禽白血病病毒分离鉴定

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一例禽白血病的临床诊断

一例禽白血病的临床诊断

一例禽白血病的临床诊断禽白血病,是由一种非致瘤病毒引起的急性、亚急性、慢性传染病。

病毒主要侵害家禽,特别是鸡,引起严重的生产经济损失。

本文将介绍一例禽白血病的临床诊断过程,供临床医生和兽医参考。

病史采集:一只3个月大的家养母鸡出现明显的食欲下降、体重减轻、腹泻、呼吸急促等症状。

饲养者发现鸡冠色泽异常,眼睛周围有血管扩张,体温略有升高。

兽医对该鸡进行详细的病史询问,了解其日常饲养条件、饲料情况、生长发育情况等。

临床观察:对该鸡进行临床观察,发现其精神差、食欲下降、毛色暗淡,腹部明显膨胀,并有浓稠的腹水,呼吸急促,体温轻度升高。

鸡冠色泽偏暗、松软,眼睛周围可见明显的血管扩张。

对该鸡进行全身骨骼和肌肉的触诊、听诊等检查,未觉明显异常。

实验室检查:对该鸡进行实验室检查,主要包括血液学检查和病毒学检查。

血液学检查结果显示:红细胞计数和血红蛋白浓度显著降低,红细胞体积分布宽度增大;白细胞计数和淋巴细胞计数明显升高;血小板计数显著降低;外周血涂片显示红细胞形态不规则,白细胞核分叶增多。

病毒学检查结果显示:通过PCR方法检测到禽白血病病毒的存在。

诊断:根据病史、临床观察和实验室检查结果,对该鸡的诊断为禽白血病。

进一步结合其他饲养鸡的发病情况和死亡情况,对该批鸡进行疫情调查,发现该批鸡中多只鸡出现类似症状,部分鸡已经死亡。

进一步提示了禽白血病的疑虑。

治疗及预防:对该鸡和同批鸡进行隔离,对病鸡进行支持治疗,包括提供高营养的饲料、维生素和微量元素的补充等。

对存活的鸡进行疫苗接种和消毒措施,预防传染。

对已死亡的鸡进行处理和消毒,避免病毒传播。

总结:对禽白血病的临床诊断需要全面了解病史、仔细观察临床症状,并进行必要的实验室检查。

及时的诊断可以帮助饲养者采取有效的控制措施,减少经济损失。

家禽饲养者也需要密切关注饲养环境和鸡的健康状况,定期进行疫情监测和预防措施,确保鸡的健康和产能。

E_亚群禽白血病病毒分离株的全基因组序列分析

E_亚群禽白血病病毒分离株的全基因组序列分析

·研究论文·Chinese Journal of Animal Infectious Diseases中国动物传染病学报E 亚群禽白血病病毒分离株的全基因组序列分析摘 要:为了弄清江苏省某一地方品种种鸡场病死鸡的死亡原因,采集病死鸡组织,检测显示仅为ALV 阳性;通过CEF 和DF-1细胞培养、p27抗原检测和间接免疫荧光(IFA )对病毒进行鉴定;对病毒分离株前病毒DNA 序列进行全基因组序列测定与分析。

结果显示:分离株能够在CEF 上生长,上清液中可检测到p27抗原,CEF 出现特异性绿色荧光,DF-1细胞培养物以上检测均为阴性,初步表明分离株为ALV-E ,命名为JY202106;其基因组大小为7529 bp ,符合复制完整型C 型反转录病毒特征,缺乏肿瘤基因;序列分析显示,分离株与参考株同源性为84.3%~98.7%,gp85进化分析分离株与ALV-E 同属一个进化分支,与ev-1株同源性高达99.2%。

研究表明地方品种鸡中存在内源性ALV ,为该病的防控提供了参考和依据,也丰富了ALV 基因组数据资料。

关键词:禽白血病病毒;E 亚群;分离鉴定;基因组分析中图分类号:S852.65文献标志码:A文章编号:1674-6422(2023)03-0134-08Whole Genome Sequencing of an Avian Leukosis Virus Subgroup E IsolateWU Zhi 1,2, WU Shuang 2, YUAN Huisha 2, ZHANG Cong 2, ZHU Shanyuan 2, FAN Hongjie 1(1. Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China; 2. Jiangsu Key Laboratory for High-Tech Research and Development of Veterinary Biopharmaceuticals, Engineering Technology Research Center for Modern Animal Science and Novel Veterinary PharmaceuticDevelopment, Jiangsu Agri-Animal Husbandry Vocational College, Taizhou 225300, China)收稿日期:2022-11-19基金项目:江苏高校“青蓝工程”项目[苏教师函(2020)10号];江苏省高等学校自然科学研究重大项目(21KJA230001);江苏省2019年度高交优秀科技创新团队“动物疫病防控技术研究”项目(苏教科函[2019] 7号)作者简介:吴植,男,硕士,副教授,主要从事畜禽疫病防控技术研究通信作者:范红结,E-mail:************.cn2023,31(3):134-141吴 植1,2,吴 双2,袁慧莎2,张 聪2,朱善元2,范红结1(1.南京农业大学,南京200241;2.江苏农牧科技职业学院 江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室江苏现代畜牧与新兽药工程技术中心,泰州225300)Abstract: To determine the cause of death of breeders without significant clinical signs on a chicken farm in Jiangsu province and analyze genomic characteristics and evolution, heart, liver, lungs, kidney and bursa were collected for detection of Avian leukemia virus (ALV). The tissue samples were inoculated onto CEF and DF-1 cells. The results showed that the virus isolate was only cultured on CEF cells and the p27 antigen was detected in the supernatant. The inoculated CEF cells showed specifi c green fl uorescence in indirect immunofl uorescence assay. The isolated virus was designated as JY202106 isolate. The whole genome of this isolate was sequenced with the full length of 7529 nt, which had a genetic organization typical of replication-competent C retroviruses lacking oncogenes. In addition, sequence analysis showed that the JY202106 isolate shared 84.3%-98.7% nucleotide homology of the whole genome with the subgroup reference strains. The gp85 gene of the JY202106 isolate had the highest identity to that of ev-1, the prototype of ALV-E. This study provided additional data for understanding the genetic evolution of ALV and provided a reference for ALV prevention and control.Key words: Avian leukemia virus; subgroup E; isolation and identifi cation; genome sequence analysis吴 植等:E亚群禽白血病病毒分离株的全基因组序列分析· 135 ·第31卷第3期禽白血病病毒(Avian leukosis virus, ALV),又称Rous相关病毒[1](Rous associated viruses, RAVs),属于逆转录病毒科正逆转录病毒科α逆转录病毒属成员[2],其基因组结构为5'LTR-5'UTR-gag-pol-env-3'UTR-3'LTR,主要引起淋巴白血病、骨硬化病、骨髓成细胞增多症、血管瘤等多种肿瘤性疾病[3-4],给我国养禽业造成了严重的经济损失,目前尚无有效药物和疫苗可供使用,控制该病最有效的措施是对种鸡核心群开展净化[5-6]。

地方品系鸡中一株 A 亚群鸡白血病 病毒的分离和鉴定

地方品系鸡中一株 A 亚群鸡白血病 病毒的分离和鉴定

中国动物传染病学报 2009,17(4):31-35 Chinese Journal of Animal Infectious Diseases・研究论文・地方品系鸡中一株A亚群鸡白血病病毒的分离和鉴定朱美真,吴玉宝,崔治中(山东农业大学动物科技学院,泰安271018)摘 要:将种蛋孵化到9~11d,分别制备成鸡胚成纤维细胞(chicken fibroblast cells,CEF)培养,再将其细胞上清接种对内源性白血病病毒(avian leukosis virus,AL V)有抵抗力的DF1细胞,从山东某地方品系种蛋中分离到一株外源性AL V,SDAU09E1。

用PCR扩增其囊膜蛋白基因(env)并隆测序后,将其g p85序列与已发表的各亚群AL V比较分析表明,该毒株与A亚群6个毒株同源性最高,为8911%~9019%,而与已发表的鸡的A、C、D、E亚群AL V的gp85的同源性仅在7312%~8719%之间,与目前国内最常见的J亚群的g p85的同源性更是低至3013%~3214%。

这是我国地方品系鸡群中第一次分离和鉴定出AL V2A及其g p85基因。

关键词:A亚型禽白血病病毒;g p85基因;地方品系鸡中图分类号:S858.312.659.3文献标识码:A文章编号:167426422(2009)0420031205ISOLATION AN D IDENTIFICATION OF SUBGR OUP A AVIANL EUK OSIS VIRUS FR OM CHICKENS OF A LOCAL BREEDZHU Mei2zhen,WU Yu2bao,CU I Zhi2zhong(College of A nimal Science and Technology,S handong A gricultural University,Taian271018,China)Abstract:The fertilized eggs were collected from a local breed chicken flock and incubated for9211days, chicken fibroblast cells(CEF)were p repared f rom t hese embryo s one by one and incubated for729days. The supernatant was collected f rom each CEF cult ure and inoculated into DF1cells.The inoculated DF1 cell cult ures were incubated for anot her9days and tested for avian leukosis virus(AL V)group specific p27antigen in EL ISA.A exogenous AL V,SDAU09E1,was identified.By PCR amplification of t he g p85 parison of gp85amino acid sequences between SDAU09E1and ot her ALV st rains of different subgroup s indicated t hat SDAU09E1had t he highest homology wit h6reference strains of subgro up A(in t he range of8911%29019%),but t he homology wit h ot her subgroup s B,C,D and E was only in t he range of7312%28719%.In addition,t h homology between SDAU09E1and several st rains of subgroup J,mo st common in China,was as low as3013%23214%.This is t he first report on isolation and identification of ALV subgroup A from local breed chickens in China.K eyw ords:Subgroup A of avian leukemia virus;envelope gp85gene;chickens of local breed 禽白血病病毒是最早证明能引发肿瘤的病毒,属a反转录病毒属。

禽白血病的检测与诊断

禽白血病的检测与诊断

禽白血病的检测与诊断禽白血病(Avian Leukosis)是一种由禽白血病病毒引起的急性、亚急性或慢性传染病。

该病主要影响鸡、火鸡和鸽子等禽类动物,对禽类养殖业造成了严重的经济损失。

禽白血病病毒主要通过接触、垂直传播和水平传播途径传播,引起感染动物的免疫功能失调,导致机体出现贫血、免疫抑制和肿瘤形成等严重症状。

及早对禽类进行禽白血病的检测和诊断是非常重要的。

一、检测方法1. 血清学检测血清学检测是禽白血病检测的常用方法之一。

该方法通过采集禽类动物的血清样本,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)或凝集素试验等技术,检测血清中是否含有禽白血病病毒抗体。

若检测结果呈阳性,则说明动物已被感染禽白血病病毒。

2. 分子生物学检测分子生物学检测是目前禽白血病病毒检测的主流方法之一。

该方法利用聚合酶链式反应(PCR)技术,针对病毒DNA或RNA进行检测,具有高度的特异性和敏感性。

通过该技术可以直接检测病毒在禽类动物的血液、组织或分泌物中的存在情况,从而及时发现患病动物,防止病毒的传播。

病理学检测是通过病理学方法对禽类动物的组织标本进行检测,观察组织病变的形态学改变,以及病毒的存在情况。

通过病理学检测可以直观地判断动物是否感染了禽白血病病毒,对于疑难病例的诊断具有重要意义。

二、诊断方法1. 临床表现禽白血病的临床表现包括贫血、体重减轻、食欲不振、呼吸困难、腹部肿块、运动障碍等症状。

对于出现上述症状的禽类动物,应及时进行禽白血病的诊断。

2. 实验室检测利用上述的检测方法对禽类动物进行实验室检测,可以明确禽白血病的感染情况。

根据检测结果,结合临床表现,可以对禽白血病进行准确的诊断。

通过对禽类动物的组织标本进行病理学检测,可以观察到病理改变的特征,如淋巴组织增生、肿瘤形成等,从而对禽白血病进行确诊。

三、预防措施1. 加强动物免疫力通过提高禽类动物的体质,加强饲养管理,合理配合饲料,以及定期进行免疫接种等措施,可以提高动物的免疫力,降低禽白血病的发病率。

商品蛋鸡J亚群禽白血病病毒分离鉴定及序列分析

商品蛋鸡J亚群禽白血病病毒分离鉴定及序列分析

细胞 瘤 混合 型 A L v — J 的 商品 海 兰褐 蛋 鸡 进行 了病 毒 分 离 ,对 2个 分 离株 的致 瘤 关键 基 因序 列 L T R与 g p 8 5进行 了 测 定 ,并 与 参 考毒 株 进行 比对 ,分 析 结 果表 明 这 两株 病 毒 的 L T R及 g p 8 5均 存在 显 著 的 变异 。在 这 两 个基 因的遗 传 进化 树 中均 形 成 一个 单 独 的 分 支 :L T R 的 U3 序 列 与 参 考毒 株 的 同源 性 低 至 8 9 . 7%~ 9 2 . 4 % ,而参 考 毒 株之 间 的 同 源 性 高达 9 0 . 7%~9 9 . 6% ,这 两株 病 毒 的 U 3区 变 异 产 生 了一 个 与 肿 瘤 形 成 与 转 移 间接 相 关 的 调 控 元 件 T C F 1 1 ( T r a n s c r i p t i o n F a c t o r l l 1 ,但 Y b o x 、T A T A b o x 、C A r G b o x都 很 保 守 ;两株 病毒 的 g p 8 5氨 基 酸 序 列 均 在 第 1 7 9位 缺 失 一 个 L y s ,两 个 毒 株 的 g p 8 5 蛋 白序 列 与 肉鸡 分 离毒 株 之 间 的 同 源性 很 低 , 为 8 6%- -8 9% ,而 与 参 考
T CF 1 1( T r a n s c r i p t i o n F a c t o r 1 1 )i n U3 wa s f o u n d i n t h e t wo i s o l a t e s , b u t t h e p u t a t i v e b i n d i n g s i t e s we r e we l l c o n s e r v e d , i n c l u d i n g

禽B型白血病病毒的分离及分子分型鉴定

禽B型白血病病毒的分离及分子分型鉴定
在鸡 群 中 A亚 群病毒 最常 见 , B亚 群病 毒 次之 , 内源 1 2 3 P R 引物设计 . . C 参考 Ge B n n a k上 已发 表 的
性病 毒 为 E亚群 病毒 [ 。对 于禽 白血病 的 检测 和诊 1 ] 断 主要依 赖 于 E I A、 脂 扩 散 试 验 等 , 琼 脂 扩 LS 琼 但
测确 定 为 AL 感染 。将病 变组 织接 种 S F鸡胚 绒 毛尿 囊膜 , 续传 代 3次 。进 一步 针 对亚 群 间特 异 性 抗 V P 连
原 g8 p 5区设 计一 对 引物进行 P R扩增 并酶切 分析 。结果确认 分 离到 的 1 病毒 为 AL - C 株 V B亚型 。 关键 词 : 白血病 病毒 ; 禽 分子 分 型 ; 白血病 ; 禽
中 图 分 类 号 : 8 8 3 ¥ 5 . ¥ 5 . ;8 6 2 文献标识码 : A 文 章 编 号 :0 75 3 ( 0 0 1 -0 0 0 1 0—0 8 2 1 )00 8-3
禽 白血病 是 由禽 白血 病病 毒 ( inlk s i Ava oi v e s —
动 物 医 学 进 展 ,0 0 3 ( 0 :08 2 1 , 1 1 ) 8 —2
Pr r s n Ve e i r e ii og e s i t rna y M d cne
禽 B型 白血 病 病 毒 的分 离 及分 子 分 型 鉴 定
石 文 慧 , 新 影 , 亚 男 , 军 霞 , 蔚 , 润 德 , 艳 琴 韩 康 卢 吕 杨 刘
r sAL 引起 的 以造 血 细胞 恶 性 增 生 为 主 的一 类 u , V)
观察 7d 检查 绒 毛 尿 囊 膜病 变 , 集 绒 毛尿 囊 膜 后 , 收 磨 碎制成 乳剂 , 续传 3代[ 。 连 1 ]

养殖技术-种鸡场禽白血病净化技术

养殖技术-种鸡场禽白血病净化技术

养殖技术-种鸡场禽白血病净化技术禽白血病是呈世界性分布的可垂直传播的病毒性肿瘤性疾病,严重制约着养禽业的发展。

该病尚无切实可行的治疗方法,也无有效的疫苗,唯一有效的控制方法是净化。

北京市华都峪口禽业有限责任公司在新品种培育过程中坚持开展禽白血病净化,通过6个世代的努力,实现了净化禽白血病的重大突破。

本文以峪口禽业为例,总结出了适合大规模养殖场原种鸡群的禽白血病净化方案,为国内种鸡场禽白血病净化的示范推广提供技术支持。

外源性禽白血病病毒既可垂直传播又可水平传播,同时医源性传播也是目前禽白血病感染的重要方式。

在净化开始前对不同代次、品系鸡群进行普查,在掌握鸡群禽白血病病毒的感染情况及排毒规律的基础上,将实验室检测技术与规模化生产相结合,形成适用于本场的净化方案。

垂直传播的控制控制垂直传播是指控制上一代次阳性鸡通过种蛋将病原传播给下一代,有效的控制措施为多次检测,剔除阳性鸡,确保用于继代的鸡群为阴性鸡群。

日龄胎粪检测母鸡感染病毒后,病毒在输卵管的膨大部进行大量复制,感染胚胎的胰腺积聚大量病毒,并从刚出壳雏鸡的粪便中排出,有很强的感染性和传播性。

通过1日龄胎粪检测,可以及时淘汰阳性鸡,避免雏鸡之间的水平传播。

在出壳前,将每只种鸡的种蛋置于同一出壳纸袋中,逐只采集1日龄雏鸡胎粪,用ELISA方法检测p27抗原,将有阳性检出的整个家系雏鸡全部淘汰,同时淘汰相应种母鸡。

6~10周龄肛拭检测带毒鸡群具有间歇排毒的特性,6~10周龄为排毒高峰期,在这个阶段检测可以检测出较多的阳性鸡。

经过胎粪检测后,雏鸡按照家系上笼,对各品系进行泄殖腔拭子检测。

在同一母鸡的同一饲养笼中,只要有1只阳性就应淘汰同笼中的其他后备鸡。

蛋清检测初产期属于鸡群排毒高峰期,取开产前3枚蛋检测蛋清p27抗原,淘汰阳性鸡。

在继代之前检测前3枚蛋,及时淘汰阳性鸡,避免阳性鸡种蛋进入孵化环节导致病毒扩散到下一代。

病毒分离检测公鸡是禽白血病病毒的携带者,通过接触或交配传染给其他的鸡。

禽白血病病毒的综合诊断

禽白血病病毒的综合诊断

皮组织增生病毒 、鸡传染性贫血病毒等可以通过种鸡垂直传播 , 其 中禽 白血 病 毒还 可 以 引起 肿瘤 和 免疫 抑 制 ,是 近年 来 国 内外 高 度 关 注 的禽 类 病原 。在 国务 院颁 布 的 《 国家 中长 期动 物 疫病 防 治 规划 ( 2 0 1 2 —2 0 2 0 年 )》中明确 提 出 ,2 0 2 0 年 全 国所 有 种鸡 场 的 禽 自血 病 必须 达到 净化标 准 。
中国畜牧兽 医文摘
2 0 1 6 年
3 2 卷 第l 2 期
临 床 兽 医
禽 白血病病毒 的综合诊 断
杜 燕
( 山东省诸城市畜牧兽医管理局 ,山东诸城 2 6 2 2 0 0 )
在感 染 鸡 的众 多病 毒 中 ,某 些 病毒 如禽 白血 病毒 、禽 网状 内 肿 瘤 ,肝脏 、脾脏 、肾脏 、心脏 、卵巢 都 是 常见 的 发病 脏 器 ,此

细 胞 瘤 、髓 样 细胞 瘤 、成 红 细胞 瘤 、纤 维 肉瘤 、血 管 内皮 细 胞 瘤 等 ,这 主要 与病 毒 的不 同特 性 及 鸡 的遗 传 性 相 关 。一 般 来 说 , A、B 亚 群 多 引发 淋 巴细胞 瘤 ,且 形成 较 大 肿瘤 块 ,而J 亚 群 多 引 起 髓样 细 胞瘤 ,多 在肿 大 的肝 脏 中呈 现 大量 弥 漫性 分 布 的 白色 细 小 的肿瘤 节结 ,在其 他脏 器也 会 引发不 规则 肿瘤 。 虽 然E 亚 群A L V 感 染 本身 不一 定会 引起 肿瘤 ,但 是先 天感 染 或 出 壳 即感 染A L V — E 的鸡往 往死 淘 率较 高 ,对外 源性A L V 更易 感 。 3 . 2 禽白血病病毒常用的实验室诊断方法 3 . 2 . 1 血 清学检 测:包 括 间接 免 疫荧 光 ( I F A) 和 酶联 免 疫 吸 附

禽白血病的检测与诊断

禽白血病的检测与诊断

禽白血病的检测与诊断禽白血病(Avian Leukosis)是一种由禽白血病病毒引起的传染性疾病,主要感染鸡类、火鸡、鸭类和鹅类。

该病具有高度传染性和致死性,给禽类养殖业造成了严重的经济损失。

对禽白血病进行及时的检测与诊断非常重要,可以帮助养殖户及时采取控制和预防措施,减少疾病的传播和损失。

一、禽白血病检测方法1. 血清学检测血清学检测是检测禽白血病病毒抗体水平的常见方法,主要通过鸡血清或鸡血浆中的抗体水平来判断禽白血病的感染情况。

目前主要的血清学检测方法包括凝集素试验(HA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)等。

ELISA方法具有操作简便、灵敏度高、定量分析等优点,被广泛应用于禽白血病的抗体检测。

2. 分子生物学检测分子生物学检测主要通过检测禽体内的病毒核酸来快速、准确地确定禽白血病病毒的感染情况。

常见的分子生物学检测方法包括聚合酶链反应(PCR)、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等。

这些方法具有高度敏感性和特异性,可以检测到禽白血病病毒的存在并判断感染程度。

病理学检测通常是通过对禽类死后组织或器官进行解剖和组织学检查,观察病变情况,从而确认禽白血病的存在。

这种方法能够直接观察到病变部位,并通过病理学病变的特征来判断禽体内是否存在禽白血病病毒感染。

二、禽白血病的诊断流程禽白血病的诊断流程一般包括病史调查、临床症状观察、实验室检测和病理解剖等步骤。

1. 病史调查病史调查是诊断禽白血病的第一步,通过询问养殖户关于禽类的生长发育情况、死亡情况、饮食及饮水情况等,了解饲养环境和管理状况,以及是否有接触过其他禽类等信息,从而初步判断是否存在禽白血病的可能性。

2. 临床症状观察禽白血病的临床症状通常包括体重减轻、腹部肿胀、羽毛脱落、行走困难、食欲不振、蛋产量下降等表现。

养殖户应该及时观察禽类的行为和外观特征,对存在异常的禽类及时隔离和处理。

3. 实验室检测实验室检测是诊断禽白血病的重要手段,对采集的禽类血清、血浆、组织等样品进行血清学检测、分子生物学检测和细菌学检测,以确定禽体内是否存在禽白血病病毒感染。

沂蒙草鸡J亚群禽白血病病毒分离鉴定及遗传变异分析

沂蒙草鸡J亚群禽白血病病毒分离鉴定及遗传变异分析
:牛建蕊(1983 -),女,副教授,博士,从事微生物与 宿主健康研究工作,E-mait: Niujianrui@ lyu. edu. cn
通信作者:王培坤,E-mail: Wangpeikun2018@ 163. com
毒(Aian leukosis virus,ALV)引起的以肿瘤发生和 免疫抑制为特征的禽 病[1]& AL感染鸡的有 A ~ E、J和K共7个亚群[2],其中J亚群(Subgroup J of ALV,ALV-J)为感染鸡的主要外源性病毒,B、C、D
M12 34 5 6 bp
Chinese Journai of Veterinary Medicine
中国兽医杂志2021年(第57卷)第2期
7
沂蒙草鸡J亚4禽白血病病毒 分离鉴定及遗传变异分析
牛建蕊1,王静2,王培坤1,薛聪1,韩照清1,于洋1,王媛1,张兴林1
(1.临沂大学微生物与宿主健康研究所,山东临沂276005 ; 2.临沂市兰山区畜牧发展促进中心,山东临沂276005)
references. The sequence analysis results showed that the full-length cDNA sequence of the isolate had the highest simgaTm (96. 4% ) with JS09GY3 strain. The gag and pol genes of the isolate were relatively conservative,while the rnv and 3'UTR genes were highly variable. The similaTm of gp85 gene between SDLYU1901 and ALV- referencc strains was 89. 7% to 95. 8%,and 205 bases were deleted in the 3'UTR rTM and DR1 reaions of SDLYU1901. The U3 sequence of the isolate had the highest similaTm

禽白血病的检测与诊断

禽白血病的检测与诊断

禽白血病的检测与诊断禽白血病是一种由禽白血病病毒感染引起的急性、慢性、亚急性或混合性传染病。

禽白血病病毒可侵染禽类动物的B淋巴细胞,包括家鸡、鸭、鹅、火鸡等。

在发病的禽类中可见粒细胞性白血病、淋巴细胞性白血病、混合型或不能分类的白血病,其中以B淋巴细胞白血病最为常见。

禽白血病的传播主要是通过接触感染源,包括从感染禽类的体液(如血液、粪便、排泄物等)中传播,或者通过母源性传播(卵或孵出的雏鸟)等方式。

病毒在受体内侵染后,可在B淋巴细胞内繁殖,导致发生白血病,并可导致淋巴瘤或器官损伤。

早期的禽白血病通常不易察觉,但一旦感染的禽类出现体重下降、食欲不振、发育迟缓、生长停滞、群体死亡率突然增加等症状时,应引起高度警惕,及时进行检测与诊断,以控制和治疗该病。

禽白血病的检测与诊断主要包括病原学检测、临床病理学检查、免疫学检测等方法。

本文将就禽白血病的检测与诊断方法进行详细介绍。

一、病原学检测1. 病毒分离病毒分离是一种直接检测方法,可利用组织培养、鸡胚等方式将可疑病体中的病毒分离出来,再通过进一步的鉴定或培养验证病毒种类。

这种方法需要专业人员操作,操作流程严谨,操作技术要求高。

2. 病毒核酸检测病毒核酸检测是一种常用的病原学检测方法。

通过采集疑似感染禽类的血样、组织样本、粪便样本等,提取其中的DNA或RNA,再通过PCR扩增、电泳、测序等方法对病毒核酸进行检测、鉴定,以确定感染禽类是否携带禽白血病病毒。

3. 血清学检测血清学检测主要通过免疫印迹、酶联免疫吸附、血凝等方法检测禽类血清中是否含有禽白血病病毒相关的抗体。

这种方法对于已感染禽类的检测效果较好,可以用于感染禽类的筛查和鉴定。

二、临床病理学检查1. 组织学检查组织学检查是一种常用的临床病理学检查方法。

利用取材后的组织样本进行病理学切片、染色等技术处理,观察组织结构的变化,如细胞形态学变化、组织细胞学特征等,以确定感染禽类是否存在白血病细胞浸润,或由白血病病毒所致的组织损伤。

禽白血病的检测与诊断

禽白血病的检测与诊断

禽白血病的检测与诊断禽白血病是由禽白血病病毒引起的一种高度接触性和传染性疾病,主要危害鸡、鸭和鹅等禽类。

该病可引起感染禽畜的血液中淋巴细胞的癌变和增生,导致免疫功能下降,严重影响禽类的生长发育和生产性能。

及早发现和尽早治疗是预防和控制禽白血病的关键。

禽白血病的检测与诊断是预防和控制该病的重要环节。

本文将从禽白血病的病原学特征、常用的检测方法和诊断标准等方面进行介绍,以期帮助广大兽医工作者更好地了解和掌握禽白血病的检测与诊断技术,提高疾病的早期诊断和治疗水平。

一、禽白血病的病原学特征禽白血病病毒(Avian Leukosis Virus,ALV)是一种隐疾病毒,属于科学家所称的白血病-肿瘤病毒群。

该病毒主要通过接触、飞沫、粪便、卵及母源传播,对鸡、鸭、鹅等禽类造成严重伤害。

禽白血病病毒具有很强的传染性和侵袭性,易引起家禽的连锁传染。

患病鸡禽体内的白血病病毒可在保护抗体的作用下,依然潜伏于血液系统、内脏器官及卵细胞中,对家禽造成潜在的危害。

禽白血病的定期检测和及时诊断对于预防和控制该病具有十分重要的意义。

二、禽白血病的检测方法1. 禽白血病病毒抗体检测禽白血病病毒抗体检测通常采用酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)或血凝试验(Agar Gel Immunodiffusion,AGID)等方法。

ELISA法是目前较为常用的检测方法,其具有操作简便、准确性强等优点。

检测时采集禽类血清标本,依据实验室制备的检测盒说明书进行操作,通过检测病毒抗体的阳性或阴性来判断是否感染禽白血病病毒。

3. 实验室细胞学检查实验室细胞学检查是通过显微镜观察血液、淋巴组织等标本的形态学变化,结合病理学和临床学等知识,对禽白血病进行初步判断。

细胞学检查结合临床症状及流行病学调查等资料,可对禽白血病的病原学特征有所了解。

三、禽白血病的诊断标准根据国家卫生健康委员会发布的《家畜白血病诊断标准》,禽白血病的诊断标准主要包括流行病学调查、临床症状、实验室检测等综合因素。

禽J亚群白血病的PCR鉴定与病理学分析

禽J亚群白血病的PCR鉴定与病理学分析
山东畜牧兽医
2 1 年第 3 卷 02 3
禽J 亚群 白血病 fP R l C 鉴定 与病理学分析 t J
刘 峰 董 辉 ( 省济南市长清区文昌畜牧兽医站 200 ) 山东 530
摘要 对山东济南某蛋鸡养殖场送检的5 只发病鸡,通过P R c 方法进行实验室诊断并进行病理组织学分析。结果发
蛋鸡(5 日龄) 10 ,引物 由大连T K Ra a a 生物工程有 限公司合
成 ,组织D N 取试 剂盒、T q a 酶购 自上海 生工 ,常规石 蜡切片所需材料 由山东农业大学临床病 理实验室提供 。 1 禽白血病P R . 2 C 鉴定 取 病死鸡肝脏 、肺脏 、骨髓等
病料 研 磨组织 匀浆 液 , 1 0 0/ n 心 1 mi,取上清 2 0 rmi离 0 n 液 ,用试剂盒提 取 总D NA样本 。参照 曲悦等方法 ,设计
[6 2 】郑 浩,高 飞,徐 晔等 .应 用上 海 乳房 炎 检测 法检 测 奶牛 隐 性乳房
炎【】 J .畜牧 与兽 医, 06 3()4-8 20 , 81: 74 . [7 2 】欧 阳五 庆 , 光 武 , 文 平等 .牛羊 隐 性 乳房 炎快 速诊 断法 研 究 唐 席
[] J.黑龙江 畜牧 兽医 ,9 5()1-4 19 ,5: 21.
P R。P R步骤参考李宏 民[ 略作修 改:反应体系分别 C C 6
加 入tmpae D e lt NA1, 1 x C u fr 5 l NT l 0 P R b fe u 、d P p、
山东济南 某蛋鸡 养殖场 ,养殖 商 品蛋鸡50 套 ,于 00
10日龄左右 开始 零星 发病 ,一个 月 内死 亡约 l 只 ,送 1 0 O 只 病 鸡 到 山农 业 大 学动 物 临 床病 理 实验 室进 行 疾 病诊 断。P R鉴定后进行病理组织学观察 。 C

商品代肉鸡J亚群禽白血病的病理及病毒分离鉴定

商品代肉鸡J亚群禽白血病的病理及病毒分离鉴定
在 国 内首 次 从 商 品 代 肉呜 中 分 离 到 了 J 群 禽 白血 病 病 毒 ( V J = 组 织 切 片 中 可 看 到 肝 脏 、 亚 AL ) 从 脾脏 等 器 官 的 髓
细胞 瑁 细 胞 + 散 在 或成 簇 , 细 胞 瑁 细 胞 的细 胞 质 内 显 现 嗜 酸 性 颗 粒 用抗 A V J囊 膜 糖 蛋 白 的单 克隆 抗 体 进 呈 髓 L
禽 白 血 病 病 毒 ( V) 在 鸡 群 中 普 遍 存 在 的 AL 是

群 反 转 录 病 毒 , 可造 成 1 ~ 2 的 成 年 鸡 诱 发 它
知 的 A— 亚 群 的 禽 白 血 病 病 毒 , 之 为 J亚 群 E 称 ( L J 0 与经 典 AL 不 同 , 亚 群 病 毒 主 要 在 A V—) ] V 该
c ike mb y i r b a t c l ( EF)a d u i g p t o o i d a n ss Th e u t r h wn t a h hc n e r o fb o ls e l C s n s a h l g c ig o i . n e r s ls we e s o h t t e m y l c t i e t cd p i s g a u e wa r l e a e n t e l e ,s l e n e r . I h n ie t eo y e f l d wi a i o h l r n l s p o i r t d i h i r p e n a d h a t n t e i d r c l h u f v f o e c n e a tb d s a ( F )wih mo o l n la t o y G2 3 o p 5 v r lg y o r t i t e s r n l r s e c n io y a s y I A u t n co a n i d — t g 8 ia l c p o en, h to g b

龙胜凤鸡禽白血病病毒的分离与鉴定

龙胜凤鸡禽白血病病毒的分离与鉴定

增, 首先对其所 属亚群进行初步鉴别 。然后采 用 P C R
法 扩增 其 e / t ' V基 因 , 经 基 因 或 氨 基 酸 序 列 同 源 性 分 析
来, 与培养上清液混匀形成 F 代 细胞 培养 物。按上述 方法 于 7 d后 收集细胞培 养上清液 和细胞培 养物 , 为
1 . 2 方 法
及 B亚群 A L V分离 情况均较罕见 , 仅见张 胜斌 [ 2 ] 从
该 地 区三 黄 鸡 中分 离 到 了 l 株 A L V — A亚 群 病 毒 。 目
前 ,广 西地区 已开展的禽 白血病 流行 病学调查研究 。
主 要 是 针 对 几 个 养 殖 数 量 较 多 的禽 类 品 种 , 而 关 于 凤
鸡A L V分离 、 鉴定等方面的研究 , 仍有待 开展 。 对于临床 A L V毒株的分离 , 目前常采用细胞接种 的方法 。使用 的细胞 多为 D F 一 1或 C E F细胞 .其 中 D F 一 1 细胞对 内源性 A I 有 抗性 , 只有外源性 A I 才
能 在 该 细 胞 上 增 殖 。因 此 其 可 用 于 外 源 性 A I J v 的 筛
胞, 维持培 养 7 d , 中途更换 1 次 维 持 培 养 基 。7 d后 , 收 集 细 胞 培 养 上 清 液 ,取 5 0 0 L接 种 到 新 的 已长 好 的D F — l 细胞 上 , 维持培养 7 d 。另 将 培 养 细胞 消 化 下
选 。A V L的 鉴 定 则 通 常 采 用 特 异 性 引 物 进 行 P C R 扩
为9 2 . 2 %和 9 2 . 8 %, 且 它们 处 在 系统 进 化树 的 同 一 分 支上 , 因此 , 该 研 究分 离到 的 G X— F 3属 于 AL V— B亚群 。

禽白血病的检测与诊断

禽白血病的检测与诊断

禽白血病的检测与诊断禽白血病是一种由白血病病毒引起的高度接触性传染病,在禽类中十分常见。

这种疾病会对禽类的健康造成严重威胁,导致生产力下降甚至死亡。

及早检测和诊断禽白血病对于控制疫情、保障家禽养殖业的发展至关重要。

本文将介绍禽白血病的病原体特点、检测方法和诊断过程,以及目前常用的预防控制措施。

一、禽白血病的病原体特点禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)是引起禽白血病的主要病原体。

该病毒主要通过接触传播途径传播,包括直接接触感染禽类、污染的饮水、食物和环境,以及母禽传给后代。

感染后,禽白血病病毒会潜伏在感染禽类的体内,引起血液、淋巴系统、内脏器官等部位的病变,严重影响禽类的正常生理功能,导致免疫力下降、生产能力下降甚至死亡。

二、禽白血病的检测方法1. 血清学检测方法血清学检测方法是目前常用的禽白血病检测方法之一。

主要通过检测禽类血清中的抗体水平来判断是否感染禽白血病病毒。

血清学检测方法简便易行,能够在疫情监测和疫情控制中起到一定的作用。

分子生物学检测方法是目前禽白血病检测的主流方法之一。

该方法主要通过提取禽类组织和血液样品的核酸,采用聚合酶链反应(PCR)技术检测ALV的基因序列。

与血清学检测方法相比,分子生物学检测方法具有更高的灵敏度和特异性,可以准确、快速地检测出禽类中的ALV感染情况。

细胞学检测方法是通过显微镜观察禽类体内的白血病病毒,包括直接涂片法和禽白血病病毒抑制法。

这些方法主要适用于病变器官的病理学检查,并对禽白血病的病变情况做出判断。

三、禽白血病的诊断过程对于禽类的禽白血病诊断,一般需要结合临床症状、检测结果和病理学检查三方面进行综合分析。

通过观察禽类的临床表现是否符合禽白血病的典型症状,如明显的生长迟缓、贫血、体重下降等。

通过血清学、分子生物学和细胞学检测方法,检测禽类体内是否存在ALV的抗体或基因序列。

通过病理学检查,观察禽类体内病变器官的组织学变化,辅助诊断禽白血病。

禽白血病的检测与诊断

禽白血病的检测与诊断

禽白血病的检测与诊断禽白血病是一种致命的禽类传染病,主要感染禽类动物,如家禽、野鸟和鸟类等。

该病可引起大规模禽类死亡,对养禽业和禽类资源造成严重损失。

及早发现和诊断禽白血病对于疫情控制和防治至关重要。

禽白血病的常见病原体有禽白血病病毒(Avian Leueosis Virus,ALV)和反转录病毒(Retrovirus)等。

禽白血病感染方式多样,可以通过血液传播、卵传播和接触传播等途径传播。

由于感染后病毒潜伏期较长,临床症状不明显,因此一些感染禽只表现为轻微或无明显症状,增加了诊断的困难。

为了及早发现和诊断禽白血病,应该进行相关的检测。

禽白血病的检测方法有多种,包括病毒学检测、免疫学检测和分子生物学检测等。

病毒学检测是利用病毒在宿主体内的复制、扩散和排出等特性进行的检测方法。

常见的病毒学检测方法包括病毒分离、免疫组化、血凝试验等。

病毒分离是指从禽体中分离出病毒并培养在合适的细胞或组织中,通过对细胞或组织的病变变化、病毒的形态结构和生物学特性进行观察和鉴定来检测禽白血病的存在。

免疫组化是通过检测禽体内特定抗体与禽白血病病毒之间的结合来判断是否感染禽白血病。

血凝试验是根据血清中具有抗体活性的物质与病毒颗粒反应生成凝集物,从而诊断禽白血病。

免疫学检测是通过检测宿主血清中的免疫相关指标来诊断禽白血病。

常见的免疫学检测方法包括免疫荧光法、酶联免疫吸附试验等。

免疫荧光法是利用免疫荧光标记的抗体与病毒或抗原结合来检测禽体内病毒或抗原的存在。

酶联免疫吸附试验是通过检测禽体内抗体与特定酶标记的抗体结合反应生成颜色来判断是否感染禽白血病。

分子生物学检测是利用靶序列扩增、杂交、测序等技术来检测禽体内的病原体核酸。

常见的分子生物学检测方法包括聚合酶链反应(PCR)、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等。

聚合酶链反应是通过特异性引物扩增禽白血病病毒或抗原相关序列,从而检测禽体内是否存在病毒。

逆转录聚合酶链反应是先将病毒RNA逆转录为DNA,再进行扩增。

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A 2 8株病 毒培 养对 照 。培养 过程 中 , V2 当培养 液 变 黄时 , 可更换新 鲜 的维 持液 。培 养 结束 后 , 毒 , 收 冻 融 2次裂 解 细 胞 , 为 c 作 1代 病 毒 分 离 物 , 0℃ 一4
以下保存 或用于传 代 。
性 抗 原 p2 核 衣 壳 蛋 白 ) 和 g8 囊 膜 蛋 一7( p5(
A V进 行 了鉴定 , 而证 明在我 国的鸡 群 中存 在经 L 从
典 A V流行 。 L
将 c 1代病 毒分 离物或 培养 物 用 19维 持液 作 9 10 0倍 稀释 , 0 按照 1 1 /0的量接 种 S F鸡胚 成纤 维 P 细胞单 层 ,7℃ 吸 附 4 i, 3 5mn 补足 维持 液 。3 7℃培 养 7d后 收毒 。
毒, 中国兽 医药 品监 察 所 保存 。A V抗 血 清 ( 特 L 群 异 性 ) 中牧股份 南 京药械 厂 惠赠 。 由
1 3 鸡 和 鸡 胚 1日龄 S F雏 鸡 和 9~1 日龄 . P 0 S F鸡胚 , 购 自北 京梅 里 亚 维通 实 验 动物 技 术有 P 均
限公 司 。
A至 E亚群 比较 常见 ; 亚群 间具 有共 同的群 特 异 自美 国 I E X 公 司 。 DX 15 病毒 分 离培 养 . 按 照 常规方 法 制备 S F鸡 P
胚 成纤 维 细 胞 , 2 L克 氏瓶 培 养 生 长 成 单 层 用 5m 后 , Hn 用 ak氏液 洗 2次 待 用 。每 瓶 细 胞 接 种 0 3 .
1 6 病毒 检 测 用 A V抗 原 检测 试 剂盒 , 照 使 . L 按
1 材 料与 方法 11 病 料 . 北 京 某 种 鸡 场 送 检 的 瘦 弱 、 神 沉 郁 精
的成 年 蛋 用 种 鸡 , 菌 采 集 心 脏 血 液 , 3 5 柠 无 与 .%
檬 酸钠混 合 ( : ) 凝 。 91抗 1 2 病 毒 和抗血 清 . A V A 2 8 R V 1 株 细 胞 L V 2 ( A 一)
白) J 0年代 后 期 以来 , 内外 相继 从 肉鸡 群 。8 国
分离 到 J 亚群 的 A V, L 其病 毒 干扰 和抗 原性 与经 典
的 A E亚 群 A V明 显不 同 J L 。本 文报 道 了从 蛋
用种 鸡 中分 离 A V 的方 法 , 对 所 分 离 到 的一 株 L 并
m L新 鲜病 料 ,7℃ 吸附 4 i, 入 4 7mL无 血 3 5mn加 .
清 19细胞 培养 液 。3 9 7℃ 培 养 2 4h后 , 去培 养 吸
液 , Hn 用 ak氏液洗 1 次细胞单层 , 加入含 2 %新生 小 牛血 清 的 1 9维 持 液 , 7℃ 培 养 7 d 9 3 。同 时 设
32培养物的病毒含量bjj1株的cl和c2代培养物经病毒含量测定均能达到10501ml33rtpcr鉴定bjj1株病毒的c1和c2代培养物经rtpcr试难均能扩增出3条alv印85基因特异性dna片段其大小分别为778bp466bp和371bp详细内容另文介绍
维普资讯
18 反 转录 一聚 合 酶 链 式 反 应 ( T P R) . R —C 试验 详 细方法 另文介 绍 。
19 特 异 性试 验 将 细 胞 培 养 物 与 A V抗 血 清 . L
等 量混 合 ,7℃ 作 用 1h 然后 用 E IA 法 检 测抗 3 , LS
14 A V 抗原 检测 试剂 盒( L — gT s K t 购 . L A V A et i )
2 0 4 ( ) 3 ~ 3 范书才 , 0 6,0 9 :1 3 / 等
中国兽药杂志
禽 白血 病 病 毒 分 离 鉴 定
范书才 , 虹 , 睿 李 肖
( 国兽 医药 品 监 察 所 , 京 中 北 10 8 ) 0 0 1
【 收稿 E期 ]20 0 t 06— 3—0 【 3 文献标识 码]A 【 文章编号]10 0 2—1 8 ( 0 6 0 2 0 20 )9—03 —0 【 0 1 3 中图分类号]¥5 .5 . 82693
[ 摘 要 ] 使 用 S F鸡 胚 成 纤 维细 胞 从 蛋 用种 鸡 的病 料 中分 离到 一 株 病 毒。 经禽 白血 病 病 毒 P (L A V)p2 -7抗 原 E IA检测 、病毒培 养 、 转录 一聚 合 酶链 式反 应 ( TP R) 定 、 特 异性 抗 LS 反 R —C 鉴 群 血 清 中和 试验 和 动物 回 归试 验 等证 明 , 该株 病毒 属于禽 白血 病病 毒 。 [ 关键 词 ] 禽 白血 病病 毒 ; 离; 分 鉴定 禽 白血病 病 毒 ( L 为 反转 录 病 毒 科 病 毒 A V) 属 的一种 病毒 J引起禽 类特 别是 鸡 的 多种 类 型 的 , 肿瘤 性 疾 病 , 中最 常 见 的 是 淋 巴 细 胞 增 生 病 。 其 A V可 使 1 ~ % 的成 年 鸡诱 发 内脏 肿 瘤 并导 致 L % 2 死 亡 , 尔发 病 率 可 达 2% 。先 前 , 据 病 毒囊 膜 偶 0 依 糖 蛋 白抗原 的不 同 、 毒 的干 扰模 式 和对 禽 类 细胞 病 的感染 谱 , A V分 成 A 至 I 9个 亚群 , 中以 将 L 共 其
用 说 明书检测 细胞 培养 物 中是否存 在病 毒 。
17 病毒 含量 测定 .
参照“ 动物病 毒学 ” 相关 章 节
进 行 , E IA 法 检 测 各 孔 的 病 毒 , 照 R e— 用 LS 按 ed Munh 法 计 算 病 毒 组 织 培 养 半 数 感 染 量 ec
( CDo : T I 5)
作 者 简 介 : 书 才 (9 7年 ~) 男 , 川成 都人 , 士 , 究 员 , 要 从 事 动 物 病 毒 学 与 分 子 生 物 学 研 究 。 范 15 , 四 硕 研 主
维普资讯

3 2・
中国兽药杂 志
20 ,0 9 :1~
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