核酸扩增检测实验室设计及工作流

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PCR实验室工作导则

医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则一、临床基因扩增检验实验室的设计（一）临床基因扩增检验实验室区域设计原则。

原则上临床基因扩增检验实验室应当设置以下区域：试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区。

这 4 个区域在物理空间上必须是完全相互独立的，各区域无论是在空间上还是在使用中，应当始终处于完全的分隔状态，不能有空气的直接相通。

根据使用仪器的功能，区域可适当合并。

例如使用实时荧光 PCR 仪，扩增区、扩增产物分析区可合并；采用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪，则标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并。

各区的功能是：1.试剂储存和准备区：贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合液的准备，以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。

2.标本制备区：核酸（RNA、DNA）提取、贮存及其加入至扩增反应管。

对于涉及临床样本的操作，应符合生物安全二级实验室防护设备、个人防护和操作规范的要求。

3.扩增区：cDNA 合成、DNA 扩增及检测。

4.扩增产物分析区：扩增片段的进一步分析测定，如杂交、酶切电泳、变性高效液相分析、测序等。

（二）临床基因扩增检验实验室的空气流向。

临床基因扩增检验实验室的空气流向可按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区进行，防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。

可按照从试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区方向空气压力递减的方式进行。

可通过安装排风扇、负压排风装置或其他可行的方式实现。

（三）工作区域仪器设备配置标准。

1.试剂储存和准备区。

（1）2～8℃和-20℃以下冰箱。

（2）混匀器。

（3）微量加样器（覆盖 0.2-1000µl）。

（4）可移动紫外灯（近工作台面）。

（5）消耗品：一次性手套、耐高压处理的离心管和加样器吸头。

（6）专用工作服和工作鞋(套)。

（7）专用办公用品。

2.标本制备区。

（1）2-8℃冰箱、-20℃或-80℃冰箱。

（2）高速离心机。

（3）混匀器。

核酸检测实验室建设方案书

核酸检测实验室建设方案书一、平面布局（一）实验室功能分区普通核酸检测PCR实验室依据所使用的方法可分为试剂准备、标本制备、核酸扩增、产物分析等四个区域。

全自动定量PCR实验室通常设置三个工作区，即试剂准备区、标本制备区、核酸扩增和产物分析区，普通PCR 实验室后两个区合并。

一体化自动化分析PCR 实验室原则上设置两个工作区，即试剂准备区、自动检测区，普通PCR实验室后三个区合并。

各个区可组合布置，也可分散布置。

（二）实验室平面布局实验室应在建筑物中自成隔离区，应有出入控制。

试剂准备区、标本制备区和核酸扩增及产物分析区等四个区域在物理空间上必须是完全相互独立的。

可以分散布置。

为避免交叉污染，进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行，即只能从试剂准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。

不能将工作服带出。

每个工作区域必须有明确的标记，避免不同工作区域内设备、物品混用。

各实验区之间的试剂及样品传递应通过传递窗进行。

整体划分为∶PCR区域、独立缓冲间，及辅助房间区域，缓冲间可兼做防护服更换间。

当缓冲间的门设置互锁时，应在互锁门的附近设置紧急手动解除互锁开关。

保持合理梯度，保证气流从辅助房间流向核心区。

可降低扩增区内的气压以避免气溶胶从本区漏出。

（三）人流、物流流向人流∶工作人员→一更→二更→缓冲间→洁净走廊→缓冲→核心试验区域洁物∶原料→入口→样品接收→传递窗→洁净走廊→缓冲→核心试验区域污物∶污物→洁净走廊→传递窗→高压灭菌→传递窗→外部进入各个区域必须严格按照单一方向进行，不同的工作区域使用不同的工作服（例如不同的颜色）。

工作人员离开时，不得将工作服带出。

这种人员的单向流动可以降低因人员的流动带来的交叉污染风险。

所有的物品进入实验区必须经过双扉互锁传递窗，利用传递窗消毒后才可进入，实验室内所有物品也必须经过传递窗才可以传递到实验室以外的清洁公共区。

这种物品有组织的单向流动可以降低物品的差错和混淆的风险。

血站核酸扩增检测实验室工作规范

血站核酸扩增检测实验室工作规范1血站核酸扩增检测实验室工作规范为使核酸扩增检测技术有效地应用于血液筛查，保证血液安全，特制定本规范。

一、血站核酸扩增检测实验室的规范化设置及其管理血站核酸扩增检测实验室的规范化设置详见《临床基因扩增检验实验室管理办法》（卫医发[2010](待定)号文）附件《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》。

为避免污染，必须严格遵循《临床基因扩增检验实验室设置标准》设置血站核酸扩增检测实验室。

血站核酸扩增检测实验室应根据仪器设备特点设置工作区域，各区域仪器设备应固定不可移至其它区域。

各区域都必须有明确的标记，以避免设备实验器材如加样器、试管或加样器吸头架、试剂等从其各自的区域内移出从而造成不同的工作区域间设备和实验器材发生混淆。

进入各个工作区域必须严格遵循单一方向顺序，即只能从试剂贮存和准备区、标本处理（混样）、核酸纯化、扩增检测区，避免发生交叉污染。

在不同的工作区域应使用不同颜色或有明显区别标志的工作服，以便于鉴别。

此外，当工作者离开工作区时，不得将各区特定的工作服带出。

清洁方法不当也是污染发生的一个主要原因，因此实验室的清洁应按试剂贮存和准备区至扩增检测区的方向进行。

不同的实验区域应有其各自的清洁用具以防止交叉污染。

（一）试剂贮存和准备区下述操作在该区进行：贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。

贮存试剂和用于标本制备的材料应直接运送至试剂贮存和准备区，不能经过产物分析区。

在打开含有反应混合液的离心管或试管前，应将其快速离心数秒。

试剂原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的贮存试剂。

当贮存试剂溶液经检查可用后，应将其分装贮存备用，避免由于经常打开反应管吸液而造成污染。

含反应混合液的离心管或试管在冰冻前都应快速离心数秒。

大多数用于扩增的试剂都应冰冻贮存。

为避免因单次反应取液而频繁的冻融主贮存试剂，应分装冰冻贮存试剂溶液。

贮存试剂的分装体积根据通常在实验室内一次测定所需的扩增反应数来决定。

核酸检测实验室建立与应用

合格标本发布结果
2022/1/24
待查标本复检
合格标本
不合格标本
单人份拆分反应性标本
淘汰不合格标本
9
检测流程(2):常规筛查合格单人份标本检测流程
2022/1/24
10
检测流程(3):平行检测流程
常
规
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
检
样测
本
清
点交
核酸单
接份
检
测
不合格标本合格标本
阴性标本
反应性标本
2022/1/24
阳性或可疑结果淘汰
2022/1/24
27
深圳血液中心核酸检测概况
对161228人份酶免疫检测结果阴性标本进行核酸检测，共检出33例不相同HBV DNA阳性献血者，总比率为1：4885。
检出anti-HCV阴性、 HCV RNA阳性1例，定量结果为1.2×105IU/ml。3个月后追踪结果发现anti-HCV（+），ALT由正常升高至700U/L。
培训:①无”核酸”的概念形成, ②防污染的概念③良好工作习惯的培养. ④报告的正确发放.
后备人员的培养.
2022/1/24
3
样本离心交接区
试剂准备区
核
酸
实
标本制备区
验
场
地扩增区及扩增产物分析区
报告发放区
2022/1/24
4
方法选择: TMA与PCR
TMA
扩增原理模拟自然 DNA 转录成 mRNA 的过程
HBsAg 检测(+).
2022/1/24
37
2022/1/24
38
1.Pooling by STAR processor 2.Virus enrichment by centrfugation

核酸检测实验室装修关键要点和要求

RT-PCR是检测新型冠状病毒核酸最广泛、最准确的筛选和确认方法。

大规模的核酸检测将不可避免地引起相关机构和单位重视建立标准化的临床PCR实验室。

如何避免污染是临床基因扩增实验室装修设计的关键问题，因此实验室的布局、空调通风系统设计、风量控制等都是围绕这一核心问题展开的。

核酸检测实验室装修要求：核酸检测实验室有设计理念、装修要求、净化空调系统、通风、自控、工艺设备等几个关键点。

材质：隔墙及吊顶——净化彩钢板、地面——同质透芯PVC地板、净化实验室专用门、观察窗要求：1.墙面：光洁、不产尘积尘、耐腐蚀，易清洁消毒、无缝隙。

2.地面：防静电、耐腐蚀、无缝隙、无渗漏。

3.阴阳角：均用圆弧角密封处理。

4.门：必须设置自动互锁(机械或电子)。

净化空调、通风系统、自控系统要求：1.避免交叉污染，采用全新风空调系统。

2.样品制备区严格按照BSL-2设计施工。

3.排风系统全部按照要求采用高效过滤器净化。

4.气流组织：采用上送下排形式。

5.压力梯度控制通过微压差计及精密自控系统控制。

6.实验室入口处显示房间内各项指标参数，并设置偏离报警。

工艺设备要求：1.实验台下部均留空，无死角。

2.全部采用不锈钢304制作。

3.样品制备区设置洗眼装置，必要时应有应急喷淋装置。

4.非接触式操作理念(感应式水龙头、感应式自动门、互锁传递窗等)。

核酸检测实验室装修关键点：1.平面布局：不论是组合式还是分散式布置的PCR实验室，各功能房间均宜设置独立缓冲间2.区域空气流向：为避免交叉污染，PCR实验室空气流向必须严格遵循单一方向进行，即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。

3.通风空调：为避免交叉污染，各功能用房内空气不能掺混。

混合式PCR实验室应采用新风直流空调系统，当采用新风系统有困难时，各区域的空气只能在自己的房间内循环。

4.生物安全：按照新型冠状病毒实验室生物安全指南（第二版）的规定，2019-nCoV病原体暂按照第二类病原微生物进行管理，则样本植被区宜为负压或加强型P2实验室，核酸操作应在生物安全柜内进行。

PCR实验检测标准操作规范

PCR检测实验室操作规范一、PCR 实验室的设置及管理1．目的：建立实验室的合理设置和科学管理，防止实验污染，保证检测结果的可靠性。

2．适用范围：本程序适用于分子诊断室的设置、工作流程和日常管理等。

3．负责人：4．细则：4．1流感实验室为急传所的专业实验室，从事临床标本的基因扩增检测及相关科研工作等。

4．2 本实验室采用实时荧光定量（定性）PCR 技术作为病毒基因诊断的主要手段，实验室分为三个区：试剂准备区（第一区）、标本处理区（第二区）、扩增分析区（第三区）。

每一工作区配备专用的设备、仪器、辅助设施、耗材、清洁用品、办公用品、专用工作服，并有明显的区分标识。

标本的接收则在检验科标本接收处进行。

4．3 各工作区专用的仪器设备、办公用品、工作服、实验耗材和清洁用具等，不可混用。

4．4 各工作区配置、功能和内务管理见各相关SOP 文件。

4．5 严格遵守从“试剂准备区→标本处理区→扩增分析区”的单一流向制度，不得逆向进入前一工作区。

4．6 非本实验室工作人员，未经许可不得入内；进修、实习或其他科室人员因科研活动需要，进入实验区域（试剂准备区、标本处理区、扩增分析区）需首先熟悉本程序的各项规定并严格遵守执行，在本实验室人员监督指导下进行。

4．7 实验完毕后做好清洁消毒工作。

二、PCR 实验室工作制度1．目的：保持良好的工作环境，以确保检测结果的可靠性，防止交叉污染，防止差错、事故及纠纷的发生。

2．适用范围：所有本实验室人员。

3．负责人：4．细则：4．1 本实验室进行临床基因扩增检测及相关实验工作，不得进行其它实验操作。

4．2 各区的用品不得混用。

4．3 在各区的实验操作过程中，操作者必须戴手套和帽子，严格按照操作规程。

4．4 试剂准备区只能进行试剂的贮存及配制等相关操作（见相关SOP 文件）。

4．5 标本处理区只能进行临床标本的保存，核酸提取、保存及其加入至扩增反应管和测定RNA 时cDNA 的合成（见相关SOP 文件）。

PCR实验室(新冠核酸检测实验室)SOP文件

标本前处理(核酸纯化)标准操作程序…………………………………………………………………….16
新型冠状病毒核酸检测标准操作程序……………………………………………………………………18
人乳头瘤病毒分型检测（基因芯片法）标准操作规程…………………………………………………24
核酸扩增及产物分析检测的操作程序……………………………………………………………………30
多恒MINI10K迷你离心机操作流程及维护保养程序………………………………………………….74
多恒MIX-2500微型旋涡混合/匀器操作流程及维护保养程序………………………………………...76
多恒2-96板式离心机操作流程及维护保养程序………………………………………………………..78
威高MSL.NC80高压灭菌器操作流程及维护保养程序………………………………………………...80
多恒DHG-9053BS-III电热恒温鼓风干燥箱操作流程及维护保养程序……………………………….54
多恒HH-100干式恒温器（金属浴）操作流程、校准及维护保养程序……………………………….56
多恒TD4Z低速离心机操作流程及维护保养程序……………………………………………………….60
多恒DH18R台式高速冷冻离心机操作流程及维护保养程序…………………………………………..66
3.2.7使用带有本室专用标志的加样器以及经过消毒处理的离心管和带滤芯的一次性吸头。
3.2.8使用过的离心管、吸头须置于盛有2000mg/L有效氯消毒液的废物盒中。
3.2.9污染的处理：实验中若在操作台面上发生液体外泄，应立即用浸有2000mg/L有效氯溶液的滤纸覆盖发生污染处半小时，然后用酒精擦洗，并开启紫外灯消毒。
3.1.5实验中所使用的离心管、吸头等需经高压灭菌处理，应在消毒有效期内使用。

核酸扩增检测实验室设计及工作流程

核酸扩增检测实验室设计及工作流程一、核酸扩增检测实验室设计1. 实验室空间布局设计核酸扩增检测实验室空间布局应根据实验室操作流程设计，尽量使实验室布局合理、流畅。

一般实验室需要分为准备区、处理区、分析区和储存区四个区域。

（1）准备区：放置进出实验室所需的物品、试剂、耗材等。

（2）处理区：扩增、提取、检测等样品处理操作区域。

该区域需配置相应的消毒设备和抽风设备，并考虑操作人员的人流量，确保操作空间充足。

（3）分析区：PCR扩增、电泳分析等实验操作区域。

该区域需要保持相对干净和静电消除，重要仪器和设备应单独放置。

（4）储存区：将操作过的样品、耗材和试剂分类存放，且应配置低温、恒温、干燥等设备，以确保长期保存。

2. 实验室环境要求核酸扩增检测实验室的环境应符合以下要求：（1）室内温度：18~28℃。

（2）相对湿度：40%~60%。

（3）装修材料：实验室室内装修材料应为易清洁、防腐蚀材料。

（4）光照：实验室应配备恒光可调光源；（5）洁净度：除配置洁净工作台外，实验室墙、地面和物品表面均需定期消毒。

3. 实验室设备及器具要求（1）洁净工作台：核酸扩增实验涉及到高度灵敏的样品处理和PCR扩增，容易引入异物和污染物，必须配置洁净工作台。

（2）PCR仪：PCR仪是核酸扩增检测的核心仪器，具有高温度精度和均匀性，能精确控制温度变化，使PCR反应体系在恒定的温度下进行扩增。

（3）显微镜：核酸扩增检测的结果常常需要用到显微镜，观察PCR扩增产物的大小、形态、颜色等。

（4）离心机：用于离心样品沉淀，制备溶液和样品混合等。

（5）电泳仪：电泳仪用于检测PCR扩增产物，并可用于结合染色方法，对扩增产物进行定性、定量和分析。

二、核酸扩增检测实验室工作流程1. 样品获取和处理根据样品种类，样品获取后需进行不同处理。

如环境样品需要加入缓冲液，以及粉尘、沙尘、胶片、坦克等样品需要分解。

2. DNA/RNA提取将样品经过离心后，取沉淀样品，加入DNA/RNA提取试剂，进行蛋白酶处理和洗脱DNA/RNA等处理步骤，以提取出样本中的DNA/RNA。

1-核酸扩增荧光检测实验室设置和管理

核酸扩增荧光检测实验室设置和管理1．目的：依照实验室管理规范实施全面质量管理，保证检验质量。

2．适用范围：适用于所有开展核酸扩增荧光检测项目的实验室及相关人员。

3．负责人：由实验室制定程序性文件，由专业技术人员负责执行，实验室主管负责监督。

4. 内容4.1 实验室分区设置4.1.1核酸扩增荧光检测实验室设置为试剂准备区、标本制备区、扩增区和产物分析区。

前三个区独立设置，各有一个缓冲间，用于更换工作服、鞋套及维持空气流向。

产物分析区分开设置，实验室布局见附图01、02。

进入各个工作区域工作时,必须严格遵守单一方向顺序,即从第一区试剂准备区→第二区标本制备区→第三区扩增区→产物分析区。

各区门前有醒目标志，一、二区通过排风装置保持正压，三、四区通过抽风装置保持负压。

4.1.2各室的实验物品（含移液器、试管架、吸头盒、记录本、笔等），不得混用，须贴上不同标签予以区别。

4.1.3各区配有不同颜色工作服，一区为粉红色，二区为蓝色，三区和四区为白色。

进入实验室，必须更换本室有颜色标识的工作服，穿上鞋套。

4.2 核酸扩增荧光检测实验室工作制度4.2.1实验室为工作场所，应保持整洁、安静、维护良好的工作环境。

4.2.2遵守医院的规章制度，严防差错事故及纠纷的发生。

在工作期间不得接待与工作无关人员。

4.2.3实验室进行基因扩增检测及相关实验工作，不得进行其他实验操作。

4.2.4严格执行本实验室的各项操作规程，及时做好详细记录，力求准确、可靠。

实验完毕，做好清洁、整理及统计工作。

4.2.5非本室工作人员，未经许可不得入内。

进修、实习人员或其他科室人员需在本室进行相关实验，应在本室实验人员指导下进行。

4.2.6仪器由专人负责，未经许可，不得随意使用或挪用，爱护使用仪器，定期进行保养与维修。

4.2.7爱护医院财产，厉行节约，离开实验室需关好门窗及水电等。

4.3 标本接收区工作制度和工作流程4.3.1此区设在检验科标本接收室，遵守检验科标本接收制度。

核酸检测室-实验室初步规划与布局

PCR核酸检测实验室布局规划建设依据：«实验室生物安全通用要求»、«生物安全实验室建筑技术规范»、«临床扩增实验室管理暂行办法»、«检测和校准实验室能力认可准则在基因扩增检测领域的应用说明»。

实验室分为洗消区、样品受理区、换衣区、试剂准备区、样品处理区、扩增区和扩增产物分析区，并设有专用走廊，其中试剂准备区、样品处理区、扩增区和扩增产物分析区四个单独的工作区域应设缓冲间，工作区与缓冲间宜安装连锁装置。

不同功能的工作区应是分隔独立的，各工作区有明显的标志，不能直通，如果紧密连接，需安装物品传递窗，不得逆向流动。

实验室的气流也应从扩增前区流向扩增后区，不得逆向流动。

各工作区顶部应该安装紫外灯，紫外灯波长为254mm,每20㎡一支40W的紫外灯。

一、各区的功能洗消区：放置清洁用具,清洗实验用具等。

样品受理区：样品的接收与受理。

换衣区：换工作服。

试剂准备区：试剂的配制、分装和保存。

样品处理区：样品登记、分装;核酸提取、保存。

扩增区：扩增反应混合物的配制、加样。

扩增产物分析区：扩增产物的测定、结果分析、登记及报告。

扩增前区与扩增后区应严格分开，须使用不同的房间，两区之间有一定的间隔。

二、PCR实验室主要设备洗消区：烘箱样品受理区：电脑、打印机。

试剂准备区：仪器设备主要有冰箱、超净台、加样器、混匀器、天平和离心机等，加样器、天平除了要专用外，还应有定期校准。

试剂分装应在超净台中进行，扩增反应混合液应使用分子生物学级的。

标本制备区：仪器设备主要有生物安全柜、加样器、离心机、干浴器、混匀器、水浴锅、冰箱等。

扩增区：扩增区的主要仪器是PCR扩增仪、超净台、微量加样器、离心机、冰箱等。

PCR扩增仪需进行校准。

并配备UPS电源，以防止由于电压的波动，停电对扩增效果的影响。

扩增产物分析区：本区所使用的仪器设备有测序仪、实时荧光定量PCR仪、加样器等。

新冠病毒核酸检测实验室设计与建设SICOLAB

新冠病毒核酸检测实验室设计与建设SICOLAB一、PCR实验室设计规范PCR（聚合酶链式反应）实验室又叫基因扩增实验室《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》（卫医发[2002]10号）《临床基因扩增检验实验室工作规范》（卫检字[2002]8号）二、PCR实验室简介及分类SICOLAB实验室内会为核酸检测准备4个区域，分别是试剂准备区、样本准备区、扩增区、扩增产物分析区。

其中试剂准备区负责接收患者样本，样本准备区则负责进行对样本的核酸进行提取，扩增区则是扩增复制核酸样本，扩增后分析区就是分析样本内核酸能能否与标准样配对，通过仪器检测的到，就判断成阳性，如果检测不到就是阴性。

PCR实验室分类：普通PCR实验室、全自动定量PCR实验室、一体自动化分析PCR实验室。

三、PCR实验室功能区域SICOLAB试剂准备区：是PCR实验室中最为“洁净”的区域，它不应有任何核酸成分的存在，否则将严重影响检测结果的准确性。

标本的制备应在生物安全柜内进行。

主要设备：冰箱、低温冰箱、混匀器、微量加样器（0.2-1000ul）、移动紫外灯。

样本准备区：核酸提取、贮存，扩增反应管制作。

主要设备：冰箱、超低温冰箱、高速冷冻离心机、混匀器、微量加样器（0.2-1000ul）、移动紫外灯、水浴锅、生物安全柜。

扩增区：扩增反应体系的配置和核酸的提取加入要在扩增区内进行。

主要设备：扩增仪、离心机、微量加样器（0.2-1000ul）、移动紫外灯。

扩增产物分析区：产物分析区最后一个工作区域，用于扩增片段的分析。

主要设备：凝胶成像分析仪、电泳仪、电泳槽、微量加样器（0.2-1000ul）、移动紫外灯。

四、PCR实验室工作流向SICOLAB进入各工作区域必须严格按照单一方向进行。

即试剂准备区→样本准备区→扩增区→扩增产物分析区。

五、PCR实验室压差及气流控制SICOLAB1）试剂准备区是工艺流线的开始，设计为正压或常压，避免外界环境的污染。

2）样品制备区一般为常压或负压，大多数情况下设计成二级生物安全实验室，避免实验产物溢出，污染外界环境。

核酸扩增检测实验室设计及工作流-PPT精品文档

仪器上完成的全自动核酸检测分析仪，标本制备区、扩增区和产物分析区可合并。
无“基因”或“核酸”概念的重要性
Evaluation only. ted with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2 Copyright 2019-2019 Aspose Pty Ltd.
理想的核酸扩增实验室设计A
产物分析区扩增区标本制备区试剂准备区
Evaluation only. 空气流向空气流向空气流向 ted with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2 空气流向 Copyright 2019-2019 Aspose 缓冲间 Pty Ltd. 缓冲间缓冲间
l
因地制宜
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方便工作
A
扩增区门
标本制备区
门产物分析区
门试剂准备区
Evaluation only. ted with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2 门门 Copyright 2019-2019 Aspose Pty Ltd.
外走廊
血液标本的接收
l
通常的工作流程：标本采集
编号保存或检测 Evaluation only.
血清分离
tedl with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2 应在四个测定区域之外的地方或区域内接收 Copyright 2019-2019 Aspose Pty Ltd.
试剂准备区
其他实验室
其实验室
其他实验室
空气流向
其他实验室

PCR实验室分区设置及要求

怎样编写SOP？
本区是最主要的扩增产物污染来源，因此必须注意避免通过本区的物品及工作服将扩增产物带出。在使用PCR-ELISA方法检测扩增产物时，必须使用洗板机洗板，废液必须收集至1mol/L HC1中，并且不能在实验室内倾倒，而应至远离PCR实验室的地方弃掉。用过的吸头也必须放至1mol/L HCl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序处理，如焚烧。
把，此外还放置高压后 PCR 管饭盒，枪头盒、记号笔及废液缸，这些物品均不得拿出超净工作台外。 3. 超净工作台内只进行打开和配制试剂的操作，不得在内加样。 4. 配制试剂及反应体系前应将试剂混均，粉末状试剂应先离心后再溶解。各种酶类应放置在自制冰盒上。配制完毕后应及时将剩余试剂放回贮存区域。 5. 反应管应放在自备的架上或夹在手指缝中带到样品制备区。 6. 试剂按位存放，最高层放高压去离子水，第一抽屉放酶、底物、引物、缓冲液。每人分装小份试剂使用。第二、三抽屉备用试剂，每人分装各自所用标本放于各自标本盒中，防止交叉污染。 7. 一周内经常使用的底物、引物、缓冲液可放 4℃保存。 8. 每天实验结束后，实验区紫外线照射 30 分钟。
下述工作在本区内进行：DNA或cDNA扩增。此外，已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。在巢式PCR测定中，通常在第一轮扩增后必须打开反应管，因此巢式扩增有较高的污染危险性，第二次加样必须在本区内进行。
用于RNA扩增检测的样本制备好以后，应立即进行cDNA合成，因为cDNA链较RNA 稳定，保存相对容易。为保证逆转录反应的需要，应在标本制备区设置一个以上的温育装置。
cDNA合成的理想温度依所使用的酶而定，倾向于使用一步法：即使用在扩增反应缓冲液条件下具有逆转录活性的热稳定的 DNA聚合酶进行逆转录，其较cDNA合成后再开盖以调节缓冲液或加入聚合酶进行扩增发生污染的可能性降低。

PCR实验室(新冠核酸检测实验室)SOP文件

XXX医院检验科基因扩增实验室标准操作规程适用部门：基因扩增实验室XX医院目录第一部分工作制度及程序 (1)PCR实验室各区工作制度及程序 (1)PCR实验室人员配置及培训程序 (4)PCR实验室清洁程序 (5)PCR实验室废弃物处理程序 (6)PCR实验室生物安全防护程序 (7)抱怨的处理程序 (8)PCR实验室应急处理程序 (9)第二部分标准操作规程 (11)临床标本的采集及处理操作程序 (11)标本接收、拒收及保存程序 (12)实验室化学试剂的管理和配制标准操作程序 (14)标本前处理(核酸纯化)标准操作程序 (16)新型冠状病毒核酸检测标准操作程序 (18)人乳头瘤病毒分型检测（基因芯片法）标准操作规程 (24)核酸扩增及产物分析检测的操作程序 (30)检测结果分析的标准操作程序 (31)检测结果报告程序 (34)实验记录管理程序 (35)第三部分设备SOP文件 (36)AU1001-96全自动核酸提取仪（96 通道）操作流程、校准及维护保养程序 (36)乐普Lepgen-96全自动医用PCR 分析系统操作流程、校准及维护保养程序 (41)净化工作台SW-CJ系列操作流程及维护保养程序 (48)博科生物安全柜操作流程及维护保养程序 (49)多恒DHG-9053BS-III电热恒温鼓风干燥箱操作流程及维护保养程序 (54)多恒HH-100干式恒温器（金属浴）操作流程、校准及维护保养程序 (56)多恒TD4Z低速离心机操作流程及维护保养程序 (60)多恒DH18R台式高速冷冻离心机操作流程及维护保养程序 (66)多恒MINI10K迷你离心机操作流程及维护保养程序 (74)多恒MIX-2500微型旋涡混合/匀器操作流程及维护保养程序 (76)多恒2-96板式离心机操作流程及维护保养程序 (78)威高MSL.NC80高压灭菌器操作流程及维护保养程序 (80)紫外线消毒车操作规程操作流程及维护保养程序 (91)澳柯玛药品冷藏柜操作流程及维护保养程序 (93)澳柯玛普通冰箱操作维护规程 (95)移液器操作流程、校准及维护保养程序 (97)传递窗操作流程、校准及维护保养程序 (101)第四部分实验室质量控制 (102)实验室试剂、耗材购买管理程序 (102)试剂的质检标准操作程序 (104)实验耗材质检的标准操作程序 (105)室内质控标准操作程序 (107)室间质评管理程序 (111)第一部分工作制度及程序PCR实验室各区工作制度及程序1 目的：实现PCR实验室日常专人负责，确保实验室操作的规范性。

核酸检测实验室标准

核酸检测实验室标准一、实验室布局和设施1.实验室应设有独立的试剂准备区、样品处理区、扩增分析区和扩增产物分析区，各区域之间应具备有效的隔离和防护措施。

2.实验室设施应符合生物安全二级实验室的要求，并具备相应的防护设备，如实验室服、手套、口罩、眼睛保护等。

二、实验室人员1.实验室人员应具备相关的专业知识和技能，并经过相应的培训和考核。

2.实验室人员应遵守实验室的各项规章制度和工作流程，保证实验室工作的安全和质量。

三、实验室设备1.实验室应配备核酸检测所需的仪器设备，如核酸提取仪、PCR仪、电泳仪等。

2.实验室设备应定期进行维护和保养，并经过相关的校准和验证。

四、实验室物料1.实验室应使用符合要求的试剂和耗材，如核酸提取试剂、PCR扩增试剂、胶等。

2.实验室物料应按照规定进行储存和管理，并建立严格的验收和领用制度。

五、实验室操作规范1.实验室应建立完善的操作规范，包括样品采集、运输、接收、处理等环节。

2.实验室操作规范应明确各项操作的具体要求和标准，确保操作的准确性和安全性。

六、实验室安全与防护1.实验室应建立完善的安全与防护制度，包括生物安全、化学危险品管理、废弃物处理等方面。

2.实验室应配备相应的安全设备和个人防护用品，如灭火器、安全柜、紧急洗眼器等。

3.实验室人员应定期进行安全培训和演练，提高安全意识和应对能力。

七、实验室质量保证1.实验室应建立完善的质量保证体系，包括样品质量控制、试剂质量控制、仪器设备质量控制等方面。

2.实验室应定期进行内部质量审核和外部质量评估，确保实验室工作的准确性和可靠性。

3.实验室应积极开展科研和学术活动，提高自身的技术水平和质量水平。

八、实验室废物处理1.实验室应按照相关规定进行废物处理和处置，确保不污染环境和危害人员健康。

2.实验室废物处理应包括医疗废物的分类收集、运输、贮存和处置等环节，并建立相应的管理制度和操作规程。

核酸检测实验室的建设和管理指南

核酸检测实验室的建设和管理指南1. 引言核酸检测实验室是一种专业的实验室，用于快速、准确地检测核酸样本中的病原体。

这份文档旨在提供核酸检测实验室的建设和管理指南，以帮助实验室的顺利运营。

2. 实验室建设2.1 实验室选择在选择实验室时，应优先考虑实验室的地理位置、面积和环境条件。

实验室应位于干净、通风良好的地方，远离噪音和人流量高的区域。

2.2 设备和材料核酸检测实验室应配备必要的设备和材料，包括PCR仪、离心机、电泳仪等。

此外，还需要合适的试剂和耗材，如核酸提取试剂、引物和探针等。

2.3 实验室布局实验室的布局应合理，确保各个操作区域之间的隔离。

应设立样品处理区、核酸提取区、PCR扩增区和结果分析区等。

各区域应根据需要设置相应的设备和工作台。

2.4 安全措施在实验室建设过程中，必须重视安全措施的设置。

应配备防护设施，如实验台上的安全玻璃面板、消防设备、紫外线灯箱等。

同时，还要建立实验室安全管理制度，并进行相关的安全培训。

3. 实验室管理3.1 实验室规章制度为了保证实验室顺利运行，必须建立相应的规章制度。

例如，制定实验室的开放时间、工作流程、实验记录要求、设备维护和校准等方面的规定。

3.2 实验室人员实验室的工作人员应具备相关的专业知识和技术能力。

在招聘和培训人员时，要注意他们的沟通能力和团队协作能力。

此外，还要建立科学的绩效评估体系，激励员工的积极性。

3.3 质量控制为了确保检测结果的准确性和可靠性，实验室必须建立一套严格的质量控制体系。

这包括对设备的日常维护和校准、试剂的质量控制、实验操作的标准化等。

3.4 数据管理实验室应建立完善的数据管理系统，以保护和管理实验数据的安全性和完整性。

在数据采集、存储和分析过程中，应遵循相关标准和规范。

3.5 废弃物处理实验室中产生的废弃物必须按照相关规定进行分类、储存和处理。

应建立废弃物处理制度，确保废弃物的安全处理，减少对环境的污染。

4. 结论本文档提供了核酸检测实验室的建设和管理指南，其中包括实验室建设、实验室管理等方面的内容。