微生物的形态和结构观察
微生物实验报告:微生物形态观察
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实验一微生物形态观察一、实验目的1.巩固显微镜的使用方法,重点练习油镜的使用;2.认识细菌、放线菌和霉菌的基本形态特征和特殊结构;3.练习手绘微生物图片。
二、实验原理1.细菌基本形态细菌是单细胞生物,一个细胞就是一个个体。
细菌的基本形态有3种:球状,杆状和螺旋状,分别称为球菌、杆菌、螺旋菌。
球菌根据细胞分裂后排列方式的不同分为单球菌、双球菌、四联球菌、八叠球菌、链球菌、葡萄球菌等。
杆菌分为单杆菌、双杆菌、链杆菌等,是细菌中种类最多的。
螺旋菌分为弧菌和螺菌。
除此之外,还有一些特殊形态的细菌。
2.细菌特殊结构细菌的特殊结构包括荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等。
荚膜是某些细菌向细胞壁表面分泌的一层厚度不定的胶状物质,具有抗干燥、抗吞噬和附着作用。
鞭毛是某些细菌表面着生的1至数根由细胞内伸出的细长、波曲的丝状体,具有运动功能,在菌体上的着生位置、数目因菌种而异。
菌毛(又称纤毛)是在细菌体表的比鞭毛更细、更短、直硬,且数量较多的丝状体,与细菌吸附或性结合有关。
芽孢又称内生孢子,是某些细菌生长到一定阶段,在菌体内部产生的圆形、椭圆形或圆柱形休眠体,具有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压等特性。
3.真菌的结构特征菌丝是构成真菌营养体的基本单位,是一种管状细丝。
可伸长并产生许多分枝,许多分枝的菌丝相互交织在一起,就叫菌丝体。
根据菌丝中是否存在隔膜可分为无隔膜菌丝和有隔膜菌丝。
为适应不同的环境条件和更有效地摄取营养满足生长发育地需要,许多真菌的菌丝可以分化成一些特殊的形态,这些特化的形态称为菌丝变态。
比如吸器、假根、子实体。
4.放线菌的结构特征放线菌的形态比细菌复杂些,但仍属于单细胞生物。
链霉菌是典型的放线菌,其细胞呈丝状分枝,菌丝直径很小,在营养生长阶段,菌丝内无隔,故一般呈多核的细胞状态。
当其孢子落在固体基质表面并发芽后,就不断伸长、分支并以放射状向基质表面和内层扩展,形成大量色浅、较细的具有吸收营养和排泄代谢废物功能的基内菌丝,同时在其上又不断向空间方向分化出颜色较深、直径较粗的分枝菌丝,这就是气生菌丝。
微生物学实验一 微生物制片及形态观察
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实验一微生物制片及形态观察一、显微镜油镜的使用显微技术是微生物检验技术中最常用的技术之一。
显微镜的种类很多,在实验室中常用的有:普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜和电子显微镜等。
1. 结构光学显微镜是由光学放大系统和机械装置两部分组成。
光学系统一般包括目镜、物镜、聚光器、光源等;机械系统一般包括镜筒、物镜转换器、镜台、镜臂和底座等(图1-1)。
图1-1 光学显微镜结构图标本的放大主要由物镜完成,物镜放大倍数越大,它的焦距越短。
焦距越小,物镜的透镜和玻片间距离(工作距离)也小。
油镜的工作距离很短,使用时需格外注意。
目镜只起放大作用,不能提高分辨率,标准目镜的放大倍数是十倍。
聚光镜能使光线照射标本后进入物镜,形成一个大角度的锥形光柱,因而对提高物镜分辨率是很重要的。
聚光镜可以上下移动,以调节光的明暗,可变光栏可以调节入射光束的大小。
显微镜用光源,自然光和灯光都可以,以灯光较好,因光色和强度都容易控制。
一般的显微镜可用普通的灯光,质量高的显微镜要用显微镜灯,才能充分发挥其性能。
有些需要很强照明,如暗视野照明、摄影等,常常使用卤素灯作为光源。
2. 原理显微镜的放大效能(分辨率)是由所用光波长短和物镜数值口径决定,缩短使用的光波波长或增加数值口径可以提高分辨率,可见光的光波幅度比较窄,紫外光波长短可以提高分辨率,但不能用肉眼直接观察。
所以利用减小光波长来提高光学显微镜分辨率是有限的,提高数值口径是提高分辨率的理想措施。
要增加数值口径,可以提高介质折射率,当空气为介质时折射率为1,而香柏油的折射率为1.51,和载片玻璃的折射率(1.52)相近,这样光线可以不发生折射而直接通过载片、香柏油进入物镜,从而提高分辨率。
显微镜总的放大倍数是目镜和物镜放大倍数的乘积,而物镜的放大倍数越高,分辨率越高。
3. 使用方法1)低倍镜观察先将低倍物镜的位置固定好,然后放置标本片,转动反光镜,调好光线,将物镜提高,向下调至看到标本,再用细调对准焦距进行观察。
微生物常规鉴定技术(带图片)
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微生物常规鉴定技术一、形态结构和培养特性观察1、微生物的形态结构观察主要是通过染色,在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构(包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等)及染色特性进行观察,直观地了解细菌在形态结构上特性,根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。
2、细菌细胞在固体培养基表面形成的细胞群体叫菌落(colony)。
不同微生物在某种培养基中生长繁殖,所形成的菌落特征有很大差异,而同一种的细菌在一定条件下,培养特征却有一定稳定性。
,以此可以对不同微生物加以区别鉴定。
因此,微生物培养特性的观察也是微生物检验鉴别中的一项重要容。
1)细菌的培养特征包括以下容:在固体培养基上,观察菌落大小、形态、颜色(色素是水溶性还是脂溶性)、光泽度、透明度、质地、隆起形状、边缘特征及迁移性等。
在液体培养中的表面生长情况(菌膜、环)混浊度及沉淀等。
半固体培养基穿刺接种观察运动、扩散情况。
2)霉菌酵母菌的培养特征:大多数酵母菌没有丝状体,在固体培养基上形成的菌落和细菌的很相似,只是比细菌菌落大且厚。
液体培养也和细菌相似,有均匀生长、沉淀或在液面形成菌膜。
霉菌有分支的丝状体,菌丝粗长,在条件适宜的培养基里,菌丝无限伸长沿培养基表面蔓延。
霉菌的基菌丝、气生菌丝和孢子丝都常带有不同颜色,因而菌落边缘和中心,正面和背面颜色常常不同,如青霉菌:孢子青绿色,气生菌丝无色,基菌丝褐色。
霉菌在固体培养表面形成絮状、绒毛状和蜘蛛网状菌落。
革兰氏染色:革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。
革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G—)两大类,是细菌学上最常用的鉴别染色法。
该染色法所以能将细菌分为G+菌和G—菌,是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。
G—菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质,而且肽聚糖层较薄、交联度低,故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质,增加了细胞壁的通透性,使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出,结果细菌就被脱色,再经蕃红复染后就成红色。
微生物的形态与结构
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细菌染色
染色原因或目的 ——小而透明,染色后便于显微镜观 察
——鉴别细菌 ——观察细菌的特殊结构
(1) 革兰氏染色步骤
① 初染:结晶紫 ② 媒染:碘液 ③ 脱色:95%乙醇 ④ 复染:稀释复红
结果判定: 紫蓝色者为G+菌,例如金黄色葡萄球菌就是G+球菌; 红色者为G-菌, 例如大肠杆菌就是G-杆菌。
革兰氏染色法(Gram stain):该法是丹麦 细菌学家革兰(Hans Christian Gram)于 1884年创建,至今仍在广泛应用。
(1) 革兰氏染色步骤
① 初染:结晶紫 ② 媒染:碘液 ③ 脱色:95%乙醇 ④ 复染:稀释复红
结果判定: 紫蓝色者为G+菌,例如金黄色葡萄球菌就是G+球菌; 红色者为G-菌, 例如大肠杆菌就是G-杆菌。
细菌的染色与结构
济源市疾病预防控制中心微检科 王军鹏
二零二零年三月十八日
第一章 细菌的形态与结构
细菌(bacterium)是属原核生物界(prokaryotae)的
一种单细胞微生物。
• 第一节 细菌的大小与形态 • 第二节 细菌的结构 • 第三节 细菌形态与结构检查法
第一节 细菌的大小与形态
◆ 光学显微镜
糖类含量 脂类含量
磷壁酸 外膜
革兰阳性菌 三维立体结构、较坚韧
20-80nm 可多达50层 占细胞壁干重50%-80%
约45% 少,1%-4%
+ —
革兰阴性菌 二0% 15-20%
较多,11%-22% — +
了解G+和G-菌细胞壁结构差异的意义
四肽侧链 磷壁酸
五肽交连桥
革兰阴性菌 聚糖骨架
四肽侧链
区分四大类微生物的方法
![区分四大类微生物的方法](https://img.taocdn.com/s3/m/cc2b3f98ac51f01dc281e53a580216fc700a53df.png)
区分四大类微生物的方法微生物是一种微小的生物体,可以只能通过显微镜观察到。
它们广泛存在于自然界的各个角落,包括土壤、水、空气、动植物体内等。
根据其形态、生态和生理特征,可以将微生物分为细菌、真菌、病毒和原生动物。
本文将对这四大类微生物的方法进行详细介绍。
一、细菌:细菌是一类单细胞微生物,形态各异,可以是球形、杆状、螺旋形等。
它们广泛存在于土壤、水、空气、动植物体内等环境中。
区分细菌的方法主要包括:形态观察和染色;生长特性观察;代谢特性检测;分子生物学方法。
1.形态观察和染色:通过显微镜观察细菌的形态特征,如球菌的球形、链球菌的成串排列、杆菌的杆状等。
同时可以使用染色方法,如革兰氏染色和抗酸染色,以区分细菌的壁和膜结构。
2.生长特性观察:通过培养细菌在不同培养基和条件下的生长特性,如菌落形状、颜色等来识别细菌的种类。
3.代谢特性检测:通过检测细菌的代谢产物,如酶的产生、底物利用等,可以判断细菌的代谢特性,并进一步鉴定其种属。
4.分子生物学方法:如PCR扩增、16SrRNA测序等,可以直接检测细菌的遗传物质,进行细菌种属的快速鉴定。
二、真菌:真菌是一类多细胞微生物,主要由菌丝组成,营养吸收方式独特。
区分真菌的方法包括:菌丝结构观察;菌落形态观察;孢子特征观察;分子生物学方法。
1.菌丝结构观察:通过显微镜观察真菌的菌丝形态特征,如菌丝的直径、分支情况、颜色等,来初步判断真菌的种类。
2.菌落形态观察:通过培养真菌在琼脂培养基上形成的菌落形态特征,如菌落的形状、边缘、颜色等,可以进一步确定真菌的种属。
3.孢子特征观察:通过显微镜观察真菌的孢子形态特征,包括孢子的大小、形状、颜色等,可以鉴定真菌的亚属和种属。
4.分子生物学方法:如ITS序列测定、18SrDNA测定等,可以通过检测真菌的遗传物质,进行真菌种属的快速鉴定。
三、病毒:病毒是一类非细胞的微生物,需要寄生于宿主细胞内进行复制。
区分病毒的方法包括:电镜观察;培养宿主细胞;生物化学方法;核酸检测。
微生物实验报告_显微镜
![微生物实验报告_显微镜](https://img.taocdn.com/s3/m/1ed0be6af011f18583d049649b6648d7c1c70897.png)
一、实验目的1. 掌握显微镜的基本操作方法。
2. 观察微生物的形态和结构。
3. 了解微生物在不同环境下的生长状况。
二、实验原理显微镜是一种利用光学原理放大微小物体的仪器。
通过显微镜,我们可以观察微生物的形态、结构、运动和生长状况,从而了解微生物的生物学特性。
三、实验材料与仪器1. 材料:- 微生物培养液- 微生物纯培养物- 玻片、盖玻片、载玻片- 滴管、酒精灯、镊子2. 仪器:- 显微镜- 照相机(可选)四、实验步骤1. 拿出显微镜,调整光源和焦距,确保视野清晰。
2. 用滴管将微生物培养液滴在载玻片上,盖上盖玻片。
3. 将载玻片放置在显微镜的载物台上,调整焦距,观察微生物的形态和结构。
4. 用照相机记录微生物的图像(可选)。
5. 重复以上步骤,观察不同环境下的微生物生长状况。
五、实验结果与分析1. 观察到微生物的形态多样,包括球形、杆形、螺旋形等。
2. 观察到微生物的结构包括细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核等。
3. 观察到微生物在不同环境下的生长状况,如温度、pH值、营养物质等对微生物生长的影响。
六、实验结论1. 显微镜是观察微生物形态和结构的重要工具。
2. 微生物的形态和结构与其生物学特性密切相关。
3. 环境因素对微生物的生长具有重要影响。
七、注意事项1. 操作显微镜时要轻柔,避免损坏镜头。
2. 保持显微镜的清洁,避免污染。
3. 观察微生物时要保持耐心,仔细观察。
八、实验拓展1. 尝试观察其他微生物,如细菌、真菌、藻类等。
2. 研究微生物的生长规律和环境适应性。
3. 利用显微镜观察微生物的繁殖过程。
九、实验总结通过本次实验,我们掌握了显微镜的基本操作方法,观察了微生物的形态和结构,了解了微生物的生长规律和环境适应性。
实验过程中,我们深刻体会到显微镜在微生物学研究中的重要作用。
形态结构观察实验报告
![形态结构观察实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/3d18d91c326c1eb91a37f111f18583d049640f98.png)
一、实验目的通过本次实验,观察并记录不同生物的形态结构特征,加深对生物形态学知识的理解,提高观察和记录实验结果的能力。
二、实验材料与仪器1. 实验材料:显微镜、载玻片、盖玻片、无菌水、刀片、镊子、植物叶片、动物组织、微生物培养皿、食用菌菌丝体、子实体等。
2. 实验仪器:光学显微镜、解剖镜、放大镜、植物学实验台、培养箱、酒精灯、火柴等。
三、实验方法1. 观察植物叶片(1)用刀片将植物叶片切成薄片,放入载玻片中央。
(2)滴加无菌水,盖上盖玻片。
(3)用显微镜观察叶片的表皮、叶肉、叶脉等结构。
2. 观察动物组织(1)取动物组织一小块,放入载玻片中央。
(2)滴加无菌水,盖上盖玻片。
(3)用显微镜观察动物组织的细胞结构、组织结构等。
3. 观察微生物(1)将微生物培养皿置于显微镜下,观察菌落形态。
(2)用无菌镊子取一小块菌落,放入载玻片中央。
(3)滴加无菌水,盖上盖玻片。
(4)用显微镜观察微生物的细胞形态、菌落结构等。
4. 观察食用菌菌丝体与子实体(1)观察食用菌菌丝体的形态、颜色、生长速度等。
(2)观察食用菌子实体的形态特征,如菌盖、菌柄、菌褶等。
(3)观察食用菌的锁状联合现象。
四、实验结果与分析1. 植物叶片观察结果显示,植物叶片由表皮、叶肉、叶脉组成。
表皮具有保护作用,叶肉负责光合作用,叶脉负责运输水分和养分。
2. 动物组织观察结果显示,动物组织由细胞、组织、器官组成。
细胞具有细胞膜、细胞质、细胞核等结构,组织具有相似结构和功能,器官由多个组织构成,具有特定的生理功能。
3. 微生物观察结果显示,微生物具有多种形态,如球形、杆形、螺旋形等。
菌落形态各异,如绒毛状、絮状、颗粒状等。
4. 食用菌观察结果显示,食用菌菌丝体呈白色、细长、有分支,生长速度快。
子实体具有菌盖、菌柄、菌褶等结构,颜色多样,形态各异。
五、实验总结通过本次实验,我们观察了植物叶片、动物组织、微生物、食用菌等生物的形态结构特征,加深了对生物形态学知识的理解。
微生物的形态与结构(共184张PPT)
![微生物的形态与结构(共184张PPT)](https://img.taocdn.com/s3/m/e78e60da760bf78a6529647d27284b73f242369a.png)
质粒的起源
质粒的起源,人们认为质粒可能是来源于某种感染细菌的病毒粒子,
进入细胞后与细胞形成共生关系(与线粒体相似)
细菌细胞的特殊结构 P23
所谓特殊结构,指一部分 细菌才具有的结构。
• 鞭毛和菌毛 • 荚膜 • 芽孢 • ·········
细菌细胞的特殊结构 ——鞭毛
• 定义
革兰氏阳性细菌的细胞壁
革兰氏阴性细菌的细胞壁
革兰氏阳性菌和阴性菌的染色原理
——二者细胞壁结构的差异
细胞壁结构与革兰氏染色的关系
• 现在大多认为,在染色过程中,细胞内形成了一种不溶性的结晶紫 - 碘的 复合物,这种复合物可被乙醇 ( 或丙酮 ) 从 G - 细菌细胞内抽提出来,但 不能从 G + 菌中抽提出来。这是由于
• 霍乱弧菌 ( Vibrio cholerae ~0.6 × 1~3
• 迂回螺菌 ( Spirillum volutans ~2 × 10~20
2.2.2 细菌细胞的结构与功能
2.2.2.1 细菌细胞的基本结构 • 细胞壁 • 细胞膜 • 细胞质 • 细胞核
细菌细胞的结构
• 定义
细菌细胞的基本结构
第二章 微生物的形态与结构
2.1 微生物的基本类型
传统的生物界分为:
• 动物 • 植物 • 微生物
以细胞结构对微生物分类
根据显微镜或电镜观察到的结构进行分类
• 无细胞结构
病毒 及亚病毒 拟病毒 类病毒 朊病毒
• 有细胞结构
原核 细菌 放线菌 蓝细菌
真核
酵母菌 霉菌 藻类 原生动物
动物 植物
原核细胞和真核细胞的电镜图
其中PHB可以用来制作可降解塑料。
显微镜的使用及细菌形态结构的观察报告
![显微镜的使用及细菌形态结构的观察报告](https://img.taocdn.com/s3/m/e8280abc6429647d27284b73f242336c1eb9300b.png)
显微镜的使用及细菌形态结构的观察报告一、引言显微镜是一种用来观察微小物体的仪器,它可以放大物体的细节,使我们能够看到肉眼无法观察到的细节。
在生物学中,显微镜被广泛应用于研究细胞和微生物等微小生物体的结构和功能。
本报告将介绍显微镜的使用方法以及如何观察细菌形态结构。
二、材料和方法1. 显微镜:本次实验使用的是光学显微镜。
2. 细菌样本:从实验室中获取了多种不同类型的细菌样本。
3. 玻片和盖玻片:用于制作样品载玻片。
4. 意式染色剂:用于染色处理,增强对细菌形态结构的观察。
三、显微镜使用方法1. 调整光源:打开显微镜后,在透明底座上放置一个白色纸片,调整光源位置和亮度,使得纸片上呈现均匀明亮的白色。
2. 调整目镜:将目镜对准眼睛,调节焦距,使得目视舒适且清晰。
3. 调整物镜:选择合适的物镜,将其转至位置,并调节焦距,使得样品清晰可见。
4. 调整聚光镜:根据需要调整聚光镜的大小和位置,以增强样品的亮度和对比度。
四、细菌形态结构观察方法1. 制作载玻片:在干净的玻片上挤出一滴细菌悬液,在另一个玻片上盖上一张盖玻片,轻轻压紧。
2. 意式染色处理:将制作好的载玻片浸泡在意式染色剂中,静置5-10分钟。
3. 洗涤处理:用蒸馏水洗涤载玻片数次,直到洗涤后水不再有颜色。
4. 干燥处理:将载玻片放置在通风处晾干。
五、结果与讨论1. 观察细胞形态结构:通过显微镜观察,可以看到不同类型的细菌具有不同的形态结构。
如球菌呈圆形或半球形,链状菌呈长条状等等。
通过染色处理后观察可以更加清晰地看到这些形态特征。
2. 观察细胞大小:通过显微镜观察,可以测量细菌的大小。
不同类型的细菌大小也不同,如球菌直径一般在0.5-1微米之间,链状菌长度则在数十到数百微米之间。
3. 观察细胞结构:通过显微镜观察,可以看到一些特殊的结构,如某些细菌具有鞭毛、纤毛或胞外多聚物等附属结构。
这些结构对于细菌的运动和生长有着重要的作用。
六、实验注意事项1. 实验过程中要注意卫生和安全。
微生物实验显微镜的使用及微生物形态观察
![微生物实验显微镜的使用及微生物形态观察](https://img.taocdn.com/s3/m/ae7210952dc58bd63186bceb19e8b8f67c1cef3a.png)
3-2
微生物实验显微镜的使用及微生物形态观察
第15页
3.革兰氏染色法:
革兰氏染色法将细菌分为G+和G- ,这由两类细菌细胞 壁结构和组成不一样而决定。用结晶紫初染后,全部细菌都 染上蓝紫色。碘作为媒染剂能与结晶紫结合形成结晶紫-碘 复合物,增强了染料与菌体结协力。用乙醇脱色处理时,两 类细菌脱色效果是不一样。G+细菌细胞壁主要由肽聚糖形 成网状结构组成,且壁厚、类脂含量低,用乙醇脱色时使细 胞壁脱水、网状结构孔径缩小,通透性降低,使得结晶紫— 碘复合物不易被洗脱而保留在细胞内。虽经洗脱和复染依然 保持初染剂蓝紫色。G-细菌则不一样,因为其细胞壁肽聚糖 层较薄,类脂含量高,所以在脱色处理时,类脂被乙醇溶解, 细胞壁通透性增大,使结晶紫—碘复合物比较轻易被洗脱出 来,用复染剂复染后,细胞被染上复染剂颜色。
总菌数 A 16104 B 32000A B(个 / ml) 5
4-3
微生物实验显微镜的使用及微生物形态观察
第24页
2. 区分酵母菌死活细胞基础原理 美蓝是一个无毒性染料,它氧化型呈蓝色,
还原型是无色。用美蓝对酵母菌活细胞进行染 色时,因为细胞新陈代谢作用,细胞内含有较 强还原能力,能使美蓝由蓝色氧化型变成无色 还原型。所以,含有还原能力酵母活细胞是无 色或淡蓝色,而死细胞或代谢作用衰老细胞则 呈蓝色,借此即可对酵母菌死细胞和活细胞进 行判别。
微生物实验显微镜的使用及微生物形态观察
第25页
四. 试验内容
1. 酵母菌形态观察及死活细胞判别 (1) 在载玻片上加半滴美蓝染液,在染液上 滴一滴菌液。取一块盖玻片,先将一边与菌液 接触,然后慢慢将盖玻片放下盖在菌液上。
(2) 将标本片放3分钟后,先用低倍镜然后用 高倍镜观察酵母菌形态和出芽情况,并依据颜
微生物的形态观察实验报告
![微生物的形态观察实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/dc5bf802f011f18583d049649b6648d7c0c70849.png)
微生物的形态观察实验报告
通过在显微镜下观察不同类型的微生物,了解它们的形态特征和结构,从而深入了解微生物的分类和生物学特征。
实验步骤:
1. 准备样本:从不同来源,如水、泥土、食物等,收集微生物样本。
2. 制备菌片:将菌种种入适当的培养基,使其生长和繁殖。
然后在玻璃片上刮取一些菌落,通过灭菌消毒杀死细菌并干燥。
3. 加染剂:将制备好的菌片放入染液中,染色时间与染色方法与染料种类有关。
4. 滴加液滴:将染色后的菌片在显微镜下观察。
实验结果:
在显微镜下观察到了许多不同形态的微生物,如红球菌、链球菌、葡萄球菌、酵母菌等。
它们的形态、大小、颜色和结构都有所不同。
例如,链球菌呈链状,难看,通常组成串并捆扎在一起。
一个典型的酵母菌是一个圆形或卵形,有微细的细胞壁,有一些嚼口器,通常高达数微米,直径可达10微米。
结论:
通过观察不同形态的微生物,我们可以更好地了解它们之间的差异和分类,从而更好地探索它们在自然界和人类生活中的作用。
此外,对微生物形态的深入认识也有助于开发生物科技和医学治疗手段。
微生物鉴定的方法
![微生物鉴定的方法](https://img.taocdn.com/s3/m/fc06dab77d1cfad6195f312b3169a4517623e561.png)
微生物鉴定的方法
微生物鉴定是确定或识别微生物种类的过程。
以下列出了常用的微生物鉴定方法:
1. 形态学鉴定:通过观察微生物的形态特征,如大小、形状、颜色和结构,来鉴定微生物。
这可以通过显微镜观察微生物细胞和组织的特征来实现。
2. 培养基鉴定:将微生物分离培养在特定的培养基上,根据不同的培养特性(如生长速度、形态、生理特征等)来鉴定微生物。
培养基可以提供适宜的营养和环境条件,促进微生物的生长。
3. 生化测试:通过测试微生物代谢产物的变化来鉴定微生物。
常用的生化测试方法包括酶活性测试、代谢途径测试和糖发酵测试等。
4. 分子生物学方法:利用分子生物学技术鉴定微生物,包括引物PCR扩增、序列分析、DNA指纹图谱等。
这些技术可以检测微生物的DNA序列并与已知的序列进行比较,从而确定微生物的种类。
5. 免疫学方法:利用免疫学技术鉴定微生物,包括血凝法、免疫荧光染色、酶联免疫吸附试验(ELISA)等。
这些方法可以检测微生物特异性抗原或抗体,从而确定微生物种类。
6. 质谱法:利用质谱技术鉴定微生物,如质谱分析、质谱成像等。
这些技术通
过分析微生物代谢产物或特定的质谱图谱,来确定微生物的种类。
综合使用上述的方法,可以更准确地鉴定微生物种类,特别是对于难以通过传统的形态学观察进行鉴定的微生物。
显微镜的使用及微生物形态的观察实验报告
![显微镜的使用及微生物形态的观察实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/cc900d7aff4733687e21af45b307e87101f6f894.png)
显微镜的使用及微生物形态的观察实验报告实验介绍
在生物学领域中,显微镜是一项非常重要的工具,可以帮助我们观察
和研究微小生物的结构和形态。
本次实验旨在使用显微镜观察微生物
的形态,了解微生物的结构、特征和功能。
实验流程
首先,我们需要取得一些样本,以便观察微生物的结构和形态。
这可
以通过在自然环境中收集样本(例如河流、湖泊、土壤等)或购买商
业制备的标本来实现。
在本次实验中,我们使用了商业制备的标本,
这些标本已经是干燥的,所以需要添加液体以便观察微生物。
接下来,我们需要准备显微镜。
将显微镜调整到所需的放大倍率,然
后取出标本,并用差压计夹住标本。
将标本夹在样品挂架上,并将挂
架固定到镜台上。
将镜头对准样本,用调节钮来调整样品的焦距,使其清晰可见。
然后,根据所需的放大倍率,旋转目镜直到图像清晰。
在观察和记录样本时,应注意保护显微镜免受污染或损坏。
实验结果
通过观察样本,我们可以看到微生物的各种结构和形态。
例如,原核生物是一种单细胞生物,具有各种形状和大小,可以自由游动。
真菌是一种多细胞生物,其细胞结构和功能类似于植物,但没有叶绿素。
还可以观察到许多微生物中的特殊结构,例如细菌的鞭毛和鞭毛,它们可以帮助微生物在水中移动。
结论
通过本次实验,我们了解了显微镜的使用方法,学习了微生物的结构和形态。
这对于我们理解微生物的功能和作用是非常重要的,可以帮助我们更好地控制和利用微生物。
此外,本次实验还帮助我们掌握了观察和记录生物的技能,这对于我们的未来学习和研究是非常有帮助的。
微生物形态观察实验报告
![微生物形态观察实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/fb4b95ea64ce0508763231126edb6f1aff0071de.png)
一、实验目的1. 掌握显微镜的使用方法,学会油镜的使用技巧。
2. 了解并掌握微生物的基本形态特征,包括细菌、放线菌、酵母菌和霉菌。
3. 培养无菌操作技能,提高实验操作的规范性和准确性。
二、实验原理微生物是构成生命的基本单位,其形态和结构是微生物学研究的重要内容。
通过显微镜观察微生物的形态,可以了解其生物学特性,为微生物的分类、鉴定和实验研究提供依据。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的纯培养物。
2. 仪器:光学显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、酒精灯、无菌水、无菌棉签、培养皿、试管等。
四、实验步骤1. 涂片(1)将接种环在酒精灯上灼烧,待其冷却后,蘸取适量纯培养物。
(2)将接种环在载玻片上轻轻涂成薄层。
(3)在涂片上滴加适量无菌水,用无菌棉签轻轻涂抹,使菌体均匀分布。
2. 干燥将涂片放在室温下自然干燥。
3. 染色(1)将干燥后的涂片放入乳酸石炭酸棉蓝染色液中,染色5-10分钟。
(2)用蒸馏水冲洗涂片,去除多余的染色液。
4. 观察(1)将涂片放在显微镜载物台上,先用低倍镜观察,找到菌体后,用高倍镜观察。
(2)观察细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的形态、大小、颜色等特征。
5. 记录将观察到的微生物形态特征记录在实验报告中。
五、实验结果与分析1. 细菌细菌是单细胞生物,基本形态有球形、杆形和螺旋形。
在显微镜下,观察到细菌的形态和大小,为杆状,大小约为0.5-1.0μm。
2. 放线菌放线菌是丝状真菌,由菌丝构成。
在显微镜下,观察到放线菌的菌丝呈细长状,直径约为2-5μm,菌丝间有横隔。
3. 酵母菌酵母菌是单细胞真菌,个体形态多为卵圆形、圆柱形。
在显微镜下,观察到酵母菌的个体大小约为5-10μm,细胞壁较薄,细胞质透明。
4. 霉菌霉菌是丝状真菌,由菌丝构成。
在显微镜下,观察到霉菌的菌丝呈粗细不一的丝状,直径约为5-20μm,菌丝间有横隔。
六、实验结论通过本次实验,我们掌握了显微镜的使用方法,观察了细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的形态特征,了解了微生物的基本生物学特性。
微生物知识点整理
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微生物知识点整理微生物知识点整理协议一、关键信息1、微生物的定义:微生物是指个体难以用肉眼观察,需要借助显微镜才能看清的微小生物的总称。
2、微生物的分类:包括细菌、真菌、病毒、支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体、放线菌等。
3、微生物的特点:体积小、结构简单、生长繁殖快、代谢类型多样、适应能力强等。
4、微生物的营养类型:自养型和异养型。
5、微生物的生长曲线:迟缓期、对数生长期、稳定期、衰亡期。
二、微生物的形态结构1、细菌11 形态:球菌、杆菌、螺旋菌等。
12 结构:细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体等。
13 特殊结构:荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等。
2、真菌21 形态:单细胞真菌(酵母菌)和多细胞真菌(霉菌、蕈菌)。
22 结构:细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核等。
23 繁殖方式:无性繁殖和有性繁殖。
3、病毒31 形态:球形、杆形、蝌蚪形等。
32 结构:由核酸(DNA 或 RNA)和蛋白质外壳组成。
33 繁殖方式:吸附、侵入、复制、装配、释放。
三、微生物的生理特性1、微生物的营养物质:水、碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
2、微生物的营养方式:21 自养微生物:能够利用无机物合成自身所需的有机物。
22 异养微生物:需要从外界摄取有机物作为营养物质。
3、微生物的代谢类型:31 产能代谢:有氧呼吸、无氧呼吸、发酵等。
32 合成代谢:合成蛋白质、核酸、多糖等生物大分子。
4、微生物的生长影响因素:温度、pH 值、氧气、渗透压等。
四、微生物的遗传变异1、微生物的遗传物质:DNA 是主要的遗传物质,部分病毒以RNA 作为遗传物质。
2、微生物的基因突变:包括点突变、染色体畸变等。
3、微生物的基因重组:转化、转导、接合等方式。
4、微生物的遗传变异在实际应用中的意义:如菌种选育、疾病诊断和防治等。
五、微生物与人类的关系1、有益方面11 工业应用:发酵生产食品、药品、化工产品等。
12 农业应用:生物肥料、生物防治病虫害等。
13 环境保护:污水处理、土壤修复等。
微生物的观察实验报告
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微生物的观察实验报告微生物的观察实验报告引言:微生物是一类极小的生物体,包括细菌、真菌、病毒等。
它们广泛存在于自然界中的各种环境中,对人类和生态系统具有重要的影响。
本实验旨在通过观察微生物的特征和行为,加深对微生物世界的认识。
实验材料与方法:1. 实验材料:- 显微镜- 高倍显微镜镜片- 细菌培养基- 细菌培养皿- 酵母菌粉末- 滴管- 洗净的玻璃片2. 实验步骤:1. 准备细菌培养基:按照说明书的要求制备细菌培养基,并倒入细菌培养皿中。
2. 取一小撮酵母菌粉末,加入适量的水中搅拌均匀,得到酵母菌悬浮液。
3. 使用滴管取一滴酵母菌悬浮液,滴在洗净的玻璃片上。
4. 将玻璃片放在显微镜下,逐渐调节放大倍数,观察酵母菌的形态和运动情况。
5. 重复步骤4,观察细菌的形态和运动情况。
实验结果与讨论:1. 酵母菌观察:在显微镜下,我们可以清晰地观察到酵母菌的形态和结构。
酵母菌是一种单细胞真菌,通常呈椭圆形或圆形,大小约为5-10微米。
酵母菌的细胞壁坚韧,外观光滑,呈现出浅黄色或乳白色。
在观察过程中,我们还发现酵母菌能够进行分裂繁殖,通过菌落的形成,酵母菌能够形成新的个体。
2. 细菌观察:细菌是一类非常微小的微生物,通常需要高倍显微镜才能观察到其形态和结构。
在实验中,我们观察到细菌呈现出不同的形态,包括球状、杆状、螺旋状等。
细菌的大小通常在1-10微米之间。
在观察过程中,我们还注意到细菌具有高度的运动性,通过鞭毛或纤毛的摆动,细菌能够在液体中迅速移动。
3. 实验结果的意义:通过这次微生物观察实验,我们对微生物的多样性和特征有了更深入的了解。
微生物在自然界中扮演着重要的角色,它们参与了许多生态过程,如分解有机物、氮循环等。
同时,微生物也与人类的健康密切相关,有些微生物能够引起疾病,而另一些微生物则可以应用于工业生产、食品加工等领域。
结论:微生物观察实验通过显微镜的使用,使我们能够观察到微生物的形态、结构和运动情况。
微生物形态和结构观察
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第二部分微生物形态和结构观察个体形态和细胞结构是微生物的重要特征,也是识别和鉴定微生物的主要依据之一。
微生物个体微小,要研究它们的形态和结构,通常需要显微镜;在许多情况下,还需要对标本进行染色。
学习和掌握形态学观察技术,对于研究、开发和利用微生物具有重要意义。
实验1 细菌染色和形态结构观察细菌的基本形态主要有球状、杆状和螺旋状。
在适宜的生长条件下,细菌细胞一般在幼龄阶段呈现特定形态。
但若培养条件发生变化或培养物老龄化,菌体形态会出现异常。
细菌个体微小且无色透明,对光线的吸收和反射与水溶液差别不大,直接在显微镜下观察,不易看清它们的真实面目。
对菌体进行染色,可以增加反差,显现细菌的一般结构和特殊结构。
染色技术是微生物形态学研究的重要手段,它可分为简单染色、鉴别染色和特殊染色三种类型。
一、简单染色法(一)目的要求1、学习细菌涂片的基本技术。
2、掌握细菌简单染色法。
3、熟练显微镜油镜的使用技术。
(二)基本原理简单染色是采用一种染料使细菌着色的染色方法。
微生物细胞含有蛋白质、核酸等两性电解质,在酸性溶液中离解出碱性基团而带正电荷,在碱性溶液中离解出酸性基团而带负电荷。
细菌的等电点为pH2~5。
在中性(pH7)、碱性(pH>7)或偏酸性(pH6~7)溶液中,细胞的等电点低于溶液的pH值,因此菌体一般带负电荷。
因为电离后碱性染料带正电荷,可与菌体内的负电荷结合,所以在细菌学研究中大多采用碱性染料进行染色。
常用的碱性染料有碱性复红、蕃红、结晶紫、孔雀绿、美蓝等。
(三)实验器材1、菌种:牙垢细菌。
2、染色液(1瓶/组):石炭酸复红染色液。
3、仪器及相关用品(1套/组):显微镜,香柏油,二甲苯,擦镜纸。
4、其它用品(1套/组):蒸馏水,载玻片,盖玻片,吸水纸,酒精灯,火柴,接种环,镊子,无菌牙签。
(四)实验程序简单染色的操作过程如图4-1所示。
图4-1 细菌的简单染色与显微镜观察1、涂片:取一片洁净无油污的载玻片(通常保存于盛有酒精的广口瓶内,用镊子取出载玻片,在酒精灯上引燃载玻片表面的酒精,冷却后即可使用),在中央滴一小滴蒸馏水,用无菌牙签取少许牙垢,与水滴混匀,涂成薄层(直径约为10mm)。
细菌形态结构观察及大小测定实验总结
![细菌形态结构观察及大小测定实验总结](https://img.taocdn.com/s3/m/8c03a7c20342a8956bec0975f46527d3240ca63b.png)
细菌形态结构观察及大小测定实验总结细菌是一类微生物,其形态结构的观察及大小测定对于了解细菌的特征和特性具有重要意义。
本文将总结细菌形态结构观察及大小测定的实验过程与结果,以及对实验结果的分析和讨论。
我们进行了细菌形态结构的观察实验。
实验中,我们使用了光学显微镜对不同种类的细菌进行观察。
在观察过程中,我们发现细菌的形态结构可以分为球菌、杆菌和螺旋菌三种基本形态。
球菌是最常见的细菌形态,其形状呈球状或椭圆状。
杆菌则呈长条状,长度较长。
螺旋菌则呈螺旋状,有些螺旋菌还具有弯曲的特征。
在观察过程中,我们还注意到细菌的大小存在一定的差异。
为了准确地测定细菌的大小,我们使用了目镜和刻度尺等工具进行测量。
经过测量,我们发现不同种类的细菌大小差异较大。
一般情况下,细菌的直径在0.5至5微米之间,长度在1至10微米之间。
其中,球菌的直径一般较小,约为0.5至1微米;杆菌的直径较大,约为0.5至2微米,长度则较长,约为2至10微米;螺旋菌的直径和长度都较大,一般在1至5微米之间。
通过对实验结果的分析和讨论,我们得出了以下几个结论。
首先,细菌的形态结构多样,主要分为球菌、杆菌和螺旋菌三种基本形态。
其次,不同种类的细菌在大小上存在差异,球菌一般较小,杆菌较大,螺旋菌大小介于两者之间。
最后,细菌的大小测定对于确定其种类和特性具有一定的参考价值,但仅凭大小无法完全确定细菌的分类,还需要综合考虑其形态结构、生长条件等因素。
细菌形态结构观察及大小测定实验的结果对于了解细菌的特征和特性具有重要意义。
通过观察不同种类细菌的形态结构和测定其大小,我们可以更好地了解细菌的生物学特征,并为进一步研究细菌的分类、生长规律和生物活性提供参考。
此外,细菌形态结构观察及大小测定实验也为生物学教学提供了重要的实验内容和教学资源,有助于学生对细菌的认识和理解。
细菌形态结构观察及大小测定实验是一项重要的实验内容。
通过观察不同种类细菌的形态结构和测定其大小,可以更好地了解细菌的特征和特性。
常见微生物的形态和结构观察
![常见微生物的形态和结构观察](https://img.taocdn.com/s3/m/721e1ce6a300a6c30d229f75.png)
实验二常见微生物的形态和结构观察一、实验目的1.掌握普通光学显微镜的正确使用方法;2.学会在培养基上区分大肠杆菌、酵母菌、放线菌、霉菌的菌落或菌苔形态与颜色、气味;3.在显微镜下观察细菌、酵母菌、放线菌、霉菌等的个体形态和结构。
二、基本原理普通光学显微镜是由一组光学系统和支持及调节光学系统的机械系统组成。
机械系统包括镜座、镜臂、镜台、物镜转换器、镜筒及调节器等。
镜座是显微镜的基座,使显微镜能平稳地放置在桌子上;镜台又称载物台,是放置标本的地方,镜台上有压片夹用以固定被检标本,标本移动器可使标本前后和左右移动,有的标本移动器带有游标尺,可指明标本所在位置;镜臂用以支持镜筒,也是移动显微镜时手握的部位;镜筒是连接目镜和物镜的金属筒,镜筒上端插入目镜,下端与物镜转换器相接;物镜转换器安装在镜筒的下端,其上装有3~5个不同放大倍数的物镜,可以通过转动物镜转换器随意选用合适的物镜;调节器安装在镜臂基部,是调节物镜与被检标本距离的装置,通过调节粗、细螺旋便可清晰地观察到标本。
光学系统主要包括目镜、物镜、光源。
目镜一般由两块透镜组成,不同的目镜上刻有5×、10×和15×等字符以表示该目镜的放大倍数;物镜是显微镜中很重要的光学部件,由多块透镜组成,根据物镜的放大倍数和使用方法的不同,分为低倍物镜(4×、10×和20×)、高倍物镜(40×和45×)和油镜(90×、95×和100×)等。
被检物体经显微镜的目镜和物镜放大后的总放大倍数是物镜的放大倍数和目镜放大倍数的乘积。
形态观察主要包括群体形态和个体形态观察两方面。
细菌个体微小,且较透明,必须借助染色法使菌体着色,显示出细菌的一般形态结构及特殊结构,在显微镜下用油镜进行观察。
三、实验材料及设备仪器:光学显微镜材料:1.成品细菌、酵母菌、放线菌、霉菌标本玻片;2.已培养的大肠杆菌、酵母菌、放线菌、霉菌菌种;3.甘油、香柏油、二甲苯、纯净水。
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实验一微生物的形态和结构观察
一、实验目的
1、掌握普通光学显微镜的正确使用方法;
2、掌握革兰氏染色法的原理及操作步骤;
3、在显微镜下观察细菌、酵母菌等的个体形态和结构。
二、基本原理
普通光学显微镜是由一组光学系统和支持及调节光学系统的机械系统组成。
普通光学显微镜是由一组光学系统和支持及调节光学系统的机械系统组成。
机械系统包括镜座、镜臂、镜台、物镜转换器、镜筒及调节器等。
镜座是显微镜的基座,使显微镜能平稳地放置在桌子上;镜台又称载物台,是放置标本的地方,镜台上有压片夹用以固定被检标本,标本移动器可使标本前后和左右移动,有的标本移动器带有游标尺,可指明标本所在位置;镜臂用以支持镜筒,也是移动显微镜时手握的部位;镜筒是连接目镜
和物镜的金属筒,镜筒上端插入目镜,下端与物镜转换器相接;物镜转换器安装在镜筒的下端,其上装有3~5个不同放大倍数的物镜,可以通过转动物镜转换器随意选用合适的物镜;调节器安装在镜臂基部,是调节物镜与被检标本距离的装置,通过调节粗、细螺旋便可清晰地观察到标本。
光学系统主要包括目镜、物镜、聚光镜和反光镜等,较好的显微镜有内光源。
目镜一般由两块透镜组成,不同的目镜上刻有5×、10×和15×等字符以表示该目镜的放大倍数;物镜是显微镜中很重要的光学部件,由多块透镜组成,根据物镜的放大倍数和使用方法的不同,分为低倍物镜(4×、10×和20×)、高倍物镜(40×和45×)和油镜(90×、95×和100×)等。
被检物体经显微镜的目镜和物镜放大后的总放大倍数是物镜的放大倍数和目镜放大倍数的乘积。
形态观察主要包括群体形态和个体形态观察两方面。
细菌个体微小,且较透明,必须借助染色法使菌体着色,显示出细菌的一般形态结构及特殊结构,在显微镜下用油镜进行观察。
根据细菌个体形态观察的不同要求,可将染色分为简单染色、鉴别染色和特殊染色。
本实验主要观察微生物的个体形态,掌握在细菌学中广泛使用的重要鉴别染色法——革兰氏染色法;通过此染色,可将细菌鉴别为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)两大类。
革兰氏染色有着重要的理论与实践意义,其染色原理是利用细菌的细胞壁组成成分和结构的不同。
革兰氏阳性菌的细胞壁肽聚糖层厚,交联而成的肽聚糖网状结构致密,经乙醇处理发生脱水作用,使孔径缩小,通透性降低,结晶紫与碘形成的大分子复合物保留在细胞内而不被脱色,结果使细胞呈紫色。
而革兰氏阴性菌肽聚糖层薄,网状结构交联疏松,而且类脂含量较高,经乙醇处理后,类脂被溶解,细胞壁孔径变大,通透性增加,结晶紫与碘的复合物被溶出细胞壁,因而细胞被脱色,再经蕃红复染后细胞呈红色。
三、仪器和药品
仪器:显微镜酒精灯接种柄接种环洗瓶载玻片滤纸镜油擦镜纸无菌水烧杯药品:结晶紫95%乙醇草酸铵碘碘化钾蕃红二甲苯降酚细菌(培养18~24小时的斜面菌种)细菌酵母菌等标本片。
草酸铵结晶紫染液:A液结晶紫2.0g,95%乙醇20mL;B液草酸铵0.8g,蒸馏水80mL。
将A和B充分溶解后混合静止24小时过滤使用。
革氏染液:碘1g ,碘化钾2g ,蒸馏水300mL。
蕃红染液:2.5%蕃红的乙醇溶液10mL,蒸馏水100mL混合过滤。
脱色液:95%乙醇。
四、实验步骤
(一)、显微镜的使用
1、标本放置
下降镜台或升高镜筒,把标本片置镜台上,用载玻片夹夹牢。
2、调焦
转动粗调节螺旋,升高镜台或下降镜筒,使低倍物镜的前端接近载玻片,在物镜上观察,可看到物像,然后转动细调节螺旋,使物像清晰。
3、使用油镜
用低倍镜看到物像后,选择合适的视野,并把要观察的部位置于视野的中央;把孔径光阑开到最大,使与油镜的数值口径相匹配,选择合适的照明;转动粗调节螺旋,使镜台下降或镜筒上升,在染色标本处滴加1~2滴镜油,转动物镜转换器,把油镜置镜筒下方;转动粗调节螺旋,使镜台上升或镜筒下降,让镜头的前端浸入镜油中。
操作时要从侧面仔细观察,只能让镜头浸入镜油中紧贴着标本而避免让镜头撞击载玻片,导致玻片和镜头损坏;然后在目镜下进行观察,并缓慢地转动粗调节螺旋,使镜台下降或镜筒上升即可看到物像,再转动细调节螺旋使物像清晰。
转动粗调节螺旋,使镜台下降或镜筒上升时,若油镜已离开油滴,必须重新进行上述操作;不得边在目镜上观察,边转动粗调节螺旋,使镜台上升或镜筒下降使镜头前端浸入油滴中,否则易使镜头撞击载玻片,损坏标本和镜头。
4、显微镜使用后的处置
观察结束后,转动粗调节螺旋使镜台下降或镜筒上升,取出染色标本片,然后先用擦镜纸擦去油镜上的镜油,再用擦镜纸沾少许二甲苯擦去粘在油镜上的镜油,最后用擦镜纸擦净二甲苯;把镜头转成“八”字形,套入镜罩后放入显微镜柜中。
(二)革兰氏染色
1、涂片
取洁净的载玻片一张,将其在火焰上微微加热,除去上面的油脂,冷却,在中央部位滴加一小滴无菌水,用接种环在火焰旁从培养24小时的斜面上挑取少量菌体与水混合;烧去环上多余的菌体后,再用接种环将菌体涂成直径约1cm的均匀薄层。
制片是染色的关键,载玻片要洁净,不得沾污油脂,菌体才能涂布均匀。
注意初次涂片,取菌量不应过大,以免造成菌体重叠。
2、干燥
涂布后,待其自然干燥。
3、固定
将已干燥的涂片标本面向上,在微火上通过3~4次进行固定。
固定作用为杀死细菌,使蛋白质凝固,菌体牢固粘附于载玻片上,染色时不被染液或水冲掉,增加菌体对染料的结合力,使涂片易着色。
4、染色
在涂片处滴加草酸铵结晶紫染液1~2滴,使其布满涂菌部分,染色1分钟。
斜置载玻片,倾去染液后用水轻轻冲去染液至流水变清。
注意水流不得直接冲在涂菌处,以免将菌体冲掉。
5、媒染
滴加革氏碘液冲去残水,并用碘液覆盖1分钟,用水冲去碘液。
6、乙醇脱色
斜置载玻片于一烧杯上,滴加95%乙醇,轻轻摇动载玻片,至乙醇液不呈现紫色时停止(约0.5分钟);立即用水冲净乙醇并用滤纸轻轻吸干。
脱色是革兰氏染色的关键,必须严格掌握乙醇的脱色程度。
若脱色过度则阳性菌被误染为阴性菌;而脱色不够时阴性菌被误染为阳性菌。
7、复染
蕃红染液复染1分钟后水洗。
8、吸干并镜检
用滤纸轻轻吸干载玻片上的水分,干燥后镜检。
在研究工作中要确证未知菌的革兰氏反应时,则需要同时用已知菌进行染色作为对照。
五、实验结果
1、描述所观察微生物的特征;
2、绘出所观察微生物的形态图;
3、记录革兰氏染色结果,分辨出革兰氏阳性菌或阴性菌;如果染色结果不理想,分析原因。
六、讨论
1、为什么必须用培养24小时以内的菌体进行革兰氏染色?
2、要得到正取的革兰氏染色结果,必须注意那些操作?哪一步是关键步骤?为什么?
3、当你对未知菌进行革兰氏染色时,怎样保证操作正确,结果可靠?。