎最佳
铁皮石斛组培快繁技术研究进展
［ ４］郑丹 ．烤烟香气物 质的成 分及其影 响 因素 研究进 展 ［ ］ ．江 Ｊ 西农业学报 ，２０ ０ ９，２ ３ ：２ １（ ） ３—２ ． ６
［ ］任永浩 ，陈建军 ，马常力 ． ５ 不同根 际 ｐ Ｈ下烤烟 香气化学 成分
的研究 ［ ］．华南农业 大学学 报 ，１９ Ｊ ９４，１ （ ） ２ ５ １ ：１７—１２ ３． ［ ］ 中国烟草总公司郑州烟草研究院 ，中国农业科学院资源与农 业 ６ 区划研究所 ．中国烟草种植 区划 图册 ［ Ｍ］．陕西 ：西安 地图
２ 基本培养基及培养条件
铁 皮石 斛 组 织 培 养 主要 采 用 ＭＳ 、改 良 ＭＳ和 Ｂ ｜． １Ｈ为基 本培 养基 ；适 宜 光照 周期 为 １ ／ ｌ］ Ｉ ２ｈｄ ； １ ７
温度 以 （ ５±１ ℃最 适合 原球 茎 的生 长繁 殖 ，较 低 ２ ）
种源的重要基础。关于铁皮石斛 的组培快繁技术 已
参 考文 献 ：
［ ］ 白智 勇．１９ １ ９３～１９ ９ ８年世界 各 国烟 叶产量统 计 ［ ］．上 海烟 Ｊ
叶 ，１９ （ ） ５— ７ ９ ９ ２ ：５ ５ ．
出 版 社 ，２ ０ ． ０９
［ ］ 王丹林 ．不 同育 苗方式对 烟株生 长发育 的影 响 ［ ］．耕 作与 ７ Ｊ
［２ １］黄光荣 ． 同轮作方式对烤烟病虫害及产量品质的影响 ［］． 不 Ｊ
河 南 农 业 科 学 ，２０ （ ） ０— ２ ０ ９ ５ ：４ ４ ．
（ 责任 编辑 ：柯 文辉 ）
２ ６
琅 舛妓
２０ 第１ ０年 期 １
箱 ｔ 琅 舛艘
２ ５
铁 皮 石 斛 组培 快 繁 技 术研 究 进展
铁皮石斛繁殖方法
铁皮石斛繁殖方法
铁皮石斛是一种草本植物，常见于热带地区。
它的繁殖方法主要包括以下几种：
1. 分株繁殖：将铁皮石斛的茎部分成若干个小段，每段至少要有一个芽眼，然后将这些茎段分别种植在适宜的土壤中。
通常选择生长良好的铁皮石斛茎段进行分株繁殖，可以提高繁殖的成功率。
2. 插条繁殖：选取健康的铁皮石斛茎部，并将其剪成适当的长度，然后将茎部插入湿润的砂土中，保持湿度并避免直射阳光。
插条需要经常喷水以保持湿润，大约2-3个月后插条就能生根并开始生长。
3. 种子繁殖：铁皮石斛也可以通过种子进行繁殖。
首先将成熟的铁皮石斛果实取出并晾干，然后将种子撒在适宜的培养基上，覆盖薄层土壤，保持湿润。
每天喷水以保持适宜的湿度，大约1-3个月后可以看到幼苗的出现。
无论是分株、插条还是种子繁殖，都需要提供适宜的生长环境，包括适宜的温度、湿度和阳光照射。
同时，注意保持土壤湿润，但避免过度浇水造成积水。
另外，提供适量的养分也是促进铁皮石斛繁殖生长的重要因素。
铁皮石斛组织培养
小苗可以用苔藓或水苔!中苗就要树皮石子加苔藓!大苗可用石子树皮等!至于用来培养组织苗的培养基属难告知恩，这个我知道，我就想出了MS培养基，没有其他适合的了吗？培养基也属于商业秘密啊？很多好一些的营养基都是商业密秘!我会去给你找个适合石斛的营养基.只能给你个普通的!希望你喜欢石斛较常见的培养基配方,花宝三克,百分之十到百分之二十的萍果汁一千毫升,蔗糖浓度百分之三点五.琼脂十五克.蒸溜水一千克氢离子浓度调节到一万纳摩/升(PH5.0)常规铁皮石斛开花后采用人工方法授粉，将其种子接种在１／２ＭＳ液体培养基中非共生萌发培养时，再转入含有０．０１％Ｏｒｙｚａｌｉｎ＋０．０１％秋水仙碱的１／２ＭＳ液体培养基中进行诱变处理，然后转入１／２ＭＳ固体培养基上，光照；取新生长的根尖固定，用压片法制备染色体标本，卡宝品红染色液染色，染色体数目为２ｎ＝７６的幼苗为四倍体铁皮石斛，按通常方法进行栽培管理。
现在大部分采用松树皮发孝后来种的！铁皮石斛组织培养的培养基用到的主要基本培养基是MS培养基，也不只是这一种，其它的WV、winte等都可以用，但是一般多用MS培养基，也可以用1/2MS培养基，大量元素减半，其它元素不变。
除此之外，还有加一些生长素（如IAA、IBA、NAA等），细胞分裂素（如6-BA等）。
但是不同的培养时期也不同的激素配合。
如诱导愈伤组织时，要两种激素的配合。
增殖传代时也要两种激素的配合，但生长素为主；分化时以分裂素为主，壮苗和生根以生长素不主。
一般用量都是0.1-10mg/L这个范围里。
此外，还有的加了什么香蕉素，椰看你是用什么外植体，或是想诱导什么先了，一般如果是茎段的话，用一般的MS+0.3mg/L NAA+5mg/L 6-BA做诱导培养基就好，但是如果你要用根茎做外植体诱导原球茎的话，最号用1/2MS加上水解乳蛋白和激动素和6-BA 就好,量看你外植体了，不同的类型不同乳等。
一般NAA：6-BA是10：1，即2：0.2mg/L（一）繁殖技术石斛的繁殖方法分为有性繁殖和无性繁殖两大类，目前生产上主要采用无性繁殖方法。
铁皮石斛组织培养与快速繁殖(简报)
＋ 香蕉汁 ２ ％；（ ） ／ ０ １ １ ＭＳ －Ａ２ ＋ Ａ ．＋ ０ ２ ＋６ ． Ｎ Ａ ０ 香蕉汁 ２％；壮苗培养基（１ ＭＳ＋ Ｂ ０ ５ ０ １） 香蕉汁 ２ ％＋ ０ ０ ２ ｇ ／ Ｌ白糖 ； １） （２ ＭＳ＋ 蕉 汁 ２ ％ ＋３ ｍ 白糖 ； １） 香 ０ ０ｇ （３ ＭＳ＋ 香蕉 汁 ２ ％ ＋ＮＡ ．；１） ０ Ａ０２ （４ ＭＳ＋ 香蕉 汁 ２％ ０ ＋ Ａ ． （５ ＭＳ 香蕉汁 １％；１） ＋ Ｎ Ａ ０ ；１） ＋ ５ ０ （ ＭＳ 香蕉汁 １％；１） ＋ ６ ５ （７ ＭＳ 香蕉汁 ２ ％； ０ 生根培养基（ ） ／ １ １ ＭＳ ８ ２ ＋Ｎ Ａ ０ ＋ Ａ ５ 香蕉汁 １％。上述培养基中的 １ ＭＳ大量元素为 ＭＳ的 ０ 倍 ，其他成分不变，未加 白糖 ． ５ ／ ２ ． ５
果 实切 开一小 口，让 种子均 匀撒播在 培养基 上培 养 。
３ ． ２获得无茵苗 将经过处理的种子接种到萌发培养基（ 一 ４上 ， １ （） 先在暗培养箱中培养 ７ ， ） 再转入光 ｄ 照条件下培养 ，１ 后种子变绿 （ １ 胚开始萌发 ， ０ 后培养基（ ～ ３中的种子发育成原球茎 ， ０ ｄ 图 ）， ４ ｄ １ （） ） 三者无明显差异 ，而培养基（） ４上产生了很多分化芽。由此可知 ，加入一定浓度的马铃薯汁可以加速种 子萌发分化成小苗。 ３ ． ３原球茎的增殖与分化 原球茎分别接种于培养基（） （） ， ５、 ６ 上 培养 ４ 后 ， ０ ｄ 培养基（） ５ 原球茎分化成 整齐的小苗 （ ２ 图 ），培养基（ 的原球茎分化较少 ，由此可知 ，添加马铃薯提取物更有利于促进原球 ６ ） 茎分化。原球茎分别接种于（ ０ ） ７ ） ｏ培养基上 ，培养 ４ 后观察可知 ，培养基（ 、（ ） ０ ｄ ９ １ 原球茎增殖多 ， ） ０ 分化芽较为矮小；同时发现 ， 加入一定浓度的 Ｎ Ａ可以促进原球茎的分化。 Ａ 综合 以上试验结果初步确 定 ：最有利于铁皮石斛原球茎分化的培养基配方为 １ ＭＳ＋ ／ ２ 马铃薯汁 ２％＋ Ａ １ ０ Ｎ Ａ０ 。 ．
铁皮石斛快繁与种植技术
铁皮石斛组培与种植铁皮石斛(DendrobiumcandidumWall. exLindl.)为兰科多年生草本，属附生兰类。
明代李时珍的《本草纲目》中记载：石斛除痹下气、补内脏虚劳赢瘦，强阴益精。
久服，厚肠胃，补内绝不足。
来胃气，长肌肉，益智除惊，轻身延年。
道教医学经典《道藏》中，铁皮石斛名列中华.. “九大仙草”之首。
我国野生的铁皮石斛资源主要分布在皖、浙、云、贵、川等地高山峻岭的悬崖峭壁和岩石缝隙中。
由于铁皮石斛生长条件的特殊性和分布的局限性，又经长期采挖，自然资源濒临枯竭，国内市场供应紧缺，国际市场每千克干品价已达10000美元以上。
1987年国务院将铁皮石斛列为重点保护的中药材之一。
而植培快繁技术是解决植物优良无性系用苗的良好途径，所以，对这一珍贵植物资源，我们决定用组织培养技术来进行快繁。
繁殖材料(云南铁皮石斛瓶栽苗，云南枫斗生物科技有限责任公司购得。
)以铁皮石斛(DemdrobiumcardidumWall. exLindl)无菌幼苗茎段为外植体, 分别研究了不同基本培养基、天然附加物和植物生长调节剂对铁皮石斛原球茎、不定芽诱导、增殖和生根的影响. 结果表明, 在不定芽诱导和增殖中, 4种基本培养基中以B5的效果最好. 而芽增殖率则以B5基本培养基中添加011mg/L6- BA的效果最好;在3种天然附加物中,以添加椰子汁对芽的增殖效果最好;原球茎的增殖以110mg/L的NAA效果最佳, 诱导生根则以110mg/L的NAA效果最明显.（周俊辉, 钟雪锋, 蔡丁稳，恺农业技术学院园艺园林系, 广东广州510225）试剂处理：在基本培养基中分别添加NAA015mg/L、6- BA015mg/L、蔗糖20g/L,调pH至5.18.在超净工作台上,将铁皮石斛试管苗切成1～2cm的茎段,在以上培养基上接种进行芽诱导. 每组各接种25瓶,随机抽取其中20瓶进行生长性状观测. 培养时间均为1个月,培养温度(25±1) ℃,光照强度1500～20001x,每天光照12h。
铁皮石斛的组培快繁技术
铁皮石斛的组培快繁技术
1.植物简介
铁皮石斛(Dendrobiumofficinale)是兰科石斛属多年生附生草本植物，为我国特有的名贵药材。
2.培养条件
增殖培养基：MS+NAA0.1mg/L+6-BA2.0mg/L；
生根培养基：MS+IBA0.5mg/L+NAA0.5mg/L。
pH调至5.8，培养温度21~25℃，光照1500lx，光照时间12h/d，环境湿度60%~80%。
3.材料与方法
选取生长旺盛、植株健壮的铁皮石斛无菌幼苗植株，以茎节为中心切下，节的上下各留0.5cm的茎段，接种于增殖培养基上，待苗子长至2~3cm时即可进行生根。
4.炼苗移栽
移栽前先将瓶苗移至炼苗房炼苗，慢慢适应自然环境，通常在常温下炼苗7天左右。
待瓶苗生长健壮、叶色浓绿，苗长5~7cm高时出瓶移栽。
组培苗出瓶时，打开瓶塞将培养基与小苗一起轻轻取出，不要伤及根茎部。
先用流水洗去根部附着的培养基，在阴凉通风处晾根半天至根发白，栽入盛有基质的穴盘中。
铁皮石斛的种植方法及繁殖
铁皮石斛的种植方法及繁殖铁皮石斛是一种多年生攀援灌木，原产于岭南一带，常见于许多我国的园林庭院，因其叶片表面的色泽独特，形状似豆荚而又有石状的特点，所以又被叫做石斛或铁皮石斛。
铁皮石斛在园林中可以做绿化点缀，是一种被广泛种植的灌木植物，可以改善空气质量，有利于环境美化。
一、种植方法：1、地块选择：铁皮石斛耐阴性较强，最好选择地势较高的地块种植，以获得较好的通风状况以及日照充足的条件，可以提高植物的生长发育环境。
2、准备土壤：铁皮石斛喜欢肥沃，排水性好的土壤，可以在种植前，提前将土壤施用适量的有机肥料，以改善土壤质地，促进植物生长发育。
3、种植方法：铁皮石斛有花、果、叶三个部位，可以选择不同部位种植，可以在秋季种植，也可以在春季种植，在选择好种植位置后，将植物挖进植坑中，平衡植株的高度，待根系有一定的发育以后，再对土壤进行深耕，保证湿润，这样可以加速植物的生长发育。
二、繁殖方法：1、嫁接繁殖：铁皮石斛嫁接繁殖比较常见，嫁接的效果比较好，嫁接的方法有横向嫁接、角向嫁接或植物茎嫁接等，可以根据植物的需求来选择嫁接的方式，并将嫁接点涂抹树脂，以保证嫁接点不容易脱落。
2、分类繁殖：铁皮石斛可以选择将植株拆分为2-3个地段，然后挖出土壤，将植株拆分为几部分，再将植株放回原地即可，只需要定期浇水，植株就会发芽繁殖。
三、养护方法：1、浇水：为了保证植物的正常生长发育，应定期根据季节的不同，适当浇水，但不能过多的浇水，也不能浇水过于频繁，以免引起植物生长过快，出现逆生等现象。
2、肥料施用：为了保证植物有良好的生长状态，可以在春季和秋季适当施用少量的有机肥料，以满足植物的营养需求，从而达到维持植物叶片的新鲜度以及营养的需求。
总的来说，铁皮石斛要想获得较好的成果，必须要注意在种植、繁殖以及养护方面的关键点，这样才能让植物生长发育的更好，达到环境美化的目的。
铁皮石斛组织培养技术
： “ + ” 代表生长状态一般 ， “ + + ” 代表生长状态良好， 注 “ + + + ” 代表生长状态优秀。
消毒时间 min 5 7 9 11
2. 2 不同激素组合对不定芽诱导的影响 将消毒处理的茎段接种在以 MS 为基本培养基， 不同激素组合的培养基中 （ 表 2 ） ， 茎段继续生长， 接种 5 ～ 30 d 后茎段节点处开始长出不定芽 （ 图 1 ） 。 45 d 后观察统计不定芽诱导生长情况 。
2
结果与分析
2. 1 外植体消毒 试验结果表明 （ 见表 1 ） ，11 min 的处理时间污 染率为最低，但死亡率最高为 46. 7% ； 9 min 消毒时 间处理效果最佳，污染率较低的同时成活率最高。所 以，经使用 70% 乙醇进行表面灭菌处理 30 s 后， 再 用 0. 1% 氯化汞溶液消毒 9 min 是最适宜铁皮石斛茎 段的消毒方法。
收稿日期： 2012-10-30 修回日期： 2012-11-09 作者简介： 彭颖，研究生，研究方向： 分子细胞遗传学。E-mail： 124995048@ qq. com 洪亚辉，通信作者，教授，研究方向： 分子细胞遗传学。E-mail： yahuihong@ vip. sina. com
彭颖
Tab. 1 表 1 不同消毒时间对茎段培养的影响 Effects of different disinfection time treatments on stem segment tissue culture
外植体数 污染数 30 30 30 30 21 17 8 6 污染率 % 70. 0 56. 7 26. 7 20. 0 成活数 9 11 19 10 成活率 % 30. 0 36. 7 63. 3 33. 3 死亡率 % 0 6. 7 10. 0 46. 7
铁皮石斛组培快繁技术实例分享 · 附配方
铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo），属微子目，兰科多年生附生草本植物，是名贵的中药材。
本文在前人研究的基础上，以铁皮石斛的未成熟种子为外植体材料，研究了铁皮石斛的再生体系，其研究结果可为铁皮石斛的工厂化育苗提供技术支撑。
1 材料与方法1.1 外植体材料及培养条件1.1.1 外植体选择实验材料为八成熟的铁皮石斛蒴果。
1.1.2 材料预处理及消毒将铁皮石斛的蒴果先用自来水冲洗干净，再置于洗洁精溶液中摇洗3次，每次摇洗5分钟；取出蒴果用自来水洗净，沥干水后。
在超净工作台上先用75%浓度的酒精消毒3分钟，倒去酒精；再用0.15%的升汞消毒15分钟；倒去升汞消毒液，用无菌水冲洗4-5次，沥干备用。
接种时，将经过表面消毒的蒴果放在无菌的不锈钢盘上，切除头尾约0.5厘米部分并弃去，然后将蒴果中段沿纵轴切开，取出种子，均匀地接种到培养基表面。
1.1.3 培养条件培养室温度为(25±2)℃，以日光灯为光源，光照强度为2000-2500lx，照光10小时/天。
2 结果与分析2.1 初代培养：种子的萌发与无菌材料的建立将铁皮石斛的未成熟种子接种在初代培养基（配方见文末，下同）上，培养约15天后，用肉眼可观察到在培养基表面有浅绿色的小团粒(直径0.5-1.5毫米)。
这些浅绿色颗粒系原球茎体，或为少数原球茎体已萌发出子叶和第1片真叶而形成的无菌实生小苗。
再经过20-25天的培养，大部分原球茎体已萌发，形成了具1-2片真叶的幼苗，同时也产生了一些新增殖的原球茎体。
这些幼苗和原球茎体相互堆挤在一起，占满了初代培养基整个表层及表层上约1.5厘米厚的空间。
此时，铁皮石斛无菌材料的建立即告完成，应该及时将无菌实生小苗或原球茎体转接到新配制的增殖培养基或者生根壮苗培养基上进行培养。
2.2 继代增殖培养建立了铁皮石斛的无菌材料后，将原球茎转接到增殖培养基，培养90天，增殖系数非常高。
铁皮石斛组培技术
铁皮石斛组培技术(总18页)--本页仅作为文档封面，使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--铁皮石斛的组织培养研究专业班级：姓名：学号：课程：植物组织培养目录摘要 (4)Abstract (5)前言 (6)1.培养基 (7)配方 (7)配制（以1000ml幼株的生根壮苗培养基为例） (7)灭菌 (9)2.转接 (10)转接前准备 (10)转接 (10)培养 (10)3.炼苗 (11)炼苗目的 (11)炼苗方法 (11)4.移栽 (12)基质选择 (12)移栽技术要求 (12)5.结论与分析 (13)参考文献 (14)摘要铁皮石斛(Dendrobium officinale)是兰科(Orchidaceae)石斛属(DendrobiumSw．)多年生草本植物。
铁皮石斛为石斛之极品，它因表皮呈铁绿色而得名。
铁皮石斛是传统名贵中药材，有生津益胃、清热养阴和清咽利嗓等功效，主要药用成分石斛多糖是一种免疫调节剂。
铁皮石斛蒴果成熟时易开裂，且种子粒径小，自然繁殖率低。
为了保护和有效利用铁皮石斛，通过组织培养技术大量快速繁殖铁皮石斛组培苗显得尤为重要。
关键词：铁皮石斛组织培养移栽培养基转接快速繁殖AbstractDendrobium orchid Dendrobium is a perennial herb. It is the ultimate in DendrobiumSw,named for its ferric green a rare traditional Chinese herbal medicine,it contributes to dry dampness and strengthen the spleen,clear away lung-heat ,nourish yin ，clear away heat ,and so main medicinal components of Dendrobium polysaccharide is a kind of immune mature,its capsule cracks,in which seeds are in small particle size and have a low rate of natural order to protect and utilize the Dendrobium orchid Dendrobium ,it is particularly important to establish a rapid propagation by the tissue culture technique .key words:Dendrobium orchid Dendrobium tissue cultureculture medium adapter rapid propagation前言多年生草本，具有气生根。
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＋Ｂ Ａ２ ． ０ ｍｇ・Ｌ ＋ ＮＡＡ ０ ． １ ｍｇ・Ｌ － 。 ， 不 加 活
（ １ ） 继代培养基为 ： ① ＭＳ ＋Ｂ Ａ２ ． ０ ｍｇ・Ｌ
陈碧华 张 娟 范辉 华 李乾振
（ 福建省林业科学研 究院 福州 ３ ５ ０ ０ １ ２ ）
铁皮 石斛 Ｄ ｅ ｎ ｄ ｒ ｏ ｂ ｉ ｕ ｍｏ ｆ ｆ ｉ ｃ ｉ ｎ ａ ｌ ｅ ， 又 叫黑 节草 、
（ ２ ）生 根 基 本 培 养 基 采 用 ： ＭＳ 、１ ／ ２ ＭＳ 、 １ ／ ４ ＭＳ ， 附力 ⅡＢ Ａ０ ． ２ ｍｇ・ Ｌ 一 、 ＮＡＡ１ ． ０ ｍｇ・ Ｌ 一 。
云南 铁皮 、 铁皮兰， 是 兰科 Ｏ ｒ ｃ ｈ ｉ ｄ ａ ｃ ｅ ａ ｅ多年 生 附 生 草本植物 ， 是 一种 珍贵 的野 生药 用 植物 。石 斛具 有 抗肿瘤 、 抗衰老、 增 强人 体 免 疫力 和扩 张 血 管 的作 用 。铁皮石斛 种子 自然 条件 下 繁殖 力低 ， 仅 靠分 株
１ ． １ 试 验材 料
将 无菌瓶 苗 生长正 常 的茎 芽 切下 ， 转 入继 代增 殖培养 基 ， 每次 培 养 ６ ０天 ， 重 复 ３次 ， 共培养 １ ８ ０
天， 观 察茎 芽增殖 生长状 况 ， 结果见 表 １ 。 表 １ 可 以看 出 ： 连续 采 用 ＭＳ为基 本 培 养 基 ， 导致 下部 叶片 轻 度 黄 化 ， 生长迟缓 ； 采 用 Ｎ６为 基
ｃ ｍ， 达 到组 培 工 厂 化 育 苗 水 平 。在 此 基 础 上 增 加 ０ ． ５ ｇ・ Ｌ 活性 炭 ， 茎 芽 增 殖倍 数 只 达 到 ２ ． ９ ， 但
平 均芽 长达 到 ５ ． ４ ｃ ｍ。 因此 ， 可 以选 择 不 加 活 性 炭 为增 殖培养 基 ， 添加活 性炭 为壮 芽培养 基 。
繁殖速度慢 ， 加上 长期人为挖掘 ， 使 得铁皮 石斛 野生 资源 日益枯 竭 。上 世纪 八 十年代 ， 铁 皮石 斛 被列 为
生根 培养 ８ Ｏ天 ， 每试验 ３ ０瓶 ， 重复 ３次 。 以上培 养基 均 附加 白糖 １ ５ ｇ・ Ｌ 和卡 拉 胶 ５ ． ５ ｇ・ Ｌ ～，
第４ ２卷
第 ５期
湖
北
林
业
科
技
Ｖｏ １ ． ４ ２． ＮＯ ． ５ Ｏｃ ｔ ． ， ２ ０ １ ３
２ ０ １ ３年 １ Ｏ月
Ｈｕ ｂ ｅ ｉ Ｆ ｏ ｒ ｅ ｓ ｔ ｒ ｙ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ａ ｎ ｄ Ｔｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ
铁皮石斛 组织培养快繁技术
石狮琼脂付食品加工厂） ５ ． ５ ｇ・ Ｌ ～， ｐ Ｈ ５ ． ８ 。
＊ 收 稿 日期 ： ２ ０ １ ３ －０ ６ —２ ３
基金项 目： 福建省林业厅项 目 “ 铁 皮石斛组织培养快繁技术的研究” （ 闽林科 ￣ ２ ０ １ ２ ３ ２ 号） ； 福 建省森林培育与林产 品加工 利用重点实
铁 皮石斛 无 菌 瓶 苗 。于 ２ ０ ０ ９年 １ １月 １ ６日，
在超净 工 作 台 上 取 出铁 皮 石 斛 无 菌 瓶 苗 ， 切 除 根
系ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 留取 ２ ／ ３以上 茎芽 ， 作 为试验 原始 材料 。
１ ． ２ 试验 方法
本培 养 基 ， 下部 叶片 严重 黄 化 ， 生 长 迟 缓； 采 用
国家重 点保 护的珍稀濒危药 用植物 。 为 了满足 市场 的需求 ， 国内许 多科研 人 员 对铁 皮石斛组 织培养 技术 进行 研究 ， 但 培养 基和 添 加剂 种类及其 含量有 所不 同， 扩 繁速 度 和培 养 出 的苗木 质量也不 同 ， 组培 苗繁殖率 低 、 生 根率低 、 苗木 品质 差、 成本高 ， 影 响了铁皮石斛 的产业化 生产 。本文重 点在 于提 高铁 皮 石 斛 继 代增 殖 率 、 茎芽长势、 生根 率， 为铁皮石斛规模化 生产提供可靠 的技 术基础 。
ｐＨ ５ ． ８。
（ ３ ） 添 加剂 ： 蛋 白胨 （ ｐ ｅ ｐ ｔ ｏ ｎ ｅ ， 北京 奥 博 星 ） 、 苹 果 汁（ 去皮 ） 、 香 蕉汁 （ 去皮 ） 、 马铃 薯 汁 （ 去皮 ） 。 １ ． ３ 培 养条件
继代 培养 光照 强度 １ ５ ０ ０ ￣２ ０ ０ ０ ｌ ｘ ； 生根 培养
＋ＮＡＡ ０ ． １ ｍｇ・ Ｌ 一 ；② Ｎ６ ＋Ｂ Ａ２ ． ０ ｍｇ・ Ｌ ＋ＮＡＡ ０ ． １ ｍｇ・ Ｌ 一 ；③ １ ／ ２ ＭＳ ＋Ｂ Ａ２ ． ０ ｍｇ・
性炭 ， 茎 芽 增 殖倍 数 达 到 ５ ． ８ ， 平均芽 长达到 ３ ． ８
Ｌ ＋ＮＡ Ａ ０ ． １ ｍｇ・ Ｌ ～ 。并 附加 添 加 剂 作 为 对 比试 验 。继代 培养 ６ Ｏ天 ， 每试 验 ３ ０瓶 ， 重 复 ３次 。 以上 培养 基均 附加 白糖 ３ ０ ｇ・ Ｌ 和 卡拉 胶 （ 福 建
验室资助。
作者简介 ： 陈碧华 （ １ ９ ６ ７ ￣） ， 男， 福建龙海人 ， 博士 ， 高级工程师 ， 主要从事林业 生物技术研究工作 。
第 ５ 期
陈碧华等 ： 铁 皮石斛组织培养快繁技术
表 １ 铁 皮 石 斛 不 同继 代 基 本 培 养 基 增 殖 情 况
初期 光 照强度 为 １ ５ ０ ０ ￣２ ０ ０ ０ ｌ ｘ ， 以后炼 苗光 照增
加到 ３ ０ ０ ０ ￣５ ０ ０ ０ ｌ ｘ 。培养 温度 为 （ ２ ６ ±２ ）ｏ Ｃ， 光
照 时间 １ ２ ｈ ／ 天。
２ 结果与分析
２ ． １ 继代增 殖
１ 材 料 和方 法