冠周康口服液制备工艺研究

冠周康口服液制备工艺研究
（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）
【摘要】目的探讨冠周康口服液的最佳提取工艺。

方法本试验采用4因素3水平正交设计法,以组方中的龙胆苦苷含量、出膏率为指标,筛选影响冠周康口服液水提醇沉工艺的因素。

结果冠周康口服液中龙胆草、板蓝根、黄芩采用乙醇提取,以龙胆苦苷含量为考察指标,最佳提取工艺条件为：乙醇提取浓度为65%,用量为药材总量的8倍,提取时间为1 h,提取次数为3次。

其余药物采用水煎煮提取,以出膏率为考察指标,最佳提取工艺条件为：水用量为药材总量的12倍,浸泡时间为0.5 h,煎煮时间为每次1 h,提取次数为3次。

结论试验结果为确定冠周康口服液的制备工艺提供了实验依据。

【关键词】冠周康口服液；制备工艺；正交设计；龙胆苦苷；出膏率
Abstract：Objective To establish the best technological condition of Guanzhoukang Oral Liquid. Method Based on the evaluation marker of extraction amount and gentiopicroside content in prescription, the factors influencing the effect of water decoction and alcohol reflux procedure were selected by
orthogonal design. Results The best technological condition of Guanzhoukang Oral Liquid should be as follows：radix gentianae, radix isatidis and radix scutellariae contained in prescription were extracted by alcohol in which the concentration was 65%, 8 times of total amount of material herb, extracted 3 times, 1 h for each time. The left material herbs were extracted by water decoction in which amount was 12 times of total amount of material herb, soaked for half hour and decocted 3 times, 1 h for each time. Conclusion The result provides experimental basis for the preparation technology of Guanzhoukan Oral Liquid.
Key words：Guanzhoukan Oral Liquid；preparations procedure；orthogonal design；gentiopicroside content；extraction amount
冠周康口服液是在古方“防风通圣散”的基础上加减化裁研制而成,由龙胆草、板蓝根、防风、细辛、黄芩、石膏、连翘等药组成,具有清胃泻火、凉血解毒、消肿排脓之功效。

为保证产品的质量,笔者采用正交试验优选法,根据药物成分和部分研究资料[1]以及中医用药习惯,确定其工艺路线为：龙胆草、板蓝根、黄芩采用乙醇回流提取,防风、细辛、连翘用蒸馏法提取挥发油,石膏、蒲公英、甘草和
回流后及提油后的药渣再水煎醇沉提取。

1 仪器与试药
Watcrs-1525高效液相色谱仪,Watcrs-2487型紫外检测仪,Breeze 色谱工作站。

色谱柱：Srinmetr C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm),流动相：甲醇-水(3∶7),检测波长：270 nm,流速：1 mL/min。

龙胆苦苷对照品(中国药品生物制品检定所提供)。

甲醇为色谱纯,水为超纯水,其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果
2.1 挥发油提取
按处方量称取防风、细辛、连翘,用8倍药材水量浸泡0.5 h后再蒸馏2 h,收集芳香水另器储存,药渣和药液备用。

2.2 乙醇提取工艺研究
2.2.1 正交试验设计
选择主要影响提取的乙醇浓度、乙醇用量、提取时间及提取次数作为考察因素,以龙胆苦苷含量为指标,应用L9(34)正交设计进行试验。

因素水平见表1。

表1 因素水平表（略）
2.2.2 提取方法
按L9(34)正交试验设计工艺条件,称取龙胆草、板蓝根、黄芩。

按正交试验各项要求,先加入乙醇浸润0.5 h,再回流规定的次数和时间,滤过,合并滤液,回收乙醇,浓缩至适量,测定其中龙胆苦苷的含量。

2.2.3 龙胆苦苷含量测定方法[2]
精密称取龙胆苦苷对照品适量,加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液,作为对照品溶液。

另取流浸膏适量,置30 mL量瓶中,加入甲醇10 mL,超声提取 1 h,放冷至室温,补足甲醇,摇匀,滤过,精密量取续滤液2 mL,置10 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,作为供试品溶液。

标准曲线的制备：精密称取龙胆苦苷对照品9.5 mg,置10 mL 量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,分别精密吸取上述标准溶液0、5、10、15、20 μL,进样,以进样所含龙胆苦苷的量为横坐标(μg),色谱峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程：Y＝726.55X＋196.8,r ＝0.998 68。

进样量在0～19 μg范围内线性关系良好。

分别测定各样品的峰面积,根据峰面积来计龙胆苦苷含量。

结果见表2,方差分析见表3。

表2 试验安排和结果（略）表3 方差分析表（略）注：F0.05(2,2)=19.00,F1-0.01(2,2)=99。

对表2、表3进行极差、方差分析,影响因素依次为DACB, D因素具有显著意义,说明乙醇提取次数对龙胆苦苷含量影响最大,提取次数以3次为佳,故优选最佳条件为A1B3C2D3,即65%乙醇浓度,乙醇用量为12倍,提取时间为1 h,提取次数为3次。

但本工艺中,乙醇用量、提取时间为不显著因素,为省时、节能、经济,B因素可选择B1,C因素选择C1,因此,最后确定工艺条件A1B1C1D3。

2.3 水煎煮提取工艺研究
2.3.1 正交试验设计
选择主要影响提取的加水量、浸泡时间、煎煮时间及煎煮次数作为考察因素,以出膏率为指标,应用L9(34)正交设计进行试验。

因素水平见表4。

表4 因素水平表（略）
2.3.2 水煎煮提取
取石膏、蒲公英、甘草和回流后及提油后的药渣、药液,按正交试验设计提取,然后浓缩,用60%的乙醇沉淀,过滤,滤液浓缩至流浸膏,以出膏得率作为考察指标。

2.3.3 出膏率的测定
精密量取等量的按正交表设计提取的各组药样,置已干燥至恒重的蒸发皿(Co),水浴浓缩至干,于105 ℃烘箱中干燥3 h,移至于干燥器中,冷却至室温,迅速精密称定重量(Ci),按公式(Ci-Co)/C样×100%,计算出膏率。

结果见表5,方差分析见表6。

表5 试验安排和结果（略）表6 方差分析表（略）
由表5可知,各因素对出膏率影响大小依次为DACB, A、D因素具有极显著意义,直观分析结果表明,最佳提取工艺为A3B1C2D3,因为C因素为不显著因素,根据节约原则,C因素可选择C1,最后确定最佳工艺条件为A3B1C1D3。

3 验证试验
为了验证上述结果的准确性,以保证提取工艺的合理可行,按上述已确定的工艺条件安排重复试验,结果见表7、表8。

表7 乙醇提取工
艺验证试验结果（略）表8 水煎煮提取工艺验证试验结果（略）按上述得出的提取工艺进行验证试验,共3次,平均龙胆苦苷总量为1.035 5 g,出膏率30.12%,高于正交表中9个试验结果的最高量。

从上述试验结果可以看出：所筛选出来的工艺合理可行,稳定可靠,具有可操作性和重现性。

4 讨论
本试验探讨冠周康口服液的制备工艺,经正交设计试验得出最佳工艺：龙胆草、板蓝根、黄芩采用乙醇提取,乙醇浓度为65%,用量为药材总量的8倍,提取时间为1 h,提取次数为3次。

其余药物采用水煎煮提取,水用量为药材总量的12倍,浸泡时间为0.5 h,煎煮时间每次为1 h,提取次数为3次。

其中无论是醇提还是水提,提取次数是影响提取的主要因素。

以最佳工艺制备了3批产品,经外观质量、含量测定、出膏率等方面的考核,均优于其它条件,所制备产品稳定性好,符合质量标准,适合大批量生产。

【参考文献】
[1] 徐旭红,唐风需,顾瑛琪.板蓝根药材及板蓝根口服液提取工艺的探讨[J].海峡药学,2004,16(4)：86－87.
[2] 聂中越,程淑娟.HPLC法测定龙胆复方制剂中龙胆苦苷的实验研究[J].深圳中西医结合杂志,2002,12(3)：173－175.。