盐酸二甲双胍化验试剂配制方法
盐酸二甲双胍质检方法
盐酸二甲双胍质检方法一：质量指标二：质量检验方法1、外观性状目测颜色、颗粒形状，本品应为白色结晶或结晶性粉末，用鼻测其气味，几乎无臭。
2、溶解性（澄清度）盐酸二甲双胍分别能溶于水合甲醇中，且水中的溶解度要远比甲醇中大。
精确称量1.000g盐酸二甲双胍，加10mL水于比色管中，待完全溶解后，比色管从上往下看，如果纯清则表示其在水中的澄清度合格；同样精确称量1.000g盐酸二甲双胍，加30mL甲醇于比色管中，边晃动边使其慢慢溶解，待完全溶解后，比色管从上往下看，如果纯清则表示其在甲醇中的澄清度合格。
3、干燥失重精确称重1.000克样品于一称量皿中，放于105℃干燥炉中4小时至恒重，取出后放于一干燥皿中至室温，称重计算，减重不超过0.5%为样品合格。
计算方法如下：干燥失重=（m样—m干）÷m样4、炽灼残渣600度坩埚，先在高温箱中600℃加热1小时，而后取出放入干燥皿中冷却，精确称重。
准确称重1.000g样品放于坩埚中，直接放电炉加热至没有青烟（约半小时左右）凉至室温加0.5mL 硫酸，继续放电炉加热至无烟(低温加热至硫酸蒸汽，全部除尽)，而后放于600度高温炉中2小时，取出放于干燥皿中完成冷却，精密称量后，再在600-800℃炽灼至恒重，称重计算，小于0.1%为合格。
计算：A最后残渣质量÷m样品质量5、有关杂质（双氰胺对照试验）取二甲样品0.5g，加无水甲醇5mL（沿壁加入）于试管1中，水浴加热至完全溶解（加热取出多次，防止沸出试管），而后自然降温至35度，再加5mL乙醚搅拌冷却至20度，静止30分钟，用滤纸过滤，再用2.5mL乙醚洗试管，同样过滤合并滤液。
滤液。
滤液置水浴上蒸发至干，（可先用电炉蒸干一部分水），残渣加水0.5mL溶解，作为备用样品。
双氰胺对照试样，取双氰胺对照品0.004g，溶于10mL水中，作为备用对照（即没1mL中含0.4mg）展开剂配比：正戊醇、吡啶、水（1:2:1.8），分别取样品5mL、10mL、9mL混合于瓶中备用。
血清中盐酸二甲双胍含量测定方法的建立和考核
血清中盐酸二甲双胍含量测定方法的建立和考核前言盐酸二甲双胍(metformin hydrochloride)是属于双胍类降血糖药物，该药在临床上使用多年，有很好的安全性和有效性。
临床上主要用于II型糖尿病患者的治疗。
本药可以单独使用或与磺脲类药物联合使用。
本文参考文献报道的方法，并对测定方法进行了改进，改进后的方法样品处理更简单，在保持精密度和准确度的情况下，所建立的方法在灵敏度方面也能够满足药代动力学研究的要求。
材料和方法1．药品和仪器1．1药品和试剂标准品：盐酸二甲双胍，北京德众万全药物技术开发有限公司提供，含量99.7％。
试剂：乙腈为美国Fisher产色谱纯乙腈，所用的其它试剂均为分析纯，试验中各种溶液的配制均使用双蒸馏水。
试验中使用的空白血清为购自北京红十字会血站。
1.2仪器和色谱条件Agilent 1100液相色谱仪系统，由单元泵、自动进样器、紫外检测器、色谱工作站组成，以上各部分均由美国Agilent公司生产。
色谱条件为：Alltima sillica色谱柱(150mm×4.6mm 5μm)；流动相为乙腈：pH7.0 0.05mol/L磷酸盐缓冲液=40：60；流速为1ml/L；检测波长为233nm；柱温为室温；进样量为40μl。
1.3贮备液的制备盐酸二甲双胍贮备液：称取适量的盐酸二甲双胍细粉于容量瓶中，用水溶解并稀释成50μg/ml的溶液作为贮备液，于冰箱中保存。
1.4血样处理方法精密量取0.25ml含有药物的血清，精密加入0.5ml乙腈(1:2)，振摇30秒后，4000r/min离心10min后，取出上清液，于自动进样器小瓶中直接进样分析。
1.5标准曲线和质控样的制备用贮备液和空白血清以三倍稀释的方式制备2.54, 0.847, 0.282, 0.094, 0.031, 0.011μg/ml的盐酸二甲双胍标准曲线溶液。
按照血样的处理方法进行试验，以盐酸二甲双胍的浓度对其峰面积进行线性回归。
离子交换色谱法测定盐酸二甲双胍片的含量
离子交换色谱法测定盐酸二甲双胍片的含量王巍;余翔;周祥敏;李洪斌【摘要】目的建立离子交换色谱法测定盐酸二甲双胍片中盐酸二甲双胍含量的方法.方法色谱柱:SHISEIDO CAPCELL PAK SCX UG80(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:0.2 mol·L-1磷酸二氢铵溶液-乙腈(80∶20)(用磷酸调节pH值至3.5);流速:1.5 mL·min-1;检测波长:233 nm;柱温:35 ℃.结果盐酸二甲双胍进样量在0.103 6～1.036 0 μg范围内与峰面积响应值呈良好的线性关系,r=0.999 9;平均回收率为98.9%,RSD为0.9%(n=6).结论该方法专属性强,结果准确,灵敏度高,重复性好,可作为盐酸二甲双胍片质量控制的方法.%Objective To establish a quantitative method for Mctformin Hydrochloridc Tablets by ion exchange chromatography. Methods SHISEIDO CAPCELL PAK SCX UG80 (250 mm×4.6 mm,5 μm) column was used. The 0. 2 mol · L-1 ammonium di-hydrogen phosphate solution-acetonitrilc (80 : 20) (adjusting pH to 3. 5 with phosphoric acid) was used as the mobile phase. The flow rate was 1.5mL · min-1. The detection wavelength was set at 233 nm. Column temperature: 35 ℃. Results The linear range of mctformin hydrochloride was 0. 103 6-1. 036 0 μg and the correlation coefficient was 0. 999 9. The average recovery rate was 98. 9% with RSD 0. 9%(n=6). Conclusion The method is specific, accurate, sensitive and reproducible, which can be used to control the quality of Mctformin Hydrochioridc Tablets.【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2013(028)001【总页数】2页(P36-37)【关键词】离子交换色谱法;盐酸二甲双胍片;含量测定【作者】王巍;余翔;周祥敏;李洪斌【作者单位】重庆市涪陵药品检验所,涪陵,408000;重庆市涪陵药品检验所,涪陵,408000;重庆市食品药品检验所,重庆,401121;重庆市涪陵药品检验所,涪陵,408000【正文语种】中文【中图分类】R927.2盐酸二甲双胍片（Metformin Hydrochloride Tablets）是双胍类降血糖药，该药主要作用于糖的代谢过程，促进糖的无氧酵解，增加周围组织对胰岛素的敏感性，增加胰岛素介导的葡萄糖利用，抑制肠壁细胞摄取葡萄糖，并抑制肝糖原异生。
HPLC法测定盐酸二甲双胍片的含量
ＨＰＬＣ法测定盐酸二甲双胍片的含量目的：用HPLC法测定盐酸二甲双胍片的含量。
方法：采用Diamond C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：0.01 mol/L磷酸二氢钾缓冲液含0.015 mol/L高氯酸（pH3.0）；流速：1.0 ml/min；柱温：室温；检测波长：218 nm，以峰面积计算。
结果：在0.1~0.3 mg/ml范围内盐酸二甲双胍片的峰面积和浓度呈良好的线性关系，r=0.999 4。
结论：本法简便、快捷、灵敏，可作为盐酸二甲双胍片质量控制的有效方法。
[Abstract]Objective:To establish an HPLC method for the content determination of Metformin Hydrochloride Tables. Methods:Analytical column was Diamond C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)，the mobile phase consisted of 0.01 mol/L postassium dihydrogen phosphate and 0.015 mol/L perchloric acid, the flow rate was 1.0 ml/min,UV detection was set at 218 nm and the peak area was calculated.Results:The linear range of metformin hydrochloride was 0.1~0.3 mg/ml,r=0.999 4.Conclusion:The method is simple，rapid and accurate.It can be used for the quality control of Metformin Hydrochloride Tablets.[Key words]HPLC;Metformin hydrochloride;Content determination盐酸二甲双胍是一种双胍类口服降糖药，用于非胰岛素依赖型糖尿病的治疗。
反向高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍片的含量
反向高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍片的含量重庆国舒制药有限公司重庆 401338重庆国泰康宁制药有限责任公司重庆 401520摘要目的：建立高效液相色谱法检测成品中盐酸二甲双胍的含量。
方法：采用高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍片成品的含量，色谱柱为C18（4.6mm×250mm，5μm），以1.7%磷酸二氢铵缓冲液（取磷酸二氢铵17g，用水稀释至1000ml，用磷酸调节pH值至3.2）为流动相，流速为2.0ml/min，柱温：40℃，检测波长：230nm。
结果：HPLC法能准确检测盐酸二甲双胍片的含量。
盐酸二甲双胍对照溶液进样体积为10μl时，在0.126mg/ml～0.502mg/ml浓度范围内线性关系好，线性方程为y=115793.4993x+61202.9655（相关系数r=1.0）；加样回收率回收率在99.7%~99.9%范围内，平均值为99.8%（n=9），RSD为0.45%。
结论：本高效液相色谱条件的专属性强、准确度高，重复性好，可作为盐酸二甲双胍片的含量控制方法。
关键词盐酸二甲双胍片；高效液相色谱法；盐酸二甲双胍；含量盐酸二甲双胍片在临床上主要用于单纯饮食控制不满意的II型糖尿病病人，尤其是肥胖和伴高胰岛素血症者，用本药不但有降血糖作用，还可能有减轻体重和高胰岛素血症的效果。
对某些磺酰脲类疗效差的患者可奏效，如与磺酰脲类、小肠糖苷酶抑制剂或噻唑烷二酮类降糖药合用，较分别单用的效果更好。
亦可用于胰岛素治疗的患者，以减少胰岛素用量[1]。
本品属于要求一致性评价的基本药物，我公司在该品的一致性评价过程中，由于《中国药典》2015年版以及《美国药典》对盐酸二甲双胍片的含量测定方法均采用紫外-可见分光光度法，由于该方法专属性不强，测定误差大，因此笔者摸索出一套高效液相色谱法测定本品的含量，现报道如下：1仪器与试药1.1仪器岛津LC-2030 HPLC色谱仪，紫外检测器；BS124S电子天平（赛多利斯天平）。
HPLC法测定盐酸二甲双胍中有关物质双氰胺的含量_王金平
1.前言盐酸二甲双胍是一种降血糖药，具有提高Ⅱ型糖尿病患者的血糖耐受性，降低基础和餐后血糖的作用。
美国糖尿病协会和欧洲糖尿病协会于2006年共同提出建议，Ⅱ型糖尿病患者一经确诊应尽早开始使用盐酸二甲双胍；世界上绝大多数的糖尿病治疗指南都将其列为首选用药，也是中国成年Ⅱ型糖尿病人用得最多的口服处方降糖药。
盐酸二甲双胍的作用机理不同于其它类型的口服抗血糖药，它可减少肝糖的产生，降低肠对糖的吸收，并且可通过增加外周糖的摄取和利用而提高胰岛素的敏感性，与磺酰脲类药物不同的是，盐酸二甲双胍不会使Ⅱ型糖尿病患者或正常血糖的患者产生低血糖症。
盐酸二甲双胍治疗后，胰岛素的分泌保持不变，而降低了空腹胰岛素水平及每日血浆胰岛素水平。
盐酸二甲双胍为药典品种，其中收载了有关物质双氰胺的测定方法，限度为0.02%[1]，但该法有一定的局限性，如色谱分离时双氰胺的保留时间较短，难于和溶剂峰基线分离，给定量的工作带来不便，色谱条件重现性欠佳等；近年来，关于盐酸二甲双胍中双氰胺含量测试也有文献报道[2-5]，但在实际应用上由于色谱条件要求高，成本高等亦存在部分局限性；本文主要参照药典方法，并作了一些条件的改动以适应实际测定的需要。
2.仪器与试药仪器：色谱仪:Agilent1200series高效液相色谱仪；紫外检测器：Agilent G1314A VWD；电子天平:CPA225D(赛多利斯)；pH计：PB-10(赛多利斯)。
试剂：盐酸二甲双胍原料药(A、B制药企业分别提供3批)；盐酸二甲双胍对照品(批号：100664-200401中国药品生物制品检定所)、双氰胺对照品(批号：100206-200302中国药品生物制品检定所)；水为超纯水；磷酸二氢铵(分析纯)，磷酸(分析纯)。
3.方法与结果3.1色谱条件的选择流动相：3.4%(W/V)磷酸二氢铵缓冲液(用磷酸调pH值至2.5)；色谱柱：Agilent SCX(250 mm×4.6mm，5μm)；检测波长：218nm；流速：1.0 ml/min；柱温30℃，进样量：10μl。
欧洲药典盐酸二甲双胍杂质F二甲胺检测方法
欧洲药典中盐酸二甲双胍杂质F（二甲胺检测方法）翻译
衍生试剂：现配现用，1ml2,4-二氟硝基苯至100ml容量瓶中，用乙腈（HLPC级）溶解。
空白溶液：取100ul三乙胺和1ml衍生试剂加入到5ml乙腈中，摇匀，60℃加热30min，冷却后，用乙腈定容至10ml。
供试品溶液：现配现用，10mg盐酸二甲双胍原料药，用5ml乙腈溶解，超声5min，加入100ul三乙胺和1ml衍生试剂，摇匀，60℃加热30min，冷却后，用乙腈定容至10ml。
用前过滤或者在（离心力）800g的转速下离心5min。
对照溶液：取1ml二甲胺至100ml容量瓶中，用乙腈溶解并定容至刻度，然后移取此溶液2.5ml此溶液至100ml容量瓶中，用乙腈溶解并定容。
取上述溶液1ml，加入5ml乙腈，在加入100ui三乙胺，摇匀，60℃加热30min，冷却后，用乙腈定容至10ml。
色谱柱：以封尾的碳十八烷基键合硅胶为固定相，规格：125mm×3mm×5um 柱温：30℃，流速：0.7ml/min，检测波长：380nm，进样量：5ul。
流动相A：0.1%磷酸（体积比）
流动相B：乙腈
洗脱梯度：
鉴别峰：对比空白图谱和对照谱图，确定杂质F衍生峰。
杂质F分离度保留时间约为4min。
系统适用性要求：与杂质F衍生峰最近的峰的分离度不得小于3.0。
限度：供试品中杂质F衍生峰的峰面积不得大于对照品溶液中杂质F衍生峰的峰面积的0.05%。
HPLC法测定盐酸二甲双胍片的含量
HPLC法测定盐酸二甲双胍片的含量目的建立测定盐酸二甲双胍片含量的方法。
方法采用HPLC法，C18柱（250 mm×6.0 mm，5μm）；流动相为0.01 mol/L磷酸二氢钾缓冲液（内含0.015 mol/L高氯酸，pH为3.0）；检测波长为218 nm。
结果盐酸二甲双胍在8.07 ~80.74μg/mL浓度范围内线性关系良好（r=0.999 1），平均回收率为98.02%，RSD=0.76%。
结论本方法简便、快速、准确，专属性强，可作为盐酸二甲双胍片的含量测定方法。
[Abstract] Objective To establish a method to determine the content of metforminhy drochloride tablets. Methods HPLC instrument with C18 chromatographic column(250 mm×6.0 mm，5μm）was used .The mobile phase consisted of 0.01 mol/L postassium dihydrogen phosphate and 0.015 mol/L perchloric acid;The wavelength for detection was 218 nm. Results The linear range of hydrochlorothiazide was 8.07 ~80.74μg/mL(r=0.999 1). The average recovery was 98.02%.RSD was 0.76%. Conclusion The method is simple,rapid，accurate and specific.It can be used as the quantitative determination of metformin hydrochloride tablets.[Key words] HPLC;Metformin hydrochloride tablets;Content盐酸二甲双胍片是一种双胍类口服降糖药，具有提高2型糖尿病患者的血糖耐受性，降低基础和餐后血糖的作用，是饮食和运动不能控制的2型糖尿病患者的首选处方药，也是国家基本药物目录中收载的品种。
高效液相色谱法对盐酸二甲双胍缓释片的含量测定结果分析
盐酸二甲双胍是目前临床常用的降血糖药物，主要作用机理是增强人体对胰岛素的敏感性，增强外周组织对血糖的摄取，同时抑制肝脏糖异生，减少肝糖原的输出。
根据BSC分类，盐酸二甲双胍属于具有高溶解性、低膜通透性、吸收受膜通透性限制特点的Ⅲ类药物。
口服二甲双胍后胃与大肠几乎不吸收，主要在人体小肠内吸收，平均生物利用度约为55%。
根据2015版《中国药典》规定，测定盐酸二甲双胍片中盐酸二甲双胍含量测定的方法为紫外-可见分光光度法，其灵敏度与准确度与高效液相色谱法相比均有一定差距。
因此本文采用高效液相色谱法对盐酸二甲双胍缓释片的含量进行测定，得到了较好结果。
一、材料与方法1.实验仪器Waters2489/2695高效液相色谱仪，XSE105DU电子分析天平，XPE56电子分析天平，PHS-3C电子分析天平2.实验材料乙腈（批号JA060430，Merck生产），氯化钠（批号20160310，国药集团化学试剂有限公司），庚烷磺酸钠（批号6YUGH，TCI生产），磷酸（批号20170714，国药集团化学试剂有限公司），磷酸盐标准缓冲液（数值：6.86），苯二甲酸盐标准缓冲液（数值：4.01），草酸盐标准缓冲液（数值：1.68），盐酸二甲双胍对照品（批号100664-201604，中国食品药品检定研究院生产），盐酸二甲双胍缓释片（注册用）中间产品（批号180517-1），盐酸二甲双胍缓释片（注册用）空白辅料（批号180517-2）。
3.实验方法（1）色谱条件与色谱适用性用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；检测波长218nm；柱温30℃；流速每分钟1.0ml，进样体积10μl。
理论板数按盐酸二甲双胍计不小于2000。
（2）检测溶液配制①对照品溶液的配置：精密称取经105℃干燥2小时的盐酸二甲双胍对照品20mg，置100ml量瓶中，加1.25%乙腈水溶液溶解并稀释至刻度，精密量取1m至100ml容量瓶中，加1.25%乙腈水溶液溶解并稀释制成每1ml中约含2.06μg的溶液，作为对照品溶液。
HPLC法测定盐酸二甲双胍缓释胶囊的含量
HPLC法测定盐酸二甲双胍缓释胶囊的含量王英;陈峻;高兴岭【摘要】目的建立HPLC法测定盐酸二甲双胍缓释胶囊含量的测定方法.方法用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-1 mmol·L-1磷酸二氢钾溶液(含10 mmol·L-1庚烷磺酸钠,用磷酸调节pH至4.0,40∶60)为流动相,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为233 nm,进样量为10 μL.结果盐酸二甲双胍质量浓度在5.015～25.075 mg·L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9);平均加样回收率为101.0%,RSD为0.8%(n=6).结论方法简单、快速、结果准确,重现性好.【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2009(024)006【总页数】2页(P445-446)【关键词】盐酸二甲双胍缓释胶囊;HPLC法;含量测定【作者】王英;陈峻;高兴岭【作者单位】陕西博森生物制药股份集团有限公司,陕西,西安,710118;陕西博森生物制药股份集团有限公司,陕西,西安,710118;西安芳草园医药科技有限公司,陕西,西安,710065【正文语种】中文【中图分类】R927.2盐酸二甲双胍(metformin hydrochloride)是目前公认首选的口服治疗糖尿病的药物，属双胍类化合物。
我国目前主要有片剂、肠溶胶囊及胶囊剂，并列为国家基本药物。
本品主要用于2型糖尿病的治疗，疗效确切，服用方便，且副作用少。
盐酸二甲双胍及其制剂收载于中国药典[1]，含量测定方法为紫外-可见分光光度法，但此方法不能完全排除有关物质的干扰，结果的准确性较低。
目前在即将要颁布的2010年版药典中，亦要将紫外-可见分光光度法改为高效液相色谱法。
笔者采用了HPLC法测定盐酸二甲双胍缓释胶囊的含量。
此方法简单、快速，准确度高。
1.1 仪器日本岛津LC-2010AHT高效液相色谱仪；YWG C18柱(150 mm×4.6 mm, 5 μm)。
盐酸二甲双胍
盐酸二甲双胍中国药典：拼音名：Yansuan Erjiashuanggua英文名：Metformin Hydrochloride【性状】本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭。
本品在水中易溶，在甲醇中溶解，在乙醇中微溶，在三氯甲烷或乙醚中不溶。
熔点本品的熔点（附录Ⅵ C）为220-225℃。
吸收系数取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含5μg的溶液。
照紫外-可见分光光度法（附录Ⅳ A），在233nm的波长处测定吸光度，吸收系数（E1%/1cm）为778-818。
【鉴别】（1）取本品约10mg，加水10ml溶解后，加10%亚硝基铁氰化钠溶液-铁氰化钾试液-10%氢氧化钠溶液（等体积混合，放置20分钟使用）10ml，3分钟内溶液呈红色。
（2）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集631图）一致。
（3）本品的水溶液显氯化物的鉴别反应（附录Ⅲ）。
【检查】有关物质取本品适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1lml中约含0.5mg 的溶液，作为供试品溶液；另取双氰胺对照品适量，精密称定，用水溶解并稀释制成每1ml 中约含0.1mg的溶液，作为双氰胺对照品溶液。
分别精密量取上述两种溶液各0.5ml，置同一100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。
照高效液相色谱法（附录Ⅴ D）测定，用磺酸基阳离子交换键合硅胶为填充剂，以1.7%磷酸二氢铝溶液（用磷酸调节pH值至3.0）为流动相，检测波长为218nm，理论板数按双氰胺峰计算不低于5000，盐酸二甲双胍峰与双氰胺峰的分离度均应符合要求。
取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使双氰胺色谱峰的峰高约为满量程的10%，再精密量取供试品溶液与对照溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至盐酸二甲双胍保留时间的2倍。
供试品溶液的色谱图中如有与双氰胺峰保留时间一致的峰，按外标法以峰面积计算，其含量不得过0.02%，其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液中盐酸二甲双胍峰面积的1/5，其他各杂质峰面积的和不得大于对照溶液中盐酸二甲双胍峰面积。
盐酸二甲双胍口服溶液剂的制备-文档资料
盐酸二甲双胍口服溶液剂的制备Preparation Study of Metformin Hydrochloride OralSolutionSU Qing, Zhao Gang, Li jing, Tian Chang-qing, Liu yong-jun, lan Jing, Meng Xiao-dong, Bai Shao-yanInstitute of Materia Medica, Shandong Academy ofMedical Sciences, Jinan 250062, China：Objective To study the preparation and stability of metformin hydrochloride oral solution. MethodsAccording to the classical comparison method, the experiments were designed. The character, colour, clarification and relevant material were examined and the content was determined. The best prescription was selected. ResultsAll the indexes and stability of the preparation were consistent with the requirements from Pharmacopoeia of thePeople ‘ s Republic of China (2005 edition). Conclusion The preparation is suited for the industrial production and useful in clinic.盐酸二甲双胍( metformin hydrochloride )是非胰岛素依赖型糖尿病患者特别是患此病肥胖者的首选药物[1] 。
HPLC法测定盐酸二甲双胍中二甲双胍的含量
HPLC法测定盐酸二甲双胍中二甲双胍的含量目的：通过HPLC方法测定二甲双胍在盐酸二甲双胍片剂中的含量。
方法：在色谱条件：选择Hypersil CN（200 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱柱，流动相：乙腈：0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调至pH=3.5）（32∶78），检测波长：234 nm，进样量10μl，1.0 mL/min流速，柱温为室温（30℃）条件下进行检测。
结果：二甲双胍在2.56ug·mL-1-64.00ug·mL-1范围内线性关系良好，线性方程为：Y =65347X-324521（r=0.9996），平均回收率为100.46%，RSD为1.43%。
结论：采用高效液相色谱方法，可有效评估盐酸二甲双胍片剂中二甲双胍的含量，本法结果准确、方法简单、灵敏度高。
标签：HPLC法；二甲双胍；盐酸二甲双胍；含量二甲双胍是目前治疗2型糖尿病的首选药物，目前对于盐酸二甲双胍的含量测定方法较多，紫外及高效液相等检测方法，都有相继报道[1]。
考虑到紫外检测不能有效分离制剂中有关物质，所测结果准确性不高，故考虑分析高效液相法对盐酸二甲双胍片剂检测的有效性，结果报道如下：1 材料1.1 仪器与试药岛津LC-20A 型高效液相色谱仪；超声波清洗器；乙腈由国药集团化学试剂有限公司提供，为色谱醇；磷酸、磷酸二氢钾均为分析纯；盐酸二甲双胍对照品（中国药品生物制品检定所，批号：150913-151102）；盐酸二甲双胍胶囊（常州兰陵制药有限公司，国药准字H11021518，批号为：140923、150316、150728）。
2 方法与结果2.1 方法学验证2.1.1 色谱条件色谱柱选择Hypersil CN（200 mm×4.6 mm，5 μm），，流动相：乙腈：0.01 mol/L 磷酸二氢钾溶液（用磷酸调至pH=3.5）（32∶78），检测波长：234 nm，进样量10μl，1.0 mL/min流速，柱温为室温（30℃）。
反相高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍血药浓度
反相高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍血药浓度发表时间：2009-02-17T10:53:56.733Z 来源：<<中国医药卫生>>杂志供稿作者：李婉姝[导读]李婉姝吉林大学第二临床学院民康医院(吉林长春130041)【摘要】目的建立反相高效液相色谱法测定血浆盐酸二甲双胍浓度的方法。
方法含有二甲双胍的全血离心分离血浆，高氯酸沉淀蛋白，高速离心取上清。
色谱柱BondapakTM C18；流动相乙腈：水：2M磷酸：2M氨水（500：490：5：5，V/V）；流速 0.5ml．min -1 紫外检测波长 233nm；柱温：40℃；外标法。
结果〓方法的回收率为93.2%。
，批内批间变异分别为5.3%和8.9%，线性范围0.1～10.0ug.ml -1 ，r=0.9853。
结论方法简便准确，可用于血浆二甲双胍的临床检测。
【关键词】反相高效液相色谱法盐酸二甲双胍血药浓度［中图分类号］R453 ［文献标识码］A ［文章编号］1810－5734(2008)11-0035-02盐酸二甲双胍（metformin hydrochloride）为双胍类降糖药，作用于糖的代谢过程，主要用于Ⅱ型糖尿病，对胰岛素治疗者加用盐酸二甲双胍可减少胰岛素用量，临床应用疗效确切。
对于盐酸二甲双胍血药浓度方法国内外均有报道，多为高效液相色谱法（HPLC），HPLC 法分析柱与流动相的灵活性较大，利用我们已有的条件，加以改进，建立了本方法。
1 材料与方法1.1 仪器与试剂：高效液相色谱仪（美国Waters公司。
515泵，UV-7500紫外检测器，655A-52柱温箱，7725手动进样器，Upper色谱工作站。
），日本Shimadzu AEL-40SM精密分析天平，法国GILSON定量移液器，江苏中大420型恒温水箱，北京北德MVS-1旋涡混合器，北京时代DT5-2自动平衡台式离心机，低温冰箱。
盐酸二甲双胍标准品（中国药品生物制品检定所），空白血浆（长春市中心血站），甲醇，乙腈（色谱纯，天津四友），高氯酸，磷酸二氢钾、磷酸、氨水、十二烷基硫酸钠、三乙胺（分析纯，天津化学试剂）。
盐酸二甲双胍化验试剂配制方法
化验试剂配制方法1、氢氧化钠试液：取氢氧化钠样品4.3g加水溶解成100mL，即得标准试液。
2、硫代乙酰胺试液：取硫代乙酰胺样品4g，加水使溶解成100mL，置冰箱中保存。
临用前，取1.0mL加入混合液（由1mo1/L氢氧化钠溶液15mL，水5mL，甘油20mL组成）5.0mL，置水浴上加热20分钟，冷却，立即使用。
3、铁氰化钾试液：取铁氰化钾1g，加水100mL使之溶解，即得，本试液应临用新制。
4、亚硝基铁氰化钠试液：取亚硝基铁氰化钠样品1g，加水使之溶解成20mL，即得，本试液应临用新制。
5、醋酸盐缓冲液（pH3.5）：取醋酸铵25g,，加水25mL溶解后，加7mo1/L盐酸溶液38mL，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5（电位法指示，pH计），用水稀释至100mL即得。
6、高氯酸滴定液（0.1mol/L）：取无水冰醋酸（按含水量计算，每1g水加醋酐5.22mL）750mL，加入高氯酸（70%-72%）8.5mL，摇匀，在室温下缓缓滴加醋酐23mL，边加边摇，加完后再摇匀，放冷，加无水冰醋酸适量使成1000mL，摇匀，放置24小时即得。
7、标准铅溶液：精确称取硝酸铅0.160g，置于1000mL量瓶中，加硝酸5mL和水50mL溶解后，用水稀释至1000mL刻度，摇匀，作为储备液待用。
临用前，精密量取储备液10mL，置于100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1mL溶液相当于10ug 的Pb）。
8、展开剂：取样正戊醇、吡啶、水分别为5mL、10mL、9mL混合于容量瓶中即得。
正戊醇、吡啶、水的比例为1:2:1.8。
.9、萘酚苯甲醇指示剂：取萘酚苯甲醇0.5g，加冰醋酸100mL使其溶解即得，变色范围pH=8.5-9.8（黄-绿）10、醋酸汞溶液：取醋酸汞5g，加冰醋酸溶解至100mL即得。
本试液应置于棕色瓶中，密闭保存。
11、结晶紫指示剂：取结晶紫0.5g加冰醋酸100mL,使溶解，即得。
高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍的血药浓度
高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍的血药浓度李丽;高运军;吴邹平【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2008(017)007【摘要】目的建立高效液相色谱法测定人血浆中盐酸二甲双胍的浓度.方法以阿替洛尔为内标,采用Lichrospher C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱,以3 mmol/L十二烷基硫酸钠(SDS,含0.5%三乙胺,用磷酸调pH值至4.0)-乙腈(65:35)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长232 nm.结果血浆盐酸二甲双胍质量浓度线性范围是50～3 000 μg/L,标准曲线方程为Y=0.339 1X-0.007 3(r=0.999 9).结论该方法灵敏、简便、快速、准确,适用于盐酸二甲双胍的血药浓度测定及临床药代动力学研究.【总页数】2页(P46-47)【作者】李丽;高运军;吴邹平【作者单位】江苏省南京市中医院,江苏,南京,210001;江苏省南京市中医院,江苏,南京,210001;江苏省南京市中医院,江苏,南京,210001【正文语种】中文【中图分类】R917;R969.1【相关文献】1.高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍缓释片中盐酸二甲双胍的含量和释放度 [J], 宋新康;曾玉梅2.高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍肠溶胶囊中盐酸二甲双胍含量 [J], 隋译;孙菲;赵明3.高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍血药浓度及临床应用 [J], 王长连;刘亦伟;黄品芳4.串联双柱固相萃取-高效液相色谱-电喷雾多级质谱法测定盐酸二甲双胍制剂中的盐酸二甲双胍及残留物三聚氰胺和双氰胺 [J], 周艳芬;王芳焕;王泽岚;詹海鹃;刘万毅;孟哲5.高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍血药浓度 [J], 何江因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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化验试剂配制方法
1、氢氧化钠试液：取氢氧化钠样品4.3g加水溶解成100mL，即得标
准试液。
2、硫代乙酰胺试液：取硫代乙酰胺样品4g，加水使溶解成100mL，
置冰箱中保存。
临用前，取1.0mL加入混合液（由1mo1/L氢氧化钠溶液15mL，水5mL，甘油20mL组成）5.0mL，置水浴上加热20分钟，冷却，立即使用。
3、铁氰化钾试液：取铁氰化钾1g，加水100mL使之溶解，即得，
本试液应临用新制。
4、亚硝基铁氰化钠试液：取亚硝基铁氰化钠样品1g，加水使之溶解
成20mL，即得，本试液应临用新制。
5、醋酸盐缓冲液（pH3.5）：取醋酸铵25g,，加水25mL溶解后，加
7mo1/L盐酸溶液38mL，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5（电位法指示，pH计），用水稀释至100mL即得。
6、高氯酸滴定液（0.1mol/L）：取无水冰醋酸（按含水量计算，每1g
水加醋酐5.22mL）750mL，加入高氯酸（70%-72%）8.5mL，摇匀，在室温下缓缓滴加醋酐23mL，边加边摇，加完后再摇匀，放冷，加无水冰醋酸适量使成1000mL，摇匀，放置24小时即得。
7、标准铅溶液：精确称取硝酸铅0.160g，置于1000mL量瓶中，加
硝酸5mL和水50mL溶解后，用水稀释至1000mL刻度，摇匀，作为储备液待用。
临用前，精密量取储备液10mL，置于100mL
量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1mL溶液相当于10ug 的Pb）。
8、展开剂：取样正戊醇、吡啶、水分别为5mL、10mL、9mL混合
于容量瓶中即得。
正戊醇、吡啶、水的比例为1:2:1.8。
.
9、萘酚苯甲醇指示剂：取萘酚苯甲醇0.5g，加冰醋酸100mL使其溶
解即得，变色范围pH=8.5-9.8（黄-绿）
10、醋酸汞溶液：取醋酸汞5g，加冰醋酸溶解至100mL即得。
本试
液应置于棕色瓶中，密闭保存。
11、结晶紫指示剂：取结晶紫0.5g加冰醋酸100mL,使溶解，即得。
变色范围紫色到蓝色（稍微带有紫色）。
12、高氯酸标定方法：取领苯二甲酸氢钠0.16g，（需精密称量，且称
量前必须干燥恒重）加冰醋酸20mL使之溶解，加结晶紫指示剂一滴，用需标定的高氯酸进行滴定至溶液为蓝色（稍微带有紫色）。
并将滴定结果用空白进行校正。
每1mL高氯酸液（0.1mo1/L）相当于20.42mg的领苯二酸氢钠钾。
（标定应至少做三个样品以上）进算方法：领苯二酸氢钾的量/高氯酸的体积/0.2042=高氯酸的实际浓度
13、高氯酸标准液：无水冰醋酸1875mL，高氯酸21.25mL，在室温
下缓缓加入醋酐57.5mL，放置室温，加冰醋酸至2500mL即得。
14、7mol/L盐酸：63mL盐酸稀释至100mL；2mol/L盐酸：18mL盐
酸稀释至100mL；1mol/L氢氧化钠：饱和氢氧化钠溶液5.6mL 稀释至100mL；
15、显色剂配制：10%亚硝基铁氰化钠溶液、10%铁氰化钾溶液、10%
氢氧化钠溶液，三试剂等体积混合放置20分钟即得；。