不同来源长春花药材中文多灵的含量比较
不同来源长春花药材中文多灵的含量比较
不同来源长春花药材中文多灵的含量比较
周高丽;曾令杰
【期刊名称】《广东药学院学报》
【年(卷),期】2009(025)004
【摘要】目的建立长春花中文多灵的含量分析方法,比较不同来源长春花药材中文多灵的含量.方法采用高效液相色谱法,以依利特C18柱为分析柱,甲醇:水(体积比64:36,以二乙胺和磷酸调pH11)为流动相,流速为1 mL/min;220 nm为检测波长.结果红色长春花、白色长春花以及恩平、阳江、广州紫色长春花样品中文多灵含量分别是1.561、0.390、0.982、0.622、0.587 mg/g.结论不同来源的长春花中文多灵的含量差异较大.
【总页数】3页(P376-378)
【作者】周高丽;曾令杰
【作者单位】广东药学院中药学院,广东广州510006;广东药学院中药学院,广东广州510006
【正文语种】中文
【中图分类】R284
【相关文献】
1.不同产地长春花中总黄酮的含量比较研究 [J], 曾令杰;杨惠玲
2.不同来源白头翁药材的皂苷含量比较 [J], 时维静;胡跃进;王海侠;谭志静
3.4种不同药材来源郁金饮片醋炙前后的HPLC特征图谱分析及水煎出物含量比较
[J], 张军;苏本正;石典花;孙立立
4.离子交换树脂对长春花中文多灵、长春质碱和长春碱的富集研究 [J], 张琳;牛卉颖;杨磊;祖元刚
5.中山产长春花不同部位中文多灵生物碱的分布 [J], 刘意;曾令杰;周高丽
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欧州药典中两个植物来源药品的质量标准简介
发布日期栏目标题作者部门正文内容20070704中药药物评价>> 中药质量控制欧州药典中两个植物来源药品的质量标准简介付文卫张永文审评二部付文卫张永文在世界各地使用的药物中约有25% 的来源于植物,目前仍有121 个活性成分制成的药物广泛地应用于临床。
世界卫生组织 (WHO) 建议的 252 个基本药物中有11% 来源于植物,还有相当数量是以天然产物为前体经合成获得。
来源于植物的药物,早期的从洋地黄属(Digitalis spp. )植物中得到的地高辛(digoxin )、从金鸡纳树属( Cinchona spp.)植物中得到的奎宁(quinine )和奎宁定(q uinidine ),近期的有从长春花( Catharanthus roseus)中分离得到的长春碱(vinblastine )和 vincristrine以及从红豆杉中分离得到的紫杉醇等。
据估计目前在市场上销售的和处在临床试验的抗癌药和抗感染药物中,大约有60% 的是天然来源的。
[1][2]对于来源于天然产物,尤其是植物的药物,研究其质量控制现状和规律对我国中药及天然药物质量控制水平的提高有一定的参考价值。
本文仅以欧州药典(EP4 )中的两个药物为例,介绍其质量控制的要点,以期对中药及天然药物有效成分新药的质量研究及标准建立有所启发。
1 、地高辛( Digoxin ) (EP4, 01/2002:0079)地高辛为目前临床常用的中等强度强心药,来源于洋地黄属植物。
是经分离得到的强心苷类天然产物。
欧州药典 EP4 中其质量标准内容包括以下几个内容:定义(DEFINITION )、性质( CHARACTERS)、鉴别(IDENTIFICATION )、检查( TESTS )、分析( ASSAY )、贮藏( STORAGE )和杂质( IMPURITIES )等几项。
定义( DEFINITION )项规定了地高辛的含量在95 ~ 103% 之间。
长春花生物碱Ⅰ中药提取物
长春花生物碱Ⅰ中药提取物长春花生物碱Ⅰ【提取来源】本品为夹竹桃科植物长春花Catharanthusroseus (L.)G.Don的全草提取的单吲哚类生物碱,总生物碱含量≥80%。
【主要成分】阿马里新Ajmalicine,含量:60%【随属成分】鸭脚木碱Alstonine冠狗牙花定Coronaridine柳叶水甘草碱Tabersomne蛇根碱Serpentine罗西定碱Roseadine含量:20%【性状】本品为类白色至淡黄色粉末,可溶于氯仿、乙醚、丙酮、乙醇。
【鉴别】取本品加氯仿制成0.5%溶液作供试液。
取标准品阿马里新、鸭脚木碱、冠狗牙花定、蛇根碱等加氯仿制成各成分含量为1mg/ml溶液作对照液。
取长春花标准对照药材5g加10%氨水5ml碱化浸润30分钟,加氯仿50ml,超声振提20分钟,滤液蒸干,残渣加乙醇5ml溶解,过滤,作对照液。
取上述三液各5μl,分别点于同一硅胶G板,一次点5板,分别按以下展开剂展开,喷硫酸铈-硫酸试液,热风吹显。
①氯仿-乙酸乙酯(1:1)。
②乙酸乙酯-无水乙醇(3:1)。
③苯-氯仿(3:1)。
④氯仿-甲醇(8:2)。
⑤氯仿-甲醇-石油醚(9:1:5)。
在标品斑点对应位置显相同颜色斑点,比对标准药材斑点,对应率≥60%。
硫酸铈·硫酸试液配制取0.1g硫酸铈悬浮于4ml水中,加1g三氯醋酸加热至沸,沿壁滴加浓硫酸至澄清,即可。
【检查】干燥失重:不得过5.0%(附录Ⅸ G)炽灼残渣:不得过0.8%(附录Ⅸ J)重金属:不得过10ppm(附录Ⅸ E)【含量测定】照高效液相色谱法(附录Ⅵ D)测定色谱条件C18柱流动相:甲醇5 mmol/L磷酸铵(pH7.3)(67:33)、(77.5:22.5)检测波长:280nm对照液:取阿马里新标品加甲醇制成0.2mg/ml溶液备用。
供试液:取本品加甲醇制成0.3mg/ml溶液备用。
利用DM-5大孔树脂富集长春花中的文多灵的研究
时珍 国医国药 2 1 00年第 2 2卷第 4期
利用 D 一 M 5大 孑 树 脂 富 集 长春 花 中的 文 多 灵 的研 究 L
摘要 : 目的 优化 D 5大孔吸附树脂分离纯化长春花 中文多灵的洗脱条件。方法 采用大孔吸附树脂色谱法, M一 以不同
体 积 分数 乙醇 水 溶 液 进 行 洗 脱 以分 离富 集 文 多灵 , 进 行 高 效 液 相 色谱 ( P C) 踪 检 测 。 结 果 长 春 花 中文 多 灵 主 要 并 HL 跟 富 集在 7 % 乙醇 洗脱 液 中 , 0 自海 南 文 昌 引种 的 长春 花 中文 多灵 含 量 为 0 1% , .9 明显 高 于 自海 南三 亚 引种 的 长春 花 中 文 多 灵的含 量 0 0 % 。结论 D 5大孔 吸附树脂对长春花 中文 多灵的分 离纯化效果 良好 , .3 M一 此方法操作 简单 、 重复性好 , 具有
较 好的工业化前景。
关 键词 : 长春花;号 : 2 4 2 R 8 .
文 献标 识码 : B
文章编 号 :0 8 8 5 2 1 )4 8 7 2 10 - 0 ( 0 0 0 - 7 - 0 0 0
长春 花 C taa tu su 1 )G.D n是一种广 布于 热带 研究室 。D ah rn s oes(| h r _ o M一 5大孔 吸附树 脂( 南开化工厂 ) 文多灵标准 品( ; 海 地区的抗癌药 物的资源植物 , 海 南分布 于万宁 、 昌、 水 、 在 文 陵 三 南 国栋公 司) 甲醇 ( ; 色谱纯 美 国 B ri udc k& Jcsn 、 ako ) 甲醇 ( 分析 亚、 东方等地 。全 草药用 , 用 于治疗 白血病 、 核细 胞性 白血 纯) 乙腈 ( 可 单 、 色谱纯 美 国 B ri & ako ) 三 乙胺 ( udc Jcsn 、 k 色谱 纯 美 国 病、 横纹肌软骨 病 、 癌 、 肺 胃癌 、 子宫 癌 、 巴 肉瘤 、 腺 癌 、 巢 B ri 淋 乳 卵 udc k& Jc sn 、 酸 ( 析 纯 ) 去 离 子 水 ( 验 室 自制 ) ako ) 磷 分 、 实 。 癌 、 丸 癌 、 烫 伤 、 血 压 病 、 血 糖 等 症 。迄 今 为 止 , 经 12 仪 器 层 析 柱 、 密 p 计 ( 特 勒 ) 烘 干 箱 ( HG一97 A 睾 火 高 高 已 . 精 H 梅 、 P 00 从该植物 中分 离出一百 五十余 种生物碱 , 分为单 吲哚生物碱 , 型 电 热 恒 温 鼓 风 干 燥 箱 , 海 一 恒 科 技 有 限 公 司 ) 电 子 天 平 可 上 、 如具 有 重 要 用 途 的 文 多 灵 ( idl e ; 聚 吲 哚 生 物 碱 长 春 碱 (a o u P 2 S 、 声 波 发 生 器 ( 国 E MA T 2 / 、 空 v on) 二 n i Sa f s 2 1 ) 超 i B 德 H 80 H) 真 (ibat e 长春新 碱 ( iciie 等 j v l i )、 n sn v rt ) n sn 。文 多灵 又称 文朵 灵 、 旋转蒸发仪( 瑞士 B C au m cnr e V一 0 ) D O E U HI cu ot u r 8 0 、 I N X高 V o 文多林 、 文朵灵碱 、 长春花朵 宁和长春 刀灵 , 是合成长春碱 和长 春 效液相色谱仪 ( V 10 P 8 P CP mp 。 U D 7 U,6 0H L u ) 新碱 的前体 。 目前长春碱 和长 春新碱 是非常有 价值 的肿瘤 化 2 方 法 疗药 物 。此外 , 动物 实验 表 明, 多灵 具有 降血 糖 、 尿和 降 2 1 树 脂 的预 处 理 称量 D 一5树 脂 2 k , 乙醇 ( 度 > 文 利 . M g加 浓 血脂作用 , 还对某些病原菌有抑制作用 J 。 9 %) 5 浸泡 2 , 2 V乙醇 , 15B / 4h用 B 以 . V h的流速 正向通过树脂 随着对文多灵药用功能研究 的不 断深入 , 其用途也越来越 被 层 , 保 持 液 面高 度 , 后 保 留一 定 量 的 乙 醇 , 泡 1 , 后 用 并 最 浸 2h然 广泛揭示 , 市场需求 日益增加 , 目前长 春花 已在 海南 大面积种植 。 2B ~ V水 , 15B / V 4B 以 . V h的 流 速 正 向通 过 树 脂 层 , 至 流 出 洗 近年来各 国学者采用多种方 法对 长春花 中生物碱 进行 分析 和分 液 加 水 不 呈 白色 混 浊 为 止 。再 用 2B 的 1m lLHC 溶 液 , 2 V o 1 / 以 离 , 现 国 内长 春 花 系 列 品 种 中海 南 产 长 春花 中文 多灵 的 含 量 最 B / 发 V h的流速 正向通过树脂 层 , 并浸泡 2h~ , 4h 而后用纯水 以同 高 。 , 且海 南 不 同地 区 长 春 花 品 种 叶 中 文 多 灵 的 含 量 不 同 。 样 流 速 洗 至 出 水 p 中性 ; 入 2B ~ V 1mo LN O 溶 液 。 而 J H 加 V 3B l aH / 同时已有较 多研究表 明大孔 吸 附树脂对 于生物碱 具有 良好 的吸 以 2 0B / . V h的流速正 向通过树 脂层 , 而后 用纯水 以同样流速 洗 附效 能 。最 近 , 琳 等 利 用 大 孑 树 脂 吸 附 分 离 长 春 花 中 的 文 至出水 p 中性 。取适量装入玻璃 色谱柱 (0c 2 4c 。 张 L H 4 m X . m) 多灵 、 长春质碱和长春碱 , 果 明显强 于传统 的硅胶和 氧化铝 载 2 2 洗脱条件 的研 究 样 品上柱 后依 次用水 ,0 ,3 ,0 , 效 . 3% 5 % 7% 体 。本 研 究 采 用 D 一 M 5大 孔 吸 附 树 脂 富 集 白海 南 文 昌 、 亚 引 9 % 乙 醇 水 溶 液 适 量 进 行 洗 脱 , 三 0 流量 为 8m/ n lmi。 种 到 海 口 的长 春 花 中 的 文 多 灵 , 利 用 HP C 检 测 文 多 灵 的 含 2 3 树 脂 的再 生 用 8 % 乙醇 20 0ml 柱至 变 白色 , 用 并 L . 0 0 洗 再 量 , 化 其 洗 脱 条 件 , 深 入 开 发 利 用 海 南 产 长 春 花 中 的 文 多 灵 400m 水 洗 至无 乙醇 味 , 离 柱 即可 重 复 使 用 。 优 为 0 l 分 提供 科 学 依 据 。 2 4 长春花 中总生物碱 的提 取和 文多灵 的含 量测定 同时采集 . 1 材 料 与 仪 器 两种长春花 , 将采 集 的样 品经 5 %烘 干 、 碎 、 6 0 粉 过 0目筛 后 备 11 材料与试剂 20 0 . 0 7— 3在海南海 口 中国热 带农业 科学 院热 用 。 取 等 量 长 春 花 样 品 , 8 % 的 甲 醇 浸 泡 , 声 提 取 3 次 , 用 0 超 带生物技术研究所 生物检测 中心基地采集长春花植株地上部位 , 3 mn 次 , 并 滤 液 , 0 i / 合 减压 浓 缩 , 适 量 水 稀 释 后 过 滤 。进 行 D 加 M 采集 的两 个 品种 分 别 是 从 海 南 三 亚 和 文 昌引 种 到 海 口 的长 春 花 , 5大 孔 树 脂 吸 附 , 后 用 3 % ,3 ,0 ,0 乙醇 水 梯 度 洗 然 0 5% 7% 9% 编 号 分 别 为 ch—a0 0 1 c 2 7 35和 ch—b0 0 1 , 中 国热 带 农 业 脱 。各流份分别减压蒸干 , c 2 7 35 经 称重 , 用色谱纯 甲醇溶解定容 。离 心 , 科学 院 热 带 生 物技 术研 究 所 代 正 福 副 研 究 员 鉴 定 , 本 保 存 在 本 取上清 、 标 微量移液枪取 1 l 0 定容至 1m 。文多灵标准 品配制成 l 0 4 gml以上 样 品 均 用 04 m徽 孔 滤 膜 过 滤 后 备 用 。 .5m / , .5 2 5 色 谱 条 件 色谱 柱 : rm s D 1(5 m × . m, . Ko aiO SC8 20 m l 4 6m 收稿 日期 :0 9 )-0; 修 订 日期 :0 9 1—0 20 463 20 -02 基金项 目: 中央级公益性科研院所基本科研业务 费专项资金 资助项 目 5t m)流 动 相 为 水 : 乙 胺 = 8 : 1 , 磷 酸 调 p =7 2 溶 液 x 二 96 4用 H .( ( o I B Z 2 0 4—1 ; N .T B D 0 7— ) B) 甲 醇 : 乙腈 =4 1 溶 液 A) 30 + 2 m ; : ( ,8 ml B 6 0 lA作 为 流 动 海 南 省 自然科 学基 金 ( o8 8 7 ) N .0 1 5 相 , 测 波 长 :6 m, 速 : tmi; 样 量 为 1 l 检 2 2n 流 1m / n 进 0 。
长春花化学成分研究进展
长春花化学成分研究进展杨莹莹;张广晶;徐雅娟;徐暾海;刘铜华;张舒媛【摘要】对长春花的化学成分研究进展进行文献整理,为其进一步开发利用提供有价值的参考。
%This paper sorted the literatures on progress of researches on chemical contents of Catharanthus Roseus,so as to provide val-uable reference for its further development and utilization.【期刊名称】《世界中医药》【年(卷),期】2014(000)007【总页数】4页(P955-957,960)【关键词】长春花;化学成分;研究进展【作者】杨莹莹;张广晶;徐雅娟;徐暾海;刘铜华;张舒媛【作者单位】长春中医药大学,长春,130117;长春中医药大学,长春,130117;吉林省中医药研究院,长春,130021;北京中医药大学中药学院,北京,100029; 北京中医药大学中医养生学教育部重点实验室,北京,100029;北京中医药大学管理学院,北京,100029; 北京中医药大学中药学院,北京,100029;北京中医药大学管理学院,北京,100029【正文语种】中文【中图分类】R284.2长春花Catharanthus roseus(L.)G.Don是双子叶纲龙胆(Dicotyledones)夹竹桃科(Apocynaceae)长春花属(Catharanthus G.Don)植物,又称雁来红、日日新、四时春、三万花等,中医临床以全株入药。
原产于非洲马达加斯加岛西印度一带的热带森林地区,早在宋代以前就传入我国[1]。
在我国的广东省、广西壮族自治区、云南省、海南省、贵州省、四川省以及江浙一带均有栽培,作为一种重要的药用植物被广泛应用。
其味微苦、性凉,具有抗癌、镇静安神、平肝、降压、解毒等功效[2-3],具有小毒,可引起人体细胞的萎缩、白血球及血小板的减少、引起肌肉无力、四肢麻痹等症状[4]。
匀浆法提取长春花中长春碱、文多灵和长春质碱
N r e t oet i ri, ab 5 0 0C io ot a rsy v syH ri 104 , hn hs F r Un e t n
Ab ta t T re i otn laod Vi lsie Vid l e a d Cah a tie sr c: he mp ra tak lis( n at , n 0i ta nhn )weee tatd fo f s b n n n r r xrce r m e h l
2 .东北林业 大学 森林植物生态学教 育部 重点实验 室, 黑龙江 哈 尔滨 10 4 ) 50 0
摘 要: 采用匀 浆法 从新鲜长春花枝叶中提取长 春碱 、 文多灵和长春质碱等3 种主要生物碱 , 研究 了提取过程 中不同影
响因子 对提取 效果的影响,确 定的匀浆提 取适宜条件为 :以01%硫酸5%甲醇溶液作为提取溶2卷第 5期 20 年 l 08 O月
高 校
化
学
工
程
学 报
No 5 、 . 2 . 2
J r a f oun l Che c l ngn ei go o mia E ie rn fChn s ieeUniest s v rie i
0c. t
2 0 08
文章编 号:10 -0 2 0 )50 6.6 39 1(0 80 .7 80 0 5
25mi, . n 匀浆提 取3 匀浆提取法所提取 的长春碱量分别 比超声 、O 次。 S ℃温 浸和回流提取 法提高1 .8 69 %和1 . %, 07 %、 .6 33 6
3 次提取 耗能时间仅7 i。匀浆提取比其他常规提取方法操作简单 ,省去 了对物料进行烘干 、粉碎 的步骤 ,并使物 . mn 5
匀浆法提 取长春花 中长春碱 、文多灵和长春质碱
长春花含有的化学成分及作用
长春花含有的化学成分及作用
长春花又名四时春,花期最长,四季常开,粉红或紫红色,姹紫嫣红,十分可爱。
宋代洪适有《长春》诗赞日:四季花常发,朝朝得细看,绛英能受署,绿刺更禁寒。
目前从此植物中分离出的长春碱、长春新碱,具有抗肿瘤作用。
长春碱主要用于何杰金氏病、绒毛膜癌,此外对淋巴肉瘤、蕈样霉菌病、白血病、横纹肌软骨癌、黑色素瘤、精母细胞瘤、畸胎瘤、星形细胞瘤、网织细胞瘤等各种肿瘤。
可使肿瘤明显缩小或发热消退,但缓解期较短。
长春新碱对何杰金氏病疗效较长春碱低,而对急性淋巴性白血病和恶性淋巴肿瘤缓解作用较强,特别是对儿童急性白血病有效果,但治疗持续时间应长,可与其他化疗药物同用。
长春花为夹竹桃科亚灌木长春花的金株。
幼枝绿色或红褐色,全株均被白色柔毛;单叶对生,长圆形或倒卵形,先端中脉伸出短尖;花1-2朵腋生,花萼绿色,5裂,花冠高脚碟状,粉红或紫红色;瞢荚果圆柱形。
花期几近全年。
多为栽培,也有野生,分布广东、广西、云南以及长江以南各地。
另有其变种白长春花、黄长春花亦入药用。
全年可采集。
现代研究:迄今已分离出70余种生物碱,主要为长春碱、长春新碱,其根、叶亦含生物碱。
药理实验有抗肿瘤。
降血压、降血糖、利尿等作用。
其毒性可见白细胞下降,少数出现食欲下降及其他胃肠道反应,以及神经系统症状,应予重视。
长春花性味微苦,凉,有毒。
有镇静安神,平肝降压之功效。
治疗高
1。
长春花(Catharanthus roseus)中吲哚类生物碱含量的比较
张 琳 祖 元 刚 牛 卉 颖 张颜 滨 孙 志 强
104 ) 5 0 0
( 东北林业大学森林植物生态学教 育部 重点实验室 , 尔滨 哈
摘
要
建立 了反 相 高效液 相法测 定 长春花 中吲哚 类生 物碱 文 多灵 、 长春质 碱和 阿玛 碱含 量 的 方
法, 色谱 柱 为 HQ s 1 i iC 8色谱 柱 (5 m × 、 5 m) 流 动相 为 1 二 乙胺 水溶 液 ( 酸调 l 20m 4 6mm, ; % 磷
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第2 8卷
第 2期
植
物
研
究
20 0 8年
Ma .. r
3月
20 08
V 1 2 No 2 o. 8 .
BU L L EⅡN 0T 0F B ANI AL RE EARC C S H
长 春 花 ( a aa t s o u) C t rn u s  ̄ 中吲哚 类 生物 碱 含量 的 比较 h h re
测, 结果表 明文 多灵和 长春质 碱 主要存 在 于在根 、 叶 、 中 , 茎、 花 阿玛碱 主要 存 在 于种 子 中 ; 且 随 并 着地 理位 置 的北移 , 长春花 中的文 多灵和 长春 质碱 的含 量逐 渐 降低 , 室 中人 为控 制 长春 花 中的 温 栽 培条件 能提 高二者 的含 量 。
aklis idl e ctaa tiea da ai n nC taa tu r es Q s 1 o mn 2 0mm l o — n o n . a rn n n j l c ei ah rnh s o u.Hi iC cl ( 5 a dv i h h m i s l 8 u
长春花生物碱类成分的分布及分析方法研究概况
神, 平肝降压等作用… 其主要成分长春碱类化合物具有 明显
的抗 肿 瘤 活 性 , 何 杰 金 氏病 及 非 小细 胞 性 肺 癌 、 性 淋 巴 对 恶 肿 瘤 等 有 显 著 疗 效 。 硫 酸 盐 已广 泛 用 于 临 床 , 今 仍 是 主 其 迄 要 的 肿 瘤用 药 之 一 : 文 旨在 对长 春花 生 物 碱 类 成 分 的检 测 本
线 性 范 围 。 目前 为 止 , 到 已建 立 多 种 长 春 花 生 物 碱 单独 分 析
8 7
第 1卷 第 1期 5 2
Vo .5 11 No 2 .1
中 莲为 导般
Gu dn o r a fTrdt n lChn s Me ii e a d h r c ii g J u n lo a io a i ee i dcn n P ama y
第 1卷 第 l期 5 2
Vo .5 11 No 2 .1
中 莲为 导般
Gud n o ra f T a io a C ie e iig J un lo rdt n l h n s Me iie a d Ph r c i dcn n ama y
20 0 9年 l 2月
在 其方法 为将样品提取液和与标准品混合液点于G 24 F5 硅
胶 板 上 , 向展 开 , ( ) 酸 乙 酯 一 醇 ( :) ( ) 氯 甲 双 以 1乙 甲 31 及 2 二 烷一 甲醇 ( :) 展 开 剂 ,%硫 酸 铈 铵 的磷 酸 溶 液 喷 洒 显 色 。 91为 1 丁 贤儒 等 【 薄层 扫描 法 及 薄 层 一 外 分 光 光 度 法 分 离 了长 1 以 紫
长春花主要农艺性状与文多灵含量的相关及通径分析
植物学报Chinese Bulletin of Botany 2009, 44 (1): 96−102, w w 收稿日期: 2008-04-22; 接受日期: 2008-06-05基金项目: 863计划(No. 2007AA 10Z189)、上海市农委项目(No. 沪农科攻字(2005)第1-1-5号)和上海市重点学科建设项目(No. B209)*通讯作者。
E -mail: kx tang@.c n; c air un@s .研究报告.长春花主要农艺性状与文多灵含量的相关及通径分析孙小芬1,2, 陈雨1, 潘俊松1, 王玉亮1, 孙克兴1, 唐克轩1*, 蔡润1*1上海交通大学农业与生物学院植物科学系植物生物技术研究中心, 上海 2002402复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室, 上海200433摘要 文多灵(vindoline)具有重要的药用价值。
本文利用反相高效液相色谱法检测了23种国内外长春花主栽品种的文多灵含量, 对文多灵含量与品种的12个主要农艺性状(包括株高、节间距、茎直径、一级侧枝数、叶片长、叶片宽、叶片长宽比、百片叶重、全株叶片重、花瓣直径、种荚长度和种子数/荚)的相关性和通径进行了分析。
相关性分析表明, 文多灵含量与一级侧枝数、茎直径、节间距、叶片宽、株高、全株叶片重、百片叶重、花瓣直径和叶片长呈正相关, 其中与一级侧枝数和茎直径的相关性达到显著水平(P <0.05), 与节间距的相关性接近显著水平; 与叶片长宽比、种荚长度和种子数/荚呈负相关。
通径分析结果表明, 长春花的主要农艺性状中, 节间距、一级侧枝数和全株叶片重对文多灵含量的正影响达到了显著水平(P <0.05),通径系数分别为0.959、0.716和0.431, 说明节间距、一级侧枝数和全株叶片重可以作为高含量文多灵长春花品种选育的重要参考指标。
关键词 农艺性状, 相关性, 长春花, 通径系数, 文多灵孙小芬, 陈雨, 潘俊松, 王玉亮, 孙克兴, 唐克轩, 蔡润 (2009). 长春花主要农艺性状与文多灵含量的相关及通径分析. 植物学报 44,96−102.长春花(C a t h a r a n t h u s r o s e u s )为夹竹桃科(Apocynaceae)长春花属(Catharanthus )多年生草本植物。
长春花中长春碱含量测定方法的研究
长春花中长春碱含量测定方法的研究丁贤儒;倪坤仪;曹海;陈文佳【期刊名称】《中国药科大学学报》【年(卷),期】1995(26)3【摘要】研究了薄层扫描法及薄层-紫外分光光度法测定长春花中长春碱含量的两种方法,在硅胶F254-CMC-Na碱性板上(NaOH浓度为0.1mol/L),以氯仿-甲醇-石油醚(9:1:5)为展开剂,分离了长春花提取液中长春碱和长春新碱等14种成分。
前法采用双波长簿层扫描,λs=280nm,λR=350nm,线性范围在2~10μg.后法采用薄层分离后,样品带用甲醇洗脱后,紫外分光光度法测定含量。
后法在5~25μg/ml间符合比尔定律。
两法回收率均在99%以上,RSD在2%以下,两法测定结果基本一致。
前法较快速、灵敏、简便。
后法不需特殊仪器设备。
【总页数】3页(P157-159)【关键词】长春花;长春碱;薄层扫描【作者】丁贤儒;倪坤仪;曹海;陈文佳【作者单位】江苏省南通勤奋制药厂,中国药科大学分析化学教研室【正文语种】中文【中图分类】R286.0【相关文献】1.人为采收后长春花中长春碱含量的动态变化 [J], 王非;李雷鸿;孙家宝;祖元刚2.反相高效液相色谱法测定不同方法提取长春花中脱水长春碱的含量 [J], 张琳;牛卉颖;祖元刚3.高压处理种子对提高长春花中长春碱含量的作用 [J], 陈丽英;吴学华;刘秀茹;苏磊;洪时明;梁恒兴;郭力4.长春花中定向诱导长春碱生物半合成方法的研究 [J], 姜守刚;祖元刚;杨磊;付玉杰;罗猛;王晓鹏;李佳磊5.离子交换树脂对长春花中文多灵、长春质碱和长春碱的富集研究 [J], 张琳;牛卉颖;杨磊;祖元刚因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
长春花重要生物碱含量测定及相关基因的表达分析
上海交通大学硕士学位论文长春花重要生物碱含量测定及相关基因的表达分析姓名:陈雨申请学位级别:硕士专业:生物化学与分子生物学指导教师:李荣秀;唐克轩20080201硕士学位论文长春花重要生物碱含量测定及相关基因的表达分析摘要生物碱(Alkaloids)是植物天然次生代谢产物中数量最多的一类含氮碱性化合物。
许多生物碱由于具有特殊的药理学活性已引起人们越来越多的关注。
药用植物长春花(Catharanthus roseus)中含有长春碱(Vinblastine)、长春新碱(Vincristine)等重要的抗肿瘤萜类吲哚生物碱(Terpenoid indole alkaloids, TIAs)。
但这些TIAs在天然长春花植株中含量较低,化学结构复杂使其人工合成十分困难,因此,仅从天然长春花植物中提取TIAs不能满足市场需求,其价格较为昂贵。
近年来,关于长春花生物碱代谢途径的研究取得了很多成果,为利用植物基因工程提高长春花中药用生物碱的含量提供了理论依据。
在研究工作中,需要快速准确地测定长春花中TIAs的含量,分析上下游代谢产物含量之间的关系,分析关键基因的表达水平和代谢产物含量的关系。
本研究利用RP-HPLC技术对采集到的25个长春花品种叶片中的文多灵、长春质碱和长春碱含量进行了测定,并分析了3种生物碱含量之间的关系,为长春花生物碱代谢工程提供了材料选择的依据。
另外通过反转录PCR技术研究了tdc,g10h,str,dat4个长春花生物碱代谢途径中的重要基因在长春花品种间的表达差异,分析了基因表达水平与生物碱含量的关系。
通过研究,取得了以下进展:1. 优化改进了RP-HPLC测定长春花中生物碱含量的方I硕士学位论文法,能一次完成长春花中3种的重要生物碱(文多灵,长春质碱和长春碱)的测定。
2. 获得了25个长春花品种中的文多灵、长春质碱和长春碱含量的数据,分析了长春碱含量与文多灵、长春质碱含量的关系。
结果表明,文多灵含量与长春碱含量的相关性比长春质碱含量与长春碱含量的相关性更好。
长春花文多灵
长春花(Catharanthus roseus)又名雁来红、日日新、四时春、三万花,是夹竹桃科植物长春花的全草,它主要生长在热带及亚热带,在我国广东、广西颇见生长,苏南地区也有栽培,目前武汉亦有引种。
长春花中含有长春碱(Vinblastine)、长春新碱(Vincristine)、长春质碱(Catharanthine)、文多灵(Vindoline)4种重要的吲哚类生物碱[1]。
其中长春碱和长春新碱是目前世界上应用广泛的抗肿瘤药物,长春质碱、文多灵是合成长春碱的前体[2],长春质碱有一定的降血糖作用,文多灵有镇痛和利尿的功效,但这些生物碱的含量都比较低,均在万分之几甚至几万分之几,因此寻找新的高效、节能、环保的提取和分离长春花中生物碱的生产工艺变得极为重要[3]。
国内外已有一些学者对长春花中生物碱的生产方法进行了研究。
Karola和Szasz等[4]用碱水浸润生药,后用甲苯提取,但碱水浸取生药就将一些中等强度生物碱乃至强生物碱都变成游离碱被提取出来,造成总生物碱所含杂质增多。
后来改进方法,采用含少量水的甲醇浸提1OO kg原料,将浓缩后含水的浸膏用硫酸酸化,用有机溶剂如苯或氯仿将非生物碱的有机物除去,碱化后再用氯仿将生物碱萃取出来,得20g~100g总生物碱,虽然甲醇比甲苯和氯仿的价格要便宜,且毒性较小,但由于极性大,提出的杂质也相对多,选择性不高。
Bashir等[5]将干草粉碎后用乙醇浸取,浸取液酸化后用氯仿萃取,然后用磷酸缓冲溶液再次萃取,萃取物浓缩干燥后溶于氯仿,再经石油醚沉淀部分杂质,后又溶于乙酸乙酯,再用磷酸缓冲液萃取,碱化后所得总生物碱虽然含量比较高,但提取步骤过于复杂,经过多次萃取,浓缩,耗用大量溶剂,不适合大规模工业化生产。
目前对长春花生物碱的提取方法有:溶剂提取法、超临界萃取法[6]、超声波提取法[7]。
纯化方法有:制备型薄层色谱法、柱色谱法、制备型 HPLC 法和高效逆流色谱 (CPC)法等。
长春花中药材详细说明书
长春花药材名称:长春花[毒]拼音名称:CHANGCHUNHUA别名:雁来红、日日新、四时春、三万花、五色梅、日日春、四时花、红长春花科属:为夹竹桃科植物长春花、黄长春花的全草。
性味:[性味归经]苦,寒。
有毒。
归肝、肾经.功能主治:解毒抗癌;清热平肝。
主多种癌肿;高血压;痈肿疮毒;烫伤用法用量:内服:煎汤,5-10G;或将提取物制成注射剂静注射。
外用:适量,捣敷;或研末调敷。
采收储藏:当年9月下旬至10月上旬采收,选晴天收害地上部分,先切除植株茎部木质化硬茎,再切成长6CM的小段,晒干。
化学成份:含70种以上生物碱,主要有长春碱、长春新碱、阿马里新等。
药理作用:1、抗肿瘤作用:从长春花植物中分离出的生物碱,多具抗肿瘤作用,其中以长春碱、长春新碱最有价值,己应用于临床。
两者化学结构极相似,但抗瘤谱不尽相同,两药间无交叉抗药性。
长春碱主要用于何杰金氏病、绒毛膜癌(对氨甲喋呤已产生抗药者,则需用较大剂量);此外,对淋巴肉瘤、蕈样霉菌病(MYCOSISFUNGOIDES)、白血病、横纹肌软骨瘤、黑色素瘤、精母细胞瘤、畸胎瘤、星形细胞瘤、网织细胞肉瘤、癌(胸、肺、口腔、胃、结肠、直肠、卵巢、颈部、子宫、膀胱、肾等部位)等的抗肿瘤作用还需进一步肯定。
有人认为这些生物碱能降低脱氧核糖核酸与核糖核酸及蛋白质的合成,抑制细胞有丝分裂,使中止于中期,表现为细胞毒(对正常骨髓、毛囊上皮均有抑制作用,使白细胞降低,脱发;但对红细胞、口腔和胃肠道粘膜、部分肝切除大鼠的肝再生则无影响)。
最近认为长春碱的作用如一个阳离子与多种蛋白产生沉淀,与CA++相似。
国产长春花总碱的一部分AC-875,用20-40MG/KG对小鼠艾氏腹水癌及腹水型肝癌均有明显抑制作用,用10MG/KG对大鼠腹水型吉田肉瘤也有较好的疗效。
长春碱对艾氏腹水癌细胞本身无破坏作用,但能延长小鼠寿命。
2、降压作用:总碱静脉注射,对麻醉猫、兔均有降压作用,血压下降速度快,与萝芙木总碱制剂的缓慢降压不同,且在降压同时伴有呼吸加深,幅度变大现象;切断迷走神经或用阿托品不影响其降压效果。
中山产长春花不同部位中文多灵生物碱的分布
中山产长春花不同部位中文多灵生物碱的分布
刘意;曾令杰;周高丽
【期刊名称】《中南药学》
【年(卷),期】2009(7)2
【摘要】目的探讨长春花药材不同部位中文多灵生物碱的含量,为长春花药材的产业化生产提供依据。
方法以C18柱(4.6 mm×250 mm,10μm)为分析柱甲醇-水(60∶40,以二乙胺和磷酸调节pH=8~9)为流动相,流速:1.0 mL.min-1 检测波长:220 nm,建立文多灵生物碱的HPLC测定法。
结果利用建立的HPLC分析方法,成功测定了长春花药材不同部位中文多灵生物碱的含量。
结论文多灵生物碱在长春花药材不同部位中均有分布,在叶中的分布显著高于在其他部位中的分布。
【总页数】3页(P102-104)
【关键词】长春花;文多灵;HPLC;分布
【作者】刘意;曾令杰;周高丽
【作者单位】广东药学院
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2;R927.2
【相关文献】
1.不同来源铁皮石斛不同部位生物碱的分布规律研究 [J], 尚喜雨
2.液质联用法分析雾灵乌头不同部位生物碱成分研究 [J], 郭晓宇;张伽妹;全庆华;姬瑞芳;谭鹏;刘永刚
3.抗氧化剂和吲哚生物碱在粉红色和白色长春花植株不同部位中的分布 [J], Cheruth Abdul JALEEL;Rajaram PANNEERSELVAM
4.不同来源长春花药材中文多灵的含量比较 [J], 周高丽;曾令杰
5.比较不同来源长春花药材中文多灵含量的分析研究 [J], 孙玉红
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不同长春花中3种生物碱的含量测定
不同长春花中3种生物碱的含量测定作者:詹小宁来源:《中国民族民间医药·下半月》2014年第12期【摘要】目的:建立快速准确的长春花内生物碱含量测定方法,为寻找高含量品种提供方法和依据。
方法:采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),对收集到的10个长春花品种中的文多灵、长春质碱、长春碱含量进行了测定,色谱柱:Dikma Diamonsil-C18 ( 46mm×250mm,5μm);流动相为A∶07%二乙胺(磷酸调整pH至72);B:乙腈:甲醇=25:40。
A∶B=35∶65;流速1ml/min。
柱温35℃。
检测波长:280nm。
结果:文多灵:Y=200×106X+546×104,r=09999,线性范围:02~4μg;长春质碱:Y=228×106X+831×104,r=09999,线性范围:02~4μg;长春碱:Y=176×106X-717×104,r=09999,线性范围:02~4μg。
文多灵含量最高的是1号品种,长春质碱含量最高的是3号品种,长春碱含量最高的是2号品种,三种生物碱总和最高的是3号品种。
结论:该方法简便、快速,分析准确,适合对长春花内主要生物碱做高通量的筛选。
综合考虑总碱的含量和最重要的长春碱的含量,1号品种适合作为代谢调控的本体。
[JP]【关键词】长春花;长春碱;长春质碱;文多灵;RP-HPLC【中图分类号】R2841 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517(2014)24-0010-04Determination of three kinds of important alkaloids in Catharanthus roseus from ten different habitatsZHAN Xiao-ningThe first affiliated hospital of Bengbu Medical College,Bengbu 233000,ChinaAbstract:Objective To establish a fast and accurate method of determination of alkaloids in Catharanthus roseus for finding high-content varieties. Method To determinate the contents of Vinblastine, Catharanthine and Vindoline in the 10 varieties of Catharanthus roseus by RP-HPLC,HPLC method is performed on Dikma Diamonsil - C18 (46mm×250mm,5μm)column, mobile phase:A:07% diethylamine(pH 72 adjusted by phosphoric acid );B:acetonitrile∶methanol =25∶40.A∶B = 35∶65; flow rate is 1ml/min.Column temperature is 35 ℃. Detected at280nm.Results Vindoline:Y=200×106X+546×104,r=09999,linear range:02 ~4μg;Catharanthine:Y=228×106X+831×104,r=09999,linear:02 ~4μg;Vinblastine:Y=176×106X-717×104,r=09999,linear range:02~4μg.The species of the highest content of vindoline is the 1st, Catharanthine is the 3rd, vinblastine is the 2nd species, the highest sum of three alkaloids is on the 3rd varieties.Conclusion This method is simple, reliable, repeatable, and is suitable for High-throughput screening of the Alkaloids content in Catharanthus roseus. The 1st varieties is suitable as the body of metabolic regulation.Keywords:Catharanthus roseus; vinblastine; catharanthine; vindoline; RP-HPLC长春花Catharanthus roseus (L. ) G. Don 为夹竹桃科(Apocynaceae)长春花属(Catharanthus)植物,原产于非洲东海岸,现广泛分布于世界各地,我国的广东、广西、云南、海南、贵州、四川以及江浙一带均有栽培。
匀浆提取法提取长春碱、文多灵和长春质碱
匀浆提取法提取长春碱、文多灵和长春质碱长春花,半灌木,略有分枝,高达60厘米,有水液,全株无毛或仅有微毛;茎近方形,有条纹,灰绿色;节间长1-3.5厘米。
叶膜质,倒卵状长圆形,长3-4厘米,宽1.5-2.5厘米,先端浑圆,有短尖头,基部广楔形至楔形,渐狭而成叶柄;叶脉在叶面扁平,在叶背略隆起,侧脉约8对。
聚伞花序腋生或顶生,有花2-3朵;花萼5深裂,内面无腺体或腺体不明显,萼片披针形或钻状渐尖,长约3毫米;花冠红色,高脚碟状,花冠筒圆筒状,长约2.6厘米,内面具疏柔毛,喉部紧缩,具刚毛;花冠裂片宽倒卵形,长和宽约1.5厘米;雄蕊着生于花冠筒的上半部,但花药隐藏于花喉之内,与柱头离生;子房和花盘与属的特征相同。
蓇葖双生,直立,平行或略叉开,长约2.5厘米,直径3毫米;外果皮厚纸质,有条纹,被柔毛;种子黑色,长圆状圆筒形,两端截形,具有颗粒状小瘤。
花期、果期几乎全年。
长春花全株有毒,误食易造成细胞萎缩、白血球减少、血小板减少、肌肉无力、四肢麻痹等。
但是长春花却是一种防治癌症的良药,全草均可入药,其中含有长春碱(Vinblastine,VBL)、文多灵(Vindoline,VDL)、长春质碱(Catharanthine,CAT)、阿玛碱(Ajmalicine,AMC)、蛇根碱(Serpentine,SPT)和长春新碱(Vincristine,VCR)等多种萜类吲哚生物碱,具有很高的药用价值,如长春碱和长春新碱具有抗肿瘤活性,尤其对白血病具有显著疗效。
长春碱可用于治疗何杰金氏病和绒毛上皮癌、淋巴肉瘤和卵巢癌等。
文多灵和长春质碱具有降血糖作用,文多灵有利尿作用,长春质碱有降血压、镇痛等作用,并且文多灵和长春质碱还是合成长春瑞宾、长春氟宁[7]等长春碱类抗肿瘤药物的中间体。
匀浆提取是指生物组织通过加入溶剂进行组织匀浆或磨浆,以提取活体组织中有效成分的一种提取方法。
该方法一般应用于从动物组织中提取氨基酸、蛋白质等目的成分。
长春花的药用价值长春花的副作用
长春花的药用价值_长春花的副作用文章目录*一、长春花的药用价值*二、长春花的副作用*三、长春花的医学记载及附方长春花的药用价值1、功能主治长春花,学名:Catharanthus roseus (L.)G. Don,别名:日日春、日日草、日日新、三万花、四时春、时钟花、雁来红。
台湾育种出多个品种,育种以花朵越大为趋势。
中草药用途上,全草入药可止痛、消炎、安眠、通便及利尿等。
亦有医者配伍入治疗癌症的复方,作为药材中的一味,可能是考量到它所具有的抗肿瘤成分。
全株具毒性需斟酌注意。
误食后,会造成白血球减少、血小板减少、肌肉无力、四肢麻痹等症状。
其乳汁中所含生物碱,如长春花碱和长春新碱(vincristine),被提炼出来作为多种癌症如白血病、哈杰金氏症所用的化学治疗药物。
全草长30-50cm。
主根圆锥形,略弯曲。
茎枝绿色或红褐色,类圆柱形,有棱,折断面纤维性,髓部中空。
叶对生,皱缩,展平后呈倒卵形或长圆形,长3-6cm,宽1、5-2、5cm,先端钝圆,具短尖,基部楔形,深绿色或绿褐色,羽状脉明显;叶柄甚短。
枝端或叶腋有花,花冠高脚碟形,长约3cm,淡红色或紫红色。
气微,味微甘、苦。
2、用法用量2.1、来源:为夹竹桃科植物长春花的全草。
2.2、采集:全年可采。
2.3、化学成份:含70种以上生物碱,主要有长春碱、长春新碱、阿马里新等。
2.4、性味:广州部队《常用中草药手册》:微苦,凉。
2.5、功用主治:凉血降压,镇静安神。
用于高血压、火烫伤、恶性淋巴瘤、绒毛膜上皮癌、单核细胞性白血病。
①广州部队《常用中草药手册》:镇静安神,平肝降压。
治高血压。
②《常用中草药彩色图谱》:治疗何杰金氏病、恶性肿瘤。
③《广西药植名录》:治白血病,肺癌,绒毛膜上皮癌,淋巴肿瘤。
2.6、用法与用量:内服:煎汤,2~5钱;或提取物制成注射剂。
长春花的副作用全株具毒性需斟酌注意。
误食后,会造成白血球减少、血小板减少、肌肉无力、四肢麻痹等症状。
长春花中毒症状表现与解救方法
长春花中毒症状表现与解救方法【别名】雁来红、四时春、日日新、三万花。
【来源】本品为长春花Catharanthus rose us(L.) G.Don.的全草。
长春花为夹竹桃科植物,亚灌木,分布于广东、广西、云南及长江以南各省。
【代用品种】,1.白长春花 C.rose us(L.) G.Don var.albus(Sweet)G.Don.。
2.黄长春花 C.rose us(L.) G.Don var.flavus(T siang)Metcalf.。
【药用特点与中毒机制】长春花性味微苦凉,有毒,所含成分迄今已分离出70余种生物碱,包括长春碱、长春新碱、洛柯定碱、洛柯辛碱、派利文碱、文朵灵碱、泻花碱等,其中6种有抗癌活性。
功效为镇静安神、平肝降压,治高血压和癌症,目前主要用于治疗恶性淋巴瘤、绒毛膜上皮癌、肺癌、乳癌、宫颈癌、白血病等。
6~15g煎汤内服,或提取物制成注射剂。
由于毒性较强,应用长春碱后,多有不同程度的白细胞下降,部分病例下降较显著。
对神经系统的损害导致感觉及运动障碍,刺激胃肠道,并能抑制骨髓的造血功能。
此外对口腔黏膜、泌尿系统和心脏也有一定影响。
【中毒症状】中毒后有3~6h潜伏期,首先出现食欲减退,恶心呕吐,腹痛腹泻,口腔炎,头痛,指、趾尖端麻木,四肢疼痛,肌肉震颤,腱反射消失,全身软弱,骨髓抑制导致血红蛋白、白细胞及血小板下降(以4~10d为最低点),精神萎靡,眼睑下垂,运动障碍,精子形成障碍,肠黏膜肿胀,肠上皮细胞变性坏死。
血压下降,呼吸加深,失眠,脱发。
大剂量应用时,可出现便秘,麻痹性肠梗阻,尿潴留,腮腺肿痛,口干,窦性心动过速等。
注射给药局部可发生栓塞性脉管炎,如漏出于血管外可引起局部坏死。
【解救方法】1.0.5%鞣酸溶液洗胃,然后服通用解毒药。
2.静脉滴注葡萄糖盐水,加能量合剂。
3.白细胞下降时,可用维生素C、维生素Bi、维生素B;、维生素B6、利血生、鲨肝醇、2',3'-核苷酸片等;其重度下降者,需多次少量输人新鲜血液。
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不同来源长春花药材中文多灵的含量比
较
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
【摘要】目的建立长春花中文多灵的含量分析方法,比较不同来源长春花药材中文多灵的含量。
方法采用高效液相色谱法,以依利特C18柱为分析柱,甲醇∶水(体积比64∶36,以二乙胺和磷酸调pH11)为流动相,流速为1 mL/min;220 nm为检测波长。
结果红色长春花、白色长春花以及恩平、阳江、广州紫色长春花样品中文多灵含量分别是1.561、0.390、0.982、0.622、0.587 mg/g。
结论不同来源的长春花中文多灵的含量差异较大。
【关键词】高效液相色谱法;长春花;文多灵
Abstract:Objective To establish the determination method of vindoline extracted from Madagascar periwinkle (Catharanthus roseus (L.) Don.) and to compare vindoline content in different sources of periwinkle. Methods Eluted at a Yilite C18 column with methanol water (64∶36) ( adjusted to pH 11 with diethylamine) at flow rate of 1 ml/min,and detected at 220nm,a HPLC method was
developed for the determination of vindoline in periwinkle;Results The vindoline content in red periwinkle,white periwinkle in Guangzhou and pink periwinkle from Enping,Yangjiang,and Guangzhou were 1.561,0.390,0.982,0.622,0.587 milligrammes per gramme.Conclusion The contents of vindoline varied greatly among periwinkles from different sources.
Key words:HPLC;Catharanthus roseus (L.) Don.;vindoline
长春花(Catharanthus roseus (L.) Don.)为夹竹桃科长春花属植物,原产于非洲马达加斯加岛西印度一带的热带森林地区,早在宋代以前就传入我国[1]。
全株入药,有利尿止血、镇定安神、平肝降压等功效[2],常用来治疗疟疾、腹泻、糖尿病、高血压、皮肤病及何杰金氏病[3]。
长春花含有100多种吲哚生物碱[4],其中主要成分长春碱临床上广泛用于治疗急性白血病、何杰金氏病、恶性淋巴肉瘤、绒毛膜上皮癌等[5]。
文多灵生物碱为长春花植物体内合成长春碱的前体[6]。
长春花分布于全国各地,在广东亦有大量栽培,而且种类繁多,但广东省不同来源长春花药材中文多灵的含量情况却未见有文献报道。
本文采用高效液相色谱法对5批不同来源的长春花中文多灵的含量进行了测定。
1 仪器与试药
天美LC 2000高效液相色谱仪,包括LC2030紫外检测器,LC2130 PUMP,T2000P色谱工作站。
文多灵对照品购于天津中新药业,纯度为99.5%,符合HPLC定
量分析的要求;分析用长春花样品采自广州或广东其他地区,经本校药用植物教研室曾令杰副教授鉴定为长春花(Catharanthus roseus (L.) Don.),白花长春花(Catharanthus roseus var. albus G. Don,Vinca rosea var. alba Sweet);甲醇为色谱纯,水为双蒸水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件及系统适应性考察
色谱柱:Yilite C18柱(10 μm,4.6 mm×250 mm);流动相:甲醇水(体积比64∶36,以二乙胺和磷酸调pH11);流速:1 mL/min;进样量:20 μL;检测波长:220 nm。
在该色谱条件下,文多灵的保留时间为13.591 min。
见图1
2.2 对照品的制备
精密称取文多灵0.010 80 g置25 mL量瓶中,用甲醇溶解并定容至25 mL,摇匀,即得质量浓度为0.432 0 mg/mL的对照品贮备液,置冰箱中保存,备用。
2.3 样品溶液的制备
精密称取干燥药材粉末各2 g,以氨水浸润加三氯甲烷70 mL 在室温下超声提取30 min,滤过,精密量取续滤液50 mL,蒸干,用甲醇溶解并完全转移至10 mL的量瓶中,甲醇定容,即得。
2.4 线性关系考察
分别精密吸取“2.2”项下对照品贮备液1、2、3、4、5 mL置10 mL量瓶中,用甲醇定容,摇匀,配成浓度分别为0.043 2,0.086 4,0.129 6,0.172 8,0.216 0 mg/mL的对照品溶液,按“2.1”项下色谱
条件进行测定,以文多灵质量浓度为横坐标,测得峰面积为纵坐标绘制标准曲线,得回归方程为
y=24416182.870x+218182(R2=0.999,n=5) 结果表明,文多灵检质量度在0.043 2~0.216 0 mg/mL范围内与峰面积积分值线性关系良好。
2.5 精密度试验
分别精密吸取“2.2”项下对照品贮备液20 μL,按“2.1”项下色谱条件重复进样5次,结果,峰面积积分值的RSD=1.79%,符合HPLC 定量分析要求。
2.6 加样回收率试验
取同一批长春花样品6份,每份约1 g,分别精密加入对照品溶液适量,按“2.3”项下提取制备供试品溶液,并按“2.1”项下色谱条件进行含量测定,计算回收率。
结果表明文多灵的平均回收率为97.2%,RSD=1.68%,见表1。
表1 文多灵回收率试验结果
2.7 样品的测定
分别精密吸取“2.3”项下样品溶液20 μL,按“2.1”项下色谱条件测定。
结果见表2。
结果表明:不同来源的长春花中文多灵含量差异较大,红色长春花中的含量最高,紫色长春花中的含量次之,白色长春花中的含量最少;阳江产与恩平产的紫色长春花中文多灵含量也有差异。
表2 不同来源长春花文多灵生物碱的含量
3 讨论
3.1 本文先后采用甲醇水(以二乙胺和磷酸调pH11)体积比为
60∶40,62∶38,64∶36,65∶35的流动相进行分离,结果以体积比为64∶36时,文多灵得到了较好的分离,峰形良好,回收率稳定,并且其他成分对文多灵的检测不形成干扰,说明建立的分析方法可行。
3.2 研究结果表明,不同来源的长春花中文多灵含量有较大的差异,红色长春花中文多灵的含量最高,紫色长春花次之,白色长春花含量最少。
不同产地的长春花文多灵含量差异也较大,在所检测的紫色长春花中,恩平所产的文多灵含量最高,阳江的次之,广州的最低。
表明遗传因素和环境条件都影响着长春花中文多灵的含量水平。
3.3 本文首次对不同来源的长春花药材中文多灵的含量进行了探讨,为长春花品种的筛选和培育提供了科学的依据,为中药材长春花的规范化栽培奠定了基础。
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