选修一 植物组织培养
人教版高中生物选修一专题3《植物的组织培养技术》ppt专题整合课件
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• 【例1】 (2010·浙江理综,40)将无根的非洲菊幼苗
转入无植物激素的培养基中,在适宜的温度和光照等 条件下培养一段时间后,应出现的现象是
( )。
•解析 无根幼苗可自身产生植物激素,诱导分化出根部。 不可能脱分化形成愈伤组织,也不会在下部分化出芽。 •答案 B
• 【例2】 (2010·全国新课标,40)请回答:
• (2)组织培养中的细胞,从分化状态转变为未分化 状态的过程称为______。
• (3)在再分化阶段所用培养基中,含有植物激素a和 植物激素b。逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓 度比,未分化细胞群的变化情况如下图所示。据图指 出两种激素的不同浓度比与形成芽、根、愈伤组织的 关系:
•①当植物激素a与植物激素b的浓度比等于1时,
•(5)据图推测,若要在诱导试管苗生根的过程中提高其 光合作用能力,应______(降低,增加)培养基中蔗糖浓度, 以便提高试管的自养能力。
•解析 (1)植物组织培养属于无性繁殖,后代能够保持 亲本的遗传特性。植物微型繁殖技术能够实现快速繁殖。 植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性,即已经分 化的细胞,仍然具有发育成完整个体的潜能。(2)植物组 织培养接种和试管苗转接过程中都需要无菌操作,以避 免微生物(杂菌)污染。(3)微型繁殖培养基中使用的生长 素与细胞分裂素比例不同,可以分别诱导根、芽的形成。 使用高浓度的植物生长素类似物(如2,4D)可以抑制试管 苗的生长。
•(4)若植物激素b是生长素,在植物组织培养中其主要作 用是_________________________________________,
•则植物激素a的名称是______。
•(5)生产上用试管苗保留植物的优良性状 ,其原因是 __________
人教高中生物选修1 课件 专题3 植物的组织培养技术 专题复习方案3
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章末·考法整合
考法一 植物组织培养的一般过程分析)
过程名称 过程
形成体特点
条件
脱分化 再分化
由外植体形 排列疏松、高度液 ①离体
成愈伤组织 泡化的薄壁细胞团 ②提供营养物
质(有机物、
由愈伤组织 形成幼苗或 胚状体结构
有根、芽或有生根 发芽的能力
无机物) ③提供激素
④提供其他适
宜条件
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③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间: 当某3个样品(重复样)的____________________时,其对 应的ABA浓度为适宜浓度,对应的培养时间是适宜培养 时间。
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解析 本题主要考查植物组织培养相关知识,并以 植物组织培养实验为背景考查实验探究能力。(1)植物组 织培养中外植体常选用茎尖、芽尖,原因是茎尖和芽尖 分裂能力强,易诱导其脱分化,而且一般不含病毒。(2) 从图中比较光照和黑暗条件下PLBs重量曲线可知,光 照条件下PLBs生长优势主要体现在开始生长时间,快 速生长的持续时间及达到生长稳定时重量的大小等方 面。
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答案 (1)新生营养芽细胞分裂能力强,几乎不含病 毒 脱分 化 (2) 生长 起 始较 快 快 速 生长 时 间较 长 PLBs增重的量更多 (3)①灭菌冷却 ②75 ③PLBs重 量和生物碱含量乘积的平均值最大
ห้องสมุดไป่ตู้
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考法二 菊花组织培养和月季花药培养的比较
组成植物茎的细胞为体细胞,花药中的花粉粒为生 殖细胞,分别将二者作为外植体进行组织培养时,应注 意区分。下表是对菊花组织与月季花药培养的比较。
制备MS固体培养 选材→材料消毒 基→外植体消毒 →接种和培养→
→接种→培养→ 筛选和诱导→移
选修一生物技术实践:专题三 植物组织培养课件
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①从花药来看,应当选择 花期早期 的花药; ②从花粉来看,应当选择 单核期 的花粉; ③从花蕾来看,应当选择完全未开放的花蕾。
2、为什么选择合适的花粉发育期是诱导花药培养成功 的重要因素?
不是任何时期的花粉都可以培养,只有某一个时期 对离体刺激敏感。
(1)被子植物的花粉的发育经历的阶段 小孢子母细胞、小孢子四分体时期、单核期 (单核居中期、单核靠边期)和双核期
4
单
小孢子 母细胞
减数 分裂
个 分离 小
个 小
(花粉母细胞)
孢
孢
子子
单
个 小
有丝 分裂
孢
子
小孢子 单核居 单核靠
四分体 中期 边期
时期
单核期
花粉管 细胞核 生殖 细胞 核
双核期
营养 细胞
生 有丝 2个 殖 分裂 精子 细 胞
小孢子母细胞 (2n)
减数分裂
小孢子四分体时期
(n)
2个 精子 (n)
有丝分裂
生殖细胞
(n)
营养细胞 (n)
单核 居中期 (n)
单核 靠边期 (n)
生殖细胞核 (n)
花粉管细胞核 (n)
有丝分裂
双核期
(2)被子植物的花粉发育过程中的四分体时期与减数 分裂过程中的四分体时期是同一阶段吗?
思考: 1、MS培养基的各种营养物质的作用是什么?
同专题2中微生物培养基的配方相比,MS培 养基的配方有哪些明显的不同?
微量、大量元素提供 必需无机盐 蔗糖提供 碳源,维持渗透压 甘氨酸、维生素满足 特殊营养需求 微生物培养基以 有机营养为主 MS培养基则需提供大量 无机营养
选修一 第3章 植物组织培养 知识总结
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生物技术实践第三章植物组织培养第一节菊花的组织培养植物组织培养的基本过程离体的植物组织或细胞,在培养来一段时间以后,会通过细胞分裂,形成愈伤组织,愈伤组织的细胞排列疏松而无规则,是一种高度液泡化的成无定形状态的薄壁细胞。
由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程,称为植物细胞的脱分化,或者叫做去分化。
脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可重新分化成根或芽等器官,这个过程叫做再分化。
再分化形成的试管苗,移栽到地里,可以发育成完整的植物体。
影响植物组织培养的条件[材料]选取生长旺盛嫩枝进行组织培养,容易脱分化和再分化[营养]常用MS培养基[激素]生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。
在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现加强趋势。
[环境条件]pH、温度、光等环境条件不同的植物对各种条件的要求往往不同。
进行菊花的组织培养,一般将pH控制在5.8左右,温度控制在18-22℃,并且每日用日光灯照射12h。
MS固体培养基的成分琼脂、大量元素(N、P、S、K、Ca、Mg)、微量元素(Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co)、有机物(甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖)和植物激素植物激素在植物组织培养过程中的作用愈伤组织的特点愈伤组织的细胞排列疏松而无规则,是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞根尖分生组织和愈伤组织的比较植物组织培养技术的应用实现优良品种的快速繁殖;培育脱毒作物;制作人工种子;培育作物新品种以及细胞产物的工厂化生产等。
外植体的灭菌方法:高压蒸汽灭菌植物组织培养技术和花药离体培养技术的理论依据:植物细胞的全能性第二节月季的花药培养被子植物的雄蕊通常包含花药、花丝两部分。
花药为囊状结构,内部含有许多花粉。
花粉是由花粉母细胞经过减数分裂形成的,因此,花药是单倍体的生殖细胞。
被子植物花粉的发育过程花粉母细胞→小孢子四分体时期→单核期→双核期→花粉粒产生花粉植株的两种途径(1)花粉通过胚状体阶段发育成植物(2)花粉再诱导培养基上先形成愈伤组织,再将其诱导分化成植株。
人教版高中生物选修一 课件植物的组织培养(共16张) (共16张PPT)
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营 养 ② 外 因
pH控制在5.8左右 温度控制在18-22℃
每日用日光灯照射12h
[归纳提升]植物组织培养的原理、条件及结果: (1)原理:植物细胞的全能性。 (2)起点:植物细胞组织或器官。 离体状态 一定的营养物质 (3)条件: 特定的激素浓度及配比 适宜的温度、pH、光照等 (4)终点:形成完整的植株
专题3 植物组织培养技术
课题2:月季的花药培养
一、基础知识
(一)被子植物 (花粉的概念见练习册25页)
四分体 时期
减数 分裂
单核期
有丝 分裂
双核期
思考: 1.被子植物花粉发育过程中的四分体时期 与减数分裂过程中的四分体时期是同一阶 段吗? 2.花粉粒中几个细胞核的基因型相同吗?
菊花的组织培养
JLSSY BYH
菊花采用分株、扦插等无性繁殖方法进行繁殖
但是传统的繁殖方法易受环境影响,繁殖周期长,随
着市场需求的急剧增加,已经不能满足市场日益发展
的需要。
植物组织培养具有增殖效率高、繁殖速度快的 特点,可以用较短的时间和较少的空间生产出大量的 试管苗
植物组织培养的应用:
1、培育无病毒植株,提高作物的产量 2、实现优良品种的快速繁殖,保持遗传性状 的一致 3、可以实现花卉的连续生产,不受开花季节的 限制 4、拯救珍稀濒危物种
a.材料选择什么时期最好,为什么? 花期为初花期,花粉发育在单核期,成功率最高。 b.如何选择单核期细胞?
选择完全未开放的花蕾
c.还有哪些影响花药培养的因素?
亲本植株的生长条件、材料的预处理及接种密度等。
二、实验操作
(一)材料的选取: 染色镜检
1.确定花粉发育时期的最常用的方法
有 醋酸洋红法 。
人教版高中生物选修1课件:专题3 植物的组织培养技术(选修一)
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4个生殖细胞核
有分
8个精子
又称人造种子、合成种子或无性种子, 就是将组织培养所产生的体细胞胚、不定 芽、顶芽、腋芽或小鳞茎等繁殖体,包裹 在能提供营养的胶囊(人造胚乳)里,再 在外面包上一层具有保护功能和防止机械 损伤的外膜(人造种皮),造成一种类似 种子的结构,能在一定的条件下萌发生长, 形成完整植株。
材料的选择: 花期早期时的花药比后期的更容易产生花 粉植株。一般,月季的花药培养时间选在五月 初到五月中旬,即月季的初花期。 选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成 功率的重要因素。一般来说,在单核期,细胞 核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养成功 率最高。 为了挑选到单核期的花药,通常选择完全未 开放的花蕾。
• (一)被子植物的花粉发育
• 被子植物的花的结构是怎样的? • 观察下图,和减数分裂比较,你能指出对应 的时期吗?又有何特点?
花丝
雌蕊:
花药:囊状结构,内有很多花粉粒 花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成 的,因此,花粉是单倍体的生殖细胞。 花粉的发育要经历:四分体时期、单核期、 双核期
注意:
材料的选择、营养成分、激素、一定的外界 因素(温度、空气、无菌环境、适合的PH、适 时光照等)。
MS固体培养基成分及比例
同微生物培养基相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同?
阅读课文,思考以下问题
1. 同微生物培养基相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同? 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同, MS培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植 物生长必须的大量元素和微量元素两大类。 2、你认为组织培养过程中,成功的关键有哪些?这些步骤的 适宜条件是什么? 组织的脱分化及愈伤组织的再分化。 植物组织培养过程中,影响植物细胞脱分化、再分 化的最重要因素是植物激素。
生物选修1 专题3 植物的组织培养技术测试题
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生物选修1 专题3 植物的组织培养技术测试题第一部分:选择题(40分)一、选择题(每小题2分,共40分)1.植物细胞表现出全能性的必要条件是()A.给予适宜的营养和外部条件B.导入其它细胞的基因C.脱离母体后,给予适宜的营养和外部条件D.将成熟筛管细胞核移植到去核的卵细胞内2.以下成为组织培养条件的是( )①C02 ②有机物③生长素④细胞分裂素⑤水⑥矿质元素A. ①③⑤⑥B. ②③⑤⑥C. ②③④⑤⑥D. ①②⑤⑥3.关于操作后出现培养物被污染的情况, 正确的叙述是( )①可立即打开培养瓶, 进行清洗②先将所有被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽锅内进行高压蒸汽灭菌, 然后再打开培养瓶, 进行清洗③按要求操作一定不出现培养物被污染④细菌污染可能是由接种人员未戴口罩、接种时说话等引起的⑤真菌污染可能是植物材料灭菌不当引起的()A. ②③⑤B. ②③④⑤C. ①③④⑤D. ②④⑤4.无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键, 以下说法正确的是( )①由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差, 对无菌操作的要求非常严格②对培养基及器械用高压蒸汽灭菌③对培养材料进行表面灭菌时一方面要考虑药剂的消毒效果, 另一方面还要考虑植物材料的耐受能力④不同药剂、不同植物材料甚至不同器官要区别对待⑤对培养材料可用高压蒸汽灭菌⑥如果不小心导致污染, 将可能造成培养工作的前功尽弃A. ①②③④⑤B. ①②③④C. ①②③④⑥D. ①②③④⑤⑥5.愈伤组织分化过程中, 当培养基中细胞分裂素/ 生长素的比值较低时, 诱导分化的器官是( ) §1A. 根B. 芽C. 叶D. 胚性细胞团6.当先使用细胞分裂素, 后使用生长素时, 实验结果是( ) 。
A. 有利于细胞分裂, 但细胞不分化B. 细胞既分裂又分化C. 分化频率提高D. 有利于细胞分化, 但不分裂7.影响植物组织培养的因素包括( ) 。
①培养基的配制②外植体的选取③激素的运用④消毒⑤温度、pH 、光照A. ①②③④⑤B. ①②③C. ①②③④D. ①②③⑤8.下列描述中,属于改变物种遗传性状的最根本的途径是()A.胚胎移植B.基因导入C.克隆D.组织培养9.在植物组织培养中,切取胡萝卜的外植体时一般选择()A.具有木质部的部分B.具有韧皮部的部分C.具有形成层的部分D.具有髓的部分10.菊花的组织培养一般选择()A.开过花的老枝B.正在开花的枝条C.未开花植株的茎上部新萌生的侧枝D.任何枝条均可11.动物细胞培养与植物组织培养的重要区别是()A.培养基不同B.动物细胞不需要在无菌条件下进行C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培养成植株12.细胞具有全能性的原因是()A.生物体细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能B.生物体的每一个细胞都具有全能性C.生物体的每一个细胞都含有个体发育的全部基因D.生物体的每一个细胞都是由受精卵发育来的13. 一个初级精母细胞在减数分裂的第一次分裂时,有一对同源染色体不发生分离,所形成的次级精母细胞减数分裂的第二次分裂正常;另一个初级精母细胞减数分裂的第一次分裂正常,减数第二次分裂时,在两个次级精母细胞中,有一个次级精母细胞的1条染色体姐妹染色单体没有分开。
高中生物选修一专题:植物组织培养技术
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(2)不同的离体组织和细胞对营养、环境等条 件的要求相对特殊,需配置适宜的培养基 MS培养基主要成分包括:
A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等
B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、 Co等
C、有机物、植物激素
(3)植物激素的影响
①常用的植物激素:生长素、细胞分裂素和 赤霉素
生长素类: 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、 吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、 吲哚丁酸(IBA)
细胞分裂素类: 激动素(KT)、6-苄基嘌呤 ( 6-BA)、玉米素(ZT)
赤霉素类: 赤霉酸(GA3)
②生长素和细胞分裂素作用
植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、 脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在 的情况下,细胞分裂素的作用呈现加强的趋势
单核居中期(n)
有分 单核靠边期(n)
1个花粉管细胞核(n) 1个生殖细胞核(n) 有分
2个精子
注意:
• ①二核花粉粒:成熟的花粉粒中,只含花粉管 细胞核和生殖细胞核。(精子在花粉管中形成)
• ②三核花粉粒:有些植物的花粉,在成熟前, 生殖细胞进行一次有丝分裂,形成两个精子, 这样的花粉在成熟时,含有一个营养核和两个 精子。
生长素 = 细胞分裂素: 促进愈伤组织生长
(4)pH、温度、光照
pH控制在5.8左右,温度控制在18-22。C,每日 用日光灯照射12h
3、植物组织培养过程:
植物细胞培养
细胞分裂
离
素>生长素
体 组
脱分化
愈 伤 再分化
芽
织 或 细
细胞生长素
素<生长素
高中生物选修一专题3植物的组织培养
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课题1 菊花的组织培养编号:0103—01学习目标1.说明植物组织培养的基本原理。
2.学习植物组织培养的基本技术。
3.进行菊花或其他植物的组织培养。
学习重点与难点重点:1.植物组织培养的相关概念和过程2.影响植物组织培养的因素3.植物组织培养过程中使用的无菌技术。
难点:1.影响植物组织培养的因素。
2.植物组织培养过程中使用的无菌技术。
自主探究一.植物组织培养的相关概念和基本过程1.植物组织培养的相关概念(1)细胞分化:植物的个体发育过程中,细胞在__________、__________和__________上都会出现稳定性的差异,形成这些差异的过程就叫做细胞分化。
细胞分化是基因__________的结果。
(2)细胞的全能性:__________的植物细胞仍然具有发育成为__________的潜能。
细胞全能性是组织培养的基本原理。
(3)愈伤组织:由离体的植物器官、组织或细胞在一定的培养条件下经过__________过程形成的组织,就叫愈伤组织,愈伤组织的细胞排列疏松而无规则,是一种__________的呈无定形状态的__________。
(4)脱分化:由__________的植物组织或细胞产生__________的过程,称为脱分化,又叫去分化。
(5)再分化:脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成__________,这个过程叫做再分化。
(6)外植体:用于离体培养的植物器官或组织片段。
2.植物组织培养的基本过程人为使用植物激素控制移植——→试管苗———→完整的植物体二.影响植物组织培养的因素1.内部因素:不同的植物组织,培养的难易程度差别很大。
同种植物材料,__________ ,__________ 等也会影响实验结果。
菊花的组织培养,一般选择__________的茎上部新萌生的侧枝。
2.外部因素:(1)营养条件常用的是__________ 培养基,其主要成分包括:__________,如_____________________________;__________ ,如______________________________ ;__________ 等。
高中生物选修一资源参考1-3植物组织培养技术

第三节植物组织培养技术教学建议植物组织培养的基础知识对于学生来说还是有一定难度的。
教师最好在课前准备已脱分化的愈伤组织和再分化的丛芽等材料,让学生在课堂上观察,以增进学生的感性认识,帮助学生理解植物组织培养的基本原理。
关于培养基,可以让学生通过与微生物培养基配方的对比来认识用于植物组织培养的培养基的特点。
关于植物激素的使用,可以引导学生回顾高中必修教材《稳态与环境》中细胞分裂素和生长素的作用。
本课题耗时较长,需要提前做好计划。
有关培养基母液的配制、培养基高压灭菌、组培苗的培养以及栽培管理等工作,可在课下进行。
如果课时紧张,外植体的消毒和接种也可以在课下进行。
课上学生只需做一些关键步骤的操作,如分化转瓶、丛芽继代、生根转瓶等。
建议第一课时完成基础知识教学,学习操作方法并使用各种母液配制培养基。
第二课时学习外植体接种或继代转瓶。
此后学生可以利用课下时间做观察记录。
第三课时做生根组培苗的移栽。
大田栽培或盆栽管理工作可以在课外组织同学来做。
参考资料1.无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键植物组织培养不同于扦插、分根、叶插等常规无性繁殖。
由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,所以对培养条件的要求较高,对无菌操作的要求非常严格。
如果不小心引起污染,将可能造成培养工作的前功尽弃。
无菌技术包括培养基消毒灭菌和植物材料(外植体)的消毒灭菌。
对培养材料进行表面灭菌时,一方面要考虑药剂的消毒效果;另一方面还要考虑植物材料的耐受能力。
不同药剂、不同植物材料,甚至不同器官要区别对待。
建议教师课前积极摸索成功经验,或先组织部分学生做外植体的接种,以培养实验骨干。
课上让骨干学生介绍经验,帮助大部分同学完成任务。
有条件的学校还可以将植物组织培养的全部过程拍摄成录像,供其他学生参考。
2.妥善处理被污染的培养物即使对于有经验的操作人员,操作后出现培养物被污染的情况也常有。
一般情况下,细菌污染可能是由接种人员造成的,如未戴口罩,接种时说话,或手及器械消毒不严等。
学案设计-选修一 第四章 第1节 植物的组织培养(配北师大版)
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第1节植物的组织培养一、学习目标1.熟悉植物组织培养的基本过程。
2.理解细胞分化的概念及离体植物细胞的脱分化和再分化。
二、重难点分析植物组织培养过程中使用的无菌技术。
三、学习过程(一)预习导学知识点一:胡萝卜的组织培养1.植物组织培养的原理植物体根、茎、叶的细胞一般都具有___________性,在一定的营养和___________条件下,可以___________形成愈伤组织。
这些愈伤组织生长一段时间后,转接到含有不同___________成分的培养基上,就可以诱导其___________生成___________或丛芽,进而发育成完整的植株。
植物组织培养的全过程反映了植物细胞的___________性,证明分化的植物细胞仍具有形成完整植株所需要的___________。
2.方法步骤(1)制备培养基:以___________为基本培养基,设计并配制植物组织培养所需要的培养基:诱导培养基、继代培养基、分化培养基、生根培养基。
(2)灭菌:将上面的各培养基贴好标签并进行___________。
(3)组织培养:材料准备→胡萝卜切段消毒→切块→接种→培养→转接、分化培养。
答案:1.全能激素脱分化激素再分化胚状体全能全部基因2.MS培养基灭菌知识点二:植物组织培养1.定义植物组织培养就是在___________和人工控制条件下,将___________的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的___________上,给予适宜的培养条件,最终诱导产生___________、___________或___________的技术。
2.基本过程制备MS固体培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培3.植物组织培养技术的意义植物组织培养技术不仅可以保持优良品种的___________,还可以高效快速地实现种苗的大量繁殖,因此植物组织培养技术也叫植物的___________技术,或称为___________技术。
4.植物组织培养技术的应用在农业上可用于作物___________培育、制备___________和单倍体育种等;工业上可以进行一些___________的工厂化生产。
浙科选修一植物组织培养
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制备MS固体 培养基
外植体消毒
接种
生芽
从状苗
生根
定植
第6页/共11页
移栽锻炼
思考
1、高等植物是光能自养型生物,为什么在植物组 织培养过程中还需要提供有机物培养基?
此时的组织或细胞为离体的,即细胞所生活的环境 为液体有机物营养环境,而不是能体现其整个植物 体的光能自养。
第8页/共11页
谢谢您的观看!
第11页/共11页
2、培养过程中为什么需要进行光照 在培养过程中,是脱分化、再分化的过程,随着芽 和根的形成,就具有了自养的能力,是由细胞到一 个个体的演变过程。
第7页/共11页
3、在整个操作过程中,是如何来实现无菌环境的? 1、培养基的灭菌(高压蒸汽灭菌) 2、外植体的消毒(酒精、次氯化钠 3、接种的无菌操作(酒精、酒精灯) 4、无菌箱中的培养; 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时 间。
源)、激素(生长素、细胞分裂素等)、琼脂
(2)类型: MS培养基
发芽培养基 书P60 生根培养基
3、不同植物激素使用顺序和使用量 4、环境条件 适宜的PH、温度和光照等
第4页/共11页
注意: ①整个操作及培养过程中,都需要一个无菌环境
②脱分化:一般遮光处理 再分化:需要适宜光照
第5页/共11页
五、实验步骤 书P60
三、植物组织培养基本过程
液体悬浮培养 胚状体
离体器官、 组织或细胞
脱分化 愈伤组织
再分化 根、芽
细胞排列松散、无规则的薄壁细胞,分裂能力强
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植物体
四、植物组织培养的条件
1、离体(外植体)
外植体的选择: 嫩枝或新生芽 (细胞分化程度低,
高中生物选修一植物组织培养技术
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48
大量元素
•培养基的大量元素使用量一般在每升几十至几千 毫克。大量元素包括N, P, K, Ca, Mg, S。 培养基中加入量最多的是N,N一般以硝酸盐或氨 盐,或者两者结合的盐提供
38
整个接种操作应在近火焰处进行,且动作要 迅速
正确
错误
39
防止操作带来的污染 接种过程中尽可能达到时不得用手接触瓶盖内壁或瓶口
正确
错误
41
瓶盖朝上放,接种完毕后立即盖好瓶口
正确
错误
42
接种完一瓶用火烧用具以防止交叉污染产生
43
种子和分生组织:培养时通常将其贴放在培养基表 面,而不是插到培养基内部,以免供氧不足
21
(二)、灭菌的方法
1、物理方法:干热、湿热、过滤(0.25微 米)、紫外灯、超声波等。 2、化学方法:使用灭菌剂或抗菌素,如酒 精、次氯酸钠、升汞、漂白粉、高锰酸钾、 双氧水、福尔马林等
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各种灭菌方法及其使用范围
干热灭菌 湿热灭菌 熏蒸灭菌 过滤灭菌 药剂灭菌 烧灼灭菌 辐射灭菌
玻璃器皿、器械 培养基、蒸馏水、器械、棉塞等 接种室、培养室 液体培养基、蒸馏水 培养材料 器械、瓶口、棉塞、包头纸 接种室、培养间
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(3)过滤灭菌
培养基的灭菌一般用高压高温处理,但如果培 养基中某些成分遇到高温分解(如某些生长调节 剂GA3、玉米素等),就需要过滤灭菌。另外酶、 血清等也需要过滤灭菌
灭菌方法:将生长调节剂或酶配成一定浓度, 用注射器注入微孔滤膜虑,滤膜孔径0.22~0.45 微米。制培养基时,现将培养基高压灭菌,待降 至50℃左右时,加入适量的激素,然后分装。
选修1第一章第3节植物组织培养技术
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二、激素与愈伤组织的再分化
结论:两种激素的用量比例影响植物细胞的发育 方向。
生长素≈细胞分裂素 促进愈伤组织生长
生长素>细胞分裂素 有利生根的形成
生长素<细胞分裂素 有利于芽的形成
拓展
使用顺序 先生长素, 后细胞分裂素 实验结果
有利于细胞分裂但不分化 细胞既分裂也分化
分化频率提高
先细胞分裂素, 后生长素 同时使用
培育出的三倍体无子西瓜,具有无子、 含糖高、口感好等特点。 但因其不结种子, 每年必须用四倍体和 二倍体西瓜杂交培育 种子,不仅增加了生 产成本,也给无籽西 瓜的普及带来困难。
一、植物组织培养
为什么植物的一个细胞就 可以培育出完整的植株呢?
2、依据 受精卵的 定义:植物体的每个体细胞都携带有来自 完整基因组,并具有发育成完整植株的潜在能力。
1、概念: 在无菌和人工控制条件下,诱导离体的植 物器官、组织等在适宜的培养条件下发育成 完整植株的技术。
植物细胞的全能性
3、植物组织培养的流程:
切取 形成层
炼苗、定植
无菌 接种 转入生根 培养基
脱分化
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
诱导形成愈伤 组织
再分化
试管苗的形成
3、植物组织培养的流程:
脱分化 愈伤组织 再分化 根、芽 移栽 或胚状体
植物体
外植体
脱分化:高度分化的植物组织或细胞产生愈伤 组织的过程。 愈伤组织:高度液泡化的呈无定形状态的薄壁 细胞(细胞排列疏松而无规则) 再分化:愈伤组织分化出芽、根等器官的过程。
4、植物组织培养的条件:
①离体 ②营养:矿质元素和有机物(蔗糖)等
③激素:细胞分裂素和生长素 ④其他外界条件:温度、PH、光照、无菌等
浙科版选修一 植物组织培养 名师制作优质课件(11张)
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组织培养的概念: 外植体
超净台 取一部分植物组织,如叶、芽、根、花 瓣或花粉等,在无菌的条件下接种三 角瓶中的琼脂培养基上,给予一定的温 度和光照,使之产生愈伤组织,发芽生 根。
植物组织培养的原理是什么?
植物细胞具有全能性,即植物体的每个 生活细胞都具有遗传上的全能性,因而 都具有发育成完整植株的潜能。
2、生芽培养
生芽培养基中,放入2-3段切段,茎部插入培 养基,盖上封口膜。日光灯下保持18~25℃的 温度培养,每天光照不少于14.5h
3、生根培养
2~3周后,将丛状苗在无菌条件下转入生根培养基 中,在上述条件下继续培养。
4、适应锻炼
将苗转移至草炭土或蛭石中,用玻璃罩或 塑料布保持80%以上的湿度,2~3天后打 开逐渐减低湿度进行锻炼,直到将罩全部 打开处于自然湿度下为止。
植物组织培养的基本过程:
离体的植物 脱分化 器官、组织、 细胞
愈 再分化 伤 组 织
根
芽
植 物 体
植物组织培养条件 含有全部营养成分的培养基、一定的 温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时 光照等。
细胞分裂素/生长素
诱导芽的生成 愈伤组织继续 大致相等 生长不分化 低 诱导根的生成
高
实验过程中使用的生长素是人工合成的萘乙酸 (NAA),需用少量0.1mol/L氢氧化钠溶液溶解,细 胞分裂素是人工合成的苄基腺嘌呤(BA),需用少 量0.1mol/L盐酸溶解。
植物中存在的天然激素都有相应的使之分解的酶, 这样天然激素在植物体内作用和存在的时间就较短, 而人工合成激素在植物中没有相应于它的酶,所以 作用和存在的时间长,作用效果明显。
所需的培养基类型:
MS培养基:由大量元素、微量元素和有机成分组成。 蔗糖:提供碳源、维持渗透压
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选修一植物组织培养
1.紫草素是紫草细胞的代谢产物,可作为生产治疗烫伤药物的原料。
用植物组织培养技术可以在生物反应器中通过培养紫草细胞生产紫草素。
下图记录了生物反应器中紫草细胞产量、紫草素产量随培养时间发生的变化。
(1)在生产前,需先加入紫草细胞作为反应器中的“种子”。
这些“种子”是应用组织培养技术,将紫草叶肉细胞经过______________而获得的。
这项技术的理论基础是______________。
(2)从图中可以看出:反应器中紫草细胞的生长呈现________________规律;影响紫草素产量的因素是________和________。
(3)在培养过程中,要不断通入无菌空气并进行搅拌的目的是________和________。
解析:因为紫草素是从大量培养的紫草愈伤组织细胞中提取的,所以生产前必须要加入离体的紫草细胞进行脱分化培养,以获得大量的紫草愈伤组织细胞,这一过程利用了植物细胞的全能性。
从图中可以看出反应器中紫草细胞的数量呈“S”型增长,原因是开始生长较慢,要经过适应期,然后进入生长较快的对数期,随细胞数目的增多,食物、空间等生活条件成为限制因素,此时进入稳定期,细胞的数目相对稳定。
在这个时期紫草细胞要产生大量的次级代谢产物——紫草素,所以说紫草素产量的高低与紫草愈伤组织细胞的数目和生长期有关。
答案:(1)脱分化(或脱分化形成愈伤组织) 细胞的全能性(2)“S”型增长细胞数量细胞所处的生长期(3)保证氧气供应充足使细胞与培养液充分接触2.如图所示,图Ⅰ为植物组织培养流程图,图Ⅱ为植物组织培养过程的部分示意图,请据图回答:
(1)植物组织培养依据的原理是_
_______________________________________________________________________。
(2)图Ⅰ中外植体是指从植物__________分离出来的。
(3)图Ⅰ中的②和图ⅡB 中培养基上的培养物都是由无特定形态与功能的细胞组成,称为________。
(4)图Ⅱ中D 培养物已经形成幼体。
请根据植物组织培养过程对图Ⅱ重新排序:________________________________________________________________________。
答案:(1)植物细胞的全能性
(2)器官、组织、细胞、原生质体
(3)愈伤组织 (4)B→A→D→C
3.现有高秆抗病(DDTT)和矮秆不抗病(ddtt)的两个小麦品种,这两对性状是完全显性。
(1)现要用最短时间培育出矮秆抗病植株纯合子,最好采用________方法,其主要方法是________。
(2)育种过程首先将高秆抗病纯合子与矮秆不抗病纯合子杂交得F 1,其基因型是________。
(3)将F 1种下去,取F 1的花药进行离体培养,为了提高花药诱导成功率,选择________花药作实验材料。
对所选择的花药一般要通过进一步的镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。
确定花粉发育期最常用的方法是________。
对不易着色的花粉细胞核需用________法,这种方法能将花粉细胞核染成________色。
(4)F 1花粉基因型理论上有4种,分别是________。
若这些花粉都能长成植物体,这些植物体的基因型是________,这些植物体称________,在花粉发育成植物体的过程中细胞分裂方式是________。
(5)假如每种基因型的花粉细胞都有机会发育成植物体,如何对这些幼苗进行筛选,请陈述。
________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________
(6)对筛选出的矮秆抗病幼苗用________处理即可得到所需要的纯合子品种。
解析:单倍体育种可以大大缩短育种年限,其育种过程可以简写为:DDTT×ddtt――→
杂交F 1(DdTt)――→减数分裂配子(DT 、Dt 、dT 、dt)――→花药离体培养单倍体(DT 、Dt 、dT 、dt)――→选择dT(矮秆抗病)――→秋水仙素诱导
ddTT(纯合子)。
在“选择”过程中,对于高矮性状可以通过目测筛选,对于是否抗病,则一般选择用病原体侵染的方法进行检测。
答案:(1)单倍体育种 花药离体培养 (2)DdTt
(3)花蕾早期的 醋酸洋红法 焙花青—铬矾 蓝黑
(4)DT 、Dt 、dT 、dt DT 、Dt 、dT 、dt 单倍体 有丝分裂
(5)在幼苗期用病原体进行感染,叶片出现病斑的即为不抗病品种,淘汰掉,剩余为抗病品种。
这些小幼苗长大后对高矮进行目测筛选,淘汰掉高秆植株,剩下的矮秆植株即为矮秆抗病个体。
(6)一定浓度的秋水仙素溶液
4.如图表示水稻(体细胞中有24条染色体)的花药通过无菌操作接入试管后,在一定条件下形成试管苗的培
养过程,已知水稻的基
因型为AaBb。
(1)愈伤组织是花粉不断分裂后形成的不规则的细胞团,在愈伤组织形成过程中,必须从培养基中获得________、________和小分子有机物等营养物质。
为什么在植物的组织培养过程中强调一系列的消毒、灭菌及无菌操作?____________________。
(2)要促进花粉细胞分裂和生长,培养基中应添加________和________两类激素。
(3)愈伤组织再分化是指愈伤组织形成芽和根,再发育成具根、茎、叶的植物体。
这一过程必须给予光照,其原因是________利用光能制造有机物,供试管苗生长发育。
(4)试管苗的细胞中含有________条脱氧核苷酸链。
(5)从细胞工程角度看,这种育种技术叫________。
这种育种技术的原理是________。
解析:植物组织培养的脱分化及再分化出根、芽初期阶段,同化类型为异养,需要从培养基中获得各种养分,而再分化后期需光照使试管苗形成叶绿素,进行光合作用,这时同化类型已为自养。
答案:(1)水矿质元素外植体体积小,抗逆性差,易感染微生物腐烂(2)生长素细胞分裂素(3)叶绿体(4)24 (5)植物的组织培养植物细胞的全能性
5.请回答下列有关植物组织培养过程中的有关问题:
(1)植物组织培养最常用的培养基是________,制培养基时加琼脂的目的是
________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
培养基中对外植体的生长发育起有关键作用的物质是
________________________________________________________________________。
(2)愈伤组织分化成根和芽,再由芽发育成叶和茎,这一过程称为________。
此过程中每天必须给予愈伤组织一定时间的光照,而且还需要控制好________等条件。
(3)无菌条件对组织培养的成功至关重要,在组织培养过程中,需要采取哪些措施以确保无菌条件?
________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
(4)植物组织培养技术除了用于植物的快速繁殖之外,请再举出一例其在生产、科研等方面的应用:
________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
答案:(1)MS培养基使培养基呈固体状态植物激素(或:生长素、细胞分裂素等) (2)再分化温度、pH (3)培养基灭菌、外植体消毒、无菌接种等(4)培养脱毒苗、单倍体育种等(任答其中一种既可,其它合理答案也可)。