中药显微鉴定PPT课件优秀课件

注意：①切片时速度要快，不可来回拉锯式切割； ②切片时右手不动，只是右臂移动，动作用臂力而不用腕力。
机器切片
石蜡切片机
滑走切片机
6 选片、粘片
选片 选择薄而完整的切片置载玻片上，加水1滴于玻片上，在展片 台上展片，置低倍镜下观察，选取组织构造完整、显微特征清晰者 备用。
粘片 用蛋清与甘油（1:1）。顺时针 用力搅拌均匀，搅拌至无泡沫产生为止。 粘片时，滴少许粘片剂，用手指涂抹均匀。
切片时，切片卷起形成圆筒，是刀刃太钝并附有 杂物、刀得倾角太大、切片太厚等原因引起的。
切片有横纹及薄厚不均一ຫໍສະໝຸດ 是刀夹松紧不均一、 刀的倾角过大引起的。
切片有纵裂或纵条纹，是因为刀口有缺口，组织 太硬引起的。
冷冻切片机
粉末制片
1 药材粉碎
选取完整的药材或待鉴定部位，粉碎，过《中国药典》4 号筛备用。
3 粉末特殊处理制片方法
含多量淀粉的药材粉末 大量淀粉粒的存在会 影响观察、描绘及摄影等效果。取一部分粉末于 试管中加水煮沸，使淀粉粒糊化而溶解，放置或 用离心机使所需细胞、组织下沉管底，用长吸管 将沉淀物吸出供制片观察。
透蜡常用固体石蜡 目的 石蜡进入细胞组织内，便于切片 透蜡方法 50%、75% 、100%石蜡各处理3h。温度：63-64 ℃ 包埋 材料在石蜡中央，便于修蜡和切片
5 蜡块的分割、切片
蜡块的分割 将蜡块修成适合的大小，蜡边与材料尽量平行。上 宽下窄，分割好的材料要妥善保管。
切片 将蜡块粘在切片机上，调整刀的角度（与蜡块保持15°的 倾角），厚度调整为20微米以内。
❖ 药材（饮片）显微制片：横切片或纵切片制片、粉 末制片、表面制片、解离组织制片、花粉粒与孢子 制片、磨片制片。
❖ 含饮片粉末的制剂显微制片：按粉末制片法制片
❖ 细胞壁性质鉴别：木质化细胞壁、木栓化或角质化 细胞壁、纤维素细胞壁。
❖ 细胞内含物性质鉴别：淀粉粒、菊糖、草酸钙结晶 2 根据切片方法，分为：徒手切片、冷冻切片、半薄 切片（0.5-2.0微米）、超薄切片（ 50-70nm)。
2 材料的预处理
处理：
清洗 水洗，用柔软的毛刷轻轻的刷洗表面。 杀生 固定 保存 将需要制片材料迅速杀死，使组织保持原生活 状态，一般以渗透力较强的的药剂作杀生剂较好。 固定液 ⑴ FAA固定液 38%甲醛：冰醋酸：70%乙醇 5：5:95
用于根、茎、叶、花药、子房的固定，固定时间24h ⑵ FPA固定液 38%甲醛：丙酸：70%乙醇 5：5:95 ⑶卡诺氏固定液 乙醇：冰醋酸 3:1
《中国药典》附录Ⅱ 显微鉴别法
显微鉴别法系指用显微镜对药材（饮片） 切片、粉末、解离组织或表面制片及含药材 粉末的制剂中药材的组织、细胞或内含物等 特征进行鉴别的一种方法。鉴别时选择具有 代表性的供试品，根据各种鉴别项的规定制 片。制剂根据不同剂型适当处理后制片。
显微鉴别方法分类
1 根据不同剂型适当处理后制片，分为：
用于根尖、花药、子房的固定，固定不超过时间24h 材料处理时，注意不能影响要观察的显微鉴别特征。如要观察菊 糖、粘液等在软化、切片、装片等过程中，均不可与水接触，以 免溶解消失；要观察挥发油、树脂等，则不可与高浓度乙醇或其 它有机溶媒接触。
3 脱水
脱水常用乙醇、二氧六环、正丁醇、叔丁醇、丙酮等
目的 除去组织中的水分，使细胞变硬； 便于包埋物进入组织及细胞，便于切片； 脱水后的组织再经过透明，便于观察。
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植物显微鉴定的简介(Microscopical
Identification)
❖ 植物显微鉴定是植物鉴定的重要手段之一。它 通过植物组织、细胞、细胞后含物等特征进行 微观分析，达到鉴别真、伪、优、劣的目的。
❖ 植物显微鉴别不但适用于中药材（饮片），也 适用于中成药制品。这一检测方法先后被《中 国药典》、《香港中药材标准》、《日本药局 方》、《印度草药典》、《美国药典》等采用。
1 材料的选择
选材（取样）： 根据鉴定要求，选择有代表性的部位；根、根茎、藤 茎等类圆形的材料要包含有中心部位，至少为1/4以上； 叶、花萼、花冠等材料要包含主脉部位。 材料切成长3cm、直径1cm左右块或段，待切面应削平。 样品的量一般不得少于实验所需用的3倍，即1/3供实 验分析用，另1/3供复核用，其余1/3则为留样保存， 保存期至少一年。
冷冻切片
❖ 仪器：冷冻切片机 ❖ 包埋材料：水、胶水 ❖ 切片温度：-20℃ ❖ 优点：节省时间、方便快捷。
注意事项：
包埋时，不能有气泡，否则会有空洞。
一定要将材料放直立胶水的中央，使材料完全被 胶水包裹。并且外围胶水的厚度要大于等于材料 的半径，有利于粘片。
不宜将材料和胶水冻的太硬，否则在切片过程中 会造成中间材料的破损。
7 染色、透明及封片
染色方法 复染和单染 ；滴染和泡染。 染料的分类 天然和人工染料；碱性、中性和酸性染料；核燃料、细 胞质染料、细胞壁染料、组织化学染料、活体染料等。 常用染料 苏木精、碱性品红、番红和固绿； 透明 梯度二甲苯 目的 便于观察 封片 用加拿大树胶封片、 目的 便于长期保存；由于 加拿大树胶折射率高适合在显 微镜下观察。
方法 由30%、 50%、 70%、 85%、 95%、 100%、 100%各级酒精 处理2-4h。
4 透明
透明常用二甲苯、氯仿、苯、甲苯等
目的 便于包埋剂(石蜡）及封藏剂（加拿大树胶）的互相融合
方法 用1/4二甲苯、 1/3二甲苯、 1/2二甲苯、 二甲苯、 二甲 苯各处理3-4h。
4 透蜡、包埋
永久制片 （以石蜡切片为例）
石蜡切片
石蜡制片法 借助于石蜡的特性，以其作 为填充剂和包埋剂，用石蜡切片机进行切 片的制作方法。 石蜡制片是目前植物性中药重要的、常用 的、效果较好的切片方法之一，但制片周 期较长是其缺点。
石蜡制片的步骤及操作基本过程如下：取材→固定→ 冲洗→脱水→透明→浸蜡及包埋→切片→粘片→脱蜡 →染色→透明→封片。
3.4 粉末特殊处理制片方法
斯氏液装片 斯氏液由醋酸∶甘油∶水（1∶1∶1）组成，主要用于观 察淀粉粒及一些遇水合氯醛试液易溶解的成分。如多糖类 成分、树脂类成分等。
水合氯醛液装片 水合氯醛试液能渗透组织，使皱缩的细胞膨胀；并能溶解 淀粉粒、蛋白质、树脂、挥发油和叶绿素等，使细胞组织 变得透明而清晰。