植物染色体制片与观察实验报告
实验九、 染色体常规制片及观察
6.压片 染色后的材料上加一些染液,盖上盖玻片, 再用钝头的用具敲打,使材料分散压平,最 后,覆一层吸水纸,以拇指垂直紧压盖片(注 意勿使盖玻片移动),便于观察。
7.镜检 先在低倍镜下寻找有分裂相的视野,再用 高倍镜仔细观察、记数。注意观察有丝分裂 全过程的染色体形态变化,找出染色体分散 较好的中、后期细胞进行染色体计数。
中期 核仁、核膜逐渐消 失,各染色体排列 在赤道板上,纺锤 丝与染色体的着丝 点相连。染色体分 散,易于鉴定形态、 数目。
后期 • 各染色体着丝点分裂 为二,其每条染色单 体也相应地分开,并 各自随着纺锤丝的收 缩而移向两极,每极 有一组染色体,数目 和原来的相同。
末期 分开在两极的染 色体各自组成新 的细胞核,在细 胞质中央赤道板 处形成新的细胞 壁,使细胞分裂 为二,形成二个 子细胞。这时细 胞进入分裂间期。
七、注意事项
1.酒精和解离液都要清洗干净,并认真吸
干,否则影响染色效果。
2.染色时间10分钟是个参考时间,应以实
际染色效果判断,不太长也不能太短。
3.镊子敲打时,应用力均匀,开始不要太
重,避免细胞挤压在一起。用力太轻不易使细
胞处于同一平面,故应适当控制敲打力度。
八、作业 简绘实际观察到的染色体
图(形态、数目)
五、结 果 前期
中期
模 式 图
后期
末期
间期 在光学显微镜下,只看到均 匀一致的细胞核及许多的丝 状染色质。实质上间期的核 是处于高度活跃的生理生化 的代谢阶段,正为细胞分裂 准备条件。
前期 • 核内染色质逐渐浓缩为细 长而卷曲的染色体,每一 染色体含有两个染色单体, 它们具有一个共同的着丝 点;核仁和核膜逐渐模糊 不明显。
猫 Felis domesticus 2n=38 牛 Bos taurus 2n=60 鸡 Gallus domestricatus 2n=78 水稻 Oriza sativa 2n=24 棉花 Gossypium hirsutum 2n=26 大豆 Glycine max 2n=40
E2 植物分生区细胞染色体制片观察
13
蚕豆(V. faba, 2n=12)有丝分裂末期
农学院生物技术系遗传学课程组
14
农学院生物技术系遗传学课程组
6
五、实验步骤
1. 取材:实验室发根取材(p10) 2. 预处理:目的、原理与方法(p10, 11)(注意, p13) 3. 固定:目的与方法(p11) 4. 解离:目的、原理与方法(p10, 11) 5. 染色:要求、方法(p11-12) 6. 压片:操作程序及要点(p12) 7. 镜检:观察要点,问题分析(p12) 8. 临时装片保存与永久片制作(p12, 25-26)
进一步熟悉有丝分裂过程及其染色体动态变化与遗传学意义农学院生物技术系遗传学课程组4二实验材料?蚕豆viciafaba2n12根尖农学院生物技术系遗传学课程组5三实验用品?培养皿恒温箱光照培养箱?盖玻片载玻片刀片解剖针镊子?光学显微镜?试剂
下周实验
实验三 细胞减数分裂制片与观察
植物花粉母细胞涂抹片制作 pp: 5~7, 14~18
9
蚕豆有丝分裂过程(pp:4~5, 12)
农学院生物技术系遗传学课程组
10
蚕豆(V. faba, 2n=12)有丝分裂前期
农学院生物技术系遗传学课程组
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蚕豆(V. faba, 2n=12)有丝分裂中期
农学院生物技术系遗传学课程组
12Βιβλιοθήκη 蚕豆(V. faba, 2n=12)有丝分裂后期
农学院生物技术系遗传学课程组
农学院生物技术系遗传学课程组
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二、实验材料
蚕豆(Vicia faba, 2n=12)根尖
农学院生物技术系遗传学课程组
4
三、实验用品
培养皿、恒温箱(光照培养箱) 盖玻片、载玻片、刀片、解剖针、镊子 光学显微镜
实验报告染色体的观察
实验报告染色体的观察实验报告:染色体的观察引言:染色体是生物体内的遗传物质DNA(脱氧核糖核酸)在细胞分裂时可见的结构。
通过观察染色体的形态和数量,我们可以了解到生物的遗传特征和进化过程。
本实验旨在通过显微镜观察染色体的结构和变化,从而加深对遗传学的理解。
实验材料和方法:1. 显微镜:用于放大染色体的细节。
2. 染色体样本:可从动植物细胞中提取,如血液、植物叶片等。
3. 染色剂:如吉姆萨染液,可使染色体更清晰可见。
4. 盖玻片和载玻片:用于制作染色体样本的载体。
5. 显微镜玻璃片:用于制作染色体样本的压片。
步骤一:制备染色体样本1. 从动物或植物细胞中提取染色体样本。
2. 将提取的样本放在载玻片上,加入适量的染色剂。
3. 用盖玻片轻轻覆盖样本,使其均匀分布在载玻片上。
4. 用显微镜玻璃片轻轻压平样本,使其更加透明。
步骤二:观察染色体1. 将制备好的染色体样本放置在显微镜下。
2. 调节显微镜的放大倍数,逐渐增加放大倍数,观察染色体的形态和结构。
3. 注意观察染色体的数量、大小、形状以及有无异常。
结果与讨论:通过实验观察,我们可以发现染色体在显微镜下呈现出一定的特征。
正常情况下,人类细胞中的染色体通常呈现出46条,即23对。
其中,前22对为常染色体,最后一对为性染色体(男性为XY,女性为XX)。
不同物种的染色体数量和形态也存在差异,这是由于物种间的遗传差异和进化过程的结果。
染色体的形态也是观察的重点之一。
正常染色体通常呈现出X形或I形,两臂长度基本相等。
然而,在某些情况下,染色体可能发生异常,如染色体缺失、染色体重复、染色体交换等。
这些异常情况可能导致遗传疾病的发生,因此对染色体的观察和分析对于遗传学的研究具有重要意义。
实验中使用的染色剂吉姆萨染液,可以使染色体更清晰可见。
这是因为染色剂能够与染色体上的DNA结合,从而增加其对光的吸收能力。
通过染色剂的使用,我们可以更清楚地观察染色体的结构和细节,进一步了解其遗传特征。
试验一植物分生区细胞染色体制片与有丝分裂过程的观察
药用植物遗传育种学实验指导书(试用本)浙江林学院遗传学科2009.02学生实验守则1、实验前认真预习,领会实验原理,明确本次实验的目的和要求,了解实验步骤和注意事项。
2、实验时要严格按照规范操作进行,仔细观察实验现象,认真记录有关数据。
3、要认真写好实验报告,实验报告要清楚、简练、整洁。
4、学生进入实验室必须严格遵守实验室规则,服从带教老师的指导。
5、爱护实验室的仪器设备,不准将实验室的仪器设备私自带出室外。
6、严格遵守操作规程及实验时应注意的事项,在使用不熟悉其性能的仪器和药品之前,应查阅有关资料或请教指导教师,不要随意进行实验,以免损坏仪器,浪费试剂,使实验失败,更重要的是预防发生意外事故。
7、实验过程中应注意防火灾、防爆炸、防腐蚀、防污染工作,牢固树立“安全第一”意识。
8、实验结束后,一切仪器试剂应放回原处,玻璃仪器要清洗干净,一些有毒、有腐蚀性的废液应倒入废液缸内。
9、实验台面要擦试干净,由值日生负责安全卫生工作,包括清理实验室,检查水、电的开关,清除垃圾和污物,关好门窗后方可离开实验室。
目录实验一植物细胞染色体制片与有丝分裂过程观察 (1)实验二植物细胞的核型分析 (7)实验三植物花粉生命力测定 (10)实验四药用植物的杂交技术 (13)实验五药用植物的优株(树)选择 (16)实验六药用植物组织培养技术 (20)附录 (26)附录Ⅰ常用试剂的配制 (26)附录Ⅱ常用染色液的配制 (29)实验一植物细胞染色体制片与有丝分裂过程观察[实验目的]1. 学习并掌握根尖或叶片材料处理、染色、压片及制片观察的方法。
2. 观察有丝分裂各时期染色体的形态变化,了解有丝分裂全过程。
[实验原理]熟悉有丝分裂过程、掌握有丝分裂染色体制片方法与技术是研究染色体形态结构、检查染色体数目、进行核型分析与带型分析的基础。
高等植物有丝分裂主要发生在根尖、茎尖生长点及幼叶等器官的分生组织(分生区),这些分生组织均可以用作制片材料;另外愈伤组织、悬浮培养物等分生组织也可用作制片材料。
实验四 植物染色体标本的制备与观察
实验四植物染色体标本的制备与观察一、实验目的1、掌握常规压片法制备植物染色体标本。
2、了解中期染色体的形态和结构以及染色体的生物学意义。
二、实验原理染色体是细胞分裂时期遗传物质存在的特定形式,是染色质紧密包装的结果,对染色体的观察在研究生物进化、发育、遗传和异变中有十分重要的作用。
植物染色体标本的制备,常用分生组织如根尖、茎尖和嫩叶做材料。
常规压片法仍是当今观察植物染色体常见的方法,其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤,简单易操作,但是染色体易变形、难分散开。
三、实验仪器、材料和试剂(一)仪器、用具:显微镜、剪刀、镊子、刀片、培养皿、滤纸、吸水纸、青霉素瓶、染色缸、载玻片、盖玻片、玻璃板、酒精灯。
(二)材料:蚕豆(Vicia faba, 2n=2x=12)、黑麦(Secale cereale, 2n=2x=14)、大麦(Hordeum sativum, 2n=2x=14)、普通小麦(Triticum aestivum, 2n=2x=42)、玉米(Zea mays, 2n=2x=20)、豌豆(Pisum sativum, 2n=2x=14)、洋葱(Aillum cepa,2n=16)等根尖。
(三)试剂1、Carnoy固定液、1%秋水仙素(或对二氯苯)。
2、苯酚品红染色液。
四、实验方法与步骤压片法制备染色体标本:(1) 取材:把蚕豆种子预先浸泡12h,然后转入垫有湿润滤纸的培养皿中上面蒙上湿纱布,置25℃温箱中暗培养发根,经过48h后幼根长至1—2cm左右,于上午9—11时剪下根尖。
(2) 预处理:将剪下的根尖置于对二氯苯饱和水溶液或0.1%秋水仙素溶液中,浸泡处理2-4 h。
(3) 固定:用水洗净处理过的根尖,经Carnoy固定液中固定2-4h,转入70%乙醇中,4℃保存备用。
(4) 解离:取出根尖,用蒸馏水洗净,放入l M HCl中60℃解离8-10min,再用蒸馏水洗净。
(5) 染色:改良苯酚品红染色5—10min。
植物染色体制片与观察实验报告(洋葱组).参考分享
植物染色体制片与观察实验报告(洋葱组).参考分享1:根尖细胞处于间期,而间期细胞没有纺锤丝和纺锤体,不能使细胞停留在中期。
2.洋葱根尖秋水仙素处理,卡若固定时间太短或浓度太小,在两个小时内不能达到预期的结果。
3.剪下洋葱根尖的最好时间是正午时分,因为此时洋葱根尖分生区有丝分裂最为活跃,此时固定,可以观察到最多的分裂相,而我们组因为实验材料培养问题,所以固定的时间是 10:40 ,且只固定了 2h ,如果固定液浓度不够,就会影响后面的实验结果。
实验方案结果展示如下:固定 2.5h酸解6min染色 10min+ / — /++/— / ++8min染色 10min++++ /— /++ +/— /+++酶解45min染色 10min+ / — /+++ /— /++60min染色 10min+++ / — /++++ /— / +++固定 24h酸解8min染色 8min+++++/+++++/++++/+++++/ ++++10min染色 10min++++/ ++++/ +++++/ ++++/ +++10min染色 12min++++ / +++ / +++ / +++ /++酶解45min染色 10min++ / ++ / +++ / / ++60min染色 10min+++/ +++ /++++/ +++/+++附:本实验共做了 9 种实验方案,结论:对洋葱根尖进行24 小时,酸解 8 min ,染色10min 的压片效果最好。
制片效果依次为:细胞松散程度/ 中期分裂相多寡 /染色效果 / 染色体形态及分散程度 / 背景清晰度六、讨论由实验结果就可以看出,本组此次实验并不十分成功。
主要原因是材料也就是洋葱没有在合适的时间培养出根尖。
我们总结出的原因主要有两个:1)种植的洋葱为新采收的洋葱,因它尚在处于休眠期不易生根。
2)该洋葱根部的木栓组织较厚,不易生根。
正确的洋葱根尖培养方法已经在前面的实验步骤中提到了。
染色体标本制作和观察实验报告
染色体标本制作和观察实验报告染色体实验报告摘要:本次实验旨在制作和观察染色体标本,通过显微镜观察染色体的结构和数量。
实验过程中,我们成功制作了植物和动物染色体标本,并使用适当的显微镜对染色体进行了观察。
通过实验结果,我们可以清楚地了解染色体的结构和数量。
实验结果表明,植物细胞通常具有较大的数量和较小的染色体,而动物细胞通常具有较少的数量和较大的染色体。
引言:染色体是细胞内的遗传物质,它们包含了个体的遗传信息。
通过观察染色体的结构和数量,可以了解物种的特性和遗传模式。
本次实验通过制作染色体标本和使用显微镜观察染色体,以探究染色体的结构和数量对不同物种的差异性。
材料和方法:1.动物染色体标本制作:-从一个动物个体中取得组织样本。
-在显微镜盖玻片上加入一滴减数分裂阻滞剂。
-使用细针将细胞群收集到玻璃滴管中。
-在玻璃滴管中加入一滴适当的染料,例如鲭鱼绿。
-轻轻将标本放在显微镜盖玻片上。
-使用显微镜观察染色体的结构。
2.植物染色体标本制作:-从一个植物个体中取得组织样本。
-将组织样本切成细小片段。
-在细胞裂变诱导剂中浸泡组织片段。
-在显微镜盖玻片上加入一滴适当的染料,例如鲭鱼绿。
-轻轻将标本放在显微镜盖玻片上。
-使用显微镜观察染色体的结构。
结果:我们制作了多个动物和植物染色体标本,并使用显微镜观察了它们的结构和数量。
通过观察,我们发现植物细胞的染色体通常比较小,数量较大,而动物细胞的染色体通常比较大,数量较少。
染色体呈现出普遍的线状结构,但也有一些不规则的染色体存在。
讨论:根据实验结果,我们可以得出结论,植物和动物细胞的染色体在结构和数量上存在差异。
这可能与物种的特点和遗传模式相关。
植物细胞通常需要更多的遗传信息来适应复杂的环境,因此具有较大的数量和较小的染色体。
相比之下,动物细胞通常需要更少的遗传信息,因此具有较少的数量和较大的染色体。
然而,本实验的主要限制在于只使用了一种染色剂来染色染色体,可能无法获取所有染色体的完整信息。
植物染色体制片与观察实验报告(洋葱组).参考分享
植物染色体制片与观察实验报告(洋葱组).参考分享植物染色体制片与观察实验报告(洋葱组)同组成员:曹鉴云陈锦容刘艳马彦霞一、中文摘要:染色体( Chromosome ),是细胞内具有遗传性质的物体,易被碱性染料染成深色,又叫染色质。
其本质是脱氧核甘酸,是细胞核内由核蛋白组成、能用碱性染料染色、有结构的线状体,是遗传物质基因的载体。
这里我们用洋葱染色体作为代表使用压片法制片并且进行观察。
二、关键词:染色体洋葱压片法三、引言:洋葱( onion )是百合科( Liliaceae )葱属中以肉质鳞片和鳞芽构成鳞芽的 2 年生草本植物,其学名为Allium cepa L ,染色体数为2n=2x=16 。
由表 1 和图 1 可见 ,洋葱的 8 对染色体中 ,有 7 对 (第 1~7 对 )染色体 ,臂比在1·01~1 ·70 之间 ,为中部着丝点染色体 ,1 对 (第 8 对 ),臂比为 4 ·74, 为近端部着丝点且带随体的染色体 ; 依据 STEB-BINS[4] 的核型分类标准 ,洋葱的染色体核型在遗传进化上属较古老的 2A 型。
100多年来有关染色体与染色体组结构功能的研究一直是生命科学最活跃的研究领域之一,现今人们完成基因组测序后回到对染色体上进行基因定位和作图,因此有关染色体的研究在基因组合功能基因组时代都有重要意义,陈瑞阳教授历时 25 年的研究完成的《中国主要植物染色体研究》对我国 2834 种植物染色体数目进行了报道,完成了 1045 种植物的核型分析,积累了宝贵的染色体基础数据创建了我国植物染色体研究信息平台。
研究染色体进化与生物进化的有不可分割的关系, 国际对染色体的化学成分,DNA 含量 ,碱基组成和以染色体数目、形态、结构、大小等为特征的核型进化与物种形成和演化关系的研究,为揭示生物进化趋势提供染色体方面的科学资料,总的来说对染色体的研究在各类学科领域内都有着重要的意义。
染色体标本制作与观察实验报告
染色体标本制作与观察实验报告一、引言染色体是细胞核中的遗传信息携带体,它是由DNA和蛋白质组成的长丝状结构。
染色体的数目、形态和大小等特征在不同物种和个体中是有差异的。
本实验旨在通过染色体标本制作和观察,了解染色体的基本结构和分类。
二、实验材料1.新鲜的玉米幼苗2.醋酸3.高锰酸钾4.盐酸5.电镜滴管6.镜片和盖玻片7.显微镜8.实验室用具:手套、显微刀、移液器等三、实验步骤1.将新鲜的玉米幼苗准备好材料摆放在实验台上;2.取一片净玻片,滴加一滴醋酸,然后用电镜滴管吸取一点玉米根尖细胞悬浮液,滴在玻片上;3.将盖玻片慢慢压在悬浮液上,使悬浮液扩散均匀;4.把制作好的染色体标本放在带有千倍放大倍数的显微镜下观察。
四、实验结果将制作好的染色体标本放在显微镜下观察,可以清晰地观察到悬浮液中的染色体结构。
在玉米根尖细胞中,染色体呈为长条状丝状物,一般成双出现。
根据染色体的位置和大小可以将其分为四组,分别为A、B、C、D组。
五、实验分析根据观察结果可以得出以下结论:1.染色体是由DNA和蛋白质组成的长丝状结构;2.染色体的数目、形态和大小等特征在不同物种和个体中是有差异的;3.在玉米根尖细胞中,染色体大多数成对出现,有些物种的染色体可能会出现多倍体现象。
六、实验总结通过本实验,我们成功制作了染色体标本并观察到了染色体的基本结构和分类。
染色体是细胞核中的遗传信息携带体,对于了解生物遗传学、进化与变异等方面具有重要意义。
然而,本实验只观察了玉米根尖细胞中的染色体,染色体在不同组织和细胞中可能会有差异,需要进一步研究和探索。
同时,在制作染色体标本的过程中需要注意操作规范,以免对实验环境和个人健康造成危害。
以上是本次染色体标本制作与观察实验的实验报告,通过本实验,我们对染色体的结构和分类有了一定的了解,并为进一步的研究提供了基础。
实验过程中需注意操作规范,确保安全性和准确性的同时保证结果的可靠性。
观察染色体实验报告
一、实验目的1. 学习和掌握植物细胞有丝分裂及染色体行为的观察方法。
2. 了解染色体的形态、结构及数目。
3. 掌握染色体标本的制作和观察技术。
二、实验原理染色体是生物遗传物质的载体,其结构、形态、功能是细胞遗传学中的核心内容。
通过观察染色体,可以了解细胞的遗传信息,研究生物的遗传规律。
本实验采用植物根尖细胞作为观察对象,利用染色剂对染色体进行染色,通过显微镜观察染色体的形态、结构及数目。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜植物根尖、卡诺氏固定液、盐酸、酒精、蒸馏水、醋酸洋红染色剂等。
2. 实验仪器:显微镜、解剖镜、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸、滴管等。
四、实验步骤1. 取材:从植物根尖中剪取一定长度的根尖,放入盛有卡诺氏固定液的试管中固定。
2. 解离:将固定好的根尖放入盛有盐酸和酒精混合液(1:1)的试管中,在室温下解离30分钟。
3. 漂洗:用蒸馏水冲洗根尖,去除盐酸和酒精。
4. 染色:将根尖放入盛有醋酸洋红染色液的试管中,染色5-10分钟。
5. 制片:将染色后的根尖用镊子取出,放在载玻片上,用盖玻片轻轻压扁,制成临时装片。
6. 观察:将临时装片放在显微镜下,先用低倍镜观察,找到染色体清晰、分散良好的细胞,再换用高倍镜观察染色体的形态、结构及数目。
五、实验结果与分析1. 染色体形态:观察到的染色体呈棒状,两端钝圆,有明显的着丝粒。
2. 染色体结构:染色体由DNA和蛋白质组成,DNA呈双螺旋结构,蛋白质分布在DNA周围。
3. 染色体数目:观察到的染色体数目与理论值相符。
4. 染色体变异:未观察到染色体变异现象。
六、实验讨论1. 实验过程中,染色剂的选择对染色体的染色效果有很大影响。
本实验中,醋酸洋红染色剂染色效果较好。
2. 在观察染色体时,显微镜的放大倍数对观察效果有较大影响。
本实验中,先用低倍镜观察,找到染色体清晰、分散良好的细胞,再换用高倍镜观察。
3. 实验过程中,解离液的浓度和时间对染色体的形态和数目有较大影响。
染色体标本制作与观察实验报告
染色体标本制作与观察实验报告实验报告:染色体标本制作与观察一、实验目的1.掌握染色体标本制作的基本原理和方法。
2.学习并掌握染色体观察的基本技巧和特点。
3.通过实验加深对遗传学基础知识的理解和应用。
二、实验原理染色体标本制作是生物学实验中的一项基本技术,其目的是将细胞中的染色体以一种可见且易观察的形式展现出来。
染色体观察有助于我们了解细胞分裂过程中染色体的行为和变化,进一步理解遗传物质的复制、分离和交换等基本过程。
本实验将通过植物根尖细胞的有丝分裂过程来制作染色体标本,并通过显微镜观察其形态和分布。
三、实验步骤1.准备试剂和器材:碱性染料(如龙胆紫溶液)、生理盐水、镊子、滴管、载玻片、盖玻片、显微镜等。
2.选取植物根尖:选择新鲜的植物根尖,长度约为5-10mm。
3.预处理:将根尖放入冰箱冷藏(4℃)约24小时,然后放入25℃的温水中浸泡约6小时。
4.固定:用镊子将根尖取出,放入卡诺氏液中浸泡0.5-1小时,然后转移到70%酒精中保存。
5.解离:将根尖放入1N的盐酸盐酸盐酸KOH溶液中,在60℃的水浴中解离10分钟。
6.漂洗:用镊子取出根尖,用清水冲洗3次,每次5分钟。
7.染色:将根尖放在载玻片上,用滴管吸取龙胆紫溶液滴在根尖上,染色3-5分钟。
8.制片:盖上盖玻片,避免产生气泡。
然后在显微镜下观察。
四、实验结果与讨论1.实验结果:通过显微镜观察到清晰的染色体形态,可以看到细胞分裂的不同阶段,如前期、中期和后期。
在中期可以看到染色体整齐地排列在赤道板上,而在后期则可以看到染色体的分离和移动。
这证明了实验方法的可行性。
2.结果讨论:实验中观察到的细胞分裂过程与教科书中的描述基本一致,说明我们的实验方法是有效的。
此外,通过观察不同阶段的细胞分裂,我们可以更好地理解细胞周期和遗传物质的复制、分配等过程。
然而,我们也注意到实验过程中存在一些问题。
例如,解离过程中可能会出现过度解离的情况,导致染色体形态不完整。
植物染色体标本的制备和观察
植物染色体标本的制备和观察摘要:目的1、掌握常规压片法制备植物染色体标本的基本原理和方法;2、学会观察和统计植物细胞的染色体数目;3、了解和学习去壁低渗法进行植物染色体制片的基本原理和方法。
方法大蒜的根尖是分裂比较旺盛的,我们可以利用秋水仙素处理根尖使得大蒜根尖的细胞分裂处于分裂中期,然后经固定染色等处理将染色体染色固定,以便观察。
结果大蒜的染色体有16条,都被染色成红色的条状或细丝状物质。
结论大蒜染色体有16条。
关键词:植物染色体;大蒜;秋水仙素前言染色体是遗传物质的载体,本实验便是观察染色体的形态和数目。
植物染色体标本的制备,常用分生组织,如根尖、茎尖和嫩叶做材料。
常规压片法仍是当今观察植物染色体常用的方法。
其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤,即可观察到较多的、处于有丝分裂中期的细胞和染色体。
由于现在洋葱发根较难,我们采用的是大蒜根尖进行相关实验。
材料与方法1.实验材料大蒜根尖、白姜花的根尖、野百合的根尖等。
2.实验试剂:0.02%秋水仙素;改良苯酚品红染液;卡诺氏固定液,1N盐酸,浓盐酸:95%乙醇(1:1)解离液。
3. 实验用具显微镜、剪刀、镊子、刀片、培养皿、吸水纸、滴管、载玻片、盖玻片。
4.实验植物和试剂大蒜根尖、 0.02%秋水仙素;改良苯酚品红染液;卡诺氏固定液,1N盐酸;70%酒精;95%乙醇;85%乙醇;蒸馏水5.实验方法和步骤5.1 取材先将大蒜浸泡若干小时,然后转入一个垫有湿润滤纸的培养皿中,置25℃恒温培养箱中萌发,待幼根长至1~2cm时,于上午9~11时剪下根尖。
5.2 预处理将剪下的根尖放进装有0.02%秋水仙素溶液的烧杯中,浸泡处理3~4小时。
5.3 固定将经过预处理或没有预处理的材料,放到卡诺氏固定液中固定(固定液的量约为材料的10倍,要求一个容器中所装的材料不能太多,温度不能太高)。
固定2~24h后分别在95%和85%乙醇中各30min ,再转入70%酒精中,于4℃冰箱内保存,保存时间最好不超过二个月。
实验三植物染色体标本制作
随着科学技术的发展,染色体制片技术将不断改进和完善, 未来有望实现更加准确、高效的染色体计数和形态分析。这 将有助于推动植物遗传学和进化生物学的研究进展。
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染色体数目
通过对大量细胞的观察和计数,我们确定了植物细胞的染色体数目为2n=46条 ,这与之前的研究结果一致。
染色体分组
我们还观察到了染色体按照大小和形态的不同被分为不同的组别,这些组别在 遗传学上具有重要意义。
染色体分析的结果
染色体长度
我们测量了每条染色体的长度,并发现不同染色体长度存在差异,这对于理解基 因组结构和功能具有重要意义。
植物染色体的结构
植物染色体的基本结构包括染色质纤维、核膜、着丝粒和染色体臂。染色质纤维是染色体的基本组成单位,由 DNA和蛋白质组成。核膜是包围着整个细胞核的双层膜结构,起着调节基因表达的作用。着丝粒是染色体上连接 两个染色单体的区域,而染色体臂则是由DNA和蛋白质组成的区域,上面排列着基因。
学习制作染色体标本的方法
染色体观察与计数
找到分裂相细胞
染色体计数
在显微镜下寻找处于分裂期的细胞, 这些细胞是观察染色体的最佳时期。
对每个分裂相细胞中的染色体进行计 数,确保计数的准确性和可靠性。
观察染色体形态
在找到分裂相细胞后,仔细观察染色 体的形态、数目和分布情况,并记录 下来。
染色体分析
染色体形态分析
分析染色体的形态特征,如长度、着丝粒 位置等,判断是否存在染色体结构变异。
染色体的形态和结构
染色体形态
染色体在细胞分裂过程中呈现特 定形态,包括染色质、染色粒和 着丝粒等。
染色体结构
染色体由DNA和蛋白质组成,具 有特定的序列结构和组织结构。
植物染色体标本的制备与观察 实验报告
实验七植物染色体标本的制备与观察一、实验目的
学习植物染色体标本的制备技术,掌握染色体的技术方法,了解染色体的生物学意义。
二、实验用品
Carnoy固定液、0.1%秋水仙素溶液、1mol/HCL、Schiff溶液、亚硫酸水溶液(漂洗液)、混合酶液(纤维素酶、果胶酶各1%-2%)、Carbor fuchsin(卡宝品红)染液配方1、配方2
三、实验方法
1.取材:将大蒜培养,待胚根长达1-2cm时。
窃取0.5cm
长的根尖部分。
2.预处理:将切下的根尖浸入0.1%秋水仙素液中,室温下
处理3-4h
3.固定:取出根尖,投入Carnoy 液固定2-24h,换入70%
酒精,暂时保存
4.水解:把根尖投入预热的58-60℃1mol/HCL中,恒温下
水解14-15min.
5.染色:用配方2染5-10min
6.用蒸馏水西区多余染液
7.酶解:酶解20min左右
8.洗涤:用蒸馏水洗涤,除去残留酶液后加45%醋酸。
9.压片:将根尖置于载玻片上,滴半滴45%醋酸,盖上盖
玻片,压片
10.镜检
四、实验结果及分析
这是用大蒜根尖所制的玻片观察到的,只能看到被染色的核,但未能清晰观察搭配中期分裂相中染色体的排列。
分析实验失败原因如下:
1.处理时间不对,处理时细胞未处于分裂
中期
2.所用试剂配的有问题,导致最终只能看
到核被染色,但看不到中期染色体的清晰排布。
实验三 植物染色体标本制备与观察
实验三植物染色体标本制备与观察孚尔根反应(Feulgen Reaction)一、实验目的1. 熟悉并掌握Feulgen反应的原理及其实验操作方法2. 掌握植物染色体标本的制备技术二、实验原理Feulgen反应(Feulgen reaction)是显示DNA的最典型的组织化学反应,为学者Feulgen和Rossenbeck于1924年发明,简称为Feulgen法。
因对DNA的显示反应具有高度专一性,故常被用来显示细胞内DNA的分布情况。
自Feulgen反应法问世以来,其作用机制也久经研究和讨论,目前认为其具体反应原理是:标本经稀盐酸水解后,DNA分子中的嘌呤碱基被解离,从而在核糖的一端出现了醛基。
Schiff试剂中的无色品红可与醛基反应,形成含有醌基的化合物分子, 因醌基为发色团,故可呈现出紫红色。
也就是说,DNA经稀酸水解后产生的醛基,具有还原作用,可与无色品红结合形成紫红色化合物,从而显示出DNA的分布。
其反应机制如下所示。
2HCl+Na2S2O5→2NaCl+SO2+H2SO3三、实验用品(一)、器材:显微镜、水浴锅、烧杯、镊子、刀片、载玻片、盖玻片(二)、材料:小麦根尖。
(三)、试剂:1. schiff氏试剂:将0.5g碱性品红置入三角烧瓶内沸腾的蒸馏水中,时时摇动玻璃瓶,煮沸5min使之充分溶解,冷却至50℃时过滤,加入10ml 1mol/L HCl,冷至25℃时,加入0.5g偏重亚硫酸钠(Na2S2O3)无水亚硫酸钠(NaHSO3),在室温冷暗处至少放置24h(有时需2~3天),使其颜色退至淡黄色,密封瓶口,藏于暗处,最好保存于4℃冰箱中(可保存数月或更长时间)。
在使用前加入0.5g活性碳,摇1min, 用粗滤纸过滤,滤液应为无色;若液体颜色变为粉红色,便不能再用。
2. 亚硫酸水(漂洗液) 用200ml普通自来水(不要用蒸馏水, 以免引起误差)、10ml 10%的偏重亚硫酸钠水溶液和10ml 1mol/L HCl,三者在使用前混合,现用现配。
实验一 植物细胞有丝分裂染色体制片及观察
六、制作永久玻片
• 冷冻脱片封片法 • 酒精一叔丁醇脱水封片法 • 酒精—二甲苯脱片封片法
七、作业及思考题
• 1.根据你的实验情况总结出制备好一张优 良的细胞分裂标本应注意哪些问题? • 2.常用染料的特点如何? • 3.绘制2~3个有丝分裂典型时期简图。
三、实验材料
• 洋葱(Allium cepa)及蚕豆(Vicia faba) 等
四、实验用具及药品
• 1.用具:显微镜、水浴锅、剪刀、镊子、 刀片、载玻片、盖玻片、酒精灯等。 • 2 .药品:无水乙醇、70%乙醇、冰乙酸、 饱和对二氯苯水溶液、 0.1% 秋水仙素、 0.1N盐酸。
五、实验步骤
实验一 植物细胞有丝分裂染色 体制片及观察
一、实验目的
• 学习和掌握植物根尖细胞有丝分裂染色 体压片技术;观察有丝分裂过程中染色 体的形态特征和动态变化。
二、实验原理
• 有丝分裂是植物体细胞增殖的主要方式。在有 丝分裂过程中,细胞核内染色体能准确地复制, 并能有规律地均匀分配到两个子细胞中去,使 子细胞遗传组成与母细胞完全一样,从而保证 了性状的发育和遗传的稳定性。 • 有丝分裂是一个连续的过程,可分为前期、中 期、后期和末期。高等植物的有丝分裂主要发 生在根尖、茎尖及幼叶等部位的分生组织。经 过适当的取材处理、固定、离析、染色、压片 等步骤,可获得清晰的植物细胞有丝分裂染色 体动态变化的装片。以进行有丝分裂和染色体 动态的观察。
压片法观察植物染色体
压片法观察植物染色体植物根尖的分生细胞的有丝分裂,每天都有分裂高峰时间,此时把根尖固定,经过染色和压片,再置放在显微镜下观察,可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。
根尖染色体压片法,是观察植物染色体最常用的方法,也是研究染色体组型、染色体分带、染色体畸变和姊妹染色单体交换的基础。
1.实验材料1.1 实验器材镊子、烧杯、培养皿、载玻片、盖玻片、温度计、试剂瓶、显微镜1.2 材料新鲜培养的豆芽根尖2.实验过程2.1 实验步骤2.1.1 材料准备:培养:取黄豆若干浸泡24h后放入沙盘,25℃下培养,当主根长至0.5—1cm 时去掉根尖,继续培养,直至侧根长度>0.5cm,剪下备用;前处理:用0.02%的秋水仙素处理剪下的根尖4h;固定:将上述根尖放入卡诺固定液(无水酒精:冰醋酸=3:1)中,固定24h;解离:酸解。
取出根尖用蒸馏水漂洗后再放到0.1mol/L的HCl中,60℃水浴中解离15min;染色:将上述根尖用蒸馏水漂洗后放在载玻片上,滴上几滴醋酸洋红溶液,染色20—30min,根尖着色后解压片观察;压片:把染色后的根尖放在洁净的载玻片上,盖上盖玻片,用滤纸吸去多余的染液,并用铅笔轻轻的敲打盖玻片5—8min,使细胞尽量分散开来;观察:将敲打好的片子放在显微镜下观察,找出最佳视野。
2.实验结果及分析经过上述操作,最终在显微镜下观察到了根尖细胞的染色体。
如下图:从上图中可以观察到这些是有丝分裂中期的细胞,染色体散乱的排列在赤道板上,并且可以清晰地数出染色体的数目。
实验注意事项:压片材料要少,以免细胞贴在一起,重复太多;用铅笔敲打盖玻片时要注意用力适中均匀,否则盖玻片很容易破裂。
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植物染色体制片与观察实验报告(洋葱组)
姓名:蔡梦雅 1230170010
同组成员:曹鉴云陈锦容刘艳马彦霞
一、中文摘要:染色体(Chromosome),是细胞内具有遗传性质的物体,易被碱性染料染成深色,又叫染色质。
其本质是脱氧核甘酸,是细胞核内由核蛋白组成、能用碱性染料染色、有结构的线状体,是遗传物质基因的载体。
这里我们用洋葱染色体作为代表使用压片法制片并且进行观察。
二、关键词:染色体洋葱压片法
三、引言:洋葱(onion)是百合科(Liliaceae)葱属中以肉质鳞片和鳞芽构成鳞芽的2年生草本植物,其学名为Allium cepa L,染色体数为2n=2x=16。
由表1和图1可见,洋葱的8对染色体中,有7对(第1~7对)染色体,臂比在1·01~1·70之间,为中部着丝点染色体,1对(第8对),臂比为4·74,为近端部着丝点且带随体的染色体;依据STEB-BINS[4]的核型分类标准,洋葱的染色体核型在遗传进化上属较古老的2A型。
100多年来有关染色体与染色体组结构功能的研究一直是生命科学最活跃的研究领域之一,现今人们完成基因组测序后回到对染色体上进行基因定位和作图,因此有关染色体的研究在基因组合功能基因组时代都有重要意义,陈瑞阳教授历时25年的研究完成的《中国主要植物染色体研究》对我国2834种植物染色体数目进行了报道,完成了1045种植物的核型分析,积累了宝贵的染色体基础数据创建了我国植物染色体研究信息平台。
研究染色体进化与生物进化的有不可分割的关系,国际对染色体的化学成分,DNA含量,碱基组成和以染色体数目、形态、结构、大小等为特征的核型进化与物种形成和演化关系的研究,为揭示生物进化趋势提供染色体方面的科学资料,总的来说对染色体的研究在各类学科领域内都有着重要的意义。
国内外对洋葱的研究主要在其成分和药用方面,在细胞遗传上张自力和陈瑞阳等对洋葱的C带显示法进行过研究,田秋元等对洋葱的核型分析及有关制片方法进行了探讨。
植物根尖的分生细胞的有丝分裂,每天都有分裂高峰时间,此时把根尖固定,经过染色和压片,再置放在显微镜下观察,可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞核染色体。
我们设计了不同的实验方案探究如何制作优良的植物染色体玻片,掌握染色体技术。
四、材料与方法:
1.取材
洋葱(Aillum cepa)的鳞茎
2.实验器具和药品
2.1器具
a.载玻片
b.盖玻片
c.烧杯
d.量筒
e.培养皿
f.滤纸
g.玻璃棒
h.镊子i.手术刀
2.2药品
a.0.1mol/L醋酸钠溶液
b.0.25%秋水仙素
c.冰醋酸
d.无水乙醇
e.1mol/LHcl
f.纤维素酶
g.果胶酶
h.卡宝品红
2.3试剂配制
卡诺固定液:用3份无水酒精,加入1份冰醋酸(现配现用)。
酸解液:一份无水乙醇与一份1mol/L 盐酸1:1进行配制。
酶解液:用0.4g的纤维素酶和0.15g的果胶酶溶解在20ml蒸馏水里。
配制成20ml酶解液。
3.实验步骤
3.1取材
于11月13日中午,将洋葱的鳞茎,置于盛水的小塑料杯上培养。
注意选取的洋葱要充实而饱满,表面要油光发亮,底部鳞片薄的老洋葱,去掉老根但不要伤害根芽,用刀片适当削去根部的木栓组织,置于清水中培养,最好使用宿舍放温了的开水,(水的高度要求与洋葱底部正好接触)并且需要注意勤换水,防止根腐烂。
3.2预处理
将洋葱根尖浸泡到0.25%的秋水仙素溶液中2小时。
3.3固定
将预处理过的根部切下,浸泡在配好的卡诺固定液中2.5小时。
3.4解离
1)酸解:从固定液中取出洋葱根尖,用蒸馏水漂洗,再放到解离液,在60℃水浴中解离。
(时间为6—10min)
2)酶解:从固定液中取出洋葱根尖,放在0.1mol/L 醋酸钠中漂洗。
然后放入配好的溶液中,在28℃温箱中解离1小时。
3.5压片
取出根尖,酸解后的根尖用蒸馏
水漂洗,酶解后的根尖用0.1mol/L 醋酸
钠漂洗,将根尖滴加卡宝品红染液,等待
5~15分钟。
盖上盖玻片,用吸水纸吸去
多余染液。
用镊尖轻轻敲打盖玻片,使细
胞铺成薄薄一层。
然后用显微镜观察。
五、实验结果
方案1:
酸解:10min
分析:解离时间较短,使解离不
完全,细胞不能很好的分散开来。
并且细
胞壁未被破坏,导致染色液无法进入细
胞,染色体无法被染色。
解决方案:延长酸解时间。
方案2:
酸解、酶:10min
分析:细胞分裂全处于间期。
1:根尖
细胞处于间期,而间期细胞没有纺锤丝和纺锤
体,不能使细胞停留在中期。
2.洋葱根尖秋水仙
素处理,卡若固定时间太短或浓度太小,在两个
小时内不能达到预期的结果。
3.剪下洋葱根尖的
最好时间是正午时分,因为此时洋葱根尖分生区
有丝分裂最为活跃,此时固定,可以观察到最多
的分裂相,而我们组因为实验材料培养问题,所以固定的时间是10:40,且只固定了2h,如果固定液浓度不够,就会影响后面的实验结果。
实验方案结果展示如下:
固定2.5h 酸解6min 染色10min + / —/++/ —/ ++
8min 染色10min ++++ /—/++ +/ —/+++
酶解45min 染色10min + /—/+++ /—/++
60min 染色10min +++ /—/++++ / —/ +++
固定24h 酸解8min 染色8min +++++ /+++++/ ++++/ +++++/
++++
10min 染色10min ++++/ ++++ / +++++/ ++++ / +++
10min 染色12min ++++ / +++ / +++ / +++ /++
酶解45min 染色10min ++ / ++ / +++ / / ++
60min 染色10min +++/ +++ /++++/ +++/ +++附:本实验共做了9种实验方案,结论:对洋葱根尖进行24小时,酸解8 min,染色10min的压片效果最好。
制片效果依次为:细胞松散程度 /中期分裂相多寡/ 染色效果/ 染色体形态及分散程度/ 背景清晰度
六、讨论
由实验结果就可以看出,本组此次实验并不十分成功。
主要原因是材料也就是洋葱没有在合适的时间培养出根尖。
我们总结出的原因主要有两个:1)种植的洋葱为新采收的洋葱,因它尚在处于休眠期不易生根。
2)该洋葱根部的木栓组织较厚,不易生根。
正确的洋葱根尖培养方法已经在前面的实验步骤中提到了。
由于材料没有及时培养出,导致没有按照计划进行预处理,而是在实验当天提前用秋水仙素预处理2h。
导致最后使用的实验材料不十分理想。
但根据最后的实验结果也能明显比较出酸解与酶解一起进行的效果比只酸解的效果要好很多。
(不同的实验效果图在实验结果中进行了展示,在这里就不重复了。
)
七、参考文献
1.《洋葱核型分析及有关制片方法》田秋元,杨约田,安徽农业大学生命科学学院,2009
2.《遗传学实验》第二版——刘祖洞、江绍慧编高等教育出版社
3.蚕豆洋葱染色体C显带法——张自力、陈瑞阳等1978
4.洋葱核型分析及有关制片方法的探讨——田秋元、杨约田、2009
5.洋葱染色体G带和R带的研究——朱燕祥、张洪达等1993
6.洋葱根尖和马蛔虫卵的细胞分裂制片法——史新柏1962。