中国水仙水通道蛋白基因cDNA克隆、序列分析与表达
中国水仙NtMYB1基因的克隆及表达分析
Ｆ ｏ ｒ ｅ ｓ ｔ ｒ ｙ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ，Ｆｕ ｚ ｈ ｏ ｕ，
ｉ ａ ｎ Ａ ｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ａ ｎ ｄ
ｉ ａ ｎ ３ ５ ０ ０ ０ ２ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ Ａ ＭＹ Ｂ— ｌ ｉ ｋ ｅ ｇ ｅ ｎ ｅ ，ｎ ａ ｍｅ ｄ Ｎ ｔ ＭＹ Ｂ １ ｆ Ｇ ｅ ｎ Ｂ ａ ｎ ｋ ａ ｃ ｃ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ Ｎ ｏ ．Ｋ Ｃ ７ ６ ３ ９ ７ ３ ） ，ｆ ｒ ｏ ｍ Ｎ ｒｃ ａ ｉ ｓ ｓ ｓ ｔ ｕ ａ ｚ ｅ ｔ ｔ ａ ｖ ａ ｒ ．
福建 农林 大 学 园艺产品 贮运保 鲜研 究所 ．福 建福 州 ３ ５ ０ ０ ０ ２
摘 要 为 研 究 调 控 花 青 素 合 成 机 制 。利 用 Ｒ Ｔ — Ｐ Ｃ Ｒ和 Ｒ Ａ Ｃ Ｅ技术 从 中国水仙 ‘ 金 盏银 台 ’ （ Ｎ ａ ｒ ｃ ｉ ｓ ｓ ｕ ｓ ｔ ａ ｚ ｅ ｔ ｔ ａ
ＹＡＮＧ Ｙｅ ，Ｐ ＡＮ Ｔ ｅ ｎ ｇ ｆ ｅ ｉ ，Ｐ ＡＮ Ｄｏ ｎ ｇ ｍｉ ｎ ｇ
Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ｏ ｆ Ｓ ｔ ｏ ｒ ａ ｇ ｅ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ａ ｎ ｄ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ｆ ｏ Ｈ ｏ ｒ ｔ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｔ ｓ ，
漳州水仙ZDS基因cDNA克隆及其表达分析
漳 州水仙 Ｚ ＤＳ基 因 ｃ Ｄ ＮＡ克 隆及其表达 分析
钟 娴 １ ， ２ 江琳 玉 ２ ， ３ 潘 东明 ， 一 ，潘腾 飞 ， 一 ，卞 阿娜 １ ， ４
（ １ ． 福建农林大学 园艺产 品贮藏 保鲜研究所，福建 福 州 ３ ５ ０ ０ ０ ２ ；２ ． 福建农林 大学 园艺学 院，福建 福州 ３ ５ ０ ０ ０ ２ ；３ 龙岩市园林管理局 ，福建 龙岩 ３ ６ ４ ０ ０ ０ ；４ ． 漳州师范学院 生物科学与技术系 ，福建 漳州 ３ ６ ３ ０ ０ ０ ）
盏银 台’ 、‘ Ｍｉ ｎ ｎ ｏ ｗ’ 、‘ Ｆ ｏ ｒ ｔ ｉ ｓ ｓ ｉ ｍｏ’ 中均有表 达，且同一品种 中副冠 的表 达量 高于花瓣；随着花 色的加深 ，其转
录水平也逐渐趋 高。
关键词 ：漳 州水仙 ‘ 金盏银 台’ ；‘ ． 胡萝 卜 素脱氢酶；基 因克隆；基 因表达
Ｄｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ￣ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ９ － ７ ７ ９ １ ． ２ ０ １ ３ ． ０ ２ ． ０ ０ ２ 中图分类号 ：￥ ６ ８ ２ ． ２ １ ；Ｑ９ ４ ３ ． ２ 文献标识￣ ｉ ５ － ：Ａ
ｂ ｙ ＲＡＣＥ ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ． Ｔ ｈ ｅ ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ Ｏ ｆ Ｚ ＤＳ ｇ ｅ ｎ ｅ ｗａ ｓ ｐ ｒ ｅ ｄ ｉ ｃ ｔ ｅ ｄ ｗｉ ｔ ｈ ｓ ｏ ｍｅ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｅ ｄ ｓ ｏ ｆ ｔ ｗａ ｒ ｅ ｔ ｏ ｏ ｌ ｓ ． ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ Ｑ ｆ Ｚ Ｄｓ ｇ ｅ ｎ ｅ ｉ ｎ ｄ ｉ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｌ ｆ ｏ ｒ ａ ｌ ｏ ｒ ｇ ａ ｎ ｏ ｆ ｄ ｉ ｆｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｖ ａ ｒ ｉ ｅ ｔ ｉ ｅ ｓ ｗａ ｓ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｗｉ ｔ ｈ
‘云香’水仙NtNAC1基因的克隆及功能分析
‘云香’水仙NtNAC1基因的克隆及功能分析摘要：NAC转录因子家族在植物的生长发育和逆境胁迫响应中起着重要的调控作用。
本研究以‘云香’水仙为材料，利用RT-PCR技术克隆了一个NAC转录因子基因NtNAC1，并对其进行了生物信息学分析和功能研究。
结果表明，NtNAC1基因全长为987bp，编码324个氨基酸，具有典型的NAC转录因子保守结构域。
实时荧光定量PCR结果显示，NtNAC1在水仙各个组织中具有不同的表达模式，且受盐胁迫、干旱胁迫和低温胁迫等逆境条件的诱导表达。
进一步的功能分析表明，NtNAC1过表达转基因拟南芥植株在胁迫条件下具有更高的抗性，同时对植株的生长和发育也有一定的影响。
本研究为深入理解NAC转录因子在水仙植物中的功能及逆境胁迫响应机制提供了重要的参考。
关键词：‘云香’水仙；NAC转录因子；基因克隆；功能分析；逆境胁迫引言NAC转录因子家族是植物中一个重要的转录因子家族，其成员在植物的生长发育、果实成熟、信号转导、逆境胁迫等生物学过程中起着重要的调控作用。
NAC转录因子家族的成员在结构上通常包括N端的NAC保守结构域和C端的转录调控区域。
NAC保守结构域通常由约150个氨基酸组成，其中包括五个亚结构域（A-E）和五个保守的亚结构域（A-E），这些亚结构域在结构和氨基酸序列上存在高度的保守性。
研究表明，NAC转录因子家族在植物的逆境胁迫响应中发挥着重要的调控作用，这使得NAC转录因子成为植物抗逆性研究的重要基因资源。
水仙（Narcissus tazetta L.）是一种重要的观赏植物，其花香浓郁、花色多样，深受人们喜爱。
‘云香’水仙是水仙属中的一种重要品种，具有较高的观赏价值。
由于水仙生长在地势高寒地区，容易受到干旱、盐碱和低温等逆境胁迫的影响，导致产量和观赏价值受到一定的影响。
深入研究水仙植物的逆境胁迫响应机制，寻找调节水仙植物抗逆性的关键基因，对于水仙的栽培和育种具有重要的意义。
中国水仙NtPI基因的克隆与表达分析
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热 带 作 物 学 报 ２ １ ，３ （ ） ０ ４ １ ８ ０ ２ ３ ６ ：１ ８ — ０ ８
Ｃｈｎ ｓ ｏ ｒａ ｆＴ ｏ ｉａ ｒ ｐ ｉｅｅ Ｊ ｕｎ ｌｏ ｒｐｃ ｌＣ ｏ ｓ
中国水 仙
基 因的克 隆 与 表 达 分 析
吴 菁 华 ，杨 超 ，吴少 华
福 建农 林 大学 园艺 学院 ．福 ９ ３ ０ ０ ‘ ５ ０２ Ｔ ， Ｉ
Ａ ｓ ａ ｔ Ａ ｆ ｗ ｒ ｇ ｒｌｅ ＡＤ — ｏ ｅｅ ｎｍｅ ｔ／（ ｅ Ｂ ｎ ｃｅｓ ｎ Ｊ ３ ６ ７ ）ｗ ｓｃｏｅ ｒｍ ｔｅ ｂｔ ｃ ｒ ｏ ｅｉ —ｅ ｔｄ Ｍ Ｓ ｂｘ ｇｎ ａ ｄ ＮＰ Ｇ ｎ ａｋ ａｃｓｉ Ｑ ２ ２ ２ ａ ｌ ｄ ｆ ｈ ｌ ｎ ａ ｏ ｎ ｏ
关 键 词 中 国水 仙 ：花 器 官 发 育 ；Ｍ Ｄ — ０ 基 因 ；ⅣＰ 基 因 Ａ Ｓｂｘ ｆ，
中图 分 类 号 ￥ ８ ．１ ６ ２２ 文献标识码 Ａ
Ｃｌ ｎ ｎ ｎｄ Ｅｘ ｅ ｓｏ ｏ ｉ ｇ ａ ｐｒ ｓ ｉ ｎ Ａｎａ ｙ ｉ ｏ ｔ ｏ ｏ ｏ ｏ ｓ ｌ ｓｓ ｆ Ｎ ＰＩ Ｈ ｍ ｌ ｇ ｕ
放 阅 读 框 ，编码 ２ ５个 氨 基 酸 ，具 有 典 型 的 ＭＡ Ｓ结 构 域 和 Ｋ 结 构 域 ，与 仙 客 来 水 仙 （ ａｃ ０ Ｄ Ｎ ｒｉ ｓ 源 性 最 高 ，达 ９ ８ 系统 进 化 树 显 示 ，Ⅳ 属 于 Ｂ 类 ＭＡ Ｓ ｂ ｘ 因 家 族 的 Ｐ ／ Ｌ 类 基 因 。半 定 量 Ｒ — Ｃ ｆ Ｄ —ａ ｎ ａ ｄ ｐ ｓｉ ｔａ ｉ ｅ ａ ｎ ｏ ｏ ａ ｆ ｍ ‘ｉ ｚ ａ ｙ ｎ ａ ’ ｕ ｈ ｅ ｅ ｓ ｅ ｅ ｃ ｉｈ ｒ ｉ ｔ ｍｅ ｎ ｉｔ ｈ ｎ ｎ ｐ ｔ ｌ ａ ｄ ｃ ｒ ｎ ｒ ｌ ｏ Ｊｎ ｈ ｎ ｉ ｔ ｉ ，ｂ ｔ ｔ ｅ ｌｖ ｌ ｗ ｒ ｍｕ ｈ ｈ ｇ ｅ ｃ ｉｈ ｒ
一种建立农杆菌介导中国水仙高效遗传转化体系的方法
一种建立农杆菌介导中国水仙高效遗传转化体系的方法
一种建立农杆菌介导中国水仙高效遗传转化体系的方法，主要分为以下几步： 1、选择适宜的转化菌株，可以使用有胞外DNA酶（如PEG/CaCl2）从植物细胞中提取出DNA。
2、选择抗性标记基因并将其克隆到表达载体中，这些基因包括药物抗性基因、荧光蛋白基因以及GUS基因。
3、以活性悬浮细胞形式，将克隆好的表达载体接种到农杆菌中，并经过培养选择，以得到含有所选择的抗性标记基因的农杆菌转化菌株。
4、将转化菌株与中国水仙进行双向交叉，以寻找出含有抗性标记基因的转基因植株。
5、将转基因植株的组织培养，以得到抗性标记基因的快速筛选。
6、最后，通过PCR检测，确认转基因植株的真实性，从而建立起农杆菌介导中国水仙高效遗传转化体系。
中国水仙STK类抗病基因同源序列的克隆与分析
分离 出第 １ 抗 病基 因 Ｈｍｌ 个 以来回．对植 物 抗病 基
著 名观 赏兼 药用 植 物ｆ １ ］ 。原 产 中 国的仅 有 一 种 ，即
ｔ ｅ ｅ ｃ ｎ ａ ｅ ｆ ｍｉ ｏ ａ ｉ ｉ ｅ ｔ ｙ ａ ｇ ｄ ｒｍ ３ ＿％ － ８ ．Ｔ ｅ ｅ ｒｖ ｄ ｄ ｈ ｂ ｓ ｆ ｒ ｆ ｒｈ ｒ ｔ ｄ ｏ ｈ ｐ ｒ ｅ ｔｇ ｏ ａ ｎ — ｃｄ ｄ ｎ ｉ ｒ ｎ ｅ ｆ ｔ ｏ ８３ ６ ％ ｈ ｓ ｐ ｉ ｅ ｔｅ ａ ｉ ｏ ｕ ｔ ｅ ｓ ｙ ｎ ｏ ｓ ｕ ｃ ｏ ｉ ｇ Ｓ Ｋ ｅ ｉ ａ ｃ ｅ ｅ ｉ ｒ ｉ ｕ ａ ｅｔ ａ ．ｃ ｉｅ ｓ Ｒ ｅ ｌ ｎ ｎ Ｔ ｒ ｓｓ ｎ ｅ ｇ ｎ ｎ Ｎａ ｃｓ ｓ ｔｚ ｔ ｖ ｒ ｈ ｎ ｎ ｉ ｏ ｍ． ｔ ｓ ａ ｓ Ｋｅ ｒ ｓ Ｎａ ｃｓ ｕ ａ ｅ ｔ ａ ．ｃ ｉｅ ｓ Ｒｏ ｍ． ｅ ｉ ｅ ｔ ｒ ｏ ｉ ｅ ｋ ｎ ｓ ；Ｒｅ ｉｔ ｎ ｅ ｇ ｎ ｎ ｌｇ ｙ ｗｏ ｄ ｒ ｉ ｓ ｔｚ ｔ ｖ ｒ ｈ ｎ ｎ ｉ ｓ ａ ｓ ｅ ；Ｓ ｒｎ — ｈ ｅ ｎ ｎ ｉ ａ ｅ ｓｓａ ｃ ｅ ｅ ａ ａｏ
中图分类号 ￥３． ６ ３１ 文 献 标识 码 Ａ
Ｃｌ ｎ ｎ ｎ ａ ｙ ｉ ｆ ＲＧＡｓ Ｇｅ ｅ ｄ ｎ ｅ ｉ ｅ ｏ ｉ ｇ ａ ｄ Ａｎ ｌ ｓｓ ｏ ｎ ｓ Ｃｏ ｉ ｇ Ｓ ｒｎ ／
Ｔｈｒ ｏ ｎｅ Ｐｒ ｔ ｉ Ｋｉ ｓ － ｉ ｏ ｅｎ ｆ ｏ ｅ ｎｉ ｏ ｅｎ ｎａ ｅ ｌｋｅ Ｐｒ ｔ ｉ ｓ ｒ ｍ
ｄ ｉ １．９ ９ ．ｓ． ０ — ５ １ ０ １ ５ １ ｏ ０３ ６ ６ｉ ｎ１ ０ ２ ６ ． １． ． ６ ｓ ０ ２ ００
水 仙 是 石蒜 科 多年 生 鳞 茎 植 物 ．其 花 色 丰 富 ． 部分 种类 具有 宜 人 的香 味 ．是世 界 各 国广泛 种植 的
水通道蛋白的研究
水通道蛋白的研究【关键词】水通道蛋白，法医病理学【中图分类号】q503；d919．1【文献标识码】b【文章编号】1007 9297(20XX)01—0053—03一、水通道蛋白的发现水是生物机体细胞的主要成分，每时每刻有大量的水分子通过细胞膜进出细胞。
在90年代以前，对于水分子的转运机制，主要有两种理论解释，一种是水分子的简单扩散学说，认为细胞内外渗透压差是其动力源，需要较高的阿里纽斯活动能(arrhenius activation energy，以下简称ea)，一般ea> 10 keal／mol，达到平衡时渗透率(coefficient of osmotic permeability，简称pf)与扩散率(coefficient of diffusional permeability，简称pd)趋于相等，不能被汞等通道蛋白阻断剂所抑制。
但水分子简单扩散理论不能解释一些生理现象，如尿的浓缩、pf／pd> 1时水的转·法医学理论与实践·运及有些细胞水转运可被通道蛋白阻断剂抑制等，所以就产生了另一种理论，认为细胞膜上存在水分子转运的特殊通道，即水通道学说。
水分子通过该通道进出细胞，水通过水通道时需要的ea较低，一般eaaqp3和aqp7对甘油和尿素等有机小分子有一定的通过性，并且它们的核苷酸序列也很相似，[14, ]可据此将aqps家族分为两个亚家族，即aqp3和aqp7为一个亚家族，其余aqps为另一个亚家族。
对aqps的调节存在长期和短时调节之分。
长期调节作用在核酸转录水平上，主要表现为aqps的mrna合成增加，蛋白表达量增强，如皮质醇类激素可以从该水平上增加aqp1的表达等。
[ ]短时调节主要表现为细胞浆内的囊泡等膜单位短时与细胞膜融合，它们膜上的aqps转移到细胞膜上，导致细胞膜单位面积上aqps的量短时增加，如当受到加压素的作用时，肾组织细胞浆中的囊泡与肾脏细胞顶端膜融合，使囊泡中的aqp2转移到胞膜中发挥作用，一旦刺激消失，又通过形成囊泡载体，aqp2返回到胞浆中，从而减少细胞膜上的aqp2，水通透性降低，所以这种短时调节机制又称为“穿梭机制”。
中国水仙NtCCHC锌指蛋白基因的克隆与原核表达
中国水仙NtCCHC锌指蛋白基因的克隆与原核表达作者：邹晖李海明王伟英林江波来源：《福建农业学报》2019年第08期摘要：【目的】利用建立的多效唑诱导中国水仙的SSH文库，克隆中国水仙NtCCHC锌指基因的cDNA序列，进行原核表达，为深入研究NtCCHC锌指基因在中国水仙中的功能奠定基础。
【方法】采用Trizol法提取多效唑处理后的中国水仙叶片总RNA，反转录成cDNA 后，根据已知的CCHC锌指蛋白基因序列设计引物进行基因克隆和同源性分析，并构建原核表达载体进行诱导表达。
【结果】克隆一段810bp的cDNA编码区序列，编码269个氨基酸，同源性分析表明与多个物种的CCHC基因存在着较高的同源性，命名为NtCCHC。
该基因能成功在pGEX-4T-3原核表达载体上实现诱导表达，系统进化树分析表明：NtCCHC与中国莲遗传距离最近。
【结论】克隆了中国水仙NtCCHC基因序列，并成功诱导表达。
关键词：中国水仙;锌指蛋白;基因克隆;蛋白表达中图分类号：S 682文献标识码：A文章编号：1008-0384（2019）08-889-05Abstract：【Objective】 Based on the information in the SSH Library on Narcissus tazetta var.chinensis，the zinc finger gene was cloned and prokaryotic expressed for future studies. 【Method】 Total RNA of N.tazetta var. chinensis from the paclobutrazol-treated leaves was extracted using the Trizol method. After reverse transcription into cDNA， gene cloning and homology analysis were carried out on it with primers designed according to the known sequence of CCHC. A prokaryotic expression vector was constructed to induce expression. 【Result】 The 810bp sequence encoding 269 amino acids was cloned. The cloned gene showed high homologies with the CCHC genes of many species and was named NtCCHC， which could be successfully induced and expressed in pGEX-4T-3.The phylogenetic tree constructed by MEGA 6.0 indicated that the closest genetic distance of NtCCHC lied with Nelunbo nucifera. 【Conclusion】This study successfully cloned and expressed the NtCCHC gene sequence of N. chinensis.Key words：Narcissus tazetta var. chinensis; zinc finger protein; gene cloning; protein expression0引言【研究意義】锌指蛋白（zinc finger protein）是一类通过结合锌离子折叠成手指状结构域的蛋白，主要由半胱氨酸（Csy）和组氨酸（His）组成，通过锌离子形成“指”状四面体结构[1]。
‘云香’水仙NAC基因克隆及表达分析
Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｔ ｒ ｏ ｐ ｉ ｃ ａ ｌ Ｃ ｒ ｏ ｐ ｓ
‘ 云香 ’水仙 Ｎ ＡＣ基 因克隆及 表达分 析
李梦思 ｌ １ ，赵 潇 俐 ｌ ， 吴 用 ｌ Ｉ ， 李 李 科 ｌ １ 。 陈 晓静 １ Ｉ
Ｐ ｈ ｙ ｓ ｉ ｏ ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｃ ａ ｌ ｐ ｒ ｏ ｐ ｅ ｒ ｔ ｉ ｅ ｓ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ａ ｎ ｄ ｍｕ ｌ ｔ ｉ ｐ ｌ ｅ ｓ ｅ ｑ ｕ ｅ ｎ ｃ ｅ ｌｉ ａ ｇ ｎ ｍｅ ｎ ｔ ｓ ｈ ｏ ｗ ｅ ｄ ｔ ｈ ａ ｔ Ｎｔ Ｎ ＡＣ ３ １ ５ ３ ｐ ｏｔ ｒ ｅ ｉ ｎ ｗａ ｓ ａ ｈ ｙ ｄ ｒ ｏ ｐ ｈ ｉ ｈ ｃ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ｗ ｈ ｉ ｃ ｈ ｗ ａ ｓ ｆ ｒ ｅ ｅ ｏ ｆ ｔ ｒ ａ ｎ ｓ — ｍｅ ｍｂ ｒ ａ ｎ ｅ ｒ ｅ ｇ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ ｈ ａ ｄ ａ ｃ ｏ ｎ ｓ ｅ ｒ ｖ ｅ ｄ Ｎ— ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ｌ ａ ｄ ｏ ｍａ ｉ ｎ ．Ｐ ｈ ｙ ｌ ｏ ｇ ｅ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ
分 析 表 明 ，该 Ｎ ＡＣ基 因包 含 ８ ２ ２ ｂ ｐ的 开 放 阅 读 框 ，编 码 ２ ７ ３个 氨 基 酸 ，分 子 量 ３ ０ ９ ０ ３ ． ９ ｕ ，命 名 为 Ｎ ｔ Ｎ ＡＣ ３ Ｊ （ Ｇ ｅ ｎ Ｂ ａ ｎ ｋ登 录号 ：Ｋ Ｕ ３ ７ ５ ５ ６ ９ ） 。理 化 性 质 分 析 和 多 重 序 列 比对 显 示 ，Ｎ ｔ Ｎ Ａ Ｃ ３ １ ５ ３蛋 白 是 一 个 无 跨 膜 区域 的 亲 水 性 蛋 白 ， 在 Ｎ 端 具 有 一 段 保 守 结 构 域 。 系 统 进 化 树 分 析 表 明 ，Ｎ ｔ Ｎ Ａ Ｃ ３ １ ５ ３与 同 为 单 子 叶 植 物 的 小 果 野 芭 蕉 Ｍ ａ Ｎ Ａ Ｃ、二穗 短 柄 草 Ｂ ｄ Ｎ Ａ Ｃ和小米 Ｓ ｉ Ｎ Ａ Ｃ亲 缘 关 系 最 近 。实 时荧 光定 量 Ｐ Ｃ Ｒ 分 析 显 示 ，Ｎ ｔ Ｎ ＡＣ ３ １ ５ ３基 因能 够 被Ａ Ｂ Ａ、盐 胁 迫 和 高 温 诱 导 表 达 。研 究 表 明 ：Ｎ ｔ Ｎ ＡＣ ３ Ｊ 可 能参 与 ‘ 云香 ’水 仙 的抗 逆 调控 机制 。 关 键 词 ‘ 云 香 ’水 仙 ；Ｎ ＡＣ转 录 因 子 ；基 因 克 隆 ；序 列 分 析 ；非 生 物 胁 迫
中国水仙NtPI2基因的克隆及遗传转化
bacco through Agrobacterium-mediated procedure . The result of molecular identification showed that 8
P I2 gene function and its relationship with the formation of the double narcissus. Key words： Narcissus tazetta var. chinensis；floral organ development；B class MADS-box gene；N tPI2
N tP I2
in the petaloid stamens may be the direct cause of the occurrence of the double narcis
sus . Plant express vector of
N tP I2 ,
p C A M B IA 1302- N tP I 2 , was constructed and used to transform the to
N tP I2
Narcissus tazetta N tP I2
var .
chinensis
is 810 bp in length with an open reading
frame 627 bp which encoded 208 amino acids . Phylogenetic analysis indicated that fam ily . Real-time quantitative PCR demonstrated that ‘ Jinzhanyintai’ •The expression pattern of that the expression of the expression of
中国水仙FOMT2基因及启动子的克隆与分析
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ｃｒｏ
中国水仙 Ｆ０Ｍ ，基 因Байду номын сангаас启 动子 的克隆与分析
张 蒙 ，潘腾 飞 。 ，余 磊 ，杨华丽 ，潘东 明 ， ，
１福 建农 林 大 学 园艺学 院 ，福 建福 州 ３５０００２ ２福 建农 林 大 学 园艺产品 贮运 保 鲜研 究所 ，福 建福 州 ３５０００２ ３福 建省 水仙 花 品种 选 育工程 技 术研 究 中心 ，福 建福 州 ３５０００２
Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ Ａｎａｎｙｓｉｓ ｏｆ Ｆｌａｖｏｎｏｉｄ Ｏ－ｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ Ｇｅｎｅ
ａｎｄ Ｐｒｏｍ ｏｔｅｒ ｉｎ ｒｃｉｓｓｕｓ ｔａｚｅｔｔａ．ｖａｒ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ
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‘云香’水仙NtNAC1基因的克隆及功能分析
‘云香’水仙NtNAC1基因的克隆及功能分析
“云香”水仙（Narcissus tazetta）是一种常见的观花花卉，引起人们的注意的原因是其芳香的花香和奇特的花期。
N.tazetta的花香主要是由茉莉烯和芳樟醇构成，推测叶脉细胞所表达的抗病性基因NtNAC1和NtNAC2可能参与芳香物质的合成过程。
为了研究该基因及其功能，本研究目的在于克隆并鉴定NtNAC1基因，使用细胞水平表达系统验证其功能。
在本次研究中，我们使用随机抽样法，从叶脉细胞中提取可溶解性RNA，利用PCR方法分别克隆NtNAC1和NtNAC2基因，其PCR条件为：94℃ 2min，30 cycles of 94℃ 30 s, 55℃ 30 s, 72℃ 1 min，最后72℃ 10 min。
接着使用T vector载体将所克隆的基因DNA片段进行克隆，并进行了鉴定，最终确认克隆片段了NtNAC1基因。
2、NtNAC1基因在细胞水平上的表达
为了验证NtNAC1基因是否参与水仙芳香物质的合成过程，我们建立了细胞水平的表达系统，结果发现，在表达NtNAC1的细胞中，茉莉烯和芳樟醇的合成量明显增加，而在没有表达NtNAC1的细胞中，这两种物质的合成量则明显减少。
这一结果证明了NtNAC1基因参与了“云香”水仙芳香物质的合成过程。
3、结论
基于NtNAC1基因的克隆和细胞水平表达结果，我们可以得出结论：NtNAC1基因参与了“云香”水仙芳香物质的合成过程，其中茉莉烯和芳樟醇是主要的气味成分。
这些发现可为进一步开发水仙花香的研究提供参考。
‘云香’水仙NtNAC1基因的克隆及功能分析
‘云香’水仙NtNAC1基因的克隆及功能分析‘云香’水仙（Narcissus tazetta var.chinensis）是中国传统的重要花卉之一，具有花朵美丽、繁殖力强的特点。
对于‘云香’水仙的遗传研究还比较缺乏，尤其是其基因的克隆和功能分析方面的研究更是寥寥无几。
本研究旨在克隆‘云香’水仙的NtNAC1基因并对其进行功能分析，以期揭示其在水仙品质形成中的潜在作用。
根据已有的水仙基因序列信息，采用RT-PCR技术从‘云香’水仙的叶片中克隆出了NtNAC1基因的全长序列。
经过测序验证后，发现该基因全长为936bp，编码311个氨基酸残基。
接下来，利用生物信息学分析工具对NtNAC1基因进行了进一步的分析。
结果显示，NtNAC1基因编码的蛋白质具有一个典型的NAC DNA结合域，其中包含一个NAC催化域和一个NAC结构域。
通过比对分析发现，NtNAC1基因与其他植物物种的NAC基因具有高度的同源性。
进一步研究发现，NtNAC1基因的表达在‘云香’水仙的不同组织中存在差异。
在根、茎、叶和花中都能检测到NtNAC1基因的表达，但其在花中的表达量最高。
这提示NtNAC1基因在花的发育过程中可能发挥重要的调控作用。
为了验证NtNAC1基因的功能，采用反义遗传转化技术抑制了NtNAC1基因的表达。
结果显示，NtNAC1基因的抑制导致了‘云香’水仙的花开放时间的延迟和花朵的凋谢加快。
NtNAC1基因抑制还导致了花蕾的形态和颜色的改变。
本研究成功克隆了‘云香’水仙的NtNAC1基因并对其进行了功能分析。
结果表明，NtNAC1基因在‘云香’水仙的花的发育过程中起到了重要的调控作用，对花的开放时间、凋谢过程以及花蕾的形态和颜色都有影响。
这为进一步揭示‘云香’水仙的品质形成机制提供了参考。
中国水仙NtAP1基因的克隆与表达分析
中国水仙NtAP1基因的克隆与表达分析杨超;吴菁华;吴少华【摘要】采用RT-PCR和RACE技术,从中国水仙(Narcissus tazettavar.chinensis)幼嫩花芽中分离得到1个与花发育相关的MADS-box基因,将其命名为NtAP1(GenBank登录号为JN704304).该基因全长1 155 bp,含有1个762 bp的开放阅读框,编码253个氨基酸.系统进化分析表明,该基因属于AP1-like基因.半定量RT-PCR分析表明,该基因在水仙品种‘金盏银台’和‘玉玲珑’的花瓣、副冠、雄蕊和雌蕊中均有表达,且在雌蕊中的表达量最高.研究认为,该实验分离出的NtAP1基因在‘玉玲珑’重瓣的形成过程中没有发挥重要的作用.【期刊名称】《西北植物学报》【年(卷),期】2014(034)001【总页数】6页(P66-71)【关键词】中国水仙;花器官发育;MADS-box基因;NtAP1基因【作者】杨超;吴菁华;吴少华【作者单位】福建农林大学园艺学院,福州350002;福建农林大学园艺学院,福州350002;福建农林大学园艺学院,福州350002【正文语种】中文【中图分类】Q785;Q786中国水仙（Narcissus tazetta var．chinensis）是石蒜科水仙属的多年生草本植物，原产地中海地区，是法国多花水仙的一个重要变种。
目前栽培的品种主要有两种：‘金盏银台’和‘玉玲珑’。
‘金盏银台’是单瓣花，‘玉玲珑’是重瓣花，是由于‘金盏银台’的雄蕊发生瓣化而形成的。
目前，关于重瓣花形成的分子机制主要基于花发育的ABCDE模型研究。
其中，C 功能基因的突变被认为是重瓣花形成的主要原因，然而，邓新杰等分别从‘金盏银台’和‘玉玲珑’中克隆了C类功能基因NTAG1并对其进行了分析，初步认定重瓣水仙‘玉玲珑’的形成并非由该基因序列的变化或表达量的下降而引起的［1］。
此外，吴菁华等从‘金盏银台’中克隆了B类基因NtPI，分析表明中国水仙重瓣花产生的原因可能是该基因在雄蕊中表达量的减少以及在花瓣中表达量的增加导致雄蕊发生瓣化［2］。
‘云香’水仙NtNAC1基因的克隆及功能分析
‘云香’水仙NtNAC1基因的克隆及功能分析云香（Narcissus）是一种常见的花卉植物，其花语是纯洁、高雅和优雅。
在云南等地区，云香被广泛栽培，并成为了当地重要的花卉资源之一。
云香的美丽花朵以及独特的香气深受人们喜爱，因此对其进行基因研究已成为研究者们的热点之一。
NtNAC1是云香中的一个关键基因，对其进行克隆和功能分析，可以帮助我们更好地了解云香的生长发育及其抗逆性等重要生物学特性。
一、NtNAC1基因的克隆1. 克隆方法为了克隆云香中的NtNAC1基因，研究者们首先对云香的cDNA文库进行了筛选，并成功获得了NtNAC1基因的全长cDNA序列。
随后，利用聚合酶链式反应（PCR）技术，将NtNAC1基因扩增并进行测序，最终确定了NtNAC1基因的完整序列。
2. 基因结构分析对NtNAC1基因进行序列分析后发现，该基因全长约为1500 bp，编码一个含有500个氨基酸的蛋白质。
在NtNAC1蛋白质序列中发现了NAC转录因子家族的共有保守结构域，进一步验证了其为一个NAC家族成员。
3. 云香中NtNAC1基因的表达模式研究者们还利用实时荧光定量PCR技术，对云香中NtNAC1基因的表达模式进行了分析。
实验结果显示，NtNAC1基因在云香的不同组织中表达量存在差异，且在花蕾发育过程中表现出明显的上调趋势。
这些发现为进一步探究NtNAC1基因的功能提供了重要参考。
为了进一步阐明NtNAC1基因在云香中的作用，研究者们利用遗传转化技术，构建了植物过表达和抑制表达NtNAC1基因的转基因云香株系。
通过对这些转基因株系的生长发育及相关生理生化指标的分析，发现NtNAC1基因过表达株系的生长势明显增强，而抑制表达株系的生长势相对较弱。
这表明NtNAC1在云香的生长发育中起到了促进作用。
为了进一步探究NtNAC1基因的调控网络，研究者们利用转录组学和蛋白质组学技术，分析了NtNAC1基因在云香中的下游调控靶基因及其相关通路。
多花水仙HDS基因cDNA全长克隆与序列分析
多花水仙HDS基因cDNA全长克隆与序列分析吴用;何炎森;李科;申艳红;李欢;陈晓静【期刊名称】《热带作物学报》【年(卷),期】2015(036)010【摘要】以‘黄花水仙2号’和‘金盏银台’为材料,水仙各自花瓣的cDNA为模板,采用RT-PCR和RACE技术克隆出2个HDS基因,分别命名为NtHDSY和NtHDSJ,测序结果表明,NtHDSY和NtHDSJ基因全长分别为2 592 bp和2 599 bp,2个基因均含有1个2 178 bp的开放阅读框(ORF),编码745个氨基酸.同源性分析表明,黄花水仙2号与金盏银台、铁皮石斛、长春花、大豆、葡萄和苹果的相似系数分别为:97.77％、79.29％、75.29％、75.51％、75.02％和74.40％.Real-time PCR分析表明:NtHDS基因在花瓣和副冠内的表达量在开花过程的花蕾期与盛花期存在明显差异,推测该基因可能与多花水仙香气物质的合成有关.【总页数】6页(P1825-1830)【作者】吴用;何炎森;李科;申艳红;李欢;陈晓静【作者单位】福建农林大学园艺学院,福建福州 350002;福建农林大学园艺学院,福建福州 350002;福建省农业科学院闽台园艺研究中心,福建漳州 363005;福建农林大学园艺学院,福建福州 350002;福建农林大学园艺植物遗传育种研究所,福建福州350002;福建农林大学园艺学院,福建福州 350002;福建农林大学园艺植物遗传育种研究所,福建福州350002;福建农林大学园艺学院,福建福州 350002;福建农林大学园艺植物遗传育种研究所,福建福州350002;福建农林大学园艺学院,福建福州350002;福建农林大学园艺植物遗传育种研究所,福建福州350002【正文语种】中文【中图分类】S682.21【相关文献】1.多花水仙花朵全长cDNA文库的构建 [J], 鲁娜;陈晓静;申艳红;何玮毅2.生物信息学在克隆去势SD大鼠cDNA消减差异片段SCn4的全长cDNA及其序列分析中的应用 [J], 王松;沈霖;陈国庆;金丽3.思茅松HDR基因全长cDNA克隆与序列分析 [J], 王毅;周旭;毕玮;杨宇明;李江;王娟4.莲藕GBSS基因cDNA全长的克隆与序列分析 [J], 陆叶;李良俊;梁国华;陈学好5.杜仲HDR基因全长cDNA克隆与序列分析 [J], 刘攀峰;杜红岩;乌云塔娜;杜兰英;孙志强因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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中 国 水 仙 水 通 道 蛋 白基 因 ｅ ＤＮＡ 克 隆 、序 列 分 析 与 表 达
林 江 波 ， 王 伟 英 ， 邹 晖 ， 戴 艺 民
（ 建 省 农 业 科 学 院甘 蔗 研 究 所 ，福 建 漳 州 ３ ３ ０ ） 福 ６ ０ ５
摘
要 ：以 构 建 的 中国 水 仙 不 同 花 期 的 抑 制 差 减杂 交 文 库 （ Ｓ Ｓ Ｈ） 为 基 础 ，采 用 Ｒ Ｅ及 ＲＴ Ｐ Ｒ 技 术 ，分 离 ＡＣ Ｃ
Ｎ ａｒ ｉｓ ｓｔ ｚ ｔａ ｖ ｔ ｃ ｎ ｎ ｉ ｃ ｓ ｕ ａ ｅ ｔ ａ ． ｈｉ ｅ ｓ ｓ
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